NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC SINH SẢN VÀ KỸ THUẬT CHO SINH SẢN NHÂN TẠO CÁ BỐNG DỪA (Oxyeleotris urophthalmus)

-viii- PHỤ LỤC Phụ Lục 1: Tỷ Lệ Chiều Cao Thân Trên Chiều Dài Chuẩn H/Lo Phụ Lục 2: Tỷ Lệ Chiều Dài Đầu Trên Chiều Dài Chuẩn T/Lo Phụ Lục 3: Tỷ Lệ Chiều Dài Ruột Trên Chiều Dài Chuẩn Li

KHOA THỦY SẢN

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP

ĐỀ TÀI:

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC SINH SẢN VÀ KỸ THUẬT CHO SINH SẢN NHÂN TẠO CÁ BỐNG DỪA

(Oxyeleotris urophthalmus)

NGÀNH : THỦY SẢN

KHÓA : 2001 - 2005

SINH VIÊN THỰC HIỆN : HỒ THỊ TRƯỜNG THY

NGUYỄN QUỐC NGUYÊN

THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

2005

Luận văn được đề trình để hoàn tất yêu cầu cấp bằng Kỹ Sư Thủy Sản

Giáo viên hướng dẫn: Lê Thị Bình

Ngô Văn Ngọc

Thành phố Hồ Chí Minh

2005

-ii-

TÓM TẮT

Đề tài “ Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản và kỹ thuật cho sinh sản

nhân tạo cá Bống Dừa (Oxyeleotris Urophthalmus)” được tiến hành từ tháng 3

đến tháng 7 năm 2005 tại trại thực nghiệm Thủy Sản trường Đại Học Nông Lâm Tp.HCM

Qua quá trình nghiên cứu thực hiện đề tài trên, chúng tôi thu được kết quả như sau:

Cá bống dừa là loài cá sống ở vùng nước ngọt và lợ, ở nước ta chúng phân bố

ở vùng ven sông đồng nội thuộc Đồng Bằng sông Cửu Long như : Long An, Tiền Giang, Bến Tre …

Chúng là loài ăn tạp thiên về động vật, chủ yếu là giáp xác nhỏ Tỷ lệ chiều dài ruột (Li)/chiều dài chuẩn (Lo) trung bình 0,39

Mùa sinh sản của cá bống dừa tập trung vào những tháng mưa, từ tháng 5 đến tháng 10 hàng năm Khi thời tiết bất lợi xảy ra ví dụ nhiệt độ quá cao, sự xâm nhập mặn của nước biển sẽ dẫn đến rối loạn sự thành thục và sinh sản của cá Hệ số thành thục cao nhất là 7,518% vào tháng 6 và thấp nhất là 3,701% vào tháng 7 SSS tuyệt đối trung bình tăng dần theo nhóm kích thước (4.417 – 23.745 hạt trứng) SSS tương đối trung bình tăng dần từ nhóm kích thước 1 đến nhóm kích thước 3 (634 – 733 hạt trứng/g thể trọng) và giảm ở nhóm kích thước 4 (724 hạt trứng/g thể trọng)

Trứng cá bống dừa thuộc loại trứng dính, có màu vàng cam và đường kính trứng 0,25mm

Cá bống dừa được cho sinh sản theo hai phương pháp: sinh sản tự nhiên trong bể bạt ngoài trời và gieo tinh nhân tạo

Chất kích thích sinh sản được sử dụng là HCG cho sự sinh sản và rụng trứng thành công với liều lượng 6500 IU/kg cá cái Thời gian hiệu ứng từ 18 – 34 giờ ở nhiệt độ 29 – 320 C

Trứng ấp theo hai hình thức: trứng khử dính ấp trong bình weis và trứng dính trên giá thể ấp trong bể composite Thời gian trứng nở 32 – 35 giờ ở nhiệt độ 28 – 310

C Trứng nở với tỷ lệ khá thấp, cao nhất 25%, nguyên nhân trứng bị nhiễm nấm thủy

mi Sức sinh sản thực tế trung bình 44.570 trứng Tỷ lệ thụ tinh cao nhất 85%, thấp nhất 39%

Ấu trùng mới nở có màu trong suốt, rất nhỏ có chiều dài từ 2,4 – 2,5mm Ấu trùng sau 3 ngày tuổi có thể ăn nguyên sinh động vật (Protozoa)

-iii-

ABSTRACT

A thesis “Study on Some Characteristics of Biological Reproduction and

Artificial Breeding Technique of Oxyeleotris urophthalmus” was carried out from

March to July, 2005 at Experimental Farm for Aquaculture, Nong Lam University in HCM city

The result of the study shows that:

Oxyeleotris urophthalmus is a brackish – freshwater species, distributing most

of Mekong Delta Basin in Vietnam such as Long An, Tien Giang, Ben Tre and so on

Oxyeleotris urophthalmus is a carnivorous species, eating mostly small

crustaceans Ratio of intestine length (Li) to standard length (Lo) is about 0.39

Their breeding season is mainly rainy season, occurring from May to November yearly When living condition is not suitable such as extremely high temperature, high salinity, their maturation and spawning are able to stagnate The highest gonado – somatic index (GSI) is 7.518% in June and the lowest is 3.701% in May An average absolute fecundity depends on body length, increasing from small size group to large size group (4,417 – 23,745 eggs) An average relative fecundity increases from size of group 1 to size of group 3 (634 – 733 eggs per gram of body weight) and decreases in size of group 4 (724 eggs per gram of body weight)

Their eggs are adhesive, orange – yellow in color and 0.25mm in diameter Artificial breeding technique was carried out in two ways: natural spawning in plastic tank and insemination Using HCG to induce their spawning and ovulation of is successful at 6,500 IU/kg of female Latency time ranged from 18 to 34 hours at 29 –

320C

Hatching time is 32 – 35 hours at 28 – 310C Hatching ratio is very low; the

highest is 25%, because of Saprolegnia infection An average real fecundity is 44,570

eggs per fish Fertilization ratio oscillates from 39 to 85%

The newly hatched larvae are transparent, very small with 2.4 – 2.5mm in length The three-day old fry is able to eat Protozoa

-iv-

CẢM TẠ

Chúng tôi xin chân thành cảm ơn:

Ban Giám Hiệu trường Đại Học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh

Ban Chủ Nhiệm Khoa Thủy Sản

Quý Thầy Cô, cán bộ công chức của trường đã hết lòng dạy dỗ, truyền đạt kiến thức trong suốt quá trình học tập của chúng tôi

Đặt biệt chúng tôi xin gửi lòng biết ơn sâu sắc đến:

Cô Lê Thị Bình Thầy Ngô Văn Ngọc

Đã tận tình hướng dẫn, chỉ dạy chúng tôi trong suốt thời gian tiến hành luận văn này

Chúng tôi cũng xin chân thành cảm ơn các anh, chị của trại Thực Nghiệm Thủy Sản trường Đại Học Nông Lâm Tp HCM, cùng các bạn trong và ngoài lớp đã động viên, giúp đỡ chúng tôi trong quá trình thực hiện đề tài

Do thời gian thực tập đề tài ngắn và kiến thức còn hạn chế nên luận văn này không tránh khỏi những sai sót , kính mong sự chỉ bảo của quý thầy cô và sự đóng góp ý kiến của các bạn

