Nghiên cứu tái sinh cây bò khai (erythropalum scandens) bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN ĐÌNH KHANG Tên đề tài: NGHIÊN CỨU TÁI SINH CÂY BÕ KHAI (ERYTHROPALUM SCANDENS) BẰNG PHƢƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo Chuyên ngành Khoa Khóa học : : : : Chính quy Công nghệ sinh học CNSH - CNTP 2011 – 2015 Thái Nguyên, 2015 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN ĐÌNH KHANG Tên đề tài: NGHIÊN CỨU TÁI SINH CÂY BÒ KHAI (ERYTHROPALUM SCANDENS) BẰNG PHƢƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo Chuyên ngành Lớp Khoa Khóa học Giảng viên HD : : : : : : Chính quy Công nghệ sinh học K43 – CNSH CNSH - CNTP 2011 – 2015 ThS Vi Đại Lâm Thái Nguyên, 2015 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu khoa học thân Các số liệu kết nghiên cứu trình điều tra thực địa hoàn toàn trung thực, chƣa công bố tài liệu Nếu có sai xin chịu hoàn toàn trách nhiệm! Thái Nguyên, ngày tháng năm 2015 Ngƣời viết cam đoan Xác nhận GVHD ThS Vi Đại Lâm Nguyễn Đình Khang XÁC NHẬN CỦA GIÁO VIÊN CHẤM PHẢN BIỆN Giáo viên chấm phản biện xác nhận sinh viên Đã sửa chữa sai xót sau Hội đồng chấm yêu cầu! (Ký, ghi rõ họ tên) ii LỜI CẢM ƠN Thực tập tốt nghiệp hoạt động giáo dục đặc thù nhằm góp phần hình thành, phát triển phẩm chất lực nghề nghiệp cần thiết sinh viên theo mục tiêu đào tạo đề ra, trình áp dụng kiến thức học đƣợc nhà trƣờng vào thực tế công việc giúp sinh viên nhận biết đƣợc điểm mạnh, điểm yếu cần trang bị thêm kiến thức, kỹ để đáp ứng nhu cầu công việc Đƣợc chí Ban giám hiệu trƣờng Đại học Nông Lâm Ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học & Công nghệ thực phẩm, đồng ý hai thầy giáo ThS Vi Đại Lâm Th.S Đào Duy Hưng, tiến hành nghiên cứu đề tài: nghiên cứu tái sinh Bò Khai (Erythropalum scandens) phương pháp nuôi cấy mô tế bào Tôi xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu nhà trƣờng Đại học Nông Lâm, Ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học, Lãnh đạo viện Khoa học sống- Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, chuyên viên môn Công nghệ tế bào (Viện khoa học sống), thầy cô giáo môn CNSH (khoa Công nghệ sinh học & Công nghệ thực phẩm) Đặc biệt, xin trân trọng cảm ơn hai thầy giáo ThS Vi Đại Lâm Th.S Đào Duy Hưng dành nhiều thời gian quý báu, tận tình hƣớng dẫn suốt thời gian thực tập hoàn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn gia đình bạn bè giúp đỡ mặt để hoàn thành khóa luận Măc dù có nhiều cố gắng để thực đề tài cách hoàn chỉnh Song bƣớc đầu làm quen với công tác nghiên cứu khoa học, tiếp cận với thực tế nhƣ hạn chế kiến thức kinh nghiệm nên tránh khỏi hạn chế thiếu sót định mà thân chƣa thấy đƣợc Tôi mong đƣợc góp ý quý thầy cô giáo bạn để khóa luận đƣợc hoàn chỉnh hơn! Xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, ngày tháng Sinh viên năm 2015 Nguyễn Đình Khang iii DANH MỤC CÁC CỤM TỪ VIẾT TẮT 2,4 D : 2,4 Diclorophenoxy acetic acid Cs : Cộng BA : 6-Benzylaminopurine CT : Công thức CV : Coeficient of Variation ĐC : Đối chứng GA3 : Gibberellic acid IAA : Indole-3-acetic acid IBA : Indole butyric acid BAP : Bezylamino purine Kinetin : 6-Furfurylaminopurine LSD : Least Singnificant Difference Test MS : Murashige & Skoog (1962) MT : Môi trƣờng W/v : Khối lƣợng/ thể tích V/v : Thể tích/thể tích iv DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 phân tích định tính nhóm chất hữu phần rễ Bò khai Bảng 4.1 Kết ảnh hƣởng thời gian khử trùng dung dịch H2O2 (4,0%) đến khả vô trùng mẫu 25 Bảng 4.2 Kết ảnh hƣởng thời gian khử trùng viên khử trùng Johnson (2,5ppm) đến hiệu khử trùng mẫu cấy 27 Bảng 4.3 Kết ảnh hƣởng thời gian khử trùng HgCl2 (0,1%) đến hiệu khử trùng mẫu 28 Bảng 4.4 Kết ảnh hƣởng kinetin đến khả tái sinh chồi 30 Bảng 4.5 Kết ảnh hƣởng BAP đến khả tái sinh chồi Kết nghiên cứu đƣợc thu thập sau 60 ngày 33 Bảng 4.6 Kết ảnh hƣởng kết hợp BAP IAA đến hiệu tái sinh chồi Kết nghiên cứu đƣợc thu thập sau 60 ngày 36 Bảng 4.7 Kết ảnh hƣởng kết hợp BAP IBA đến hiệu tái sinh chồi Kết nghiên cứu đƣợc thu thập sau 60 ngày 39 v DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 4.1 Ảnh hƣởng thời gian khử trùng dung dịch H2O2 (4,0%) đến khả vô trùng mẫu Bò khai 26 Hình 4.2 Ảnh hƣởng thời gian khử trùng viên khử trùng Johnson (2,5ppm) đến hiệu khử trùng mẫu Bò khai 27 Hình 4.3 Ảnh hƣởng thời gian khử trùng HgCl2 (0,1%) đến hiệu khử trùng mẫu Bò khai 29 Hình 4.4 Ảnh hƣởng kinetin đến khả tái sinh chồi 32 Hình 4.5 Ảnh hƣởng BAP đến khả tái sinh chồi Bò khai 35 Hình 4.6 Ảnh hƣởng kết hợp BAP IAA đến hiệu tái sinh chồi Bò khai 38 Hình 4.7 Ảnh hƣởng kết hợp BAP IBA đến hiệu tái sinh chồi Bò khai .41 vi MỤC LỤC PHẦN MỞ ĐẦU .1 Đặt vấn đề .1 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Yêu cầu đề tài 1.4 Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài 1.4.1 Ý nghĩa khoa học 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung Bò khai 2.1.1 Đặc điểm Bò khai 2.1.2 Nguồn gốc phân bố .4 2.1.3 Phân loại 2.1.4 Giá trị Bò khai 2.2 Tình hình nghiên cứu Bò khai .7 2.3 Khái niệm sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật 10 2.3.1 Khái niệm 10 2.3.2 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật 10 2.4 Một số yếu tố ảnh hƣởng đến nuôi cấy mô tế bào thực vật .11 2.4.1 Vật liệu nuôi cấy 11 2.4.2 Điều kiện nuôi cấy 11 2.4.3.Vô trùng mẫu cấy: 12 2.4.3 Thành phần môi trƣờng nuôi cấy 12 2.4.4 Môi trƣờng vật lý 17 PHẦN VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .19 3.1 Vật liệu, hóa chất thiết bị nghiên cứu 19 3.1.1 Vật liệu 19 3.1.2 Hóa chất 19 3.1.3 Thiết bị 19 3.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 19 vii 3.2.1.Địa điểm nghiên cứu 19 3.2.2 Thời gian nghiên cứu 19 3.3 Nội dung nghiên cứu 19 3.