THIẾT KẾ, TỔNG HỢP VÀ THỬ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA MỘT SỐ NHYDROXYBENZAMIDPROPENAMID MANG KHUNG QUINAZOLIN4(3H)ON HƯỚNG TÁC DỤNG KHÁNG UNG THƯ DS. Dương Tiến Anh (Đại học Dược Hà Nội) ThS. Đoàn Thanh Hiếu (Bộ môn Hóa Dược, Đại học Y Dược Thái Nguyên) DS. Trần Diễm Hương (Đại học Dược Hà Nội) SV. Nguyễn Trần Phương Linh (Sinh viên năm 4, Đại học Dược Hà Nội) Hướng dẫn khoa học: GS.TS. Nguyễn Hải Nam (Bộ môn Hóa Dược, Đại học Dược Hà Nội) PGS.TS. Phan Thị Phương Dung (Bộ môn Hóa Dược, Đại học Dược Hà Nội) Đặt vấn đề và mục tiêu nghiên cứu Trong các phân tử đích của nhóm thuốc chống ung thư, HDAC nổi lên như là một trong những đích rất tiềm năng. Đến thời điểm hiện tại, có ít nhất 5 chất ức chế HDAC đã được phê duyệt trong điều trị các type ung thư khác nhau bao gồm suberoylanilid hydroxamic acid (SAHA, Zolinza®), belinostat (PXD101), romidepsin (Istodax®), panobinostat (LBH589, Farydak®) và chidamid (Epidaza®). Bên cạnh đó, dị vòng quinazolin4(3H)on được tìm thấy ở nhiều dẫn chất có hoạt tính sinh học (như luotonin A, rutaecarpin, tryptanthrin, chloroqualon và alloqualon) đặc biệt là các dẫn chất ức chế tyrosin kinase và tác dụng chống ung thư (gelfitinib, erlotinib). Trên cơ sở đó, chúng tôi thiết kế một dãy các dẫn chất mang hợp phần Nhydroxybenzamidpropenamid có nhóm nhận diện bề mặt chứa dị vòng quinazolin4(3H)on giúp những dẫn chất này sẽ tạo nhiều tương tác hydro với các amino acid trên bề mặt kênh enzym và cho tác dụng ức chế HDAC tốt.
THIẾT KẾ, TỔNG HỢP VÀ THỬ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA MỘT SỐ N-HYDROXYBENZAMID/PROPENAMID MANG KHUNG QUINAZOLIN-4(3H)-ON HƯỚNG TÁC DỤNG KHÁNG UNG THƯ DS Dương Tiến Anh (Đại học Dược Hà Nội) ThS Đồn Thanh Hiếu (Bộ mơn Hóa Dược, Đại học Y Dược Thái Nguyên) DS Trần Diễm Hương (Đại học Dược Hà Nội) SV Nguyễn Trần Phương Linh (Sinh viên năm 4, Đại học Dược Hà Nội) Hướng dẫn khoa học: GS.TS Nguyễn Hải Nam (Bộ mơn Hóa Dược, Đại học Dược Hà Nội) PGS.TS Phan Thị Phương Dung (Bộ mơn Hóa Dược, Đại học Dược Hà Nội) Đặt vấn đề mục tiêu nghiên cứu Trong phân tử đích nhóm thuốc chống ung thư, HDAC lên đích tiềm Đến thời điểm tại, có chất ức chế HDAC phê duyệt điều trị type ung thư khác bao gồm suberoylanilid hydroxamic acid (SAHA, Zolinza®), belinostat (PXD101), romidepsin (Istodax®), panobinostat (LBH-589, Farydak®) chidamid (Epidaza®) Bên cạnh đó, dị vòng quinazolin-4(3H)-on tìm thấy nhiều dẫn chất có hoạt tính sinh học (như luotonin A, rutaecarpin, tryptanthrin, chloroqualon alloqualon) đặc biệt dẫn chất ức chế tyrosin kinase tác dụng chống ung thư (gelfitinib, erlotinib) Trên sở đó, chúng tơi thiết kế dãy dẫn chất mang hợp phần N-hydroxybenzamid/propenamid có nhóm nhận diện bề mặt chứa dị vòng quinazolin-4(3H)-on giúp dẫn chất tạo nhiều tương tác hydro với amino acid bề mặt kênh enzym cho tác dụng ức chế HDAC tốt Đề tài thực với hai mục tiêu: + Tổng hợp 16 dẫn chất N-hydroxybenzamid/propenamid mang khung