NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC VÀ ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ THUỐC NÔNG DƯỢC ĐẾN NHỆN LỚN BẮTMỒI Pardosa sp. (LYCOSIDAE – ARANEAE) TRÊN RUỘNG RAU TẠI THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

i NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC VÀ ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ THUỐC NÔNG DƯỢC ĐẾN NHỆN LỚN BẮTMỒI Pardosa sp. (LYCOSIDAE – ARANEAE) TRÊN RUỘNG RAU TẠI THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Tác giả NGUYỄN TẤN LỘC Khóa luận được đệ trình đề để đáp ứng yêu cầu cấp bằng kỹ sư ngành Nông Học Giáo viên hướng dẫn: ThS. TRẦN THỊ THIÊN AN Tháng 10 năm 2007 ii LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên xin chân thành cảm ơn gia đình và người thân đã động viên và lo lắng để tôi có được ngày hôm nay. Xin chân thành cảm ơn quý thầy cô trường Đại Học Nông Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh đã truyền đạt kiến thức quý báu và dạy dỗ tôi trong suốt bốn năm đại học. Xin chân thành biết ơn cô ThS. Trần Thị Thiên An đã tận tâm chỉ bảo, giúp đỡ tôi vượt qua những khó khăn trong quá trình thực hiện khóa luận. Tạo cho tôi một cách nhìn rộng và mới hơn về phương pháp thực hiện một đề tài nghiên cứu mà tôi có thể mang theo trên con đường sự nghiệp của mình. Cuối cùng xin cảm ơn những anh chị và những người bạn đã giúp đỡ tôi trong suốt quãng đời sinh viên của mình. Xin chân thành cảm ơn TP.HCM, ngày 20 thánh 10 năm 2007 Sinh viên Nguyễn Tấn Lộc iii TÓM TẮT Đề tài “Nghiên cứu đặc điểm sinh học và ảnh hưởng của một số thuốc nông dược đến nhện lớn bắt mồi Pardosa sp. (Lycosidae – Araneae) trên ruộng rau tại Tp. Hồ Chí Minh” được tiến hành tại Bộ môn Bảo vệ Thực vật trường Đại Học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh, thời gian từ tháng 042007 đến 092007. Thí nghiệm được thực hiện theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên đơn yếu tố. Sâu hại là một trong những nguyên nhân chính gây ảnh hưởng đến năng suất và phẩm chất rau màu, đòi hỏi cấp bách phải tìm ra được biện pháp phòng trừ mang lại hiệu quả kinh tế. Côn trùng thiên địch có thể làm giảm thiểu mật số sâu bệnh hại. Nhện lớn bắt mồi Pardosa sp. (Lycosidae – Araneae) là một trong những loài thiên địch cần được tìm hiểu rõ đặc điểm sinh học, sinh thái để làm cơ sở xây dựng biện pháp bảo vệ, phát triển và sử dụng loài thiên địch này trong tự nhiên. Kết quả bước đầu đề tài đã đạt được Nhện Pardosa sp. nhân nuôi trong diều kiện nhiệt độ 27 ± 2oC và ẩm độ là 65 ± 5%, quá trình phát dục trải qua 3 giai đoạn Trứng có thời gian phát triển trung bình là 12,50 ngày Nhện non có 8 tuổi, thời gian phát dục trung bình là 65,16 ngày Thời gian phát triển của nhện trưởng thành dài chưa theo dõi được Vòng đời của nhện Pardosa sp. trung bình 96,33 ngày Nhện Pardosa sp. có phổ thức ăn khá rộng tuy nhiên các loài côn trùng thân mềm, nhỏ và có thể bay nhảy vẫn được nhện Pardosa sp. ăn nhiều. Thí nghiệm ảnh hưởng của một số nông dược đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp. được bố trí theo kiểu khối hoàn toàn ngẫu nhiên, 3 lần lặp lại, 11 nghiệm thức thuốc là (1) Onecide 15EC, (2) Visimaz 800BTN, (3) Daconil 500SC, (4) Aliette 800WG, (5) Secure 10EC, (6) Regent 800WG, (7) Vertimec 1,8EC, (8) Confidor 100SL, (9) Success 25SC, (10) Dipel 6,4DF, (11) Đối chứng là nước cất. Trong nhóm thuốc trừ sâu Secure 10EC là thuốc tác động mạnh nhất đến tỷ lệ chết nhện Pardosa sp ở 6 ngày sau phun thuốc (thuốc ở mức tương đối độc (cấp 3)) và loại thuốc trừ sâu gây chết ít nhất đối với nhện Pardosa sp. ở 6 ngày sau phun thuốc là iv Dipel 6,4DF (ở mức độc cấp 2 (ít độc)), nhóm thuốc trừ cỏ gây ảnh hưởng rất thấp (cấp độc 1), còn nhóm thuốc trừ bệnh thì không gây ảnh hưởng (cấp độc 1). Thí nghiệm xác định số trứng nở của nhện Pardosa sp. sau khi bị nhiễm thuốc thí nghiệm được bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên, 4 lần lặp lại với 8 nghiệm thức gây chết ít nhất đối với nhện Pardosa sp. là (1) Onecide 15EC, (2) Visimaz 800BTN, (3) Daconil 500SC, (4) Aliette 800WG, (5) Success 25SC, (6) Confidor 100SL, (7) Dipel 6,4DF, (8) Đối chứng nước cất. Qua thí nghiệm cho thấy số trứng nở của nhện Pardosa sp. sau khi bị nhiễm thuốc đều giảm so với đối chứng. Trong đó thuốc trừ cỏ Visimaz 800BTN có số trứng nở cao nhất, thuốc trừ bệnh Daconil 500SC có số trứng nở thấp nhất. v MỤC LỤC Nội dung Trang Trang tựa i Lời cảm ơn ii Tóm tắt iii Mục lục v Danh sách các chữ viết tắt vii Danh sách các hình và biểu đồ viii Danh sách các bảng ix Chương 1. MỞ ĐẦU 1 1.1. Đặt vấn đề 1 1.2. Mục đích và yêu cầu 2 1.3. Giới hạn 2 Chương 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 2.1. Một số kết quả nghiên cứu về nhện lớn bắt mồi Pardosa trên thế giới 3 2.1.1. Thành phần loài của nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa 3 2.1.2. Một số kết quả nghiên cứu về đặc điểm sinh học của nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa 3 2.1.3. Một số kết quả nghiên cứu về ảnh hưởng của nông dược đến nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa 5 2.2. Một số kết quả nghiên cứu về nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa trong nước 6 2.2.1. Thành phần loài của nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa 6 2.2.2. Một số nghiên cứu về đặc điểm sinh học của nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa 7 2.2.3. Ảnh hưởng của thuốc bảo vệ thực vật đến nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa 8 Chương 3. NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM 10 3.1. Thời gian và địa điểm thí nghiệm 10 3.2. Nội dung thí nghiệm 10 3.3. Vật liệu và dụng cụ thí nghiệm 10 3.4. Phương pháp nghiên cứu 10 3.4.1. Nghiên cứu đặc điểm sinh học của nhện lớn bắt mồi Pardosa sp. 10 vi 3.4.1.1. Xác định phổ mồi của nhện Pardosa sp. 10 3.4.1.2. Thí nghiệm xác định khả năng tiêu thụ ruồi giấm Drosophila melanogaster sâu khoang Spodoptera liture của nhện Pardosa sp. 10 3.4.1.3. Thí nghiệm xác định thời gian phát triển các pha cơ thể và vòng đời của nhện Pardosa sp. 11 3.4.2. Thí nghiệm ảnh hưởng của một số nông dược đối với nhện lớn bắt mồi Pardosa sp. 11 3.4.2.1. Xác định ảnh hưởng của nông dược đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp. 11 3.4.2.2. Số trứng nở của nhện Pardosa sp. sau khi bị nhiễm thuốc thí nghiệm 14 3.5. Xử lý số liệu 14 Chương 4. KẾT QUẢ THẢO LUẬN 15 4.1 Thí nghiệm nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của nhện lớn bắt mồi Pardosa sp.15 4.1.1. Phổ mồi của nhện Pardosa sp. (Lycosidae – Araneae) 15 4.1.2. Khả năng tiêu thụ ruồi giấm Drosophila melanogaster và sâu khoang Spodoptera litura của nhện Pardosa sp. 16 4.1.3. Thời gian phát triển các pha cơ thể và vòng đời của nhện Pardosa sp. 17 4.2. Ảnh hưởng của một số loại nông dược đối với nhện lớn bắt mồi Pardosa sp.19 4.2.1. Ảnh hưởng của một số loại nông dược đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp.19 4.2.2. Số trứng nở của nhện Pardosa sp. sau khi bị nhiễm thuốc thí nghiệm 22 Chương 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 25 5.1. Kết luận 25 5.2. Đề nghị 25 TÀI LIỆU THAM KHẢO 26 PHỤ LỤC 28 vii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT NLBM: Nhện lớn bắt mồi TTDT: Trưởng thành đẻ trứng TB: Trung bình SD: Độ lệch chuẩn STT: Số thứ tự TLTN: Tỷ lệ trứng nở PLCD: Phân loại cấp độc NT: Nghiệm thức NSP: Ngày sau phun LLL: Lần lặp lại GSP: Giờ sau phun viii DANH SÁCH CÁC HÌNH VÀ BIỂU ĐỒ Hình Trang 3.1 Tháp phun thuốc Potter Tower 12 3.2 Hộp thử thuốc thí nghiệm đối với nhện Pardosa sp. 13 4.1 Nhện Pardosa sp. ăn sâu xanh hai sọc trắng D. indica S. 16 4.2 Nhện Pardosa sp. ăn ruồi giấm D. melanogaster 16 4.3 và 4.4 Nhện Pardosa sp. đang ăn vật mồi a) Ăn ruồi giấm Drosophila melanogaster b) Ăn sâu khoang Spodoptera litura 17 4.5 Vòng đời của nhện Pardosa sp. (Lycosidae – Araneae) 18 Biểu đồ 4.1 Số trứng nở trung bình của nhện Pardosa sp. sau khi bị nhiễm thuốc 22 ix DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng Trang 3.1 Các thuốc thí nghiệm và liều lượng sử dụng 12 4.1 Phổ mồi của nhện Pardosa sp. (Lycosidae – Araneae) 15 4.2 Khả năng tiêu thụ ruồi giấm Drosophila melanogaster và sâu khoang Spodoptera litura của nhện Pardosa sp. 16 4.3 Thời gian phát triển các pha cơ thể và vòng đời của nhện Pardosa sp. 17 4.4 Ảnh hưởng của một số loại nông dược đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp. 19 4.5 Ảnh hưởng của thuốc trừ cỏ đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp. 20 4.6 Ảnh hưởng của thuốc trừ sâu đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp. 21 4.7 Tỷ lệ (%) trứng nở của nhện Pardosa sp. sau khi bị nhiễm thuốc trừ bệnh so với nghiệm thức đối chứng 23 4.8 Tỷ lệ (%) trứng nở của nhện Pardosa sp. sau khi bị nhiễm thuốc trừ cỏ so với nghiệm thức đối chứng 23 4.9 Tỷ lệ (%) trứng nở của nhện Pardosa sp. sau khi bị nhiễm thuốc trừ sâu so với nghiệm thức đối chứng 24 1 Chương 1 MỞ ĐẦU 1.1. Đặt vấn đề Nước ta là một nước nông nghiệp, hơn 80% dân số sống bằng nghề nông, vì vậy sự ổn định của nền nông nghiệp có ảnh hưởng lớn đến sự phát triển của đất nước. Việc phòng trừ sâu bệnh hại bảo vệ mùa màng là một trong những biện pháp quan trọng tạo ra sự ổn định này (Nguyễn Xuân Thành, 1996). Rau màu là loại cây trồng ngắn ngày, đóng một vai trò quan trọng cung cấp thực phẩm thiết yếu cho cuộc sống con người. Tuy nhiên, hiện nay việc sản xuất rau màu gặp rất nhiều khó khăn mà các loại dịch hại là một trong những nguyên nhân chính gây ảnh hưởng lớn đến năng suất và phẩm chất. Để tiêu diệt dịch hại nông dân thường sử dụng các loại thuốc hóa học. Biện pháp này tuy đã diệt được một số loài côn trùng gây hại nhưng đồng thời cũng tiêu diệt luôn những thiên địch quan trọng trên đồng ruộng. Việc lạm dụng các loại thuốc hóa học đã gây nhiều tác động xấu đến thiên nhiên, làm mất cân bằng sinh thái, gây ô nhiễm môi trường, ảnh hưởng đến sức khỏe con người… Để có thể khống chế được dịch hại một cách hiệu quả thì không chỉ sử dụng riêng rẽ một biện pháp hóa học mà phải kết hợp nhiều biện pháp hổ trợ với nhau. Nền nông nghiệp thế giới đang hướng tới nền nông nghiệp bền vững, trong đó chú trọng biện pháp đấu tranh sinh học, coi trọng việc bảo vệ và phát huy vai trò của thiên địch, giảm thiểu sử dụng thuốc hóa học. Ở nước ta, để góp phần vào mục tiêu giảm sử dụng thuốc hóa học trong nông nghiệp, chiến lược phòng trừ sâu hại tổng hợp (IPM = Integrate pest management)) được triển khai cũng trên quan điểm bảo vệ và phát triển vai trò của thiên địch. Trong các loài thiên địch, nhện lớn bắt mồi đã được đánh giá là loài thiên địch có vai trò quan trọng, chúng có thể tiêu diệt được nhiều loài sâu hại rất hiệu quả. Hiện nay, loài nhện lớn bắt mồi Pardosa sp. (Lycosidae Araneae) đã được xem là tác nhân đấu tranh sinh học quan trọng trên ruộng lúa. Tuy nhiên những tài liệu 2 nghiên cứu đặc điểm sinh học, sinh thái và ảnh hưởng của thuốc hóa học đối với Pardosa sp. trên ruộng rau còn rất hạn chế. Vì vậy, được sự đồng ý của bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, trường Đại Học Nông Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh, dưới sự hướng dẫn của Ths.Trần Thị Thiên An đề tài “Nghiên cứu đặc điểm sinh học và ảnh hưởng của một số thuốc nông dược đến nhện lớn bắt mồi Pardosa sp. (Lycosidae Araneae) trên ruộng rau tại Tp. Hồ Chí Minh” đã được thực hiện. 1.2. Mục đích và yêu cầu Xác định được phổ mồi của nhện Pardosa sp. đối với một số sâu hại phổ biến trên rau Xác định được khả năng ăn mồi của nhện Pardosa sp. trong điều kiện phòng thí nghiệm Xác định được thời gian phát triển các pha cơ thể và vòng đời của nhện Pardosa sp. Tìm hiểu được ảnh hưởng của một số nông dược đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp. Xác định được số trứng nở của nhện Pardosa sp. sau khi nhiễm thuốc thí nghiệm Từ những cơ sở trên góp phần xây dựng biện pháp bảo vệ, phát triển và sử dụng loài thiên địch này trong việc quản lý các loại dịch hại trên các vùng trồng rau ở Tp. Hồ Chí Minh. 1.3. Giới hạn Thời gian thực hiện đề tài: từ tháng 042007 đến tháng 092007 Đề tài chỉ mới theo dõi được khả năng tiêu thụ mồi của nhện Pardosa sp. đối với sâu khoang Spodoptera litura và ruồi giấm Drosophila melanogaster Chưa nghiên cứu được tuổi thọ của trưởng thành nhện Pardosa sp. 3 Chương 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1. Một số kết quả nghiên cứu về nhện lớn bắt mồi Pardosa trên thế giới 2.1.1. Thành phần loài của nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa Theo Boesenberg và Strand (1906) loài Pardosa pseudoannulata xuất hiện phổ biến ở vùng Đông Nam Á, theo Foelix (1982) và Jackman (1997) loài Pardosa milvina được tìm thấy ở Mỹ, loài Pardosa groenlandica được phát hiện ở Canada (Cosawic 2005a, 2005b). Trường Đại học Manitoba (Canada), ghi nhận được 19 loài Pardosa gồm Pardosa concinna (Thorell), Pardosa distincta (Blackwell), Pardosa dromaea (Thorell), Pardosa furcifera (Thorell), Pardosa fuscula (Thorell), Pardosa groenlandica (Thorell), Pardosa hyperborea (Thorell), Pardosa lapponica (Thorell), Pardosa mackenziana (Keyserling), Pardosa modica (Blackwall), Pardosa moesta (Banks), Pardosa mulaiki (Gertsch), Pardosa ontariensis (Gertsch), Pardosa podhorskii (Kulczynski), Pardosa saxatilis (Hentz), Pardosa sp., Pardosa tesquorum (Odenwall), Pardosa uintana (Gertsch) và Pardosa xerampelina (Keyserling). Ngoài ra một số loài Pardosa phổ biến còn được phát hiện ở nhiều nơi khác cũng đóng vai trò quan trọng như Pardosa agrestis (Westring, 1861), Pardosa amentata (Clerck, 1757), Pardosa glacialis (Thorell, 1872), Pardosa hortensis (Thorell, 1872), Pardosa lugubris (Walckenaer, 1802), Pardosa palustris (Linneaus, 1758), Pardosa riparia (C.L. Koch, 1833), Pardosa sphagnicola (Dahl, 1908), Pardosa suwai (Tanaka, 1985; Matsuda, 1999), Pardosa vancouveri (Emerton, 1917). 2.1.2. Một số kết quả nghiên cứu vềđặc điểm sinh học của nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa Họ nhện săn mồi Lycosidae trong đó có loài Pardosa sp. thường xuyên bắt giữ con mồi thuộc bộ cánh thẳng, bộ cánh nửa, bộ hai cánh, bộ cánh đều, bộ cánh tơ, bộ cánh vẩy, một số loài bộ cánh cứng và bộ cánh màng (Riechert và Bishop, 1990; Young và Edwards, 1990; Nyffeler et al., 1994). 4 Trên ruộng lúa khoảng 80% rầy nâu, rầy xanh đuôi đen là thức ăn của họ nhện Lycosidae. Tuy nhiên không có một con nhện NLBM nào phát triển đến tuổi trưởng thành khi chỉ ăn rầy nâu. Khi nhện cái họ Lycosidae ăn nhiều loại con mồi khác nhau thì khả năng sinh sản của chúng gia tăng một cách nhanh chóng (Suzuki và Kiritani, 1974). Ishijima et al. (2004) cho rằng mật số các loại rầy giảm trên ruộng không làm đất hơn là ruộng có làm đất truyền thống, khi đó mật độ NLBM đặc biệt có nhện Pardosa sp. tăng lên nhanh chóng trên ruộng canh tác không làm đất. Kết quả này cho thấy nhóm NLBM đóng vai trò quan trọng trong việc ngăn chặn các loại rầy. Nhện Pardosa pseudoannulata là thiên địch quan trọng của côn trùng gây hại trên đồng lúa bởi vì chúng ăn nhiều rầy nâu và rầy xanh đuôi đen hơn là nhiều loại nhện khác (Sasaba et al., 1970; Kiritani et al., 1972; Yaginuma, 1986). Kiritani et al. (1972, 1974) đưa ra bảng phân tích tuổi thọ trung bình của rầy xanh Nephotettix cincticeps (Uhler) trên ruộng lúa và kết luận NLBM Pardosa pseudoannulata là đối tượng săn mồi quan trọng nhất. Nhện Pardosa sp. là loài nhện rất nhanh nhẹn. Chúng thích ăn rầy xanh đuôi đen và rầy nâu. Mỗi ngày nhện ăn từ 515 con mồi (Boessenberg và Strand, 1906). Nhện Pardosa milvina là loài bắt mồi ăn thịt, chúng săn bắt con mồi với một tốc độ nhanh và mạnh mẽ. Các loại vật mồi của chúng gồm có rầy nâu, châu chấu, trứng các loài sâu hại…. Mỗi ngày Pardosa milvina ăn khoảng 3,5 mg sâu hại, tương đương 12% trọng lượng cơ thể của chúng (Foelix, 1982; PrestonMafham,1996). Nhện hạn chế được mật số sâu hại bởi vì chúng thường bắt giữ và tiêu diệt hơn là tiêu thụ con mồi. Riechert và Lockley (1984) nhận định nhện có thể giết chết con mồi gấp 50 lần so với sức tiêu thụ của nó. Lang et al. (1999) tìm ra trong những vụ màu, nhện làm suy yếu mật độ của côn trùng gây hại như rầy xanh đuôi đen (Cicadellidae), bọ trĩ (Thysanoptera) và rệp (Aphididae) Marc et al. (1999) nhận thấy có 3 loài nhện phong phú trên vụ lúa mì vào mùa đông là Pardosa agrestis (Westring) (Lycopsidae Araneae) và hai loại NLBM họ Linyphiidae có thể làm giảm mật độ của rệp (Aphididae) từ 34% đến 58% trong điều kiện thí nghiệm. Vòng đời của nhện Pardosa groenlandica khoảng 23 tháng (Dondate, 1999). Mỗi năm Pardosa sp. đẻ hai hoặc ba thế hệ (Kawahara et al., 1974). 5 Nhện Pardosa sp. là những kẻ săn mồi quan trọng trên đồng ruộng và cây trồng cạn, nhện cái đẻ khoảng 100 trứng trong một túi trứng, khi nở con cái mang nhện con ở đằng sau của chúng (Shepard, Carner, Barrion, Ooi và Berg, 1999). Theo Boesenberg và Strand (1906), nhện Pardosa sp. săn mồi trên mặt đất. Trên cánh đồng nhện cái thường dễ nhận biết bởi vì chúng thường di chuyển với một cái túi trứng hình cầu được gắn ở đằng sau chúng. Những nhện con mới nở của Pardosa sp. được nhện mẹ đeo ở phần bụng. Nhện con không ăn trong giai đoạn này. Nếu chúng bị rơi xuống, chúng vẫn có thể treo lơ lửng với nhện mẹ bằng một sợi dây mịn, và có thể dễ dàng trở về với nhện mẹ qua đường chân và xúc biện. Nhện con chỉ phân tán sau khi đã trải qua một lần lột xác Nhện Pardosa sp. được tìm thấy ở vùng đất ẩm hay những ruộng lúa khô. 2.1.3. Một số kết quả nghiên cứu về ảnh hưởng của nông dược đến nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa Yardrim Edward (1998) nhận định đối với nhóm NLBM thì ảnh hưởng của thuốc trừ sâu lớn hơn thuốc trừ cỏ và thuốc trừ nấm. Những ruộng mà phun thuốc trừ sâu thường xuyên thì mật độ nhện rất thấp (Bogya và Markó, 1999; Feber et al., 1998; HuuselaVeistola, 1998; Yardim và Edwards, 1998; Holland et al., 2000; Amalin et al., 2001). Nhìn chung, đối với thuốc hóa học thì nhện dễ bị tổn thương hơn nhiều loài sâu hại khác, như thuốc tổng hợp gốc cúc pyrethroids như cypermethrin và deltamethrin; thuốc gốc lân organophosphates như dimethoate và malathion và thuốc gốc cacbamat (carbamate) như carbaryl. Việc thuốc hóa học làm giảm mật số nhện có thể là kết quả của sự bùng phát nhiều loài sâu hại (Brown et al., 1983; Birnie et al., 1998; HuuselaVeistola, 1998; Yardim và Edwards, 1998; Marc et al., 1999; Holland et al., 2000; Tanaka et al., 2000). Ở những vùng nhiệt đới, để bảo vệ các loài thiên địch thì phải tránh phun thuốc hóa học quá sớm, việc này giúp ngăn ngừa được nhiều thứ dịch hại chẳng hạn như dịch rầy nâu và rầy xanh đuôi đen (Way và Heong, 1994; Settle et al., 1996). Theo Wisniewska và Prokopy (1997) nếu thuốc hóa học chỉ được sử dụng trước những vụ trồng thì mật độ nhện sẽ được gia tăng. Nhện có khả năng thay đổi theo chiều hướng thích nghi để chiếm lại lãnh thổ của chúng nếu thuốc trừ sâu không còn tác dụng nữa. Sự giới hạn về không gian của thuốc hóa học cũng dẫn đến kết quả số 6 lượng nhện cao hơn, bởi chúng có thể đi ra khỏi khu vực có xử lý thuốc và trở về khi thuốc hóa học đã xua tan (Riechert và Lockley, 1984; Balanca và de Visscher, 1997). Một vài yếu tố ảnh hưởng đến hiệu quả của thuốc hóa học đối với nhện là dung môi, loại đất, độ ẩm, phần trăm vật chất hữu cơ, nhiệt độ, và thời gian sau khi phun thuốc (Marc et al., 1999). Ishijima et al. (2004) trong cả mùa vụ không sử dụng thuốc trừ sâu hoặc thuốc trừ nấm, NLBM Pardosa pseudoannulata và Pirata subpiraticus là những đối tượng săn mồi chủ yếu của rầy xanh và rầy nâu. 2.2. Một số kết quả nghiên cứu về nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa trong nước 2.2.1. Thành phần loài của nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa Theo Nguyễn Văn Huỳnh (2002), nhóm NLBM Pardosa là loài thiên địch quan trọng trong công tác phòng trừ sâu hại. Một số loài Pardosa được phát hiện và mô tả như sau Loài Pardosa pseudoannulata (Boesenberg và Trand) là loài nhện rất phổ biến và là loài thiên địch quan trọng trên ruộng lúa. Loài Pardosa sumatrana (Thorell) có kích thước trung bình dài 6,9 mm, phần đầu dài 3,4 mm và phần bụng dài 3,5 mm. Thân có màu vàng, kích thước của đầu lớn hơn kích thước ngang của bụng. Trên đầungực có một băng Y lợt màu nho và hai sọc màu lợt ở hai bên. Hai cặp mắt trước hẹp hơn hai cặp mắt sau. Trên bụng có các vân màu nâu đứt quãng. Loài Pardosa iriensi (Barrion và Litsinger) có kích thước trung bình dài 6,9 mm, phần đầu dài 3,4 mm và phần bụng dài 3,5 mm. Đầungực màu nâu, kích thước ngang phần đầu nhỏ hơn phần bụng. Trên đầu có hai sọc sậm màu chạy dọc bên từ trước ra sau. Phần bụng có một đốm màu đậm và có nhiều vân đứt quãng. Loài Pardosa mackenzici (Gravely) có kích thước trung bình dài 5,5 mm, đầu ngực có kích thước là 2,9 mm và phần bụng có kích thước 2,6 mm. Phần đầu có màu vàng, phần bụng có màu nâu với những đốm trắng không đồng nhất. Trên đầu có một sọc đen ở giữa và có nhiều vân đen. Trên lưng có một sọc đen ngắn từ phần tiếp giáp giữa đầu và lưng đến nửa lưng. Loài Pardosa santamaria (Barrion và Litsinger), có kích thước trung bình, chiều dài của con cái là 4,96 mm, phần đầu dài khoảng 2,8 mm, phần bụng dài khoảng 7 2,2 mm. Phần đầu có màu nâu đỏ và có một sọc đen ở giữa, xung quanh là những vân màu vàng. Phần bụng màu vàng nâu, trên lưng có những đốm trắng đối xứng nhau qua hai bên lưng, trong đốm trắng đó có chấm nhỏ màu nâu. 2.2.2. Một số nghiên cứu về đặc điểm sinh học của nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa Theo Phạm Văn Lầm (2002), quá trình phát triển của nhện lớn bắt mồi trải