Tình trạng rối loạn sinh sản ở bò và ứng dụng thử nghiệm ELISA để xác định hàm lượng progesterone
MỤC LỤC
Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN
Xỏc ủịnh một số bệnh ở buồng trứng bũ gõy hiện tượng rối loạn sinh sản thường gặp, nguyên nhân gây bệnh ở bò lai hướng sữa thông qua khám lõm sàng và ứng dụng kỹ thuật ELISA ủể xỏc ủịnh. Ứng dụng hormone sinh dục và chế phẩm hormone nhằm phòng và ủiều trị một vài hiện tượng rối loạn sinh sản ở bũ.
Oestrus Df - 1
Sự ủiều hoà hoạt ủộng sinh dục của tuyến nội tiết
Lần ủầu tiờn Prostaglandin ủược Eiber phỏt hiện vào năm 1935 trong tinh dịch người, lỳc ủú người ta giả thiết rằng nguồn gốc của nú là từ tuyến tiền liệt (Prostata glansdula) do ủú mà cú tờn là Prostaglandin, sau này nú cũn ủược tỡm thấy ở tử cung, buồng trứng, nhau thai, nước ối, phổi, nóo, ruột, thận. Prostaglandin là sản phẩm của các axit béo chưa no có 20 gốc carbon, công thức hoá học của Prostaglandin là C20H34O5. Tuỳ theo cách sắp xếp khác nhau của cỏc nguyờn tử, cỏch kết hợp của hai nhúm Hydroxyl và Axeton ủể tạo ra các Prostaglandin nhóm A, B, E, F, trong các nhóm trên chỉ có Prostaglandin ở. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………29 nhúm E và nhúm F, ủặc biệt là ở nhúm F cú tỏc dụng mạnh ủến hoạt ủộng sinh dục và ủược gọi là PGF2α. Tỏc dụng chớnh của PGF2α là làm thoỏi hoỏ thể vàng, giảm hàm lượng Progesterone trong máu, kích thích tiết Gonadotropin, kớch thớch phỏt triển nang trứng gõy ủộng dục và rụng trứng. PGF2α khụng cú hiệu lực khi dựng cho gia sỳc khụng cú thể vàng. Ngày nay, PGF2α và cỏc chất ủồng dạng của nú ủược xem là chất cú tỏc dụng trong quỏ trỡnh thoỏi hoỏ thể vàng. Chỳng ủược dựng rộng rói và khỏ phổ biến trong việc gõy ủộng dục ủồng loạt và kế hoạch hoỏ trong phối giống gia sỳc. e) Huyết thanh ngựa chửa (PMSG-Pregnant Mare Serum Gonadotropin). Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………30 súc cái như FSH kích thích sinh trưởng và phát triển của bao noãn, gây rụng trứng và hình thành thể vàng, PMSG làm tăng nhanh sự sinh trưởng và chín của tế bào trứng và gõy rụng trứng, làm tăng biểu hiện ủộng dục tạo ủiều kiện thuận lợi cho sự thụ tinh, PMSG cú tỏc dụng nhất ủối với trõu bũ cỏi bị nhược năng buồng trứng, mất tớnh dục, cú chu kỳ ủộng dục nhưng khụng rụng trứng (Nguyễn Xuân Trạch, 1996 [36]).