quinazolin4(3H)-on + Thử hoạt tính sinh học hợp chất tổng hợp được: tác dụng ức chế HDAC khả kháng dòng tế bào ung thư: SW620 (ung thư đại tràng), PC3 (ung thư biểu mô tuyến tiền liệt) NCI-H23 (ung thư phổi) Đối tượng phương pháp nghiên cứu Tổng hợp hóa học Hóa chất dung mơi nhập từ cơng ty Merck (Đức) Sigma-Aldrich (Mỹ), với độ tinh khiết 99,9% Nhiệt độ nóng chảy đo máy đo điểm chảy nhiệt điện Melting point apparatus Smp3 Sắc ký lớp mỏng sử dụng mỏng nhôm tráng sẵn silica gel GF254 Phổ hồng ngoại ghi máy Shimadzu FTIR Affinity-1S Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H, 13C ghi máy Bruker AV-500, dùng DMSO-d6 làm dung môi, độ dịch chuyển hóa học (δ) biểu thị đơn vị phần triệu (ppm), lấy mốc pic chất chuẩn nội tetramethylsilan (TMS) Phổ khối lượng ghi máy khối phổ LC-MSD-Trap-SL Các acid hydroxamic 4a-h tổng hợp theo sơ đồ 1: Sơ đồ Quy trình tổng hợp dẫn chất 4a-h Các dẫn chất 8a-d tổng hợp theo sơ đồ 2: Sơ đồ Quy trình tổng hợp dẫn chất 8a-d Các dẫn chất 10a-d tổng hợp theo sơ đồ 3: Sơ đồ Quy trình tổng hợp dẫn chất 10a-d Thử hoạt tính sinh học Tác dụng ức chế HDAC thực khoa Dược, Đại học Chungbuk, Hàn Quốc với kit Fluorogenic (Enzo Life Sciences Inc.) theo hướng dẫn nhà sản xuất Tác dụng kháng tế bào ung thư in vitro thực khoa Dược, Đại học Chungbuk, Hàn Quốc dòng tế bào: SW620 (ung thư đại tràng), PC3 (ung thư biểu mô tuyến tiền liệt) NCI-H23 (ung thư phổi) theo phương pháp SRB giá trị IC50 tính theo phương pháp GraphPad Prism Kết phát Về tổng hợp hóa học + Đã tổng hợp 16 dẫn chất N-hydroxybenzamid/N-hydroxypropenamid thiết kế ban đầu + Đã kiểm tra độ tinh khiết sản phẩm TLC đo nhiệt độ nóng chảy + Đã khẳng định cấu trúc sản phẩm phương pháp IR, MS, 1H-NMR 13 C-NMR Về hoạt tính sinh học + Cả 16 dẫn chất có tác dụng ức chế HDAC với IC50 nhỏ, cỡ µM, dãy dẫn chất 10a-d có hoạt tính ức chế HDAC tốt + Cả 16 dẫn chất có tiềm kháng dòng tế bào ung thư thử nghiệm: SW620, PC-3, NCI-H23 Kết luận Chúng tơi tổng hợp nhóm dẫn chất N-hydroxybenzamid Nhydroxypropenamid có tác dụng ức chế tốt HDAC có tiềm kháng dòng tế bào ung thư thử nghiệm Một số dẫn chất (như 4e, 8b-c 10b-d) có độc tính tế bào tốt chất đối chiếu dương tính SAHA tới lần Điều chứng minh cấu trúc quinazolin-4(3H)on nhóm nhận diện bề mặt phù hợp chất ức chế HDAC Từ khóa Histon deacetylase, acid hydroxamic, quinazolin-4(3H)-on ... chất 8a-d tổng hợp theo sơ đồ 2: Sơ đồ Quy trình tổng hợp dẫn chất 8a-d Các dẫn chất 10a-d tổng hợp theo sơ đồ 3: Sơ đồ Quy trình tổng hợp dẫn chất 10a-d Thử hoạt tính sinh học Tác dụng ức chế... HDAC thực khoa Dược, Đại học Chungbuk, Hàn Quốc với kit Fluorogenic (Enzo Life Sciences Inc.) theo hướng dẫn nhà sản xuất Tác dụng kháng tế bào ung thư in vitro thực khoa Dược, Đại học Chungbuk,... C-NMR Về hoạt tính sinh học + Cả 16 dẫn chất có tác dụng ức chế HDAC với IC50 nhỏ, cỡ µM, dãy dẫn chất 10a-d có hoạt tính ức chế HDAC tốt + Cả 16 dẫn chất có tiềm kháng dòng tế bào ung thư thử nghiệm: