Nghiên cứu thành phần hoá học cây xuyên tâm thảo (canscora lucidissima) họ long đởm (gentianaceae) ở cao bằng

Header Page of 126 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HOÀNG THỊ YÊN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CÂY XUYÊN TÂM THẢO (CANSCORA LUCIDISSIMA) HỌ LONG ĐỞM (GENTIANACEAE) Ở CAO BẰNG LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC HOÁ HỌC Thái Nguyên, năm 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page of 126 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HOÀNG THỊ YÊN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CÂY XUYÊN TÂM THẢO (CANSCORA LUCIDISSIMA) HỌ LONG ĐỞM (GENTIANACEAE) Ở CAO BẰNG Chuyên ngành: Hoá hữu Mã số: 60.44.27 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC HOÁ HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS PHẠM VĂN THỈNH Thái Nguyên, năm 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page of 126 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng tôi, số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố công trình khác Tác giả Hoàng Thị Yên Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page of 126 LỜI CẢM ƠN Luận văn hoàn thành phòng thí nghiệm khoa Hóa học trường Đại học sư phạm Thái Nguyên Tôi xin chân thành bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc tới PGS.TS Phạm Văn Thỉnh - Người thầy tận tình hướng dẫn, động viên giúp đỡ suốt trình học tập, nghiên cứu thực luận văn Tôi xin chân trân trọng cảm ơn TS Nguyễn Quyết Tiến, TS Phạm Thị Hồng Minh, Th.S Vũ Anh Tuấn người thầy động viên giúp đỡ bước trình nghiên cứu thực luận văn Xin chân thành cảm ơn thầy cô khoa Hoá - Trường Đại học Sư phạm Thái Nguyên, phòng hoạt chất sinh học trường Đại học Y Thái Nguyên, thầy cô phòng HCSH -Viện KH CNVN, phòng nghiên cứu cấu trúc - Viện Hóa học tận tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để hoàn thành kế hoạch nghiên cứu Xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu, khoa Sau Đại học trưòng Đại học Sư phạm Thái Nguyên- Đại học Thái Nguyên tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình học tập làm luận văn Thái Nguyên, tháng năm 2010 Tác giả Hoàng Thị Yên Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page of 126 MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU CHƢƠNG I: TỔNG QUAN CÁC THỰC VẬT CHI CANSCORA VÀ THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CỦA NÓ 1.1 Khái quát vÒ thực vật chi Canscora 1.2 Đặc điểm sinh trưởng phát triển xuyên tâm thảo (Canscora lucidissima Hand- Mazz) 1.3 Những nghiên cứu hoá thực vật chi canscora 1.3.1 Các hợp chất có khung flavonoit 1.3.2 Các hợp chất khung steroit I.3.3 Các hợp chất có khung triterpenoit 1.3.4 Các hợp chất khung xanthon 1.3.5 Một số hợp chất khác 14 1.4 Nghiên cứu hoá thực vật loài Canscora lucidissima 15 1.5 Tình hình nghiên cứu ứng dụng thực vật chi Canscora 16 1.6 Những nghiên cứu ứng dụng xuyên tâm thảo nước 18 CHƢƠNG 2: PHẦN THỰC NGHIỆM 19 2.1 Đối tượng nghiên cứu 19 2.1.1.Thu mẫu cây, xác định tên khoa học phương pháp xử lý mẫu 19 2.1.2 Phương pháp phân lập hợp chất từ dịch chiết xuyên tâm thảo 20 2.1.3 Phương pháp khảo sát xác định cấu trúc hoá học hợp chất 20 2.2 Dụng cụ, hoá chất thiết bị nghiên cứu 21 2.2.1 Dụng cụ, hoá chất 21 2.2.2 Thiết bị nghiên cứu 22 2.3.1 Thu nhận dịch chiết 22 2.3.2 Khảo sát định tính dịch chiết 24 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page of 126 2.3.3 Thử hoạt tính sinh học 27 2.4 Phân lập tinh chế chất 29 2.4.1 Cặn dịch chiết n-hexan xuyên tâm thảo (C H) 30 2.4.2 Cặn chiết etylaxetat (CE) 32 CHƢƠNG 3: THẢO LUẬN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 34 3.1 Nguyên tắc chung 34 3.2 Phân tích định tính phát nhóm chất dịch chiết khác 34 3.3 Phân lập nhận dạng chất có dịch chiết khác xuyên tâm thảo 35 3.3.1 Ancol no mạch dài nonacosan-1-ol (CH.1) 35 3.3.2 β-Sitosterol hay stigmast-5-en-3-ol (C29H50O) (CH.2) 36 3.3.3 1-Hiđroxy-3,7,8-trimethoxy xanthon (CH.3) 38 3.3.4 1-Hiđroxy-3,5-đimethoxy xanthon (CH.4) 47 3.3.5 1,7-Đihiđroxy-3-methoxy xanthon (E1) 52 3.3.6 1,7-Đihiđroxy-3,6-đimethoxy xanthon (E2) 59 3.4 Thử hoạt tính sinh học 65 KẾT LUẬN 66 PHỤ LỤC 72 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page of 126 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT DÙNG TRONG LUẬN VĂN * Kí hiệu hoá học: Me: Metyl * Các phƣơng pháp sắc ký CC : Column Chromatography (Sắc ký cột) TLC : Thin-layer Chromatography (Sắc ký lớp mỏng) SKLM : Sắc ký lớp mỏng * Các phƣơng pháp phổ MS : Mass Spectrometry (Phổ khối lượng) FT-IR : Fourier Transform Infrared Spectroscopy (Phổ hồng ngoại biến đổi Fourie) NMR : Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân) H-NMR : Proton Magnetic Resonance Spectrometry (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton) 13 C-NMR : Phổ cộng hưởng từ hạt nhân cacbon-13 DEPT : Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer HSQC : Heteronuclear Single - Quantum Coherence HMBC : Heteronuclear multiple - Bond Correlation Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page of 126 DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 2.1 Khối lượng cặn chiết thu từ phân đoạn xuyên tâm thảo 24 Bảng 2.2 Kết định tính nhóm chất xuyên tâm thảo 26 Bảng 2.3 Kết thử hoạt tính sinh học dịch chiết thô từ xuyên tâm thảo 29 Bảng 3.1 Số liệu phổ 13C-NMR chất CH.2 phân lập từ xuyên tâm thảo phổ β-sitosterol [17] 37 Bảng 3.2 Số liệu phổ NMR tương tác xa CH.3 40 Bảng 3.3 Số liệu phổ NMR tương tác xa 1-hiđroxy-3,5đimethoxyxanthon (CH.4) 48 Bảng 3.4 Số liệu phổ NMR, DEPT tương tác xa 1,7-đihyđroxy-3methoxy xanthon (E1) 53 Bảng 3.5 Số liệu phổ NMR, DEPT tương tác xa 1,7-đihyđroxy3,6-đimethoxy xanthon 60 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page of 126 DANH MỤC HÌNH ẢNH Trang Hình 1.1 Hình ảnh xuyên tâm thảo (Canscora lucidissima) Hình 2.1: Đường kính vùng ức chế xung quanh giếng thạch (mm) theo phương pháp khuyếch tán giếng thạch 28 Hình 3.1 Phổ H-NMR 1-hiđroxy-3,7,8-trimethoxy xanthon 42 Hình 3.2 Phổ 3C-NMR 1-hiđroxy-3,7,8-trimethoxy xanthon 43 Hình 3.3 Phổ DEPT 1-hiđroxy-3,7,8-trimethoxyxanthon 44 Hình 3.4 Phổ HSQC 1-hidroxy-3,7,8-trimethoxyxanthon 45 Hình 3.5 Phổ HMBC 1-hidroxy-3,7,8-trimethoxyxanthon 46 Hình 3.6 Phổ H-NMR 1-hiđroxy-3,5-đimethoxy xanthon 49 Hình 3.7 Phổ 3C-NMR 1-hiđroxy-3,5-đimethoxy xanthon 50 Hình 3.8 Phổ DEPT 1-hiđroxy-3,5-đimethoxy xanthon 51 Hình 3.9 Phổ IR 1,7-Đihiđroxy-3-methoxy xanthon 54 Hình 3.10 Phổ H-NMR 1,7-đihiđroxy-3-methoxyxanthon 55 Hình 3.11 Phổ 13 C-NMR 1,7-đihiđroxy-3-methoxy xanthon 56 Hình 3.12 Phổ DEPT 1,7-đihiđroxy-3-methoxy xanthon 57 Hình 3.13 Phổ HMBC 1,7-đihiđroxy-3-methoxy xanthon 58 Hình 3.14 Phổ 1H-NMR 1,7-đihyđroxy-3,6-đimethoxy xanthon 61 Hình 3.15 Phổ 13C-NMR 1,7- đihiđroxy-3,6-đimethoxy xanthon 62 Hình 3.16 Phổ DEPT 1,7-đihyđroxy-3,6-đimethoxy xanthon 63 Hình 3.17 Phổ HMBC 1,7-đihyđroxy-3,6-đimethoxy xanthon 64 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 10 of 126 MỞ ĐẦU Việt Nam nằm vùng khí hậu nhiệt đới, gió mùa, mưa thuận, gió hoà nên hệ thực vật phong phú đa dạng với nhiều loài thực vật loại dược liệu quí Từ thời xa xưa, trước đời thuốc tây cha ông ta biết sử dụng nhiều loại cỏ tự nhiên làm thuốc chữa bệnh, nhiều loại bệnh tật chữa khỏi nhờ loại cỏ N hững thực vật đóng vai trò quan trọng đời sống hàng ngày người Từ nhiều kỷ hợp chất