-v-

MỤC LỤC

2.4.1 GtH (Gonadotropin hormone, hormone kích dục) ngoại sinh 8

2.4.2 GnRH (Hormon kích thích tiết KDT – GnRH) hay LH – RH tổng hợp 8

-vi-

4.6.2 Các giai đoạn phát triển của tuyến sinh dục cá bống dừa 25

4.7.3 Kết quả sinh sản bằng hình thức sinh sản tự nhiên 46

4.7.4 Kết quả sinh sản bằng phương pháp gieo tinh nhân tạo 46

-viii-

PHỤ LỤC

Phụ Lục 1: Tỷ Lệ Chiều Cao Thân Trên Chiều Dài Chuẩn (H/Lo)

Phụ Lục 2: Tỷ Lệ Chiều Dài Đầu Trên Chiều Dài Chuẩn (T/Lo)

Phụ Lục 3: Tỷ Lệ Chiều Dài Ruột Trên Chiều Dài Chuẩn (Li/Lo)

Phụ Lục 4: Hệ Số Thành Thục Của Cá Bống Dừa Khảo Sát Tháng 3

Phụ Lục 5: Hệ Số Thành Thục Của Cá Bống Dừa Khảo Sát Tháng 4

Phụ Lục 6: Hệ Số Thành Thục Của Cá Bống Dừa Khảo Sát Tháng 5

Phụ Lục 7: Hệ Số Thành Thục Của Cá Bống Dừa Khảo Sát Tháng 6

Phụ Lục 8: Hệ Số Thành Thục Của Cá Bống Dừa Khảo Sát Tháng 7

Phụ Lục 9: Sức Sinh Sản Của Cá Bống Dừa Khảo Sát Qua Các Tháng Thu MẫuPhụ Lục 10: Sức Sinh Sản Của Cá Bống Dừa Theo Nhóm Kích Thước

Phụ Lục 11: Kết Quả Xử Lý Thống Kê

Phụ Lục 12: Kết Quả Kích Thích Cá Bống Dừa Sinh Sản Bằng HCG

Phụ Lục 13: Tóm tắt các giai đoạn phát triển phôi của cá bống dừa

-ix-

DANH SÁCH CÁC BẢNG

Bảng 2.1 Sự phát triển của noãn sào qua các giai đoạn 4 Bảng 2.2 Sự phát triển của tinh sào qua các giai đoạn 5 Bảng 4.1 Đặc điểm phân biệt giữa cá đực và cá cái bống dừa 23 Bảng 4.2 Giai đoạn thành thục của cá bống dừa qua các tháng khảo sát 33 Bảng 4.3 Sức sinh sản cá bống dừa theo tháng thu mẫu 38

Bảng 4.5 Kết quả về sức sinh sản qua các lần gieo tinh 47

-x-

DANH SÁCH ĐỒ THỊ VÀ HÌNH ẢNH

Đồ thị 4.1 Mối tương quan giữa chiều dài và trọng lượng cá bống dừa 22 Đồ thị 4.2 Tỷ lệ xuất hiện các giai đoạn thành thục của cá 33 Đồ thị 4.3 Hệ số thành thục của cá bống dừa theo thời gian 35

Đồ thị 4.5 Sức sinh sản của cá bống dừa theo nhóm kích thước 37

Hình 2.1 Sơ đồ tác động của hormone lên sự phát triển tuyến sinh dục 10

Hình 4.1 Cồn Tàu – lưu vực sông Tiền, xã Tam Hiệp, huyện Bình Đại,

tỉnh Bến Tre – một trong những nơi sinh sống của cá bống dừa 18

Hình 4.3 Dấuhiệu sinh dục phụ của cá đực và cá cái bống dừa 23

Hình 4.7 Tinh sào cá bống dừa giai đoạn I, II (X = 10 × 10) 26 Hình 4.8 Tinh sào cá bống dừa giai đoạn III (X = 10 ×10) 27

Hình 4.11 Tinh sào cá bống dừa giai đoạn VI (X = 10 × 40) 28 Hình 4.12 Noãn sào cá bống dừa giai đoạn II, III ( X = 10 ×10) 30 Hình 4.13 Noãn sào cá bống dừa giai đoạn IV (X = 10 × 10) 31 Hình 4.14 Sự phát triển không đồng bộ của noãn sào cá bống dừa (X = 10 × 4) 31 Hình 4.15 Noãn sào cá bống dừa giai đoạn V (X = 10 × 4) 32 Hình 4.16 Noãn sào cá bống dừa giai đoạn VI (X = 10 × 10) 32 Hình 4.17 Đặt bẫy Lộp bắt cá bống dừa ngoài tự nhiên 40

Hình 4.19 Tiêm chất kích thích sinh sản cho cá bống dừa 43 Hình 4.20 Bố trí cho cá bống dừa sinh sản tự nhiên trong bể bạt 43

I GIỚI THIỆU

1.1 Đặt Vấn Đề

Trong các sản phẩm thủy sản, cá là nguồn thực phẩm không những ngon dễ chấp nhận mà còn là nguồn dinh dưỡng trong bữa ăn của người dân

Trong thị trường cá thương phẩm, bên cạnh những loài cá nuôi còn có các loài cá được khai thác chủ yếu từ tự nhiên, trong đó có loài cá bống dừa Loài này tuy kích cỡ nhỏ nhưng chất lượng thịt thơm ngon được nhiều người ưa thích Chúng phân bố chủ yếu ở vùng nước ngọt ven sông, cá có màu đen thường sống ở kẹt cây dừa nước, loài thực vật có nhiều ở miền sông rạch Nam Bộ, có lẽ vì thế mà người dân thường gọi là cá bống dừa

Cho đến nay nguồn cung cấp cá này phần lớn chủ yếu từ đánh bắt tự nhiên,

do đó trong tương lai sẽ dẫn đến cạn kiệt nguồn giống thiên nhiên Để góp phần trong việc bảo vệ nguồn lợi thủy sản của nước ta nói chung, cá bống dừa nói riêng, việc tìm hiểu đặc điểm sinh học sinh sản và nghiên cứu sản xuất giống nhân tạo cá bống dừa là một việc làm có ý nghĩa thực tiễn cần được quan tâm

Trước tình hình trên, được sự phân công của Khoa Thủy Sản trường Đại học

Nông Lâm Tp HCM, chúng tôi đã tiến hành thực hiện đề tài: “NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC SINH SẢN VÀ KỸ THUẬT CHO SINH SẢN NHÂN TẠO CÁ

BỐNG DỪA (Oxyeleotris urophthalmus)”

1.2 Mục Tiêu Đề Tài

Khảo sát một số đặc điểm sinh học sinh sản của cá bống dừa để áp dụng vào quy trình sản xuất giống nhân tạo

Nghiên cứu cho cá bống dừa sinh sản nhân tạo nhằm đáp ứng nguồn giống, bảo vệ nguồn lợi thủy sản, đồng thời phát triển nghề nuôi cá bống dừa

II TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1 Đặc Điểm Sinh Học Cá Bống Dừa

Tên Việt Nam: cá bống dừa, cá bống đen

Tên tiếng Anh: Smooth-scaled Gudgeon

2.1.2 Hình thái

Cá bống dừa có đầu dẹp bên, mõm tù hướng lên Miệng trên rộng, rộng miệng tương đương chiều dài xương hàm trên Rạch miệng xiên, kéo dài đến đường thẳng đứng kẽ qua giữa mắt Răng nhọn, mịn, xếp thành nhiều hàng trên mỗi hàm Lưỡi rất phát triển, dài, dẹp bằng, đầu lưỡi tròn, không có râu Mắt tròn, nhỏ, đường kính mắt tương đương phân nửa chiều dài mõm, mắt lệch về nửa trên của đầu, phần trán giữa hai mắt rộng, tương đương với hai lần đường kính của mắt và hơi cong lồi

Phần trước của thân có tiết diện tròn, phần sau dẹp bên Cuống đuôi thon dài Vảy rất nhỏ phủ khắp cơ thể, nhiều vảy nhỏ phủ lên gốc vi ngực và quá một nửa gốc đuôi

Cá có màu nâu đỏ đến nâu tối, có khi đen bóng Cạnh trên gốc vi đuôi có một đốm đen to với một đốm vàng nằm ở trước, có khi đốm vàng bao xung quanh đốm đen, bụng cá có nhiều đốm đen nhỏ li ti hoặc trắng

2.1.3 Nguồn gốc phân bố

Cá bống dừa là loài cá đặc trưng của vùng nhiệt đới, tập trung ở vùng Đông Nam Á như : Thái Lan, Malaysia, Indonesia, Việt Nam Ở nước ta cá sinh sống nhiều

ở vùng đồng bằng sông Cửu Long như : Bến Tre, Tiền Giang, Long An, …

2.1.4 Môi trường sống

Môi trường sống thích hợp cho cá bống dừa là nước ngọt và nước lợ Trong tự nhiên, cá phân bố ở các thủy vực sông rạch Cá thích hợp ở môi trường nước có nhiệt độ 25 – 280C Cá có thể sống ở môi trường có dưỡng khí thấp (Trương Thủ Khoa và Trần Thị Thu Hương, 1993) Môi trường nước yên tĩnh, có cây cỏ thủy sinh là nơi lưu trú lý tưởng cho chúng

2.1.5 Dinh dưỡng

Cá trưởng thành có bộ máy tiêu hóa biểu hiện cho loài cá ăn tạp thiên về động vật Miệng rộng, trên hàm có răng Cá bống dừa ăn động vật chủ yếu là côn trùng, giáp xác, phiêu sinh vật, cá con, tép con,

2.1.6 Đặc điểm sinh trưởng

Cá bống dừa tăng trưởng sau 4 – 6 tháng, đạt kích cỡ trung bình 7 – 9cm, tương đương trọng lượng 5 – 10g Cá có thể đạt kích cỡ lớn hơn tùy thuộc vào chế độ dinh dưỡng và điều kiện sinh thái

2.1.7 Đặc điểm sinh sản

Cá sinh sản lần đầu khi đạt kích cỡ 6 – 8cm, khoảng 5 – 6 tháng Mùa sinh sản tự nhiên kéo dài từ tháng năm đến tháng mười Cá sinh sản quanh năm Bãi đẻ của cá nằm ở ven bờ, nơi có cây cỏ thủy sinh và gốc thân cây chìm trong nước Cá bống dừa là loài cá đẻ trứng dính Vào những tháng mưa là điều kiện môi trường lý tưởng để cá sinh sản và phát triển

2.2 Sự Phát Triển của Tuyến Sinh Dục

2.2.1 Noãn sào

Theo Xakun & Buskaia (1968), sự phát triển của buồng trứng chia làm 6 giai đoạn như sau:

Bảng 2.1 Sự phát triển của noãn sào qua các giai đoạn

I

- Tuyến sinh dục có dạng sợi mảnh và trong, không thể phân biệt được tế bào sinh dục bằng mắt thường

- Các nguyên bào và noãn bào trong thời kỳ tăng trưởng nguyên sinh

II

- Buồng trứng vẫn trong suốt và hầu như không màu, có thể quan sát trứng dưới kính hiển vi

- Các nguyên bào, một số noãn bào ở đầu thời kỳ lớn nguyên sinh và một số đã hết thời kỳ lớn nguyên sinh

III

- Sự tăng kích thước đáng kể của noãn bào và noãn sào Noãn sào có màu sắc đặc trưng của từng loài

- Các nguyên bào và noãn bào ở thời kỳ lớn nguyên sinh Các noãn bào sinh trưởng và hình thành vỏ trứng

IV

- Noãn sào lớn chiếm phần lớn xoang bụng, các noãn bào đạt kích thước tối đa với mỗi loài

- Các nguyên bào và noãn bào ở thời kỳ lớn nguyên sinh Các noãn bào kết thúc thời kỳ lớn nguyên sinh noãn hoàng

- Các nang đã vỡ, các tế bào trứng

ở giai đoạn II hoặc III tùy loài

2.2.2 Tinh sào

Theo Xakun & Buskaia (1968), tinh sào phát triển qua các giai đoạn sau:

Bảng 2.2 Sự phát triển của tinh sào qua các giai đoạn

2.3 Phương Pháp Làm Tiêu Bản Tuyến Sinh Dục Cá

2.3.1 Mục đích

Quan sát cấu trúc vi thể của tế bào sinh dục

2.3.2 Các bước tiến hành

Gồm 6 bước

− Lấy mẫu

− Cố định mẫu

− Đúc bloc (parafin)

− Cắt tiêu bản

I

- Tuyến sinh dục là hai sợi mảnh

trong suốt chưa phân biệt được giới

tính

- Nhiều nguyên tinh bào nằm riêng biệt nên tinh sào trở nên trong suốt

II

- Tinh sào tăng về kích thước có

màu trắng hơi đục

- Các nguyên tinh bào trong trạng thái sinh sản tạo tinh trùng

III

- Khối lượng tinh sào tăng nhanh

có màu trắng hơi vàng

- Có sự tạo tinh trùng vào cuối giai đoạn khi cắt ngang tinh sào

IV

- Tinh sào có màu trắng sữa, số

lượng tinh trùng lớn

- Kết thúc quá trình tạo tinh trùng, tinh trùng rơi vào tinh nang, có nguyên tinh bào lớn dự trữ cho quá trình tạo tinh trùng lần sau

V

- Tinh sào có màu trắng sữa, mềm,

kích thước giảm dần do sự chảy

của tinh dịch

- Tinh dịch được tạo ra hòa loãng với tinh trùng và gây hiện tượng chảy sẹ

VI

- Tinh sào giảm về kích thước, có

dạng sợi mềm, có màu hồng hoặc

hơi nâu

- Tinh trùng đã chảy ra hết chỉ còn một ít chất lỏng hơi vàng

− Nhuộm

− Quan sát kết quả

2.3.2.1 Lấy mẫu

− Mẫu được lấy ở vị trí đầu, giữa và cuối của tuyến sinh dục

− Mẫu tươi nguyên không bị dập nát

− Kích thước mẫu 3 – 5mm

2.3.2.2 Cố định mẫu

a/ Nguyên tắc

Đảm bảo các tiêu chuẩn sau:

− Vận tốc xuyên thấm cao, ngấm nhanh vào tổ chức, giết nhanh tế bào

− Bảo toàn hoặc thay đổi không đáng kể cấu trúc cơ bản của tổ chức

− Chống nhiễm khuẩn

− Không hòa tan những chất và cấu trúc cần tìm

− Tôn trọng những đặc điểm vật lý cơ bản

− Nhuộm màu tốt

b/ Dung dịch cố định mẫu

− Formol 10%

2.3.2.3 Đúc bloc (Đúc parafin)

− Rửa nước nhiều lần để loại dung dịch cố định

− Rút nước (khử nước)

Mục đích: loại nước chứa trong mẫu vì parafin không tan trong nước

− Dùng cồn Ethylic tuyệt đối khử 4 lần:

+ Lần 1 và 2: 4 giờ/lần

+ Lần 3 và 4: 6 giờ/ lần

− Tẩm parafin có điểm nóng chảy 50 – 600C, thuần nhất, trắng đục, rắn chắc

− Parafin ngấm vào mẫu, loại Ethylic khi ở tinh thể lỏng Do đó cần thao tác trong tủ ấm

2.3.2.4 Cắt tiêu bản

− Bloc được cắt mỏng bằng microtome thành dây ruban, mẫu dày 3 – 4µm

− Chọn mẫu đẹp đặt trên lame, hơ ấm kéo dây ruban thẳng (mẫu thẳng) và dán bằng keo Albumin hoặc Bon Canada

2.3.2.5 Nhuộm tiêu bản hai màu

− Hematoxylin – Eosin

2.3.2.6 Kết quả

− Nhân bắt màu tím đậm (màu của Hematoxylin)

− Tế bào bắt màu tím nhạt (màu của Hematoxylin)

− Noãn hoàng bắt màu hồng cam (màu của Eosin)

− Tinh tử và tinh trùng bắt màu tím đậm (màu của Hematoxylin)

2.4 Chất Kích Thích Sinh Sản Trên Cá

Về mặt lý thuyết có thể sử dụng các nguồn sau để kích thích cá sinh sản

2.4.1 GtH (Gonadotropin Hormone, hormone kích dục) ngoại sinh

2.4.1.1 Não thùy (pituitary)

Trong não thùy cá xương hiện diện đồng thời cả hai yếu tố tương tự như FSH (Follicle Stimulating Hormone, hormone kích thích nang) và LH (Luteinizing Hormone, hormone hoàng thể hóa) của động vật có vú FSH thúc đẩy noãn bào lớn lên và kích thích nang trứng hoạt động Còn LH kích thích tố sinh sản hoàng thể hóa gây ra sự rụng trứng và biến nang trứng thành thể vàng (Nguyễn Tường Anh, 1999)

Tiêm não thùy là tiêm chất chiết thô của não thùy cá vào cơ hay xoang thân cá được kích thích sinh sản

Não thùy được lấy từ những cá thuộc các loài: chép, trắm, mè, đã thành thục còn tươi sống Não thùy cá chép được coi là chế phẩm kích dục tố (KDT) mạnh cho nhiều loài cá, kể cả các đối tượng khác họ và cả các loài cá biển (Blanc và Abraham, 1968 – trích bởi Nguyễn Tường Anh, 1999)

Hoạt tính của não thùy phụ thuộc tuổi, phái tính, tình trạng thành thục của cá, phương pháp thu và cách bảo quản Hàm lượng não thùy cá thay đổi theo mức độ thành thục của tuyến sinh dục (Burlacov và Zolotrillski, 1977) Theo Eskin (1968) thì

ở động vật có vú hàm lượng FSH chiếm đa số còn LH chỉ hiện diện một phần nhỏ trong tuyến yên Đối với cá thì ngược lại (Hoar, 1965 – trích bởi Lê Đức Lợi, 1993)

2.4.1.2 HCG (Human Chorionic Gonadotropin)

HCG có tên gọi kích dục tố màng đệm hoặc kích dục tố nhau thai, đã được Zondec và Aschheim phát hiện vào năm 1927 trong nước tiểu phụ nữ mang thai hoặc nhau thai HCG được đo bằng đơn vị quốc tế (IU), HCG có thể sử dụng đơn độc đối với nhiều loài cá để gây rụng trứng và tạo tinh HCG thường được pha với nước cất hoặc nước muối sinh lý để tiêm cho cá như: các loài thuộc họ cá chép, cá trê, cá vược Liều lượng HCG được sử dụng gây rụng trứng và tạo tinh cho một số loài khoảng 1000 IU/kg trọng lượng, có thể tiêm một liều hoặc một liều sơ bộ và một liều quyết định (Nguyễn Tường Anh, 1999)

HCG là một glycoprotein tan trong nước HCG thường được dùng do tác động giống LH và FSH – KDT của động vật hữu nhủ

Ngày nay, HCG đã được sử dụng rộng rãi để kích thích các loài cá sinh sản nhân tạo

2.4.2 GnRH (Hormone kích thích tiết KDT – GnRH) hay LH-RH tổng hợp

GnRH (Gonadotropin Releasing Hormone) được sản xuất ra từ vùng dưới đồi thị (Hypothalamus) Tác động của GnRH là kích thích sự sản sinh hormone kích dục

hay KDT (Gonadotropin Hormone, GtH) Đó là một decapeptide (10 acid amin) còn gọi là LH-RH (Luteinizing Hormone-Releasing Hormone)

Từ các GnRH tự nhiên, người ta có thể tổng hợp những chất tương tự (GnRHa, a – analog) có hoạt tính cao để dùng trong thực tiễn sản xuất GnRHa tổng hợp có thành phần các acid amin trong chuỗi peptide được thay đổi Các chất tổng hợp này thường chỉ có 9 acid amin Nhờ sự thay thế các acid amin tại một số vị trí mà phân tử GnRH ít bị phân giải bởi các enzym, nên hoạt tính được tăng lên gấp bội

Chất đồng dạng siêu hoạt (Superactive Analogue) des-Gly10 {D-Ala6}LH-RH ethylamide hay LH-RHa có hoạt tính cao hơn và có tác động kéo dài hơn trong việc kích thích giải phóng KDT so với LH-RH, dùng để tiêm một lần hay hai lần để kích thích sự rụng trứng và sinh sản ở cá

2.4.3 GRIF (Gonadotropin Release Inhibitory Factor)

Ở cá, GRIF có thể là Dopamine Dopamine hoạt động như một chất ức chế giải phóng KDT mà sự giải phóng này được kích thích bởi GnRH và dường như tác động trực tiếp lên não thùy Do đó, khi sử dụng LH-RHa đơn độc để kích thích cá sinh sản sẽ gặp nhiều khó khăn

Phương pháp Linpe: tiêm kết hợp GnRH với chất kháng Dopamine vào cơ hay xoang thân cá được kích thích sinh sản

Các chất kháng Dopamine (Domperidone, Pimozide, Reserpine) có tác động ngăn chặn sự tổng hợp Dopamine, ngăn chặn sự tổng hợp Dopamine với chất tiếp nhận nó (D-2 type Dopamine Receptors) hay ngăn chặn tác động ức chế của Dopamine với sự giải phóng KDT

Theo Lin và ctv.,1988 cho rằng Domperidone (DOM) là một chất đối kháng mạnh của Dopamine (DA) đã gây được cả sự rụng trứng ở cá chép (trích bởi Nguyễn Tường Anh, 1999) Hiệu quả của việc tiêm LH-RHa kết hợp DOM được xem là tối hảo khi áp dụng trên cá vì không gây ảnh hưởng phụ và giảm tỷ lệ chết cá khi sinh sản

2.4.4 Cơ chế tác động của hormone kích dục

KDT được vận chuyển đến cơ quan đích, tuyến sinh dục Ở đây, đến lượt nó lại kích thích sự sản xuất các hormone sinh dục (Gonadal Hormone, Sexual Hormone) có bản chất steroid Các hormone này, ở cá đực là Androgens (Testosterone), ở cá cái là Estrogens và Progesterone, là các chất trung gian (Mediators) của sự phát triển tuyến sinh dục (TSD)

Ở cá cái, hai giai đoạn của quá trình phát triển TSD chịu sự kiểm soát của hormone là giai đoạn phát sinh noãn hoàng, thành thục và đẻ của cá

Trong giai đoạn phát sinh noãn hoàng, KDT tác động lên các mô nội tiết của buồng trứng để tổng hợp và tiết ra Estrogen Estrogen kích thích sự tổng hợp chất noãn hoàng hay tiền chất của nó trong gan Các chất này được đưa vào tuần hoàn máu để sau đó được hấp phụ một cách đặc hiệu bởi các noãn bào

Trong giai đoạn thành thục, KDT của não thùy tác động lên các tế bào nang trứng để tổng hợp nên các hormone tương tự Progesterone là các steroid gây chín (Maturation Inducing Steroids, MIS), hormone này tác động lên bề mặt noãn bào để hoạt hóa yếu tố gây chín (Maturation Promoting Factor, MPF), có tác động làm tan túi mầm (tan màng nhân) và phân chia giảm nhiễm cho ra noãn bào thành thục sẵn sàng cho sự thụ tinh

Các kích thích môi trường

Progesterone Estrogens

Sự phát sinh noãn hoàng Các tiền chất noãn hoàng

III VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.1 Thời Gian và Địa Điểm Nghiên Cứu

Đề tài được tiến hành từ ngày 15/03/2005 đến ngày 15/07/2005 tại Trại Thực Nghiệm và phòng thí nghiệm Khoa Thủy Sản trường Đại Học Nông Lâm, Tp HCM

3.2 Vật Liệu Thí Nghiệm

− Kính hiển vi, kính lúp, lam, đĩa petri, lọ thủy tinh, kim tiêm, kéo, …

− Giấy kẻ ô li, cân điện, cân tiểu li của Trung Quốc với độ chính xác mg

− Formol, hóa chất cố định tuyến sinh dục

− Giai, bể xi-măng, …

3.3 Phương Pháp Thu Mẫu

Định kỳ mỗi tháng thu mẫu ngẫu nhiên 1 lần, tại các địa điểm nơi cá sinh sống tự nhiên thông qua ngư dân đánh bắt ở Tiền Giang, Bến Tre và tại chợ đầu mối

ở TPHCM

Mỗi đợt thu từ 20 – 30 cá sống

Xử lý mẫu chia theo nhóm kích thước để khảo sát sức sinh sản của cá

Chia làm 4 nhóm:

− Nhóm 1: 8,0 – 9,9cm

− Nhóm 2: 10,0 – 11,9cm

− Nhóm 3: 12,0 – 13,9cm

− Nhóm 4: 14,0 – 15,9cm

3.4 Phương Pháp Nghiên Cứu Một Số Chỉ Tiêu Sinh Học

3.4.1 Mô tả hình dạng bên ngoài cá

Quan sát về màu sắc, đầu, mõm, vây, vẩy

Xác định các kích cỡ (cm):

+ L: chiều dài tổng cộng + T: chiều cao thân

+ H: chiều cao thân lớn nhất + Lo: chiều dài chuẩn

3.4.2 Đặc điểm dinh dưỡng

Tiến hành khảo sát hệ thống tiêu hóa của 30 mẫu cá:

− Cơ quan bắt mồi: xem hình thái bên ngoài miệng, răng, lưỡi cá

− Bộ máy tiêu hoá: giải phẫu tại nơi đánh bắt thu mua, lấy mẫu ruột và dạ

dày cá mang về phòng thí nghiệm quan sát

− Xác định tỷ lệ chiều dài ruột (Li)/ chiều dài chuẩn (Lo)

+ Chiều dài ruột (Li): được tính từ phần đầu thực quản đến phần cuối của

ruột, đơn vị cm

+ Chiều dài chuẩn (Lo): được tính từ đầu mõm đến đuôi (phần hết vảy),

đơn vị cm

− Lập tỷ số Li/Lo để xếp loại tính ăn của cá:

+ Nếu Li/Lo <1: cá ăn động vật

+ Nếu Li/Lo> 3: cá ăn thực vật

+ Nếu 1< Li/Lo<1,5: cá ăn tạp thiên về động vật

+ Nếu 1,5<Li/Lo<3: cá ăn tạp thiên về thực vật

− Xác định thành phần thức ăn trong dạ dày bằng mắt thường, kính lúp, kính

hiển vi

3.4.3 Khảo sát đặc điểm sinh sản

3.4.3.1 Xác định tổ chức học của noãn sào và tinh sào

− Tiến hành thu mẫu 25 – 30 con mỗi tháng một lần tại nơi đánh bắt

− Giải phẫu lấy tuyến sinh dục, quan sát hình thái bên ngoài bằng mắt

thường

− Gửi mẫu tuyến sinh dục đến phòng Giải Phẫu Bệnh Lý của bệnh viện Từ

Dũ làm tiêu bản, để xác định các giai đoạn thành thục của cá dưới kính hiển vi

3.4.3.2 Theo dõi sự phát triển của phôi

Ngay sau khi gieo tinh nhân tạo cho cá, chúng tôi thu trứng để theo dõi sự phát triển của phôi Chúng tôi dùng kính hiển vi để quan sát Thời gian giữa hai lần quan sát cách nhau hai giờ Xác định thời gian nở của trứng được tính từ khi trứng thụ tinh đến khi trứng nở đồng loạt

3.4.3.3 Xác định hệ số thành thục (HSTT)

Khối lượng tuyến sinh dục là một trong những chỉ tiêu thiết yếu để giải thích mức độ chín muồi của các sản phẩm sinh dục và hệ số thành thục thường được sử dụng nhiều trong các công trình nghiên cứu hiện nay Hệ số này là tỷ lệ phần trăm của tuyến sinh dục trên khối lượng thân cá

Mỗi tháng thu 25 – 30 mẫu, giải phẫu lấy tuyến sinh dục cân trọng lượng Đơn vị g

Cân trọng lượng cá sau khi đã bỏ nội quan (Po) Đơn vị g

Áp dụng công thức tính HSTT:

HSTT (%) = (Ptsd/Po) ×100 Ptsd: trọng lượng tuyến sinh dục (g)

Po: trọng lượng cá bố mẹ bỏ nội tạng (g)

3.4.3.4 Xác định sức sinh sản (SSS)

Với 25 – 30 mẫu cá trên chọn lấy buồng trứng

Để tính được SSS tuyệt đối chúng tôi tiến hành giải phẫu cá, đếm trứng Lấy ngẫu nhiên một mẫu trên bất kỳ vị trí nào đó của buồng trứng và đếm số trứng trong mẫu bằng kính lúp

+ SSS tuyệt đối (trứng) = Số lượng trứng trong mẫu × trọng lượng buồng trứng

b/ SSS tương đối

SSS tương đối là số trứng trong noãn sào trên một đơn vị trọng lượng

+ SSS tương đối (trứng/g thể trọng) =

3.4.4 Phương pháp đo đạc

Sử dụng giấy kẻ ô li để đo các chỉ tiêu độ dài (cm) như: chiều dài tổng cộng (L), chiều dài chuẩn (Lo), chiều cao thân (H), chiều dài đầu (T), chiều dài ruột (Li)

3.5 Kỹ Thuật Sản Xuất Giống

3.5.1 Chọn cá bố mẹ

Chọn những con khỏe mạnh, không bị dị hình, dị tật hoặc sây sát, bụng cá to chứa đầy trứng Sau đó vận chuyển cá từ nơi thu mua về trại Thực Nghiệm Thủy Sản

3.5.3 Kiểm tra độ thành thục của cá

Công việc kiểm tra được thực hiện định kỳ 2 – 3 tuần/lần thông qua biểu hiện hình dạng bên ngoài gai sinh dục, bụng cá căng to ửng vàng,

3.5.4 Kỹ thuật cho cá sinh sản

3.5.4.1 Chọn cá sinh sản

Khi cho cá sinh sản nên chọn những cá bố mẹ thành thục tốt, cá khỏe mạnh, không bị bệnh tật

− Cá cái: chọn cá bụng to, mềm, da bụng mỏng, đặc biệt màu sắc bụng cá ửng vàng cam của trứng Gai sinh dục sưng to và ửng hồng

− Cá đực: chọn cá to khỏe, gai sinh dục to và nhọn, có màu hồng đỏ

SSS tuyệt đốiTrọng lượng cá

3.5.4.2 Bố trí sinh sản

a/ Cho cá sinh sản theo hình thức sinh sản tự nhiên:

Sau khi tiêm kích dục tố HCG liều lượng 5500 IU/kg cá cái, cá được cho vào bể đẻ và kích thích nước cho cá tự bắt cặp sinh sản Tỷ lệ đực cái là 1:1

b/ Cho cá sinh sản theo hình thức gieo tinh nhân tạo:

Sử dụng hình thức gieo tinh nhân tạo bán khô

Các bước tiến hành:

+ Tiêm kích dục tố

Sử dụng HCG với phương pháp tiêm ba lần:

• Lần 1: 500 IU/kg cá cái

• Lần 2: 1000 IU/kg cá cái

• Lần 3: 5000 IU/kg cá cái

- Cá đực chỉ tiêm một lần ở thời điểm tiêm liều quyết định cho cá cái, liều tiêm 2000 IU/kg cá đực

- Sau mỗi lần tiêm phải kiểm tra độ thành thục cũng như khả năng rụng trứng của cá Khoảng cách giữa hai lần tiêm dao động 12 – 24 giờ

- Thời gian hiệu ứng tính từ khi tiêm liều quyết định đến khi cá rụng trứng đồng loạt

+ Vuốt trứng gieo tinh

- Giải phẫu cá đực lấy tinh trước khi tiến hành vuốt trứng

- Vuốt trứng: cá cái lau khô và vuốt trứng nhẹ nhàng vào chén nhỏ

- Nghiền tinh: cho nước muối sinh lý vào cối tinh đã nghiền, nhanh tay đổ vào thau trứng đã vuốt

- Gieo tinh: dùng lông gà khuấy đều tinh và trứng, sau đó khử tính dính của trứng bằng tanin

+ Theo dõi các chỉ tiêu sinh sản

- SSS thực tế tương đối: là số trứng cá đẻ ra trên một đơn vị trọng lượng cá cái (Pravdin, 1963)

SSS thực tế tương đối(trứng/g) =

- SSS thực tế: là tổng số trứng cá đẻ ra ở mỗi lần sinh sản, bằng cách đếm tổng số lượng trứng cá đẻ ra

SSS thực tế = (A × C)/B (trứng)

A (g): trọng lượng trứng đã được vuốt

B (g): trọng lượng mẫu được lấy từ số trứng đã được vuốt

C (trứng): số lượng trứng có trong mẫu

- Xác định HSTT cá đực

HSTT (%) = (Ptsd/Po) × 100

Po (g): trọng lượng cá bỏ nội tạng Ptsd (g): trọng lượng tuyến sinh dục

3.5.5 Kỹ thuật ấp trứng

− Trứng khử dính ấp trong bình weis Trứng dính trên giá thể ấp trong bể composite

- Theo dõi sự phát triển của phôi để xác định thời gian nở

- Đo nhiệt độ nước

- Kết quả ấp trứng:

Tỉ lệ thụ tinh (%) = × 100

Xác định tỉ lệ thụ tinh sau 6 – 7 giờ kể từ thời điểm bắt đầu cho trứng vào ấp,

vì lúc này trứng ở giai đoạn phôi vị Trứng hư có màu trắng đục

Tỉ lệ nở (%) = × 100

3.5.6 Ương cá bột

Cá sau khi nở đưa vào bể composite Tùy theo số lượng cá nở thu được sau mỗi lần ấp mà bố trí mật độ ương thích hợp

Chăm sóc cá bột: mỗi ngày thay nước 2 lần vào buổi sáng và buổi chiều, chỉ thay 1/3 lượng nước Thức ăn sử dụng cho cá là Infusoria, cho cá ăn 2 lần/ngày (sáng và chiều)

SSS thực tếTrọng lượng cá

Số trứng thụ tinhSố trứng thu được

Số cá nởSố trứng thụ tinh

Theo dõi các chỉ tiêu môi trường nước trong bể ương: pH, nhiệt độ, DO

3.6 Phân Tích Thống Kê

Giá trị trung bình về tăng trưởng, hệ số thành thục, sức sinh sản qua các tháng khảo sát được xử lý bằng phần mềm Excel

Phân tích thống kê so sánh các chỉ tiêu sinh học sinh sản và ương nuôi bằng chương trình Statgraphics 7.0

IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

Hình 4.1 Cồn Tàu – lưu vực sông Tiền, xã Tam Hiệp, huyện Bình Đại, tỉnh Bến Tre

– một trong những nơi sinh sống của cá bống dừa

4.2 Hình Thái

Cá có màu đen tối hay đen bóng, đầu to, mõm tù, vây đuôi tròn dài, cạnh trên của gốc vây đuôi có một đốm đen to và đốm vàng bao xung quanh đốm đen, bụng cá xám đen với nhiều đốm đen nhỏ li ti, lỗ sinh dục nằm sát hậu môn

Thân có dạng trụ thon dài, vảy nhỏ phủ kín khắp cơ thể Khoảng cách giữa hai vây lưng ngắn hơn chiều dài gốc vây lưng thứ nhất, khởi điểm của vây lưng thứ nhất ngang với vảy đường bên thứ 12 – 15 Hai vây bụng tách rời nhau, vây ngực nằm giữa phần lưng và phần bụng

Khi cá đến giai đoạn thành thục phần bụng của cá đực có màu xám nhạt, mấu gai tại lỗ sinh dục có dạng hình chóp nhọn Phần bụng của cá cái có màu ửng hồng, mấu gai tại lỗ sinh dục có dạng hình quạt tròn

Hình 4.2 Hình dạng ngoài của cá bống dừa

A: Cá đực B: Cá cái

4.3 Phân Loại

Qua khảo sát đặc điểm hình thái trên và kết hợp với tài liệu của Trương Thủ Khoa và Trần Thị Thu Hương (1993), Mai Đình Yên và ctv (1992), chúng tôi cho rằng cá bống dừa thuộc:

4.4 Đặc Điểm Dinh Dưỡng

4.4.1 Cấu tạo ngoài hệ thống tiêu hóa

Để khảo sát đặc điểm dinh dưỡng của cá, chúng tôi tiến hành giải phẫu quan sát cơ quan tiêu hóa và thu được kết quả như sau:

Hình thái giải phẫu hệ thống tiêu hóa của cá bống dừa thứ tự bao gồm xoang miệng, hầu, thực quản, dạ dày, ruột và tận cùng là hậu môn

4.4.1.1 Xoang miệng, hầu

Miệng cá bống dừa rộng, hướng lên trên, hàm dưới của miệng nhô ra Rạch miệng xiên kéo dài đến đường thẳng đứng kẻ qua giữa hai mắt

Trong xoang miệng có nhiều răng kích thước nhỏ, mịn, mọc trên xương hàm có tác dụng bắt giữ mồi

Lưỡi cá có màu hồng, hình dạng lưỡi dài và dẹp, đầu lưỡi tròn

4.1.1.4 Ruột

Ruột nằm sau dạ dày, là ống thẳng có đường kính tương đối nhỏ, vách ruột cũng có các lớp màng và lớp cơ trơn có tác dụng chuyển đổi và hấp thụ thức ăn Tận cùng ruột là hậu môn

4.4.2 Tập tính dinh dưỡng

Quan sát 30 mẫu ruột cá bống dừa được giải phẫu có kích thước từ 3,2 – 6cm cho thấy ruột cá ngắn, trung bình dài 4,46cm

Qua kết quả tỷ lệ chiều dài ruột (Li) trên chiều dài chuẩn (Lo) (Phụ lục 3), chúng tôi nhận thấy tỷ lệ Li/Lo dao động trong khoảng 0,29 – 0,52 Theo Nicolski (1963), tỷ số giữa chiều dài ruột và chiều dài chuẩn nhỏ hơn 1 thuộc những loài cá có ruột ngắn, được xếp vào nhóm cá ăn tạp thiên về động vật

4.4.3 Thành phần thức ăn

Giải phẫu dạ dày của 30 mẫu cá, chúng tôi nhận thấy thức ăn hiện diện trong dạ dày cá bao gồm cua, tôm tép, cá con, ốc nhỏ, … trong các loại thức ăn trên, giáp xác chiếm số lượng nhiều nhất

Tóm lại, từ những kết quả ghi nhận về tỷ lệ chiều dài ruột trên chiều dài chuẩn kết hợp với thành phần thức ăn có trong dạ dày cá, chúng tôi có thể kết luận rằng cá bống dừa thuộc nhóm cá ăn tạp thiên về động vật

4.5 Tương Quan Giữa Chiều Dài và Trọng Lượng

Chiều dài và trọng lượng cơ thể cá cũng như các loài động vật khác đặc trưng cho khả năng sinh trưởng của chúng, liên quan đến quá trình hấp thu chất dinh dưỡng và trao đổi chất trong cơ thể

Sự trao đổi chất và khả năng sinh trưởng bị ảnh hưởng bởi nhiều yếu tố bao gồm yếu tố bên trong (loài cá, tuổi, phái tính, thành thục sinh dục, mức độ dinh dưỡng) và yếu tố bên ngoài (nhiệt độ, ánh sáng, mùa vụ, dòng nước, dưỡng khí)

Sự tương quan giữa chiều dài và trọng lượng có ý nghĩa ở mỗi giai đoạn phát triển của cơ thể có sự gia tăng khác nhau giữa chiều dài và trọng lượng cơ thể Điều này được ghi nhận qua Đồ thị 4.1

Qua kết quả từ Đồ thị 4.1, chúng tôi nhận thấy giữa chiều dài và trọng lượng có mối tương quan tương đối chặt chẽ với nhau (R2 = 0,9838) Với những kết quả đo đạc từ thực tế, chúng tôi nhận thấy khi cá còn nhỏ sự gia tăng về kích thước luôn lớn hơn sự gia tăng về trọng lượng, điều này phù hợp với quy luật tự nhiên, khi cá còn nhỏ, để thích nghi nhanh với môi trường và tránh địch hại chúng phải tăng nhanh về mặt kích thước Khi cá đạt kích cỡ 11,3cm trở lên thì trọng lượng cơ thể sẽ tăng nhanh hơn so với sự gia tăng kích thước vì đó là lúc bắt đầu của sự phát triển tuyến sinh dục và bước vào độ tuổi thành thục, nhằm tích lũy chất dinh dưỡng và năng lượng cho các đợt sinh sản Đây cũng là một trong những đặc trưng phát triển cơ thể của sinh vật nói chung và các loài cá nói riêng

Đồ thị 4.1 Mối tương quan giữa chiều dài và trọng lượng cá bống dừa

4.6 Đặc Điểm Sinh Sản

Sinh sản là chức năng quan trọng để bảo tồn giống nòi, là đặc điểm của cơ thể sống Sinh sản là quá trình sinh lý, sinh hóa vô cùng phức tạp diễn ra trong cơ thể động vật, được bắt đầu từ quá trình tạo ra tế bào sinh dục, quá trình thụ tinh, quá trình hình thành và phát triển cơ thể mới Mỗi loài cá trong quá trình tiến hóa đã hình thành những đặc tính sinh vật học về sinh sản nhất định Để có một cơ sở nền tảng trong việc nghiên cứu cho sinh sản nhân tạo cá bống dừa, chúng tôi tiến hành khảo sát một số đặc điểm sinh học sinh sản của chúng

4.6.1 Phân biệt giới tính

Sự phân biệt giới tính không phải lúc nào cũng dễ dàng Cá đến tuổi thành thục sẽ dễ dàng phân biệt đực cái hơn cá chưa đến tuổi thành thục Qua khảo sát thực tế, chúng tôi có thể đưa ra một số đặc điểm về giới tính như sau:

Bảng 4.1 Đặc điểm phân biệt giữa cá đực và cá cái bống dừa

- Cá có màu nâu đất hoặc đen bóng

- Thân thon dài

- Bụng cá xám với những đốm nhỏ li ti

- Kích thước gai sinh dục nhỏ

- Mấu gai sinh dục có dạng hình chóp

nhọn có màu xám hoặc hồng nhạt

- Cá có màu nâu đất hoặc đen bóng

- Thân tròn và ngắn hơn cá đực

- Bụng cá to tròn có màu ửng vàng

- Kích thước gai sinh dục to

- Mấu gai sinh dục có dạng hình quạt tròn màu hồng nhạt đến ửng đỏ

- Buồng tinh là một đôi có dạng sợi hình

chữ V, rất mảnh có màu trắng đục kích

thước từ 2 – 4cm tùy theo cá lớn nhỏ

- Buồng trứng có dạng hai thùy, căng

to bên trong chứa rất nhiều trứng có màu vàng đến hồng cam tùy theo giai đoạn phát triển

Hình 4.3 Dấu hiệu sinh dục phụ của cá đực và cá cái bống dừa

A: Gai sinh dục cá cái B: Gai sinh dục cá đực

A

B

Hình 4.4 Hình dạng ngoài buồng tinh cá bống dừa

Hình 4.5 Hình dạng ngoài buồng trứng cá bống dừa

Hình 4.6 Vị trí cơ quan sinh dục cá bống dừa

4.6.2 Các giai đoạn phát triển tuyến sinh dục của cá bống dừa

4.6.2.1 Tinh sào

a/ Hình thái bên ngoài

Giai đoạn I: tuyến sinh dục có dạng sợi mảnh trong suốt, kích thước rất nhỏ Mắt thường rất khó phân biệt giới tính Trạng thái như vậy đặc trưng cho những cá chưa thành thục sinh dục

Giai đoạn II: tinh sào tăng dần về kích thước, do sự sinh sản của tế bào sinh dục, gia tăng về mặt số lượng Về màu sắc, tinh sào hơi đục hơn và có màu hồng nhạt

do sự phân bố của các mạch máu

Giai đoạn III: tinh sào có kích thước và khối lượng tương đối lớn, sợi tinh lúc này đã đục hẳn

Giai đoạn IV: tinh sào lúc này đã đạt kích thước tới hạn và có màu trắng sữa Giai đoạn V: tinh sào kích thước giảm dần do sự chảy tinh dịch và có màu trắng sữa

Giai đoạn VI: tinh sào giảm nhanh về kích thước do tinh trùng trong các ống dẫn tinh đã chảy ra hết Tinh sào trở lại màu hồng hoặc hơi nâu

b/ Đặc điểm tổ chức học

Giai đoạn I: trong giai đoạn này các tế bào sinh dục được gọi là nguyên tinh bào đang trong thời kỳ sinh trưởng nguyên sinh Các nhóm tinh bào phase 1 chiếm ưu thế

Giai đoạn II: đặc trưng của giai đoạn phát dục II là sự tồn tại các tế bào sinh dục ở thời kỳ đầu của quá trình tạo tinh trùng tức là nguyên tinh bào đang trong trạng thái sinh sản Vì vậy, giai đoạn này bao gồm tinh bào sơ cấp và tinh bào thứ cấp, trong đó tinh bào thứ cấp chiếm đa số Ngoài ra, quan sát tiêu bản qua kính hiển vi chúng tôi thấy bắt đầu xuất hiện rải rác những tinh tử nhỏ nhuộm màu tím

Hình 4.7 Tinh sào cá bống dừa giai đoạn I, II (X = 10 × 10)

A: Tinh nang giai đoạn I B: Tinh nang giai đoạn II

Giai đoạn III: trong tinh sào giai đoạn III ngoài các nguyên tinh bào, còn có các tinh bào bậc 1, bậc 2 và các tinh tử hay còn gọi là tiền tinh trùng Tinh tử chiếm

đa số và xuất hiện một số tinh trùng

Giai đoạn IV: giai đoạn này đặc trưng bằng sự kết thúc quá trình tạo tinh trùng Các tinh trùng đã chín được giải phóng ra khỏi nang chứa và nằm tự do trong khoang ống dẫn tinh sẵn sàng cho việc phóng tinh Vì vậy, trong buồng tinh xuất hiện phần lớn tinh trùng và còn một ít tinh tử

Giai đoạn V: đặc trưng cho trạng thái sinh sản của cá Lúc này chỉ có sự hiện diện của tinh trùng trong buồng tinh

A B

Giai đoạn VI: tinh sào chỉ còn những nang rỗng chứa rất ít tinh trùng còn sót lại Trong tinh sào lại bắt đầu thời kỳ sinh sản của các nguyên tinh bào, một đợt tạo tinh trùng mới

Hình 4.8 Tinh sào cá bống dừa giai đoạn III (X = 10 × 10)

Hình 4.9 Tinh sào cá bống dừa giai đoạn IV (X = 10 × 40)

Hình 4.10 Tinh sào cá bống dừa giai đoạn V (X = 10 × 4)

Hình 4.11 Tinh sào cá bống dừa giai đoạn VI (X = 10 × 40)

A: Tinh nang rỗng với một ít tinh trùng còn sót lại

A

4.6.2.2 Noãn sào

a/ Hình thái bên ngoài

Giai đoạn I: tuyến sinh dục có dạng sợi, rất mảnh và nhỏ, không màu, trong suốt, rất khó nhìn bằng mắt thường Giai đoạn này cá chưa thành thục nên cũng khó phân biệt về giới tính

Giai đoạn II: noãn sào vẫn còn trong suốt và hầu như không màu, kích thước noãn sào lúc này tương đối lớn hơn có thể nhìn thấy dễ dàng bằng mắt thường Nếu quan sát kỹ bằng kính lúp có thể thấy những mạch máu nhỏ phân bố trên bề mặt của noãn sào

Giai đoạn III: noãn sào tăng kích thước đáng kể, trứng trở nên đục có màu vàng nhạt

Giai đoạn IV: noãn sào rất to chiếm phần lớn trong xoang bụng Nếu cắt noãn sào làm đôi, dùng que tăm hay kéo nhỏ tách nhẹ trứng rời ra Hạt trứng có dạng hình cầu căng tròn, có màu hồng cam

Giai đoạn V: do các noãn bào đã được giải phóng khỏi nang và mô liên kết,

vì vậy khi vuốt bụng cá cái trứng chảy ra từ lỗ sinh dục một cách dễ dàng Hạt trứng lúc này có màu vàng trong

Giai đoạn VI: noãn sào kích thước nhỏ lại, nhão và có màu đỏ bầm

b/ Đặc điểm tổ chức học

Giai đoạn I: thời kỳ của những nguyên bào còn non, noãn bào phase 1, đây là những tế bào sinh dục khởi nguồn của những tế bào trứng Qua tiêu bản dưới kính hiển vi là những tế bào nhuộm màu tím kích thước nhỏ, nguyên sinh chất là một khối đồng nhất, nhân còn rất to Ngoài những noãn bào thuộc phase 1 còn có một ít noãn bào phase 2

Giai đoạn II: các noãn bào đang ở thời kỳ tăng trưởng nguyên sinh chất, noãn bào thuộc phase 2 Quan sát tiêu bản chúng tôi nhận thấy noãn bào phase 2 đã có kích thước lớn hơn, nhân nhỏ hơn nhân của noãn bào phase 1 nhưng không đáng kể, đặc biệt có sự xuất hiện không bào ở ngoài biên Trên lát cắt noãn sào nhìn dưới kính hiển vi, ngoài các noãn bào phase 2 chiếm ưu thế còn có sự xen kẻ rải rác một ít noãn bào phase 3

Giai đoạn III: các noãn bào đầu phase 3 bắt đầu xuất hiện các hạt noãn hoàng ngoài biên, không bào dịch chuyển dần vào bên trong Ở cuối phase 3, sự tích lũy noãn hoàng có xu hướng phát triển mạnh, kích thước noãn bào tăng lên rõ rệt, nhân nhỏ lại và nằm ở trung tâm trứng Trên tiêu bản chúng tôi nhận thấy có sự phát triển không đồng bộ, cùng với noãn bào phase 3 còn có noãn bào phase 1, phase 2,