Nghiên cứu một số dạng bất thường nhiễm sắc thể y ở nam giới khám vô sinh tại bệnh viện phụ sản thành phố cần thơ (tt)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã ngành: 9 42 02 01 CAO THỊ TÀI NGUYÊN NGHIÊN CỨU MỘT SỐ DẠNG BẤT THƯỜNG NHIỄM

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Chuyên ngành: Công nghệ sinh học

Mã ngành: 9 42 02 01

CAO THỊ TÀI NGUYÊN

NGHIÊN CỨU MỘT SỐ DẠNG BẤT THƯỜNG NHIỄM SẮC THỂ Y Ở NAM GIỚI KHÁM VÔ SINH TẠI BỆNH VIỆN PHỤ SẢN THÀNH PHỐ CẦN THƠ

Cần Thơ, 2018

CÔNG TRÌNH ĐƯỢC HOÀN THÀNH TẠI

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

Luận án được bảo vệ trước hội đồng chấm luận án tiến sĩ cấp trường Họp tại:………, Trường Đại học Cần Thơ Vào lúc … giờ … ngày … tháng … năm …

Phản biện 1:

Phản biện 2:

Phản biện 3:

Có thể tìm hiểu luận án tại thư viện:

Trung tâm Học liệu, Trường Đại học Cần Thơ

Thư viện Quốc gia Việt Nam

DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ

1 Cao Thị Tài Nguyên, Nguyễn Trung Kiên, Vũ Thị Nhuận, Nguyễn Chung Viêng, Trịnh Thị Bích Liên (2017), “Nghiên cứu bước đầu áp dụng kỹ thuật QF-PCR trong chẩn đoán các kiểu

mất đoạn nhỏ vùng AZFc trên NST Y ở nam giới vô sinh”, Tạp chí Y Học Việt Nam Tháng 4 - Số 2, tr 245-249

2 Cao Thị Tài Nguyên, Trịnh Thị Bích Liên, Nguyễn Trung Kiên,

Vũ Thị Nhuận, Nguyễn Phan Vinh, Nguyễn Thị Bích Ngọc, Trịnh Minh Thiết, Phan Thị Nhan (2017), “Đặc điểm hormon FSH, LH và testosteron ở nam giới vô sinh có mật độ tinh trùng

≤5x106/ML tinh dịch”, Tạp chí Y Học Thực hành 5(1043), tr

178-181

3 Cao Thi Tai Nguyen, Nguyen Trung Kien, Vu Thi Nhuan, Nguyen Chung Vieng, Trinh Minh Thiet, Nguyen Phan Vinh, Nguyen Thi Bich Ngoc, Cao Luong Binh, Trinh Thi Bich Lien (2017), “An infertility SRY-negative 46,XX male detected by

quantitative fluorescent polymerase chain reaction”, Journal of clinical case reports 7:1013, doi: 10.4172/21657920.10001013

4 Cao Thị Tài Nguyên, Nguyễn Trung Kiên, Trịnh Thị Bích Liên,

Vũ Thị Nhuận, Nguyễn Chung Viêng, Nguyễn Đắc Khoa, Nguyễn Thị Bích Ngọc, Trịnh Minh Thiết, Cao Lương Bình, Nguyễn Phan Vinh, Nguyễn Văn Khuôn (2018), “Sử dụng kỹ thuật QF-PCR trong chẩn đoán một số nguyên nhân di truyền

thường gặp ở nam giới vô sinh”, Tạp chí Công nghệ sinh học

16(2), tr.241-252

Chương 1 GIỚI THIỆU

1.1 Đặt vấn đề

Có nhiều nguyên nhân gây vô sinh ở nam giới, trong đó nguyên nhân di truyền chiếm từ 4-38% Hiện nay, 2 nguyên nhân di truyền thường gặp ở nam giới vô sinh là hội chứng Klinefelter và mất đoạn AZF Tại Việt Nam, tỷ lệ các nguyên nhân này là khoảng 23% ở nam giới có ≤ 5x106 tinh trùng/mL tinh dịch Tỷ lệ nam giới vô sinh bị mất đoạn AZF ở Việt Nam khoảng 5-12,8%

Có 3 loại mất đoạn AZF là AZFa, AZFb và AZFc Nam giới bị mất đoạn AZFc có thể có con nhờ vào kỹ thuật hỗ trợ sinh sản (tỷ lệ thành công khoảng 70%), các mất đoạn khác rất khó có con Viện Hàn Lâm Nam học Châu Âu/Mạng lưới kiểm định chất lượng Di truyền phân tử Châu Âu khuyến cáo nam giới có ≤ 5x106 tinh trùng/mL tinh dịch nên thực hiện xét nghiệm tìm nguyên nhân di truyền trước khi sử dụng kỹ

thuật hỗ trợ sinh sản (Krausz et al., 2014)

Kỹ thuật QF-PCR với nhiều ưu điểm như thời gian trả kết quả nhanh, giá thành rẻ, độ chính xác cao nên nhiều tác giả đề xuất áp dụng kỹ thuật này trong chẩn đoán tìm nguyên nhân di truyền ở nam giới vô sinh

Trên cơ sở đó, luận án “Nghiên cứu một số dạng bất thường nhiễm sắc

thể Y ở nam giới khám vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản thành phố Cần Thơ” được thực hiện

(3) Mô tả đặc điểm tinh dịch đồ, nội tiết tố và một số yếu tố liên quan đến bất thường nhiễm sắc thể Y ở nam giới khám vô sinh có ≤ 5x106 tinh trùng/mL tinh dịch

1.3 Ý nghĩa của luận án

1.3.1 Ý nghĩa khoa học

- Cung cấp những cứ liệu khoa học về tỷ lệ một số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y, đặc điểm tinh dịch đồ, nội tiết tố, một số yếu tố liên quan

đến bất thường nhiễm sắc thể Y ở nam giới khám vô sinh có ≤ 5x106 tinh trùng/mL tinh dịch

- Làm tiền đề cho các nghiên cứu tiếp theo

1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn

Nghiên cứu này có ý nghĩa rất lớn trong việc hỗ trợ chẩn đoán, tư vấn và điều trị vô sinh hiệu quả và ít tốn kém hơn cho bệnh nhân tại Bệnh viện Phụ sản thành phố Cần Thơ nói riêng và khu vực Đồng bằng sông Cửu Long nói chung

1.4 Tính mới của luận án

- Nghiên cứu xây dựng và tối ưu hóa thành công quy trình kỹ thuật QF-PCR với 14 chỉ dấu di truyền dùng để phát hiện một số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y ở nam giới khám vô sinh

- Nghiên cứu của Rozen et al (2012) là công trình đầu tiên và duy

nhất công bố về tỷ lệ mất một phần đoạn AZFc kiểu gr/gr và b2/b3 của người Việt Nam Bên cạnh các kiểu mất một phần đoạn AZFc trên, nghiên cứu còn ghi nhận 4 dạng mất một phần đoạn AZFc mới là mất đoạn

sY1191-sY1192, sY1291, 2 gen DAZ - 1 gen CDY1 và mất 1 gen CDY1

- Nghiên cứu ghi nhận sự đa hình về chiều dài đoạn gen được khuếch đại bằng chỉ dấu di truyền sY1291, dao động từ 507-527 bp

Chương 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1 Đại cương về vô sinh và quá trình sinh tinh

2.1.1 Một số khái niệm về vô sinh và vô sinh nam

Khoảng 80-85% các cặp vợ chồng có thai tự nhiên sau một năm chung sống, nhưng cũng có 15-20% cặp vợ chồng gặp vấn đề về khả năng

sinh sản hay còn gọi là vô sinh (Ayensu-Coker et al., 2007; Jungwirth et al., 2012)

Một cặp vợ chồng hay một đôi nam nữ được gọi là vô sinh khi họ giao hợp thường xuyên và không sử dụng biện pháp tránh thai nào sau 12 tháng mà vẫn không có con (WHO, 2000)

Vô sinh nam là tình trạng các cặp vợ chồng hoặc cặp nam nữ không

có thai sau một năm sinh hoạt tình dục bình thường và không dùng biện

pháp tránh thai nào do nguyên nhân từ nam giới (Jungwirth et al., 2012)

2.1.2 Đại cương về quá trình sinh tinh

Các tế bào mầm sinh dục nguyên thủy tham gia vào quá trình sinh tinh trải qua 3 giai đoạn là phân bào nguyên phân, giảm phân và biệt hóa

để tạo thành tinh trùng trưởng thành (Oliveira và Alves, 2015) Nam giới

có khả năng sinh sản bình thường mỗi ngày tạo ra > 40x106 tinh trùng (Cheng và Mruk, 2013)

