báo cáo thí nghiệm vi sinh thực phẩm

ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ủa tế bào vi sinh vật sống ật sống ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc vi khu n quá bé và h u nh trong su t nên đ thu đ

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP HCM

KHOA CÔNG NGHỆ HÓA HỌC VÀ THỰC PHẨM



BÁO CÁO THỰC HÀNH THÍ NGHIỆM VI SINH THỰC PHẨM

NHÓM 1 SVTH: MSSV

Trần Thị Như Hảo 16116126

Hà Thị Trinh 16116187

Trương Thị Thu 16116176

Trần Thị Sao Mai 16116148

Nguyễn Thị Yến 16116200

Hoàng Ngọc Thương 16116179 Lớp thứ 3,5,7 – tiết 15

Tp Hồ Chí Minh, tháng 7 năm 2018

M C L C ỤC LỤC ỤC LỤC

Bài 1: TIÊU BẢN GIỌT TREO VÀ TIÊU BẢN GIỌT ÉP 3

Bài 2: TẠO VẾT BÔI VÀ NHUỘM ĐƠN 6

BÀI 3: NHUỘM GRAM 8

Bài 4: NHUỘM BÀO TỬ 13

Bài 5: KĨ THUẬT PHÒNG ẨM (QUAN SÁT NẤM SỢI) 16

Bài 6: KỸ THUẬT CẤY RIA 19

Bài 7: ĐỊNH LƯỢNG COLIFORMS BẰNG PHƯƠNG PHÁP MPN 23

Bài 8: ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ NẤM MEN, NẤM MỐC BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐẾM KHUẨN LẠC 27

Bài 9: ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ VI KHUẨN HIẾU KHI BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐẾM KHUẨN LẠC 31

DANH MỤC HÌNH

Hình 1 1: Tiêu b n gi t ép c a n ản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ủa nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 c d a c i chua đ phóng đ i ×1000 ư ản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ở độ phóng đại ×1000 ộ phóng đại ×1000 ại ×1000 3

Hình 1 2: Vi khu n hình que trong n ước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 c d a c i mu i chua nhu m b ng crystal violet ư ản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ối chua nhuộm bằng crystal violet ộ phóng đại ×1000 ằng crystal violet đ ược quan sát ở độ phóng đại ×1000 c quan sát đ phóng đ i ×1000 ở độ phóng đại ×1000 ộ phóng đại ×1000 ại ×1000 6

Hình 1 3: C u trúc thành t bào c a vi khu n Gram d ế bào của vi khuẩn Gram dương (trái) và Gram âm (phải) ủa nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ương (trái) và Gram âm (phải) ng (trái) và Gram âm (ph i) ản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 10

Hình 1 4: K t qu nhu m bào t ế bào của vi khuẩn Gram dương (trái) và Gram âm (phải) ản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ộ phóng đại ×1000 ử 13

Hình 1 5: N m s i ợc quan sát ở độ phóng đại ×1000 16

Hình 1 6: H s i c a n m ệ sợi của nấm ợc quan sát ở độ phóng đại ×1000 ủa nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 17

Hình 1 7: K t qu sau khi c y men bánh mỳ ( bên trái), Yakult (bên ph i) lên môi tr ế bào của vi khuẩn Gram dương (trái) và Gram âm (phải) ản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ường ng. 19

Hình 1 8: Th ch đ ng sau khi nuôi c y b ng m u Yakult ại ×1000 ứng sau khi nuôi cấy bằng mẫu Yakult ằng crystal violet ẫu Yakult. 19

Hình 1 9 a-b: Th ch đ ng ại ×1000 ứng sau khi nuôi cấy bằng mẫu Yakult sau khi nuôi c y b ng n m men ằng crystal violet 20

Hình 1 10: Th ch nghiêng sau khi nuôi c y b ng n m men ại ×1000 ằng crystal violet 21

Hình 1 11: ng nghi m d Ống nghiệm dương tính ệ sợi của nấm ương (trái) và Gram âm (phải) ng tính 23

Hình 1 12: So sánh ng nghi m d ối chua nhuộm bằng crystal violet ệ sợi của nấm ương (trái) và Gram âm (phải) ng tính và ng nghi m không d ối chua nhuộm bằng crystal violet ệ sợi của nấm ương (trái) và Gram âm (phải) ng tính. 24

Hình 1 13: ng nghi m d Ống nghiệm dương tính ệ sợi của nấm ương (trái) và Gram âm (phải) ng tính. 25

Hình 1 14: Khu n l c m c trên đĩa th ch v i đ pha loãng m u ại ×1000 ọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ại ×1000 ớc dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ộ phóng đại ×1000 ẫu Yakult 10−2 27 Hình 1 15: Khu n l c m c trên đĩa th ch có đ pha loãng m u l n l ại ×1000 ọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ại ×1000 ộ phóng đại ×1000 ẫu Yakult ần lượt là ược quan sát ở độ phóng đại ×1000 t là 10−3,10−4 28

DANH M C B NG BI U ỤC LỤC ẢNG BIỂU ỂU

Bảng 1 1: K t qu so sánh vi khu n lactic nhu m Gram và nhu m đ n b ng crystal violet ế bào của vi khuẩn Gram dương (trái) và Gram âm (phải) ản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ộ phóng đại ×1000 ộ phóng đại ×1000 ơng (trái) và Gram âm (phải) ằng crystal violet

và safranin O 9

Bảng 1 2: T l các thành ph n có trong c u trúc c a thành t bào vi khu n Gram d ệ sợi của nấm ần lượt là ủa nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ế bào của vi khuẩn Gram dương (trái) và Gram âm (phải) ương (trái) và Gram âm (phải) ng và Gram âm (Nguy n Lân Dũng và c ng s , 2003) ễn Lân Dũng và cộng sự, 2003) ộ phóng đại ×1000 ự, 2003) 11