qua 3 pha gồm trứng, nhện non và nhện trưởng thành. Số tuổi của nhện non thay đổi tùy theo từng loài, ngay trong một loài cũng có sự thay đổi tuổi. Nhện non của Pardosa pseudoannulata có 7 8 tuổi (đa số 8 tuổi). Thời gian phát dục pha trứng của Pardosa pseudoannulata là 11,8 16,6 ngày, nhện non là 76,2 155,8 ngày, nhện trưởng thành là 122,9 219,0 ngày (tùy điều kiện nhiệt độ). Trong 24 giờ, một cá thể trưởng thành cái của loài nhện sói vân đinh ba Pardosa pseudoannulata trong ngày thí nghiệm thứ nhất, thứ 2 và 3 tiêu diệt được trung bình 27,5; 17,5 và 12,4 rầy non tuổi 5 của rầy nâu. Nhện sói vân đinh ba Pardosa pseudoannulata là loài bắt mồi có ưu thế trong số các loài nhện lớn bắt mồi của rầy nâu và rầy lưng trắng. Đây là loài bắt mồi quan trọng và hiệu quả trong khống chế số lượng các loài rầy hại lúa ở nhiều nước Đông Nam Á. Kết quả từ các thí nghiệm trong phòng tại Viện BVTV cho thấy khả năng ăn rầy nâu của nhện sói vân đinh ba Pardosa pseudoannulata khá cao. Một nhện sói vân đinh ba Pardosa pseudoannulata ở giai đoạn nhện non tuổi 3 sau 24 giờ có khả năng tiêu diệt được 3,2 5,5 rầy non tuổi 4 của rầy nâu. Khả năng ăn rầy nâu của chúng tăng theo tuổi phát dục. Nhện non tuổi 8 của loài nhện sói vân đinh ba trong 24 giờ đã ăn trung bình được 6,5 21,0 rầy non tuổi 4 của rầy nâu. Đặc biệt một trưởng thành cái loài nhện sói vân đinh ba Pardosa pseudoannulata không mang bọc trứng có sức ăn mồi rất lớn. Trong 24 giờ, trung bình nó ăn được 17,3 34,1 rầy non tuổi 5 của rầy nâu (Phạm Văn Lầm, 2006). Nghiên cứu về khả năng ăn mồi của Pardosa pseudoannulata, Bùi Xuân Phương (2001) cho biết khả năng ăn mồi của các nhóm nhện đối với bọ xít non tuổi một của bọ xít gai Cletus punctiger Dallas là cao nhất. Tuổi bọ xít non càng lớn, số lượng con mồi bị nhện tiêu diệt trong một ngày càng giảm. Nhện đực có sức ăn kém hơn, một ngày một nhện đực tiêu diệt được trung bình 7,1 ± 2,3 đối với bọ xít non tuổi 1 hoặc là 1,2 ± 0,2 bọ xít trưởng thành. Nhện cái không mang trứng có sức ăn lớn hơn. Trong một ngày một nhện cái không mang trứng của Pardosa pseudoannulata có thể 8 ăn trung bình 15,7 ± 3,9 bọ xít tuổi 1 hoặc 2,0 ± 0,4 bọ xít trưởng thành. Thí nghiệm trong phòng cho thấy bọ xít đen Scotinophara lurida Burm và bọ xít dài cũng là con mồi của Pardosa pseudoannulata. Nhện sói vân đinh ba Pardosa pseudoannula có phổ thức ăn rộng, theo Phạm Đình Sắc và Khuất Đăng Long (2001), Pardosa pseudoannulata ăn những loại mồi như bọ nhảy sọc vỏ lạc Phyllotrela striolata, rầy xanh Empoasca flavescens và sâu cuốn lá đậu tương Lamprosema indicata. Theo Phạm Văn Lầm (2002), các con mồi phổ biến của Pardosa pseudoannulata là rầy nâu Nilaparvata lugen, rầy lưng trắng Sogatella furcifera, rầy xanh đuôi đen hai chấm nhỏ Nephotettix virescens, rầy xanh đuôi đen hai chấm lớn Nephotettix nigropictus, rầy điện quang Recilia dorsalis, rầy trắng lớn Cofana specta, sâu cuốn lá nhỏ Cnaphalocrocis medinalis, sâu cuốn lá lớn đầu vệt đen Parnara guttata, sâu keo Spodoptera mauritia, sâu cắn gié Mythimna separata, sâu đo xanh Naranga aenescens, sâu đục thân bướm hai chấm Scirpophaga incestulas… 2.2.3. Ảnh hưởng của thuốc bảo vệ thực vật đến nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa Theo Phạm Văn Lầm (2002) thuốc Admire, Ortus và Validacin, sau xử lý 17 ngày, gây chết cho nhện Pardosa pseudoannulata với tỷ lệ thấp (13,340,0%). Các thuốc Regent, Wofatox và Trebon có mức độc nhẹ (cấp 2) đối với nhện Pardosa pseudoannulata, thuốc Bassa và Padan là độc trung bình (cấp 3) đối với nhện Pardosa pseudoannulata. Cũng theo tác giả này, với liều lượng khuyến cáo dùng trong sản xuất, hầu hết các thuốc bảo vệ thực vật đều ảnh hưởng tới sự tích lũy quần thể của nhện lớn bắt mồi ăn thịt. Thuốc Monitor và Bassa độc cao (cấp 4) đối với nhóm nhện lớn bắt mồi thuộc họ Lycosidae, Tetragnathidae và Araneidae. Thuốc Wofatox (đã bị cấm năm 1997) độc cao (cấp 4) đối với nhện lớn họ Tetragnathidae, Araneidae và độc trung bình (cấp3) đối với nhóm nhện lớn họ Lycosidae. Thuốc Basudin độc cấp 3 (trung bình) đối với nhện lớn họ Tetragnathidae, nhưng lại độc cao (cấp 4) đối với nhện lớn họ Lycosidae và Araneidae. Theo các nhà sản xuất, thuốc Trebon và Applaud ít độc với thiên địch. Nhưng kết quả thí nghiệm cho thấy thuốc Trebon độc trung bình (cấp 3) đối với nhện lớn họ Lycosidae, Tetragnathidae và độc nhẹ (cấp 2) đối với nhện họ Araneidae. Thuốc Applaud độc trung bình (cấp 3) đối với nhện lớn họ Lycosidae và 9 độc nhẹ (cấp 2) đối với nhện họ Tetragnathidae và Araneidae. Thuốc thảo mộc Rotenon độc nhẹ (cấp 2) và độc trung bình (cấp 3) đối với nhện lớn họ Lycosidae, Tetragnathidae và Araneidae. Chỉ có thuốc BT (Bacilus thurigensis) là không độc (cấp 1) đối với nhện lớn bắt mồi trên lúa. Các thuốc trừ bệnh đều có mức độc từ nhẹ đến trung bình (Phạm Văn Lầm, 2002). Theo Nguyễn Văn Huỳnh (2002) thì mật số nhện trên ruộng lúa cao hơn trên rẫy cây màu trồng cạn như là bắp và đậu xanh. Xuất hiện phổ biến nhất là các loài Pardosa sp., Tetragnatha spp, Atepina adelinae….Theo tác giả này thì nguyên nhân làm cho trên rẫy cây màu mật số nhện thấp hơn trên ruộng lúa là do nông dân sử dụng thuốc trừ sâu thường xuyên hơn ruộng lúa. Cũng theo tác giả này, hầu hết các loại thuốc trừ sâu phổ biến hiện nay đều có độc tính cao đối với nhện, ngoại trừ một số ít loại thuốc không có tác dụng lên trung khu thần kinh của nhện. Vì vậy ông cho rằng phải thật cẩn thận khi quyết định dùng thuốc trừ sâu để tránh ảnh hưởng bất lợi đến hoạt động phong phú của nhện thiên địch. 10 Chương 3 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM 3.1. Thời gian và địa điểm thí nghiệm Đề tài được thực hiện từ 042007 đến tháng 092007 tại Bộ môn Bảo vệ Thực vật trường Đại Học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh. 3.2. Nội dung thí nghiệm Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của NLBM Pardosa sp. Tìm hiểu ảnh hưởng của một số thuốc nông dược đến NLBM Pardosa sp. 3.3. Vật liệu và dụng cụ thí nghiệm Vật liệu thí nghiệm Dung dịch ngâm mẫu: cồn 70o Vật liệu nhân nuôi ruồi giấm và sâu khoang: chuối sứ, agar, vitamin E, vỏ dứa, đậu đũa, lồng lưới, hộp nhựa. Dụng cụ thí nghiệm Dụng cụ thu mẫu: túi nilon, ống nghiệm, hộp nhựa, vợt Máy ảnh, kính hiển vi, thước đo, kéo, băng keo, cát sạch … Dụng cụ phun thuốc: tháp phun Potter Tower 3.4. Phương pháp nghiên cứu 3.4.1. Nghiên cứu đặc điểm sinh học của nhện lớn bắt mồi Pardosa sp. 3.4.1.1. Xác định phổ mồi của nhện Pardosa sp. Thí nghiệm được tiến hành với thức ăn là các loại côn trùng gây hại khác nhau được thu thập từ các ruộng trồng rau, màu tại ngoại ô Tp. Hồ Chí Minh. Nhện bị bỏ đói 24 giờ trong hộp nhựa có bông gòn ẩm. Cho vật mồi vào, quan sát cách tấn công và ăn mồi. Sau 24 giờ kiểm tra và ghi nhận phổ vật mồi của nhện. 3.4.1.2. Thí nghiệm xác định khả năng tiêu thụ ruồi giấm Drosophila melanogaster và sâu khoang Spodoptera litura của nhện Pardosa sp. Thí nghiệm được thực hiện với 15 lần lặp lại, mỗi lần lặp lại là một nhện 11 Pardosa sp. trưởng thành. Cho mỗi con nhện bắt mồi vào hộp nhựa có bông gòn ẩm, bỏ đói một ngày trước khi cho vật mồi vào. Chuẩn bị đầy đủ lượng sâu khoang và ruồi giấm. Cho vật mồi vào mỗi hộp với một lượng thừa (30 con ruồi giấm hoặc 10 con sâu khoang). Sau 24 giờ đếm số vật mồi còn dư và thay thức ăn mới. Tiến hành theo dõi liên tục trong 3 ngày để tính lượng mồi tiêu thụ ngày của nhện Pardosa sp. 3.4.1.3. Thí nghiệm xác định thời gian phát triển các pha cơ thể và vòng đời của nhện Pardosa sp. Thí nghiệm được thực hiện theo phương pháp nhân nuôi sinh học cá thể nhện Pardosa sp.Tiến hành thu bắt nhện Pardosa sp. trưởng thành ngoài các ruộng rau màu. Tiếp tục nuôi đến khi đẻ trứng để tiến hành làm thí nghiệm Chọn 30 nhện con nở cùng ngày nhốt riêng từng cá thể vào hủ nhựa có bông gòn ẩm cung cấp nước cho nhện, hằng ngày cho ăn thức ăn là ruồi giấm, ghi nhận thời gian và số lần lột xác của nhện con để tính thời gian phát triển từng tuổi và vòng đời của nhện Pardosa sp. Số tuổi nhện = số lần lột xác +1. 3.4.2. Thí nghiệm ảnh hưởng của một số nông dược đối với nhện lớn bắt mồi Pardosa sp. 3.4.2.1. Xác định ảnh hưởng của nông dược đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp. a) Vật liệu và dụng cụ thí nghiệm: + Dụng cụ thí nghiệm Lồng lưới nhỏ (30cm x 30cm x30cm), hộp nhựa trong loại 5 lít. Lưới, kéo, pen, giấy thấm, bút lông, đĩa petri, kim gút, chai lọ lưu mẫu, bình phun nước cầm tay. Bóng đèn điện quang (40w), cọ quét, bình phun nước. Chậu nhựa, cát ẩm vô trùng, chuối sứ, agar, vitamin E, ruồi giấm. Giấy mica trong loại dày (khổ 0,8m) Lưới inox A60 ( 23 ôcm2) Tháp phun thuốc Potter Tower (Hình 3.1) 12 Hình 3.1 Tháp phun thuốc Potter Tower + Vật liệu thí nghiệm Đường cát trắng, dung dịch ngâm mẫu cồn 700. Thuốc thí nghiệm (bảng 3.1 và phụ lục 5) Bảng 3.1 Các thuốc thí nghiệm và liều lượng sử dụng STT Tên thương mại Hoạt chất và liều lượng Liều lượng sử dụng 1 Daconil 500SC Chlorothanil (500gl) 15ml8l 2 Aliette 800WG Fosetyl aluminium (800gkg) 20g8l 3 Onecide 15EC Fluazifop – butyl (150gl) 25ml8l4 4 Visimaz 800BTN Simazine (80%) 40g8l 5 Vertimec 1,8EC Abamectin (18gl) 10ml8l 6 Confidor 100SL Imidacloprid (100gl) 7ml8l 7 Success 25SC Spinosad (27.8gl) 25ml8l 8 Dipel 6,4 DF Bacillus thurigiensis 10g8l (32 tỉ IUkg bào tử tinh thể độc tố vi khuẩn) 9 Regent 800WG Fipronil (800gkg) 0,8g8l 10 Secure 10EC Chlorfenapyr (100gl) 10 ml 8l b) Phương pháp thí nghiệm  Chuẩn bị thức ăn cho nhện Pardosa sp. Để đảm bảo đầy đủ thức ăn cho việc nghiên cứu nhện Pardosa sp. tiến hành nhân nuôi ruồi giấm Drosophilla melanogaster Môi trường nhân nuôi ruồi giấm gồm những thành phần sau 13 1. Nước: 1 lít. 2. Agar: 3 muỗng cà phê. 3. Chuối sứ: 8 trái to. 4. Pepton: 500 mg. 5. Vitamin E: 78 giọt được bổ sung định kì sau 3 lần nấu môi trường để cung cấp thêm thức ăn cho ruồi giấm. 6. 1 muỗng đường cát. Cho tất cả Agar, Pepton và đường cát vào ngâm trong 1lít nước khoảng 5 phút. Sau đó cho lên bếp đun sôi, cho chuối đã được bóp nhuyễn vào khuấy đều. Khi hỗn hợp chín thì nhấc ra để nguội, cho vitamin E vào trộn đều, rồi cho hỗn hợp vào các hủ nhựa trong loại 1 lít và đặt vào lồng để nhân nuôi ruồi giấm.  Phương pháp thực hiện Thí nghiệm được thực hiện theo phương pháp của Hassan (1985) ở phần 5.1.9 gồm các bước sau Chuẩn bị dụng cụ thí nghiệm + Dụng cụ thí nghiệm: các hộp nhốt nhện ăn mồi có kích thước 5 x 5 x 5 cm bằng giấy mica trong, với nắp hộp được làm bằng lưới inox A60 (23ôcm2) để cho hộp được thông thoáng và dễ dàng thao tác trong việc phun thuốc thí nghiệm. Ở mặt bên của hộp cắt một cửa số (1 cm) để cho thức ăn vào. Phần đáy của hộp có một lớp cát sạch dày 2 cm. Hộp phải được làm thật kín để ngăn không cho nhện thoát ra ngoài Hình 3.2 Hộp thử thuốc thí nghiệm đối với nhện Pardosa sp. Nhện Pardosa sp. được thu thập từ các ruộng rau thuộc ngoại ô Tp. Hồ Chí Minh mang về phòng thí nghiệm tiếp tục nuôi bằng thức ăn là ruồi giấm để có nhện trưởng thành thuần làm thí nghiệm. 14 Thí nghiệm được bố trí theo kiểu đầy đủ hoàn toàn ngẫu nhiên đơn yếu tố, với 10 nghiệm thức là 10 loại thuốc thí nghiệm và nghiệm thức đối chứng được phun bằng nước cất, mỗi nghiệm thức gồm 30 cá thể. Tiến hành cho nhện Pardosa sp. vào trong mỗi hộp ở trên Phun từng loại thuốc với liều lượng là 6ml vào các hộp đã có sẵn NLBM và hằng ngày cung cấp thức ăn là ruồi giấm.  Chỉ tiêu theo dõi Ghi nhận lượng nhện sống và chết ở mỗi nghiệm thức thí nghiệm tại các thời điểm 1, 3 và 6 ngày sau khi xứ lí thuốc để tính tỷ lệ nhện bắt mồi chết và hiệu lực của các loại thuốc thí nghiệm Tỷ lệ chết được tính theo công thức Tỷ lệ chết (%) = tổng số nhện chết tổng số nhện theo dõi x 100 Hiệu lực của thuốc được hiệu đính bằng công thức Abbott Hiệu lực thuốc (%) = (C – T) C x 100 Trong đó C: % NLBM sống ở ô đối chứng sau xử lý T: % NLBM sống ở ô thí nghiệm sau xử lý 3.4.2.2. Số trứng nở của nhện Pardosa sp. sau khi bị nhiễm thuốc thí nghiệm Sáu ngày sau khi xử lý thuốc, chọn nhện còn sống cho ghép đôi giao phối trong cùng nghiệm thức. Thí nghiệm ảnh hưởng của nông dược đến số trứng nở của nhện Pardosa sp. được bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên, 4 lần lặp lại (mỗi lần lặp lại là 1 cặp Pardosa sp. đực và cái). 8 nghiệm thức có khả năng gây chết ít nhất đối với nhện Pardosa sp. được chọn làm thí nghiệm là (1) Aliette 800WG, (2) Dipel 6,4DF, (3) Onecide 15EC, (4) Daconil 500SC, (5) Visimaz 800BTN, (6) Confidor 100SL, (7) Success 25SC và (8) Đối chứng (nước cất). Hằng ngày cho ăn ruồi giấm, phun thêm nước, kết thúc khi trứng nở. Chỉ tiêu theo dõi Ghi nhận số trứng nởbọc trứngcon cái trên từng loại thuốc. 3.5. Xử lý số liệu Các số liệu thu được từ những thí nghiệm trên được xử lý và phân tích thống kê trên phần mềm MSTATC và EXCEL. 15 Chương 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1. Thí nghiệm nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của nhện lớn bắt mồi Pardosa sp. 4.1.1. Phổ mồi của nhện Pardosa sp. (Lycosidae – Araneae) Bảng 4.1 Phổ mồi của nhện Pardosa sp. (Lycosidae – Araneae) STT Sâu hại Tên khoa học (Họ Bộ) Pha vật mồi bị ăn 1 Sâu xanh hai sọc trắng Diaphannica indica S. (Pyralidae Lepidoptera) Tuổi 1, tuổi 2 2 Sâu khoang Spodoptera litura F. (Noctuidae Lepidoptera) Tuổi 1, tuổi 2 3 Sâu đo xanh Trichoplusia sp. (Noctuidae Lepidoptera) Tuổi 1, tuổi 2 4 Sâu xanh da láng Spodoptera escigua Hb. (Noctuidae Lepidoptera) Tuổi 1 5 Rầy xanh Empoasca sp. (Cicadellidae Homoptera) Tất cả các tuổi 6 Sâu gạo Corcyra cephalonica ( Pyralidae Lepidoptera) Sâu non 7 Bọ trĩ Thrips sp. (Thripidae Thysanoptera) Trưởng thành Qua bảng 4.1 cho thấy nhện Pardosa sp. có thể ăn được nhiều loại vật mồi khác nhau. Nhện ăn tất cả các tuổi của rầy xanh Empoasca sp., tuy nhiên nhện Pardosa sp. chỉ ăn được sâu tuổi nhỏ vì phù hợp với kích thước của chúng. Qua thí nghiệm này cùng với những nghiên cứu về phổ thức ăn của nhện Pardosa sp. với những loại vật mồi như rầy nâu Nilaparvata lugen, rầy lưng trắng Sogatella furcifera, rầy xanh đuôi đen hai chấm nhỏ Nephotettix virescens, rầy xanh đuôi đen hai chấm lớn Nephotettix nigropictus, rầy điện quang Recilia dorsalis, rầy trắng lớn Cofana specta, bọ nhảy sọc vỏ lạc Phyllotrela striolata, rầy xanh Empoasca flavescens…của những tác giả Phạm Văn Lầm, Khuất Đăng Long, cho thấy nhện Pardosa sp. có phổ thức ăn khá rộng, là thiên địch quan trọng trong công tác phòng trừ sâu bệnh hại. 16 Hình 4.1 Nhện Pardosa sp. ăn sâu xanh hai Hình 4.2 Nhện Pardosa sp. ăn ruồi giấm sọc trắng D. indica S. D. melanogaster 4.1.2. Khả năng tiêu thụ ruồi giấm Drosophila melanogaster và sâu khoang Spodoptera litura của nhện Pardosa sp. Sức tiêu thụ ruồi giấm Drosophila melanogaster và sâu khoang Spodoptera litura của nhện Pardosa sp. được thể hiện qua bảng 4.2 Bảng 4.2 Khả năng tiêu thụ ruồi giấm Drosophila melanogaster và sâu khoang Spodoptera litura của nhện Pardosa sp. Đơn vị: conngày Loại vật mồi Sức tiêu thụ Sâu khoang Spodoptera litura Ruồi giấm Drosophila melanogaster Ít nhất 1,00 10,30 Nhiều nhất 4,70 21,70 TB ± SD 2,02 ± 1,06 15,56 ± 3,93 Ghi chú: TB: trung bình, SD: độ lệch chuẩn Trong 3 ngày thí nghiệm có thể nhận thấy Nhện Pardosa sp. một ngày có thể ăn trung bình là 2,02 con sâu khoang hoặc 15,56 ruồi giấm trưởng thành. Khả năng ăn mồi của nhện Pardosa sp. như vậy là hợp lý bởi vì chúng là loài săn mồi tự do, nhanh nhẹn và có mắt rất linh động, kiểu săn mồi của nhện Pardosa sp. là theo dõi, quan sát và di chuyển để bắt mồi, vì vậy mà nhện Pardosa sp. thích bắt những con mồi có thể bay nhảy hơn. 17 Hình 4.3 và 4.4 Nhện Pardosa sp. đang ăn vật mồi a) Ăn ruồi giấm Drosophila melanogaster b) Ăn sâu khoang Spodoptera litura 4.1.3. Thời gian phát triển các pha cơ thể và vòng đời của nhện Pardosa sp. Bảng 4.3 Thời gian phát triển các pha cơ thể và vòng đời của nhện Pardosa sp. STT Các pha cơ thể Thời gian phát dục của nhện Pardosa sp. (ngày) 1 Trứng 12,5 ± 1,78 2 Tuổi 1 10,9 ± 2,56 3 Tuổi 2 11,47 ± 3,97 4 Tuổi 3 7,93 ± 3,13 5 Tuổi 4 6,53 ± 2,57 6 Tuổi 5 8,07 ± 2,20 7 Tuổi 6 8,63 ± 2,58 8 Tuổi 7 11,63 ± 2,87 9 TTDT 18,67 ± 10,02 10 Vòng đời 96,33 ± 3,61 Ghi chú: nhiệt độ 27 ± 2oC, ẩm độ 65 ± 5%, STT: số thứ tự, TTDT: trưởng thành đẻ trứng. Qua bảng 4.3 cho ta thấy vòng đời của nhện Pardosa sp. khi nuôi trong điều kiện thí nghiệm đạt trung bình là 96,33 ngày. Giai đoạn nhện non có 8 tuổi với 7 lần lột xác trong đó thì tuổi 7 có thời gian phát dục dài nhất, trung bình 11,63 ngày. a) b) 18  Tuổi 1   Tuổi 2 TTDT   Tuổi 3 Tuổi 7   Tuổi 4  Tuổi 6 Tuổi 5 Hình 4.5 Vòng đời của nhện Pardosa sp. (Lycosidae – Araneae) 19 Thời gian phát dục của nhện non tuổi 1 và tuổi 2 khá dài trung bình lần lượt là 10,9 và 11,47 ngày, thời kỳ này do cơ thể nhện còn nhỏ, khả năng bắt giữ con mồi kém nên thời gian phát dục dài. Khi nhện đạt những tuổi lớn hơn, đồng nghĩa với kích thước cơ thể cũng lớn lên thì khả năng bắt giữ con mồi làm thức ăn tăng nên thời gian phát dục cũng nhanh hơn. 4.2. Ảnh hưởng của một số loại nông dược đối với nhện lớn bắt mồi Pardosa sp. 4.2.1. Ảnh hưởng của một số loại nông dược đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp. Ảnh hưởng của một số loại nông dược đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp. được thể hiện qua bảng 4.4 Bảng 4.4 Ảnh hưởng của một số loại nông dược đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp. Nghiệm thức Tên thương mại % nhện Pardosa sp. chết (%) PLCD 1 NSP 3 NSP 6 NSP Thuốc trừ bệnh Fosetyl aluminium Aliette 800WG 0,00 b 0,00 d 0,00 c 1 Chlorothalonil Daconil 500SC 0,00 b 0,00 d 0,00 c 1 Thuốc trừ cỏ Fluazifop butyl Onecide 15EC 6,67 ab 6,67 bcd 6,67 bc 1 Simazine Visimaz 800BTN 0,00 b 0,00 d 0,00 c 1 Thuốc trừ sâu Fipronil Regent 800WG 10,00 ab 33,33 b 70,00 a 2 Imidacloprid Confidor 100SL 6,67 ab 16,67 bcd 16,67 bc 1 Chlorfenapyr Secure 10EC 43,33 a 76,67 a 86,67 a 3 Abamectin Vertimec 1,8EC 6,67 ab 20,00 bc 26,67 b 1 Spinosad Success 25SC 13,33 ab 13,33 bcd 13,33 bc 1 Bacillus thuringiensis Dipel 6,4DF 3,33 b 3,33 cd 3,33 bc 1 Đối chứng Nước cất 0,00 b 0,00 d 0,00 c Ghi chú: ToC: 27±2oC,RH: 65±5%, NSP: ngày sau phun, PLCD: phân loại cấp độc. Số liệu đã được chuyển đổi sang acrsin P12 trước khi phân tích thống kê. Trong cùng một cột, các số liệu có chung mẫu kí tự thì khác biệt không có ý nghĩa ở mức độ prob = 0,01. Cấp độc 1: thuốc không độc (tỷ lệ nhện chết < 50%), cấp độc 2: thuốc ít độc (tỷ lệ nhện chết 50 – 79%), cấp độc 3: thuốc tương đối độc (tỷ lệ nhện chết 80 – 99%), cấp độc 4: thuốc độc (tỷ lệ nhện chết > 99%). Qua bảng 4.4 ta có thể thấy qua 6 ngày sau phun thuốc phần lớn nhóm thuốc trừ sâu đều ảnh hưởng đến NLBM Pardosa sp. từ mức không độc (cấp 1) đến tương đối độc (cấp 3), nhóm thuốc trừ cỏ ảnh hưởng rất ít ở mức không độc (cấp 1) và nhóm 20 thuốc trừ bệnh thì không ảnh hưởng (cấp 1). Để đánh giá cụ thể hơn mức độ ảnh hưởng của từng nhóm thuốc đối với NLBM Pardosa sp.. Tiến hành so sánh tỷ lệ chết của từng nhóm thuốc thí nghiệm so với đối chứng không phun thuốc ở các thời điểm 1, 3 và 6 ngày sau khi phun thuốc. Kết quả cho thấy  Với 2 loại thuốc trừ bệnh Qua bảng 4.4 cho thấy kết quả sau 6 ngày xử lý thuốc thì cả hai loại thuốc trừ bệnh Daconil 500SC và Aliette 800WG đều không gây chết đối với nhện Pardosa sp.. Với tỷ lệ chết của thuốc đối với nhện Pardosa sp. ở 6 NSP là 0%. Tuy cả hai loại thuốc trừ bệnh đều không gây chết đối với nhện Pardosa sp. nhưng nông dân nên sử dụng Aliette 800WG để trừ bệnh bởi vì thuốc Aliette 800WG thuộc nhóm fosetyl aluminium, mau phân hủy trong cơ thể người và môi trường. Trái lại thuốc Daconil 500SC thuộc nhóm chlorothalonil, nhóm này tuy có độc tính thấp nhưng tồn lưu trong cơ thể người, động vật, môi trường sống và gây độc mãn tính.  Với 2 loại thuốc trừ cỏ So sánh tỷ lệ chết của 2 loại thuốc trừ cỏ so với đối chứng ở 1, 3, và 6 ngày sau khi phun thuốc đã thu được những kết quả như sau Bảng 4.5 Ảnh hưởng của thuốc trừ cỏ đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp. Nghiệm thức % nhện Pardosa sp. chết so với đối chứng (%) 1 NSP 3 NSP 6 NSP Onecide 15EC 6,67 6,67 6,67 Visimaz 800BTN 0,00 0,00 0,00 Ghi chú: NSP: ngày sau phun Qua bảng 4.5 cho thấy trong 2 loại thuốc trừ cỏ dùng trong thí nghiệm chỉ có Onecide 15EC là gây chết đối với nhện Pardosa sp., nhưng với tỷ lệ rất thấp là 6,67% ở 6 NSP. Có thể thuốc Onecide 15EC có ảnh hưởng hơn Visimaz 800BTN bởi vì Onecide 15EC có độc tính cao hơn, LD50 qua miệng là 1490 – 3328 mgkg, trong khi LD50 qua miệng của thuốc Visimaz 800BTN phải hơn 5000 mgkg.  