NGHIÊN CỨU TÁCH CHIẾT βGLUCAN TỪ BÃ MEN BIA VÀ CHẾ TẠO OLIGOβGLUCAN BẰNG PHƢƠNG PHÁP CHIẾU XẠ

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU TÁCH CHIẾT β-GLUCAN TỪ BÃ MEN BIA VÀ CHẾ TẠO OLIGO-β-GLUCAN BẰNG PHƢƠNG PHÁP CHIẾU XẠ Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Sinh viên thực hiện: VÕ THỊ MỸ LỢI Niên khóa: 2008 – 2012 Tháng 07/2012 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU TÁCH CHIẾT β-GLUCAN TỪ BÃ MEN BIA VÀ CHẾ TẠO OLIGO-β-GLUCAN BẰNG PHƢƠNG PHÁP CHIẾU XẠ Hƣớng dẫn khoa học Sinh viên thực TS LÊ QUANG LUÂN VÕ THỊ MỸ LỢI Tháng 07/2012 LỜI CẢM ƠN Sau tháng thực tập phòng Sinh học, Trung tâm Hạt nhân Tp Hồ Chí Minh, tơi nhận thấy trƣởng thành nhiều Tơi tự tin vốn kiến thức đƣợc củng cố, khả thực hành đƣợc nâng cao Ngoài cố gắng, nỗ lực thân, tơi nhận đƣợc quan tâm, giúp đỡ từ nhiều phía Tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến: Ba mẹ - ngƣời sinh thành nuôi dƣỡng hôm Cảm ơn ba mẹ yêu thƣơng động viên để có thêm niềm tin, nghị lực vƣợt qua thời điểm khó khăn sống Thầy Lê Đình Đơn - trƣởng mơn Cơng nghệ Sinh học thầy hết lòng dạy dỗ, truyền đạt cho chúng em không kiến thức mà kinh nghiệm sống quý báu Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến thầy Lê Quang Luân Cảm ơn thầy nhận tạo điều kiện cho em hồn thành khóa luận Cảm ơn thầy ln tận tình giúp đỡ, bảo truyền đạt cho em kiến thức, kinh nghiệm quý báu trình thực tập trung tâm Em xin chân thành cảm ơn Ban Giám đốc nhân viên Cơng ty Cổ phần Sài Gòn Thủy Canh tạo điều kiện thuận lợi cho em thời gian thực tập công ty Đặc biệt em xin gửi lời cảm ơn đến chị Uyên, chị Trang, chị Hạnh giúp đỡ chia sẻ cho em kinh nghiệm hay trình thực tập Cuối cùng, xin cảm ơn tất ngƣời bạn mà yêu thƣơng giúp đỡ động viên suốt thời gian làm đề tài Tp Hồ Chí Minh, ngày 10 tháng năm 2012 Võ Thị Mỹ Lợi i TÓM TẮT Bã men bia chứa lƣợng lớn chất rắn thô tế bào nấm men S cerevisiae Thành tế bào nấm men S cerevisiae đƣợc cấu thành chủ yếu từ β-glucan – hợp chất có khả điều hòa miễn dịch khơng đặc hiệu kháng khối u mạnh Đề tài đƣợc thực với mục đích tách chiết β-glucan từ nguồn phế thải bã men bia để tạo chế phẩm tăng trƣởng thực vật oligo-β-glucan phƣơng pháp chiếu xạ nhằm gia tăng hiệu kinh tế nguồn nấm men phế thải bƣớc đầu thử nghiệm hiệu ứng tăng trƣởng rau thủy canh β-glucan thu đƣợc sau xử lý thành tế bào nấm men với NaOH nồng độ 3%, tỉ lệ mẫu/ dung môi 1/5, 900C có hàm lƣợng protein thấp, khoảng 1,4% hiệu suất thu nhận 16,13% β-glucan tách chiết từ thành tế bào nấm men đƣợc chiếu xạ tia gamma Co-60 liều 100, 150, 200, 250 300 kGy dƣới dạng hỗn hợp huyền phù 10, 15 20% Chế phẩm oligo-β-glucan đƣợc chế tạo từ hỗn hợp β-glucan 10% sau chiếu xạ có hàm lƣợng β-glucan tan lên đến 41,36% (liều 300 kGy) có khối lƣợng phân tử khoảng 3,51 - 9,38 kDa Chế phẩm oligo-β-glucan đƣợc chế tạo liều xạ 250 kGy có khối lƣợng phân tử khoảng 4,5 kDa cho hiệu ứng tăng trƣởng thích hợp rau cải bẹ xanh, xà lách Nato cải dún Nồng độ chế phẩm xác định tối ƣu cho hiệu ứng tăng trƣởng cải bẹ xanh 75ppm Chế phẩm oligo-β-glucan chế tạo đƣợc hứa hẹn chất tăng trƣởng thực vật an tồn, hiệu