1. Trang chủ
  2. » Giáo Dục - Đào Tạo

Nghiên cứu tác dụng giảm đau, chống viêm của cắn dịch chiết ethylacetat nho rừng (vitis heyneana roem schult , họ nho vitaceae) thực nghiệm

66 346 1

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 66
Dung lượng 1,29 MB

Nội dung

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HUYỀN TRANG NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG GIẢM ĐAU, CHỐNG VIÊM CỦA CẮN DỊCH CHIẾT ETHYL ACETAT NHO RỪNG (VITIS HEYNEANA ROEM & SCHULT., HỌ NHO VITACEAE) THỰC NGHIỆM LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC HÀ NỘI 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HUYỀN TRANG NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG GIẢM ĐAU, CHỐNG VIÊM CỦA CẮN DỊCH CHIẾT ETHYL ACETAT NHO RỪNG (VITIS HEYNEANA ROEM & SCHULT., HỌ NHO VITACEAE) THỰC NGHIỆM LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: DƢỢC LÝ – DƢỢC LÂM SÀNG MÃ SỐ: 8720205 Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS Đỗ Thị Nguyệt Quế PGS.TS Đỗ Thị Hà HÀ NỘI 2018 LỜI CẢM ƠN Với tất lòng kính trọng u mến tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Đỗ Thị Nguyệt Quế, môn Dược lực, trường Đại học Dược Hà Nội, người thầy tận tình hướng dẫn, bảo, động viên, khích lệ tơi suốt q trình học tập nghiên cứu để tơi hồn thiện luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn PGS.TS Đỗ Thị Hà NCS Phùng Thanh Long, khoa Hóa thực vật, Viện Dược liệu, bảo giúp đỡ tơi nhiều suốt q trình nghiên cứu hồn thiện luận văn Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn tới tồn thể thầy cơ, anh chị kỹ thuật viên, em sinh viên, bạn học viên nghiên cứu khoa học môn Dược lực, trường Đại học Dược Hà Nội bên tôi, giúp đỡ suốt trình tơi thực hồn thiện luận văn Cuối xin gửi lời cảm ơn chân thành tới gia đình, bạn bè đồng hành, chia sẻ với gần hai năm học tập nghiên cứu mái trường Dược thân yêu! Hà Nội, ngày 31 tháng năm 2018 MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng TỔNG QUAN Tổng quan đau 1.1 Vài nét sinh lý đau 1.2 Thuốc giảm đau Tổng quan viêm 2.1 Khái niệm nguyên nhân gây viêm .5 2.2 Vai trò cyclooxygenase (COX), lypooxygenase (LOX) chất trung gian hóa học đáp ứng viêm 2.3 Thuốc chống viêm 11 Một số mơ hình thực nghiệm nghiên cứu tác dụng giảm đau, chống viêm 13 3.1 Một số mơ hình thực nghiệm nghiên cứu tác dụng giảm đau 13 3.2 Một số mơ hình thực nghiệm nghiên cứu tác dụng chống viêm 14 Tổng quan dƣợc liệu nghiên cứu 16 4.1 Đặc điểm thực vật Nho rừng (Vitis heyneana Roem & Schult.) 16 4.2 Thành phần hóa học Nho rừng (Vitis heyneana Roem & Schult.) 17 4.3 Tác dụng sinh học số loài chi Vitis Nho rừng (Vitis heyneana Roem & Schult.) 19 Chƣơng ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 25 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 27 2.2.1 Đánh giá tác dụng giảm đau cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng 27 2.2.2 Đánh giá tác dụng chống viêm cấp cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng 28 2.2.3 Đánh giá tác dụng chống viêm mạn cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng 30 2.2.4 Đánh giá tác dụng ức chế cyclooxygenase (COX - 2) tế bào trơn động mạch 31 2.2.5 Xử lý số liệu 33 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 34 3.1 Tác dụng giảm đau ngoại vi cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng mơ hình gây đau quặn acid acetic .34 3.2 Tác dụng chống viêm cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng 35 3.3 Tác dụng ức chế cyclooxygenase (COX-2) tế bào SMC cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng 41 Chƣơng BÀN LUẬN .43 4.1 Về tác dụng giảm đau cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng 43 4.2 Về tác dụng chống viêm cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng .44 4.3 Về khả ức chế enzym Cyclooxygenase (COX) tế bào SMC cắn dịch chiết ethylacetat Nho rừng 49 KẾT LUẬN 51 Về tác dụng giảm đau, chống viêm 51 Về tác dụng ức chế COX-2 tế bào SMC 51 KIẾN NGHỊ 52 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT COX (1,2) : Enzym cyclooxygenase (1, 2) DPPH : 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl GC : Glucocorticoid HeLa : Tế bào ung thƣ cổ tử cung HepG2 : Tế bào ung thƣ gan ngƣời IASP : Hiệp hội quốc tế nghiên cứu đau IL : Interleukin iNOS : Nitric oxyd synthase INF : Interferon LCT : Leucotrien LPS : Lipopolysaccharid NO• : Gốc nitric oxyd tự NSAIDs : Thuốc chống viêm không steroid PG : Prostaglandin PGI : Protacyclin SMC: Tế bào trơn động mạch TNF : Yếu tố hoại tử u DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU STT Tên bảng Sơ đồ quy trình thí nghiệm nghiên cứu tác dụng giảm đau cắn dịch chiết ethyl acetat nho rừng Sơ đồ 2.1 mơ hình gây đau quặn acid acetic Trang 28 Sơ đồ quy trình nghiên cứu tác dụng chống viêm Sơ đồ 2.2 cấp cắn dịch chiết ethyl acetat nho rừng mơ hình gây viêm carrageenin 29 Sơ đồ quy trình nghiên cứu tác dụng chống viêm Sơ đồ 2.3 cấp cắn dịch chiết ethyl acetat nho rừng mơ hình gây viêm màng bụng 30 Bảng 3.1 Số đau quặn lô chuột giai đoạn sau gây đau acid acetic 34 Bảng 3.2 Tỉ lệ phù chân chuột cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng 36 Bảng 3.3 Tỉ lệ ức chế phù chân chuột cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng 37 Bảng 3.4 Ảnh hƣởng cắn dịch chiết ethylacetat Nho rừng lên thể tích dịch rỉ viêm 38 Bảng 3.5 Ảnh hƣởng cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng đến số lƣợng bạch cầu dịch rỉ viêm 38 Bảng 3.6 Ảnh hƣởng cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng đến hàm lƣợng protein dịch rỉ viêm 39 10 Bảng 3.7 Khối lƣợng u hạt sau cân ƣớt 40 11 Bảng 3.8 Khối lƣợng u hạt sau cân khô 41 Bảng 3.9 Kết thử tác dụng ức chế COX-2 in vitro tế bào SMC cắn dịch chiết ethyl acetat phân đoạn khác Nho rừng (Vitis heyneana Roem & Schult.) 42 12 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ STT Tên Sơ đồ đƣờng dẫn truyền cảm giác đau vị trí tác Hình 1.1 dụng thuốc giảm đau Hình 1.2 Hình 1.3 Hình 1.4 Hình 1.5 CTCT số hợp chất stilbenoid thuộc V heyneana Hình 1.6 Phản ứng chuyển hóa acid arachidonic dƣới xúc tác enzym COX Phản ứng chuyển hóa acid arachidonic dƣới xúc tác enzym LOX Đặc điểm hình thái Nho rừng (Vitis heyneana Roem.& Schult.) Công thức cấu tạo số hợp chất khác thuộc V heyneana Trang 17 18 19 ĐẶT VẤN ĐỀ Việt Nam nằm vùng khí hậu nhiệt đới ẩm gió mùa, có nguồn tài nguyên thực vật phong phú đa dạng, có nhiều lồi đƣợc sử dụng làm thuốc Việc sử dụng thuốc thực phẩm bảo vệ sức khỏe có nguồn gốc từ thực vật chủ yếu dựa kinh nghiệm dân gian, chƣa có đầy đủ chứng khoa học để chứng minh tác dụng, chế tác dụng, tác dụng không mong muốn cỏ làm thuốc Trong đó, Nho rừng đối tƣợng gần đƣợc quan tâm nhiều Từ lâu, chi Nho Vitis đƣợc sử dụng làm thuốc với nhiều cơng dụng nhƣ: nho leo có đặc tính làm se, mát, dịu da chống viêm sƣng đƣợc sử dụng làm trà chữa bệnh tiêu chảy, kinh nguyệt nhiều xuất huyết tử cung, làm thuốc chữa loét miệng thuốc thụt rửa âm đạo nhiều mủ Lá nho leo chữa bệnh giãn tĩnh mạch, bệnh trĩ mao mạch yếu Nhựa cành đƣợc dùng làm thuốc rửa mắt Quả nho khơ có tác dụng long đờm, làm dịu ho [5] Hiện có số nghiên cứu nhà khoa học giới thành phần hóa học, tác dụng sinh học chi Nho, nhƣng chủ yếu V vinifera, số nghiên cứu tiến hành loài V amurensis, V thunbergii Cây Nho rừng (hay gọi nho lơng, nho năm góc, nho ngũ giác, nho tía), tên khoa học Vitis heyneana Roem & Schult., họ Nho Vitaceae [5], [7] Trong dân gian, rễ Nho rừng đƣợc dùng để ăn với trầu dùng trị viêm phế quản; làm thuốc lợi tiểu phối hợp với rễ dứa hãm sắc uống trị bệnh lậu Vỏ rễ đƣợc dùng trị kinh nguyệt khơng bạch đới, dùng ngồi điều trị chứng viêm đau nhƣ đòn ngã tổn thƣơng, gân cốt tê đau; tồn dùng trị bệnh sởi; dùng trị bệnh lỵ, mụn nhọt sƣng lở; số tác dụng khác [7] Trên giới nghiên cứu tác dụng Nho rừng ít, Việt Nam chƣa có nghiên cứu tác dụng lồi Vì vậy, để góp phần xây dựng sở liệu Nho rừng, sử dụng làm thuốc, thực đề tài “Nghiên cứu tác dụng giảm đau, chống viêm cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng (Vitis heyneana Roem & Schult., họ Nho Vitaceae) thực nghiệm” Với hai mục tiêu nhƣ sau: Đánh giá tác dụng giảm đau, chống viêm cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng thực nghiệm Đánh giá tác dụng ức chế enzym cyclooxygenase in vitro cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng dung dịch acid acetic 1% tác dụng tƣơng đƣơng aspirin 240 mg/kg (p >0,05) Tác dụng giảm đau cắn dịch chiết ethylacetat Nho rừng liều 150 mg/kg liều 450 mg/kg tƣơng đƣơng (p >0,05) Nghiên cứu Bakhta cộng tác dụng giảm đau cao chiết ethanol V vinifera loài thuộc chi nho Vitis mơ hình gây đau quặn acid acetic 0,6% (10ml/kg),cho thấy với mức liều 200, 400 mg/kg mẫu thử làm giảm số đau so với lô chứng lần lƣợt 60,5% 65,5% [18] Từ nghiên cứu dựa kết thực nghiệm đạt đƣợc, ta thấy cắn dịch chiết ethylacetat Nho rừngtác dụng giảm đau mơ hình gây đau quặn acid acetic 1% hoàn toàn phù hợp Nhƣ vậy, kết qủa thực nghiệm chứng minh cắn dịch chiết ethylacetat Nho rừngtác dụng làm giảm đau quặn tốt, đồng thời phù hợp với kinh nghiệm dân gian sử dụng Nho rừng để điều trị đau bụng kinh, đòn ngã tổn thƣơng, đau nhức xƣơng khớp 4.2 Về tác dụng chống viêm cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng Thành phần hóa học Nho rừng nhóm polyphenol bao gồm flavonoid, stibelnoid… có tác dụng chống viêm mạnh, tác dụng chống viêm cấp chống viêm mạn Trên giới, có số nghiên cứu chứng minh tác dụng chống viêm in vitro, in vivo chi nho [24], [31], [39] Ngoài ra, dân gian Nho rừng đƣợc dùng để chữa bệnh liên quan đến viêm nhƣ viêm phế quản, phong thấp, đòn ngã tổn thƣơng, gân cốt tê đau… [5] Từ sở chúng tơi lựa chọn tìm hiểu tác dụng chống viêm cắn dịch chiết ethylacetat Nho rừng Chúng tiến hành thử tác dụng chống viêm mơ hình gây viêm cấp (gây phù bàn chân chuột carrageenin, gây tràn dịch màng bụng) mơ hình gây viêm mạn (gây u hạt thực nghiệm bông) 44  Tác dụng chống viêm cấp cắn dịch chiết ethyl acetat Nho rừng mơ hình gây phù chân chuột carrageenin Chúng tơi lựa chọn mơ hình gây phù chân chuột carrageenin để đánh giá tác dụng chống viêm cấp So với mơ hình chống viêm cấp bán cấp khác mơ hình gây phù chân chuột nhất, đơn giản, dễ dàng thực phù hợp cho mục đích sàng lọc lẫn nghiên cứu sâu Đây mơ hình đƣợc sử dụng rộng rãi nhiều nghiên cứu giới Việt Nam để đánh giá tác dụng chống viêm Indomethacin có đặc tính kháng viêm bật, đƣợc dùng để điều trị bệnh viêm khớp dạng thấp từ vừa đến nặng, viêm khớp mãn tính, viêm khớp gout cấp, viêm cột sống dính khớp…do indomethacin ức chế không chọn lọc enzym cyclooxygenase (COX), ức chế vận động bạch cầu đa nhân, làm giảm q trình sinh tổng hợp mucopolysaccharides Thuốc có nồng độ dịch khớp tƣơng đƣơng với nồng độ huyết tƣơng vòng sau sử dụng [37] Chúng tiến hành đánh giá tác dụng chống viêm cấp cắn dịch chiết ethylacetat dùng cho chuột cống trắng mức liều 85 mg/kg 250 mg/kg, sử dụng chứng dƣơng indomethacin Kết nghiên cứu bảng 3.2 3.3 cho thấy: Indomethacin thể tác dụng giảm phù chân chuột rõ rệt so với lô chứng thời điểm giờ, giờ, sau gây viêm carrageenin (p < 0,01) Sau gây viêm carrageenin, mức độ phù chân chuột lô uống cắn dịch chiết ethylacetat nho rừng liều 85 mg/kg thời điểm (30,14 ± 2,18) (26,14 ±1,88) khác biệt có ý nghĩa thống kê so với lô chứng ( giờ: 43,11± 4,89 ; giờ: 41,16 ± 4,82); p

Ngày đăng: 14/06/2018, 12:41

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN