Nghiên cứu khả năng kháng nấm mốc của chế phẩm phối hợp Chitosan Nano bạc. (Khóa luận tốt nghiệp)

Nghiên cứu khả năng kháng nấm mốc của chế phẩm phối hợp Chitosan Nano bạc. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng kháng nấm mốc của chế phẩm phối hợp Chitosan Nano bạc. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng kháng nấm mốc của chế phẩm phối hợp Chitosan Nano bạc. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng kháng nấm mốc của chế phẩm phối hợp Chitosan Nano bạc. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng kháng nấm mốc của chế phẩm phối hợp Chitosan Nano bạc. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng kháng nấm mốc của chế phẩm phối hợp Chitosan Nano bạc. (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng kháng nấm mốc của chế phẩm phối hợp Chitosan Nano bạc. (Khóa luận tốt nghiệp)

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NÔNG VIỆT TRINH Tên đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG NẤM MỐC CỦA CHẾ PHẨM PHỐI HỢP CHITOSAN - NANO BẠC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo Chun ngành Khoa Khóa học : Chính quy : Cơng nghệ Thực phẩm : CNSH - CNTP : 2012 - 2016 Thái nguyên, năm 2016 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NÔNG VIỆT TRINH Tên đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG NẤM MỐC CỦA CHẾ PHẨM PHỐI HỢP CHITOSAN - NANO BẠC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành: Công nghệ Thực phẩm Lớp : K 44 - CNTP Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2012 - 2016 Giảng hƣớng dẫn: Th.S Lƣơng Hùng Tiến Thái nguyên, năm 2016 i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành khóa luận tốt nghiệp này, bên cạnh nỗ lực thân, em nhận giúp đỡ nhiều từ cá nhân tập thể Với lòng biết ơn sâu sắc em xin chân thành cảm ơn giáo viên hướng dẫn, thầy Lương Hùng Tiến giảng viên khoa CNSH - CNTP tin tưởng giao đề tài, tận tình giúp đỡ, tạo điều kiện tốt cho em suốt q trình thực hồn thành khóa luận Em xin chân thành cảm ơn thầy, giáo làm việc quản lí phịng thí nghiệm thường xun giúp đỡ em thực hồn thành khóa luận tốt nghiệp Cuối cùng, em xin cảm ơn toàn thể người thân gia đình bạn bè quan tâm, ủng hộ tạo điều kiện để em hồn thành tốt khóa luận Dù cố gắng nhiều, xong khóa luận cịn thiếu xót hạn chế Kính mong nhận chia sẻ ý kiến đóng góp q báu thầy, giáo bạn Em xin chân thành cảm ơn! Thái nguyên ngày 29 tháng năm 2016 Sinh viên Nông Việt Trinh ii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Số nguyên tử lượng bề mặt hạt nano bạc Bảng 4.1 Ảnh hưởng nồng độ nano bạc đến hoạt tính kháng nấm mốc Penicillium digitatum 36 Bảng 4.2 Ảnh hưởng nồng độ nano bạc đến hoạt tính kháng nấm mốc Penicillium expansum 38 Bảng 4.3 Ảnh hưởng nồng độ nano bạc đến hoạt tính kháng nấm mốc Alternaria sp .39 Bảng 4.4 Ảnh hưởng nồng độ chitosan đến hoạt tính kháng nấm mốc Penicillium digitatum 41 Bảng 4.5 Ảnh hưởng nồng độ chitosan đến hoạt tính kháng nấm mốc Penicillium expansum 42 Bảng 4.6 Ảnh hưởng nồng độ chitosan đến hoạt tính kháng nấm mốc Alternaria sp .44 Bảng 4.7 Ảnh hưởng chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc tỉ lệ phối trộn khác đến hoạt tính kháng nấm mốc Penicillium digitatum 46 Bảng 4.8 Ảnh hưởng chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc tỉ lệ phối trộn khác đến hoạt tính kháng nấm mốc Penicillium expansum .47 Bảng 4.9 Ảnh hưởng chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc tỉ lệ phối trộn khác đến hoạt tính kháng nấm mốc Alternaria sp 49 iii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1 Công thức cấu tạo chitin .13 Hình 2.2 Cơng thức cấu tạo chitosan 13 Hình 3.1 Sơ đồ phương pháp xác định nồng độ ức chế tối thiểu nano bạc .32 Hình 3.2 Sơ đồ phương pháp xác