Với 6 loại thuốc trừ sâu Trong các nhóm thuốc thí nghiệm thì nhóm thuốc trừ sâu gây ảnh hưởng đến nhện Pardosa sp. rõ ràng nhất. Kết quả được thể hiện ở bảng 4.6 21 Bảng 4.6 Ảnh hưởng của thuốc trừ sâu đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp. Nghiệm thức % nhện Pardosa sp. chết so với đối chứng (%) 1 NSP 3 NSP 6 NSP Vertimec 1,8EC 6,67 20,00 26,67 Confidor 100SL 6,67 16,67 16,67 Dipel 6,4 DF 3,33 3,33 3,33 Success 25SC 13,33 13,33 13,33 Secure 10EC 43,33 76,67 86,67 Regent 800WG 10,00 33,33 70,00 Ghi chú: NSP: ngày sau phun Qua bảng 4.6 cho thấy ở 1 ngày sau khi phun thuốc thì hầu hết các thuốc trừ sâu đều gây gây chết đối với nhện Pardosa sp.. Loại thuốc gây tác động mạnh nhất là Secure 10EC với tỷ lệ chết 43,33% rất khác biệt so với đối chứng và các nghiệm thức còn lại. Ở 6 ngày sau khi phun thuốc nhận thấy có hai loại thuốc tác động mạnh là Secure 10EC và Regent 800WG với tỷ lệ chết của hai thuốc lần lượt là 86,67% và 70%. Hai loại thuốc này rất khác biệt so với đối chứng và các thuốc còn lại. Trong nhóm thuốc trừ sâu thì Dipel 6,4DF là gây chết nhện bắt mồi thấp nhất với tỷ lệ chết 3,33%. Thuốc Regent 800WG ở mức cấp độc 2, với tỷ lệ chết cao hơn 70% so với đối chứng ở sáu ngày sau phun thuốc. Thuốc có tác động mạnh bởi vì thuốc có LD50 rất thấp, chỉ 77 – 95 mgkg, là loại thuốc có LD50 thấp nhất trong các loại thuốc thí nghiệm, cách tác động của thuốc là tiếp xúc, vị độc và nội hấp. Kết quả này phù hợp với kết quả nghiên cứu của tác giả Phạm Văn Lầm . Tác giả này cho rằng thuốc Regent có mức độc nhẹ (cấp 2) đối với nhện Pardosa pseudoannulata So với Regent 800WG, Secure 10EC có LD50 cao hơn và cách tác động của thuốc chỉ là tiếp xúc và vị độc nhưng Secure 10EC là loại thuốc có mùi rất mạnh mà nhện Pardosa sp. là loài rất mẫn cảm với mùi, do đó tác động của thuốc đã thể hiện rất rõ, chỉ sau khi phun thuốc 1 ngày thì tỉ lệ chết của NLBM đã đạt 43,33% so với đối chứng, và sau 6 ngày đạt 86,67% so với đối chứng. Trong thí nghiệm Secure 10EC là thuốc ảnh hưởng mạnh nhất đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp. có mức độc tương đối (cấp 3). Riêng Vertimec 1,8EC tuy ở 6 ngày sau phun thuốc tỷ lệ chết đối với nhện Pardosa 22 sp. chỉ 26,67% so với đối chứng, nhưng thuốc Vertimec 1,8EC tác động làm cho nhện Pardosa sp. hạn chế hoặc không di chuyển được. Vì vậy cũng cần cẩn thận khi sử dụng. Loại thuốc tác động yếu nhất là Dipel 6,4DF, thuốc không độc (cấp 1) đối với nhện Pardosa sp.. Sau khi phun 6 ngày, Dipel 6,4DF gây chết 3,33% so với đối chứng vì đây là loại thuốc trừ sâu vi sinh nên có ảnh hưởng thấp nhất đối với nhện Pardosa sp.. Kết quả này là phù hợp với kết quả nghiên cứu của tác giả Phạm Văn Lầm. Tác giả này cho rằng thuốc BT (Bacilus thurigensis) là không độc (cấp 1) đối với nhện lớn bắt mồi trên lúa. Do đó mà trong quá trình canh tác nông dân nên sử dụng thuốc Dipel 6,4DF để phòng trừ sâu non thuộc bộ cánh vẩy nhằm giảm đến mức thấp nhất ảnh hưởng của việc sử dụng thuốc hóa học đến quần thể thiên địch. Đồng thời hạn chế dùng các loại thuốc có độc tính mạnh như Secure 10EC và Regent 800WG. Qua thí nghiệm nhận thấy đa số các loại thuốc nông dược dùng trong thí nghiệm đều gây chết đối với nhện Pardosa sp. Vì vậy trong quá trình canh tác nông dân nên lựa chọn khi phun thuốc hóa học để phòng trừ dịch hại, sử dụng loại thuốc hóa học nào ít ảnh hưởng đến thiên địch nhất. 4.2.2. Số trứng nở của nhện Pardosa sp. sau khi bị nhiễm thuốc thí nghiệm Kết quả được trình bày qua biểu đồ 4.1 55 38 36 41 44 48 41 41 0 10 20 30 40 50 60 Success 25SC Dipel 6,4DF Visimaz 800BTN Onecide 15EC Aliette 800WG Daconil 500SC Confidor 100SL Đối Chứng Các nghiệm thức thí nghiệm Số trứng nởtrung bìnhbọc trứngcon cái Biểu đồ 4.1 Số trứng nở trung bình của nhện Pardosa sp. sau khi bị nhiễm thuốc 23 Kết quả thí nghiệm cho thấy các loại thuốc thí nghiệm đều làm giảm số trứng nở của nhện Pardosa sp. so với đối chứng. Trong các nghiệm thức thí nghiệm, thuốc Visimaz 800BTN có số trứng nở của nhện Pardosa sp. cao nhất (đạt 48 trứng) và thuốc Daconil 500SC có số trứng nở thấp nhất (đạt 36 trứng). Để tìm hiểu rõ hơn số trứng nở của nhện Pardosa sp. sau xử lý trên từng nhóm thuốc thí nghiệm. Tiến hành so sánh tỉ lệ (%) trứng nở của nhện Pardosa sp. trên từng nhóm thuốc thí nghiệm so với đối chứng (nhện Pardosa sp. không bị nhiễm thuốc thí nghiệm). Kết quả được thể hiện qua bảng 4.7, 4.8 và 4.9. Bảng 4.7 Tỉ lệ (%) trứng nở của nhện Pardosa sp. sau khi bị nhiễm thuốc trừ bệnh so với nghiệm thức đối chứng STT Nghiệm thức TLTN (%) % trứng nở giảm so với đối chứng (%) 1 Daconil 500SC 65,90 34,10 2 Aliette 800WG 74,55 25,45 3 Đối chứng 100 _ Ghi chú: STT: số thứ tự, TLTN: tỷ lệ trứng nở Kết quả ở bảng 4.7 cho thấy trong hai loại thuốc trừ bệnh, tỷ lệ trứng nở của nhện Pardosa sp. sau khi nhiễm thuốc Aliette 800WG (74,55%) cao hơn thuốc Daconil 500SC (65,90%), nhưng cả hai loại thuốc này đều có tỷ lệ trứng nở thấp hơn so với đối chứng với tỉ lệ lần lượt là 34,10% và 25,45%. Bảng 4.8 Tỷ lệ (%) trứng nở của nhện Pardosa sp. sau khi bị nhiễm thuốc trừ cỏ so với nghiệm thức đối chứng STT Nghiệm thức TLTN (%) % trứng nở giảm so với đối chứng (%) 1 Onecide 15EC 79,55 20,45 2 Visimaz 800BTN 86,82 13,18 3 Đối chứng 100 _ Ghi chú: STT: số thứ tự, TLTN: tỷ lệ trứng nở Kết quả bảng 4.8 cho thấy trong hai loại thuốc trừ cỏ, tỷ lệ trứng nở của nhện Pardosa sp. ở thuốc Visimaz 800BTN (86,82%) cao hơn thuốc Onecide 15EC (79,55). Thuốc trừ cỏ Onecide 15EC và Visimaz 800BTN đã làm giảm tỷ lệ trứng nở nhện Pardosa sp. so với đối chứng với tỉ lệ lần lượt là 13,18% và 20,45%. 24 Bảng 4.9 Tỷ lệ (%) trứng nở của nhện Pardosa sp. sau khi bị nhiễm thuốc trừ sâu so với nghiệm thức đối chứng STT Nghiệm thức TLTN (%) % trứng nở giảm so với đối chứng (%) 1 Confidor 100SL 69,09 30,91 2 Success 25SC 73,64 26,36 3 Dipel 6,4DF 73,64 26,36 4 Đối chứng 100 _ Ghi chú: STT: số thứ tự, TLTN: tỷ lệ trứng nở Kết quả ở bảng 4.9 cho thấy tỷ lệ trứng nở của nhện Pardosa sp. trên các loại thuốc trừ sâu là không có sự khác biệt, nhưng cả ba loại thuốc Confidor 100SL, Success 25SC và Dipel 6,4DF đều có tỷ lệ trứng nở thấp hơn so với đối chứng lần lượt là 30,91%, 26,36% và 26,36%. Đa số các loại nông dược đều ảnh hưởng đến sức sống, tỷ lệ trứng nở của nhện Pardosa sp.. Do đó chỉ nên sử dụng thuốc hóa học trên đồng ruộng khi thật sự cần thiết và nên dùng những loại thuốc ít ảnh hưởng đến thiên địch nhất nhằm giảm chi phí đầu tư trong nông nghiệp, bảo tồn những loài thiên địch quan trọng và mang lại hiệu quả kinh tế cao. 25 Chương 5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1. Kết luận Nhện Pardosa sp. có phổ thức ăn khá rộng, có thể ăn được tất cả các tuổi của rầy xanh Empoasca sp., nhưng chỉ ăn đươc sâu tuổi nhỏ. Nhện trưởng thành Pardosa sp. có thể ăn được trung bình 2,02 con sâu khoang hoặc 15,56 ruồi giấm. Vòng đời của nhện Pardosa sp. nuôi trong điều kiện thí nghiệm đạt 96,33 ngày. Ảnh hưởng của 10 loại thuốc thí nghiệm đối với tỷ lệ chết nhện Pardosa sp., nhóm thuốc trừ sâu gây ảnh hưởng mạnh nhất và nhóm thuốc trừ bệnh không gây ảnh hưởng đến nhện Pardosa sp.. Thuốc gây chết mạnh nhất đối với nhện Pardosa sp. là Secure 10EC có mức độc tương đối (cấp 3) và 3 loại thuốc không gây chết đối với nhện Pardosa sp. là thuốc Daconil 500SC, Aliette 800WG và Visimaz 800BTN (cấp 1). Thuốc trừ sâu gây chết ít nhất là Dipel 6,4DF ở mức không độc (cấp 1). Ảnh hưởng của thuốc thí nghiệm đến số trứng nở của nhện Pardosa sp. Sau khi bị nhiễm thuốc số trứng nở của nhện Pardosa sp. đều giảm so với đối chứng. Nhện bị nhiễm thuốc trừ bệnh Daconil 500SC có số trứng nở thấp nhất đạt trung bình là 36 trứng (giảm 34,10% so với đối chứng), nhện bị nhiễm thuốc trừ cỏ Visimaz 800BTN có số trứng nở cao nhất trong các thuốc thí nghiệm đạt trung bình 48 trứng, nhưng cũng giảm so với đối chứng là 13,18. 5.2. Đề nghị Tiếp tục nghiên cứu đặc điểm sinh học, sinh thái của nhện lớn bắt mồi Pardosa sp. trên ruộng rau. Tiếp tục nghiên cứu ảnh hưởng của các loại nông dược khác đến nhện Pardosa sp. trên ruộng rau 26 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT 1. Phạm Văn Biên Bùi Cách Tuyến Nguyễn Mạnh Chinh, 2005. Cẩm nang THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT 2005, nhà xuất bản nông nghiệp TP.Hồ Chí Minh. 2. Nguyễn Văn Huỳnh, 2002. Nhện là thiên địch của sâu hại cây trồng, nhà xuất bản nông nghiệp TP.Hồ Chí Minh, 136 trang. 3. Phạm Văn Lầm, 2006. Những điều cần biết về rầy nâu và biện pháp phòng trừ, nhà xuất bản lao dộng Hà Nội, trang 71 – 77. 4. Phạm Văn Lầm, 2002. Tài nguyên thiên địch của sâu hại nghiên cứu và ứng dụng, nhà xuât bản nông nghiệp Hà Nội, 142 trang 5. Bùi Xuân Phương, 2001. Khả năng ăn bọ xít của nhện xói vân đinh ba, tạp chí chuyên ngành Bảo Vệ Thực vật, số 52001, 1316. 6. Phạm Đình Sắc, Khuất Đăng Long, 2001. Nghiên cứu thành phần và vai trò của nhện lớn bắt mồi trên đậu tương, tạp chí chuyên ngành bảo vệ thực vật, số 62001, 37. 9. Nguyễn Xuân Thành, 1996. Sâu hại bông, đay và thiên địch của chúng ở Việt Nam, nhà xuất bản nông nghiệp Hà Nội, 166 trang. TIẾNG NƯỚC NGOÀI 7. B.M. Shepard, G.R. Carner, A.T. Barrion, P.A.C. Ooi and H. van den Berg. Insect and their Natural Enemies Associated with Vegetables and Soybean in Southeast Asia. TỪ INTERNET 8. Boesenberg và Strand, 1906. Pardosa pseudoannulata 9. Hiroyuki Iida và Kenji Fujisaki, Adaptive significance of the gregarious phase in nymphs of a wolf spider, Pardosa pseudoannulata (Araneae Lycosidae) 27 10. Chikara Ishijima và ctv, Observational evidence that the diet of wolf spiders (Araneae Lycosidae) in paddies temporarily depends on dipterous insects 11. Keizi Kiritani, Integrated biodiversity management (IBM) in rice fields 12. Darlene Maloney, Francis A. Drummond và Randy Alford, 2003. SpiderPredation in Agroecosystems:Can Spiders Effectively Control Pest Populations? 13. Christopher M. Buddle, Life history of Pardosa moesta and Pardosa mackenziana (Araneae Lycosidae) in central Alberta, Canada 14. Wolf spider (Pardosa amentata) 15. Pardosa milvina 16. DAVID PENNEY VÀ SUSAN P. BENNETT, SHORT COMMUNICATIONFIRST UNEQUIVOCAL MERMITHID–LINYPHIID(ARANEAE) PARASITE–HOST ASSOCIATION . 28 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Khả năng ăn mồi của nhện Pardosa sp. Đơn vị: con STT SÂU KHOANG RUỒI GIẤM NGÀY 1 NGÀY 2 NGÀY 3 NGÀY 1 NGÀY 2 NGÀY 3 1 3 1 1 12 10 10 2 3 1 1 11 7 13 3 2 2 1 17 16 14 4 4 2 1 20 10 20 5 2 2 1 15 14 22 6 2 0 1 19 10 11 7 1 1 1 11 9 16 8 1 2 1 21 15 13 9 7 3 1 25 26 14 10 8 4 2 16 15 22 11 3 1 0 15 10 9 12 5 3 1 14 10 9 13 2 1 1 22 23 20 14 5 2 1 23 15 16 15 5 2 1 25 17 18 MIN 1 0 0 11 7 9 MAX 8 4 2 25 26 22 TB 3,40 1,73 0,93 17,73 13,8 15,13 SD 2,06 1,03 0,46 4,82 5,31 4,49 Phụ lục 2: Số trứng nở của nhện Pardosa sp. sau khi bị nhiễm thuốc thí nghiệm Đơn vị: trứng NT STT Success 25SC Dipel 6,4DF Visimax 800BTN Onecide 15EC Aliette 800WP Daconil 500SC Confidor 100SL Đối chứng 1 43 36 49 43 30 38 44 61 2 34 46 36 33 57 39 32 53 3 54 45 54 43 45 39 42 54 4 31 35 52 56 32 29 34 52 29 NT STT Success 25SC Dipel 6,4DF Visimax 800BTN Onecide 15EC Aliette 800WP Daconil 500SC Confidor 100SL Đối chứng Min 31 35 36 33 30 29 32 52 Max 54 46 54 56 57 39 44 61 TB 40,50 40,50 47,75 43,75 41,00 36,25 38,00 55,00 SD 10,34 5,80 8,10 9,43 12,57 4,86 5,89 4,08 Phụ lục 3: Hiệu lực của thuốc đối với nhện Pardosa sp. Đơn vị: % NT LLL Thời gian theo dõi 6 GSP 1 NSP 2 NSP 3 NSP 4 NSP 5 NSP 6 NSP Onecide 1 10 10 10 10 10 10 10 2 0 10 10 10 10 10 10 3 0 0 0 0 0 0 0 Regent 1 0 30 30 50 60 70 70 2 0 0 10 20 60 60 70 3 0 0 10 30 40 60 70 Aliette 1 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 0 Secure 1 0 20 40 80 90 100 100 2 40 90 90 90 90 90 90 3 0 20 50 60 70 70 70 Success 1 10 10 10 10 10 10 10 2 0 20 20 20 20 20 20 3 0 10 10 10 10 10 10 Daconil 1 0 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 0 Vertim