Quá trình sinh tinh được điều hòa bởi 3 hormon chính là FSH

(FSH - Follicle-stimulating hormon), LH (LH - Luteinizing hormon) và

testosteron (Verhoeven et al., 2010; Rato et al., 2012) Bên cạnh đó, quá

trình này còn được điều hòa bởi một số yếu tố khác như nhiệt độ, các dạng oxi hoạt động ROS (ROS - Reactive oxygen species) và hàng rào chống oxi hóa tại tinh hoàn (Oliveira và Alves, 2015)

Xét nghiệm nồng độ hormon FSH, LH và testosteron là những xét nghiệm cần thiết và quan trọng giúp tìm ra được nguyên nhân và cách điều trị cho nam giới vô sinh do nội tiết (Hotaling và Walsh, 2009)

2.2 Tinh dịch đồ và một số yếu tố liên quan đến vô sinh nam

2.2.1 Tinh dịch đồ

Hiện nay, tại các phòng xét nghiệm tinh dịch đồ đánh giá kết quả dựa trên hướng dẫn của WHO (2010)

2.2.2 Một số yếu tố liên quan đến vô sinh nam

Một số yếu tố liên quan đến vô sinh nam đã được xác định như tuổi, chỉ số khối của cơ thể BMI (BMI - Body mass index), tiền sử gia đình về vô sinh, một số thói quen (hút thuốc, uống rượu, ít vận động), môi trường độc hại, nghề tiếp xúc với những chất độc hại, nhiệt độ cao, mặc quần lót chật, và xông hơi (Cavallini và Beretta, 2015)

2.3 Nhiễm sắc thể Y và một số bất thường nhiễm sắc thể Y ở nam giới

vô sinh

2.3.1 Nhiễm sắc thể Y của người

Nhiễm sắc thể Y dài khoảng 60 Mb, gồm 2 vùng là vùng giả nhiễm

sắc thể thường chiếm 5% và vùng không kết hợp chiếm 95% (Jangravi et al., 2013) Vùng không kết hợp gồm có vùng đồng nhiễm sắc và vùng dị

nhiễm sắc (Hình 2.1)

Hình 2.1 Cấu trúc nhiễm sắc thể Y (Kandeel et al., 2007)

2.3.2 Một số chỉ dấu di truyền trên nhiễm sắc thể Y

Trên vùng đồng nhiễm sắc của nhiễm sắc thể Y chứa khoảng 1287

vị trí trình tự đánh dấu STS (Sequence tagged site), trong đó 992 STS

có trình tự đơn và 285 STS trình tự lặp (Lange et al., 2008)

Hiện nay, đa số các nghiên cứu sử dụng 6 chỉ dấu di truyền (sY84, sY86, sY127, sY134, sY254 và sY255) để phát hiện mất đoạn AZFa,

AZFb và AZFc (Krausz et al., 2014) Ngoài ra, Rozen et al (2012) sử

dụng một số chỉ dấu di truyền sY1189, sY1191, sY1192 và sY1291 để phát hiện mất một phần đoạn AZFc Trên cơ sở đó, nghiên cứu này sử dụng các chỉ dấu di truyền sY84, sY86, sY127, sY134, sY254, sY255, sY1191, sY1192 và sY1291 Ngoài ra, để có thể phát hiện được một số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y, nghiên cứu sử dụng thêm các chỉ dấu di truyền AMEL, TAF9B, DAZ, CDY, SRY Như vậy, luận án sử dụng 14 chỉ dấu di truyền

Tất cả các trình tự mồi của các chỉ dấu di truyền được kiểm tra trên ngân hàng cơ sở dữ liệu của NCBI (Phiên bản GRCh38.p7) để phát hiện vị trí các đoạn sản phẩm PCR Ở Hình 2.2 thể hiện sản phẩm PCR được khuếch đại của 13 chỉ dấu di truyền trên nhiễm sắc thể Y, ngoại trừ TAF9B (khuếch đại đoạn gen trên nhiễm sắc thể 3 và NST X)

Hình 2.2 Vị trí sản phẩm các đoạn ADN được khuếch đại bằng cặp mồi

của 13 chỉ dấu di truyền trên nhiễm sắc thể Y

2.3.3 Bất thường nhiễm sắc thể Y ở nam giới vô sinh

Các nguyên nhân di truyền chiếm khoảng 30% gồm có rối loạn đơn gen, bất thường di truyền tế bào và các loại bất thường đoạn AZF của nhiễm sắc thể Y (Aston và Conrad, 2013)

