BÁO cáo TIỂU LUẬN TỔNG QUAN về sắc ký lớp MỎNG và sắc ký GIẤY

- Trong kĩ thuật sắc kí, hỗn hợp được chuyên chở trong chất lỏng hoặc khí và các thành phần của nó được tách ra do sự phân bố khác nhau của các chất tan khi chúng chảy qua pha tĩnh rắn h

Tiểu luận

TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỚP MỎNG

di chuyển của các thành phần trong mẫu Khi các thành phần này di chuyển qua hệ thống với tốc độ khác nhau, chúng sẽ được tách khỏi nhau theo thời gian.

- Một cách lí tưởng, mỗi thành phần đi qua hệ thống trong một khoảng thời gian riêng biệt, gọi là "thời

- Trong kĩ thuật sắc kí, hỗn hợp được chuyên chở trong chất lỏng hoặc khí và các thành phần của nó được tách ra do sự phân bố

khác nhau của các chất tan khi chúng chảy qua pha tĩnh rắn hay lỏng Nhiều kĩ thuật

khác nhau đã được dùng để phân tích hợp chất phức tạp dựa trên ái tính khác nhau

của các chất trong môi trường động khí

hoặc lỏng và đối với môi trường hấp phụ

tĩnh mà chúng di chuyển qua, như giấy,

gelatin hay gel magnesium silicate

- Sắc kí phân tích được dùng để xác định danh tính và nồng độ các phân tử trong hỗn hợp Sắc kí tinh chế được dùng để tinh chế các chất có trong hỗn hợp

I.2 Các kĩ thuật sắc kí

- Sắc kí giấy

- Sắc kí lớp mỏng

- Sắc kí khí-lỏng

- Sắc kí trao đổi ion

- Sắc kí ái tính ion kim loại bất động

- Sắc kí lỏng hiệu năng cao

- Sắc kí thẩm thấu gel

II TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỚP MỎNG

II.1 Sắc kí lớp mỏng

- Sắc kí lớp mỏng (thin layer chromatography - TLC)

là một kĩ thuật sắc kí được dùng để tách các chất trong hỗn hợp Phương pháp sắc kí lớp mỏng bao gồm pha tĩnh là một lớp mỏng các chất hấp phụ, thường là silica gel, aluminium oxide, hoặc cellulose được phủ trên một mặt phẳng chất trơ Pha động bao gồm dung dịch cần phân tích được hòa tan

trong một dung môi thích hợp và được hút lên bản sắc kí bởi mao dẫn, tách dung dịch thí nghiệm dựa trên tính phân cực của các thành phần trong dung dịch.

- Sắc kí lớp mỏng được sử dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực: xét nghiệm độ tinh khiết của các hóa chất phóng xạ trong dược khoa

- Xác định các sắc tố trong tế bào thực vật

- Phát hiện thuốc trừ sâu, thuốc diệt côn trùng trong thức ăn, hoặc nhận biết những hóa

chất trong một chất cho sẵn

- Giám sát các phản ứng hữu cơ

- Một số cải tiến có thể kết hợp phương pháp truyền thống để tự động hóa một vài bước, làm tăng độ dung giải của sắc kí lớp mỏng

và cho số liệu chính xác hơn Phương pháp này được gọi là sắc kí lớp mỏng hiệu năng cao (high performance TLC - HPTLC)

II.2 Chuẩn bị bản sắc kí

- Bản sắc kí được làm bằng cách trộn chất hấp phụ, như silica gel, với một lượng nhỏ chất trơ để kết dính, như calcium sulfate (thạch cao), và nước Hỗn hợp này được trải ra

như một lớp vữa đặc trên một bề mặt chất trơ, như thủy tinh, nhôm, hoặc nhựa Bản sắc kí này sẽ được để khô và kích hoạt bằng cách nung nóng trong lò trong 30 phút ở

nhiệt độ 110 °C Độ dày của lớp hấp phụ

thường là 0.1-0.25 mm cho hóa học phân

tích, và khoảng 1-2mm cho sắc kí lớp mỏng

dự bị Trong mọi kĩ thuật sắc kí đều bao

gồm 1 pha động và 1 pha tĩnh

III.3 Kĩ thuật

- Sắc phổ của 10 tinh dầu được nhuộm màu bởi thuốc thử vanillin

- Phương pháp tiến hành giống với sắc

kí giấy với lợi thế là nhanh hơn, tách hỗn hợp hiệu quả hơn, và có sự lựa chọn giữa các "pha tĩnh" khác nhau Bởi tính đơn giản và nhanh, sắc kí lớp mỏng thường được dùng để giám sát các phản ứng hóa học và phân tích

chất lượng sản phẩm của phản ứng.

