Các phương pháp phân tích chất lượng tinh dầu

I. Lấy mẫu và chuẩn bị mẫuII. Xác định các tính chất cảm quan của tinh dầuIII. Xác định tỷ trọng của tinh dầuIV.Xác định chỉ số khúc xạV. Xác định góc quay cựcVI. Xác định điểm đôngVII. Xác định giới hạn sôiVIII. Xác định chỉ số axit và hàm lượng axitIX. Xác định chỉ số este và hàm lượng esteX. Xác định hàm lượng rượu tự doXI. Xác định hàm lượng rượu bậc 3XII. Xác định độ hòa tan trong ethanolXIII. Xác đỊnh hàm lưỢng phenolXIV. Xác đỊnh phẦn còn lại ko bay hơiNếu mẫu ở trạng thái lỏng (nhiệt độ thường): rót mẫu vào bình tam giác khô, sạch sao cho lượng tinh dầu không vượt quá 23 dung tích bình  Thêm bột Na hoặc MgSO4 khan với ( khoảng 15% khối lượng tinh dầu) và thỉnh thoảng lắc đều trong khoảng 2h.Nếu mẫu ở trạng thái đặc đông đặc một phần (nhiệt độ thường)  cần hóa lỏng mẫu trong tủ sấy ở nhiệt độ thích hợp. Khi sấy cần nới lỏng nhưng không mở nút, mẫu có thể được lọc trong tủ sấy  rót mẫu vào các bình tam giác khô sạch và đã sấy ở nhiệt độ cần thiết với lượng mẫu không vượt quá 8% dung tích bình  cho thêm bột Na hoặc MgSO4 khan (khoảng 15% khối lượng mẫu), thỉnh thoảng lắc đều trong khoảng 2h. Trong quá trình bảo quản để phân tích, mẫu cần được giữ ở nhiệt độ thấp nhất mà vẫn duy trì mẫu ở trạng thái lỏng.

Báo cáo Các phương pháp phân tích thành phần hóa lý Đề tài: Các phương pháp phân tích chất lượng tinh dầu GVHD: Th.S Hoàng Quốc Tuấn Sinh viên thực hiện: Nguyễn Đức Trung 20136659 Lê Thị Hiền 20135513 Nguyễn Thị Thu Hằng 20135494 Bùi Thị Tâm 20136352 Nguyễn Hoài Vi 20136826 Nội dung I Lấy mẫu chuẩn bị mẫu II Xác định tính chất cảm quan tinh dầu III Xác định tỷ trọng tinh dầu IV.Xác định số khúc xạ V Xác định góc quay cực VI Xác định điểm đông VII Xác định giới hạn sôi VIII Xác định số axit hàm lượng axit IX Xác định số este hàm lượng este X Xác định hàm lượng rượu tự XI Xác định hàm lượng rượu bậc XII Xác định độ hòa tan ethanol XIII Xác đỊnh hàm lưỢng phenol XIV Xác đỊnh phẦn lại ko bay I Lấy mẫu chuẩn bị mẫu Nguyên tắc: Chất lượng tinh dầu xác định sở chất lượng mẫu trung bình lô hàng Các mẫu lấy hạng chất lượng, sản xuất thiết bị lắng, đựng loại bao bì, giao nhận lần không lớn 500 đơn vị bao gói I Lấy mẫu chuẩn bị mẫu Lấy mẫu: 2.1 Dụng cụ: đũa thủy tinh, ống hút, cốc đong, lọ đựng mẫu 2.2 Xác định số lượng mẫu lấy: Số lượng đơn vị bao gói lô hàng Số lượng đơn vị bao gói lấy mẫu Từ đến Lấy tất Từ đến 100 Lấy đơn vị 5% số đơn vị lô Từ 101 đến 300 Lấy đơn vị 3% số đơn vị lô Từ 301 đến 500 Lấy 15 đơn vị 1% số đơn vị lô I Lấy mẫu chuẩn bị mẫu 2.3 Quy trình lập mẫu: - Mở thùng/can chứa  quan sát mức độ lắng cặn/tạp chất  dùng đũa thủy tinh khuấy dùng ống Lấy mẫu ban đầu hút lấy 100 ml vị trí thùng chứa - Trong trường hợp lô hàng nhỏ, cần tăng khối lượng mẫu ban đầu cho khối lượng mẫu chung không nhỏ 2000 ml Lập mẫu chung Tập trung tất mẫu ban đầu lấy từ đơn vị bao gói vào cốc đong  dùng đũa thủy tinh trộn  ta mẫu chung lô hàng có khối lượng không nhỏ 2000 ml I Lấy mẫu chuẩn bị mẫu 2.3 Quy trình lập mẫu: Lập mẫu trung bình từ mẫu chung trộn kỹ cách rót vào hai chai chứa mẫu dung tích chai 500 ml, nút kín dán nhãn với nội dung: + Tên sở có lô hàng; +Tên sản phẩm hạng chất lượng; + Số ký hiệu khối lượng lô hàng; Lập mẫu trung bình + Địa điểm thời gian lấy mẫu; +Người lấy mẫu Một mẫu trung bình gửi tới phòng thí nghiệm để đánh giá tiêu chất lượng lô hàng Một mẫu lưu quan lấy mẫu, thời gian lưu mẫu theo thỏa thuận bên hữu quan I Lấy mẫu chuẩn bị mẫu Chuẩn bị mẫu:  Nếu mẫu trạng thái lỏng (nhiệt độ thường): rót mẫu vào bình tam giác khô, cho lượng tinh dầu không vượt 2/3 dung tích bình  Thêm bột Na MgSO4 khan với ( khoảng 15% khối lượng tinh dầu) lắc khoảng 2h  Nếu mẫu trạng thái đặc /đông đặc phần (nhiệt độ thường)  cần hóa lỏng mẫu tủ sấy nhiệt độ thích hợp Khi sấy cần nới lỏng không mở nút, mẫu lọc tủ sấy  rót mẫu vào bình tam giác khô sấy nhiệt độ cần thiết với lượng mẫu không vượt 8% dung tích bình  cho thêm bột Na MgSO4 khan (khoảng 15% khối lượng mẫu), lắc khoảng 2h  Trong trình bảo quản để phân tích, mẫu cần giữ nhiệt độ thấp mà trì mẫu trạng thái lỏng II Xác định tính chất cảm quan - Mục đích: mô tả chi tiết tính chất cảm quan tinh dầu Nguyên tắc chung: sử dụng phép thử mô tả để mô tả chi tiết tính chất cảm quan tinh dầu Các tiêu đánh giá: màu sắc, mùi , vị, độ Yêu cầu: + Có mẫu chuẩn với loại tinh dầu tương ứng cần đánh giá chất lượng + Việc chuẩn bị mẫu cần thực trước đánh giá cảm quan Nếu không, tinh dầu chuẩn bị cần bảo quản nơi mát, tránh ánh sáng mạnh, đổ đầy vật chứa có nắp đậy kín sấy khô trước II Xác định tính chất cảm quan Đánh giá mùi: - Nhỏ vài giọt tinh dầu lên giấy thấm khô, sạch, mùi lạ Dùng mũi xác định mùi tinh dầu từ lần đến lần, 15 phút xác định lần - Khi cần, so sánh mùi phần mẫu thử với mẫu tinh dầu chuẩn tương ứng cho loại tinh dầu II Xác định tính chất cảm quan Đánh giá vị: - Cân khoảng g đường kính cho vào chén thử khô, sạch, mùi vị lạ Nhỏ vài giọt tinh dầu vào chén, trộn đều, dùng lưỡi xác định vị hỗn hợp - Khi cần, so sánh vị phần mẫu thử với mẫu tinh dầu chuẩn tương ứng cho loại tinh dầu XI Xác định hàm lượng rượu bậc Nguyên tắc: Dùng clorua axetyl dimetylanilin tác dụng với rượu bậc (linalool) nhiệt độ thấp để este hóa hoàn toàn rượu cách nhẹ nhàng, tránh nước rượu bậc axetyl hóa ahydric axetic Cách tiến hành: Cho 10 ml tinh dầu vào bình nón 100 ml nút mài, làm lạnh nước đá 10’ Cho thêm 20 ml dimetylanilin vào bình XI Xác định hàm lượng rượu bậc Cách tiến hành: - Lắc đều, làm nước đá 15’ Sau thêm ml clorua axetyl anhydric axetic Tiếp tục làm lạnh 10’ Để yên nhiệt độ phòng 30’ để tủ sấy bể điều nhiệt 40± 0C 16h - Chuyển sang phễu chiết Rửa lần lần 75 ml nước ướp đá Và lần 25 ml H2SO4 5% để loại hết dimetylanilin tự Rửa tiếp =10 ml dung dịch Na2CO3 10% lần 50ml nước muối bão hòa cuối lần 50ml nước cất - Làm khô tinh dầu cách lắc