Nghiên cứu tác dụng và cơ chế hạ glucose máu của dịch ép thân cây chuối tiêu (musa x paradisiaca l ) trên thực nghiệm

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ ĐÔNG NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG VÀ CƠ CHẾ HẠ GLUCOSE MÁU CỦA DỊCH ÉP THÂN CÂY CHUỐI TIÊU (MUSA X PARADISIACA L.) TRÊN THỰC NGHIỆM LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƢỢC HỌC HÀ NỘI, NĂM 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN THNGUYNGUYÊNNỄN THỊ ĐÔNGỊ ĐÔNG NGUYỄN THỊ ĐÔNG NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG VÀ CƠ CHẾ HẠ GLUCOSE MÁU CỦA DỊCH ÉP THÂN CÂY CHUỐI TIÊU (MUSA X PARADISIACA L.) TRÊN THỰC NGHIỆM LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƢỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: HÓA SINH DƢỢC MÃ SỐ: 62720408 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Phùng Thanh Hƣơng GS.TS Nguyễn Hải Nam HÀ NỘI, NĂM 2018 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa công bố công trình khác Tác giả luận án Nguyễn Thị Đơng LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình h c tập hồn thành luận án, tơi đ nhận hư ng d n, gi p đ qu báu nhà Khoa h c, th y cô giáo, anh ch , em, b n b đ ng nghiệp gia đình V i l ng k nh tr ng biết n sâu s c xin bày t l ng biết n chân thành t i PGS TS Phùng Thanh Hương, GS.TS Nguyễn Hải Nam, hai người Th y tâm huyết, tận tình ln sát cánh bên tơi quan tâm gi p đ động viên tơi suốt q trình h c tập, nghiên cứu hoàn thành luận án Tơi xin cảm n PGS.TS Nguyễn Hồng Anh, th y hư ng d n tôi, th y đ gi p đ nhều nghiên cứu Lời cảm n tiếp theo, xin trân tr ng cảm n an Giám hiệu trường Trường Đ i h c Dược Hà Nội, Trường Cao đẳng Dược Trung ng Hải Dư ng, đ t o điều kiện cho h c tập nghiên cứu Tôi xin gửi lời cảm n t i thày giáo, cô giáo, anh ch em k thuật viên ộ môn H a sinh, ộ môn Dược lực, Ph ng au đ i h c Trường Đ i H c Dược Hà Nội, ộ môn H a dược Trường Cao đẳng Dược Trung ng Hải Dư ng, đ t o m i điều kiện thuận lợi gi p đ tơi q trình h c tập hồn thành luận án Trong q trình làm thực nghiệm t i Khoa Sinh h a Huyết h c, Khoa Giải ph u bệnh- ệnh viện Đa khoa tỉnh Hải Dư ng Viện H a sinh biển- Viện Hàn lâm Khoa h c Việt Nam, Khoa H a sinh Vi sinh, Đ i h c H a h c Cơng nghệ Praha, Cộng hòa Czech Tơi đ nhận gi p đ điều kiện trang thiết b , h a chất k thuật gi p tơi hồn thành luận án Xin bày t l ng biết n t i chuyên gia,các ác sĩ, Dược sĩ, anh ch em k thuật viên t i c quan Xin gửi lời cảm n t i b n b , em sinh viên Trường Đ i h c Dược Hà Nội, anh ch em đ ng nghiệp Trường Cao đẳng Dược Trung ng Hải Dư ng, động viên gi p đ thời gian qua Lời cảm n cuối muốn giành tặng cho người thân gia đình đ ln bên c nh động viên, gi p đ giành m i thời gian để h c tập làm việc hoàn thành luận án NCS Nguyễn Thị Đông NCS Nguyễn Thị Đông MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 ĐẠI CƢƠNG VỀ BỆNH ĐÁI THÁO ĐƢỜNG 1.1.1 Định nghĩa, dịch tễ, phân loại đái tháo đường 1.1.2 Cơ chế bệnh sinh 1.2 CÁC CƠ CHẾ G ÂY HẠ GLUCOSE MÁU 10 1.2.1 Tăng cường số lượng insulin nội sinh 10 1.2.2 Tăng cường nhạy cảm mô đích với insulin 13 1.2.3 Tác dụng điều hòa, chuyển hóa tương tự insulin 17 1.2.4 Ức chế tiêu hóa carbohydrat 19 1.2.5 Các chế khác gây hạ glucose máu 20 1.3 CÁC MƠ HÌNH THỰC NGHIỆM TRONG NGHIÊN CỨU THUỐC ĐIỀU TRỊ ĐÁI THÁO ĐƢỜNG 20 1.3.1 Các mơ hình thực nghiệm in vivo 20 1.3.2 Các mơ hình thực nghiệm in vitro 24 1.4 CÂY CHUỐI TIÊU 26 1.4.1 Vị trí phân loại đặc điểm thực vật 26 1.4.2 Bộ phận dùng 27 1.4.3 Các nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng dược lý chuối tiêu (Musa x paradisiaca L.) 27 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 2.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 32 2.1.1 Dược liệu nghiên cứu 32 2.1.2 Động vật thí nghiệm 32 2.1.3 Các dòng tế bào cho nghiên cứu in vitro 33 2.2 DỤNG CỤ, HÓA CHẤT NGHIÊN CỨU 33 2.2.1 Thiết bị, dụng cụ 33 2.2.2 Thuốc hóa chất nghiên cứu 34 2.3 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 2.3.1 Phương pháp điều chế mẫu nghiên cứu 38 2.3.2 Phương pháp đánh giá tác dụng hạ glucose máu thực nghiệm chuột 39 2.3.3 Các kỹ thuật định lượng hóa sinh thực nghiệm in vivo 44 2.3.4 Kỹ thuật xét nghiệm mô bệnh học 47 2.3.5 Phương pháp xác định hoạt độ enzym G6Pase gan (EC 3.1.3.9) 48 2.3.6 Phương pháp đánh giá khả ức chế enzym in vitro 49 2.3.7 Phương pháp đánh giá ảnh hưởng phosphoryl hóa AMPK IRS-1 53 2.3.8 Phương pháp đánh giá khả ức chế biệt hóa tế bào mơ mỡ 3T3-L1 58 2.3.9 Các phương pháp nghiên cứu thành phần hóa học cắn tồn phần thân chuối tiêu 58 2.3.10 Xử lý số liệu 59 CHƢƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 60 3.1 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG HẠ GLUCOSE MÁU TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM 60 3.1.1 Kết tác dụng hạ glucose máu cắn toàn phần 60 3.1.2 Kết tác dụng cắn phân đoạn 65 3.2 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CẮN TOÀN PHẦN THÂN CÂY CHUỐI TIÊU 69 3.2.1 Kết định tính nhóm chất 69 3.2.2 Kết phân lập hợp chất phân đoạn ethylacetat 70 3.2.3 Kết phân lập hợp chất phân đoạn n-butanol 76 3.3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CƠ CHẾ HẠ GLUCOSE MÁU CỦA CẮN TOÀN PHẦN THÂN CÂY CHUỐI TIÊU 80 3.3.1 Kết mơ hình thực nghiệm in vivo 80 3.3.2 Kết mơ hình thực nghiệm in vitro 89 CHƢƠNG IV BÀN LUẬN 99 4.1.1 Lựa chọn liều thử nghiệm 99 4.1.2 Tác dụng cắn toàn phần 100 4.1.3 Tác dụng cắn phân đoạn 105 4.2 VỀ VIỆC PHÂN LẬP CHẤT TRONG PHÂN ĐOẠN CÓ TÁC DỤNG HẠ GLUCOSE MÁU CHIẾM ƢU THẾ .106 4.3 VỀ CƠ CHẾ TÁC DỤNG HẠ GLUCOSE MÁU CỦA THÂN CÂY CHUỐI TIÊU .111 4.3.1 Cơ chế hạ glucose máu mức độ thể 112 4.3.2 Cơ chế hạ glucose máu mức độ tế bào, phân tử 117 4.4 BÀN LUẬN CHUNG 129 KẾT LUẬN 134 Tác dụng hạ glucose máu cắn toàn phần thân chuối tiêu 134 Cơ chế hạ glucose máu thân chuối tiêu 134 2.1 Trên chuyển hoá 134 2.2 Trên nhạy cảm mô đích với insulin 135 2.3 Trên chuyển hoá tăng nhạy cảm tế bào mơ đích với insulin 135 ĐỀ XUẤT 135 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT VIẾT TẮT ACC Ac-CoA ADA AICAR Akt AMPK ARB Cho TP CXCL DAG Db/db DMEM DMSO DPP-4 ĐTĐ ECLIA F1,6BPase FBS FDA FFA G6Pase GDH GIP GK GLP-1 GLP-1 GLUT GOAT GOD GP GPR TÊN ĐẦY ĐỦ Acetyl-coA carboxylase Acetyl-CoA Hiệp hội đái tháo đường M (American Diabetes Association) Aminoimidazol-4-carboxamid Ribosid The serine/threonine kinase Adenosine monophosphate activated protein kinase Angiotensin receptor blocker Cholesterol toàn ph n Chemokine ligand Diacylglycerol Diabetes Môi trường nuôi cấy tế bào (Dulbecco’s modified eagle medium) Dimethyl sulfoxid Dipeptidyl peptidase-4 Đái tháo đường Electro chemiluminessance Immuno Assay Fructose-1,6-biphosphatase Huyết bào thai bê (Fetal bovine serum) Cục quản l Thực phẩm Dược phẩm Hoa Kỳ (Food and drug administration) Acid béo tự (Free fatty acid) Glucose6phosphatase Glucose dehydrogenase Glucose-dependent insulinotropic polypeptid Glucokinase Glucagon-like peptide Glucagonlike pepdid-1 Hệ vận chuyển glucose (Glucose-transporter) Ghrelin o-acyltransferase Glucose oxidase Glycogen phosphorylase G protein-coupled receptors VIẾT TẮT GSH GSK-3 HbA1C HDACs HEPES HLA HMGB1 HOMA HS IC50 IKK IL IRS JNK LC-CoA LDL NaCMC NF-κ NOD NPPH OB/OB p-AMPK PĐ PI3 PI3K PPAR PTP1B SGLT STZ SUR TG TP WHO TÊN ĐẦY ĐỦ Glutathione Glycogen synthase kinase-3 Hemoglobin A1C Histone deacetylase 4-(2- hydroxyethyl)-1-piperazineethane sulfonic acid Kháng nguyên liên kết tế bào lympho (Human Leukocyte Antigen) High-mobility-group Homeostasis model assessment Huyết ngựa (Horse erum) N ng độ ức chế 50% Inhibitory κ kinase Interleukin Insulin receptor substrate Jun N-terminal kinase Long chair-CoA Low densyti lipoprotein Sodium carboxy methyl cellulose Nuclear factor κ nonobese diabetic 2,2-diphenyl -1-picrylhydrazyl Obese Adenosine monophosphate activated protein kinase đ phân tử threonin172 đ phosphoryl h a Phân đo n Phosphatidylinositol Phosphatidylinositol 3-kinase Peroxisome proliferator-activated receptors protein-tyrosine phosphatase 1B Na+/glucose cotransporter Streptozocin Sulfunylurea receptor Triglycerid Toàn ph n Tổ chức y tế gi i (World Heath Organization) V.3.5 Hợp chất FB2A V.3.6 Hợp chất FB2B PHỤ LỤC VI ĐỘC TÍNH CẤP CẮN TỒN PHẦN THÂN CÂY CHUỐI VI.1 Chuẩn bị mẫu thử Mẫu th pha với nước cất thành dung dịch với nồng độ thích hợp động vật thí nghiệm uống theo mức thiết kế, sau gọi chế phẩm th cắn chuối tiêu VI.2 Phƣơng tiện nghi n cứu - Động vật nghi n cứu - Chuột nhắt trắng trưởng thành, giống cái, Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ng cung cấp - Động vật nuôi ổn định với điều kiện ph ng thí nghiệmBộ mơn Dược lực, Trường ĐH Dược Hà Nội ngày trước thực nghiên cứu, nuôi dư ng b ng thức ăn tiêu chuẩn Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ng cung cấp, uống nước tự - Thiết bị dụng cụ nghi n cứu - Cân kĩ thuật Precisa-BJ610C, TE 412 (Sartorius) - Các dụng cụ bắt giữ động vật, b m kim đ u tù động vật uống mẫu th VI.3 Phƣơng pháp nghi n cứu Phư ng pháp th độc tính cấp theo hướng dẫn Bộ Y tế kết hợp với hướng dẫn OECD Thiết kế thí nghiệm - Chuột nhắt trắng nhịn ăn trước thí nghiệm, nước uống theo nhu c u Kiểm tra cân nặng trước th nghiệm - Cách dùng: đưa mẫu th theo đường uống Lấy thể tích mẫu th theo dự kiến đưa thẳng vào dày chuột b ng kim cong đ u tù - Thể tích mẫu th dùng theo đường uống: 0,2mL 10 g chuột l n - Số l n cho động vật uống: l n v ng 24 giờ, l n cách - Sau uống thuốc giờ, chuột cho ăn trở lại - Sau thăm d số chuột hạn chế (th nghiệm thăm d ), động vật thí nghiệm chia thành t ng lô, lô 10 động vật (th nghiệm thức) Tùy theo kết th nghiệm thăm d để lựa chọn mức liều cho th nghiệm thức Thơng thường, thiết kế thí nghiệm với lơ đ u uống liều tối đa không gây chết động vật lô cuối uống liều tối thiểu gây chết toàn động vật - Theo d i động vật v ng 14 ngày sau dùng mẫu th (theo d i chuột liên tục v ng giờ, theo d i thường xuyên v ng 72 sau l n uống chế phẩm th cuối cùng) Theo dõi, đánh giá - Theo d i động vật v ng 72 sau uống thuốc, ghi chép lại thơng số sau: + Tình trạng chung chuột: hoạt động tự nhiên, tư thế, màu sắc (m i, tai, đuôi), lông, phân, nước tiểu + Sự tiêu thụ thức ăn, nước uống + Số động vật chết:xác định tỷ lệ động vật chết lơ v ng 72 để tính tốn LD50 + Khi có động vật chết, mổ để quan sát đại thể c quan phủ tạng Nếu c n, làm thêm vi thể để xác định nguyên nhân - Tiếp tục theo d i động vật 14 ngày sau uống chế phẩm th VI.4 Kết nghi n cứu Thử nghiệm thăm dò - S dụng 10 chuột nhắt trắng, giống cái, chia thành nhóm, nhóm động vật cho uống chế phẩm th cắn chuối tiêu với liều tăng d n, theo d i liên tục tiếp tục quan sát 14 ngày - Kết quả: sau giờ, 10 chuột khơng có biểu bất thường; sau 72 10 chuột c n sống không xuất chuột chết v ng 14 ngày sau uống thuốc - Kết th c th nghiệm thăm d đ xác định liều 20g (tính theo khối lượng cao) kg chuột, tư ng đư ng0,4 ml 10 g chuột mức liều cao cho uống khơng gây chết chuột nhắt trắng thí nghiệm Thử nghiệm thức Dựa kết th nghiệm thăm d , tiến hành th nghiệm thức 20 chuột nhắt trắng, giống cái, chia thành nhóm th theo mức liều đ dự tính Các nhóm th dùng mẫu th mức liều số l n đưa mẫu th bảng VI.1 ảng VI.1 ố trí thí nghiệm cho thử độc tính cấp mẫu thử Cắn chuối tiêu Nhóm Liều dùng Thể tích dùng Số lần Số chuột chuột (g/kg) (mL mẫu thử/10g) cho uống thí nghiệm Mức liều 10 0,2 mL mẫu th 10 Mức liều 20 0,2 mL mẫu th 10 - Kết + Sau uống thuốc giờ: tất chuột khơng có biểu bất thường: ăn uống, vận động bình thường, phản xạ tốt với kích thích, khơng khó thở, lơng mượt, niêm mạc hồng hào, mắt sáng, phân khơ, nước tiểu bình thường, khơng bị tiêu chảy + Trong v ng 72 sau uống thuốc, không xuất chuột chết 100% số chuột th nghiệm c n sống sau 14 ngày th nghiệm + Vì khơng có chuột chết lơ th nghiệm nên chưa xác định LD 50 cắn chuối tiêu VI.5 Kết luận Mẫu th cắn chuối tiêu dùng theo đường uống chuột nhắt trắng với liều 20 g kg, liều cao cho chuột uống được, khơng thấy thể độc tính cấp chuột nhắt trắng Liều th độc tính cấp chế phẩm cắn chuối tiêu gấp khoảng 20 l n liều thể tác dụng dược lý PHỤ LỤC VII ĐỘ GIAO ĐỘNG CỦA CÁC SỐ LIỆU TRONG THỰC NGHIỆM Giao động số liệu thực nghiệm trình bày theo mục tư ng ứng luận án sau: VII.1 Mục: Tác dụng cắn toàn phần glucose máu chuột tiêm STZ liều 150mg/kg 72 sau tiêm STZ liều 150mg kg nồng độ glucose máu lô chuột giao động t 11,4 đến 20,3 mmol L Chuột tăng glucose máu chọn ngẫu nhiên vào lô đảm bảo khơng có khác lơ (p>0,05), lơ chuột bình thường có nồng độ glucose máu giao động t 4,0 đến 6,9 mmol L Sau 15 ngày uống mẫu th , nồng độ glucose máu lô chuột uống mẫu th khác hạ khác nhau: lô chứng bệnh giao động t 11,6 đến 18,1mmol L, lơ chứng dư ng1 uống gliclazid có nồng độ glucose máu t 4,9 đến 9,2 mmol L, lô chứng dư ng2 uống metformin có nồng độ glucose máu t 4,5 đến 9,6 mmol L, lơ uống mẫu th có glucose máu t 5,3 đến 9,4 mmol L, lơ chuột bình thường có glucose máu t 4,0 đến 8,2 mmol/L 3.1.1.2 Tác dụng cắn toàn ph n glucose máu chuột ĐTĐ typ Nồng độ glucose máu lô chuột ĐTĐ typ giao động t 14,2 đến 23,5 mmol L Chuột chia ngẫu nhiên vào lơ đảm bảo khơng có khác (p>0,05), lơ chuột bình thường có nồng độ glucose máu giao động t 4,0 đến 6,9 mmol L Sau 15 ngày uống mẫu th , nồng độ glucose máu lô chuột uống mẫu th khác hạ khác nhau: lô chứng bệnh giao động t 14,6 đến 21,9 mmol L, lơ chứng dư ng uống metformin có nồng độ glucose máu t 6,0 đến 11,6 mmol L, lô uống mẫu th có glucose máu t 11,2 đến 17,1 mmol L, lơ chuột bình thường có glucose máu t 4,4 đến 6,9 mmol/L VII.2 Mục: Tác dụng cắn toàn phần khả dung nạp glucose chuột ĐTĐ typ Sau 15 ngày uống mẫu th , nồng độ glucose máu lô chuột uống mẫu th khác hạ khác nhau: lô chứng bệnh giao động t 17,6 đến 23,2 mmol L, lô chứng dư ng uống metformin có nồng độ glucose máu t 8,6 đến 13,5 mmol L, lơ uống mẫu th có glucose máu t 11,3 đến 16,7 mmol L, lô chuột bình thường có glucose máu t 4,9 đến 6,8 mmol L Sau 30 ph t uống dung dịch glucose, nồng độ glucose máu lơ chuột thí nghiệm tăng cao lô chứng bệnh nồng độ glucose giao động t 28,0 đến 33,9 mmol L, lô chứng dư ng uống metformin có nồng độ glucose máu t 15,0 đến 20,6 mmol L, lơ uống mẫu th có glucose máu t 17,0 đến 25,3 mmol L, lơ chuột bình thường có glucose máu t 7,5 đến 11,2 mmol L - Tác dụng cắn phân đoạn tr n glucose máu chuột ti m STZ liều 150mg/kg 72 sau tiêm STZ liều 150mg kg nồng độ glucose máu lô chuột giao động t 16,1 đến 25,5 mmol L Chuột tăng glucose máu chọn ngẫu nhiên vào lơ đảm bảo khơng có khác lô (p>0,05) Sau 15 ngày uống mẫu th , nồng độ glucose máu lô chuột uống mẫu th khác hạ khác nhau: lô chứng bệnh giao động t 17,2 đến 24,7 mmol L, lô chứng dư ng uống metformin có nồng độ glucose máu t 6,5 đến 13,2 mmol L, lô uống cắn phân đoạn n-hexan có glucose máu t 16,8 đến 23,6 mmol L,lơ uống cắn phân đoạn chloroform có glucose máu t 17,8 đến 25,5 mmol L, lô uống cắn phân đoạn ethylacetat có glucose máu t 8,5 đến 16,7 mmol L, lơ uống cắn phân đoạn n-butanol có glucose máu t 6,9 đến 16,7 mmol L, lô uống cắn nước c n lại có glucose máu t 16,5 đến 23,4 mmol L lơ uống cắn tồn ph n có glucose máu t 8,8 đến 14,2 mmol L VII.3 Mục: Tác dụng cắn phân đoạn chuột ĐTĐ typ Chuột ĐTĐ typ có nồng độ glucose máu giao động t 16,6 đến 24,5 mmol L Chuột ĐTĐ typ chọn ngẫu nhiên vào lô đảm bảo khơng có khác lơ (p>0,05) Chuột bình thường có nồng độ glucose máu t 4,0 đến 6,9 mmol L Sau 15 ngày uống mẫu th , nồng độ glucose máu lô chuột uống mẫu th khác hạ khác nhau: lô chứng bệnh giao động t 18,0 đến 26,6 mmol L, lô chứng dư ng uống metformin có nồng độ glucose máu t 7,8 đến 14,3 mmol L, lô uống cắn phân đoạn ethylacetat có glucose máu t 7,8 đến 16,2 mmol L lơ uống cắn phân đoạn n-butanol có glucose máu t 7,5 đến 14,9 mmol L V.II.4 Mục: Nồng độ insulin huyết - Trên chuột tiêm TZ liều 150mg/kg Nồng độ insulin huyết lơ chuột bình thường giao động t 1,23 đến 1,65 ng mL, IR t 12,20 đến 26,59 % t 188,40 đến 1271,52 Lô chứng bệnh, nồng độ insulin giao động t 0,33 đến 0,51 ng mL, IR t 8,58 đến 19,67 % t 19,93 đến 42,42 Lô chứng dư ng , chuột uống gliclazid, nồng độ insulin giao động t 0,64 đến 0,99 ng mL, IR t 8,68 đến 18,77 % t 108,18 đến 370,34 Lô chứng dư ng2, chuột uống metformin, nồng độ insulin giao động t 0,32 đến 0,55 ng mL, IR t 4,29 đến 11,88 % t 56,89 đến 279,72 Lơ th uống cắn tồn ph n, nồng độ insulin giao động t 0,32 đến 0,51 ng mL, IR t 4,22 đến 10,64 % t 51,13 đến 223,79 - Trên chuột ĐTĐ typ Nồng độ insulin huyết lơ chuột bình thường giao động t 0,42 đến 1,03 ng mL, IR t 6,24 đến 15,33 % t 95,83 đến 846,23 Lô chuột ĐTĐ typ 2, nồng độ insulin giao động t 0,80 đến 1,79 ng mL, IR t 36,04 đến 86,41 % t 47,22 đến 111,87 Sau 15 ngày uống mẫu th , lơ chuột bình thường, nồng độ insulin huyết giao động t 0,60 đến 0,96, IR t 6,94 đến 13,95 % t 150,45 đến 499,68 Lô chứng bệnh, nồng độ insulin giao động t 0,97 đến 1,68 ng mL, IR t 39,86 đến 80,75 % t 52,53 đến 103,39 Lô chứng dư ng chuột uống metformin, nồng độ insulin giao động t 0,85 đến 1,62 ng mL, IR t 17,42 đến 37,44 % t 138,95 đến 372,45 Lơ th uống cắn tồn ph n, nồng độ insulin giao động t 1,21 đến 1,75 ng mL, IR t 31,77 đến 67,10 % t 81,09 đến 136,0 VII.5 Mục: Nồng độ lipid huyết Nồng độ cholesterol triglycerid huyết lơ chuột bình thường giao động t 2,40 đến 4,10 0,90 đến 1,90 mmol L Lô chuột ĐTĐ typ 2, t 5,90 đến 12,10 mmol L 8,5 đến 13,2 mmol L Sau 15 ngày uống mẫu th , lơ chuột bình thường, nồng độ cholesterol triglycerid huyết giao động t 1,60 đến 5,10 mmol L 0,7 đến 2,5 mmol L Lô chứng bệnh, giao động t 5,10 đến 10,5 mmol L 6,6 đến 13,2 mmol L Lô chứng dư ng chuột uống metformin, giao động t 2,70 đến 7,10 mmol L 2,5 đến 7,2 mmol L Lơ th uống cắn tồn ph n giao động t 2,70 đến 7,20 mmol L 2,70 đến 6,80 mmol L VII.6 Mục: Kết hoạt độ enzym G6Pase gan - Ho t độ enzym G6Pase gan chuột tăng glucose máu TZ liều 150mg/kg Sau 15 ngày uống mẫu th , hoạt độ enzym gan G6Pase lơ chuột bình thường giao động t 0,33 đến 0,85 gPi ph t mg protein, lô chứng bệnh, 0,55 đến 1,10 gPi ph t mg protein, lô chứng dư ng1, chuột giao động t uống gliclazid giao động t 0,31 đến 0,84 gPi ph t mg protein, lô chứng dư ng2 chuột uống metformin giao động t 0,27 đến 0,87 gPi ph t mg protein, lô th uống cắn toàn ph n, giao động t 0,28 đến 0,84 gPi ph t mg protein - Ho t độ enzym G6Pase gan chuột ĐTĐ typ sau 15 ngày uống m u thử Sau 15 ngày uống mẫu th , hoạt độ enzym gan G6Pase lơ chuột bình thường giao động t 0,88 đến 2,63 gPi ph t mg protein, lô chứng bệnh, giao động t 1,88 đến 4,10 gPi ph t mg protein, lô chứng dư ng chuột uống metformin giao động t 0,80 đến 3,52 gPi ph t mg protein, lơ th uống cắn tồn ph n, giao động