Nghiên cứu thu nhận polyphenol có hoạt tính chống oxy hóa từ hải miên thu mẫu tại nha trang bằng kỹ thuật chiết hỗ trợ siêu âm

BỘ GIÁO VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG TRẦN KHẮC TRÍ NHÂN NGHIÊN CỨU THU NHẬN POLYPHENOL CĨ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HÓA TỪ HẢI MIÊN THU MẪU TẠI NHA TRANG BẰNG KỸ THUẬT CHIẾT HỖ TRỢ SIÊU ÂM LUẬN VĂN THẠC SĨ KHÁNH HÒA - 2017 BỘ GIÁO VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG TRẦN KHẮC TRÍ NHÂN NGHIÊN CỨU THU NHẬN POLYPHENOL CĨ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HĨA TỪ HẢI MIÊN THU MẪU TẠI NHA TRANG BẰNG KỸ THUẬT CHIẾT HỖ TRỢ SIÊU ÂM LUẬN VĂN THẠC SĨ Ngành: Công nghệ Thực phẩm Mã số: 60540101 Quyết định giao đề tài: Số 295/QĐ-ĐHNT ngày 15/3/2017 Quyết định thành lập hội đồng: Ngày bảo vệ: 30/12/2017 Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS Đặng Xuân Cƣờng PGS TS Vũ Ngọc Bội Chủ tịch Hội đồng: PGS TS Ngô Đăng Nghĩa Khoa sau đại học: KHÁNH HÒA - 2017 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chƣa đƣợc cơng bố cơng trình khác Khánh Hịa, ngày 01 tháng 01 năm 2018 Tác giả luận văn Trần Khắc Trí Nhân iii LỜI CẢM ƠN Để hồn thành Luận văn này, Trƣớc hết, xin gửi tới Ban Giám hiệu Trƣờng Đại học Nha Trang, Ban Chủ nhiệm Khoa Cơng nghệ Thực phẩm Phịng Đào tạo Sau đại học kính trọng, niềm tự hào đƣợc học tập nghiên cứu Trƣờng thời gian qua Sự biết ơn sâu sắc xin đƣợc dành cho: TS Đặng Xuân Cƣờng - Viện Nghiên cứu Ứng dụng Công nghệ Nha Trang PGS TS Vũ Ngọc Bội - Trƣởng Khoa Công nghệ Thực phẩm tận tình giúp đỡ hƣớng dẫn suốt trình thực Luận văn Xin chân thành cảm ơn: q Thầy, Cơ giáo - Trung tâm Thí nghiệm Thực hành Trƣờng Đại học Nha Trang Phịng Thí nghiệm Phân tích - Viện Nghiên cứu Ứng dụng Cơng nghệ Nha Trang tạo điều kiện tốt cho tơi q trình thực Luận văn Xin ghi nhận tình cảm giúp đỡ Thầy, Cô giáo Khoa Công nghệ Thực phẩm giảng dạy giúp đỡ thời gian học tập Trƣờng vừa qua Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến gia đình bạn bè giúp đỡ động viên tơi suốt q trình học tập thực luận văn vừa qua Khánh Hòa, ngày 01 tháng 01 năm 2018 Tác giả luận văn Trần Khắc Trí Nhân iv MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN iii LỜI CẢM ƠN .iv MỤC LỤC v DANH MỤC CÁC BẢNG x DANH MỤC CÁC HÌNH xi TRÍCH YẾU LUẬN VĂN xv MỞ ĐẦU CHƢƠNG - TỔNG QUAN 1.1 HẢI MIÊN 1.1.1 Giới thiệu Hải Miên 1.1.2 Phân loại phân bố loài Hải Miên 1.1.3 Ứng dụng Hải Miên Việt Nam giới 1.1.4 Tình hình nghiên cứu Hải Miên nƣớc 1.2 GIỚI THIỆU VỀ POLYPHENOL .8 1.2.1 Sơ lƣợc polyphenol 1.2.2 Phân loại polyphenol 1.2.3 Polyphenol Hải Miên 11 1.2.4 Vai trị polyphenol có Hải Miên 14 1.2.5 Cơ chế chống oxy hóa polyphenol 15 1.3 KỸ THUẬT CHIẾT, ĐỊNH LƢỢNG VÀ TINH CHẾ POLYPHENOL 17 1.3.1 Nguyên lý trình chiết 17 1.3.2 Những yếu tố ảnh hƣởng đến trình chiết 19 1.3.3 Những khó khăn nghiên cứu chiết tìm hoạt chất có đối tƣợng Hải Miên 20 v 1.3.4 Kỹ thuật chiết có hỗ trợ sóng siêu âm 20 1.3.5 Các kỹ thuật chiết khác 22 1.4 PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH LƢỢNG HỢP CHẤT POLYPHENOL 24 1.5 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU POLYPHENOL TRÊN THẾ GIỚI VÀ Ở VIỆT NAM 25 1.5.1 Tình hình nghiên cứu polyphenol giới 25 1.5.2 Tình hình nghiên cứu polyphenol Việt Nam 27 CHƢƠNG - NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU 28 2.1.1 Hải Miên nguyên liệu 28 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.3 PHƢƠNG PHÁP BỐ TRÍ THÍ NGHIỆM .30 2.3.1 Phƣơng pháp bố trí thí nghiệm tổng quát 30 2.3.2 Phƣơng pháp sàng lọc mẫu 32 2.3.3 Bố trí thí nghiệm xác định thơng số q trình nghiên cứu 32 2.4 HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ .40 2.5 PHƢƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU 41 CHƢƠNG - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 42 3.1 THU THẬP MẪU VÀ SÀNG LỌC .42 3.1.1 Thu mẫu Hải Miên vịnh Nha Trang – Khánh Hòa 42 3.1.2 Cấu trúc đơn vị khung xƣơng loài Hải Miên thu mẫu Nha Trang 44 3.1.3 Sàng lọc lồi Hải Miên có hàm lƣợng polyphenol hoạt tính chống oxy cao 46 3.2 NGHIÊN CỨU CHIẾT POLYPHENOL CĨ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HÓA TỪ HẢI MIÊN A SUBERITOIDES THU MẪU TẠI VỊNH NHA TRANG BẰNG PHƢƠNG PHÁP CHIẾT CÓ HỖ TRỢ SÓNG SIÊU ÂM 52 3.2.1 Ảnh hƣởng chế độ chiết đến hàm lƣợng polyphenol hoạt tính chống oxy hóa tổng dịch chiết Hải Miên 52 vi 3.2.2 Ảnh hƣởng nhiệt độ chiết đến hàm lƣợng polyphenol hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết Hải Miên 55 3.2.3 Ảnh hƣởng thời gian chiết đến hàm lƣợng polyphenol hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết Hải Miên 58 3.2.4 Ảnh hƣởng tỷ lệ DM/NL (dung môi/nguyên liệu) đến hàm lƣợng polyphenol hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết Hải Miên 61 3.2.5 Ảnh hƣởng phƣơng thức chiết đến hàm lƣợng polyphenol hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết Hải Miên 64 3.2.6 Ảnh hƣởng pH dung mơi chiết lên hàm lƣợng polyphenol hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết Hải Miên 67 3.2.7 Đề xuất quy trình thu nhận popyphenol hoạt tính chống oxy hóa từ lồi Hải Miên (A superitoides) 69 3.3 SƠ BỘ TINH SẠCH POLYPHENOL CĨ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HÓA CHIẾT TỪ HẢI MIÊN A SUBERITOIDES 70 3.3.1 Phân đoạn n-hexan 71 3.3.2 Phân đoạn Chloroform 73 3.3.3 Phân đoạn ethanol 76 3.3.5 Phân đoạn ethyl acetate 79 3.3.5 Phân đoạn n-butanol 81 3.3.6 Độ polyphenol qua phân đoạn 84 3.3.7 Đề xuất quy trình thu nhận tinh sơ polyphenol hoạt tính chống oxy hóa từ Hải Miên 85 3.4 SẢN XUẤT VÀ ĐÁNH GIÁ CHẤT LƢỢNG BỘT POLYPHENOL HẢI MIÊN A SUBERITOIDES 87 3.4.1 Thử nghiệm sản xuất bột polyphenol từ Hải Miên A suberitoides kỹ thuật sấy phun…… 87 3.4.2 Đánh giá chất hàm lƣợng polyphenol hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết Hải Miên Aaptos suberitoides trƣớc sau sấy phun 88 vii 3.4.3 Phân tích phổ IR bột polyphenol từ Hải Miên A suberitoides 90 3.4.4 Phân tích nhiệt vi sai bột polyphenol từ Hải Miên A suberitoides 91 3.4.5 Đánh giá phân bố kích thƣớc hạt bột polyphenol từ Hải Miên A suberitoides 92 3.4.6 Quy trình thu nhận, tinh sơ sản xuất bột polyphenol hoạt tính chống oxy hóa từ Hải Miên Aaptos suberitoides 93 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN 96 TÀI LIỆU THAM KHẢO 98 PHỤ LỤC 109 viii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT DPPH : 2,2 diphenyl-1picrylhydrazyl IR : Phổ hồng ngoại Infra red DSC : Differential scanning calorimetry DM/NL : Dung môi/nguyên liệu A suberitoides : Aaptos suberitoides ix DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Tính chất số dung môi phổ biến chiết xuất hợp chất tự nhiên 18 Bảng 1.2 Thông số kỹ thuật bể chiết siêu âm Elmasonic S 100H 21 Bảng 3.1 Kết thu mẫu loài Hải Miên Vịnh Nha Trang – Khánh Hòa 42 x ... TRƢỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG TRẦN KHẮC TRÍ NHÂN NGHIÊN CỨU THU NHẬN POLYPHENOL CĨ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HÓA TỪ HẢI MIÊN THU MẪU TẠI NHA TRANG BẰNG KỸ THU? ??T CHIẾT HỖ TRỢ SIÊU ÂM LUẬN VĂN THẠC... ? ?Nghiên cứu thu nhận polyphenol có hoạt tính chống oxy hóa từ Hải Miên thu mẫu Nha Trang kỹ thu? ??t chiết hỗ trợ siêu âm? ?? Mục tiêu đạt đƣợc là: Đánh giá sàng lọc đƣợc lồi Hải miên có hàm lƣợng polyphenol. .. hành nghiên cứu chiết polyphenol có hoạt tính chống oxy hóa phƣơng pháp ngâm dầm có hỗ trợ siêu âm sơ tinh Điều kiện chiết polyphenol có hoạt tính chống oxy hóa cụ thể nhƣ, sử dụng kỹ thu? ??t chiết