với Na2SO4khan, lọc XI Xác định hàm lượng rượu bậc 3 Tính kết quả: Hàm lượng rượu bậc (linalool) (X6) tính theo %: Trong đó: • m - lượng tinh dầu axetyl hóa, g; • V - thể tích dd H2SO4 hay HCl 0,5N dùng để chuẩn độ mẫu trắng, ml; • V1 - thể tích dd H2SO4 hay HCl 0,5N dùng để chuẩn độ mẫu thử, ml XII Xác định độ hòa tan ethanol Nguyên tắc :Dùng etanol nồng độ khác để hòa tan tinh dầu Ghi lượng etanol tối thiểu cần để hòa tan ml tinh dầu 20 ± 0,50C Cách tiến hành: - Dung môi dụng cụ thí nghiệm phải trì 20 ± 0,5 0C - Hút 1ml tinh dầu cho vào ống nghiệm, từ buret nhỏ dần etanol có nồng độ xác định vào ống đựng tinh dầu ngâm nước 20± 0,50C, lần ~0,5 ml Đậy nút, lắc nhẹ cho tan hết tinh dầu lại tiếp tục ngâm vào nước 20± 0,50C nhỏ thu dung dịch suốt - Ghi lượng etanol dùng Lặp lại thí nghiệm với lần nhỏ 0,2 ml etanol để có thể tích etanol tiêu tốn xác Nếu dung dịch thu không suốt đục trắng đem so sánh với dung dịch tiêu chuẩn XIII Xác định hàm lượng Phenol Nguyên tắc: Dựa phản ứng phenol vs kiềm tạo phenolat hòa tan nước C6H5OH + NaOH = C6H5ONa + H2O Cách tiến hành: - Lấy ~10g tinh dầu+0,2ml axit tactric cho vào bình, lắc kĩ - Thêm 2g MgSO4 Na2SO4 sấy kiệt nước 180 độ nghiền nhỏ lắc khoảng 2h để làm nước - Lấy 5ml tinh dầu cho vào bình cầu, thêm 50 ml dd NaOH 3%, đun nóng bếp cách thủy 15’, lắc đều, sau để nguội, - Cho thêm dd NaOH để đưa phần đầu không phản ứng lên phần cổ bình có chia độ Gõ nhẹ vào cổ bình cho hạt dầu lại lên cổ bình XIII Xác định hàm lượng Phenol Tính kết quả: Hàm lượng phenol(X8) tíh theo %: Trong đó: V-thể tích tinh dầu ko phản ứng(ml) XIV Xác định chất lại không bay 1.Cách tiến hành: Cân 5g tinh dầu xác đến 0,001g cốc thủy tinh 50 ml biết trước khối lượng.Làm bay tinh dầu bếp cách thủy sôi khối lượng không đổi Sau lau khô cốc đặt bình hút ẩm cho nguội đem cân với độ xác 2.Kết quả: Hàm lượng phần lại ko bay hơi(X9) tính theo %m: Trong đó: m- khối lg tinh dầu dùng(g) m0- khối lg cốc(g) m1- khối lg cốc + phần ko bay hơi(g) XV Xác định hàm lượng Aldehyd Ceton Phương pháp Natri sulfat (andehyt cinnamic) 1.1 Nguyên tắc: dựa phản ứng AĐH xeton tinh dầu với Na 2SO4 trung tính tạo hợp chất cộng tan trog nước dd Phần ko AĐH dầu tách riêng  lượng Aldehyd Ceton có dầu 1.2 Cách tiến hành: - Hút 10 ml tinh dầu+dd bão hòa Na2SO3 + giọt thị màu phenolphtalein 1% cho vào bình150 ml Đun sôi bếp cách thủy lắc Khi xuất màu hồng, nhỏ dd NaHSO giọt màu, tiếp tục đun ,lắc XV Xác định hàm lượng Aldehyd Ceton 1.2 Cách tiến hành:  Nếu ko thấy xuất màu hồng thêm vài giọt phenolphtalein mà ko thấy xuất màu hồng coi  Còn thấy xuất màu hồng thêm NaHSO3cho đến màu hồng Lại tiếp tục làm thêm vài giọt phenolphtalein dd ko có màu hồng trở lại.Để đảm bảo cho phản ứng hoàn toàn, tiếp tục đun 15’ nữa, để nguội Sau lớp dầu không phản ứng phân ly hoàn toàn cho dd Na2SO3 vào để lớp dầu lên cổ bình c) Tính toán: XV Xác định hàm lượng Aldehyd Ceton 1.3 Tính kết quả: Hàm lượng AĐH xeton (X10) theo %: Trong đó: 10-lượng tinh dầu lấy(ml) v-lượng tinh dầu ko phản ứng(ml) XV Xác định hàm lượng Aldehyd Ceton Phương pháp Oxim hóa hydroxylamine clohydrat: 2.1 Nguyên tắc: dựa tạo thành oxim tác dụng hydroxylamine clohydrat với h/c có nhóm cacbonyl, đồng thời giải phóng lượng HCl RCHO + H2NOH.HCl = RCH + NOH + H2O + HCl RCOR1 + H2NOH.HCl=(RR1)C + NOH + HCl XV Xác định hàm lượng Aldehyd Ceton 2.2 Cách tiến hành: 2.2.1 Cách xác định aldehyt (citral vvvv….) -Cân lượng tinh dầu khan xác đến 0,0005g có chứa khoảng 0,4– 0,8g AĐH cho vào bình cầu - Rót vào bình 15ml dd hydroxylamin clohydrat 0,5N, AĐH có khối lượng phân tử thấp rót vào ~ 20 - 25ml Sau thêm 8-10 giọt bromophenol xanh - Chuẩn độ lượng HCl thoát dd KOH 0,5N rượu vàng) đến dd có màu trung tính bromophenol (lục - Để yên bình 1h, lại xuất màu vàng phải chuẩn độ lại - Làm mẫu kiểm nghiệm đồng thời XV Xác định hàm lượng Aldehyd Ceton Hàm lượng aldehyt theo % (X11) : Trong đó: v – lượng dd KOH0,5N rượu chuẩn độ mẫu thử (ml); v1 – lượng dd KOH0,5N rượu chuẩn độ mẫu trắng(ml); M – khối lượng phân tử AĐH cần xác định; m – lượng tinh dầu(g) 2.2.2 Xác đinh hàm lượng xeton( menion, cacvon…): -Cân lượng tinh dầu khan xác đến 0,0005g, chứa~0,5 - 0,6g xeton đem cho vào bình cầu - Rót vào bình 20ml dd hydroxylamin clohydrat 0,5N Cho -10 giọt bromophenol xanh Để yên 10’ XV Xác định hàm lượng Aldehyd Ceton 2.2.2 Xác đinh hàm lượng xeton( menion, cacvon…): - Chuẩn độ lượng HCl thoát dd KOH 0,5N rượu dd có màu trung tính bromophenol (lục vàng) - Lắp ống làm lạnh vào bình đun cách thủy 10’ Để nguội lại chuẩn độ lần = dd KOH 0,5N Làm nhiều lần dd giữ màu cố định lục vàng mà không chuyển lại màu.Làm mẫu kiểm nghiệm đồng thời Hàm lượng xeton theo % (X12): Trong đó: m – lượng tinh dầu(g) v – lượng dd KOH 0,5N rượu chuẩn độ mẫu thử(ml); v1 – lượng dd KOH 0,5N rượu chuẩn độ mẫu trắng (ml); M – khối lượng phân tử xeton cần xác định; Câu hỏi: Khi phân tích sản phẩm cụ thể VD tinh dầu chè) có cần thực đầy đủ đánh giá nêu không? Vì sao? Câu trả lời nhóm em là: Ta không cần thực đầu đủ đánh giá kể với sản phẩm cụ thể, VD tinh dầu chè người ta thường quan tâm đến thành phần có giá trị đặc trưng như: Hàm lượng chất nhóm chất tanin (Polyphenol), tinh dầu (metyl salixylat, citronellol, )… quan tâm đến tiêu màu sắc, độ (cảm quan)… ... độ tinh dầu Khi cần, so sánh màu sắc phần mẫu thử với mẫu tinh dầu chuẩn tương ứng cho loại tinh dầu III Xác định tỷ trọng tinh dầu -Tỉ trọng tinh dầu tỉ số khối lượng tinh dầu 200C với khối lượng. .. tinh dầu 2.2 Xác định khối lượng tinh dầu: Tiến hành 2.1 thay nước cất tinh dầu ta xác định khối lượng bình tinh dầu 200 ± 0,50C III Xác định tỷ trọng tinh dầu 2.3 Tính toán: Tỉ trọng tinh dầu. .. hành đun sôi tinh dầu Sau cất giọt, đọc, ghi nhiệt độ sôi đầu tinh đầu.Điều chỉnh nhiệt cho phút, cất ~4-5ml tinh dầu Tiếp tục đun cất 95% lượng tinh dầu Đọc ghi nhiệt độ sôi cuối tinh dầu VII Xác