2.4 Một số kỹ thuật dùng để phát hiện nguyên nhân di truyền ở nam giới vô sinh

Hiện nay, bên cạnh kỹ thuật di truyền tế bào người ta đã dùng nhiều kỹ thuật phân tử để phát hiện các bất thường trên nhiễm sắc thể Y như kỹ thuật lai tại chỗ huỳnh quang (FISH), PCR đa mồi, Realtime PCR, khuếch đại các đầu dò phụ thuộc ghép nối (MLPA) và QF-PCR

2.5 Tình hình nghiên cứu một số nguyên nhân vô sinh ở nam giới 2.5.1 Trên thế giới

Nhiều nghiên cứu cho thấy hội chứng Klinefelter và mất đoạn AZF

là 2 nguyên nhân di truyền thường gặp ở nam giới khám vô sinh có số lượng < 5x106 tinh trùng/mL tinh dịch (Cavkaytar et al., 2012; Choi et al., 2013; Zhang et al., 2013b) Tỷ lệ mất đoạn AZF từ 4-38% (Mafra et al., 2011; Cavkaytar et al., 2012; Fu et al., 2012; Choi et al., 2013; Ambulkar

et al., 2013; Nasasse et al., 2015)

2.5.2 Ở Việt Nam

Tỷ lệ mất đoạn AZF từ 5-12,8%; trong đó mất đoạn AZFc lưu hành phổ biến nhất (Nguyễn Minh Hà, 2011; Nguyễn Thị Việt Hà, 2012; Nguyễn Đức Nhự, 2015)

Chương 3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Sơ đồ nghiên cứu tổng quát

Sơ đồ 3.1 Sơ đồ nghiên cứu tổng quát

3.2 Đối tượng nghiên cứu

Nam giới khám vô sinh tại Khoa Hiếm muộn Bệnh viện Phụ sản thành phố Cần Thơ có ≤ 5x106 tinh trùng/mL tinh dịch theo tiêu chuẩn WHO (2010)

Tiêu chuẩn loại trừ: bệnh nhân không thể lấy tinh dịch bằng cách

thủ dâm và không đồng ý tham gia nghiên cứu Bên cạnh đó, cũng loại trừ

những nam giới thắt, cắt ống dẫn tinh, lấy mẫu tại nhà, làm rơi vãi tinh dịch trong khi lấy mẫu

3.3 Cỡ mẫu

- Áp dụng công thức tính cỡ mẫu ước lượng cho một tỷ lệ

2

2 2 / 1

) 1 (

.

d

p p Z

 

Trong đó:

n: cỡ mẫu tối thiểu cần thiết

Z1-  /2 = 1,96 với hệ số tin cậy mong muốn là 95%

p: tỷ lệ nam giới có ≤ 5x106 tinh trùng/mL tinh dịch bị mất đoạn AZF trên nhiễm sắc thể Y Dựa trên nghiên cứu của Nguyễn Minh Hà (2011) với p = 12,8%, luận án chọn p = 0,128

d: sai số cho phép, chọn d = 0,037

Thay vào công thức tính được n = 313

Như vậy, cỡ mẫu nghiên cứu tối thiểu là 313 nam giới khám vô sinh có ≤ 5x106 tinh trùng/mL tinh dịch

Trong thực tế, luận án đã nghiên cứu trên 322 trường hợp

3.4 Phương pháp chọn mẫu

Chọn mẫu thuận tiện không xác xuất

3.5 Thời gian và địa điểm

3.5.1 Thời gian nghiên cứu

Từ tháng 11/2014 đến tháng 3/2017

3.5.2 Địa điểm nghiên cứu

- Thu nhận mẫu tinh dịch đồ và thực hiện xét nghiệm tinh dịch đồ tại Khoa Hiếm muộn, Bệnh viện Phụ sản thành phố Cần Thơ

- Xét nghiệm nồng độ hormon FSH, LH, testosteron, ly trích ADN,

kỹ thuật QF-PCR và giải trình tự được thực hiện tại Khoa xét nghiệm - Di truyền học, Bệnh viện Phụ sản thành phố Cần Thơ

- Gửi 1 mẫu máu, 3 mẫu ADN đến phòng xét nghiệm kỹ thuật cao ISOLABO tại địa chỉ 101/26 Nguyễn Chí Thanh, Phường 9, Quận 5, thành phố Hồ Chí Minh để kiểm định kết quả QF-PCR