- Một vệt nhỏ dung dịch chứa mẫu thử được thấm lên bản sắc kí, khoảng 1 cm từ dưới

lên Bản sắc kí sau đó được nhúng vào một dung môi thích hợp, như ethanol hoặc nước,

và được đặt vào trong một vật chứa có nắp Dung môi di chuyển lên bản sắc kí bởi mao dẫn, gặp phải mẫu thử và dịch chuyển mẫu thử lên bản sắc kí Các hợp chất khác nhau trong hỗn hợp mẫu thử dịch chuyển với tốc

độ khác nhau do chúng có sức hút khác

nhau đối với pha tĩnh, và độ tan khác nhau trong dung môi

- Các hợp chất được tách ra dựa trên sự cạnh tranh của chất tan và pha động

để có được chỗ liên kết với pha tĩnh Thí dụ, nếu silica gel được dùng như pha tĩnh, nó được xem là phân cực

Cho trước 2 hợp chất có tính phân cực khác nhau, chất nào có tính phân cực lớn hơn sẽ có sự liên kết với silica gel lớn hơn và vì thế sẽ có khả năng đẩy pha động ra khỏi các chỗ liên kết

Do đó, hợp chất có tính phân cực nhỏ

hơn sẽ di chuyển lên cao hơn trên bản sắc kí (kết quả là hệ số lưu Rf sẽ lớn hơn) Nếu pha động được thay bằng một dung môi phân cực hơn hoặc là

một hỗn hợp các dung môi, nó sẽ có khả năng để đẩy các chất tan ra khỏi chỗ liên kết với silica gel, và tất cả các hợp chất trên bản sắc kí sẽ dịch

chuyển lên cao hơn.

- Trên thực tế, nếu chúng ta dùng một hỗn

hợp ethyl acetate và heptane như là pha

động, tăng thêm ethyl acetate sẽ cho hệ số lưu Rf cao hơn cho tất cả các hợp chất trên bản sắc kí Thay đổi độ phân cực của pha động sẽ không làm các hợp chất có thứ tự

di chuyển ngược lại trên bản sắc kí Nếu

muốn có một thứ tự ngược lại trên bản sắc

kí, một pha tĩnh không phân cực sẽ được sử dụng, như là C18-chức năng hóa silica

- Quá trình sắc kí lớp mỏng: một hỗn hợp của một hợp chất đỏ và một hợp chất lam được tách biệt trong quá trình sắc kí (dung môi màu xanh nhạt di chuyển lên trên bản sắc kí)

- Dung môi thích hợp dùng trong sắc kí lớp mỏng sẽ là một dung môi có tính phân cực khác với pha tĩnh Nếu một dung môi phân cực được dùng để hòa tan mẫu thử trên một pha tĩnh phân cực, vệt nhỏ mẫu thử sẽ lan tròn do

mao dẫn, và các vệt khác nhau có thể trộn lẫn vào nhau Do đó, để hạn chế

sự lan tròn của các vệt mẫu, dung môi được sử dụng để hòa tan mẫu thử

phải không phân cực, hoặc phân cực một phần, nếu pha tĩnh phân cực, và ngược lại.

zinc silicate, được cho thêm vào chất hấp

phụ để có thể quan sát được những vệt này dưới ánh sáng đen (tia cực tím UV254) Lớp hấp phụ vì thế sẽ tự phát ra ánh sáng lục, nhưng các vệt mẫu sẽ làm tắt ánh sáng này

- Hơi Iodine cũng là một loại thuốc thử cho

màu giống nhau

- Một số thuốc thử cho màu riêng biệt được dùng để nhúng bản sắc kí vào, hoặc phun

- Trong trường hợp của chất béo, sắc phổ có thể sẽ được chuyển qua một màng

polyvinylidene fluoride (PVDF) và sau đó sẽ được phân tích sâu hơn, chẳng hạn như

khối phổ

- Một khi đã trở nên quan sát được, hệ số lưu

Rf của mỗi vệt mẫu sẽ được xác định bằng cách chia khoảng cách di chuyển được của hợp chất cho khoảng cách di chuyển được của dung môi Những số liệu này phụ thuộc vào các loại dung môi được sử dụng và các loại bản sắc kí, và không phải là hằng số

II.4 Ứng dụng

- Trong hóa học hữu cơ, phản ứng được giám sát chất lượng bởi sắc kí lớp mỏng Các mẫu thử được thấm lên bản sắc kí bằng một ống mao dẫn: một vệt nhỏ chất ban đầu, một

vệt nhỏ từ hỗn hợp phản ứng, và một vệt

nhỏ gồm cả 2 chất Một bản sắc kí nhỏ (3

cm x 7 cm) sẽ mất khoảng khoảng hai, ba phút để vận hành Quá trình này phân tích chất lượng và sẽ chỉ ra nếu chất ban đầu

biến mất, sản phẩm được tạo thành, và bao nhiêu sản phẩm được tạo thành Đáng tiếc rằng sắc kí lớp mỏng đối với các phản ứng xảy ra ở nhiệt độ thấp có thể cho ra kết quả không đúng, bởi vì các mẫu thử sẽ được

Một trong những phản ứng như vậy là

phản ứng khử ester bởi DIBALH thành aldehyde.

- Một ví dụ là sắc kí được áp dụng cho

một phần lá xanh (ở đây là rau chân

vịt) qua 7 bước Carotene tách ra

nhanh chóng và chỉ quan sát được cho đến bước 2 Chlorophyll A và B hiện rõ

ở giữa bản sắc kí trong bước cuối cùng

và lutein là hợp chất đầu tiên nhuộm màu vàng lên bản sắc kí.

Bước 1

Bước 2

Bước 3

Bước 4

Bước 5

Bước 6

Bước 7

- Trong một nghiên cứu, sắc kí lớp mỏng

đã được sử dụng để lọc phản ứng hóa học hữu cơ, như tổng hợp BINAP từ

2-naphtol Trong phương pháp này,

cồn và dung dịch xúc tác (chẳng hạn như iron(III) chloride được đặt riêng

rẽ trên đường gốc, sau đó phản ứng

với nhau và được phân tích ngay lập

tức.

II 5.Phương pháp sắc ký lớp mỏng hiệu năng cao

- Phương pháp sắc ký lớp mỏng hiệu năng cao được dùng để định tính, thử tinh khiết và

đôi khi để bán định lượng hoặc định lượng hoạt chất thuốc

- Về nguyên tắc cơ bản không khác nhiều với sắc ký lớp mỏng thông thường Điểm khác chủ yếu là quá trình chấm sắc ký được điều khiển và thực hiện bằng máy, số vết, lượng dịch chiết sẽ chấm trên bản mỏng được xác lập trên máy vi tính Quá trình chấm dịch

chiết thực hiện với sự hỗ trợ của máy nén

khí hoặc bình khí nén N Sau khi triển khai, sắc ký đồ được chụp ảnh qua buồng chụp

hợp chất mà sắc ký giấy có thể phân tách

được,đó là các ion kim loại, các amin, và

mọt vài chất khác Sắc ký giấy lan ra bởi

phân bố còn sắc ký lớp mỏng lan ra bởi mao dẫn, tuy vậy quá trình tiến hành là giống

nhau Vì vậy ta sẽ xét nhiều tới phương

pháp thông dụng hơn để có thể hiểu rõ cho

cả hai phương pháp này

IV KẾT LUẬN

- Như vậy: sắc kí lớp mỏng giúp phân tích

được trong một hợp chất có bao nhiêu chất

và dự đoán được chúng bao gồm những

chất gì Nhờ thế chúng ta biết được những tính chất vật lí, hóa học của cũng như là dễ dang trong việc trích chiết các hợp chất

- Được sử dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực: xét nghiệm độ tinh khiết của các hóa chất phóng xạ trong dược khoa

Tài liệu tham khảo

http://vi.wikipedia.org/wiki/S%E1%BA%AFc_k

%C3%AD_l%E1%BB%9Bp_m%E1%BB%8Fng http://duoclieu.net/Dlieuhoc/Tools/Phuongphap/ HPTLC.htm

http://tailieu.vn/xem-tai-lieu/sac-ki-lop-mong.442928.html