Những nhõn tố ảnh hưởng ủến khả năng sinh sản 1. Di truyền (nhân tố bên trong)
Kẽm (Zn) tham gia kích thích sự chuyển hoá caroten thành vitamin A, sự thiếu hụt kẽm diễn ra cùng với sự thiếu hụt vitamin A trong cơ thể, niêm mạc mắt, niờm mạc ruột và niờm mạc ủường sinh dục. Khi thiếu những nguyờn tố này buồng trứng thường nhỏ lại. ðồng và sắt trong cơ thể nằm ở những liên kết chức năng. ðồng giúp hấp thụ sắt và sinh tổng hợp Hemoglobin tham gia vào chuyển hoá sắc tố ủiều tiết chức phận lụng, da. Những hợp chất của ủồng kớch thớch trung tõm sinh dục bằng cỏch thay ủổi hoạt lực oxytoxin mỏu và bảo ủảm một biểu hiện ủộng dục hoàn chỉnh. Khi thiếu Mangan, sự thành thục về tính dục bò chậm, có những chu. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………32 kỳ khụng rụng trứng. b) Thời tiết khí hậu. Những yếu tố ngoại cảnh ảnh hưởng ủến chức năng sinh sản của ủộng vật là ủộ dài thời gian chiếu sỏng, nhiệt ủộ khụng khớ và ủộ ẩm khụng khớ. ðối với bũ, nếu ủược nuụi dưỡng phự hợp, ủảm bảo thức ăn ủủ số lượng, chất lượng, chu kỳ ủộng dục xuất hiện bất kỳ thời gian nào trong năm. Ngoài những yếu tố kể trên, các rối loạn chức năng sinh sản và bệnh sản khoa ở bò cỏi cũng dẫn ủến năng suất sinh sản giảm thấp. Kết quả nghiên cứu cho biết các trường hợp vô sinh ở bị nhiều hơn ở trõu. Trong số những con cái trưởng thành khoảng cỏch dài từ khi ủẻ ủến khi ủộng dục lại là yếu tố chớnh trong vô sinh, 38% ở trâu cái trưởng thành và 44% ở bò cái trưởng thành có buồng trứng khụng phỏt triển ủủ chức năng. c) Tổ chức phối giống. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………33 Theo Sipilop V.S (1967) [53] cho rằng thời gian di chuyển của trứng từ khi rụng ủến vị trớ thụ tinh trong khoảng vài giờ.
Nguyên nhân gây ra hiện tượng rối loạn sinh sản
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………34 + Cỏc yếu tố liờn quan ủến ủộ tuổi, hệ nội tiết, hệ thần kinh hoạt ủộng tuyến sữa, các bệnh ký sinh trùng và truyền nhiễm. + Các trường hợp rối loạn chức năng, thoái hoá các bộ phận của cơ quan sinh dục ủặc biệt ở buồng trứng, tồn lưu thể vàng, rối loạn chu kỳ sinh dục, những dị tật về tử cung và các bộ phận sinh dục khác.
Các phương pháp khắc phục hiện tượng rối loạn sinh sản
* Hormone liệu pháp: là biện pháp sử dụng các chế phẩm hormone tự nhiờn hay tổng hợp, cú thể sử dụng ủể khắc phục hiện tượng rối loạn sinh sản như những chế phẩm hormone thuộc nhóm Oestrogene (Syoestrol, Folicullin, Estrograndon, Estroginol..). Các chế phẩm thuộc thuỳ sau tuyến yên như Oxytoxin, Gipotoxin. Cỏc chế phẩm Oestrogene dựng ủiều trị cỏc bệnh sỏt nhau, xơ hoá tử cung, giảm hoặc mất trương lực cơ tử cung và một số trường hợp thiểu năng buồng trứng. a) Khắc phục hiện tượng rối loạn sinh sản bằng hormone GnRH (Gonadotropin Releasing Hormone = hormone giải phóng kích dục tố). Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………36 ðây là chế phẩm tổng hợp tương tự như hormone do trung khu Hypothalamus tiết ra, có tác dụng kích thích thuỳ trước tuyến yên tiết FSH và LH. GnRH thường ủược sử dụng trong trường hợp buồng trứng bũ kộm phỏt triển hoặc bị u nang hoặc ủối với bũ ủộng dục thầm lặng, khụng rừ ủộng dục nhưng phối giống nhiều lần không có chửa. b) Khắc phục hiện tượng rối loạn sinh sản bằng chế phẩm gonadotropin Dựa trờn nguyờn lý kớch thớch trực tiếp ủến hoạt ủộng của buồng trứng cũng như kớch thớch giỏn tiếp thụng qua hoạt ủộng tiết gonadotropin của tuyến yờn cỏc chế phẩm gonadotropin ủược sử dụng rộng rói ủể khắc phục vụ sinh ở trâu, bò cái. Cỏc nhà khoa học Bắc Ai Len (Trexenkov, 1987) ủó dựng PMSG kết hợp với PGF2α tiờm cho bũ thu. c) Khắc phục hiện tượng rối loạn sinh sản bằng Progesterone phối hợp chế phẩm gonadotropin. Nguyên lý của phương pháp là khi tiêm Progesterone sẽ làm teo nhỏ thể vàng, kích thích tuyến yên tiết FSH, làm phát triển noãn bao. Sau khi Progesterone hết tác dụng, tuyến yên sẽ tiết Gonadotropin với số lượng lớn. Kết hợp với việc thêm chế phẩm Gonadotropin bổ sung sẽ làm cho noãn bao chớn và rụng trứng, con vật sẽ ủộng dục và thụ thai. Phương phỏp này rất hiệu quả khi ủiều trị thể vàng tồn lưu, u nang buồng trứng, nhược năng buồng trứng. Sử dụng Progesterone gõy ủộng dục ở bũ cú nhiều phỏc ủồ ủiều trị và liều lượng khác nhau. Có thể dùng riêng biệt hoặc kết hợp với PMSG và HCG. Có thể dùng Progesterone với HCG, sự phối hợp của hai hormone này cú kết quả tốt nhất khi ủiều trị u nang buồng trứng. d) Khắc phục hiện tượng rối loạn sinh sản bằng các chế phẩm PGF2α Prostaglandin có tác dụng phân hủy thể vàng kích thích sinh trưởng, phát triển bao noãn, kích thích tiết GnRH, FSH, LH gây rụng trứng, vì vậy cỏc chế phẩm PGF2α ủược sử dụng rộng rói trong ủiều trị vụ sinh và chậm sinh do thể vàng tồn lưu, ủiều trị u nang buồng trứng, ủộng dục ngầm, phối.
Hiểu biết về Progesterone a) Nguồn gốc Progesterone
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………42 Hormone là những hoạt chất sinh học ủặc biệt trong cơ thể, ủược tiết ra với một lượng rất nhỏ, tuần hoàn theo mỏu từ cơ quan sản sinh ủến cơ quan tiếp nhận (cơ quan ủớch) phỏt huy tỏc dụng sinh học cao, ủiều hoà cỏc hoạt ủộng sống của cơ thể (Nguyễn Xuõn Tịnh và Cs, 1996 [33]). Progesterone có 21 Carbon có nhân cơ bản là pregman, có 2 nhóm –CH3 ủớnh ở vị trớ carbon thứ 10 và thứ 13, trong phõn tử cũn thờm chuỗi -CO-CH3 ủớnh ở vị trớ Carbon thứ 14, trong ủú cú 2 nguyờn tử Hydro ở vị trớ carbon thứ 20 ủược thay thế bằng một nguyờn tử Oxy.
Cỏc phương phỏp ủịnh lượng hormone
Về bản chất, sự kết hợp giữa kháng thể – kháng nguyên chính là sự liên kết giữa các nhóm chức khỏc nhau của khỏng nguyờn với trung tõm hoạt ủộng của khỏng thể nhờ cỏc lực liờn kết ủặc trưng là lực Wander – Wals, lực liờn kết Hydro và lực liờn kết tĩnh ủiện (Vũ Triệu An, 1998 [1]). Cỏc enzyme ủược sử dụng trong phương phỏp ELISA cú hoạt tớnh cao như peroxydase (chế từ củ cải ủen), glucose-oxydase (chế từ nấm mốc) hoặc βgalacto-oxydase (chế từ vi khuẩn E.coli) ủể gắn hormone giống nhau, trong ủú peroxydase ủược sử dụng một cỏch thụng dụng nhất.
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
Thụng thường thời gian ủộng dục lại sau khi ủẻ dao ủộng trong khoảng 30 – 180 ngày, thời gian này phụ thuộc nhiều vào chế ủộ chăm súc nuụi dưỡng và hộ lý sau khi ủẻ, phụ thuộc vào tỷ lệ thay ủàn, sự tỏc ủộng về kỹ thuật cú thể rỳt ngắn ủược thời gian ủộng dục lại sau ủẻ, ủặc biệt với bũ lai cú tỷ lệ mỏu ngoại càng cao (F2 3/4 HF) thỡ sự ủũi hỏi về dinh dưỡng càng cao. Theo chúng tôi đàn bò vùng phụ cận có hệ số phối giống cao là vì ở các xi này không có dẫn tinh viên hoặc có thể không có tinh bò sữa, vì vậy thời gian phối không thích hợp hoặc sớm hoặc muộn quá nên dẫn đến hệ số phối giống cao.
