Nghiên cứu tái sinh cây Bò Khai (Erythropalum scandens) bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào (Khóa luận tốt nghiệp)

Nghiên cứu tái sinh cây Bò Khai (Erythropalum scandens) bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu tái sinh cây Bò Khai (Erythropalum scandens) bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu tái sinh cây Bò Khai (Erythropalum scandens) bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu tái sinh cây Bò Khai (Erythropalum scandens) bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu tái sinh cây Bò Khai (Erythropalum scandens) bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu tái sinh cây Bò Khai (Erythropalum scandens) bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu tái sinh cây Bò Khai (Erythropalum scandens) bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào (Khóa luận tốt nghiệp)

(ERYTHROPALUM SCANDENS) Chuyên ngành Khoa : Chính quy : : CNSH - CNTP : 2011 2015 Thái Nguyên, 2015 CÂY BÒ KHAI (ERYTHROPALUM SCANDENS) Chuyên ngành Khoa : : : : : : Chính quy K43 CNSH CNSH - CNTP 2011 2015 ThS Lâm Thái Nguyên, 2015 i L u khoa h c c a b n thân Các s li u k t qu nghiên c toàn trung th u tra th a hoàn tài li u N u có sai tơi xin ch u hoàn toàn trách nhi m! Thái Nguyên, ngày tháng Xác nh n c a GVHD i vi i Lâm Nguy XÁC NH N C A GIÁO VIÊN CH M PH N BI N Giáo viên ch m ph n bi n xác nh n sinh viên a ch a sai xót sau H ng ch m yêu c u! (Ký, ghi rõ h tên) ii L IC Th c t p t t nghi p ho phát tri n ph m ch ng giáo d c thù nh m góp ph n hình thành, c ngh nghi p c n thi t c a sinh viên theo m c tiêu ng ki n th c h vào th c t công vi c giúp sinh viên nh n bi ng mm c n trang b thêm nh ng ki n th c, k m y u c a ng nhu c u cơng vi c c s nh t chí c a B giáo tơi nghiên c u tái sinh Bò Khai (Erythropalum scandens) b nuôi c y mô t bào Tôi - tôi s uc g th c hi tài m t cách hoàn ch nh nh t Song u làm quen v i công tác nghiên c u khoa h c, ti p c n v i th c t n ch v ki n th c kinh nghi m nên không th tránh kh i nh ng h n ch thi u sót nh nh mà b quý th y cô giáo b c Tơi r khóa lu n c hồn ch Thái Ngun, ngày tháng Sinh viên c s góp ý c a iii DANH M C CÁC C M T VI T T T 2,4 D : 2,4 Diclorophenoxy acetic acid Cs : C ng s BA : 6-Benzylaminopurine CT : Công th c CV : Coeficient of Variation i ch ng GA3 : Gibberellic acid IAA : Indole-3-acetic acid IBA : Indole butyric acid BAP : Bezylamino purine Kinetin : 6-Furfurylaminopurine LSD : Least Singnificant Difference Test MS : Murashige & Skoog (1962) MT : ng W/v : Kh ng/ th tích V/v : Th tích/th tích iv DANH M C CÁC B NG B nh tính nhóm ch t h n ng n r Bò khai B ng 4.1 K t qu ng c a th i gian kh trùng b ng dung d ch H2O2 n kh B ng 4.2 K t qu ng c a th i gian kh trùng viên kh B ng 4.3 K t qu b ng HgCl2 n hi u qu kh trùng m u c y 27 ng c a th i gian kh trùng n hi u qu kh trùng m u 28 B ng 4.4 K t qu ng c B ng 4.5 K t qu ng c K t qu nghiên c B ng 4.6 K t qu u 25 n kh i 30 i c thu th p sau 60 ngày 33 ng c a s k t h p gi qu tái sinh ch i K t qu nghiên c B ng 4.7 K t qu n kh c thu th p sau 60 ngày 36 ng c a s k t h p gi hi u qu tái sinh ch i K t qu nghiên c n hi u n c thu th p sau 60 ngày 39 v DANH M C CÁC HÌNH Hình 4.1 ng c a th i gian kh trùng b ng dung d ch n kh Hình 4.2 nh h u Bò khai 26 ng c a th i gian kh trùng viên kh trùng Johnson n hi u qu kh trùng m u Bò khai 27 Hình 4.3 nh h ng c a th i gian kh trùng b ng HgCl2 (0,1%) n hi u qu kh trùng m u Bò khai 29 Hình 4.4 nh h ng c Hình 4.5 ng c nh h Hình 4.6 nh h n kh n kh ng c a s k t h p gi i 32 i Bò khai .35 n hi u qu tái sinh ch i Bò khai 38 Hình 4.7 nh h ng c a s k t h p gi n hi u qu tái sinh ch i Bò khai 41 vi M CL C PH N M tv U .1 1.2 M tài 1.3 Yêu c u c tài c ti n c tài c c ti n PH N T NG QUAN TÀI LI U 2.1 Gi i thi u chung v Bò khai m c a Bò khai .4 2.1.2 Ngu n g c phân b .4 2.1.3 Phân lo i 2.1.4 Giá tr c a Bò khai 2.2 Tình hình nghiên c u Bị khai .7 2.3 Khái ni khoa h c c a nuôi c y mô t bào th c v t 10 2.3.1 Khái ni m 10 khoa h c c a nuôi c y mô t bào th c v t 10 2.4 M t s y u t n nuôi c y mô t bào th c v t .11 2.4.1 V t li u nuôi c y 11 u ki n nuôi c y 11 2.4.3.Vô trùng m u c y: 12 2.4.3 Thành ph 2.4.4 Môi ng nuôi c y 12 ng v t lý 17 PH N V T LI U, N U 19 3.1 V t li u, hóa ch t thi t b nghiên c u 19 3.1.1 V t li u 19 3.1.2 Hóa ch t 19 3.1.3 Thi t b 19 m th i gian nghiên c u 19 vii m nghiên c u 19 3.2.2 Th i gian nghiên c u 19 3.3 N i dung nghiên c u 19 u 19 3.4.1 N i dung 1: Nghiên c u n kh ng c a m t s ch t kh trùng ng vơ trùng m u Bị khai 20 3.4.1 Nghiên c u H2 O ng c a th i gian kh trùng b ng dung d ch n kh u 20 3.4.2 Nghiên c u ng c a th i gian kh trùng viên kh trùng n hi u qu kh trùng m u c y 21 3.4.3 Nghiên c u ng c a th i gian kh 2(0,1%) 21 3.5 N i dung 2: Nghiên c u c a m t s ch n kh ng i Bò khai 22 3.5.1.Nghiên c u ng c n kh i 22 3.5.2.Nghiên c u ng c 3.5.3.Nghiên c u ng c a s k t h p gi a (kinetin ho c BAP) n kh i 22 n hi u qu tái sinh ch i 23 3.5.4.Nghiên c u nh h ng c a s k t h p gi a (kinetin ho c BAP) n hi u qu tái sinh ch i 23 3.6 X lý s li u .24 PH N D 4.1 K t qu KI N K T QU NGHIÊN C U 25 ng c a m t s ch t kh n kh vơ trùng m u Bị khai 25 4.2 K t qu ng c a m t s ch tái sinh ch i Bò Khai K t qu nghiên c n kh c thu th p sau 60 ngày 30 PH N K T LU N VÀ KI N NGH 42 5.1 K t lu n 42 5.2 Ki n ngh 42 PH N M U tv c Erythropalum Cây Bò khai hay g scandens ( , 2003) [13] Bò khai lo i dây leo dài t 5-10m Vi t Nam, Bò khai có h u h t t nh vùng núi phía B c, nhi u nh t B c K n c coi m t nh ng lo cs nc a T t L i 100g c a Bị khai có ch c; 2,6 mg carotene 60 mg VitaminC Nhi u nghiên c tác d ng c lí c a Bò khai dùng ch a viêm th ti u ti m tm c -2 l khai s c l ( ng ti t li u, c ti c ti u tr l c, ch c bi t Bò c u ng ch a b t k t qu r t t t , 2003) [13] t thu nh p cao v i giá bán th t 3000- ng hi n ng/bó (m t bó kho ng 200-300 gam), 15000-30000 ng/1kg ng n non Vì v y vi c tr t ng làm kinh t tri n v i núi phía B c (Nguy n Ti n Bân, 1998) [1] Hi n nhu c u v gi i l ng truy n th ng (giâm hom) nhi u h n ch M t nhi u th i gian công s c, h s nhân ch i th cao Trong nuôi c y mơ t t phát tri n, có nhi tr ng i nhân gi tr hóa khơng t i c y 41 Cơng Hình 4.7 ng c a s k t h p gi a BAP IB n hi u qu tái sinh ch i Bò khai K t qu b ng 4.7 cho th y: V i giá tr LSD0,5 so v i công th t 5,63 cơng th c khác có s sai khác có ý i ch ng m tin c y 95% Công th c th cho k t qu tái sinh th p nh t v i t l m u n y ch 1,0 l n th i công th t 57,48%, h s b t ch i i ch ng Công th c t t nh t v i n BAP (1,5mg/l) + IBA (0,4mg/l) cho k t qu tái sinh cao nh t v i t l n y ch t 95,56%, h s n y ch t 3,29 l n ch i m m Qua k t qu thí nghi m cho th y s k t h p gi a BAP v i t hi u qu cao nh t vi c tái sinh ch i so v i vi c s d ng ch k t h p v i IAA V i n tái sinh cao nh t v i t l n y ch ch i m m BAP (1,5mg/l) +IBA (0,4mg/l) cho k t qu t 95,56%, h s n y ch t 3,29 l n 42 - H2O2 (4,0%), HgCl2 (0,1%) viên kh trùng johnson (2,5ppm), kho ng th i gian: 5, 10, 15, 20 phút cơng HgCl2 (0,1%) 10 phút sung BAP (1,5mg/l) IBA (0,4mg/l) s b t ch i cao 3,29 l n, m 95,56%, h m in vitro Bị khai (Erythropalum scandens) tơi (Erythropalum scandens) (Erythropalum scandens) Bò khai 43 TÀI LIÊU THAM KH O: I.Tài li u ti ng Vi t Nguy n Ti n Bân (1998), M t s rau d c Vi t Nam, Nxb Lê Tr n Ch n (1993), "H th c v t Ba Vì - Ngu b ov c T p chí Lâm nghi p, 5/1993, tr 13-14 p (1996), Ngu n tài nguyên di truy n Lê Tùng Châu, Nguy thu c ch uc Vi t Nam, Tài Nguyên di truy n th c v t Vi t Nam, Nxb Nông nghi p, Hà N i, tr 70-76 n (2000), Nhân gi ng k t qu Tr n C u nghiên c u nhân gi ng b ng hom có ích, Tuy n t p H i th o Qu c t v B o t n s d ng b n v ng tài ngun có ích nQu Nguy n Ti -75 n Vi t T u (2003), hóa h c thu c, Nxb n qu c gia g pháp nghiên c u c TPHCM t (2007), Công ngh sinh h c, t p b n-Công ngh di Tr truy n, Nxb Giáo d c n (2005), B o t n phát tri n th c v t cho Lâm s n Ph ngồi g , Nxb Nơng ngh p, Hà N i Tr n, M n, Ph m M Thông(2003), ho t tính sinh h c c a m t s flavonoit chi t t thu c nam, Nxb Hà N i Nguy n Chí Hi (2009), c a m t s lo i thu c kích thích r (NAA, IBA, ABT) t i kh ng g r n y ch i c a hom giâm Bị khai (Erythropalum Scanden , T p chí NN & PTNT s 12/2009 44 10 Ph m Hoàng H (l999), Cây c Vi t Nam (quy n I,II,III), Nxb tr , TP H Chí Minh K thu t tr ng m t s 11 Tri c s n r ng, Nxb Nông nghi p, Hà N i Giáo trình ch 12.Nguy u ng th c v t, Nxb Giáo d c Vi t Nam 13 (2003), , Nxb Th i ng Kim Vui, Nguy n Chí Hi u(2011) Nghiên c u 14 ki n th c b a v rau Bò khai (Erythropalum Scanden Blume) t i vùng núi phía B c Vi T p chí Khoa h c Cơng ngh ih c Thái Nguyên, s 01/2011 M t s loài b 15 Nguy a, Nxb Nông nghi p Hà N i Nhân gi ng vơ tính Tr ng r ng dịng 16 Nguy vơ tính, Nxb Nơng nghi p 17 Th Ng c Oanh (2004), Giáo trình - ng ru ng, Nxb Nông nghi p, Hà N i 18 u Phùng, Tri Nghiên c u kh gi ng vơ tính Bị Khai, ngót r ng, g ng d i, Nxb Giáo d c Vi t Nam 19 n, Nguy Nguy n M nh Chính (2006), i S ng Cây Tr ng quy n 2, Nxb Nông nghi p 20 Hoàng Minh T n, Nguy n Quang Th ch (1994), Giáo trình - Sinh lý th c v t, Nxb Nông nghi p, Hà N i 21 ng (2003), Giáo trình Qu c gia Hà N i sinh thái h c i h c 45 22 Ph u nghiên nh, H c u thành ph n hóa h c Bị Khai, T p chí Khao h c công ngh H i- 23 ch ph ng, t tr ng, Nxb Nông nghi p, Hà N i 24 Sinh cC lý h c th c v t, Giáo trình cao h c Nơng nghi p, sinh h c, Nxb Nông nghi p, Hà N i II.Tài li u ti ng anh 25 Johan Rusydi Iskandar,Kotanegara (l995), Methodology for BiodiversityResearch, Regional study on Biodiversity, concepts, Frameworks, andMethods, Yunan University Press, pp 88-128 26 Michael J Balick, Elaine Elisabetsky and Sarah A Laird.(1996), Medicinal Resouces of the Tropical Forest - Biodiversity and its Impotance to HumanHealth, Columbia University Press - New York: pp 80-92 27 Tonga Noweg, Abdul Rashid Abdullah, Dimbab Nidang (2003), Forestplants as vegetables for communities bodering the crocker range NationalPark, ASEAN Review of Biodiversity and Environmental Conservation: from site 69-73 28 (2006), , Ethnobotanical Leaflets: from site 98-103 46 Ph luc ng MS Nhóm I II III IV V Vitamins Thành ph n ng (mg/l) NH4NO3 1650 KNO3 1900 KH2PO4 170 MgSO4 7H2O 370 MnSO4 H2O 22.3 ZnSO4 7H2O 10.6 CuSO4 H2O 0.25 CaCl2 2H2O 440 KI 0.83 CoCl2 6H2O 0.025 H3BO3 6.2 Na2MoO4 2H2O 0.25 FeSO4 7H2O 27.85 Na2EDTA 2H2O 37.25 Nicotinic acid 0.5 Glycine Thiamine HCl 0.1 Pyridoxine HCl 0.5 47 K t qu thí nghi m kh trùng b ng dung d ch H2O2 n (4,0%) 48 49 K t qu thí nghi m kh trùng b ng dung d ch Jonhson (2,5ppm) 50 51 K t qu thí nghi m kh trùng b ng dung d ch HgCl 0,1% 52 53 K t qu ng c a n BAP n tái sinh ch i Bò khai 54 K t qu ng c a kinetin n kh i 55 K t qu ng c a s k t h p gi sinh ch i n hi u qu tái ... giúp sinh viên nh n bi ng mm c n trang b thêm nh ng ki n th c, k m y u c a ng nhu c u cơng vi c c s nh t chí c a B giáo tơi nghiên c u tái sinh Bị Khai (Erythropalum scandens) b nuôi c y mô t bào. .. kh ng c a s k t h p gi i 32 i Bò khai .35 n hi u qu tái sinh ch i Bò khai 38 Hình 4.7 nh h ng c a s k t h p gi n hi u qu tái sinh ch i Bò khai 41 vi M CL C PH N... c c a nuôi c y mô t bào th c v t 10 2.3.1 Khái ni m 10 khoa h c c a nuôi c y mô t bào th c v t 10 2.4 M t s y u t n nuôi c y mô t bào th c v t .11 2.4.1 V t li u nuôi c