Bảng 1 3:S ng d ối chua nhuộm bằng crystal violet ối chua nhuộm bằng crystal violet ương (trái) và Gram âm (phải) ng tính 24

Bảng 1 4: Số ống dương tính ở các nồng độ 25

Bảng 1 5: Số ống dương tính ở các nồng độ 25

Bảng 1 6: S khu n l c đ m đ ối chua nhuộm bằng crystal violet ại ×1000 ế bào của vi khuẩn Gram dương (trái) và Gram âm (phải) ược quan sát ở độ phóng đại ×1000 ở độ phóng đại ×1000 c các đ pha loãng ộ phóng đại ×1000 29

Bảng 1 7: Bảng kết quả 32

Bài 1: TIÊU B N GI T TREO VÀ TIÊU B N GI T ÉP ẢNG BIỂU ỌT TREO VÀ TIÊU BẢN GIỌT ÉP ẢNG BIỂU ỌT TREO VÀ TIÊU BẢN GIỌT ÉP

1 M c đích ục đích

Quan sát đư c hình d ng, kích thạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc và cách s p x p c a t bào vi sinh v t s ngắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống ủa tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống ật sống ốngtrong môi trường lỏng.ng l ng.ỏng

Quan sát kh năng di đ ng c a vi sinh v t trong môi trộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ủa tế bào vi sinh vật sống ật sống ường lỏng.ng l ng, t đó phânỏng ừ đó phân

bi t đệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ư c chuy n đ ng t thân và chuy n đ ng Brown.ển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ự thân và chuyển động Brown ển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân

2 K t qu thí nghi m ết quả thí nghiệm ả thí nghiệm ệm

K t qu làm tiêu b n thu đếp của tế bào vi sinh vật sống ư c hình nh c a h vi sinh v t trong nủa tế bào vi sinh vật sống ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ật sống ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc d a c iư

mu i chua b ng vi c s d ng kính hi n vi quang h c n n sáng Trong đó, có nhi u nh tống ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ển động tự thân và chuyển động Brown ọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ền sáng Trong đó, có nhiều nhất ền sáng Trong đó, có nhiều nhất ất

là nh ng vi khu n hình que có đ dài ng n khác nhau, trong su t (đ tộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ương phản vớing ph n v iớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống

n n sáng th p) Các vi khu n này đ ng riêng l ho c x p thành chu i.ền sáng Trong đó, có nhiều nhất ất ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi ẻ hoặc xếp thành chuỗi ặc xếp thành chuỗi ếp của tế bào vi sinh vật sống ỗi

Các vi khu n này không di đ ng, có s d ch chuy n h n lo n so v i v trí ban đ uộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ự thân và chuyển động Brown ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ển động tự thân và chuyển động Brown ỗi ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ầu

do s chuy n đ ng c a các phân t nự thân và chuyển động Brown ển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ủa tế bào vi sinh vật sống ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc kéo theo

Hình 1 1: Tiêu b n gi t ép c a n ản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ủa nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 c d a c i chua đ phóng đ i ×1000 ư ản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ở độ phóng đại ×1000 ộ phóng đại ×1000 ại ×1000

K t qu quan sát s chuy n đ ng c a vi khu n trong m u n ết quả thí nghiệm ả thí nghiệm ự chuyển động của vi khuẩn trong mẫu nước dưa cải chua: ển động của vi khuẩn trong mẫu nước dưa cải chua: ộng của vi khuẩn trong mẫu nước dưa cải chua: ủa vi khuẩn trong mẫu nước dưa cải chua: ẩn trong mẫu nước dưa cải chua: ẫu nước dưa cải chua: ước dưa cải chua: c d a c i chua: ư ả thí nghiệm

(*) Các vi khu n lactic acid đư c x p chung vào h Lactobacteriaece Các viếp của tế bào vi sinh vật sống ọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhấtkhu n lactic không đ ng nh t v m t hình thái (vi khu n d ng que ng n, que dài l nồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn ất ền sáng Trong đó, có nhiều nhất ặc xếp thành chuỗi ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ẫncác vi khu n hình c u), Gram dầu ương phản vớing, không t o thành bào t và h u h t không di đ ng.ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ầu ếp của tế bào vi sinh vật sống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân

Vì th , hình nh thu đếp của tế bào vi sinh vật sống ư c trên tiêu b n gi t treo và tiêu b n gi t ép là c a viọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ủa tế bào vi sinh vật sốngkhu n lactic acid Các vi khu n này có chuy n đ ng Brown, h u nh không di đ ng Cácển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ầu ư ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân

vi khu n này ch d ch chuy n h n lo n g n v trí ban đ u là do s chuy n đ ng c a các$ ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ển động tự thân và chuyển động Brown ỗi ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ầu ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ầu ự thân và chuyển động Brown ển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ủa tế bào vi sinh vật sốngphân t nử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc kéo theo

Tiêu b n gi t treo và tiêu b n gi t ép cho phép quan sát vi sinh v t s ng trongọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ật sống ốngmôi trường lỏng.ng l ng nên ta có th thu đỏng ển động tự thân và chuyển động Brown ư c hình d ng và s di đ ng c a vi sinh v t m tạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ủa tế bào vi sinh vật sống ật sống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phâncách chân th c nh t.ự thân và chuyển động Brown ất

4 Bàn lu n ận xét và giải thích

Tiêu b n gi t treo và tiêu b n gi t ép cho ta th y d dàng cách di chuy n c a viọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ất ễn Lân Dũng, 2003) Sự hiện diện của axetic acid và pH thấp của ển động tự thân và chuyển động Brown ủa tế bào vi sinh vật sốngsinh v t s ng trong môi trật sống ống ường lỏng.ng ch t l ng Đây là phất ỏng ương phản vớing pháp đ n gi n và ti n l i nh tơng phản với ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ất