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 19 3.4.1 Nội dung 1: Nghiên cứu ảnh hƣởng số chất khử trùng đến khả vô trùng mẫu Bò khai 20 3.4.1 Nghiên cứu ảnh hƣởng thời gian khử trùng dung dịch H2O2 (4,0%) đến khả vô trùng mẫu .20 3.4.2 Nghiên cứu ảnh hƣởng thời gian khử trùng viên khử trùng Johnson (2,5ppm) đến hiệu khử trùng mẫu cấy 21 3.4.3 Nghiên cứu ảnh hƣởng thời gian khử trùng với HgCl2(0,1%) 21 3.5 Nội dung 2: Nghiên cứu số chất điều hòa sinh trƣởng đến khả tái sinh chồi Bò khai 22 3.5.1.Nghiên cứu ảnh hƣởng kinetin đến khả tái sinh chồi 22 3.5.2.Nghiên cứu ảnh hƣởng BAP đến khả tái sinh chồi 22 3.5.3.Nghiên cứu ảnh hƣởng kết hợp (kinetin BAP) IAA đến hiệu tái sinh chồi 23 3.5.4.Nghiên cứu ảnh hƣởng kết hợp (kinetin BAP) IBA đến hiệu tái sinh chồi 23 3.6 Xử lý số liệu .24 PHẦN DỰ KIẾN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 25 4.1 Kết ảnh hƣởng số chất khử trùng đến khả vô trùng mẫu Bò khai 25 4.2 Kết ảnh hƣởng số chất điều hòa sinh trƣởng đến khả tái sinh chồi Bò Khai Kết nghiên cứu đƣợc thu thập sau 60 ngày 30 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 42 5.1 Kết luận 42 5.2 Kiến nghị 42 PHẦN MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Cây Bò khai hay gọi Dây hƣơng có tên khoa học Erythropalum scandens (Đỗ Tất Lợi, 2003) [13] Bò khai loại dây leo dài từ 5-10m Ở Việt Nam, Bò khai có hầu hết tỉnh vùng núi phía Bắc, nhiều Bắc Kạn Thái Nguyên đƣợc coi loại rau đặc sản địa phƣơng Theo Đỗ Tất Lợi 100g Bò khai có chứa: 78,8g nƣớc; 6g Protein; 6,1g Gluxit; 7,5 g xơ; 1,6g tro; 138 mg canxi; 40,7mg photpho; 2,6 mg carotene 60 mg VitaminC Nhiều nghiên cứu tác dụng dƣợc lí Bò khai dùng chữa viêm thận, viêm gan, viêm đƣờng tiết liệu, tiểu tiện không thông Khi ngƣời xa mệt mỏi, nƣớc tiểu vàng đục, cần ăn rau Bò khai 1-2 lần nƣớc tiểu trở lại bình thƣờng Đặc biệt Bò khai sắc lấy nƣớc uống chữa bệnh viêm gan siêu vi trùng đạt kết tốt (Đỗ Tất Lợi, 2003) [13] Đây cho suất thu nhập cao với giá bán thị trƣờng từ 3000-5000 đồng/bó (một bó khoảng 200-300 gam), 15000-30000 đồng/1kg non Vì việc trồng khai thác Bò khai hƣớng làm kinh tế triển vọng cho bà vùng đồi núi phía Bắc (Nguyễn Tiến Bân, 1998) [1] Hiện nhu cầu giống Bò khai tƣơng đối lớn, phƣơng pháp nhân giống truyền thống (giâm hom) nhiều hạn chế Mất nhiều thời gian công sức, hệ số nhân chồi thấp, độ trẻ hóa không cao Trong nuôi cấy mô tế bào phát triển, có nhiều ƣu điểm vƣợt trội so với nhân giống thông thƣờng Đó phƣơng pháp nuôi cấy 41 Gía trị 95,56 100 88,44 90 77,78 80 68,89 70 57,48 60 Tỷ lệ nảy chồi (%) 50 Hệ số bật chồi (lần) 40 30 20 10 2,09 1,56 3,29Công thức CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 Hình 4.7 Ảnh hưởng kết hợp BAP IBA đến hiệu tái sinh chồi Bò khai Kết bảng 4.7 cho thấy: Với giá trị LSD0,5 đạt 5,63 công thức khác có sai khác có ý nghĩa so với công thức đối chứng mức độ tin cậy 95% Công thức thứ cho kết tái sinh thấp với tỷ lệ mẫu nảy chồi đạt 57,48%, hệ số bật chồi 1,0 lần thấp so với công thức đối chứng Công thức tốt với nồng độ BAP (1,5mg/l) + IBA (0,4mg/l) cho kết tái sinh cao với tỷ lệ nảy chồi đạt 95,56%, hệ số nảy chồi đạt 3,29 lần chồi mập, xanh đậm Qua kết thí nghiệm cho thấy kết hợp BAP với IBA đạt hiệu cao việc tái sinh chồi so với việc sử dụng chất đơn lẻ kết hợp với IAA Với nồng độ BAP (1,5mg/l) +IBA (0,4mg/l) cho kết tái sinh cao với tỷ lệ nảy chồi đạt 95,56%, hệ số nảy chồi đạt 3,29 lần chồi mập, xanh đậm 42 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Từ thực tế tiến hành thí nghiệm kết thu đƣợc, đƣa số kết luận sau: - Khi khử trùng mẫu Bò khai loại hóa chất H2O2 (4,0%), HgCl2 (0,1%) viên khử trùng johnson (2,5ppm), khoảng thời gian: 5, 10, 15, 20 phút công thức khử trùng mẫu Bò khai tốt sử dụng dung dịch HgCl2 (0,1%) 10 phút cho tỷ lệ mẫu cao đạt 63,33%, tỷ lệ mẫu nhiễm thấp với 23,33% tỷ lệ mẫu chết đạt 13,33% - Môi trƣờng tốt cho tái sinh chồi Bò khai môi trƣờng có bổ sung kết hợp BAP (1,5mg/l) IBA (0,4mg/l) cho tỷ lệ tái sinh đạt 95,56%, hệ số bật chồi cao 3,29 lần, chất lƣợng chồi tốt, mập, xanh đậm 5.2 Kiến nghị Để tiếp tục hoàn thiện quy trình nhân giống in vitro Bò khai (Erythropalum scandens) xin có số kiến nghị sau: - Tiếp tục nghiên cứu hoàn thiện quy trình nhân giống phƣơng pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật Bò khai (Erythropalum scandens) - Tách chiết nghiên cứu tác dụng hợp chất Bò khai (Erythropalum scandens) 43 TÀI LIÊU THAM KHẢO: I.Tài liệu tiếng Việt Nguyễn Tiến Bân (1998), Một số rau dại ăn Việt Nam, Nxb QĐND Lê Trần Chấn (1993), "Hệ thực vật Ba Vì - Nguồn gen đặc hữu cần đƣợc bảo vệ”, Tạp chí Lâm nghiệp, 5/1993, tr 13-14 Lê Tùng Châu, Nguyễn Văn Tập (1996), Nguồn tài nguyên di truyền thuốc Việt Nam, Tài Nguyên di truyền thực vật Việt Nam, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 70-76 Trần Cự, Đỗ Đình Tiến (2000), Nhân giống kết bước đầu nghiên cứu nhân giống hom có ích, Tuyển tập Hội thảo Quốc tế Bảo tồn sử dụng bền vững tài nguyên có ích Vƣờn quốc gia Tam Đảo, VƣờnQuốc gia Tam Đảo, Vĩnh Phúc tr 70-75 Nguyễn Tiến Đàn, Nguyễn Việt Tựu (2003), Phương pháp nghiên cứu hóa học thuốc, Nxb Y dƣợc TPHCM Trịnh Đình Đạt (2007), Công nghệ sinh học, tập bốn-Công nghệ di truyền, Nxb Giáo dục Phạm Văn Điển (2005), Bảo tồn phát triển thực vật cho Lâm sản gỗ, Nxb Nông nghệp, Hà Nội Trần Văn Hiền, Mai Văn Hiển, Phạm Mạnh Hùng, Ngô Văn Thông(2003), hoạt tính sinh học số flavonoit chiết từ thuốc nam, Nxb Hà Nội Nguyễn Chí Hiểu, Đặng Kim Vui, Đặng Văn Minh (2009), “Ảnh hưởng số loại thuốc kích thích rễ (NAA, IBA, ABT) tới khả rễ nảy chồi hom giâm Bò khai (Erythropalum Scanden Blume)”, Tạp chí NN & PTNT số12/2009 44 10 Phạm Hoàng Hộ (l999), Cây cỏ Việt Nam (quyển I,II,III), Nxb trẻ, TP Hồ Chí Minh 11 Triệu Văn Hùng (2002), Kỹ thuật trồng số loài đặc sản rừng, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 12.Nguyễn Nhƣ Khanh, Nguyễn Văn Đính (2011), Giáo trình chất điều hòa sinh trưởng thực vật, Nxb Giáo dục Việt Nam 13 Đỗ Tất Lợi (2003), Cây thuố c và vi ̣ thuố c Niê ̣t Nam, Nxb Thời Đại 14 Đặng Văn Minh, Đặng Kim Vui, Nguyễn Chí Hiểu(2011), “Nghiên cứu kiến thức địa rau Bò khai (Erythropalum Scanden Blume) vùng núi phía Bắc Việt Nam” Tạp chí Khoa học Công nghệ, Đại học Thái Nguyên, số 01/2011 15 Nguyễn Hoàng Nghĩa (1999), Một số loài bị đe dọa, Nxb Nông nghiệp Hà Nội 16 Nguyễn Hoàng Nghĩa (2001), Nhân giống vô tính Trồng rừng dòng vô tính, Nxb Nông nghiệp 17 Đỗ Thị Ngọc Oanh (2004), Giáo trình - Phương pháp thí nghiệm đồng