cao có tiềm ứng dụng nông nghiệp công nghệ cao để sản xuất rau nông phẩm ii SUMMARY VO THI MY LOI, July 2012, Nong Lam University, Ho Chi Minh City “STUDY ON THE EXTRACTION OF β-GLUCAN FROM BREWER’S YEAST SLUGE AND OLIGO-β-GLUCAN PREPARATION BY RADIATION METHOD” SUPERVISIORS: DR LE QUANG LUAN The study was carried out at Biological Department, Center for Nuclear Technique, Ho Chi Minh City The discard waste from beer production industry contents a large amount of S.cerevisiae cells in its dried matter content The cell wall is conducted mainly by βglucan, a compound has ability of non-specific immunomodulatory and strong antitumor The aim of this study is to extract β-glucan from the discard waste of beer production industry for preparation of plant growth promoter oligo β-glucan in order to increase the economic efficiency of the discard waste of beer production industry and initially test the plant growth promotion effect of oligo-β-glucan on vegetables grown in hydroponics system About 16,13% of β-glucan with low protein content (~1.4%) was obtained by treated the mixture including part yeast cell walls per part of 3% NaOH solution at 90oC for hours The extracted β-glucan was irradiated by gamma-rays from a Co-60 source at doses of 100, 150, 200, 250 and 300 kGy in paste condition of 10, 15 and 20% β-glucan The β-glucan prepared by irradiation of the mixture of 10% β-glucan has 41,36 water soluble content (at irradiation dose of 300 kGy) and the molecular weights of oligo-β-glucan were determined from 3,51 to 9,38 kDa The oligo-β-glucan with Mw ~ 4,5 kDa prepared at the dose of 250 kGy displayed a high promotion effect on the growth of Brassica juncea var rugosa, Brassica oleracea var sabauda and Lactuca sativa spp The concentration of oligoβ-glucan were determined at 75 ppm for Brassica juncea var rugosa The oligo-β-glucan prepared by radiation techniques showed as a promising, safety and high effective plant growth promoter This product has good potential for application in high-technological agriculture for production of clean vegetables and agro-products Keywords: β-glucan, oligo-β-glucan, extraction, hydroponics, radiation iii MỤC LỤC Trang Lời cảm ơn i Tóm tắt ii Summary iii Mục lục iv Danh sách chữ viết tắt viii Danh sách bảng ix Danh sách hình x Chƣơng MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Yêu cầu đề tài 1.3 Nội dung thực Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu β-glucan 2.1.1 Nguồn thu nhận β-glucan 2.1.1.1 Nguồn thu nhận chung 2.1.1.2 Thành tế bào nấm men S cerevisiae 2.1.2 Cấu trúc β-glucan 2.1.3 Hoạt tính β-glucan 2.1.4 Ứng dụng β-glucan 2.2 Giới thiệu bã men bia 10 2.2.1 Tình hình sản xuất bia Việt Nam 10 2.2.2 Bã men bia 10 2.3 Phƣơng pháp tách chiết β-glucan 11 iv 2.3.1 Phƣơng pháp phá vỡ tế bào 11 2.3.1.1 Phƣơng pháp vật lý 11 2.3.1.2 Phƣơng pháp hóa học 12 2.3.1.3 Phƣơng pháp sinh học 13 2.3.2 Phƣơng pháp tách chiết β-glucan từ thành tế bào nấm men S cerevisiae 13 2.4 Giới thiệu oligo-β-glucan 15 2.4.1 Oligosaccharide 15 2.4.2 Oligo-β-glucan 16 2.4.3 Các phƣơng pháp cắt mạch β-glucan 17 2.4.3.1 Phƣơng pháp hóa học 17 2.4.3.2 Phƣơng pháp sinh học 17 2.4.3.3 Phƣơng pháp chiếu xạ 17 2.5 Kỹ thuật thủy canh 19 2.5.1 Khái niệm thủy canh 19 2.5.2 Phân loại 19 2.5.2.1 Kỹ thuật thủy canh dịch lỏng 19 2.5.2.2 Thủy canh có sử dụng giá thể rắn 20 2.5.3 Ý nghĩa thực tiễn phƣơng pháp thủy canh 21 Chƣơng VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP 23 3.