đ tìm hi u v hình d ng và s chuy n đ ng c a vi sinh v t Tuy nhiên, do kích thển động tự thân và chuyển động Brown ển động tự thân và chuyển động Brown ền sáng Trong đó, có nhiều nhất ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ự thân và chuyển động Brown ển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ủa tế bào vi sinh vật sống ật sống ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc

vi khu n quá bé và h u nh trong su t nên đ thu đầu ư ống ển động tự thân và chuyển động Brown ư c hình thái chính xác c a viủa tế bào vi sinh vật sốngkhu n ta c n có các phầu ương phản vớing pháp khác

Đ phân bi t chuy n đ ng Brown và chuy n đ ng t thân c a vi sinh v t trongển động tự thân và chuyển động Brown ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ự thân và chuyển động Brown ủa tế bào vi sinh vật sống ật sốngtiêu b n gi t treo và tiêu b n gi t ép, ta c n quan sát xác đ nh:ọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ầu ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu

 Quãng đường lỏng.ng vi khu n di chuy n trong m t kho ng th i gian.ển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ờng lỏng

 Hước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngng di chuy n c a vi khu n so v i hển động tự thân và chuyển động Brown ủa tế bào vi sinh vật sống ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngng d ch chuy n c a các phân t ch tịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ển động tự thân và chuyển động Brown ủa tế bào vi sinh vật sống ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ất

l ng.ỏng

Có th so sánh chuy n đ ng Brown c a vi khu n lactic trong nển động tự thân và chuyển động Brown ển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ủa tế bào vi sinh vật sống ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc d a c i mu iư ốngchua v i chuy n đ ng t thân c a vi khu n trong nớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ự thân và chuyển động Brown ủa tế bào vi sinh vật sống ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc th t th i địch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ống ư c quan sát b ngtiêu b n gi t treo đ phân bi t s khác nhau gi a hai lo i di chuy n c a vi sinh v t.ọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ển động tự thân và chuyển động Brown ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ự thân và chuyển động Brown ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ển động tự thân và chuyển động Brown ủa tế bào vi sinh vật sống ật sống

Chuy n đ ng c a vi khu n có trong n ển động của vi khuẩn trong mẫu nước dưa cải chua: ộng của vi khuẩn trong mẫu nước dưa cải chua: ủa vi khuẩn trong mẫu nước dưa cải chua: ẩn trong mẫu nước dưa cải chua: ước dưa cải chua: c th t th i: ịt thối: ối:

https://drive.google.com/open?id=1qnRsGtzmw1rrTF2Fa0mxVscsfwxysg4a

Khi vi sinh v t quan sát đật sống ư c có di chuy n t thân, c n có các phển động tự thân và chuyển động Brown ự thân và chuyển động Brown ầu ương phản vớing pháp khác đ xácển động tự thân và chuyển động Brown

đ nh c ch di chuy n c a vi khu n Nh ng vi khu n di chuy n th t s có th diịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ơng phản với ếp của tế bào vi sinh vật sống ển động tự thân và chuyển động Brown ủa tế bào vi sinh vật sống ển động tự thân và chuyển động Brown ật sống ự thân và chuyển động Brown ển động tự thân và chuyển động Brown.chuy n nh tiên mao (flagellar motion), di chuy n theo ki u xo n c (corkscrew-typeển động tự thân và chuyển động Brown ờng lỏng ển động tự thân và chuyển động Brown ển động tự thân và chuyển động Brown ắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ốngmotion) ho c u n khúc (bending-type motion) ho c trặc xếp thành chuỗi ống ặc xếp thành chuỗi ư t nh nhàng (gliding motion).ẹ nhàng (gliding motion)

Ngoài ra, trong m u tiêu b n còn có nh ng v t ch t có hình d ng và cách di chuy nẫn ật sống ất ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ển động tự thân và chuyển động Brown.khác v i vi khu n lactic Tuy nhiên nh ng v t ch t này không ph i đ i tớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ật sống ất ống ư ng quan sát

và không đ c s đ đ a ra nh ng k t lu n v chúng.ủa tế bào vi sinh vật sống ơng phản với ở để đưa ra những kết luận về chúng ển động tự thân và chuyển động Brown ư ếp của tế bào vi sinh vật sống ật sống ền sáng Trong đó, có nhiều nhất

Đ th c hi n tiêu b n g t treo ta c n l u ý m t s đi u sau:ển động tự thân và chuyển động Brown ự thân và chuyển động Brown ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ầu ư ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ống ền sáng Trong đó, có nhiều nhất

 Đ t v trí quan sát t i phía rìa gi t nặc xếp thành chuỗi ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc vì vi khu n t p trung nhi u khu v cật sống ền sáng Trong đó, có nhiều nhất ở để đưa ra những kết luận về chúng ự thân và chuyển động Brown.này

 Tiêu b n gi t treo quan sát đọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ư c s chuy n đ ng c a vi sinh v t d dàng h nự thân và chuyển động Brown ển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ủa tế bào vi sinh vật sống ật sống ễn Lân Dũng, 2003) Sự hiện diện của axetic acid và pH thấp của ơng phản với

và quan sát đư c các t bào vi khu n có kích thếp của tế bào vi sinh vật sống ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc l n

 Nh có m t l p g Vaseline gi m, tiêu b n gi t treo có th quan sát và giờng lỏng ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ờng lỏng ọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ển động tự thân và chuyển động Brown

m u vi sinh v t đẫn ật sống ư c lâu h n.ơng phản với

Trong khi đó, tiêu b n gi t ép có m t s u đi m và h n ch nh :ọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ống ư ển động tự thân và chuyển động Brown ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống ư

 D ng c d ki m, thao tác đ n gi n, chu n b m u nhanh.ụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ễn Lân Dũng, 2003) Sự hiện diện của axetic acid và pH thấp của ếp của tế bào vi sinh vật sống ơng phản với ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ẫn

 Quan sát đư c h vi sinh v t có trong m u t nhiên.ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ật sống ẫn ự thân và chuyển động Brown

 Tiêu b n d b khô do ch u nh hễn Lân Dũng, 2003) Sự hiện diện của axetic acid và pH thấp của ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ưở để đưa ra những kết luận về chúng.ng c a nhi t đ và đèn chi u sáng nênủa tế bào vi sinh vật sống ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ếp của tế bào vi sinh vật sốngkhông gi đư c lâu

Đ ng th i, khi s d ng kính hi n vi quang h c n n sáng cho tiêu b n gi t treo vàồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn ờng lỏng ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ển động tự thân và chuyển động Brown ọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ền sáng Trong đó, có nhiều nhất ọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhấttiêu b n gi t ép, c n đi u ch nh ngu n sáng cọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ầu ền sáng Trong đó, có nhiều nhất $ ồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn ở để đưa ra những kết luận về chúng ường lỏng.ng đ y u đ nh ng vi sinh v t trongộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ếp của tế bào vi sinh vật sống ển động tự thân và chuyển động Brown ật sống

su t có s tống ự thân và chuyển động Brown ương phản vớing ph n v i n n sáng đ d quan sát.ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ền sáng Trong đó, có nhiều nhất ển động tự thân và chuyển động Brown ễn Lân Dũng, 2003) Sự hiện diện của axetic acid và pH thấp của

5 Tài li u tham kh o ệm ả thí nghiệm

Lê Văn Vi t M n (2006) ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ẫn Thí nghi m Vi sinh v t Th c ph m ệ sợi của nấm ật Thực phẩm ự, 2003) , NXB ĐH Qu c gia TPống

H Chí Minh.ồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn

Nguy n Lân Dũng, Nguy n Đình Quy n, Ph m Văn Ty (2003) ễn Lân Dũng, 2003) Sự hiện diện của axetic acid và pH thấp của ễn Lân Dũng, 2003) Sự hiện diện của axetic acid và pH thấp của ếp của tế bào vi sinh vật sống ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống Vi sinh v t h c ật Thực phẩm ọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000

NXB Giáo d c.ụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất

Webleyd, D M (1953) A Simple Method for Producing Microcultures in Hanging Drops with special reference to Organisms Utilizing Oils.Macaulay Institute for Soil

Research, Craigiebuckler, Aberdeen 66-71

Anthony W Thomas (2011) Making a wet mount microscope slide Microbehunter

Microscopy Magazine, 1: 5-6

Bài 2: T O V T BÔI VÀ NHU M Đ N ẠO VẾT BÔI VÀ NHUỘM ĐƠN ẾT BÔI VÀ NHUỘM ĐƠN ỘM ĐƠN ƠN

Quá trình tạo vết bôi và nhuộm đơn được tiến hành trên nước dưa cải muối chua chứa

vi khuẩn lactic acid

Hình 1 2: Vi khuẩn hình que trong nước dưa cải muối chua nhuộm bằng crystal

violet được quan sát ở độ phóng đại ×1000

Tạo vết bôi và nhuộm đơn trên nước dưa cải muối chua cho thấy hình ảnh của các vikhuẩn hình que có độ dài ngắn khác nhau, bắt màu tím đen của thuốc nhuộm crystal violet

Các vi khuẩn đứng riêng lẻ (A) hoặc xếp thành chuỗi (B), ngoài ra còn có trong hìnhảnh trường hợp vi khuẩn xếp thành một cụm các tế bào hình que song song

3 Nhận xét và giải thích

Mẫu nước dưa cải muối chua chứa nhiều vi khuẩn lactic acid Những vi khuẩn này cóhình que, đứng riêng lẻ hoặc tạo thành chuỗi Căn cứ vào hình dạng, những vi khuẩn quan sát

được được gọi là bacillus (số nhiều là bacilli), khi chúng đứng thành một chuỗi được gọi là streptobacilli.

Trường hợp quan sát được vi khuẩn xếp thành cụm các tế bào hình que song song docác vi khuẩn bước vào quá trình nhân đôi và phân chia Khi đó, kích thước của vi khuẩn sẽnhỏ hơn vi khuẩn trong giai đoạn sinh trưởng nên hình ảnh thu được các vi khuẩn hình que cókích thước khác nhau

Trong quá trình tạo vết bôi và nhuộm đơn, vết bôi dày sẽ làm vi khuẩn xếp chồng lênnhau dẫn đến khó quan sát chính xác hình dạng, kích thước và cách sắp xếp của vi khuẩn

4 Bàn luận

Các thành phần trên tế bào vi sinh vật rất nhạy cảm với thuốc nhuộm Phẩm nhuộmđược sử dụng để nhuộm vi khuẩn có những ion tự do có khả năng kết hợp kết hợp với cácthành phần của tế bào để tạo thành muối có khả năng bắt màu và giữ màu phẩm nhuộm rấttốt

Những lỗi thường gặp trong quá trình tạo vết bôi và nhuộm đơn:

 T o v t bôi dày, lạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống ư ng m u vi sinh v t nhi u sẽ làm vi sinh v t x p ch ng lênẫn ật sống ền sáng Trong đó, có nhiều nhất ật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống ồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫnnhau

 Th i gian nhu m quá ng n ho c qúa dài đ i v i t ng lo i thu c nhu mờng lỏng ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ặc xếp thành chuỗi ống ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ừ đó phân ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân

 Lư ng thu c nhu m d không đống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ư ư c r a trôi toàn b ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân

 H quá nóng làm phá v c u trúc t bào vi khu nơng phản với ỡ cấu trúc tế bào vi khuẩn ất ếp của tế bào vi sinh vật sống

5 Tài liệu tham khảo

Lê Văn Việt Mẫn (2006) Thí nghiệm Vi sinh vật Thực phẩm, NXB ĐH Quốc gia TP

Michael J Leboffe and Burton E Pierce 2010 Microbiology Laboratory Theory & Application.Third Edition Morton Publishing Company

Churchman, J.W (1912) The selective bactericidal action of gentian violet, Journal

of Experimental Medicine, 16 (2): 221–247, plates 21–31

BÀI 3: NHU M GRAM ỘM ĐƠN

1 M c đích ục đích

Phân bi t các loài vi khu n thành hai nhóm Gram dệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ương phản vớing và Gram âm T đó phânừ đó phân

bi t s khác nhau v thành ph n hóa sinh trên thành t bào.ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ự thân và chuyển động Brown ền sáng Trong đó, có nhiều nhất ầu ếp của tế bào vi sinh vật sống

2 K t qu thí nghi m ết quả thí nghiệm ả thí nghiệm ệm

Thu c nhu m ối: ộng của vi khuẩn trong mẫu nước dưa cải chua: K t qu ết quả thí nghiệm ả thí nghiệm

Crystal violet ( nhu mộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân

đ n)ơng phản với

(thu c nhu m th nh t):ống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi ất

vi khu n có màu tím đen

Safranin O (nhu m đ n)ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ơng phản với

(thu c nhu m th hai) viống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi

khu n có màu h ngồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn

Crystal violet + safranin O

(nhu m Gram): vi khu nộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân

gi đư c màu tím đen (B)

và màu h ng (A)ồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn

Bảng 1 1 : K t qu so sánh vi khu n lactic nhu m Gram và nhu m đ n b ng crystal violet ế bào của vi khuẩn Gram dương (trái) và Gram âm (phải) ản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ộ phóng đại ×1000 ộ phóng đại ×1000 ơng (trái) và Gram âm (phải) ằng crystal violet

và safranin O

Trong quy trình nhu m Gram, crystal violet đóng vai trò là thu c nhu m thộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi

nh t, Safranin O đóng vai trò là thu c nhu m th hai.ất ống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi

M u vi sinh v t là nẫn ật sống ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc d a c i mu i chua ch a ch y u là vi khu n lactic acid K tư ống ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi ủa tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống

qu sau khi nhu m Gram cho th y vi khu n lactic có kh năng b t màu và gi màu cộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ất ắp xếp của tế bào vi sinh vật sốnghai lo i thu c nhu m trên cùng m t tiêu b n.ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân

Do c u t o c a thành t bào vi khu n Gram âm và Gram dất ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ủa tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống ương phản vớing khác nhau nên có

kh năng b t màu và gi màu ph m nhu m khác nhau Thành t bào vi khu n Gramắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ếp của tế bào vi sinh vật sống

dương phản vớing có l p Peptidoglycan dày (chi m 50% kh i lớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống ống ư ng khô) đư c g n ch t v i nhauắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ặc xếp thành chuỗi ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống

và có nhi u acid teichoic Peptidoglycan là m t lo i polyme x p, không tan, khá c ng vàền sáng Trong đó, có nhiều nhất ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ống ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi

b n v ng, bao quanh t bào nh m t m ng lền sáng Trong đó, có nhiều nhất ếp của tế bào vi sinh vật sống ư ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngi Thành ph n c a Peptidoglycan g mầu ủa tế bào vi sinh vật sống ồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫnN-acetylglucosamine (NAG), N-acetylmuramic acid (NAM) và tetrapeptide g m c lo i Dồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống

và L acid amine Tetrapeptide trên các chu i peptidoglycan sẽ liên k t v i nhau t o c uỗi ếp của tế bào vi sinh vật sống ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ấttrúc ch c ch n Trong khi đó, vi khu n Gram âm có c u trúc thành t bào khá ph c t p:ắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ất ếp của tế bào vi sinh vật sống ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngtrong cùng là m t l p peptidoglycan m ng, m t không gian chu ch t và l p màng ngoàiộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ỏng ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ất ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống

có ch a phospholipid và lipopolysaccharides d b hòa tan trong ch t t y màu ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi ễn Lân Dũng, 2003) Sự hiện diện của axetic acid và pH thấp của ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ất

Hình 1 3: C u trúc thành t bào c a vi khu n Gram d ế bào của vi khuẩn Gram dương (trái) và Gram âm (phải) ủa nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ương (trái) và Gram âm (phải) ng (trái) và Gram âm (ph i) ản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000

Bảng 1 2 : T l các thành ph n có trong c u trúc c a thành t bào vi khu n Gram d ệ sợi của nấm ần lượt là ủa nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ế bào của vi khuẩn Gram dương (trái) và Gram âm (phải) ương (trái) và Gram âm (phải) ng

và Gram âm (Nguy n Lân Dũng và c ng s , 2003) ễn Lân Dũng và cộng sự, 2003) ộ phóng đại ×1000 ự, 2003)

Thành ph nầu T l % đ i v i kh i l$ ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown. Gram dống ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngương phản vớingống ư ng khô c a thành t bào vi khu nủa tế bào vi sinh vật sống Gram âmếp của tế bào vi sinh vật sống

Protein

Không có ho c ítặc xếp thành chuỗi cao

Trong quá trình nhu m Gram, c vi khu n Gram âm và Gram dộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ương phản vớing đ u có khền sáng Trong đó, có nhiều nhấtnăng b t màu thu c nhu m th nh t crystal violet Dung d ch ch t c n màu iodine cóắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi ất ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ất

kh năng t o ph c không tan crystal violet- iodine Khi b r a b ng c n, thành t bào viạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn ếp của tế bào vi sinh vật sốngkhu n Gram dương phản vớing b hydrate hóa làm gi m kho ng cách c a các phân t trong màng.ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ủa tế bào vi sinh vật sống ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất

Đ ng th i l p peptidoglycan dày và nhi u t ng x p ch ng giúp các ph c crystal violet –ồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn ờng lỏng ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ền sáng Trong đó, có nhiều nhất ầu ếp của tế bào vi sinh vật sống ồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi.iodine không b r a trôi và gi địch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ư c màu thu c nhu m ban đ u Trong khi đó, các viống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ầukhu n Gram âm không có kh năng gi l i ph c này do l p lipid ngoài thành t bào dạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống ễn Lân Dũng, 2003) Sự hiện diện của axetic acid và pH thấp của

b hòa tan trong ch t t y, làm trôi thu c t y th nh t L p peptidoglycan m ng lúc nàyịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ất ống ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi ất ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ỏng

b l ra ngoài nh ng không có kh gi địch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ư ư c ph c crystal violetứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi – iodine Lúc này, thu cốngnhu m b sung (Safranin O) động của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ổ sung (Safranin O) được sử dụng để nhuộm màu vi khuẩn Gram âm ư c s d ng đ nhu m màu vi khu n Gram âm.ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân

Trên các t bào vi khu n Gram dếp của tế bào vi sinh vật sống ương phản vớing “già”, thành t bào vi khu n b thoái hóaếp của tế bào vi sinh vật sống ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu

và kh năng v n chuy n các ion dật sống ển động tự thân và chuyển động Brown ương phản vớing c a acid teichoic kém nên ph m nhu m thủa tế bào vi sinh vật sống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi

nh t có kh năng b r a trôi cùng v i thu c t y và b t màu ph m nhu m th hai Vìất ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ống ắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi

v y, khi quan sát m u nhu m Gram vi khu n lactic trong nật sống ẫn ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc d a c i chua, ngoàiư

nh ng vi khu n nhu m màu tím đen còn có m t s vi khu n có màu tím.ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ống

Ngoài ra, do th i gian kh màu b ng ch t t y màu quá lâu ho c trong quá trình t oờng lỏng ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ất ặc xếp thành chuỗi ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống

v t bôi làm bi n d ng thành t bào vi khu n nên vi khu n Gram dếp của tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống ương phản vớing còn có th xu tển động tự thân và chuyển động Brown ất

hi n dệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngi d ng Gram âm

4 Bàn lu n ận xét và giải thích

Trong kĩ thu t nhu m Gram, các t bào vi khu n Gram dật sống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ếp của tế bào vi sinh vật sống ương phản vớing có th xu t hi n dển động tự thân và chuyển động Brown ất ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngi

d ng Gram âm, nh ng các t bào Gram âm thì không bao gi xu t hi n dạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ư ếp của tế bào vi sinh vật sống ờng lỏng ất ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngi d ng Gram

dương phản vớing

Khi quan sát tiêu b n nhu m Gram, ngoài phân bi t thành ph n hóa sinh và c u t oộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ầu ất ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống

c a thành t bào còn có th xác đ nh đủa tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống ển động tự thân và chuyển động Brown ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ư c hình d ng, kích thạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc và s s p x p c u cácự thân và chuyển động Brown ắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống

t bào vi khu n Đây là công c h u d ng nh t và đếp của tế bào vi sinh vật sống ụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ất ư c s d ng thử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ường lỏng.ng xuyên trong thínghi m vi sinh.ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown

Thành t bào vi khu n có ch c năng ch y u:ếp của tế bào vi sinh vật sống ứng riêng lẻ hoặc xếp thành chuỗi ủa tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống

 Duy trì ngo i hình c a t bào.ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ủa tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống

 H tr s chuy n đ ng c a tiên mao.ỗi ự thân và chuyển động Brown ển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ủa tế bào vi sinh vật sống

 Giúp t bào thích nghi v i các đi u ki n môi trếp của tế bào vi sinh vật sống ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ền sáng Trong đó, có nhiều nhất ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ường lỏng.ng ( nhi t đ , áp su t th mệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ất

th u,…).ất

 C n thi t cho quá trình phân c t c a t bào, c n tr s xâm nh p c a các ch tầu ếp của tế bào vi sinh vật sống ắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ủa tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống ở để đưa ra những kết luận về chúng ự thân và chuyển động Brown ật sống ủa tế bào vi sinh vật sống ất

đ c h i vào t bào.ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống

 Liên quan đ n kh năng sinh đ c t và gây h i c a t bào vi khu n.ếp của tế bào vi sinh vật sống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ống ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ủa tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống

Vì th , vi c xác đ nh vi khu n thu c Gram dếp của tế bào vi sinh vật sống ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ương phản vớing ho c Gram âm cho th y cái nhìnặc xếp thành chuỗi ất

t ng quát v c u trúc, hình thái, m t s đ c đi m và kh năng gây b nh c a vi khu n.ổ sung (Safranin O) được sử dụng để nhuộm màu vi khuẩn Gram âm ền sáng Trong đó, có nhiều nhất ất ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ống ặc xếp thành chuỗi ển động tự thân và chuyển động Brown ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ủa tế bào vi sinh vật sốngTrong kĩ thu t nhu m Gram, c n l u ý m t s đi m sau:ật sống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ầu ư ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ống ển động tự thân và chuyển động Brown

 S d ng hai lo i thu c nhu m khác màu, thông thử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ường lỏng.ng là crystal violet và m tộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân

lo i ph m nhu m khác d phân bi t v i màu tím đen.ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ễn Lân Dũng, 2003) Sự hiện diện của axetic acid và pH thấp của ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống

 Luôn s d ng gi ng vi khu n “tr ” đử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ống ẻ hoặc xếp thành chuỗi ư c nuôi c y trong vòng 24 gi đ choất ờng lỏng ển động tự thân và chuyển động Brown

k t qu t t nh t,ếp của tế bào vi sinh vật sống ống ất

 L u ý th i gian nhu m màu và th i gian t y màu, lo i thu c t y s d ng,ư ờng lỏng ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ờng lỏng ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ống ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất

 T o v t bôi vi khu n đúng cách.ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống

5 Tài li u tham kh o ệm ả thí nghiệm

Nguy n Lân Dũng, Nguy n Đình Quy n, Ph m Văn Ty (2003) ễn Lân Dũng, 2003) Sự hiện diện của axetic acid và pH thấp của ễn Lân Dũng, 2003) Sự hiện diện của axetic acid và pH thấp của ếp của tế bào vi sinh vật sống ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống Vi sinh v t h c ật Thực phẩm ọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000

NXB Giáo d c 27-30.ụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất

TS Tr nh Khánh S n (2018) ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ơng phản với Các kĩ thu t c b n trong th c nghi m vi sinh v t ật Thực phẩm ơng (trái) và Gram âm (phải) ản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ự, 2003) ệ sợi của nấm ật Thực phẩm

h c ọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 NXB Đ i h c Qu c gia TP H Chí Minhạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ống ồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn

Lê Văn Vi t M n 2006 ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ẫn Thí nghi m vi sinh v t h c th c ph m ệ sợi của nấm ật Thực phẩm ọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ự, 2003) Nhà xu t b n ĐHất

Qu c gia TP.HCM.ống

M.R.Adams and M.O.Moss.2000 Food Microbiology Second Edition The Royal

Sociaty of Chemistry

Bào tử nằm ở tâm tế bào sinh dưỡng

1 M c đích ục đích

Nhu m bào t nh m giúp chúng ta quan sát động của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ư c hình d ng và v trí c a bào tạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ủa tế bào vi sinh vật sống ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất

trong t bào sinh dếp của tế bào vi sinh vật sống ưỡ cấu trúc tế bào vi khuẩnng

2 K t qu thí nghi m ết quả thí nghiệm ả thí nghiệm ệm

Hình 1 4: K t qu nhu m bào t ế bào của vi khuẩn Gram dương (trái) và Gram âm (phải) ản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ộ phóng đại ×1000 ử

3 Nh n xét ận xét và giải thích

Sau khi nhu m v i malachite green thì các thành ph n khác c a t bào vi khu nộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ầu ủa tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống

sẽ b t y màu và sẽ địch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ư c nhu m b sung v i ch t nhu m b sung safranin, còn n i bàoộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ổ sung (Safranin O) được sử dụng để nhuộm màu vi khuẩn Gram âm ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ất ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ổ sung (Safranin O) được sử dụng để nhuộm màu vi khuẩn Gram âm ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân

t dử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngi tác nhân nhi t sẽ đệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ư c nhu m và có màu xanh.ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân

K t thúc quá trình nhu m, ta th y đếp của tế bào vi sinh vật sống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ất ư c hình nh c a bào t có màu xanh n m ủa tế bào vi sinh vật sống ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ở để đưa ra những kết luận về chúng

bên trong, còn t bào sinh dếp của tế bào vi sinh vật sống ưỡ cấu trúc tế bào vi khuẩnng ngoài có màu h ng.ở để đưa ra những kết luận về chúng ồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn

V hình thái c a n i bào t quan sát dền sáng Trong đó, có nhiều nhất ủa tế bào vi sinh vật sống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngi kính hi n vi: bào t n m tâm c a tển động tự thân và chuyển động Brown ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ở để đưa ra những kết luận về chúng ủa tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sốngbào thu c ki u vi khu n Bacillus Đây là ki u vi khu n gram dộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ển động tự thân và chuyển động Brown ển động tự thân và chuyển động Brown ương phản vớing, hình que.

4 Bàn lu n ận xét và giải thích

Do tính không th m th u c a áo bào t nên v i nh ng phất ủa tế bào vi sinh vật sống ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ương phản vớing pháp nhu mộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phânthông thường lỏng.ng không làm cho bào t b t màu Bào t có đ c đi m là khó b t màu h n tử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ặc xếp thành chuỗi ển động tự thân và chuyển động Brown ắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ơng phản với ếp của tế bào vi sinh vật sốngbào dinh dưỡ cấu trúc tế bào vi khuẩnng, xong khi b t màu r i thì l i r t khó b t y màu, trong khi đó t bàoắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ất ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ếp của tế bào vi sinh vật sốngdinh dưỡ cấu trúc tế bào vi khuẩnng b t y màu nhanh chóng.ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu

Chính vì v y, đ bào t có th b t màu thu c nhu m, ta c n ho t hóa nó b ngật sống ển động tự thân và chuyển động Brown ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ển động tự thân và chuyển động Brown ắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ầu ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngtác nhân nhi t đ cao hay k t h p acid v i nhi t Vi c ho t hóa sẽ kích thích bào t n yệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ếp của tế bào vi sinh vật sống ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất

m m và khi bào t tr ng thái n y m m thì thu c nhu m sẽ d dàng xâm nh p vàoầu ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ở để đưa ra những kết luận về chúng ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ầu ống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ễn Lân Dũng, 2003) Sự hiện diện của axetic acid và pH thấp của ật sốngbên trong lõi d n đ n bào t b t màu.ẫn ếp của tế bào vi sinh vật sống ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ắp xếp của tế bào vi sinh vật sống

Đi u này đền sáng Trong đó, có nhiều nhất ư c gi i thích b ng c ch : khi ho t hóa b ng nhi t thì nhi t đ sẽơng phản với ếp của tế bào vi sinh vật sống ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phânlàm cho protein c a áo bào t b bi n tính d n đ n c u trúc áo tr nên x p h n, tínhủa tế bào vi sinh vật sống ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ếp của tế bào vi sinh vật sống ẫn ếp của tế bào vi sinh vật sống ất ở để đưa ra những kết luận về chúng ống ơng phản với

th m tăng và đ ng th i cũng xúc ti n ho t đ ng th y phân c a enzyme protease t iất ồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn ờng lỏng ếp của tế bào vi sinh vật sống ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ủa tế bào vi sinh vật sống ủa tế bào vi sinh vật sống ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngđây K t qu là lếp của tế bào vi sinh vật sống ư ng protein gi m, c u trúc áo tr nên l ng l o t o đi u ki n cho nất ở để đưa ra những kết luận về chúng ỏng ẻ hoặc xếp thành chuỗi ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ền sáng Trong đó, có nhiều nhất ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc

và thu c nhu m th m vào v bào t , làm cho v bào t trống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ất ỏng ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ỏng ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ương phản vớing ph ng S trồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn ự thân và chuyển động Brown ương phản vớing

ph ng sẽ làm cho l p peptidoglycan b v c u trúc t o đi u ki n cho nồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ỡ cấu trúc tế bào vi khuẩn ất ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ền sáng Trong đó, có nhiều nhất ệt được chuyển động tự thân và chuyển động Brown ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc và thu cốngnhu m th m vào trong lõi làm cho bào t có màu xanh.ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ất ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất

Nh ng l u ý có kh năng nh hư ưở để đưa ra những kết luận về chúng.ng đ n quá trình nhu m :ếp của tế bào vi sinh vật sống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân

 V t bôi v a ph i, không quá dày n u không thì các l p vi khu n sẽ ch ng lênếp của tế bào vi sinh vật sống ừ đó phân ếp của tế bào vi sinh vật sống ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫnnhau khó nhu m và gây khó quan sát ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân

 M u gi y đ t trên hình ch nh t có kính thẫn ất ặc xếp thành chuỗi ật sống ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc v a, phù h p v i phi n kínhừ đó phân ớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống

ch nh t, vì n u to quá sẽ làm thu c nhu m ch y xu ng phía dật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống ống ộng của vi sinh vật trong môi trường lỏng, từ đó phân ống ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngi

 M u gi y trên phi n kính hình ch nh t ph i luôn luôn ph i đẫn ất ếp của tế bào vi sinh vật sống ật sống ư c làm m b iở để đưa ra những kết luận về chúng.malachite green Vì n u khô gi y sẽ b dính ch t vào v t bôi và chúng ta không th r aếp của tế bào vi sinh vật sống ất ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ặc xếp thành chuỗi ếp của tế bào vi sinh vật sống ển động tự thân và chuyển động Brown ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhấttrôi v i nớc và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sốngc

Trong quá trình c đ nh vi sinh v t, n u h nóng quá có th gây v thành t bàoống ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ật sống ếp của tế bào vi sinh vật sống ơng phản với ển động tự thân và chuyển động Brown ỡ cấu trúc tế bào vi khuẩn ếp của tế bào vi sinh vật sốnggây khó quan sát đư c bào t ử dụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất

5 Tài li u tham kh o ệm ả thí nghiệm

Nguy n Lân Dũng, Nguy n Đình Quy n, Ph m Văn Ty (2003) ễn Lân Dũng, 2003) Sự hiện diện của axetic acid và pH thấp của ễn Lân Dũng, 2003) Sự hiện diện của axetic acid và pH thấp của ếp của tế bào vi sinh vật sống ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống Vi sinh v t h c ật Thực phẩm ọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000

NXB Giáo d c 27-30.ụng kính hiển vi quang học nền sáng Trong đó, có nhiều nhất

TS Tr nh Khánh S n (2018) ịch chuyển hỗn loạn so với vị trí ban đầu ơng phản với Các kĩ thu t c b n trong th c nghi m vi sinh v t ật Thực phẩm ơng (trái) và Gram âm (phải) ản giọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 ự, 2003) ệ sợi của nấm ật Thực phẩm

h c ọt ép của nước dưa cải chua ở độ phóng đại ×1000 NXB Đ i h c Qu c gia TP H Chí Minh.ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ọc nền sáng Trong đó, có nhiều nhất ống ồng nhất về mặt hình thái (vi khuẩn dạng que ngắn, que dài lẫn

Bài 5: KĨ THU T PHÒNG M (QUAN SÁT N M S I) ẬT PHÒNG ẨM (QUAN SÁT NẤM SỢI) ẨM (QUAN SÁT NẤM SỢI) ẤM SỢI) ỢI)

1 M c đích ục đích

Nh vào kĩ thu t phòng m mà ta có th quan sát đờng lỏng ật sống ển động tự thân và chuyển động Brown ư c hình d ng, c u t o cũng nhạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ất ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ư

gi ng loài c a lo i n m s i mà ta c y vào môi trống ủa tế bào vi sinh vật sống ạng, kích thước và cách sắp xếp của tế bào vi sinh vật sống ất ất ường lỏng.ng

2 K t qu thí nghi m ết quả thí nghiệm ả thí nghiệm ệm

Hình 1 5: N m s i ợc quan sát ở độ phóng đại ×1000