NGHIÊN CƯÚ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC, KỸ THUẬT CHIẾT XUẤT VÀ THỬ NGHIỆM HIỆU LỰC TRỪ SÂU TƠ CỦA HOẠT CHẤT ROTENONE TỪ CÂY CÓC KÈN (Derris trifoliata Lour)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CƯÚ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC, KỸ THUẬT CHIẾT XUẤT VÀ THỬ NGHIỆM HIỆU LỰC TRỪ SÂU TƠ CỦA HOẠT CHẤT ROTENONE TỪ CÂY CÓC KÈN (Derris trifoliata Lour) Họ tên sinh viên: TRẦN THỊ CẨM HÀ Ngành: CÔNG NGHỆ HỐ HỌC Niên khố: 2004 - 2008 Tháng 10/2008 NGHIÊN CƯÚ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC, KỸ THUẬT CHIẾT XUẤT VÀ THỬ NGHIỆM HIỆU LỰC TRỪ SÂU TƠ CỦA HOẠT CHẤT ROTENONE TỪ CÂY CÓC KÈN (Derris trifoliata Lour) Tác giả TRẦN THỊ CẨM HÀ Khố luận đệ trình để đáp ứng yêu cầu cấp Kỹ sư ngành Cơng nghệ hố học Giáo viên hướng dẫn: Ts Phan Phước Hiền Cử nhân: Đoàn Văn Mục Nhi Tháng 10 năm 2008 i CẢM TẠ Tôi xin chân thành cảm ơn tri ân đến: Ban Giám Hiệu trường Đại học Nơng Lâm Thành phố Hồ Chí Minh Ban Chủ nhiệm Bộ mơn Cơng nghệ hố học Q thầy khoa truyền đạt kiến thức năm học vừa qua, đồng thời giúp đỡ tận tình thời gian thực đề tài Đặc biệt xin gởi lòng biết ơn sâu sắc đến thầy Phan Phước Hiền trực tiếp hướng dẫn, bảo tạo điều kiện tốt cho suốt q trình thực khóa luận Xin bày tỏ lòng biết ơn đến thầy Nhi anh chị Phòng hố học Cơng ty cổ phần giám định khử trùng FCC anh chị phòng sinh học Trung tâm nghiên cứu phát triển nơng dược Vipesco tận tình giúp đỡ hướng dẫn chúng tơi thí nghiệm Xin cảm ơn gia đình Ba Lệnh thị trấn Chơn Thành, huyện Chơn Thành, tỉnh bình Phước giúp đỡ chúng tơi việc thu mẫu Lời cảm ơn sau xin gởi đến gia đình bạn bè giúp đỡ, động viên suốt thời gian học tập thực đề tài Do kiến thức chuyên môn hạn chế thời gian thực đề tài hạn chế nên chúng tơi khơng tránh sai sót Rất mong bảo, góp ý q thầy bạn ii TĨM TẮT Đề tài “Nghiên cứu đặc điểm sinh học, kỹ thuật chiết xuất thử nghiệm hiệu lực trừ sâu tơ hoạt chất rotenone từ cóc kèn (Derris trifoliata Lour) tiến hành Công ty cổ phần giám định khử trùng FCC Trung tâm nghiên cứu phát triển nông dược Vipesco, thời gian từ 01/05/2008 đến 01/10/2008 Thí nghiệm bố trí theo kiểu hồn tồn ngẫu nhiên Kết thu được: - Cây cóc kèn (Derris trifoliata Lour.) loại ưa ánh sáng, ưa ẩm, dễ trồng, thường mọc thành bụi Cây có nhiều cơng dụng hữu ích cho người Là loại có hoạt chất rotenone - Hàm lượng rotenon rễ cóc kèn đạt 2% chất khơ - Hiệu lực sâu tơ sau 24 giờ:  Ở nồng độ 5% đạt 16,67%  Ở nồng độ 7,5% đạt 23,33%  Ở nồng độ 10% đạt 26,67%  Ở nồng độ 12,5% đạt 36,67% - Hiệu lực sâu tơ sau 48  Ở nồng độ 5% đạt 53,33%  Ở nồng độ 7,5% đạt 56,67%  Ở nồng độ 10% đạt 63,33%  Ở nồng độ 12,5% đạt 83,33% iii MỤC LỤC Trang tựa i Cảm tạ ii Tóm tắt iii Mục lục iv Danh sách chữ viết tắt vii Danh sách hình viii Danh sách bảng x CHƯƠNG1.MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Nội