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 23 3.2 Vật liệu hóa chất 23 3.2.1 Vật liệu 23 3.2.2 Hóa chất 23 3.2.3 Dụng cụ thiết bị thí nghiệm 23 3.2.4 Điều kiện thí nghiệm 24 v 3.3 Phƣơng pháp thực 24 3.3.1 Thu nhận thành tế bào nấm men S cerevisiae 24 3.3.2 Thu nhận β-glucan từ thành tế bào nấm men S cerevisiae 25 3.3.2.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hƣởng nồng độ NaOH 26 3.3.2.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hƣởng thời gian thủy phân 27 3.3.2.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hƣởng nhiệt độ xử lý 28 3.3.2.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hƣởng tỉ lệ mẫu/ dung môi thủy phân 29 3.3.3 Chế tạo oligo-β-glucan 30 3.3.3.1 Thí nghiệm 5: Khảo sát ảnh hƣởng liều xạ lên hiệu suất thu nhận β-glucan tan khối lƣợng phân tử oligo-β-glucan 30 3.3.3.2 Xác định đặc trƣng β-glucan sau chiếu xạ 31 3.3.4 Xác định hiệu ứng tăng trƣởng thực vật oligo-β-glucan 32 3.3.4.1 Thí nghiệm 6: Khảo sát ảnh hƣởng oligo-β-glucan chế tạo theo liều xạ 32 3.3.4.2 Thí nghiệm 7: Khảo sát ảnh hƣởng nồng độ chế phẩm oligo-β-glucan rau cải bẹ xanh 33 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 35 4.1 Hồn thiện quy trình tách chiết β-glucan từ bã nấm men bia 35 4.1.1 Tách thu nhận thành tế bào nấm men S cerevisiae 35 4.1.2 Tách chiết β-glucan từ thành tế bào nấm men S cerevisiae 35 4.1.2.1 Ảnh hƣởng nồng độ NaOH đến hiệu suất tách chiết β-glucan 35 4.1.2.2 Ảnh hƣởng thời gian đến hiệu suất tách chiết β-glucan 37 4.1.2.3 Ảnh hƣởng nhiệt độ đến hiệu suất tách chiết β-glucan 38 4.1.2.4 Ảnh hƣởng tỉ lệ mẫu/ dung môi đến hiệu suất tách chiết β-glucan 39 4.2 Chế tạo oligo-β-glucan phƣơng pháp chiếu xạ 43 4.2.1 Hiệu suất thu nhận β-glucan tan phƣơng pháp chiếu xạ 44 vi 4.2.2 Khối lƣợng phân tử oligo-β-glucan 46 4.3 Hiệu ứng tăng trƣởng oligo-β-glucan đƣợc chế tạo phƣơng pháp chiếu xạ lên rau thủy canh 48 4.3.1 Hiệu ứng tăng trƣởng oligo-β-glucan chế tạo liều xạ khác lên rau thủy canh 48 4.3.1.1 Hiệu ứng tăng trƣởng oligo-β-glucan chế tạo liều xạ khác lên rau cải bẹ xanh 48 4.3.1.2 Hiệu ứng tăng trƣởng oligo-β-glucan chế tạo liều xạ khác lên rau xà lách Nato 50 4.3.1.3 Hiệu ứng tăng trƣởng oligo-β-glucan chế tạo liều xạ khác lên rau cải dún 52 4.3.2 Hiệu ứng tăng trƣởng oligo-β-glucan có Mw tối ƣu lên rau cải bẹ xanh nồng độ khác 53 Chƣơng KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 56 5.1 Kết luận 56 5.2 Đề nghị 56 Tài liỆu tham khẢo 57 Phụ lục vii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT CNBX Công nghệ xạ ctv Cộng tác viên Dp Degree of polymezation (độ polymer hóa) ĐC Đối chứng FTIR Fourier Transform Infrared Spectroscopy GPC Gel Permeation Chromatography (sắc ký lọc gel) IL - Interleukin IL - Interleukin IL - Interleukin IPM Intergrated Pest Managerment (phòng trừ tổng hợp) Mw Khối lƣợng phân tử NMR Nuclear Magnetic Resonance NT Nghiệm thức SEM Scaning Electron Microscope SVĐC So với đối chứng TNF Tumor Necrosis Factor viii Bảng 35 Bảng ANOVA chiều dài rễ cải bẹ xanh số liệu bảng 34 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Source Model Error Corrected Total Sum of Squares 118.5752381 65.9504762 184.5257143 DF 12 20 R-Square 0.642595 Source k NT Mean Square 14.8219048 5.4958730 F Value 2.70 Pr > F 0.0592 Coeff Var Root MSE Y Mean 7.733409 2.344328 30.31429 DF Anova SS Mean Square F Value 9.6028571 4.8014286 0.87 108.9723810 18.1620635 3.30 Pr > F 0.4424 0.0370 Bảng 36 Bảng trắc nghiệm phân chiều dài rễ cải bẹ xanh kết bảng 35 t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 5.495873 Critical Value of t 2.17881 Least Significant Difference 4.1705 Means with the same letter are not significantly different t Grouping A A A B B B B B C C C C C Mean N NT 34.600 32.600 30.667 29.200 28.533 28.500 28.100 3 3 3 NT250 NT200 NT300 NTDC NT0 NT150 NT100 Bảng 37 Số liệu dùng cho xử lý thống kê sinh khối tƣơi rau cải bẹ xanh theo liều xạ Liều xạ, kGy Sinh khối tƣơi, g ĐC 82,96 86,12 83,48 90,85 80,55 84,35 100 90,78 86,91 76,7 150 93,99 98,75 101,6 200 100,26 122,37 112,45 250 134,03 13097 135,88 300 128,16 134,07 137,44 Bảng 38 Bảng ANOVA sinh khối tƣơi cải bẹ xanh số liệu bảng 37 sinh khoi tuoi The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Source Model Error Corrected Total Sum of Squares 8837.088200 471.882629 9308.970829 DF 12 20 R-Square 0.949309 Source k NT Coeff Var 6.005821 DF Mean Square 1104.636025 39.323552 Root MSE 6.270849 Anova SS 25.223171 8811.865029 F Value 28.09 Pr > F F 0.7317 F F 0.3967 F 0.0523 Y Mean 23.21905 Mean Square 0.17761905 3.90539683 F Value 0.17 3.69 Pr > F 0.8475 0.0259 Bảng 45 Bảng trắc nghiệm phân hạng chiều cao xà lách Nato kết bảng 44 t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 1.05873 Critical Value of t 2.17881 Least Significant Difference 1.8305 Means with the same letter t Grouping A A B A B A C B A C B C C are not significantly different Mean N NT 24.6667 NT200 24.4333 NT250 23.7000 NT300 22.9333 NT150 22.9000 NT0 22.5000 NT100 21.4000 NTDC Bảng 46 Số liệu dùng cho xử lý thống kê chiều dài rễ xà lách Nato theo liều xạ Liều xạ, kGy Chiều dài rễ, cm ĐC 12,9 15,6 13,4 13,1 14,5 14,4 100 13,5 14,2 13,6 150 13 15,5 13,5 200 14,8 15,5 14,6 250 15,9 15 16,2 300 14,2 13,7 14 Bảng 47 Bảng ANOVA chiều dài rễ xà lách Nato số liệu bảng 46 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Source Model Error Corrected Total DF 12 20 R-Square 0.631010 Source k NT Sum of Squares 12.44952381 7.28000000 19.72952381 Coeff Var 5.432298 DF Mean Square 1.55619048 0.60666667 Root MSE 0.778888 Anova SS 3.20666667 9.24285714 F Value 2.57 Pr > F 0.0687 Y Mean 14.33810 Mean Square 1.60333333 1.54047619 F Value 2.64 2.54 Pr > F 0.1119 0.0799 Bảng 48 Số liệu dùng cho xử lý thống kê sinh khối tƣơi xà lách Nato theo liều xạ Sinh khối tƣơi, g/cây Liều xạ, kGy ĐC 31,13 34,65 35,05 31,39 34,61 33,47 100 33,7 35,72 38,18 150 45,1 41,66 48,1 200 46,02 48,27 47,05 250 45,68 47,54 49,32 300 44,75 42,28 43,19 Bảng 49 Bảng ANOVA sinh khối tƣơi xà lách Nato số liệu bảng 48 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Source Model Error Corrected Total DF 12 20 R-Square 0.951869 Source k NT Sum of Squares 750.1077143 37.9287143 788.0364286 Coeff Var 4.357154 DF Mean Square 93.7634643 3.1607262 Root MSE 1.777843 Anova SS 19.8288857 730.2788286 F Value 29.67 Pr > F F 0.0802 F 0.0901 Y Mean 4.750000 Mean Square 0.00061429 0.01405556 F Value 0.13 3.06 Pr > F 0.8759 0.0467 Bảng 53 Bảng trắc nghiệm phân hạng hàm lƣợng khô xà lách Nato kết bảng 52 t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 0.004587 Critical Value of t 2.17881 Least Significant Difference 0.1205 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N NT A A C C C C C 4.86667 4.81667 4.74333 4.73000 4.72333 4.70000 4.67000 3 3 3 NT200 NT250 NT150 NT100 NT300 NTDC NT0 B B B B B Bảng 54 Số liệu dùng cho xử lý thống kê chiều cao cải dún theo liều xạ Liều xạ, kGy Chiều cao cây, cm ĐC 17,7 20,8 15,9 20,7 22,4 19,5 100 21,9 24,8 20,4 150 22,5 21,1 24 200 19,9 23,8 21,9 250 21,5 23,7 21,6 300 20,3 23,3 21,8 Bảng 55 Bảng ANOVA chiều cao cải dún số liệu bảng 54 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Source Model Error Corrected Total DF 12 20 R-Square 0.727640 Source k NT Sum of Squares 64.65047619 24.19904762 88.84952381 Coeff Var 6.634346 DF Mean Square 8.08130952 2.01658730 Root MSE 1.420066 Anova SS 21.74095238 42.90952381 F Value 4.01 Pr > F 0.0155 Y Mean 21.40476 Mean Square 10.87047619 7.15158730 F Value 5.39 3.55 Pr > F 0.0214 0.0295 Bảng 56 Bảng trắc nghiệm phân hạng chiều cao cải dún kết bảng 55 t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 2.016587 Critical Value of t 2.17881 Least Significant Difference 2.5263 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N NT A A A A A A B 22.533 22.367 22.267 21.867 21.800 20.867 18.133 3 3 3 NT150 NT100 NT250 NT200 NT300 NT0 NTDC Bảng 57 Số liệu dùng cho xử lý thống kê chiều dài rễ cải dún theo liều xạ Liều xạ, kGy Chiều dài rễ, cm ĐC 25 28,8 27,3 23 26,8 26,2 100 32 31 28,5 150 30 28,3 32 200 32,2 35,9 33,4 250 34,7 29,6 32,8 300 30,5 34,3 31,4 Bảng 58 Bảng ANOVA chiều dài rễ cải dún số liệu bảng 57 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Source Model Error Corrected Total DF 12 20 R-Square 0.759989 Source k NT Sum of Squares 169.4000000 53.4980952 222.8980952 Coeff Var 6.997036 DF Mean Square 21.1750000 4.4581746 Root MSE 2.111439 Anova SS 3.8352381 165.5647619 F Value 4.75 Pr > F 0.0081 Y Mean 30.17619 Mean Square 1.9176190 27.5941270 F Value 0.43 6.19 Pr > F 0.6601 0.0037 Bảng 59 Bảng trắc nghiệm phân hạng chiều dài rễ cải dún kết bảng 58 t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 4.458175 Critical Value of t 3.05454 Least Significant Difference 5.266 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N NT A 33.833 NT200 A 32.367 NT250 B A 32.067 NT300 B A C 30.500 NT100 B A C 30.100 NT150 B C 27.033 NTDC C 25.333 NT0 Bảng 60 Số liệu dùng cho xử lý thống kê sinh khối tƣơi cải dún theo liều xạ Liều xạ, kGy Sinh khối tƣơi, g ĐC 18,40 17,21 19,74 20,02 22,85 21,59 100 23,06 22,18 23,15 150 23,63 22,13 24,27 200 23,16 24,25 23,41 250 30,30 27,63 29,12 300 27,85 25,92 26,30 Bảng 61 Bảng ANOVA sinh khối tƣơi cải dún số liệu bảng 60 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Source Model Error Corrected Total DF 12 20 R-Square 0.937721 Source k NT Sum of Squares 214.0674095 14.2174190 228.2848286 Coeff Var 4.606898 DF Mean Square 26.7584262 1.1847849 Root MSE 1.088478 Anova SS 2.3179143 211.7494952 F Value 22.59 Pr > F F 0.4041 F 0.0034 Y Mean 5.439524 Mean Square 0.01046190 0.03891587 F Value 1.92 7.15 Pr > F 0.1886 0.0020 Bảng 65 Bảng trắc nghiệm phân hạng hàm lƣợng khô cải dún kết bảng 60 t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 0.00544 Critical Value of t 3.05454 Least Significant Difference 0.183 Means with the same letter are not significantly different t Grouping A B A B A B A C B C C C Mean 5.60000 5.52667 5.51333 5.43333 5.39333 5.32333 5.28667 N 3 3 3 NT NT250 NT300 NT200 NT100 NT150 NTDC NT0 Bảng 66 Số liệu dùng cho xử lý thống kê chiều cao rau cải bẹ xanh theo nồng độ oligo-β-glucan Nồng độ, ppm Chiều cao cây, cm ĐC 29,1 30,1 31,0 25 26,1 29,8 27,1 50 32,8 29,2 32,1 75 30,0 31,9 32,4 100 29,7 29,8 29,9 150 28,0 29,8 29,0 Bảng 67 Bảng ANOVA chiều cao rau cải bẹ xanh theo nồng độ oligo-β-glucan số liệu bảng 66 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Source Model Error Corrected Total DF 10 17 R-Square 0.657641 Source k NT Sum of Squares 34.62555556 18.02555556 52.65111111 Coeff Var 4.493617 DF Mean Square 4.94650794 1.80255556 Root MSE 1.342593 Anova SS 3.24777778 31.37777778 F Value 2.74 Pr > F 0.0721 Y Mean 29.87778 Mean Square 1.62388889 6.27555556 F Value 0.90 3.48 Pr > F 0.4368 0.0441 Bảng 68 Trắc nghiệm phân hạng chiều cao rau cải bẹ xanh theo nồng độ oligo-βglucan kết bảng 67 t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 1.802556 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 2.4425 Means with the same letter are not significantly different t Grouping A A A A B B B B C C C C Mean N NT 31.433 31.367 30.067 29.800 28.933 27.667 3 3 3 NT75 NT50 NTDC NT100 NT150 NT25 Bảng 69 Số liệu dùng cho xử lý thống kê chiều dài rễ rau cải bẹ xanh theo nồng độ oligo-β-glucan Nồng độ, ppm Chiều dài rễ, cm ĐC 29,0 27,2 24,9 25 31,2 30,0 33,8 50 37,3 34,0 35,6 75 38,2 35,0 36,0 100 38,7 37,2 34,0 150 36,2 32,8 28,5 Bảng 70 Bảng ANOVA chiều dài rễ rau cải bẹ xanh theo nồng độ oligo-β-glucan số liệu bảng 69 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Source Model Error Corrected Total DF 10 17 R-Square 0.860237 Source k NT Sum of Squares 235.9955556 38.3422222 274.3377778 Coeff Var 5.878270 DF Mean Square 33.7136508 3.8342222 Root MSE 1.958117 Anova SS 29.7644444 206.2311111 F Value 8.79 Pr > F 0.0014 Y Mean 33.31111 Mean Square 14.8822222 41.2462222 F Value 3.88 10.76 Pr > F 0.0566 0.0009 Bảng 71 Bảng trắc nghiệm phân hạng rau bẹ xanh theo nồng độ oligo-β-glucan kêt bảng 70 t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 3.834222 Critical Value of t 3.16927 Least Significant Difference 5.067 Means with the same letter are not significantly different t Grouping A A A A B A B Mean 36.633 36.400 35.633 32.500 31.667 27.033 N 3 3 3 NT NT100 NT75 NT50 NT150 NT25 NTDC Bảng 72 Số liệu dùng cho xử lý thống kê sinh khối tƣơi cải bẹ xanh theo nồng độ oligo-β-glucan Nồng độ, ppm Sinh khối tƣơi, g/cây ĐC 31.66 35.29 41,51 25 40.18 39.32 33,29 50 45.34 43.15 46,48 75 49.56 44.07 49,46 100 47.62 49.52 41,58 150 40.68 42.91 38,30 Bảng 73 Bảng ANOVA sinh khối tƣơi cải bẹ xanh theo nồng độ oligo-β-glucan dựa số liệu bảng 72 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Source Model Error Corrected Total DF 10 17 R-Square 0.702304 Source k NT Sum of Squares 345.4599556 146.4353556 491.8953111 Coeff Var 9.064161 DF Mean Square 49.3514222 14.6435356 Root MSE 3.826687 Anova SS 1.8552444 343.6047111 F Value 3.37 Pr > F 0.0406 Y Mean 42.21778 Mean Square 0.9276222 68.7209422 F Value 0.06 4.69 Pr > F 0.9390 0.0182 Bảng 74 Bảng trắc nghiệm phân hạng sinh khối tƣơi cải bẹ xanh theo nồng độ oligo-βglucan dựa kết bảng 73 t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 14.64354 Critical Value of t 2.22814 Least Significant Difference 6.9618 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N NT B B B A A A C C C 47.697 46.240 44.990 40.630 37.597 36.153 3 3 3 NT75 NT100 NT50 NT150 NT25 NTDC Bảng 75 Số liệu dùng cho xử lý thống kê hàm lƣợng chất khô cải bẹ xanh theo nồng độ oligo-β-glucan Hàm lƣợng chất khô, % Nồng độ, ppm ĐC 6,03 6,12 6,09 25 6,49 6,23 6,38 50 6,32 6,36 6,45 75 6,68 6,72 6,66 100 6,38 6,22 6,26 150 6,22 6,24 6,37 Bảng 76 Bảng ANOVA hàm lƣợng chất khô cải bẹ xanh theo nồng độ oligo-βglucan dựa sô liệu bảng 75 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Source Model Error Corrected Total R-Square 0.899262 Source k NT Sum of Squares 0.59858889 0.06705556 0.66564444 DF 10 17 Coeff Var 1.290469 DF Mean Square 0.08551270 0.00670556 Root MSE 0.081887 Anova SS 0.00907778 0.58951111 F Value 12.75 Pr > F 0.0003 Y Mean 6.345556 Mean Square 0.00453889 0.11790222 F Value 0.68 17.58 Pr > F 0.5300 0.0001 Bảng 77 Bảng trắc nghiệm phân hạng hàm lƣợng chất khô cải bẹ xanh theo nồng độ oligo-β-glucan dựa kết bảng 76 t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 10 Error Mean Square 0.006706 Critical Value of t 3.16927 Least Significant Difference 0.2119 Means with the same letter are not significantly different t Grouping A B B C B C B C Mean 6.68667 6.37667 6.36667 6.28667 6.27667 6.08000 N 3 3 3 NT NT75 NT50 NT25 NT100 NT150 NT0 ... toàn, hiệu cao có tiềm ứng dụng nơng nghiệp công nghệ cao để sản xuất rau nông phẩm ii SUMMARY VO THI MY LOI, July 2012, Nong Lam University, Ho Chi Minh City “STUDY ON THE EXTRACTION OF β-GLUCAN... khác Phƣơng pháp thƣờng đƣợc áp dụng cho việc phá vỡ tế bào vi khuẩn Sự khác biệt thi t bị lớn nên cần lựa chọn thi t bị phù hợp chuyển từ quy mô nhỏ sang quy mô lớn (Nguyễn Đức Lƣợng ctv, 2010)... có hàm lƣợng lipid protein lại sản phẩm thấp nhƣng đòi hỏi trang thi t bị đại, sử dụng enzyme để xử lý tốn khó kiểm sốt 2.4 Giới thi u oligo-β-glucan 2.4.1 Oligosaccharide Oligosaccharide chuỗi