Nghiên cứu nhân giống Keo lai BV32 bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống Keo lai BV32 bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống Keo lai BV32 bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống Keo lai BV32 bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống Keo lai BV32 bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống Keo lai BV32 bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống Keo lai BV32 bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống Keo lai BV32 bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống Keo lai BV32 bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu nhân giống Keo lai BV32 bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào. (Khóa luận tốt nghiệp)
i I H C THÁI NGUYÊN I H C NÔNG LÂM NGUY N TH CHÍNH KHĨA LU N T T NGHI H o IH C : Chính quy Chuyên ngành : Công ngh sinh h c Khoa : CNSH - CNTP Khoá h c : 2011 - 2015 ii I H C THÁI NGUYÊN I H C NÔNG LÂM NGUY N TH CHÍNH KHĨA LU N T T NGHI H o IH C : Chính quy Chun ngành : Cơng ngh sinh h c L p : K43 - CNSH Khoa : CNSH - CNTP Khoá h c : 2011 - 2015 Gi ng d n : ThS ng i Em xin ch Lâ NSH (khoa Th.S ThS ! Thái Nguyên, ngày 30 tháng 05 Sinh viên ii B ng 4.1 K t qu nghiên c u ng c n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai 35 B ng 4.2 K t qu nghiên c u ng c n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai 38 B ng 4.3 K t qu nghiên c u ng c a s k t h p gi n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai 41 B ng 4.4 K t qu nghiên c u nh ng c a s k t h p gi n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai 44 B ng 4.5 K t qu nghiên c u ng c n hi u qu r ch i Keo lai 47 B ng 4.6 K t qu nghiên c u ng c n hi u qu r ch i Keo lai 49 B ng 4.7.K t qu nghiên c u ng c a giá th n t l s ng c a Keo lai 51 iii DANH M C BI Bi 4.1 ng c n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai (sau 30 ngày) 37 Bi 4.2 Bi 4.3 ng c n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai 40 ng c a s k t h p gi n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai .43 Bi 4.4 ng c a s k t h p gi n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai .45 Bi 4.5 ng c n hi u qu r ch i Keo lai 48 Bi 4.6 ng c n hi u qu r ch i Keo lai .50 iv DANH M C HÌNH NH Hình 4.1 nh ng c Hình 4.2 ng c Hình 4.3 K t qu nghiên c u n kh ch i Keo lai BV32 36 n kh .39 ng c a s k t h p gi a BAP n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai 42 Hình 4.4 K t qu nghiên c u ng c a s k t h p gi n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai 45 Hình 4.5 K t qu nghiên c u ng c n hi u qu r ch i Keo lai 48 Hình 4.6 K t qu nghiên c u ng c n hi u qu r ch i Keo lai 50 Hình 4.7:K t qu nghiên c u ng c a giá th n t l s ng c a Keo lai 52 v BAP : Benzylamino purine IBA : Indol butyric acid NAA : Naphthyl acetic acid MS : Murashige & Skoog Medium MS* : MS n( vitamin) CT :C HSNC TB W/w V/v : Trung bình vi PH N 1: M 1.1 U 1.2 M c tiêu nghiên c u .3 1.3 M u 1.4 c th c ti n c tài PH N 2: T NG QUAN TÀI LI U .5 2.1 Ngu n g c c a Keo lai gi ng BV32 2.1.1 Lai gi ng nhân t o .5 2.1.2 Dòng Keo lai BV32 2.2 Tình hình nghiên c u v c .7 2.2.1 Tình hình nghiên c u th gi i 2.2.2 Tình hình nghiên c c 2.3 Khái ni m nuôi c y mô t bào th c v t khoa h c c a nhân gi ng b ng nuôi c y mô t bào th c v t 2.4 a t bào th c v t 2.4.2 S phân hóa ph n phân hóa c a t bào th c v t 10 n ni c y mơ t bào th c v t 11 n chu n b .11 n kh trùng m u, c y kh ng .11 n t o ch i nhân nhanh ch i 12 n t o mơ hồn ch nh 12 n chuy 2.6 Các y u t 12 ng t i k t qu nuôi c y mô t bào 13 u ki n vô trùng .13 2.6.2 V t li u nuôi c y 14 vii ng nuôi c y 15 2.7 Nh ng v nhân gi ng in vitro 26 2.7.1 Tính b nh v m t di truy n 26 .27 27 28 PH N 3: NG, N U 29 ng (v t li u) 29 m th i gian nghiên c u .29 m nghiên c u 29 3.2.2 Th i gian nghiên c u .29 3.3 N i dung nghiên c u 29 3.3.1 N i dung 1: Nghiên c u ng c a m t s ch n kh 3.3.2 N i dung 2: Nghiên c u n kh u ti ng i Keo lai 29 ng c a m t s ch u ti ng c a Keo lai .29 3.3.3 N i dung 3: Nghiên c u ng c a m t s giá th n t l s ng c a Keo lai 30 u .30 u ki n thí nghi m .30 u n i dung 1: Nghiên c u ch u ti ng c a m t s n kh nhanh ch i Keo lai .30 u n i dung 2: Nghiên c u ch u ti n kh u n i dung 3: Nghiên c u th ng c a m t s c a Keo lai 32 ng c a m t s giá n t l s ng c a Keo lai .33 viii lý s li u .33 PH N 4: K T QU NGHIÊN C U VÀ TH O LU N 35 4.1 K t qu nghiên c u ng c a m t s ch u ti n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai .35 4.1.1 K t qu nghiên c u ng c n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai 35 4.1.2 K t qu nghiên c u ng c n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai (Acacia hybrids) 38 4.1.3 K t qu nghiên c u ng c a s k t h p gi a BAP v n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai .40 4.1.4 K t qu nghiên c u ng c a s k t h p gi n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai .43 4.2 K t qu nghiên c u ng c a m t s ch u ti n hi u qu r ch i Keo lai 46 4.2.1 K t qu nghiên c u ng c n hi u qu r ch i Keo lai 46 4.2.2 K t qu nghiên c u ng c n hi u qu r ch i Keo lai 49 4.3 Nghiên c u ng c a giá th n t l s ng c a Keo lai nuôi c y mô 51 PH N 5: K T LU N VÀ KI N NGH .53 5.1 K t lu n 53 5.2 Ki n ngh .53 TÀI LI U THAM KH O PH L C 49 Keo lai Các ch tiêu chu n ch i chuy c tách riêng t ng ng có b sung NAA Sau 30 ngày nuôi c y K t qu ch tiêu theo dõi t l ch i r , s r trung bình m u ch t ng r c t ng h p b ng 4.6 Công N T ng s T l r S r M us c (%) TB/cây(r ) r 54 87,04 1,93 Tr c 0,2 54 88,89ns 2,78* Tr c CT3 0,5 54 90,74ns 1,71* Tr c CT4 0,8 54 92,59* 3,80* Tr c CT5 1,0 54 94,44* 4,86* Tr c LSD.05 6,88 0,21 CV% 4,0 3,7 NAA m u (mg/l) (m u) 0,0 CT2 th c CT1 Ghi chú: ns: sai ng vi r i v i dòng Keo lai BV32 Qua b ng ta th y, m y kh tin c y 95% công th c NAA cho k t qu t t nh t CT5 (1,0 mg/l) v i ch tiêu l t i ch ng là: T l r 94,44%-87,04%; s r TB/cây 4,86%-1,93% So sánh giá tr trung bình gi a cơng th c thí nghi m v thơng qua giá tr LSD 5% cho th y t l r s d ng NAA v i ch ng ng 50 0,8-1,0 mg/l s i ch ng T thí nghi m trên, ta th y hàm ng NAA t t nh kích thích r dòng Keo lai BV32 1,0 mg/l (CT5) C): NAA 0,0 mg/l CT5: NAA 1,0 mg/l Hình 4.6 giá N 51 i tác d ng riêng r c a hai lo i Auxin NAA, IBA cơng th c cho hi u qu r t t nh t IBA 1,0 mg/l Qua quan sát ta th y vi c s d ng IBA cho hi u qu r kh e, phát tri n t i t t, r i v i dòng Keo lai K t qu phù h p v i k t lu n nghiên c u c Mai (2009) NAA, IBA thích h y, so v i or 4.3 Nghiê n cu i quy trình nhân gi ng in vitro Cây Keo lai Công th c CT1 CT2 CT3 CT4 ( Ghi Giá th t t ng B t t ng B + 50% tr u hun t t ng B + 30% tr u hun t t ng B + 20% tr u hun +10% mùn h LSD.05 CV% Chi u S T l s ng cao TB (cây) (%) cây(cm) 30 56,67 4,51 30 30 66,67* 70,00* 4,30ns 5,35* 30 93,33* 5,81* 9,98 0,23 6,8 2,3 c có sai khác có ý 52 Qua b ng k t qu ta th y, v i giá tr LSD.05 nghi m có s m t 9,98 cơng th c thí tin c y 95% Theo dõi k t qu sau tu n tr ng, t l s ng c t t ng phát t t Trên giá th tr u hun +10% mùn h n t t nh t, t l s t t t ng B + 20% t 93,33% sau 30 ngày theo dõi K t qu có th gi B, mùn h d ng phân h ong thành ph n than tr t t ng nh) s làm cho b p, m c n thi tri n c a nên cho t l s ng cao, phát tri n t t ng phát i lo i giá th khác CT4: t + 20% tr u +10%mùn Hình 4.7: Keo lai t 53 Qua k t qu -V tài rút k t lu ng n n là: MS* + 30 g/l Saccharose+ 6,5 g/l Agar + 0,1 g/l Myo inositol n b sung BAP phù h p cho nhân nhanh ch i Keo lai 1,5 mg/l BAP Vi c k t h p BAP v i IBA, IAA làm gi m h s nhân ch i -V ng n n r là: 1/2MS* + 30 g/l Saccharose + 6,5 g/l Agar + 0,1 g/l Myo inositol n b sung IBA t t nh t cho r 1,0 mg/l IBA - Giá th s ng g t t ng B + 20% tr u hun +10% mùn h u l s t nhi u so v i giá th t Bên c ti p t c nghiên c u giá th khác 5.2 C n ti n hành nghiên c u thêm v ng nhân ch i r thích h p nh t cho dịng Keo lai BV32, th nghi m v i Cytokinin, Auxin khác ho ng thích h p nh t t h p gi a ch tìm mơi Ngơ Xn Bình Hùng (2009), Thái Ngun Kh (1999), Ngiên c u s d ng gi ng lai t nhiên gi a Keo tai ng Keo tràm Vi t Nam, Nxb Nông Nghi p Kh (2006), Lai gi ng r ng, Nxb Nông Nghi p, Hà N i Kh ng Hùng (2003), Gi ng r ng, Nxb Nông Nghi p Kh , Nguy i, H Quang Vinh (1997), K t qu m i v kh o nghi m gi ng lai t nhiên gi ng Keo tràm, T p chí Lâm Nghi p B Nơng nghi Lâm nghi 10 tr Ngành i tác Kiên (2002), Triêu Hà (2008), Giáo 11 (1999) Giáo trình 12 Mai 13 Mai, Ngu 14 Sinh lý h Thanh 15 Tôn (2005), Giáo trình 16 (1993), 17 ng Anh 18 Trindate H., J G Ferreira, M S Pais, R Aloni (1990), The role of cytokinin and auxin in rapid multiplication of shoots of Eucalyptus globulus grownln vitro, Australian Forestry 19 Sharma J.K (1994), Patbological investigations in Forest Nurseries and plantations in Vietnam, Report of Food and Agriculture organization of the United Nations, FAO VIE/92,022: Hanoi 20 Gamborg O.L, Philips.G.C (1995), Plant Cell, Tissue, and Organ Culture: Fugamental Methods, Springer-Verlag, New York 21 Edwin F.George Ph.D (1993), Plant propagation by tissue culture part the technology, Exegetics Ltd., Edington, Wilts., BA13 4QG, England 22 Trigiano R.N, Gray.D.J (1999), Plant Tissueculture Concepts and Laboratory Exercises, CRC press, Bocaration, Florida, USA 23 Nissen S.J, Sutter.E.G (1990), Sability of IAA and IBA nutrient medium to several tissue culture procedures, Hortsciense 24 Bhojwani S.S, M.K Razdan (1983), Plant tissue culture: Theory and Practice, Amsterdam, Oxford, New York, Tokyo Ph l c 1: K t qu thí nghi m Ph l c 2: Ph l c 3: K t qu nghiên c u ng c a s k t h p gi a BAP n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai BV32 Ph l c 4: K t qu nghiên c u ng c a s k t h p gi a BAP n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai Ph l c 5: K t qu nghiên c u ng c ch i Keo lai n hi u qu r Ph l c 6: K t qu nghiên c u ng c ch i Keo lai n hi u qu r Ph l c 7: K t qu nghiên c u ng c a giá th Keo lai n t l s ng c a ... gi ng lai mong mu n 2.1.2 Dòng Keo lai BV32 Acacia hybrids Keo lai BV32 Acacia mangium) Keo tràm (Acacia auriculiformis) ( , 2006) y cao ( cs, 1997) b ov t , 2006) Thông tin v dòng Keo lai BV32: ... (Acacia hybrids) - Nghiên c u ng c a n n kh ch i Keo lai - Nghiên c u ng c a n K n kh nhanh ch i Keo lai - Nghiên c u ng c a s k t h p gi a (BAP ho c Kinetin) n kh i Keo lai dòng BV32 - Nghiên c u ng... nhân nhanh ch i Keo lai .40 4.1.4 K t qu nghiên c u ng c a s k t h p gi n hi u qu nhân nhanh ch i Keo lai .43 4.2 K t qu nghiên c u ng c a m t s ch u ti n hi u qu r ch i Keo lai