dung đề tài 1.4 Yêu cầu CHƯƠNG 2.TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu cóc kèn 2.1.1 Mơ tả 2.1.2 Phân bố 2.1.3 Thành phần hoá học 2.1.4 Độc tính 2.1.5 Tác dụng dược lý 2.1.6 Cách dùng dân gian 2.2 Hoạt chất Rotenone 2.2.1 Danh pháp cấu trúc hoá học 2.2.2 Tính chất vật lý rotenone 2.2.3 Tính chất hoá học rotenone 10 2.2.3.1 Phản ứng oxy hoá 10 2.2.3.2 Phản ứng với chất kiềm 10 2.2.3.3 Phản ứng với acid 10 2.2.3.4 Phản ứng phân biệt Rotenone với deguelin 10 2.2.3.5 Phản ứng tạo phức 10 2.2.4 Hoạt tính sinh học Rotenone 10 iv 2.2.5 Mối liên hệ cấu trúc tác dụng sinh học rotenone 11 2.2.6 Sinh tổng hợp rotenone 11 2.3 Các nghiên cứu hoạt chất rotenone 12 2.4 Một số có chứa rotenoid giới Việt Nam 13 2.4.1 Nước 13 2.4.2 Trong nước 13 2.5Một số hợp chất trao đổi thứ cấp thảo mộc khác dùng làm thuốc trừ sâu 13 2.5.1 Nhóm cúc – Pyrethrum 13 2.5.2 Nicotine 14 2.5.3 Azadirachtin 14 2.5.4 Limonene 14 2.6 Các đặc tính sinh học sâu tơ 15 2.6.1 Phân bố 15 2.6.2 Vòng đời sâu tơ 15 2.6.3 Hình thái sâu tơ 16 2.6.4 Đặc điểm sinh học, sinh thái 16 CHƯƠNG 3.VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 3.1 Thời gian địa điểm tiến hành 18 3.2 Vật liệu, hóa chất, thiết bị 18 3.2.1 Vật liêu yêu cầu 18 3.2.2 Hóa chất thiết bị 19 3.3 Phương pháp nghiên cứu 20 3.3.1 Phương pháp xử lý mẫu 20 3.3.2 Phương pháp xác định độ ẩm 21 3.3.2.1 Nguyên lý 21 3.3.2.2 Tiến hành thí nghiệm 21 3.3.2.3 Tính kết 21 3.3.3 Phương pháp định lượng 22 3.3.3.1 Nguyên tắc: 22 3.3.3.2 Các bước thực nghiệm: 22 3.3.4 Phương pháp phân tích HPLC 25 v 3.3.4.1 Nguyên tắc hoạt động: 25 3.3.4.2 Ưu, khuyết điểm phương pháp HPLC 26 3.3.4.3 Các bước tiến hành 26 3.3.5 Phương pháp thử độ độc dịch chiết 27 3.3.5.1 Chuẩn bị dịch thử 28 3.3.5.2 Cách thử sâu tơ 28 3.3.4 Phương pháp xử lý số liệu thơ thí nghiệm 29 CHƯƠNG 4.KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 30 4.1 Kết khảo sát đặc điểm sinh học cóc kèn 30 4.1.1 Về đặc điểm hình thái 30 4.1.2 Về điều kiện sinh trưởng, phát triển bảo quản 33 4.2 Kết đo độ ẩm rễ cóc kèn 35 4.3 Kết định lượng rotenon 35 4.4 Kết phân tích HPLC 36 4.4.1 Điều kiện chạy sắc ký 36 4.4.2 Kết phân tích rotenon rễ cóc kèn 37 4.5 Kết thử hiệu lực sâu tơ 38 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 40 5.1 Kết luận 40 5.2 Đề nghị 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC vi DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT HPLC: high performance liquid chromatography LC: liquid chromatography CRD: completely random design NT: Nghiệm thức vii DANH SÁCH CÁC HÌNH Hình 2.1: Cây cóc kèn Hình 2.2: Hoa cóc kèn Hình 2.3: Quả cóc kèn Hình 2.4: Cơng thức cấu tạo rotenon Hình 2.5: Cấu trúc chromanochromanone Hình 2.6: Rotenone Sumatrol Hình 2.7: Deguelin Toxicarol Hình 2.8: Ellipton Malaccol Hình 2.9: Eroson Hình 2.10: Munduseron