thiên nhiên phân lập từ cỏ ứng dụng rộng rãi nhiều ngành ngành công nghiệp, nông nghiệp, chúng dùng để sản xuất thuốc chữa bệnh, thuốc bảo vệ thực vật, làm nguyên liệu cho ngành công nghiệp thực phẩm mỹ phẩm Ngày công nghệ tổng hợp hoá dược phát triển mạnh mẽ, tạo biệt dược khác sử dụng công tác phòng, chữa bệnh Điều góp phần làm tăng tuổi thọ người, không mà việc sử dụng loại cỏ chữa bệnh giảm đi, mà nhu cầu sử dụng chúng theo cách cổ truyền hay từ hợp chất nguồn gốc tự nhiên có xu hướng ngày tăng chiếm vị trí quan trọng y học T rong chúng có chứa biệt dược khó tổng hợp, khoa học đại soi sáng Mặt khác việc dùng thuốc nam chữa bệnh không gây tác dụng phụ Việc sử dụng thảo dược dù loại dược liệu lại hỗn hợp nhiều hợp chất khác trường hợp hầu hết chưa xác định rõ hoạt chất chất Vì vậy, thuốc sử dụng thảo dược đối tượng nhà khoa học nghiên cứu cách đầy đủ chất hoạt chất có cỏ thiên nhiên Từ định hướng cho Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 10 of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 125 of 126 116 VI Phổ chất 1,7-đihiđroxy-3,6-đimethoxy xanthon (E2) Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 125 of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 126 of 126 117 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 126 of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 127 of 126 118 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 127 of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 128 of 126 119 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 128 of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 129 of 126 120 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 129 of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 130 of 126 121 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 130 of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 131 of 126 122 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 131 of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 132 of 126 123 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 132 of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 133 of 126 124 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 133 of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 134 of 126 125 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 134 of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 135 of 126 126 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 135 of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 136 of 126 127 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 136 of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 137 of 126 128 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 137 of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 138 of 126 129 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 138 of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 139 of 126 130 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 139 of 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn ... 126 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HOÀNG THỊ YÊN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CÂY XUYÊN TÂM THẢO (CANSCORA LUCIDISSIMA) HỌ LONG ĐỞM (GENTIANACEAE) Ở CAO BẰNG Chuyên ngành: Hoá hữu... truyền Việt Nam với đề tài Nghiên cứu thành phần hoá học xuyên tâm thảo (Canscora lucidissima) họ Long đởm (Gentianaceae) Cao Bằng Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page... xuyên tâm thảo, hiểu biết thành phần hoá học hoạt tính sinh học chúng chưa có công trình nghiên cứu thực vật chưa có tên sách thuốc Việt Nam Vì vậy, chọn xuyên tâm thảo làm đối tượng nghiên cứu,