Bảng 3.1A Các chỉ dấu di truyền dùng phát hiện một số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y

Chỉ dấu

di truyền

Vị trí nhiễm sắc thể

huỳnh quang

Kích thước sản phẩm PCR tham khảo (bp)

Nguồn tham khảo

112

Xie và Liang et al

(2014) TAF9B-F

TAF9B-R

X NST 3

F: TTTGACAGGTAGTTTTGGGTCA R: TGGTTTTGCCTAGGTCCAGT

140

Plaseska et al

(2011) DAZ-F

DAZ-R

AZFc NST 3

F: TTAAGTACTACTGTAGACACC R: GTTTCTTGTATAATGTAGAAGAGTAGAGC

217

Alimardanian et al

(2016)

- Chứng âm (nước cất, nữ bình thường) và chứng dương (nam giới

bị mất đoạn AZFc, hội chứng Klinefelter do Bộ môn Y Sinh học – Di truyền, Học viện Quân Y và Đại học Y Hà Nội cung cấp, được xác định bằng kỹ thuật multiplex-PCR (AZF) và nuôi cấy bạch cầu lympho máu ngoại vi (hội chứng Klinefelter))

+ Cặp mồi thường sY1291 đặt công ty Macrogen, Hàn Quốc sản xuất và cặp mồi thường LAPT đặt công ty Macrogen, Hàn Quốc và công

ty TNHH Phù Sa, Cần Thơ, Việt Nam sản xuất (Bảng 3.1B)

Bảng 3.1B Một số đặc điểm của 2 chỉ dấu di truyền sY1291 và LAPT

Chỉ dấu

di truyền Trình tự mồi (5’-3’)

Kích thước sản phẩm PCR tham khảo (NCBI, GRCh38.p7) (bp)

3.3 Phương pháp nghiên cứu

3.3.1 Xây dựng và kiểm định quy trình kỹ thuật QF-PCR để phát hiện một số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y ở nam giới khám vô sinh có ≤ 5x10 6 tinh trùng /mL tinh dịch

3.3.1.1 Ly trích ADN

3.3.1.2 Xây dựng quy trình kỹ thuật QF-PCR

Luận án khảo sát các điều kiện thực hiện phản ứng QF-PCR và điện di mao quản để xây dựng và tối ưu hóa quy trình kỹ thuật QF-PCR

a Khảo sát các điều kiện thực hiện phản ứng QF-PCR

Xác định nhiệt độ gắn mồi của từng chỉ dấu di truyền dựa vào trang web của NEB calculator Tm tại https://tmcalculator.neb.com/#!/

Sắp xếp nhóm các chỉ dấu di truyền dựa vào nhiệt độ gắn mồi và tối ưu dựa vào điều kiện thực nghiệm

Thử nghiệm phản ứng QF-PCR ở nồng độ cuối cùng của mồi là 5 pmol và 10 pmol; multiplex PCR mastermix là 1X và 2X ở thể tích phản ứng là 25 µl và 50 µl

Xác định điều kiện tối ưu của các nhóm chỉ dấu di truyền trong phản ứng QF-PCR

b Khảo sát các điều kiện điện di mao quản sản phẩm PCR huỳnh quang

Thực hiện pha HiDi-Formamide (HiDi) và thang chuẩn ở 2 thể tích

là 200 µl HiDi + 4 µl thang chuẩn và 120 µl HiDi + 4 µl thang chuẩn

Pha loãng 40 lần, 60 lần và 100 lần sản phẩm PCR huỳnh quang với nước cất khử ion 2 lần (Bảng 3.2)

Bảng 3.2 Thể tích pha loãng sản phẩm PCR huỳnh quang

Thể tích dung dịch cuối

cùng điện di mao quản

Thể tích pha loãng Sản phẩm PCR huỳnh quang Nước cất khử ion 2 lần

3.3.1.2 Kiểm định quy trình kỹ thuật QF-PCR

Để đánh giá độ chính xác và tin cậy của quy trình kỹ thuật đã xây dựng và tối ưu, kết quả QF-PCR được kiểm định bằng những cách sau đây:

- So sánh với NCBI (Phiên bản GRCh38.p7) và một số nghiên cứu trên thế giới

- So sánh với mẫu chứng dương do Bộ môn Y Sinh học Di truyền của Đại học Y Hà Nội và Học viện Quân Y cung cấp