Hình 2.11: Dolineno Pachyrrhizon Hình 2.12: Sâu tơ 15 Hình 3.1: Rễ cóc kèn (Derris trifoliata) 19 Hình 3.2 Bột rễ cóc kèn (Derris Trifoliata) 20 Hình 3.3 Bột mẫu ngâm CHCl3 22 Hình 3.4: Mẫu lọc làm khan 23 Hình 3.5 Cơ cạn dung mơi 23 Hình 3.6: Đun hồi lưu tạo phức solvat 24 Hình 3.7: Màng lọc với lỗ lọc  = 0,45m 27 Hình 3.8: Cột lọc RP - C18 27 Hình 3.9: Bột rễ ngâm aceton 28 Hình 4.1: Thân cóc kèn phân nhánh 30 Hình 4.2: Thân cóc kèn 30 Hình 4.3: Cây cóc kèn 14 tháng tuổi 31 Hình 4.4: Lá cóc kèn 32 Hình 4.5: Rễ cóc kèn 14 tháng tuổi 32 Hình 4.6: Rễ cóc kèn 18 tháng tuổi sau thu hoạch 33 Hình 4.7: Lá non cóc kèn dùng để chữa bệnh 34 Hình 4.8: Phức C23H22O6CCl4 36 viii Hình 4.9: Sắc ký đồ rotenon chuẩn 37 Hình 4.10: Sắc ký đồ mẫu rễ rotenon 38 Sơ đồ: 2.1: Vòng đời sâu tơ 16 Sơ đồ 3.1: Các bước tiến hành xử lý mẫu 21 Sơ đồ 3.2: Các bước tiến hành phương pháp định lượng 25 Sơ đồ 3.3: Phân tích rotenon RP-HPLC 27 ix Bảng 4.7: Kết hiệu lực dịch thử sau 24 48 Nghiệm thức Hiệu lực Q% Nồng độ % 24 48 NT1 0 NT2 16,67 53,33 NT3 7,5 23,33 56,67 NT4 10 26,67 63,33 NT5 12,5 36,67 83,33 Nhận xét: Từ kết thử nghiệm bảng thống kê, chúng tơi nhận thấy: - Thuốc bắt đầu có hiệu lực tốt sâu tơ sau 48 - P < 0,05 nên nồng độ dịch chiết ảnh hưởng lên số sâu sống có ý nghĩa độ tin cậy 95% (xem phụ lục B phụ lục C) - Qua bảng kết so sánh nghiệm thức, thấy số sâu sống giảm tăng nồng độ dịch chiết - Sau 24 khơng có khác biệt có ý nghĩa nồng độ 7,5 10% (P < 0,05) (xem phụ lục B phụ lục D) Nhưng sau 48 có khác biệt có ý nghĩa nồng độ (xem phụ lục C phụ lục E) 39 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Qua q trình thực đề tài chúng tơi thu kết sau: - Khảo sát đặc điểm hình thái điều kiện sinh trưởng, phát triển cóc kèn - Hàm lượng rotenone rễ cóc kèn 14 tháng tuổi 0,9% thấp so với cóc kèn 18 tháng tuổi khoảng 2% - Hiệu lực diệt sâu sâu tơ đạt hiệu cao sau 48 - Hiệu lực diệt sâu tỷ lệ thuận với nồng độ dịch chiết rotenone 5.2 Đề nghị - Đối với phương pháp đ trọng lượng cần bổ sung thêm thể tích CCl4 để tăng khả tạo phức solvate - Sử dụng phương pháp HPLC làm tiêu chuẩn để phân tích kiểm chứng kết phương pháp phân tích khác 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Quốc Khang, 2001 Bước đầu nghiên cứu đặc trưng tác dụng thuốc trừ sâu thảo mộc Viêt nam Tạp chí Sinh học, tập 23, số 3a, trang 197202 Nguyễn Quốc Khang, 2001 Khả diệt sâu hại số chế phẩm thảo mộc có Việt nam Tạp chí Bảo vệ Thực vật, số 3, trang 18 - 22 Phan Phước Hiền, Nguyễn Văn Luật, Nguyễn Công Hào Nghiên cứu điều kiện sinh trưởng hiêu lực sử dụng hoạt chất rotenon Tạp chí Nơng Nghiệp – Công Nghiệp Thực Phẩm Việt Nam, số 12/96, trang 522 – 524 Phan Phước Hiền, Nguyễn Văn Luật, Nguyễn Công Hào Hoạt chất rotenon trừ sâu rau cá tạp Tạp chí Nơng Nghiệp – Cơng Nghiệp Thực Phẩm Việt Nam, số 1/99, trang35 – 37 