t 1,11 đến 3,59 gPi ph t mg protein VII.7 Mục: Tác dụng ức chế enzym α-amylase - Kết ức chế enzym α-amylase chất phân lập từ thân chuối tiêu Ở n ng độ M, - sitosterol acarbose ức chế enzym amylase giao động t 14,73 đến 17,62% 29,77 đến 33,63 % nồng độ 10 M, - sitosterol acarbose ức chế amylase giao động t 22,41 đến 24,18 t 39,72% động t 37,64 đến nồng độ 25 M, - sitosterol acarbose ức chế amylase giao 50,97 đến 52,50 55,22 đến 53,62 % - Kết khảo sát IC50 β- sitosterol acarbose giao động từ 23,79 đến 24,29 từ 19,16 đến 21,01 µM VII.8 Mục: Tác dụng ức chế enzym α-glucosidase - Kết tác dụng ức chế enzym α-glucosidase c n toàn ph n thân chuối tiêu nồng độ g ml; 10 g ml 30 g ml giao động t 17,36; 22,01 đến 29,60 t 73,08 đến 79,16 % 11,44 đến - Kết ức chế enzym α-glucosidase chất phân lập từ thân chuối tiêu nồng độ M, - sitosterol; daucosterol acarbose ức chế enzym -glucosidase giao động t 22,13 đến 27,42%; t 17,23 đến 21,82 32,81 đến 36,47 % nồng độ 10 M, - sitosterol; daucosterol acarbose ức chế -glucosidase giao động t 32,53 đến 34,80; t 27,30 đến 28,87 t đến 40,65% 38,1 nồng độ 25 M, - sitosterol; daucosterol acarbose ức chế -glucosidase giao động t 50,77 đến 53,57; t 67,8 đến 72,75 52,80 đến 53,70 % Kết khảo sát IC50 - sitosterol; daucosterol acarbose giao động t 21,84 đến 23,35; t 16,93 đến 17,82 t 21,26 đến 21,93 M VII.9 Mục: Tác dụng ức chế enzym PTP1B - C n toàn ph n thân chuối tiêu nồng độ g ml; 10 g ml 30 g ml giao động t 11,44 đến 17,36; 22,01 đến 29,60 t 73,08 đến 79,16 % - Các chất phân lập từ thân chuối tiêu nồng độ M, cycloeucalenon; acid myristic suramin ức chế enzym PTP1B giao động t 60,26 đến 62,57%; t 32,96 đến 34,90 27,82 đến 28,66 % nồng độ 10 M, cycloeucalenon; acid myristic suramin ức chế PTP1B giao động t 71,77 đến 73,27; t 47,21 đến 47,87 t 51,59 đến 52,18% nồng độ 25 M, cycloeucalenon; acid myristic suramin ức chế PTP1B giao động t 83,07 đến 84,47; t 68,95 đến 69,50 77,96 đến 79,00 % Kết khảo sát IC50 cycloeucalenon; acid myristic suramin giao động t 2,62 đến 3,49; t 10,11 đến 11,23 t 9,48 đến 9,51 M ... DỤNG HẠ GLUCOSE MÁU CHIẾM ƢU THẾ .106 4.3 VỀ CƠ CHẾ TÁC DỤNG HẠ GLUCOSE MÁU CỦA THÂN CÂY CHUỐI TIÊU .111 4.3.1 Cơ chế hạ glucose máu mức độ thể 112 4.3.2 Cơ chế hạ glucose. .. thân chuối tiêu (Musa x paradisiacal L. ) thực nghiệm với mục tiêu: Đánh giá tác dụng h glucose máu c n toàn ph n từ d ch ép thân chuối tiêu chuột thực nghiệm Nghiên cứu c chế h glucose máu c... có vài nghiên cứu tác dụng hạ glucose máu thân chuối tiêu [89],[163] Các nghiên cứu mức độ sàng l c, kết chưa thống nhất, chưa có nghiên cứu có hệ thống đánh giá tác dụng c chế tác dụng hạ glucose