- Gửi mẫu máu và ADN của đối tượng nghiên cứu đi kiểm chứng

- Giải trình tự để khẳng định sự tương đồng trình tự nucleotid ở mẫu thể hiện sự đa hình về chiều dài sản phẩm PCR huỳnh quang

3.3.2 Xác định tỷ lệ một số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y ở nam giới khám vô sinh có ≤ 5x10 6 tinh trùng /mL tinh dịch bằng quy trình

kỹ thuật QF-PCR đã được xây dựng và kiểm định

Áp dụng quy trình kỹ thuật QF-PCR đã kiểm định vào xác định một

số dạng bất thường nhiễm sắc thể Y

Nam giới khám vô sinh không có bất thường nhiễm sắc thể Y (bình

thường) xuất hiện các peak như sau: AMELX/AMELY là 1:1 (103-106 bp), DAZ/DAZL là 4:2 (210-214 bp), TAF9B3/TAF9BX là 2:1 (144-148 bp), CDY2/CDY1 là 2:2 (198-204 bp), SRY ( 465 bp), sY84 (328 bp), sY86

(316 bp), sY127 (192 bp), sY134 (302 bp), sY254 (380 bp), sY255 (122 bp), sY1191 (385 bp) và sY1192 (255 bp) Peak của sY1291 có thể xuất

hiện tại một trong các vị trí sau: 507 bp hoặc 512 bp hoặc 523 bp hoặc 527

bp

+ Mất một phần đoạn AZFb kiểu mất 2 gen CDY2 xuất peak CDY2/CDY1 là 0:2; các peak còn lại đều xuất hiện như ở nam giới bình

thường

+ Mất một phần đoạn AZFc kiểu gr/gr: xuất hiện peak DAZ/DAZL

là 2:2 (DAZ bị giảm ½); CDY2/CDY1 là 2:1 (mất 1 CDY1), không có peak

của sản phẩm PCR huỳnh quang sY1291 và các peak còn lại giống như nam giới bình thường

+ Mất một phần đoạn AZFc kiểu b2/b3: xuất hiện peak DAZ/DAZL

là 2:2 (DAZ bị giảm ½); CDY2/CDY1 là 2:1 (mất 1 CDY1), không có peak

của sản phẩm PCR huỳnh quang sY1191 và sY1192; và các peak khác giống ở nam giới bình thường

+ Mất một phần đoạn AZFc kiểu mất 2 gen DAZ: xuất hiện peak DAZ/DAZL là 2:2; các peak khác giống như ở nam giới bình thường

+ Mất một phần đoạn AZFc kiểu mất 1 gen CDY1: xuất hiện peak CDY2/CDY1 là 2:1; các peak còn lại giống ở nam giới bình thường

+ Mất một phần đoạn AZFc kiểu mất 2 gen DAZ và 1 gen CDY1: peak DAZ/DAZL là 2:2 và CDY2/CDY1 là 2:1; các peak còn lại đều xuất

hiện như ở nam giới bình thường

+ Mất một phần đoạn AZFc kiểu mất sY1191-sY1192: không có peak của 2 chỉ dấu di truyền sY1191 và sY1192; các peak khác đều xuất hiện như ở nam giới không có bất thường nhiễm sắc thể Y

+ Mất một phần đoạn AZFc kiểu mất sY1291: xuất hiện các peak giống nam giới bình thường, ngoại trừ sY1291 không xuất hiện peak tại bất kỳ vị trí nào 507 bp, 512 bp, 523 bp, 527 bp

+ Mất hoàn toàn đoạn AZFc (b2/b4): không có peak của sY254,

sY255, sY1191, sY1192 và sY1291; peak CDY2/CDY 1là 2:0 và DAZ/DAZL là 0:2; các peak khác đều xuất hiện như ở nam giới bình

thường

+ Mất hoàn toàn đoạn AZFbc: kết quả QF-PCR không có peak của

sY127, sY134, sY254, sY255, sY1191, sY1192, sY1291, CDY2/CDY1, DAZ; các peak còn lại và DAZL đều xuất hiện như ở nam giới không có

bất thường nhiễm sắc thể Y

+ Nhân đoạn gen DAZ: xuất hiện peak DAZ/DAZL là 6:2 hoặc 8:2,

các peak còn lại đều giống nam giới bình thường

+ Hội chứng Klinefelter với nhiễm sắc thể Y bị mất một phần đoạn AZFc kiểu gr/gr: là nam giới tăng 1 nhiễm sắc thể X (tỷ lệ peak