Phan Phước Hiền, Nguyễn Cơng Hào, Hà Thi Lệ Một số tính chất hóa lý hoạt chất rotenon Derris elliptica Benth ĐBSCL Tạp chí Nơng Nghiệp – Cơng Nghiệp Thực Phẩm Việt Nam, số 9/2000, trang393 – 395 Phan Phước Hiền, Nguyễn Công Hào, Nguyễn Cửu Thị Hương Giang Đặc điểm sinh học thuốc cá Derris elliptica Benth ĐBSCL Tạp chí sinh học Việt Nam số tháng 4/2000 Phan Phước Hiền Hiệu triển vọng thuốc trừ sâu từ chất thứ cấp thực vật bảo vệ môi trường sinh thái Các biện pháp phòng trừ sâu bệnh khơng gây nhiễm môi sinh, 4/10/2007, Nhà xuất Nông Nghiệp Phan Phước Hiền, Vũ Tiến Khang Catherine Claparols Nghiên cứu hiệu phòng trị sâu rầy phục hồi thiên địch lúa hoạt chất Rotenone chiết xuất từ Derris Phan Phước Hiền, Suzy Richelme-David, Nguyễn Công Hào- Nghiên cứu tách chiết phát rotenoids khác từ rễ Derrs trifoliata Việt nam, Hội nghị Hóa Học tồn quốc 19-20/10/2003 Hà nội (tr.149) 10 Hien Phan Phuoc, Heinz Gortnizka, Raymond Kraemer, Hao Nguyen Cong, Structural and spectroscopical studies on natural rotenone extracted from the 41 derris trifoliata of Vietnam, Tuyển tập Hội nghị “Ngày Hóa Học TP Hồ Chi Minh – Hóa học cho phát triển”, 13-14/5/2003 11 Phan Phuoc Hien, Heinz Gortnizka, and Raymond Kraemer- Rotenone – Potential and prospect for sustainable agriculture Omonrice 11: 41-48 (2003), Cuulong Delta Rice Research Institute (CLRRI), Minister of Agriculture and rural development Viet nam (MARD), Agricultural Publishing House Ho Chi Minh City – 2003 12 1Hien Phan Phuoc, 2Heinz Gortnizka, Suzy Richelme-David, 3Hao Nguyen Cong, Structural and applied studies of rotenone and other rotenoids extracted for the first time from the Derris trifoliata, First worldwide conference on chemical ecology, July 14-18, 2003, Gyeongju, Korea 13 Hien Phan Phuoc, Heinz Gortnizka, Antoine Barnabe, Suzy Richelme-David, Molecular structure studies of rotenone crystallized for the first time from the Derris trifoliata of Viet nam, 10th Asian Chemical Congress, 8th Eurasia Conference on Chemical Sciences, Hà nội 21-24/10/2003 (Poster) 14 Hien Phan Phuoc, Heinz Gortnizka, Antoine Barnabe, Suzy Richelme-DavidRotenone from Derris plant of Vietnam- A potential and perspective insecticide and pisticide for a sustainable and ecological agriculture and the environmental protection The 5th general seminar of the core university program- The 2th seminar on environmental science and technology issues related to the urban and coastal zones development, Vietnam National University, Hanoi and Osaka University, september 28-19, 2004, (p 326-337) 15 Đỗ Tất Lợi Những thuốc vị thuốc Việt Nam Nhà xuất khoa học kỹ thuật Hà Nội 1986, trang 1207 – 1210 16 Phạm Hoàng Hộ Cây cỏ Việt Nam Nhà xuất Đại học trung học chuyên nghiệp 1999, trang 900 – 905 17 Đỗ Huy Bích, Dặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Đông, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thi