Luận văn thực trạng hiện tượng rối loạn sinh sản ở bò, bước đầu xác định hàm lượng progesterone ở bò bị rối loạn sinh sản bằng phươ

Luận văn thực trạng hiện tượng rối loạn sinh sản ở bò, bước đầu xác định hàm lượng progesterone ở bò bị rối loạn sinh sản bằng phươ

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI -------------- NGUYỄN ðỨC LÂM NGHIỆP THỰC TRẠNG HIỆN TƯỢNG RỐI LOẠN SINH SẢN Ở BÒ, BƯỚC ðẦU XÁC ðỊNH HÀM LƯỢNG PROGESTERONE Ở BÒ RỐI LOẠN SINH SẢN BẰNG PHƯƠNG PHÁP ELISA VÀ THỬ NGHIỆM ðIỀU TRỊ LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành : Thú y Mã số : 60.62.50 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS. TRẦN TIẾN DŨNG HÀ NỘI - 2008 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… i LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan rằng: - Các kết quả nghiên cứu trong luận văn là trung thực, khách quan và chưa ñược sử dụng ñể bảo vệ một học vị nào. - Mọi sự giúp ñỡ cho việc thực hiện luận văn ñã ñược cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn ñã ñược chỉ rõ nguồn gốc. Hà nội, tháng 9 năm 2008 Tác giả luận văn Nguyễn ðức Lâm Nghiệp Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… ii LỜI CẢM ƠN Trong suốt hai năm học tập và hoàn thành luận văn, với nỗ lực của bản thân, tôi ñã nhận ñược sự giúp ñỡ, hướng dẫn tận tình của nhiều cá nhân và tập thể, cho phép tôi ñược tỏ lòng biết ơn và cảm ơn chân thành tới: Ban Giám hiệu Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội, ban chủ nhiệm khoa Sau ðại học, ban chủ nhiệm khoa Thú y ñã giúp ñỡ, tạo ñiều kiện thuận lợi ñể tôi học tập, tiếp thu kiến thức của chương trình học. ðặc biệt tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy hướng dẫn khoa học PGS.TS. Trần Tiến Dũng ñã tận tình hướng dẫn tôi trong quá trình nghiên cứu và xây dựng luận văn. Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể thầy cô giáo, cán bộ, công nhân viên trong Khoa Thú y, Phòng công nghệ tế bào ñộng vật - Viện công nghệ sinh học, ñặc biệt tôi xin chân thành cảm ơn TS. ðỗ Thị Thảo ñã giúp ñỡ và ñịnh hướng cho tôi từng bước ñi trong khoa học. Xin chân thành cảm ơn Ban giám ñốc, tập thể cán bộ công nhân viên Trung tâm nghiên cứu bò và ñồng cỏ Ba Vì. Nhân dịp hoàn thành luận văn, cho phép tôi ñược gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia ñình, người thân cùng bạn bè ñã ñộng viên giúp ñỡ tôi vượt qua mọi khó khăn trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu, thực hiện ñề tài. Một lần nữa tôi xin ñược bày tỏ lòng biết ơn, cảm ơn chân thành tới những tập thể, cá nhân ñã tạo ñiều kiện giúp ñỡ tôi hoàn thành chương trình học tập. Hà Nội, tháng 9 năm 2008 Tác giả Nguyễn ðức Lâm Nghiệp Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… iii MỤC LỤC Lời cam ñoan .i Lời cảm ơn . ii Mục lục iii Danh mục các hình, sơ ñồ, biểu ñồ, ñồ thị Error! Bookmark not defined. 1. Mở ñầu 1 1.1. ðặt vấn ñề .1 1.2. Mục ñích nghiên cứu .3 1.2.1. ðánh giá ñược thực trạng sinh sản của ñàn bò. 3 1.2.2. Xác ñịnh một số bệnh ở buồng trứng bò gây hiện tượng rối loạn sinh sản 3 1.2.3. ứng dụng hormone sinh dục và chế phẩm hormone ñiều trị 3 1.3. ý nghĩa khoa học và thực tiễn 3 2. Tổng quan tài liệu .4 2.1. Cơ sở khoa học của việc nghiên cứu khả năng sinh sản 4 2.1.1. ðặc ñiểm cấu tạo và chức năng cơ quan sinh dục bò cái 4 2.1.3. Sự ñiều hoà hoạt ñộng sinh dục của tuyến nội tiết 21 2.1.4. Những nhân tố ảnh hưởng ñến khả năng sinh sản 30 2.2. Hiện tượng rối loạn sinh sản, các phương pháp khắc phục hiện tượng rối loạn sinh sản ở gia súc cái 33 2.2.1. Nguyên nhân gây ra hiện tượng rối loạn sinh