iii ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - DƢƠNG QUỐC HUY NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CỦA CHẾ PHẨM E.LAC TRONG PHÒNG TIÊU CHẢY Ở LỢN SAU CAI SỮA VÀ ỨNG DỤNG PHÒNG, TRỊ Chuyên ngành: Thú Y Mã số: 60.62.50 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆPsss Thái Nguyên - 2012 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iii MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Chăn nuôi ngày có vị trí quan trọng cấu ngành nông nghiệp Sản phẩm ngành chăn nuôi nguồn thực phẩm thiếu nhu cầu đời sống người Hiện nay, nước ta chuyển đổi cấu sản xuất từ chăn nuôi nhỏ lẻ sang chăn nuôi trang trại nhằm tạo sản phẩm chăn nuôi có chất lượng cao, phục vụ nhu cầu tiêu thụ nước phần xuất Trong chăn nuôi lợn nay, hội chứng tiêu chảy lợn bệnh phổ biến nguyên nhân gây thiệt hại nặng nề kinh tế cho người chăn nuôi Bổ sung chế phẩm vi sinh vật cho lợn thời điểm sơ sinh, thời gian theo mẹ sau cai sữa nhằm thiết lập cân vi sinh vật đường ruột theo hướng có lợi giúp hạn chế tiêu chảy Khi lợn mắc tiêu chảy vi khuẩn, sử dụng kháng sinh cần thiết, nhiên kháng sinh có khả tiêu diệt vi khuẩn gây bệnh vi khuẩn có lợi đường tiêu hoá, làm cho lợn bị rối loạn tiêu hoá Việc nghiên cứu vi khuẩn Lactobacillus có khả đề kháng kháng sinh, bổ sung với kháng sinh trình điều trị giúp tăng hiệu điều trị bệnh Vi khuẩn Lactobacillus ức chế tiêu diệt vi khuẩn gây bệnh đường tiêu hoá cách: Sinh tổng hợp chất kháng khuẩn bacteriocin, hydrogen peroxide, axit hữu (acetic, lactic, propionic) làm giảm pH đường tiêu hoá; cạnh tranh vị trí gắn kết biểu mô ruột giảm lượng chất độc vi khuẩn gây bệnh; giúp tăng cường đáp ứng miễn dịch, miễn dịch tự nhiên, nhiều chủng Lactobacillus có khả hoạt hóa đại thực bào, kích thích hình thành bạch cầu trung tính, kích thích Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iii tăng khả tổng hợp IgA interferon gamma biểu mô ruột Vi khuẩn Lactobacillus sản sinh axit hữu có tác dụng hoạt hoá enzym pepsinogen tăng cường tiêu hoá protein; hỗ trợ hấp thu khoáng; kích thích ruột tiết secretin, tuỵ tiết nhiều bicarbonate axit mật giúp tiêu hoá lipit tốt Như vây đường tiêu hoá lợn hấp thu triệt để chất dinh dưỡng thức ăn, phân thải khô, thành khuôn, giảm mùi hôi chuồng nuôi, nâng cao hiệu chăn nuôi lợn Xuất phát từ thực tế trên, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu tác dụng chế phẩm E.Lac phòng tiêu chảy lợn sau cai sữa ứng dụng phòng, trị” Mục tiêu nghiên cứu Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn con, tác dụng vi khuẩn Lactobacillus phòng, trị hội chứng tiêu chảy lợn sau cai sữa Mục đích nghiên cứu Nghiên cứu vi khuẩn Lactobacillus từ có sở khoa học để phòng, trị tiêu chảy cho lợn Ý nghĩa đề tài - Ý nghĩa khoa học: Kết đề tài thông tin khoa học đặc điểm dịch tễ, tác dụng vi khuẩn Lactobacillus biện pháp phòng, trị hội chứng tiêu chảy lợn - Ý nghĩa thực tiễn: Đề xuất biện pháp phòng phác đồ điều trị tiêu chảy có hiệu cao, góp phần nâng cao suất chăn nuôi lợn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iii NỘI DUNG Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Những nghiên cứu hội chứng tiêu chảy Hội chứng tiêu chảy lợn phổ biến, gây thiệt hại lớn cho ngành chăn nuôi Vì có nhiều công trình nghiên cứu hội chứng tiêu chảy lợn, nghiên cứu bệnh lý tiêu chảy lợn biểu chủ yếu nước, chất điện giải cuối vật trúng độc, kiệt sức chết Theo Nguyễn Lương (1963) [26], Trịnh Văn Thịnh (1985) [56], Lê Minh Chí (1995) [1], lợn bị tiêu chảy thường nước, chất điện giải kiệt sức Những lợn khỏi bệnh thường còi cọc, thiếu máu, chậm lớn dẫn đến tỷ lệ nuôi sống thấp tỷ lệ chết cao Đó nguyên nhân làm cho hiệu chăn nuôi không cao Ở nước ta điều kiện khí hậu thời tiết thay đổi phức tạp, hội chứng tiêu chảy xảy quanh năm, đặc biệt thời tiết thay đổi đột ngột, lạnh, độ ẩm không khí cao Theo Đoàn Thị Băng Tâm (1987) [50], Sử An Ninh (1981) [31], Lê Văn Tạo (1993) [48], Phan Thanh Phượng (1995) [43], nước ta tiêu chảy gia súc xảy quanh năm, đặc biệt vào vụ đông xuân, thời tiết thay đổi đột ngột giai đoạn chuyển mùa 1.1.1 Nguyên nhân gây hội chứng tiêu chảy Đã có nhiều nghiên cứu hội chứng tiêu chảy lợn, tác giả dày công nghiên cứu, tìm hiểu nguyên nhân gây bệnh, kết cho thấy nguyên nhân phức tạp Tuy nhiên tiêu chảy tượng bệnh lý đường tiêu hóa có liên quan đến nhiều yếu tố, có yếu tố nguyên Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iii nhân nguyên phát, có yếu tố nguyên nhân thứ phát việc phân biệt rạch ròi nguyên nhân gây tiêu chảy vấn đề nan giải nhà khoa học quan tâm nghiên cứu để đề biện pháp phòng, trị Song cho dù nguyên nhân dẫn đến tiêu chảy hậu gây viêm nhiễm, tổn thương thực thể đường tiêu hoá cuối nhiễm trùng Qua nghiên cứu cho thấy, hội chứng tiêu chảy gia súc xảy nguyên nhân sau đây: 1.1.1.1 Nguyên nhân vi khuẩn Khi nghiên cứu nguyên nhân gây hội chứng tiêu chảy nhiều tác giả kết luận trường hợp bệnh có vai trò tác động vi khuẩn Trong đường ruột gia súc nói chung lợn nói riêng, có nhiều loài vi sinh vật sinh sống Vi sinh vật đường ruột tồn dạng hệ sinh thái Hệ sinh thái vi sinh vật đường ruột trạng thái cân động theo hướng có lợi cho thể vật chủ Hoạt động sinh lý gia súc diễn bình thường hệ sinh thái đường ruột trạng thái cân Sự cân biểu ổn định môi trường đường tiêu hóa vật quan hệ cân nhóm vi sinh vật với hệ vi sinh vật đường ruột Dưới tác động yếu tố gây bệnh, trạng thái cân bị phá vỡ dẫn đến loạn khuẩn hậu lợn bị tiêu chảy Theo Vũ Văn Ngữ (1979) [34], vi khuẩn đường ruột giữ vai trò “hàng rào vi khuẩn”, ngăn chặn vi khuẩn gây bệnh đường ruột xâm nhập cư trú ống tiêu hoá tác động đối kháng vi khuẩn Theo Nguyễn Lương (1963) [26], đường tiêu hoá lợn có nhiều vi sinh vật cư trú, chúng giữ chức định trình tiêu hóa có vai trò sinh lý quan trọng thể Ở trạng thái sinh lý bình Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iii thường thể hệ vi sinh vật đường tiêu hoá trạng thái cân cân cần thiết cho thể vật chủ Những thay đổi thức ăn, chế độ chăm sóc nuôi dưỡng, thời tiết khí hậu hay trạng thái thể tác động làm cho trạng thái cân hệ vi sinh vật đường ruột bị phá vỡ, vi sinh vật có hại gây bệnh tăng cường độc lực sinh tiêu chảy Theo Nguyễn Thị Khanh (1994) [15], loạn khuẩn thể biến động số lượng chất lượng nhóm vi khuẩn Có thể loài tăng số lượng tăng độc lực, có đột biến hay bội nhiễm Họ vi khuẩn đường ruột họ lớn, bao gồm trực khuẩn Gram âm, sống hiếu khí tuỳ tiện ống tiêu hoá người động vật Chúng gây bệnh không gây bệnh Chúng có chung đặc tính: Không có Oxydaza, sống hiếu khí kỵ khí tuỳ tiện, mọc môi trường dinh dưỡng thông thường, có khả khử Nitrat thành Nitrit, phân giải glucose hình thành nên axit có không bay Hệ vi khuẩn đường ruột bao gồm hai nhóm vi khuẩn lớn: - Nhóm vi khuẩn vãng lai: Chúng xâm nhập vào thể qua thức ăn, nước uống, bao gồm: Staphylococcus, Streptococcus, Bacillus subtilis Trong đường tiêu hoá lợn có thêm trực khuẩn yếm khí gây thối rữa: Clostridium perfringens, Bacillus faso bacterium, Plantvincentii, B fuso bacterium pubatun - Nhóm vi khuẩn định cư vĩnh viễn: Nhóm vi khuẩn thích ứng với môi trường đường tiêu hoá trở thành vi khuẩn bắt buộc, gồm: Escherichia coli, Salmonella, Shigella, Klebsiella, Proteus Họ vi khuẩn đường ruột có vai trò định trình gây hội chứng tiêu chảy gia súc nói chung lợn nói riêng Nhiều tác giả, Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iii nhiều công trình nghiên cứu khoa học đưa kết luận: Trong nguyên nhân gây tiêu chảy có vai trò quan trọng vi khuẩn E coli, Salmonella Clostridium - Vi khuẩn E coli: Nguyễn Vĩnh Phước (1976) [39], Nguyễn Như Thanh cs (2001) [51] cho biết, E coli thường có phần sau ruột, dày hay ruột non, thấy niêm mạc nhiều phận thể Trong đường ruột động vật, E coli chiếm khoảng 80% quần thể vi khuẩn hiếu khí Dựa vào tính chất huyết học, E coli chia thành serotype riêng, số có số type đóng vai trò quan trọng việc gây bệnh cho người gia súc Theo Nguyễn Thị Nội (1985) [36], bệnh phát ra, E coli có mặt khắp đường tiêu hoá Trong phủ tạng phân lập E coli, thường giai đoạn cuối bệnh Cũng vi khuẩn đường ruột, vi khuẩn E coli gây bệnh cho người động vật nhờ yếu tố bám dính độc tố ruột Hầu hết chủng E coli gây bệnh sản sinh nhiều kháng nguyên bám dính Các chủng không gây bệnh kháng nguyên bám dính Kháng nguyên bám dính cho phép vi khuẩn bám vào thụ thể đặc hiệu bề mặt tế bào biểu mô ruột lớp màng nhầy, chống lại đào thải tế bào ruột Kháng nguyên bám dính có cấu trúc protit Hiện nay, người ta phát đến 30 yếu tố khác nhau, hầu hết yếu tố bám dính đặc trưng cho serotyp E coli phân lập từ loài động vật khác nhau, trừ yếu tố F1 chung cho nhiều chủng E coli Sau bám dính vào niêm mạc ruột, vi khuẩn E coli sản sinh độc tố ruột, làm thay đổi nước chất điện giải ruột non dẫn tới tiêu chảy Độc tố ruột Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iii E coli gồm loại: Độc tố chịu nhiệt độc tố không chịu nhiệt Độc tố chịu nhiệt (ST) có loại: STa STb STa protein tính kháng nguyên, kích thích sản sinh cGMP mức cao tế bào, ngăn trở hệ thống chuyển Na+ Cl-, làm giảm khả hấp thụ chất điện giải nước ruột STb protein có tính kháng nguyên yếu Cơ chế gây tiêu chảy chưa rõ Độc tố không chịu nhiệt (LT): Là độc tố phức tạp, yếu tố quan trọng tác động gây tiêu chảy Bình thường vi khuẩn E coli cư trú ruột già phần cuối ruột non, gặp điều kiện thuận lợi nhân lên với số lượng lớn lớp sâu tế bào thành ruột, vào máu đến nội tạng Trong máu, nhờ cấu trúc kháng nguyên O khả dung huyết, vi khuẩn chống lại yếu tố phòng vệ không đặc hiệu khả thực bào Ở quan nội tạng, vi khuẩn tiếp tục phát triển cư trú chúng làm cho vật rơi vào trạng thái bệnh lý Đào Trọng Đạt cs (1995) [9] cho biết, sức đề kháng thể giảm sút, E coli thường xuyên cư trú đường ruột lợn thừa sinh sản nhanh gây nên cân hệ vi sinh vật đường ruột, gây tiêu chảy - Vi khuẩn Salmonella: Hiện người ta phân lập 2000 chủng Salmonella, thực tế có khoảng 5% số gây bệnh cho người động vật Salmonella thường gây bệnh cho lợn lứa tuổi 45 đến 90 ngày tuổi Lợn lứa tuổi khác mắc bệnh Bệnh xảy lợn sơ sinh Lợn chăn nuôi tập trung thường có tỷ lệ tiêu chảy cao chăn nuôi riêng lẻ Salmonella gây bệnh cho người gia súc độc tố yếu tố Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iii độc tố Các yếu tố độc tố như: Kháng nguyên O, kháng nguyên K, kháng nguyên H, yếu tố bám dính, khả xâm nhạp nhân lên tế bào, khả tổng hợp sát, khả kháng kháng sinh Các yếu tố gây bệnh độc tố chế tác động phương thức khác mà tạo điều kiện bất lợi cho thể vật chủ đồng thời tạo điều kiện thuận lợi cho vi khuẩn Salmonella gây bệnh cho thể vật chủ Các yếu tố đóng vai trò quan trọng trình sinh bệnh vi khuẩn đồng thời nghiên cứu yếu tố góp phần đưa phương pháp có hiệu việc phòng chống bệnh Salmonella gây ra, hội chứng tiêu chảy Độc tố vi khuẩn Salmonella gồm: Nội độc tố, ngoại độc tố độc tố tế bào Đây tác nhân gây bệnh tác động trực tiếp đến trình sinh bệnh vi khuẩn Salmonella - Vi khuẩn Clostridium perfringens: Đây nhóm vi khuẩn kị khí gây nhiễm độc ruột huyết, hoại thư sinh ngộ độc thức ăn Clostridium perfringens có nhiều chủng sản sinh nhiều loại độc tố khác Theo kết nghiên cứu, Clostridium perfringens sản sinh 12 loại độc tố gồm: Alpha - toxin, beta - toxin, gamma - toxin, delta - toxin, epsilon - toxin, eta - toxin, theta - toxin, iota - toxin, kappa - toxin, lamda - toxin, mu - toxin, nu - toxin Trong độc tố đặc biệt quan trọng gây tình trạng bệnh lý đặc trưng gây chết là: Alpha - toxin, beta - toxin, epsilon - toxin, eta - toxin Theo Phan Thanh Phượng cs (1996) [44], xác định vai trò Clostridium perfringens hội chứng tiêu chảy lợn Theo tác giả vi khuẩn Clostridium perfringens tác nhân quan trọng hội chứng tiêu chảy lợn lứa tuổi từ 1- 60 ngày tuổi từ 60 - 120 ngày Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 10 iii tuổi Ở lợn theo mẹ tỷ lệ mắc lên tới 100% tỷ lệ chết 60% Lượng vi khuẩn Clostridium perfringens chứa gram phân lợn bị tiêu chảy lứa tuổi - 60 ngày tuổi dao động từ 106 - 1010 CFU, đặc biệt có số mẫu lượng vi khuẩn cao (108 - 1010) chiếm 37 - 45% Ở lợn từ 60 - 120 ngày tuổi bị tiêu chảy số lượng Clostridium perfringens giảm 10 lần so với lợn bị tiêu chảy - 60 ngày tuổi, nhiên số lượng vi khuẩn có gram phân mức 108, 109 chiếm tỷ lệ cao 27,14 - 35,71% Tác giả Nguyễn Bá Hiên ( 2001) [12], nghiên cứu lợn bị tiêu chảy có kết luận: Lợn bị tiêu chảy có số lượng tỷ lệ xuất Clostridium perfringens thể bội nhiễm rõ Mức độ bội nhiễm rõ lợn giai đoạn từ - 60 ngày tuổi cụ thể: Ở lợn từ - 21 ngày tuổi tổng số vi khuẩn gram mẫu lợn bị tiêu chảy tăng gấp 10,48 lần so với lợn khoẻ; lợn từ 22 - 60 ngày tuổi tổng số vi khuẩn gram mẫu lợn bị tiêu chảy tăng gấp 10,36 lần so với lợn khoẻ Đoàn Thị Kim Dung (2004) [4], nghiên cứu biến động số loại số lượng vi khuẩn hiếu khí phân lợn tiêu chảy kết luận: Bình thường lợn giai đoạn đến 21 ngày tuổi phân có loại vi khuẩn lợn 22 đến 60 ngày tuổi loại Khi bị tiêu chảy, lợn đến 21 ngày tuổi số lượng vi khuẩn 261,25 x 106 vi khuẩn/1 gram phân, lợn 22 đến 60 ngày tuổi 237,99 x 106 vi khuẩn /1 gram phân Nguyễn Bá Hiên (2001) [12] cho biết, đường tiêu hoá gia súc khoẻ mạnh gia súc tiêu chảy thường xuyên có mặt loại vi khuẩn hiếu khí Salmonella, E.coli, Klebsiella, Staphylococcus sp, Streptococcus sp, Bacillus subtilis loài vi khuẩn yếm khí Clostridium perfringens, Peptococcus sp Bacteroides fragilis Theo Nguyễn Như Thanh cs (2001) [51], bệnh phân trắng lợn con, Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ... cứu đề tài: Nghiên cứu tác dụng chế phẩm E.Lac phòng tiêu chảy lợn sau cai sữa ứng dụng phòng, trị Mục tiêu nghiên cứu Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn con, tác dụng vi khuẩn... vi khuẩn Lactobacillus phòng, trị hội chứng tiêu chảy lợn sau cai sữa Mục đích nghiên cứu Nghiên cứu vi khuẩn Lactobacillus từ có sở khoa học để phòng, trị tiêu chảy cho lợn Ý nghĩa đề tài - Ý... khoa học đặc điểm dịch tễ, tác dụng vi khuẩn Lactobacillus biện pháp phòng, trị hội chứng tiêu chảy lợn - Ý nghĩa thực tiễn: Đề xuất biện pháp phòng phác đồ điều trị tiêu chảy có hiệu cao, góp phần