định nồng độ ức chế tối thiểu chitosan 33 Hình 3.3 Sơ đồ phương pháp xác định nồng độ ức chế tối thiểu chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc .34 Hình 4.1 Ảnh hưởng nồng độ nano bạc đến hoạt tính kháng nấm mốc Penicillium digitatum 37 Hình 4.2 Ảnh hưởng nồng độ nano bạc đến hoạt tính kháng nấm mốc Penicillium expansum 38 Hình 4.3 Ảnh hưởng nồng độ nano bạc đến hoạt tính kháng nấm mốc Alternaria sp 39 Hình 4.4 Ảnh hưởng nồng độ chitosan đến hoạt tính kháng nấm mốc Penicillium digitatum 41 Hình 4.5 Ảnh hưởng nồng độ chitosan đến hoạt tính kháng nấm mốc Penicillium expansum 43 Hình 4.6 Ảnh hưởng nồng độ chitosan đến hoạt tính kháng nấm mốc Alternaria sp 44 Hình 4.7 Ảnh hưởng chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc tỉ lệ phối trộn khác đến hoạt tính kháng nấm mốc Penicillium digitatum 46 Hình 4.8 Ảnh hưởng chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc tỉ lệ phối trộn khác đến hoạt tính kháng nấm mốc Penicillium expansum 48 Hình 4.9 Ảnh hưởng chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc tỉ lệ phối trộn khác đến hoạt tính kháng nấm mốc Alternaria sp .50 Hình 4.10 Khả kháng Penicillium digitatum chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc theo thời gian 51 Hình 4.11 Khả kháng Penicillium expansum chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc theo thời gian 52 Hình 4.12 Khả kháng Alternaria sp chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc theo thời gian 52 iv DANH MỤC CÁC TỪ, CÁC CỤM TỪ VIẾT TẮT A sp Alternaria sp DD Degree of deacetylation MIC Nồng độ ức chế tối thiểu P digitatum Penicillium digitatum P expansum Penicillium expansum PE Polyethylene PLA Phenyllalanime ammonia-lyase POD Peroxidase PPO Polyphenol oxydase v MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC CÁC BẢNG ii DANH MỤC CÁC HÌNH iii DANH MỤC CÁC TỪ, CÁC CỤM TỪ VIẾT TẮT iv MỤC LỤC v PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu yêu cầu đề tài .2 1.2.1 Mục tiêu đề tài 1.2.2 Yêu cầu đề tài .2 1.3 Ý nghĩa đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học .3 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn .3 PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan nano bạc 2.1.1 Khái niệm công nghệ nano 2.1.2 Phân loại vật liệu nano 2.1.3 Cơ sở khoa học công nghệ nano 2.1.4 Giới thiệu hạt nano bạc .5 2.1.4.1 Hạt nano bạc 2.1.4.2 Tính chất lý hóa hạt nano bạc 2.1.5 Tính kháng vi sinh vật nano bạc 2.1.6 Ứng dụng nano bạc 11 2.2 Tổng quan chitosan .12 2.2.1 Nguồn gốc chitin chitosan 12 2.2.2 Cấu trúc hóa học chitosan 13 2.2.3 Tính chất chitosan .14 2.2.4 Đặc tính kháng vi sinh vật chitosan 17 vi 2.2.5 Ứng dụng chitosan 19 2.3 Tổng quan nấm mốc 23 2.3.1 Nấm mốc Penicillium digitatum .23 2.3.2 Nấm mốc Penicillium expansum .24 2.3.3 Nấm mốc Alternaria sp 25 2.4 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 25 2.4.1 Tình hình nghiên cứu giới 25 2.4.2 Tình hình nghiên cứu nước 27 PHẦN 3: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 29 3.1.1 Đối tượng 29 3.1.2 Hóa chất, thiết bị dụng cụ 29 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành nghiên cứu 30 3.3 Nội dung nghiên cứu 30 3.4 Phương pháp nghiên cứu 30 3.4.1 Phương pháp xác định mật độ tế bào phương pháp đếm khuẩn lạc … 30 3.4.2 Chuẩn bị môi trường nuôi cấy dung dịch đệm acetate 30 3.4.3 Phương pháp pha chitosan 2% 31 3.4.4 Phương pháp bảo quản giống 31 3.4.5 Phương pháp xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) nano bạc lên nấm mốc 32 3.4.6 Phương pháp xác định MIC chitosan nấm mốc 33 3.4.7 Phương pháp xác định MIC chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc 33 3.4.8 Theo dõi thời gian kháng nấm mốc chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc 35 PHẦN 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 36 4.1 Xác định MIC nano bạc với nấm mốc Penicillium digitatum, Penicillium expansum, Alternaria sp 36 4.1.1 Xác định MIC nano bạc với nấm mốc Penicillium digitatum 36 4.1.2 Xác định MIC nano bạc với nấm mốc Penicillium expansum 37 vii 4.1.3 Xác định MIC nano bạc với nấm mốc Alternaria sp .39 4.2 Xác định MIC chitosan với nấm mốc Penicillium digitatum, Penicillium expansum, Alternaria sp 40 4.2.1 Xác định MIC chitosan với nấm mốc Penicillium digitatum .40 4.2.2 Xác định MIC chitosan với nấm mốc Penicillium expansum 42 4.2.3 Xác định MIC chitosan với nấm mốc Alternaria sp 43 4.3 Xác định MIC chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc nấm mốc Penicillium digitatum, Penicillium expansum, Alternaria sp 45 4.3.1 Xác định MIC chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc nấm mốc Penicillium digitatum 45 4.3.2 Xác định MIC chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc nấm mốc Penicillium expansum 47 4.3.3 Xác định MIC chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc nấm mốc Alternaria sp 48 4.4 Theo dõi thời gian kháng nấm mốc Penicillium digitatum, Penicillium expansum, Alternaria sp chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc 51 PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 54 5.1 Kết luận 54 5.2 Đề nghị .54 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tiếng Việt II Tài liệu tiếng Anh PHỤ LỤC PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Việt Nam có khí hậu nóng ẩm thuận lợi cho nấm mốc phát triển Nấm mốc nguyên nhân gây hư hỏng sản phẩm lương thực, thực phẩm, rau đặc biệt làm hư hỏng sau thu hoạch Trong có ba chủng nấm mốc xuất phổ biến, gây hư hỏng cam quýt táo Penicillium digitatum, Alternaria sp, Penicillium expansum [6] Chúng gây bệnh mốc lục cam quýt, thối đen cam quýt, giai đoạn tồn trữ sau thu hoạch, gây nhiều thiệt hại kinh tế cho người Có nhiều cơng trình nghiên cứu biện pháp nhằm ngăn chặn phát triển nấm mốc nông sản sau thu hoạch công bố bảo quản trái sau thu hoạch sulfitsodium (Na2SO3) làm chậm q trình chín cách sử dụng số hóa chất nitrat bạc (AgNO3) [6] Tuy nhiên hóa chất nói hóa chất gây ảnh hưởng đến sức khỏe người tiêu dùng sử dụng với liều lượng mức cho phép Đặc biệt sản phẩm xử lý hóa chất gặp phải rào cản nghiêm ngặt xuất sang nước EU, Nhật, Mỹ [24] Gần xu hướng phát triển giới sử dụng chất bảo quản có nguồn gốc tự nhiên sinh học để bảo quản nông sản Bạc từ lâu sử dụng điều trị bệnh y tế thuộc tính kháng khuẩn tự nhiên Nano bạc vật liệu có diện tích bề mặt riêng lớn, có đặc tính khử khuẩn, chống nấm, khử mùi, khơng có hại cho sức khỏe người với liều lượng tương đối cao, ổn định nhiệt độ cao, chi phí cho q trình sản xuất thấp [46] Ngồi khơng gây phản ứng phụ, liều lượng khơng gây độc cho người vật nuôi nhiễm lượng nano bạc nồng độ diệt khuẩn (< 100ppm) [57] Khả kháng khuẩn nano bạc nhờ vào ion Ag+, ion có khả liên kết mạnh với peptidoglican, thành phần cấu tạo nên thành tế bào vi sinh vật ức chế khả vận chuyển oxy vào bên tế bào dẫn đến làm tê liệt ... pháp xác định MIC chitosan nấm mốc 33 3.4.7 Phương pháp xác định MIC chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc 33 3.4.8 Theo dõi thời gian kháng nấm mốc chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc ... Ảnh hưởng chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc tỉ lệ phối trộn khác đến hoạt tính kháng nấm mốc Penicillium expansum 48 Hình 4.9 Ảnh hưởng chế phẩm phối hợp Chitosan - Nano bạc tỉ lệ phối trộn... TRINH Tên đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG NẤM MỐC CỦA CHẾ PHẨM PHỐI HỢP CHITOSAN - NANO BẠC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chun ngành: Cơng nghệ Thực phẩm Lớp : K 44 -