sản .33 2.2.2. Các phương pháp khắc phục hiện tượng rối loạn sinh sản 34 2.3. Hormone và các phương pháp ñịnh lượng hormone .41 2.3.1. Hiểu biết về Progesterone .42 2.3.2. Các phương pháp ñịnh lượng hormone .45 3. ðối tượng, nội dung, nguyên liệu và phương pháp nghiên cứu .50 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… iv 3.1. ðối tượng nghiên cứu 50 3.2. Nội dung nghiên cứu 50 3.2.1. ðánh giá thực trạng sinh sản của ñàn bò lai tại Ba Vì 50 3.2.2. Xác ñịnh hiện tượng rối loạn sinh sản thường gặp ở bò lai hướng sữa thông qua khám lâm sàng và ứng dụng kỹ thuật ELISA ñể xác ñịnh.50 3.2.3. Sử dụng hormone sinh dục và chế phẩm hormone ñể ñiều trị. 50 3.3. Phương pháp nghiên cứu .50 3.3.1. Phương pháp ñánh giá các chỉ tiêu sinh sản 51 3.3.2. Phương pháp ñịnh lượng hormone 52 3.3.3. Sử dụng hormone sinh dục và chế phẩm hormone ñể ñiều trị một vài hiện tượng rối loạn sinh sản. 54 3.4. Phương pháp xử lý số liệu .55 3.5. Thời gian và ñịa ñiểm nghiên cứu .55 4. Kết quả nghiên cứu và thảo luận .56 4.1. Kết quả ñiều tra về khả năng sinh sản của ñàn bò lai hướng sữa ở Ba Vì - Hà Tây .56 4.1.1. Khối lượng cơ thể và tuổi phối giống lần ñầu của ñàn bò lai .57 4.1.2. Khối lượng cơ thể và tuổi ñẻ lứa ñầu của ñàn bò lai .60 4.1.3. Thời gian ñộng dục lại sau khi ñẻ của bò lai hướng sữa .62 4.1.4. Khoảng cách giữa hai lứa ñẻ 63 4.1.5. Hệ số phối giống 65 4.1.6. Tỷ lệ thụ thai .66 4.1.7. Hiện tượng rối loạn sinh sản của ñàn bò lai hướng sữa ở Ba Vì .69 4.2. Kết quả ñịnh lượng Progesterone (P4) .72 4.2.1. ðộng thái P 4 trong một chu kỳ ñộng dục bình thường của bò .72 4.2.2. Kết quả ñịnh lượng P 4 trong các trường hợp bò bị rối loạn sinh sản74 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… v 4.2.3. Kết quả chẩn ñoán nguyên nhân gây rối loạn sinh sản bằng ñịnh lượng P 4 kết hợp khám buồng trứng qua trực tràng 78 4.3. Sử dụng hormone sinh dục và chế phẩm hormone ñể ñiều trị 79 4.3.1. Kết quả sử dụng chế phẩm PGF 2 α trên bò có thể vàng tồn lưu .80 4.3.2. Kết quả sử dụng HCG trên bò có u nang buồng trứng .82 4.3.3. Kết quả sử dụng GnRH kết hợp với PGF 2 α ở bò có buồng trứng kém phát triển .84 5. kết luận và ñề nghị 86 5.1. Kết luận 86 5.1.1. Kết quả ñiều tra về khả năng sinh sản của ñàn bò lai hướng sữa ở Ba Vì - Hà Nội .86 5.1.2. Kết quả ñịnh lượng Progesterone 86 5.1.3. Kết quả ñiều trị bệnh ở buồng trứng .86 5.2. ðề nghị 87 5.2.1. Công tác quản lý .87 5.2.2. Về kỹ thuật 87 Tài liệu tham khảo 88 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… vi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Cs: Cộng sự ðVC: ðơn vị chuột ELISA: Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay FBS: Fetal Bovine Serum FRH: Folliculin Releasing hormone FSH: Follicle Stimulating hormone GnRH: Gonadotropin Releasing hormone HCG: Human Chorionic Gonadotropin HF : Holstein Friesian KN: Kháng nguyên KT: Kháng thể LH: Luteinizing hormone LRH: Lutein Releasing hormone LTH: Luteo Tropic hormone PGF 2 α: Prostaglandin F 2 alpha PMSG: Pregnant Mare Serum Gonadotropin PRH: Prolactin Releasing hormone P 4 : Progesterone OD: Optical Density RIA: Radio Immuno Assay TMB: Tetrametyl benzidin Tr: Trang Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1. Các giai ñoạn của pha ñộng dục Bảng 4.1. Cơ cấu ñàn bò sữa của Trung tâm nghiên cứu bò và ñồng cỏ Ba Vì . Bảng 4.2. Khối lượng cơ thể và tuổi phối giống lần ñầu của bò cái lai Bảng 4.3. Khối lượng cơ thể và tuổi ñẻ lứa ñầu của bò cái lai Bảng 4.4. Thời gian ñộng dục lại sau khi ñẻ của bò cái lai Bảng 4.5. Khoảng cách giữa hai lứa ñẻ của bò cái lai Bảng 4.6. Hệ số phối giống và tỷ lệ thụ thai trên ñàn bò lai hướng sữa . Bảng 4.7. Phân loại nguyên nhân của hiện tượng rối loạn sinh sản Bảng 4. 8. Hàm lượng P 4 trong một chu kỳ ñộng dục của bò . Bảng 4.9. Hàm lượng P 4 trong các trường hợp chậm sinh ở bò . Bảng 4.10. Kết quả chẩn ñoán nguyên nhân chậm sinh ở bò sữa bằng ñịnh lượng P 4 kết hợp khám buồng trứng qua trực tràng . Bảng 4.11. Hiệu quả sử dụng PGF 2 α gây ñộng dục ở bò lai hướng sữa Bảng 4.12. Hiệu quả sử dụng HCG gây ñộng dục ở bò lai hướng sữa Bảng 4.13. Hiệu quả sử dụng GnRH kết hợp PGF2α gây ñộng dục ở bò Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… viii DANH MỤC CÁC HÌNH, SƠ ðỒ, BIỂU ðỒ, ðỒ THỊ ơ Hình 2.1. Cơ quan sinh dục của bò cái ðồ thị 2.1. ðồ thị sóng nang trong chu kỳ ðồ thị 2.2. Diễn biến ñộng thái của các hormone trong máu ở các giai ñoạn trong chu kỳ ñộng dục ở bò cái Sơ ñồ 2.1. Hypothalamus ñiều khiển hoạt ñộng hệ nội tiết Hình 2.2. Cơ chế thần kinh thể dịch ñiều hoà chu kỳ ñộng dục của bò cái Hình 2.3. Công thức hoá học của Progesterone . Sơ ñồ 2.2. Sơ ñồ phản ứng ELISA ðồ thị 2.3. Mối tương quan giữa mật ñộ quang học (OD) và nồng ñộ progesterone (ηg/ml) . Biểu ñồ 4.1. Nguyên nhân của hiện tượng rối loạn sinh sản ở bò cái lai hướng sữa ðồ thị 4.1. ðộng thái P 4 trong một chu kỳ ñộng dục bình thường của bò sữa ðồ thị 4.2. Hàm lượng P 4 trong các trường hợp chậm sinh do buồng trứng Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 1 1. MỞ ðẦU 1.1. ðẶT VẤN ðỀ Với mục tiêu ñưa chăn nuôi trở thành ngành sản xuất chính và chiếm vị trí cao trong ngành sản xuất nông nghiệp của ñất nước, trong những năm qua, ngành chăn nuôi luôn ñược sự quan tâm ñầu tư của ðảng và nhà nước, vì vậy ñã ñạt ñược những thành tựu ñáng kể, trong ñó chăn nuôi ñại gia súc có một vị trí rất quan trọng do phải ñảm bảo ñáp ứng nhu cầu ngày càng cao của ñất nước về thịt và sữa. Quyết ñịnh 167/2001 của Thủ tướng chính phủ về chính sách phát triển bò sữa của nước ta, mục tiêu của Chính phủ ñến năm 2005 ñạt 100.000 bò sữa ñáp ứng trên 20% lượng sữa tiêu dùng trong nước, ñến năm 2010 ñạt 200.000 bò sữa ñáp ứng trên 40% lượng sữa tiêu dùng trong nước, sau năm 2010 ñạt 1,1 triệu tấn sữa. ðàn bò sữa ñã phát triển với tốc ñộ nhanh trên phạm vi cả nước. Theo thống kê của Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn cho ñến tháng 6/2007 nước ta ñã có gần 200.000 con bò sữa và trên 3 triệu con bò thịt ñược nuôi phân tán ở các vùng nông thôn với phương thức nuôi nhốt hoàn toàn hoặc bán chăn thả. Trong ñiều kiện khí hậu ở Việt Nam không thích hợp cho nuôi bò sữa thuần nên ta thường nuôi bò lai hướng sữa (HF x LaiSind) F 1 , F 2 , F 3 , chúng có thể thích nghi hơn. Tuy nhiên, mô hình chăn nuôi phân tán ở các nông hộ và các trang trại nhỏ với quy mô từ 3 – 20 con, ñiều kiện chăm sóc nuôi dưỡng có sự khác nhau nên dẫn ñến các chỉ tiêu sản xuất của ñàn bò cũng khác nhau, các chỉ tiêu sinh sản thường không ổn ñịnh ñặc biệt hiện tượng rối loạn sinh sản xảy ra trên ñàn bò cái do nhiều nguyên nhân như: di truyền, chế ñộ chăm sóc nuôi dưỡng, khai thác và quản lý ñàn, dị tật và các quá trình bệnh lý ở cơ quan sinh dục và ñặc biệt do rối loạn nội tiết, ñã làm cho tỷ lệ ñẻ toàn ñàn thấp, tỷ lệ thụ thai thấp, hệ số phối giống cao và khoảng cách giữa . NGUYỄN ðỨC LÂM NGHIỆP THỰC TRẠNG HIỆN TƯỢNG RỐI LOẠN SINH SẢN Ở BÒ, BƯỚC ðẦU XÁC ðỊNH HÀM LƯỢNG PROGESTERONE Ở BÒ RỐI LOẠN SINH SẢN BẰNG PHƯƠNG PHÁP ELISA. tiến hành ñề tài: Thực trạng hiện tượng rối loạn sinh sản ở bò, bước ñầu xác ñịnh hàm lượng Progesterone ở bò rối loạn sinh sản bằng phương pháp ELISA