Trong c¸c s¾c ký, kü thuËt SKLM lµ phư¬ng ph¸p –Ýt ®ßi hái thiÕt bÞ phøc t¹p nhÊt –c¸ch tiÕn hµnh còng thuéc lo¹i ®¬n gi¶n nhÊt. • SKLM –bæ sung những gi¸ trÞ míi cho c¸c phư¬ng ph¸p s¾c ký, –®ưîc chuyÓn tõ s¾c ký cét sang s¾c ký cét hë, –®Ó t¸ch những lîng nhá hçn hîp c¸c chÊt. • SKLM cã thÓ lµ sù kÕt hîp cña nhiÒu c¬ chÕ s¾c ký kh¸c nhau.
II Sắc ký lớp mỏng Trong sắc ký, kỹ thuật SKLM phơng pháp đòi hỏi thiết bị phức tạp cách tiến hành thuộc loại đơn giản SKLM bổ sung nhng giá trị cho phơng pháp sắc ký, đợc chuyển từ sắc ký cột sang sắc ký cột hở, để tách nhng lợng nhỏ hỗn hợp chất SKLM kết hợp nhiều chế sắc ký khác Một số u điểm SKLM Yêu cầu trang thiết bị cần thiết đơn giản • Cho kÕt qu¶ nhanh, rÊt thn tiƯn cho theo dõi phản ứng, dự đoán nhanh chất Thời gian thực ngắn so với sắc ký cột sắc ký giấy Khá kinh tế nên hiệu thm dò kết nhiều trỡnh khác Vết nhỏ gọn vết sắc ký giấy Tác dụng phân tách đợc rõ rệt phơng pháp sắc ký khác Có thể dùng đợc thuốc thử mạnh C¸c øng dơng cđa SKLM SKLM øng dơng chđ u cho định tính thử độ tinh khiết, bán định lợng định lợng Nguyên tắc SKLM Cũng nh tất phơng pháp sắc ký khác, trinh tách xẩy cho pha động chuyển động qua pha tĩnh Pha tĩnh đợc rải thành lớp mỏng giá đỡ phẳng • Pha ®éng thÊm theo líp máng chđ u dưíi tác dụng lực mao quản Nguyên tắc cđa SKLM Trong qu¸ trinh di chun cđa pha động: nhờ trinh hấp phụ giải hấp phụ đợc lặp lặp lại hệ số phân bố khác mà nhng chất khác di chun theo hưíng chun ®éng (pha ®éng) víi tốc độ khác Kết quả: chất hỗn hợp phân tích vị trí khác mỏng đợc tách riêng Nguyên tắc SKLM Giá đỡ: thờng kính phẳng đợc cắt sẵn Hiện nay, giá đỡ dạng phẳng kim loại (nhôm) hay plastic cho mỏng tráng sẵn Giá đỡ kiểu nµy: – thn tiƯn cho viƯc vËn chun –chia nhá mỏng lớn thành mỏng phù hợp Các đại lợng đặc trng SKLM Tuyến dung môi a Các hệ số đánh giá di chuyển cđa c¸c chÊt: z f HƯ sè di chun R : R f oạn đờng chất tan đợc từ tuyến xuất phát đến tâm vết sắc ký Rf tỷ số gia tốc độ di chuyển chất tan dung môi mỏng m l l z Điểm xuất phát n Các đại lợng đặc trng SKLM a Các hệ số đánh giá di chuyển chÊt: HƯ sè di chun Rf: • Rf chØ có giá trị từ đến - Nếu Rf = 0: chất tan hoàn toàn không di chuyển, - NÕu Rf= 1:chÊt tan di chun cïng tèc ®é víi dung môi không bị chất hấp phụ hấp phụ Còn dùng giá trị hRf: hRf = 100.Rf Các đại lợng đặc trng SKLM a Các hệ số đánh giá di chuyển chất: Hệ số di chuyển Rf: đợc tính Rf 1K. víi Cs K Cm Ws Vm Các yếu tố ảnh hởng đến Rf SKLM chất lợng hoạt tính chất hấp phụ bề dầy lớp mỏng tính chất, thành phần độ tinh khiết pha động độ bão hoà dung môi binh sắc ký phơng pháp khai triển sắc ký tốc độ di chuyển pha động đoạn đờng pha động đợc vị trí đa chất tan lên mỏng lợng mẫu đa lên mỏng ảnh hởng chất tan khác, chất tạo phức, pH, nhiệt độ độ xác phép đo khoảng cách. o mật ®é vÕt b»ng densitometer: KiĨu trun qua : •Cã thĨ phun lên lớp mỏng dung dịch parafin pha ether lớp mỏng trở nên Sau cho bay hết ether, cho vào máy đo mật độ quang ịnh lợng trực tiếp b¶n máng: Xư lý hinh ¶nh víi camera kü tht số: Nhng nm gần đây, việc quét mỏng với hệ thống phân tích hinh ảnh, đặc biệt với CCD camera (Charge-Coupled Device camera) trở nên phổ biến Lợi kỹ thuật có thể: Quét mỏng với vùng rộng Số điểm ảnh lớn với thiết bị kỹ thuật số có độ phân giải ngày cao Các d liệu ảnh đợc xử lý máy tính ịnh lợng trực tiếp mỏng: Xử lý hinh ảnh với máy quét phòng : Các hệ thống phân tích hinh ảnh thờng có giá thành cao, dùng máy quét phòng (scanner) để thu đợc hinh ảnh mỏng Hinh ảnh mỏng đợc: đo kích thớc tay hay tự động chơng trinh đồ hoạ máy tính xử lý với phần mềm chuyên dụng ây phơng pháp thu đợc kết nhanh giá thành thấp o kích thớc vết sắc ký Measure Tool không dïng Color Range. Đo kÝch thíc vÕt s¾c ký b»ng Measure Tools cã sư dơng Color Range Đo tù ®éng diƯn tÝch cđa vÕt b»ng b»ng Magic Wand Tool ... sau: Sắc ký lên Sắc ký xuống Sắc ký liên tục Sắc ký lặp Sắc ký đa bậc Sắc ký hai chiều S" S" TuyÕn dung m«i 4 TuyÕn dung m«i 4 3 TuyÕn dung m«i 2 S S' S" S S' S S' d Hiện sắc đồ: Hiện sắc đồ... giai đoạn: Chuẩn bị mỏng, a mẫu lên mỏng, Khai triển mỏng với pha động thích hợp (Hiện màu) Xử lý mỏng để thu kết quả. Kỹ thuật tiến hành sklm: a Chuẩn bị mỏng: Hiện mỏng thờng đợc tráng... Thời gian thực ngắn so với sắc ký cột sắc ký giấy Khá kinh tế nên hiệu thm dò kết nhiều trỡnh khác Vết nhỏ gọn vết sắc ký giấy Tác dụng phân tách đợc rõ rệt phơng pháp sắc ký khác Có thể dùng