Nhu, Nguyễn Tập, Trần Toàn.Viện Dược Liệu Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam Nhà xuất khoa học kỹ thuật, trang 521 – 522 42 18 Sở giáo dục đào tạo Hà Nội.Giáo trình Bảo vệ thực vật, phần 2: chuyên khoa Nhà xuất Hà Nội, trang 106 – 109 19 Nguyễn Kim Phi Phụng, 2007 Phương pháp cô lập hợp chất hữu Nhà xuất Đại học Quốc Gia, TP Hồ Chí Minh, 525 trang 20 Đào Văn Hoằng Kỹ thuật tổng hợp hoá chất bảo vệ thực vật Nhà xuất khoa học kỹ thuật, trang 30- 37 21 E.A.Heinrichs, S.Chellian, S.L Valencia, M.B.Arceo, L.T.Facbellả, G.B.Aquino, and Pickin Manual for testing insecticides on rice, Published by IRRI International Rice research Institute, 1997 22 Nicholas Ling.Rotenone.a review of its toxicity and use for fisheries management New Zealand 23 Hiroshi Fukami Minor Nakajima Rotenone and Rotenoids sách Naturrally Occuring Insecticides Martin Tacisbsm D6 Cróby, Newyork 1971, trang 71-75 24 http://www.lrchueuni.edu.vn/dongy/show_target.plx?url=/thuocdongy/C/CocKe n.htm&key=&char=C 25 http://tuyenquangkhcn.org.vn/CHANNUOI/thuysan/Phongbenh/cay%20lam%2 0thuoc%20chua%20benh%20cho%20ca%20tom.htm 26 http:// www.foodsafety.com.vn/tin tuc/List/tintuc/Default 27 http://www.mard.gov.vn/PPDHCMC/Html/Tailieukt/rau-sauto.htm 28 http://www.mard.gov.vn/PPDHCMC/Html/tailieukt/rau-nhendo.htm 43 PHỤ LỤC A Hình A.1: Máy quay Buchii Rotavapor R - 200 Hình A.2: Máy nghiền búa 44 Hình A.3: Hệ thống HPLC 45 PHỤ LỤC B  Bảng ANOVA One-Way Analysis of Variance -Data: CRD.Sosausong Level codes: CRD.Nongdo Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 334.00000 83.500000 104.375 0000 Within groups 16.00000 20 800000 -Total (corrected) 350.00000 24 missing value(s) have been excluded  Bảng trung bình Table of means for CRD.Sosausong by CRD.Nongdo -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean -0 30.000000 0000000 4000000 29.409858 30.590142 5 25.000000 3162278 4000000 24.409858 25.590142 7.5 23.000000 3162278 4000000 22.409858 23.590142 10 22.000000 7071068 4000000 21.409858 22.590142 12.5 19.000000 3162278 4000000 18.409858 19.590142 -Total 25 23.800000 1788854 1788854 23.536080 24.063920 10/10/08 23:02 STATGRAPHICS Vers.7.0 46  Kiểu LSD Multiple range analysis for CRD.Sosausong by CRD.Nongdo Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 12.5 19.000000 X 10 22.000000 X 7.5 23.000000 X 5 25.000000 X 30.000000 X contrast difference +/limits - 5.00000 1.18028 * - 7.5 7.00000 1.18028 * - 10 8.00000 1.18028 * - 12.5 11.0000 1.18028 * - 7.5 2.00000 1.18028 * - 10 3.00000 1.18028 * - 12.5 6.00000 1.18028 * 7.5 - 10 1.00000 1.18028 7.5 - 12.5 4.00000 1.18028 * 10 - 12.5 3.00000 1.18028 * * denotes a statistically significant difference  Kiểu Duncan Multiple range analysis for CRD.Sosausong by CRD.Nongdo Method: 95 Percent Duncan Level Count Average Homogeneous Groups 12.5 19.000000 * 10 22.000000 * 7.5 23.000000 * 5 25.000000 * 30.000000 * contrast difference - 5.00000 * - 7.5 7.00000 * - 10 8.00000 * - 12.5 11.0000 * - 7.5 2.00000 * - 10 3.00000 * - 12.5 6.00000 * 7.5 - 10 1.00000 7.5 - 12.5 4.00000 * 10 - 12.5 3.00000 * * denotes a statistically significant difference 47 PHỤ LỤC C  Bảng ANOVA One-Way Analysis of Variance -Data: CRD.Sosausong Level codes: CRD.Nongdo Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 1726.0000 431.50000 1078.750 0000 Within groups 8.0000 20 40000 -Total (corrected) 1734.0000 24 missing value(s) have been excluded  Bảng trung bình Table of means for CRD.Sosausong by CRD.Nongdo -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean -0 30.000000 0000000 2828427 29.582706 30.417294 5 14.000000 3162278 2828427 13.582706 14.417294 7.5 13.000000 3162278 2828427 12.582706 13.417294 10 11.000000 3162278 2828427 10.582706 11.417294 12.5 5.000000 3162278 2828427 4.582706 5.417294 -Total 25 14.600000 1264911 1264911 14.413381 14.786619 10/10/08 23:23 STATGRAPHICS Vers.7.0 48  Kiểu LSD Multiple range analysis for CRD.Sosausong by CRD.Nongdo Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 12.5 5.000000 X 10 11.000000 X 7.5 13.000000 X 5 14.000000 X 30.000000 X contrast difference +/limits - 16.0000 0.83459 * - 7.5 17.0000 0.83459 * - 10 19.0000 0.83459 * - 12.5 25.0000 0.83459 * - 7.5 1.00000 0.83459 * - 10 3.00000 0.83459 * - 12.5 9.00000 0.83459 * 7.5 - 10 2.00000 0.83459 * 7.5 - 12.5 8.00000 0.83459 * 10 - 12.5 6.00000 0.83459 * * denotes a statistically significant difference  Kiểu Duncan Multiple range analysis for CRD.Sosausong by CRD.Nongdo Method: 95 Percent Duncan Level Count Average Homogeneous Groups 12.5 5.000000 * 10 11.000000 * 7.5 13.000000 * 5 14.000000 * 30.000000 * contrast difference - 16.0000 * - 7.5 17.0000 * - 10 19.0000 * - 12.5 25.0000 * - 7.5 1.00000 * - 10 3.00000 * - 12.5 9.00000 * 7.5 - 10 2.00000 * 7.5 - 12.5 8.00000 * 10 - 12.5 6.00000 * * denotes a statistically significant difference 49 PHỤ LỤC D  Bảng ANOVA One-Way Analysis of Variance -Data: CRD.Hieuluc Level codes: CRD.Nongdo Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 1041.7167 347.23890 31.244 0000 Within groups 177.8224 16 11.11390 -Total (corrected) 1219.5391 19 missing value(s) have been excluded  Bảng trung bình Table of means for CRD.Hieuluc by CRD.Nongdo -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean -5 16.668000 1.0546203 1.4908989 14.432589 18.903411 7.5 23.332000 1.0546203 1.4908989 21.096589 25.567411 10 26.666000 2.3567872 1.4908989 24.430589 28.901411 12.5 36.668000 1.0546203 1.4908989 34.432589 38.903411 -Total 20 25.833500 7454494 7454494 24.715795 26.951205 50  Kiểu LSD Multiple range analysis for CRD.Hieuluc by CRD.Nongdo Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 5 16.668000 X 7.5 23.332000 X 10 26.666000 X 12.5 36.668000 X contrast difference +/limits - 7.5 -6.66400 4.47082 * - 10 -9.99800 4.47082 * - 12.5 -20.0000 4.47082 * 7.5 - 10 -3.33400 4.47082 7.5 - 12.5 -13.3360 4.47082 * 10 - 12.5 -10.0020 4.47082 * * denotes a statistically significant difference  Kiểu Duncan Multiple range analysis for CRD.Hieuluc by CRD.Nongdo Method: 95 Percent Duncan Level Count Average Homogeneous Groups 5 16.668000 * 7.5 23.332000 * 10 26.666000 * 12.5 36.668000 * contrast difference - 7.5 -6.66400 * - 10 -9.99800 * - 12.5 -20.0000 * 7.5 - 10 -3.33400 7.5 - 12.5 -13.3360 * 10 - 12.5 -10.0020 * * denotes a statistically significant difference 51 PHỤ LỤC E  Bảng ANOVA One-Way Analysis of Variance -Data: CRD.Hieuluc Level codes: CRD.Nongdo Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 2708.1334 902.71112 162.325 0000 Within groups 88.9779 16 5.56112 -Total (corrected) 2797.1113 19 missing value(s) have been excluded  Bảng trung bình Table of means for CRD.Hieuluc by CRD.Nongdo -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean -5 53.332000 1.0546203 1.0546203 51.750733 54.913267 7.5 56.668000 1.0546203 1.0546203 55.086733 58.249267 10 63.332000 1.0546203 1.0546203 61.750733 64.913267 12.5 83.332000 1.0546203 1.0546203 81.750733 84.913267 -Total 20 64.166000 5273102 5273102 63.375366 64.956634 52  Kiểu LSD Multiple range analysis for CRD.Hieuluc by CRD.Nongdo Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 5 53.332000 X 7.5 56.668000 X 10 63.332000 X 12.5 83.332000 X contrast difference +/limits - 7.5 -3.33600 3.16253 * - 10 -10.0000 3.16253 * - 12.5 -30.0000 3.16253 * 7.5 - 10 -6.66400 3.16253 * 7.5 - 12.5 -26.6640 3.16253 * 10 - 12.5 -20.0000 3.16253 * * denotes a statistically significant difference  Kiểu Duncan Multiple range analysis for CRD.Hieuluc by CRD.Nongdo Method: 95 Percent Duncan Level Count Average Homogeneous Groups 5 53.332000 * 7.5 56.668000 * 10 63.332000 * 12.5 83.332000 * contrast difference - 7.5 -3.33600 * - 10 -10.0000 * - 12.5 -30.0000 * 7.5 - 10 -6.66400 * 7.5 - 12.5 -26.6640 * 10 - 12.5 -20.0000 * * denotes a statistically significant difference 53 ...NGHIÊN CƯÚ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC, KỸ THUẬT CHIẾT XUẤT VÀ THỬ NGHIỆM HIỆU LỰC TRỪ SÂU TƠ CỦA HOẠT CHẤT ROTENONE TỪ CÂY CÓC KÈN (Derris trifoliata Lour) Tác giả TRẦN THỊ CẨM... tiến hành: Nghiên cưú đặc điểm sinh học, kỹ thuật chiết xuất thử nghiệm hiệu lực trừ sâu tơ hoạt chất rotenone từ cóc kèn (Derris trifoliata Lour) 1.2 Mục đích đề tài Khảo sát điều kiện sinh trưởng... q thầy bạn ii TĨM TẮT Đề tài Nghiên cứu đặc điểm sinh học, kỹ thuật chiết xuất thử nghiệm hiệu lực trừ sâu tơ hoạt chất rotenone từ cóc kèn (Derris trifoliata Lour) tiến hành Công ty cổ phần