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC VÀ ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ

THUỐC NÔNG DƯỢC ĐẾN NHỆN LỚN BẮTMỒI Pardosa sp

(LYCOSIDAE – ARANEAE) TRÊN RUỘNG RAU

Giáo viên hướng dẫn:

ThS TRẦN THỊ THIÊN AN

Tháng 10 năm 2007

Cuối cùng xin cảm ơn những anh chị và những người bạn đã giúp đỡ tôi trong suốt quãng đời sinh viên của mình

Xin chân thành cảm ơn!

TP.HCM, ngày 20 thánh 10 năm 2007 Sinh viên

Nguyễn Tấn Lộc

TÓM TẮT

Đề tài “Nghiên cứu đặc điểm sinh học và ảnh hưởng của một số thuốc nông

dược đến nhện lớn bắt mồi Pardosa sp (Lycosidae – Araneae) trên ruộng rau tại Tp

Hồ Chí Minh” được tiến hành tại Bộ môn Bảo vệ Thực vật trường Đại Học Nông Lâm

Tp Hồ Chí Minh, thời gian từ tháng 04/2007 đến 09/2007 Thí nghiệm được thực hiện theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên đơn yếu tố

Sâu hại là một trong những nguyên nhân chính gây ảnh hưởng đến năng suất và phẩm chất rau màu, đòi hỏi cấp bách phải tìm ra được biện pháp phòng trừ mang lại hiệu quả kinh tế Côn trùng thiên địch có thể làm giảm thiểu mật số sâu bệnh hại Nhện

lớn bắt mồi Pardosa sp (Lycosidae – Araneae) là một trong những loài thiên địch cần

được tìm hiểu rõ đặc điểm sinh học, sinh thái để làm cơ sở xây dựng biện pháp bảo vệ, phát triển và sử dụng loài thiên địch này trong tự nhiên

Kết quả bước đầu đề tài đã đạt được

Nhện Pardosa sp nhân nuôi trong diều kiện nhiệt độ 27 ± 2oC và ẩm độ là 65 ± 5%, quá trình phát dục trải qua 3 giai đoạn

- Trứng có thời gian phát triển trung bình là 12,50 ngày

- Nhện non có 8 tuổi, thời gian phát dục trung bình là 65,16 ngày

- Thời gian phát triển của nhện trưởng thành dài chưa theo dõi được

Vòng đời của nhện Pardosa sp trung bình 96,33 ngày

Nhện Pardosa sp có phổ thức ăn khá rộng tuy nhiên các loài côn trùng thân mềm, nhỏ và có thể bay nhảy vẫn được nhện Pardosa sp ăn nhiều

Thí nghiệm ảnh hưởng của một số nông dược đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa

sp được bố trí theo kiểu khối hoàn toàn ngẫu nhiên, 3 lần lặp lại, 11 nghiệm thức thuốc là (1) Onecide 15EC, (2) Visimaz 800BTN, (3) Daconil 500SC, (4) Aliette 800WG, (5) Secure 10EC, (6) Regent 800WG, (7) Vertimec 1,8EC, (8) Confidor 100SL, (9) Success 25SC, (10) Dipel 6,4DF, (11) Đối chứng là nước cất

Trong nhóm thuốc trừ sâu Secure 10EC là thuốc tác động mạnh nhất đến tỷ lệ

chết nhện Pardosa sp ở 6 ngày sau phun thuốc (thuốc ở mức tương đối độc (cấp 3)) và loại thuốc trừ sâu gây chết ít nhất đối với nhện Pardosa sp ở 6 ngày sau phun thuốc là

Dipel 6,4DF (ở mức độc cấp 2 (ít độc)), nhóm thuốc trừ cỏ gây ảnh hưởng rất thấp (cấp độc 1), còn nhóm thuốc trừ bệnh thì không gây ảnh hưởng (cấp độc 1)

Thí nghiệm xác định số trứng nở của nhện Pardosa sp sau khi bị nhiễm thuốc

thí nghiệm được bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên, 4 lần lặp lại với 8 nghiệm thức gây chết

ít nhất đối với nhện Pardosa sp là (1) Onecide 15EC, (2) Visimaz 800BTN, (3)

Daconil 500SC, (4) Aliette 800WG, (5) Success 25SC, (6) Confidor 100SL, (7) Dipel 6,4DF, (8) Đối chứng nước cất

Qua thí nghiệm cho thấy số trứng nở của nhện Pardosa sp sau khi bị nhiễm

thuốc đều giảm so với đối chứng Trong đó thuốc trừ cỏ Visimaz 800BTN có số trứng

nở cao nhất, thuốc trừ bệnh Daconil 500SC có số trứng nở thấp nhất

MỤC LỤC

Trang tựa i

Lời cảm ơn ii Tóm tắt iii Mục lục v Danh sách các chữ viết tắt vii

Danh sách các hình và biểu đồ viii

2.1 Một số kết quả nghiên cứu về nhện lớn bắt mồi Pardosa trên thế giới 3

2.1.1 Thành phần loài của nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa 3

2.1.2 Một số kết quả nghiên cứu về đặc điểm sinh học của nhóm nhện lớn bắt mồi

2.1.3 Một số kết quả nghiên cứu về ảnh hưởng của nông dược đến nhóm nhện lớn

2.2 Một số kết quả nghiên cứu về nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa trong nước 6

2.2.1 Thành phần loài của nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa 6

2.2.2 Một số nghiên cứu về đặc điểm sinh học của nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa 7

2.2.3 Ảnh hưởng của thuốc bảo vệ thực vật đến nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa 8

Chương 3 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM 10

3.1 Thời gian và địa điểm thí nghiệm 10

3.2 Nội dung thí nghiệm 10

3.3 Vật liệu và dụng cụ thí nghiệm 10

3.4 Phương pháp nghiên cứu 10

3.4.1 Nghiên cứu đặc điểm sinh học của nhện lớn bắt mồi Pardosa sp 10

3.4.1.1 Xác định phổ mồi của nhện Pardosa sp 10

3.4.1.2 Thí nghiệm xác định khả năng tiêu thụ ruồi giấm Drosophila melanogaster sâu khoang Spodoptera liture của nhện Pardosa sp 10 3.4.1.3 Thí nghiệm xác định thời gian phát triển các pha cơ thể và vòng đời của

Chương 4 KẾT QUẢ THẢO LUẬN 15

4.1 Thí nghiệm nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của nhện lớn bắt mồi Pardosa sp.15 4.1.1 Phổ mồi của nhện Pardosa sp (Lycosidae – Araneae) 15

4.1.2 Khả năng tiêu thụ ruồi giấm Drosophila melanogaster và sâu khoang

4.1.3 Thời gian phát triển các pha cơ thể và vòng đời của nhện Pardosa sp 17

4.2 Ảnh hưởng của một số loại nông dược đối với nhện lớn bắt mồi Pardosa sp.19 4.2.1 Ảnh hưởng của một số loại nông dược đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp.19 4.2.2 Số trứng nở của nhện Pardosa sp sau khi bị nhiễm thuốc thí nghiệm 22

DANH SÁCH CÁC HÌNH VÀ BIỂU ĐỒ

Hình Trang

3.2 Hộp thử thuốc thí nghiệm đối với nhện Pardosa sp 13 4.1 Nhện Pardosa sp ăn sâu xanh hai sọc trắng D indica S 16 4.2 Nhện Pardosa sp ăn ruồi giấm D melanogaster 16

4.3 và 4.4 Nhện Pardosa sp đang ăn vật mồi

a) Ăn ruồi giấm Drosophila melanogaster

4.5 Vòng đời của nhện Pardosa sp (Lycosidae – Araneae) 18

Biểu đồ

4.1 Số trứng nở trung bình của nhện Pardosa sp sau khi bị nhiễm thuốc 22

DANH SÁCH CÁC BẢNG

3.1 Các thuốc thí nghiệm và liều lượng sử dụng 12

4.1 Phổ mồi của nhện Pardosa sp (Lycosidae – Araneae) 15

4.2 Khả năng tiêu thụ ruồi giấm Drosophila melanogaster và sâu khoang Spodoptera

4.3 Thời gian phát triển các pha cơ thể và vòng đời của nhện Pardosa sp 17

4.4 Ảnh hưởng của một số loại nông dược đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp 19

4.5 Ảnh hưởng của thuốc trừ cỏ đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp 20

4.6 Ảnh hưởng của thuốc trừ sâu đến tỷ lệ chết của nhện Pardosa sp 21

4.7 Tỷ lệ (%) trứng nở của nhện Pardosa sp sau khi bị nhiễm thuốc trừ bệnh so với

Chương 1

MỞ ĐẦU

1.1 Đặt vấn đề

Nước ta là một nước nông nghiệp, hơn 80% dân số sống bằng nghề nông, vì vậy

sự ổn định của nền nông nghiệp có ảnh hưởng lớn đến sự phát triển của đất nước Việc phòng trừ sâu bệnh hại bảo vệ mùa màng là một trong những biện pháp quan trọng tạo

ra sự ổn định này (Nguyễn Xuân Thành, 1996)

Rau màu là loại cây trồng ngắn ngày, đóng một vai trò quan trọng cung cấp thực phẩm thiết yếu cho cuộc sống con người Tuy nhiên, hiện nay việc sản xuất rau màu gặp rất nhiều khó khăn mà các loại dịch hại là một trong những nguyên nhân chính gây ảnh hưởng lớn đến năng suất và phẩm chất Để tiêu diệt dịch hại nông dân thường

sử dụng các loại thuốc hóa học Biện pháp này tuy đã diệt được một số loài côn trùng gây hại nhưng đồng thời cũng tiêu diệt luôn những thiên địch quan trọng trên đồng ruộng Việc lạm dụng các loại thuốc hóa học đã gây nhiều tác động xấu đến thiên nhiên, làm mất cân bằng sinh thái, gây ô nhiễm môi trường, ảnh hưởng đến sức khỏe con người…

Để có thể khống chế được dịch hại một cách hiệu quả thì không chỉ sử dụng riêng

rẽ một biện pháp hóa học mà phải kết hợp nhiều biện pháp hổ trợ với nhau Nền nông nghiệp thế giới đang hướng tới nền nông nghiệp bền vững, trong đó chú trọng biện pháp đấu tranh sinh học, coi trọng việc bảo vệ và phát huy vai trò của thiên địch, giảm thiểu sử dụng thuốc hóa học Ở nước ta, để góp phần vào mục tiêu giảm sử dụng thuốc hóa học trong nông nghiệp, chiến lược phòng trừ sâu hại tổng hợp (IPM = Integrate pest management)) được triển khai cũng trên quan điểm bảo vệ và phát triển vai trò của thiên địch Trong các loài thiên địch, nhện lớn bắt mồi đã được đánh giá là loài thiên địch có vai trò quan trọng, chúng có thể tiêu diệt được nhiều loài sâu hại rất hiệu quả

Hiện nay, loài nhện lớn bắt mồi Pardosa sp (Lycosidae - Araneae) đã được xem

là tác nhân đấu tranh sinh học quan trọng trên ruộng lúa Tuy nhiên những tài liệu

nghiên cứu đặc điểm sinh học, sinh thái và ảnh hưởng của thuốc hóa học đối với

Pardosa sp trên ruộng rau còn rất hạn chế

Vì vậy, được sự đồng ý của bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, trường Đại Học Nông Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh, dưới sự hướng dẫn của Ths.Trần Thị Thiên An đề tài

“Nghiên cứu đặc điểm sinh học và ảnh hưởng của một số thuốc nông dược đến

nhện lớn bắt mồi Pardosa sp (Lycosidae - Araneae) trên ruộng rau tại Tp Hồ

Chí Minh” đã được thực hiện

- Thời gian thực hiện đề tài: từ tháng 04/2007 đến tháng 09/2007

- Đề tài chỉ mới theo dõi được khả năng tiêu thụ mồi của nhện Pardosa sp đối với sâu khoang Spodoptera litura và ruồi giấm Drosophila melanogaster

- Chưa nghiên cứu được tuổi thọ của trưởng thành nhện Pardosa sp

Chương 2

TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1 Một số kết quả nghiên cứu về nhện lớn bắt mồi Pardosa trên thế giới

2.1.1 Thành phần loài của nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa

Theo Boesenberg và Strand (1906) loài Pardosa pseudoannulata xuất hiện phổ biến ở vùng Đông Nam Á, theo Foelix (1982) và Jackman (1997) loài Pardosa milvina được tìm thấy ở Mỹ, loài Pardosa groenlandica được phát hiện ở Canada (Cosawic 2005a, 2005b) Trường Đại học Manitoba (Canada), ghi nhận được 19 loài Pardosa gồm Pardosa concinna (Thorell), Pardosa distincta (Blackwell), Pardosa dromaea (Thorell), Pardosa furcifera (Thorell), Pardosa fuscula (Thorell), Pardosa

groenlandica (Thorell), Pardosa hyperborea (Thorell), Pardosa lapponica (Thorell), Pardosa mackenziana (Keyserling), Pardosa modica (Blackwall), Pardosa moesta