ruộng, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 18 Dƣơng Hữu Phùng, Triệu Văn Phú (2003), Nghiên cứu khả nhân giống vô tính Bò Khai, ngót rừng, gừng dại, Nxb Giáo dục Việt Nam 19 Mai Văn Quyền, Nguyễn Đăng Nghĩa, KS Nguyễn Mạnh Chính (2006), Đời Sống Cây Trồng 2, Nxb Nông nghiệp 20 Hoàng Minh Tấn, Nguyễn Quang Thạch (1994), Giáo trình - Sinh lý thực vật, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 21.Vũ Trung Tạng (2003), Giáo trình Cơ sở sinh thái học, Nxb Đại học Quốc gia Hà Nội 45 22 Phạm Văn Thỉnh, Hứa Văn Thao, ThS Lê Thị Hƣơng bước đầu nghiên cứu thành phần hóa học Bò Khai, Tạp chí Khao học công nghệ ĐHTN số năm 2000 23 Lê Văn Tri (1997), Hỏi - đáp chế phẩm điều hòa sinh trưởng, tăng suất trồng, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 24 Vũ Văn Vụ, Hoàng Đức Cự, Vũ Thanh Tâm, Trần Văn Lài (1993), Sinh lý học thực vật, Giáo trình cao học Nông nghiệp, sinh học, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội II.Tài liệu tiếng anh 25 Johan Rusydi Iskandar,Kotanegara (l995), Methodology for BiodiversityResearch, Regional study on Biodiversity, concepts, Frameworks, andMethods, Yunan University Press, pp 88-128 26 Michael J Balick, Elaine Elisabetsky and Sarah A Laird.(1996), Medicinal Resouces of the Tropical Forest - Biodiversity and its Impotance to HumanHealth, Columbia University Press - New York: pp 80-92 27 Tonga Noweg, Abdul Rashid Abdullah, Dimbab Nidang (2003), Forestplants as vegetables for communities bodering the crocker range NationalPark, ASEAN Review of Biodiversity and Environmental Conservation: from site 69-73 28 Tugba Bayrak Ozbucak, Hamd, Guray Kutbay and Oznur Ergen Akcın (2006), The Contributıon of Wıld Edible Plants to Human Nutrıtion in the Black SeaRegıon of Turkey, Ethnobotanical Leaflets: from site 98-103 46 Phụ luc Môi trƣờng MS - Murashige and Skoog’s Nhóm I II III IV V Vitamins Thành phần Hàm lƣợng (mg/l) NH4NO3 1650 KNO3 1900 KH2PO4 170 MgSO4 7H2O 370 MnSO4 H2O 22.3 ZnSO4 7H2O 10.6 CuSO4 H2O 0.25 CaCl2 2H2O 440 KI 0.83 CoCl2 6H2O 0.025 H3BO3 6.2 Na2MoO4 2H2O 0.25 FeSO4 7H2O 27.85 Na2EDTA 2H2O 37.25 Nicotinic acid 0.5 Glycine Thiamine HCl 0.1 Pyridoxine HCl 0.5 47 Kết thí nghiệm khử trùng dung dịch H2O2 nồng độ (4,0%) BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMS FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:50 :PAGE VARIATE V003 TLMS LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 5423.33 1355.83 232.43 0.000 R 3.33334 1.66667 0.29 0.761 * RESIDUAL 46.6666 5.83333 * TOTAL (CORRECTED) 14 5473.33 390.952 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMN FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:50 :PAGE VARIATE V004 TLMN SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 11616.7 2904.17 366.84 0.000 R 70.0000 35.0000 4.42 0.051 * RESIDUAL 63.3345 7.91681 * TOTAL (CORRECTED) 14 11750.0 839.286 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMC FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:50 :PAGE VARIATE V005 TLMC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 1423.33 355.833 20.83 0.000 R 63.3333 31.6667 1.85 0.217 * RESIDUAL 136.667 17.0833 * TOTAL (CORRECTED) 14 1623.33 115.952 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:50 :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 TLMS 0.000000 18.3333 31.6667 53.3333 45.0000 TLMN 100.000 70.0000 51.6667 28.3333 25.0000 TLMC 0.000000 11.6667 16.6667 18.3333 30.0000 SE(N= 3) 1.39443 1.62448 2.38630 5%LSD 8DF 4.54711 5.29727 7.78150 MEANS FOR EFFECT R R NOS 5 TLMS 30.0000 29.0000 30.0000 TLMN 57.0000 56.0000 52.0000 TLMC 13.0000 15.0000 18.0000 SE(N= 5) 1.08012 1.25832 1.84842 5%LSD 8DF 3.52217 4.10325 6.02752 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:50 :PAGE 48 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLMS TLMN TLMC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 29.667 15 55.000 15 15.333 STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 19.773 2.4152 8.1 0.0000 28.970 2.8137 5.1 0.0000 10.768 4.1332 27.0 0.0004 |R | | | 0.7612 0.0506 0.2175 | | | | 49 Kết thí nghiệm khử trùng dung dịch Jonhson (2,5ppm) BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMS FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:54 :PAGE VARIATE V003 TLMS LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 2616.67 654.167 224.29 0.000 R 10.0000 5.00000 1.71 0.240 * RESIDUAL 23.3333 2.91666 * TOTAL (CORRECTED) 14 2650.00 189.286 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMN FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:54 :PAGE VARIATE V004 TLMN SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 10426.7 2606.67 329.26 0.000 R 3.33333 1.66667 0.21 0.816 * RESIDUAL 63.3340 7.91675 * TOTAL (CORRECTED) 14 10493.3 749.524 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMC FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:54 :PAGE VARIATE V005 TLMC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 2793.33 698.333 64.46 0.000 R 13.3333 6.66667 0.62 0.568 * RESIDUAL 86.6665 10.8333 * TOTAL (CORRECTED) 14 2893.33 206.667 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:54 :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 TLMS 0.000000 10.0000 23.3333 31.6667 35.0000 TLMN 100.000 66.6667 43.3333 33.3333 28.3333 TLMC 0.000000 23.3333 33.3333 35.0000 36.6667 SE(N= 3) 0.986013 1.62447 1.90029 5%LSD 8DF 3.21529 5.29725 6.19665 MEANS FOR EFFECT R R NOS 5 TLMS 19.0000 20.0000 21.0000 TLMN 54.0000 55.0000 54.0000 TLMC 27.0000 25.0000 25.0000 SE(N= 5) 0.763762 1.25831 1.47196 5%LSD 8DF 2.49055 4.10323 4.79991 - 50 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:54 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLMS TLMN TLMC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 20.000 15 54.333 15 25.667 STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 13.758 1.7078 8.5 0.0000 27.377 2.8137 5.2 0.0000 14.376 3.2914 12.8 0.0000 |R | | | 0.2397 0.8156 0.5679 | | | | 51 Kết thí nghiệm khử trùng dung dịch HgCl 0,1% BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMS FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:56 :PAGE VARIATE V003 TLMS LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 8166.67 2041.67 257.90 0.000 R 3.33333 1.66667 0.21 0.816 * RESIDUAL 63.3332 7.91665 * TOTAL (CORRECTED) 14 8233.33 588.095 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMN FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:56 :PAGE VARIATE V004 TLMN SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 17843.3 4460.83 535.30 0.000 R 205080E-11 102540E-11 0.00 1.000 * RESIDUAL 66.6671 8.33339 * TOTAL (CORRECTED) 14 17910.0 1279.29 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMC FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:56 :PAGE VARIATE V005 TLMC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 2793.33 698.333 57.79 0.000 R 3.33333 1.66667 0.14 0.873 * RESIDUAL 96.6669 12.0834 * TOTAL (CORRECTED) 14 2893.33 206.667 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:56 :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 TLMS 0.000000 23.3333 63.3333 53.3333 51.6667 TLMN 100.000 68.3333 23.3333 16.6667 11.6667 TLMC 0.000000 8.33333 13.3333 30.0000 36.6667 SE(N= 3) 1.62446 1.66667 2.00693 5%LSD 8DF 5.29721 5.43485 6.54441 MEANS FOR EFFECT R R NOS 5 TLMS 38.0000 39.0000 38.0000 TLMN 44.0000 44.0000 44.0000 TLMC 18.0000 17.0000 18.0000 SE(N= 5) 1.25830 1.29100 1.55456 5%LSD 8DF 4.10320 4.20982 5.06928 - 52 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:56 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLMS TLMN TLMC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 38.333 15 44.000 15 17.667 STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 24.251 2.8137 7.3 0.0000 35.767 2.8868 6.6 0.0000 14.376 3.4761 19.7 0.0000 |R | | | 0.8156 1.0000 0.8730 | | | | 53 Kết ảnh hƣởng nồng độ BAP đến tái sinh chồi Bò khai BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLBC FILE 123456 28/ 5/15 21:59 :PAGE VARIATE V003 TLBC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 4018.31 1004.58 64.62 0.000 R 112.634 56.3170 3.62 0.075 * RESIDUAL 124.373 15.5467 * TOTAL (CORRECTED) 14 4255.32 303.951 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSBC FILE 123456 28/ 5/15 21:59 :PAGE VARIATE V004 HSBC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 3.13977 784943 85.57 0.000 R 116800E-01 584000E-02 0.64 0.558 * RESIDUAL 733868E-01 917336E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.22484 230346 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 123456 28/ 5/15 21:59 :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 TLBC 37.7767 48.8900 71.1133 84.4467 62.2233 HSBC 0.846667 1.02333 1.39667 2.09000 1.75333 SE(N= 3) 2.27645 0.552972E-01 5%LSD 8DF 7.42327 0.180319 MEANS FOR EFFECT R R NOS 5 TLBC 57.3340 64.0020 61.3340 HSBC 1.42600 1.38600 1.45400 SE(N= 5) 1.76333 0.428331E-01 5%LSD 8DF 5.75004 0.139674 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 123456 28/ 5/15 21:59 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLBC HSBC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 60.890 15 1.4220 STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 17.434 3.9429 6.5 0.0000 0.47994 0.95778E-01 6.7 0.0000 |R | | | 0.0753 0.5576 | | | | 54 Kết ảnh hƣởng kinetin đến khả tái sinh chồi BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLBC FILE 123456 28/ 5/15 22: :PAGE VARIATE V003 TLBC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 1167.34 291.835 24.63 0.000 R 53.3333 26.6667 2.25 0.167 * RESIDUAL 94.7854 11.8482 * TOTAL (CORRECTED) 14 1315.46 93.9613 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSBC FILE 123456 28/ 5/15 22: :PAGE VARIATE V004 HSBC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 481760 120440 43.48 0.000 R 149733E-01 748667E-02 2.70 0.126 * RESIDUAL 221600E-01 277000E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 518893 370638E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 123456 28/ 5/15 22: :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 TLBC 51.1100 64.4467 75.5533 71.1100 57.7767 HSBC 0.866667 1.17667 1.31000 0.910000 0.890000 SE(N= 3) 1.98731 0.303864E-01 5%LSD 8DF 6.48041 0.990871E-01 MEANS FOR EFFECT R R NOS 5 TLBC 66.6660 62.6660 62.6660 HSBC 1.05400 1.05200 0.986000 SE(N= 5) 1.53936 0.235372E-01 5%LSD 8DF 5.01970 0.767525E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 123456 28/ 5/15 22: :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLBC HSBC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 63.999 15 1.0307 STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 9.6934 3.4421 5.4 0.0002 0.19252 0.52631E-01 5.1 0.0000 |R | | | 0.1669 0.1260 | | | | 55 Kết ảnh hƣởng kết hợp BAP IBA đến hiệu tái sinh chồi BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLBC FILE 123456 28/ 5/15 22: :PAGE VARIATE V003 TLBC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 2974.61 743.652 126.10 0.000 R 218.608 109.304 18.53 0.001 * RESIDUAL 47.1788 5.89735 * TOTAL (CORRECTED) 14 3240.40 231.457 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSBC FILE 123456 28/ 5/15 22: :PAGE VARIATE V004 HSBC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 1.64217 410543 62.17 0.000 R 192400E-01 962000E-02 1.46 0.289 * RESIDUAL 528267E-01 660334E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.71424 122446 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 123456 28/ 5/15 22: :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 TLBC 84.4667 53.3333 62.2333 91.1000 66.6667 HSBC 2.09000 1.84667 2.06667 2.82333 2.13333 SE(N= 3) 1.40206 0.469160E-01 5%LSD 8DF 4.57199 0.152988 MEANS FOR EFFECT R R NOS 5 TLBC 66.6800 72.0000 76.0000 HSBC 2.16000 2.17400 2.24200 SE(N= 5) 1.08603 0.363410E-01 5%LSD 8DF 3.54145 0.118504 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 123456 28/ 5/15 22: :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLBC HSBC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 71.560 15 2.1920 STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 15.214 2.4284 3.4 0.0000 0.34992 0.81261E-01 3.7 0.0000 |R | | | 0.0012 0.2889 | | | |