(Banks), Pardosa mulaiki (Gertsch), Pardosa ontariensis (Gertsch), Pardosa

podhorskii (Kulczyn'ski), Pardosa saxatilis (Hentz), Pardosa sp., Pardosa tesquorum

(Odenwall), Pardosa uintana (Gertsch) và Pardosa xerampelina (Keyserling)

Ngoài ra một số loài Pardosa phổ biến còn được phát hiện ở nhiều nơi khác cũng đóng vai trò quan trọng như Pardosa agrestis (Westring, 1861), Pardosa amentata (Clerck, 1757), Pardosa glacialis (Thorell, 1872), Pardosa hortensis (Thorell, 1872), Pardosa

lugubris (Walckenaer, 1802), Pardosa palustris (Linneaus, 1758), Pardosa riparia

(C.L Koch, 1833), Pardosa sphagnicola (Dahl, 1908), Pardosa suwai (Tanaka, 1985; Matsuda, 1999), Pardosa vancouveri (Emerton, 1917)

2.1.2 Một số kết quả nghiên cứu về đặc điểm sinh học của nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa

Họ nhện săn mồi Lycosidae trong đó có loài Pardosa sp thường xuyên bắt giữ

con mồi thuộc bộ cánh thẳng, bộ cánh nửa, bộ hai cánh, bộ cánh đều, bộ cánh tơ, bộ cánh vẩy, một số loài bộ cánh cứng và bộ cánh màng (Riechert và Bishop, 1990;

Young và Edwards, 1990; Nyffeler et al., 1994)

Trên ruộng lúa khoảng 80% rầy nâu, rầy xanh đuôi đen là thức ăn của họ nhện Lycosidae Tuy nhiên không có một con nhện NLBM nào phát triển đến tuổi trưởng thành khi chỉ ăn rầy nâu Khi nhện cái họ Lycosidae ăn nhiều loại con mồi khác nhau thì khả năng sinh sản của chúng gia tăng một cách nhanh chóng (Suzuki và Kiritani, 1974)

Ishijima et al (2004) cho rằng mật số các loại rầy giảm trên ruộng không làm

đất hơn là ruộng có làm đất truyền thống, khi đó mật độ NLBM đặc biệt có nhện

Pardosa sp tăng lên nhanh chóng trên ruộng canh tác không làm đất Kết quả này cho

thấy nhóm NLBM đóng vai trò quan trọng trong việc ngăn chặn các loại rầy

Nhện Pardosa pseudoannulata là thiên địch quan trọng của côn trùng gây hại trên đồng lúa bởi vì chúng ăn nhiều rầy nâu và rầy xanh đuôi đen hơn là nhiều loại nhện khác (Sasaba et al., 1970; Kiritani et al., 1972; Yaginuma, 1986)

Kiritani et al (1972, 1974) đưa ra bảng phân tích tuổi thọ trung bình của rầy xanh Nephotettix cincticeps (Uhler) trên ruộng lúa và kết luận NLBM Pardosa

pseudoannulata là đối tượng săn mồi quan trọng nhất

Nhện Pardosa sp là loài nhện rất nhanh nhẹn Chúng thích ăn rầy xanh đuôi

đen và rầy nâu Mỗi ngày nhện ăn từ 5-15 con mồi (Boessenberg và Strand, 1906)

Nhện Pardosa milvina là loài bắt mồi ăn thịt, chúng săn bắt con mồi với một

tốc độ nhanh và mạnh mẽ Các loại vật mồi của chúng gồm có rầy nâu, châu chấu,

trứng các loài sâu hại… Mỗi ngày Pardosa milvina ăn khoảng 3,5 mg sâu hại, tương

đương 12% trọng lượng cơ thể của chúng (Foelix, 1982; Preston-Mafham,1996)

Nhện hạn chế được mật số sâu hại bởi vì chúng thường bắt giữ và tiêu diệt hơn

là tiêu thụ con mồi Riechert và Lockley (1984) nhận định nhện có thể giết chết con mồi gấp 50 lần so với sức tiêu thụ của nó

Lang et al (1999) tìm ra trong những vụ màu, nhện làm suy yếu mật độ của côn

trùng gây hại như rầy xanh đuôi đen (Cicadellidae), bọ trĩ (Thysanoptera) và rệp (Aphididae)

Marc et al (1999) nhận thấy có 3 loài nhện phong phú trên vụ lúa mì vào mùa đông là Pardosa agrestis (Westring) (Lycopsidae - Araneae) và hai loại NLBM họ

Linyphiidae có thể làm giảm mật độ của rệp (Aphididae) từ 34% đến 58% trong điều kiện thí nghiệm

Vòng đời của nhện Pardosa groenlandica khoảng 23 tháng (Dondate, 1999) Mỗi năm Pardosa sp đẻ hai hoặc ba thế hệ (Kawahara et al., 1974)

Nhện Pardosa sp là những kẻ săn mồi quan trọng trên đồng ruộng và cây trồng

cạn, nhện cái đẻ khoảng 100 trứng trong một túi trứng, khi nở con cái mang nhện con

ở đằng sau của chúng (Shepard, Carner, Barrion, Ooi và Berg, 1999)

Theo Boesenberg và Strand (1906), nhện Pardosa sp săn mồi trên mặt đất

Trên cánh đồng nhện cái thường dễ nhận biết bởi vì chúng thường di chuyển với một cái túi trứng hình cầu được gắn ở đằng sau chúng

Những nhện con mới nở của Pardosa sp được nhện mẹ đeo ở phần bụng Nhện

con không ăn trong giai đoạn này Nếu chúng bị rơi xuống, chúng vẫn có thể treo lơ lửng với nhện mẹ bằng một sợi dây mịn, và có thể dễ dàng trở về với nhện mẹ qua đường chân và xúc biện Nhện con chỉ phân tán sau khi đã trải qua một lần lột xác

Nhện Pardosa sp được tìm thấy ở vùng đất ẩm hay những ruộng lúa khô

2.1.3 Một số kết quả nghiên cứu về ảnh hưởng của nông dược đến nhóm nhện lớn

bắt mồi Pardosa

Yardrim Edward (1998) nhận định đối với nhóm NLBM thì ảnh hưởng của thuốc trừ sâu lớn hơn thuốc trừ cỏ và thuốc trừ nấm

Những ruộng mà phun thuốc trừ sâu thường xuyên thì mật độ nhện rất thấp

(Bogya và Markó, 1999; Feber et al., 1998; Huusela-Veistola, 1998; Yardim và Edwards, 1998; Holland et al., 2000; Amalin et al., 2001) Nhìn chung, đối với thuốc

hóa học thì nhện dễ bị tổn thương hơn nhiều loài sâu hại khác, như thuốc tổng hợp gốc cúc pyrethroids như cypermethrin và deltamethrin; thuốc gốc lân organophosphates như dimethoate và malathion và thuốc gốc cacbamat (carbamate) như carbaryl Việc thuốc hóa học làm giảm mật số nhện có thể là kết quả của sự bùng phát nhiều loài sâu

hại (Brown et al., 1983; Birnie et al., 1998; Huusela-Veistola, 1998; Yardim và Edwards, 1998; Marc et al., 1999; Holland et al., 2000; Tanaka et al., 2000).

Ở những vùng nhiệt đới, để bảo vệ các loài thiên địch thì phải tránh phun thuốc hóa học quá sớm, việc này giúp ngăn ngừa được nhiều thứ dịch hại chẳng hạn như

dịch rầy nâu và rầy xanh đuôi đen (Way và Heong, 1994; Settle et al., 1996)

Theo Wisniewska và Prokopy (1997) nếu thuốc hóa học chỉ được sử dụng trước những vụ trồng thì mật độ nhện sẽ được gia tăng Nhện có khả năng thay đổi theo chiều hướng thích nghi để chiếm lại lãnh thổ của chúng nếu thuốc trừ sâu không còn tác dụng nữa Sự giới hạn về không gian của thuốc hóa học cũng dẫn đến kết quả số

lượng nhện cao hơn, bởi chúng có thể đi ra khỏi khu vực có xử lý thuốc và trở về khi thuốc hóa học đã xua tan (Riechert và Lockley, 1984; Balanca và de Visscher, 1997)

Một vài yếu tố ảnh hưởng đến hiệu quả của thuốc hóa học đối với nhện là dung môi, loại đất, độ ẩm, phần trăm vật chất hữu cơ, nhiệt độ, và thời gian sau khi phun

thuốc (Marc et al., 1999)

Ishijima et al (2004) trong cả mùa vụ không sử dụng thuốc trừ sâu hoặc thuốc trừ nấm, NLBM Pardosa pseudoannulata và Pirata subpiraticus là những đối tượng

săn mồi chủ yếu của rầy xanh và rầy nâu

2.2 Một số kết quả nghiên cứu về nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa trong nước 2.2.1 Thành phần loài của nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa

Theo Nguyễn Văn Huỳnh (2002), nhóm NLBM Pardosa là loài thiên địch quan trọng trong công tác phòng trừ sâu hại Một số loài Pardosa được phát hiện và mô tả

như sau

Loài Pardosa pseudoannulata (Boesenberg và Trand) là loài nhện rất phổ biến

và là loài thiên địch quan trọng trên ruộng lúa

Loài Pardosa sumatrana (Thorell) có kích thước trung bình dài 6,9 mm, phần

đầu dài 3,4 mm và phần bụng dài 3,5 mm Thân có màu vàng, kích thước của đầu lớn hơn kích thước ngang của bụng Trên đầu-ngực có một băng Y lợt màu nho và hai sọc màu lợt ở hai bên Hai cặp mắt trước hẹp hơn hai cặp mắt sau Trên bụng có các vân màu nâu đứt quãng

Loài Pardosa iriensi (Barrion và Litsinger) có kích thước trung bình dài 6,9

mm, phần đầu dài 3,4 mm và phần bụng dài 3,5 mm Đầu-ngực màu nâu, kích thước ngang phần đầu nhỏ hơn phần bụng Trên đầu có hai sọc sậm màu chạy dọc bên từ trước ra sau Phần bụng có một đốm màu đậm và có nhiều vân đứt quãng

Loài Pardosa mackenzici (Gravely) có kích thước trung bình dài 5,5 mm, đầu

ngực có kích thước là 2,9 mm và phần bụng có kích thước 2,6 mm Phần đầu có màu vàng, phần bụng có màu nâu với những đốm trắng không đồng nhất Trên đầu có một sọc đen ở giữa và có nhiều vân đen Trên lưng có một sọc đen ngắn từ phần tiếp giáp giữa đầu và lưng đến nửa lưng

Loài Pardosa santamaria (Barrion và Litsinger), có kích thước trung bình,

chiều dài của con cái là 4,96 mm, phần đầu dài khoảng 2,8 mm, phần bụng dài khoảng

2,2 mm Phần đầu có màu nâu đỏ và có một sọc đen ở giữa, xung quanh là những vân màu vàng Phần bụng màu vàng nâu, trên lưng có những đốm trắng đối xứng nhau qua hai bên lưng, trong đốm trắng đó có chấm nhỏ màu nâu

2.2.2 Một số nghiên cứu về đặc điểm sinh học của nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa

Theo Phạm Văn Lầm (2002), quá trình phát triển của nhện lớn bắt mồi trải qua

3 pha gồm trứng, nhện non và nhện trưởng thành Số tuổi của nhện non thay đổi tùy

theo từng loài, ngay trong một loài cũng có sự thay đổi tuổi Nhện non của Pardosa

pseudoannulata có 7 - 8 tuổi (đa số 8 tuổi) Thời gian phát dục pha trứng của Pardosa pseudoannulata là 11,8 - 16,6 ngày, nhện non là 76,2 - 155,8 ngày, nhện trưởng thành

là 122,9 - 219,0 ngày (tùy điều kiện nhiệt độ)

Trong 24 giờ, một cá thể trưởng thành cái của loài nhện sói vân đinh ba

Pardosa pseudoannulata trong ngày thí nghiệm thứ nhất, thứ 2 và 3 tiêu diệt được

trung bình 27,5; 17,5 và 12,4 rầy non tuổi 5 của rầy nâu Nhện sói vân đinh ba

Pardosa pseudoannulata là loài bắt mồi có ưu thế trong số các loài nhện lớn bắt mồi

của rầy nâu và rầy lưng trắng Đây là loài bắt mồi quan trọng và hiệu quả trong khống chế số lượng các loài rầy hại lúa ở nhiều nước Đông Nam Á Kết quả từ các thí nghiệm trong phòng tại Viện BVTV cho thấy khả năng ăn rầy nâu của nhện sói vân

đinh ba Pardosa pseudoannulata khá cao Một nhện sói vân đinh ba Pardosa

pseudoannulata ở giai đoạn nhện non tuổi 3 sau 24 giờ có khả năng tiêu diệt được 3,2

- 5,5 rầy non tuổi 4 của rầy nâu Khả năng ăn rầy nâu của chúng tăng theo tuổi phát dục Nhện non tuổi 8 của loài nhện sói vân đinh ba trong 24 giờ đã ăn trung bình được 6,5 - 21,0 rầy non tuổi 4 của rầy nâu Đặc biệt một trưởng thành cái loài nhện sói vân

đinh ba Pardosa pseudoannulata không mang bọc trứng có sức ăn mồi rất lớn Trong

24 giờ, trung bình nó ăn được 17,3 - 34,1 rầy non tuổi 5 của rầy nâu (Phạm Văn Lầm, 2006)

Nghiên cứu về khả năng ăn mồi của Pardosa pseudoannulata, Bùi Xuân

Phương (2001) cho biết khả năng ăn mồi của các nhóm nhện đối với bọ xít non tuổi

một của bọ xít gai Cletus punctiger Dallas là cao nhất Tuổi bọ xít non càng lớn, số

lượng con mồi bị nhện tiêu diệt trong một ngày càng giảm Nhện đực có sức ăn kém hơn, một ngày một nhện đực tiêu diệt được trung bình 7,1 ± 2,3 đối với bọ xít non tuổi

1 hoặc là 1,2 ± 0,2 bọ xít trưởng thành Nhện cái không mang trứng có sức ăn lớn hơn

Trong một ngày một nhện cái không mang trứng của Pardosa pseudoannulata có thể

ăn trung bình 15,7 ± 3,9 bọ xít tuổi 1 hoặc 2,0 ± 0,4 bọ xít trưởng thành Thí nghiệm

trong phòng cho thấy bọ xít đen Scotinophara lurida Burm và bọ xít dài cũng là con

mồi của Pardosa pseudoannulata

Nhện sói vân đinh ba Pardosa pseudoannula có phổ thức ăn rộng, theo Phạm Đình Sắc và Khuất Đăng Long (2001), Pardosa pseudoannulata ăn những loại mồi như bọ nhảy sọc vỏ lạc Phyllotrela striolata, rầy xanh Empoasca flavescens và sâu cuốn lá đậu tương Lamprosema indicata

Theo Phạm Văn Lầm (2002), các con mồi phổ biến của Pardosa pseudoannulata

là rầy nâu Nilaparvata lugen, rầy lưng trắng Sogatella furcifera, rầy xanh đuôi đen hai chấm nhỏ Nephotettix virescens, rầy xanh đuôi đen hai chấm lớn Nephotettix

nigropictus, rầy điện quang Recilia dorsalis, rầy trắng lớn Cofana specta, sâu cuốn lá

nhỏ Cnaphalocrocis medinalis, sâu cuốn lá lớn đầu vệt đen Parnara guttata, sâu keo

Spodoptera mauritia, sâu cắn gié Mythimna separata, sâu đo xanh Naranga aenescens, sâu đục thân bướm hai chấm Scirpophaga incestulas…

2.2.3 Ảnh hưởng của thuốc bảo vệ thực vật đến nhóm nhện lớn bắt mồi Pardosa

Theo Phạm Văn Lầm (2002) thuốc Admire, Ortus và Validacin, sau xử lý 1-7

ngày, gây chết cho nhện Pardosa pseudoannulata với tỷ lệ thấp (13,3-40,0%) Các thuốc Regent, Wofatox và Trebon có mức độc nhẹ (cấp 2) đối với nhện Pardosa

pseudoannulata, thuốc Bassa và Padan là độc trung bình (cấp 3) đối với nhện Pardosa pseudoannulata

Cũng theo tác giả này, với liều lượng khuyến cáo dùng trong sản xuất, hầu hết các thuốc bảo vệ thực vật đều ảnh hưởng tới sự tích lũy quần thể của nhện lớn bắt mồi

ăn thịt Thuốc Monitor và Bassa độc cao (cấp 4) đối với nhóm nhện lớn bắt mồi thuộc

họ Lycosidae, Tetragnathidae và Araneidae Thuốc Wofatox (đã bị cấm năm 1997) độc cao (cấp 4) đối với nhện lớn họ Tetragnathidae, Araneidae và độc trung bình (cấp3) đối với nhóm nhện lớn họ Lycosidae Thuốc Basudin độc cấp 3 (trung bình) đối với nhện lớn họ Tetragnathidae, nhưng lại độc cao (cấp 4) đối với nhện lớn họ Lycosidae và Araneidae Theo các nhà sản xuất, thuốc Trebon và Applaud ít độc với thiên địch Nhưng kết quả thí nghiệm cho thấy thuốc Trebon độc trung bình (cấp 3) đối với nhện lớn họ Lycosidae, Tetragnathidae và độc nhẹ (cấp 2) đối với nhện họ Araneidae Thuốc Applaud độc trung bình (cấp 3) đối với nhện lớn họ Lycosidae và

độc nhẹ (cấp 2) đối với nhện họ Tetragnathidae và Araneidae

Thuốc thảo mộc Rotenon độc nhẹ (cấp 2) và độc trung bình (cấp 3) đối với

nhện lớn họ Lycosidae, Tetragnathidae và Araneidae Chỉ có thuốc BT (Bacilus

thurigensis) là không độc (cấp 1) đối với nhện lớn bắt mồi trên lúa Các thuốc trừ bệnh

đều có mức độc từ nhẹ đến trung bình (Phạm Văn Lầm, 2002)

Theo Nguyễn Văn Huỳnh (2002) thì mật số nhện trên ruộng lúa cao hơn trên rẫy cây màu trồng cạn như là bắp và đậu xanh Xuất hiện phổ biến nhất là các loài

Pardosa sp., Tetragnatha spp, Atepina adelinae….Theo tác giả này thì nguyên nhân

làm cho trên rẫy cây màu mật số nhện thấp hơn trên ruộng lúa là do nông dân sử dụng thuốc trừ sâu thường xuyên hơn ruộng lúa

Cũng theo tác giả này, hầu hết các loại thuốc trừ sâu phổ biến hiện nay đều có độc tính cao đối với nhện, ngoại trừ một số ít loại thuốc không có tác dụng lên trung khu thần kinh của nhện Vì vậy ông cho rằng phải thật cẩn thận khi quyết định dùng thuốc trừ sâu để tránh ảnh hưởng bất lợi đến hoạt động phong phú của nhện thiên địch

Chương 3

NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM

3.1 Thời gian và địa điểm thí nghiệm

Đề tài được thực hiện từ 04/2007 đến tháng 09/2007 tại Bộ môn Bảo vệ Thực vật trường Đại Học Nông Lâm Tp Hồ Chí Minh

3.2 Nội dung thí nghiệm

- Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của NLBM Pardosa sp

- Tìm hiểu ảnh hưởng của một số thuốc nông dược đến NLBM Pardosa sp

3.3 Vật liệu và dụng cụ thí nghiệm

Vật liệu thí nghiệm

- Dung dịch ngâm mẫu: cồn 70o

- Vật liệu nhân nuôi ruồi giấm và sâu khoang: chuối sứ, agar, vitamin E, vỏ dứa, đậu đũa, lồng lưới, hộp nhựa

Dụng cụ thí nghiệm

- Dụng cụ thu mẫu: túi nilon, ống nghiệm, hộp nhựa, vợt

- Máy ảnh, kính hiển vi, thước đo, kéo, băng keo, cát sạch …

- Dụng cụ phun thuốc: tháp phun Potter Tower

3.4 Phương pháp nghiên cứu

3.4.1 Nghiên cứu đặc điểm sinh học của nhện lớn bắt mồi Pardosa sp

3.4.1.1 Xác định phổ mồi của nhện Pardosa sp

Thí nghiệm được tiến hành với thức ăn là các loại côn trùng gây hại khác nhau được thu thập từ các ruộng trồng rau, màu tại ngoại ô Tp Hồ Chí Minh

Nhện bị bỏ đói 24 giờ trong hộp nhựa có bông gòn ẩm Cho vật mồi vào, quan sát cách tấn công và ăn mồi Sau 24 giờ kiểm tra và ghi nhận phổ vật mồi của nhện

3.4.1.2 Thí nghiệm xác định khả năng tiêu thụ ruồi giấm Drosophila

melanogaster và sâu khoang Spodoptera litura của nhện Pardosa sp

Thí nghiệm được thực hiện với 15 lần lặp lại, mỗi lần lặp lại là một nhện

Pardosa sp trưởng thành

Cho mỗi con nhện bắt mồi vào hộp nhựa có bông gòn ẩm, bỏ đói một ngày trước khi cho vật mồi vào

Chuẩn bị đầy đủ lượng sâu khoang và ruồi giấm

Cho vật mồi vào mỗi hộp với một lượng thừa (30 con ruồi giấm hoặc 10 con sâu khoang) Sau 24 giờ đếm số vật mồi còn dư và thay thức ăn mới Tiến hành theo

dõi liên tục trong 3 ngày để tính lượng mồi tiêu thụ / ngày của nhện Pardosa sp

3.4.1.3 Thí nghiệm xác định thời gian phát triển các pha cơ thể và vòng đời của

nhện Pardosa sp

Thí nghiệm được thực hiện theo phương pháp nhân nuôi sinh học cá thể nhện

Pardosa sp.Tiến hành thu bắt nhện Pardosa sp trưởng thành ngoài các ruộng rau màu

Tiếp tục nuôi đến khi đẻ trứng để tiến hành làm thí nghiệm

Chọn 30 nhện con nở cùng ngày nhốt riêng từng cá thể vào hủ nhựa có bông gòn ẩm cung cấp nước cho nhện, hằng ngày cho ăn thức ăn là ruồi giấm, ghi nhận thời gian và số lần lột xác của nhện con để tính thời gian phát triển từng tuổi và vòng đời

- Lồng lưới nhỏ (30cm x 30cm x30cm), hộp nhựa trong loại 5 lít

- Lưới, kéo, pen, giấy thấm, bút lông, đĩa petri, kim gút, chai lọ lưu mẫu, bình phun nước cầm tay

- Bóng đèn điện quang (40w), cọ quét, bình phun nước

- Chậu nhựa, cát ẩm vô trùng, chuối sứ, agar, vitamin E, ruồi giấm

- Giấy mica trong loại dày (khổ 0,8m)

- Lưới inox A60 ( 23 ô/cm2)

- Tháp phun thuốc Potter Tower (Hình 3.1)

Hình 3.1 Tháp phun thuốc Potter Tower + Vật liệu thí nghiệm

- Đường cát trắng, dung dịch ngâm mẫu cồn 700

- Thuốc thí nghiệm (bảng 3.1 và phụ lục 5)

Bảng 3.1 Các thuốc thí nghiệm và liều lượng sử dụng

STT Tên thương mại Hoạt chất và liều lượng Liều lượng sử dụng

1 Daconil 500SC Chlorothanil (500g/l) 15ml/8l

2 Aliette 800WG Fosetyl aluminium (800g/kg) 20g/8l

3 Onecide 15EC Fluazifop – butyl (150g/l) 25ml/8l4

4 Visimaz 800BTN Simazine (80%) 40g/8l

5 Vertimec 1,8EC Abamectin (18g/l) 10ml/8l

6 Confidor 100SL Imidacloprid (100g/l) 7ml/8l

7 Success 25SC Spinosad (27.8g/l) 25ml/8l

8 Dipel 6,4 DF Bacillus thurigiensis 10g/8l

(32 tỉ IU/kg bào tử tinh thể độc tố vi khuẩn)

9 Regent 800WG Fipronil (800g/kg) 0,8g/8l

10 Secure 10EC Chlorfenapyr (100g/l) 10 ml /8l

b) Phương pháp thí nghiệm

 Chuẩn bị thức ăn cho nhện Pardosa sp

Để đảm bảo đầy đủ thức ăn cho việc nghiên cứu nhện Pardosa sp tiến hành nhân nuôi ruồi giấm Drosophilla melanogaster

Môi trường nhân nuôi ruồi giấm gồm những thành phần sau

1 Nước: 1 lít

2 Agar: 3 muỗng cà phê

3 Chuối sứ: 8 trái to

2 cm Hộp phải được làm thật kín để ngăn không cho nhện thoát ra ngoài

Hình 3.2 Hộp thử thuốc thí nghiệm đối với nhện Pardosa sp

- Nhện Pardosa sp được thu thập từ các ruộng rau thuộc ngoại ô Tp Hồ Chí

Minh mang về phòng thí nghiệm tiếp tục nuôi bằng thức ăn là ruồi giấm để có nhện trưởng thành thuần làm thí nghiệm

- Thí nghiệm được bố trí theo kiểu đầy đủ hoàn toàn ngẫu nhiên đơn yếu tố, với

10 nghiệm thức là 10 loại thuốc thí nghiệm và nghiệm thức đối chứng được phun bằng

nước cất, mỗi nghiệm thức gồm 30 cá thể Tiến hành cho nhện Pardosa sp vào trong

mỗi hộp ở trên

Phun từng loại thuốc với liều lượng là 6ml vào các hộp đã có sẵn NLBM và hằng ngày cung cấp thức ăn là ruồi giấm

 Chỉ tiêu theo dõi

Ghi nhận lượng nhện sống và chết ở mỗi nghiệm thức thí nghiệm tại các thời điểm 1, 3 và 6 ngày sau khi xứ lí thuốc để tính tỷ lệ nhện bắt mồi chết và hiệu lực của các loại thuốc thí nghiệm

Tỷ lệ chết được tính theo công thức

3.4.2.2 Số trứng nở của nhện Pardosa sp sau khi bị nhiễm thuốc thí nghiệm

Sáu ngày sau khi xử lý thuốc, chọn nhện còn sống cho ghép đôi giao phối trong cùng nghiệm thức Thí nghiệm ảnh hưởng của nông dược đến số trứng nở của nhện

Pardosa sp được bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên, 4 lần lặp lại (mỗi lần lặp lại là 1 cặp Pardosa sp đực và cái) 8 nghiệm thức có khả năng gây chết ít nhất đối với nhện Pardosa sp được chọn làm thí nghiệm là (1) Aliette 800WG, (2) Dipel 6,4DF, (3)

Onecide 15EC, (4) Daconil 500SC, (5) Visimaz 800BTN, (6) Confidor 100SL, (7) Success 25SC và (8) Đối chứng (nước cất)

Hằng ngày cho ăn ruồi giấm, phun thêm nước, kết thúc khi trứng nở Chỉ tiêu theo dõi

Ghi nhận số trứng nở/bọc trứng/con cái trên từng loại thuốc

3.5 Xử lý số liệu

Các số liệu thu được từ những thí nghiệm trên được xử lý và phân tích thống kê

trên phần mềm MSTATC và EXCEL

Chương 4

KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

4.1 Thí nghiệm nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của nhện lớn bắt mồi Pardosa sp 4.1.1 Phổ mồi của nhện Pardosa sp (Lycosidae – Araneae)

Bảng 4.1 Phổ mồi của nhện Pardosa sp (Lycosidae – Araneae)

STT Sâu hại Tên khoa học

(Họ - Bộ) Pha vật mồi bị ăn

1 Sâu xanh hai sọc trắng Diaphannica indica S

chỉ ăn được sâu tuổi nhỏ vì phù hợp với kích thước của chúng Qua thí nghiệm này

cùng với những nghiên cứu về phổ thức ăn của nhện Pardosa sp với những loại vật mồi như rầy nâu Nilaparvata lugen, rầy lưng trắng Sogatella furcifera, rầy xanh đuôi đen hai chấm nhỏ Nephotettix virescens, rầy xanh đuôi đen hai chấm lớn Nephotettix

nigropictus, rầy điện quang Recilia dorsalis, rầy trắng lớn Cofana specta, bọ nhảy sọc

vỏ lạc Phyllotrela striolata, rầy xanh Empoasca flavescens…của những tác giả Phạm Văn Lầm, Khuất Đăng Long, cho thấy nhện Pardosa sp có phổ thức ăn khá rộng, là

thiên địch quan trọng trong công tác phòng trừ sâu bệnh hại