Bộ giáo dục đào tạo Trờng đại học nông nghiƯp hµ néi - - TRầN văn cờng Phân lập, xác định đăc tính sinh học E coli, Salmonella gây tiêu chảy cho lợn sau cai sữa nuôi tỉnh Lào Cai đề xuất biện pháp phòng trị Luận văn thạc sĩ nông nghiệp Chuyên ngành: Thú y M· sè: 60.62.50 Ng−êi h−íng dÉn khoa häc: PGS.Ts cï hữu phú Hà nội - 2009 Lời cam đoan - Tôi xin cam đoan rằng, số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực cha đợc sử dụng để bảo vệ học vị - Tôi xin cam đoan rằng, giúp đỡ cho việc thực luận văn đ đợc cảm ơn thông tin trích dẫn luận văn đợc rõ nguồn gốc Tác giả luận văn Trần Văn Cờng Trng i hc Nụng nghip H Ni Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………i Lêi cảm ơn Tôi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ thầy cô giáo Khoa Thú y Viện Sau Đại học Trờng Đại học Nông Nghiệp Hà Nội, thầy cô giáo đ giảng dạy suốt trình học thực tập Đặc biệt, xin bày tỏ lòng biết ơn PGS.TS Cù Hữu Phú, TS Nguyễn Hữu Nam đ tận tình hớng dẫn, giúp đỡ hoàn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn L nh đạo Chi cục Kiểm dịch động vật vùng Lào Cai, gia đình, anh em, bạn bè đồng nghiệp đ tạo điều kiện động viên giúp đỡ hoàn thành tốt chơng trình học tập Hà Nội, ngày 19 tháng 09 năm 2009 Tác giả luận văn Trần Văn Cờng Trng i hc Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nơng nghiệp ………………………ii Mơc lơc Lêi cam ®oan 79 Lời cảm ơn 79 Mục lục 79 Danh mục chữ viết tắt 79 Danh mục bảng 79 Danh mục hình 79 Mở đầu 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu nghiên cøu 1.3 ý nghÜa khoa häc vµ thùc tiƠn Tổng quan tài liệu 2.1 Khái niệm hội chứng tiêu chảy 2.2 Một số nguyên nhân gây tiêu chảy lợn 2.3 Một số nghiên cứu vi khuẩn E coli gây bệnh đờng tiêu hoá 2.4 Một số nghiên cứu vi khuẩn Salmonella gây bệnh đờng tiêu hoá 19 2.5 Tình hình dịch bệnh đàn lợn nuôi địa bàn tỉnh Lo Cai 24 Đối tợng, nguyên liệu, nội dung phơng pháp nghiên cứu 26 3.1 Đối tợng, địa điểm thời gian nghiên cứu 26 3.2 Nội dung nghiên cứu 26 3.2.1 Nghiên cứu xác định vai trò vi khuẩn E coli Salmonella hội chứng tiêu chảy lợn sau cai sữa 26 3.2.2 Thử nghiệm phác đồ điều trị tiêu chảy cho lợn sau cai sữa 27 3.3 27 Nguyên liƯu dïng nghiªn cøu 3.3.1 MÉu bƯnh phÈm 27 3.3.2 Các loại môi trờng, hoá chất 27 3.3.3 Động vËt thÝ nghiƯm 27 Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp iii 3.4 Phơng pháp nghiên cứu 27 Kết nghiên cứu thảo luận 38 4.1 Nghiên cứu xác định vai trò vi khuẩn E coli Salmonella hội chứng tiêu chảy lợn sau cai sữa 38 4.1.1 Kết phân lập vi khuẩn từ mẫu bệnh phẩm phân lợn mắc hội chứng tiêu chảy 38 4.1.2 Kết xác định số lợng vi khuẩn E coli Salmonella sp có phân lợn tiêu chảy lợn bình thờng 43 4.1.3 Kết giám định đặc tính sinh hoá chủng vi khuẩn phân lập đợc 4.1.4 Kết xác định serotyp chủng vi khuẩn phân lập đợc 45 48 4.1.5 Kết xác định yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn E coli phân lập đợc 52 4.1.6 Kết kiểm tra độc lực cđa mét sè chđng vi khn E coli vµ Salmonella sp phân lập đợc động vật thí nghiệm 55 4.1.7 Kết xác định khả mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E coli Salmonella phân lập đợc 58 4.2 Kết thử nghiệm phác đồ điều trị tiêu chảy cho lợn 64 Kết luận đề nghị 67 5.1 Kết luận 67 5.2 Đề nghị 68 Tài liệu tham khảo Trng i học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa hc Nụng nghip iv 69 DANH mục chữ viÕt t¾t AEEC Adherence Enteropathogenic E coli BEt Ethidium bromide BHI Brain Heart Infusion C perfringens Clostridium perfringens DNA Deoxyribo Nucleic Acid DPF Delayed Permeability Factor E coli Escherichia coli EMB Eosin Methylen-Bleu EPEC Enteropathogenic E coli ETEC Enterotoxigenic Escherichia coli F Fimbriae LPS Lipopolysaccharid LT Heat-labile toxin M Mucous NCCLS National Committee for Clinical Laboratory Standards OMP Outer membrane protein PCR Polymerase Chain Reaction R Rough RPF Rapid Permeability Factor S Smooth SS Salmonella – Shigella ST Heat-stable toxin TAE Tris - Acetic - EDTA TGE Transmissible Gastro Enteritis (Bệnh viêm dày ruột truyền nhiễm) VTEC Verotoxigenic Escherichia coli VT2e Verotoxin 2e Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp v Danh mục bảng STT Tên bảng Trang 4.1 Kết phân lập vi khuẩn từ bệnh phẩm phân lợn tiêu chảy 4.2 Kết xác định số lợng vi khuẩn E coli Salmonella sp có 1g phân lợn tiêu chảy lợn bình thờng 4.3 54 Kết kiểm tra độc lực số chủng vi khuẩn E coli chuột bạch 4.8 52 Tû lƯ c¸c chđng vi khn E coli mang gen quy định sinh tổng hợp yếu tố gây bệnh( n=69) 4.7 48 Kết xác định serotyp chủng vi khuẩn Salmonella sp phân lập đợc 4.6 46 Kết xác định serotyp kháng nguyên O chủng vi khuẩn E coli phân lập đợc 4.5 43 Kết giám định đặc tính sinh hoá chủng vi khuẩn E coli Salmonella sp phân lập đợc 4.4 39 56 Kết kiểm tra ®éc lùc cña mét sè chñng vi khuÈn Salmonella sp chuột bạch 57 4.9 a Kết xác định tính mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E coli phân lập đợc 59 4.9 b Kết xác định tính mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn Salmonella phân lập đợc 61 4.10 Kết điều trị thực nghiệm số phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy lợn sau cai sữa Trng ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nơng nghiệp ………………………vi 66 Danh mơc c¸c hình STT Tên hình Trang 3.1 Quy trình phân lập vi khuẩn đờng ruột 29 4.1 Đàn lợn sau cai sữa bị tiêu chảy 41 4.2 Mổ khám kiểm tra bệnh tích lợn sau cai sũa bị tiêu chảy 41 4.3 Lợn bị mắc bệnh tiêu chảy E coli gây 42 4.4 Mổ khám lấy bệnh phẩm lợn mắc bệnh tiêu chảy 42 4.5 Hình tthái vi khn E coli d−íi kÝnh hiĨn vi (x 1000 lần) 47 4.6 Kết thử phản ứng sinh Indol 47 4.7 Kết xác định serotyp kháng nguyên O chủng vi khuẩn E coli phân lập đợc 4.8 Tû lƯ c¸c chđng vi khn E coli mang gen quy định sinh tổng hợp yếu tố gây bệnh 4.9 50 55 Kết xác định tính mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E coli phân lập đợc 60 4.10 Kết xác định tính mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn Salmonella phân lập đợc 62 4.11 Kết thử kháng sinh đồ với vi khuẩn phân lập 63 4.12 Kết điều trị thực nghiệm 65 Trng i học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa hc Nụng nghip vii Mở đầu 1.1 Tính cấp thiết đề tài Nền kinh tế phát triển, với hội nhập kinh tế toàn cầu, mức sống ngời dân đợc nâng cao, vai trò ngành chăn nuôi trở lên quan trọng, nhiệm vụ công tác chăn nuôi thú y nặng nề hơn; bên cạnh việc tăng nhanh số lợng, phải trọng việc nâng cao chất lợng đàn gia súc, gia cầm Mục tiêu chủ yếu kế hoạch phát triển chăn nuôi Việt Nam đến năm 2010 cần đạt: đàn lợn 32,8 triệu con, sản lợng thịt lợn 3,2 triệu tấn; đàn bò thịt 7,1 triệu con, sản lợng thịt bò 210 ngàn tấn; đàn bò sữa 200 ngàn con, sản lợng sữa 350 ngàn tấn; đàn gia cầm 283 triệu con, sản lợng thịt 1.427 ngàn 7,95 tỷ trứng gà, vịt (Cục chăn nuôi, 2006 ) Để đạt đợc mục tiêu có tính chiến lợc đó, đơng nhiên phải đầu t cho công tác giống, quan tâm đến vấn đề thức ăn, chơng trình quản lý; đồng thời phải trọng công tác thú y, tăng cờng áp dơng c¸c biƯn ph¸p khoa häc kü tht chÈn đoán làm sở cho công tác phòng, chống dịch bệnh vật nuôi có hiệu Hội chứng tiêu chảy với đặc điểm dịch tễ phức tạp gây nên thiệt hại to lớn, làm giảm suất, chất lợng đàn vật nuôi nói chung chăn nuôi lợn nói riêng Bệnh tiêu chảy xảy giống lợn lứa tuổi: lợn nái sinh sản, lợn theo mẹ, lợn sau cai sữa BƯnh th−êng xt hiƯn thêi tiÕt thay ®ỉi ®ét ngột, thức ăn phẩm chất, vệ sinh chăm sóc không đảm bảo Hội chứng tiêu chảy lợn thờng xảy quanh năm, nhng nhiều vào tháng cã khÝ hËu Èm −ít, thay ®ỉi ®ét ngét sau đợt ma b o Trên giới Việt Nam đ có số công trình nghiên cứu bệnh tiêu chảy lợn, vi khuẩn E coli, Salmonella số bệnh chúng gây cho vËt Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nơng nghiệp ………………………1 nu«i; nh−ng nay, Lào Cai cha có nghiên cứu hội chứng tiêu chảy lợn vi khuẩn E coli Salmonella lợn sau cai sữa bị tiêu chảy Nhiều kết công trình nghiên cứu nớc đ kết luận E coli Salmonella bệnh chung nhiều loại vật nuôi gây bệnh cho ngời NhÊt lµ hiƯn nay, n−íc ta gia nhËp Tỉ chức Thơng mại Thế giới (WTO) vấn đề an toàn vệ sinh thực phẩm có lợn thịt lợn bệnh yêu cầu cấp thiết Việc nghiên cứu vi khuẩn E coli Salmonella, tỷ lệ nhiễm, vai trò gây bệnh chúng, lợn từ sau cai sữa Lào Cai việc làm cần thiết, để từ có sở xây dựng biện pháp phòng, chống bệnh đạt hiệu cao, góp phần thúc đẩy chăn nuôi gia súc, gia cầm nói chung, chăn nuôi lợn nói riêng phát triển bền vững, tạo sản phẩm an toàn vệ sinh thực phẩm, có sức cạnh tranh cao thị trờng Sau nhiều năm công tác Chi cục Kiểm dịch động vËt vïng Lµo Cai vµ qua thùc tÕ theo dâi tình hình dịch bệnh đàn lợn với Chi cục Thú y Lào Cai, nhận thấy hội chứng tiêu chảy lợn sau cai sữa xảy phổ biến, gây nhiều thiệt hại cho ngời chăn nuôi Xuất phát từ yêu cầu cấp thiết thực tiễn sản xuất, đ tiến hành đề tài: "Phân lập, xác định đăc tính sinh học E coli, Salmonella gây tiêu chảy cho lợn sau cai sữa nuôi tỉnh Lào Cai đề xuất biện pháp phòng trị" 1.2 Mục tiêu nghiên cứu - Phân lập giám định vi khuẩn E coli Salmonella từ mẫu bệnh phẩm phân lợn tiêu chảy - Xác định đặc tính sinh học chủng vi khuẩn phân lập đợc - Xác định vai trò gây bệnh vi khuẩn E coli Salmonella hội chứng tiêu chảy lợn - Xây dựng đề xuất phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy lợn sau cai sữa đạt hiệu Trng i học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nơng nghiệp ………………………2 l−íi néi m«, kÝch thÝch đông máu, điều hoà nớc thể, tăng cờng chức gan, kích thích trình trao đổi chất, hấp thụ vitamin, chất khoáng (Nguyễn Hữu Vũ cs, 2000 [64]), chống nhiễm độc, tự nhiễm độc (Nguyễn Phớc Tơng, 1994 [62]) Kết điều trị thùc nghiÖm 100 90 80.6 80 70 63.4 Tû lÖ (%) 60 51.3 I 50 40 II 30 III 20 10 Phác đồ Hình 4.12 Kết điều trị thùc nghiƯm Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nơng nghiệp ………………………65 B¶ng 4.10 Kết điều trị thực nghiệm số phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy lợn sau cai sữa Phác đồ điều trị I Loại thuốc Gentamicin 80mg 4-6 mg/kg TT; tiêm bắp, lần/ngày Điện giải Pha nớc uống, 10g/con/ngày ADE B-complex 1-2 ml/con; tiêm bắp, ngày/ lần Glucose 30% Plus vitamin C II Liều lợng cách dùng Số lợn Thời gian Kết điều trị đợc điều điều trị Số lợn khỏi Tỷ lệ trị (con) (ngày) bệnh (con) khỏi (%) 93 75 80.6 52 33 63.4 37 19 51.3 1ml/ 6-8 kgTT; phúc xoang uống, lần/ngày Ampicillin 1g 10 15 mg/kgTT, tiêm bắp, lần/ngày Điện giải Pha nớc uống, 10 g/con/ngày ADE B-complex 1-2 ml/con; tiêm bắp, ngày/ lần Glucose 30% Plus 1ml/ 6-8 kgTT; tiêm phúc xoang uống, lần/ngày vitamin C III Enrofloxacin (Baytril) 1ml/10 kg TT; tiêm bắp, lần/ngày Điện giải Pha nớc uống, 10 g/con/ngày ADE B-complex 1-2 ml/con; tiêm bắp, ngày/ lần Glucose 30% Plus 1ml/ 6-8 kgTT; tiêm phúc xoang uống, lần/ngày vitamin C Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………66 Kết luận đề nghị 5.1 Kết luận Vi khuẩn E coli Salmonella đ phân lập đợc từ mẫu bệnh phẩm phân lợn sau cai sữa bị tiêu chảy nuôi huyện khác tỉnh Lào Cai Trong đó: - Tỷ lệ phân lập đợc vi khuẩn E coli 92% Salmonella sp 28,8% - Số lợng vi khuẩn E coli 1g chất chứa lợn bị mắc tiêu chảy đ tăng lên cao, cao gấp khoảng 25 lần so với lợn khoẻ (132 x 106 VK/g so víi 5,18 x 106 VK/g) - Sè l−ỵng vi khn Salmonella 1g chÊt chøa cđa lỵn bị mắc tiêu chảy là: 5,20 x 106 vk/g Các chủng vi khuẩn E coli Salmonella sp phân lập đợc mang đầy đủ đặc tính sinh hóa điển hình nh tài liệu nớc đ mô tả Các chủng E coli gây bệnh tiêu chảy cho lợn sau cai sữa tỉnh Lào Cai thuộc serotyp là: O138, O139, O141 O149, ®ã O141 chiÕm tû lƯ cao nhÊt (53,05%) vµ thÊp nhÊt lµ O138 (4,35%) - Trong sè 69 chủng vi khuẩn E coli đợc kiểm tra yếu tố gây bệnh: có 34,8% chủng mang F18; 13,1% chủng mang F4; loại độc tố phân bố với tỷ lệ nh sau: độc tố VT2e chiÕm tû lƯ cao nhÊt (78,3%), tiÕp theo lµ ®éc tè LT (69,6%) vµ STa (65,2%), thÊp nhÊt lµ STb (21,7%) Trong sè 36 chđng Salmonella sp ph©n lập đợc, có 22 chủng đợc xác định S typhimurium 14 chủng S Enteretidis Độc lực chủng vi khuẩn E coli Salmonella chuột bạch mạnh Có 60.00% chủng E coli g©y chÕt 100% chuét thêi 67 gian tõ 12 - 36 100% số chủng Salmonella gây chết 100% chuột vòng 12-24 Các chủng vi khuẩn E coli Salmonella sp phân lập đợc mẫn cảm với số loại kháng sinh nh Ceftiofur, Gentamicin, Amikacin, Apramycin kháng mạnh với Tetracyclin Sulfamethoxazole/Trimethoprim Trong phác đồ điều trị đ thử nghiệm, phác đồ I sử dụng kháng sinh Gentamicin có hiệu điều trị bệnh tiêu chảy cao Có thể sử dụng rộng r i phác đồ I điều trị bệnh tiêu chảy lợn sau cai sữa tỉnh Lào cai 5.2 Đề nghị 2.1 Tiếp tục tiến hành nghiên cứu đầy đủ yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn Salmonella sp phân lập đợc, nh vai trò số vi khuẩn khác gây bệnh tiêu chảy lợn sau cai sữa nuôi Lào Cai, nhằm lựa chọn đợc chủng vi khuẩn phù hợp để chế vacxin phòng bệnh 2.2 Để chăn nuôi lợn có hiệu hạn chế đợc dịch bệnh, có bệnh tiêu chảy, cần khuyến khích đầu t vào chăn nuôi theo phơng thức công nghiệp, xây dựng trại chăn nuôi đảm bảo yêu cầu kỹ thuật vệ sinh an toàn dịch bệnh 68 Tài liệu tham khảo I Tiếng việt Archie H (2000) Sổ tay dịch bệnh động vật (Phạm Gia Ninh Nguyễn Đức Tâm dịch), NXB Bản đồ, Hà Nội, tr 53, 207 214 Chi cục thú y tỉnh Lào Cai (2006) Các báo cáo dịch bệnh năm ( 2005 - 2007) Lê Minh Chí (1995) Bệnh tiêu chảy gia súc Hội thảo khoa học, Bộ Nông nghiệp Công nghiệp thùc phÈm, Hµ Néi, tr 20 – 22 Cơc thống kê tỉnh Lào Cai (2008) Báo cáo thống kê tổng đàn gia súc, gia cầm tính đến 1/8/2008 Đỗ Trung Cứ, Trần Thị Hạnh, Nguyễn Quang Tuyên (2001) Kết phân lập xác định số yếu tè g©y bƯnh cđa vi khn Salmonella spp g©y bƯnh phó thơng hàn lợn số tỉnh miền núi phía bắc Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú Y tËp VIII (sè 3/2001), tr 10 – 17 Cï Xuân Dần, Nguyễn Xuân Tịnh, Tiết Hồng Ngân, Nguyễn Bá Mïi, Lª Méng Loan (1996) Sinh lý häc gia sóc NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 122141 Đoàn Kim Dung (2003) Sù biÕn ®éng mét sè vi khuÈn hiÕu khí đờng ruột, vai trò E coli hội chứng tiêu chảy lợn phác đồ điều trị Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Viện Thú Y quốc gia, Hà Nội Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Văn Đức, Đặng Hồng Mai, Nguyễn Vĩnh Phớc (1976) Một số phơng pháp nghiên cứu Vi sinh vật, tập vµ NXB Khoa häc kü thuËt, Hµ Néi Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phợng (1985) Bệnh đờng tiêu hoá lợn NXB Nông nghiệp, Hà Nội 69 10 Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phợng, Lê Ngọc Mỹ, Huỳnh Văn Kháng (1996) Bệnh lợn nái lợn NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 57 147 11 Bùi Xuân Đồng (2002) Bệnh phù đầu Escherichia coli gây lợn Hải Phòng biện pháp phòng chống Khoa học kỹ thuật thú y, tập IX, tr 98 99 12 Trần Thị Hạnh, Đặng Xuân Bình, Lu Quỳng Hơng (2004) Xác định vai trò vi khuẩn E coli Cl.perfringens bệnh tiêu chảy lợn giai đoạn theo mẹ, chế tạo sinh phẩm phòng bệnh Viện Thú Y 35 năm xây dựng phát triển (1969 2004), NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 393 405 13 Phạm Khắc Hiếu, Trần Thị Lộc (1998) Stress đời sống ngời vật nuôi NXB Nông nghiệp, Hà Nội 14 Phạm Khắc Hiếu Bùi Thị Tho (1999) Một số kết nghiên cứu tính kháng thuốc vi khuẩn gây bệnh thú y Kết nghiên cứu KHKT khoa CNTY (1996-1998), NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr.134 138 15 Bïi Q Huy (2003) Sỉ tay phßng chèng bệnh từ động vật lây sang ngời- Bệnh E coli NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr.30-34 16 Vũ Khắc Hùng, M pilipcinec (2004) Nghiên cứu so sánh yếu tố độc lực chủng E coli phân lập từ lợn bị tiêu chảy cộng hòa Slovakia Báo cáo khoa học chăn nuôi Thú y, Hà Nội, tr 45 46 17 Lý Thị Liên Khai (2001) Phân lập, xác định độc tố ruột chủng E coli gây bệnh tiêu chảy cho heo Khoa häc kü thuËt Thó y tËp 8, tr.13 – 18 18 Ngun ThÞ Kim Lan (2004) Thư nghiƯm phòng trị bệnh coli dung huyết cho lợn Thái Nguyên Bắc Giang Khoa học kỹ thuật Thó y tËp XII (sè 3), tr 35 – 39 70 19 Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Thị Minh, Lê Thị Ngân (2006a) Vai trò ký sinh trùng đờng tiêu hoá hội chứng tiêu chảy lợn sau cai sữa Thái Nguyên.Khoa học kỹ thuật Thú y tËp XIII (sè 3/2006), tr 36 – 40 20 NguyÔn Thị Kim Lan, Nguyễn Thị Minh, Lê Thị Ngân (2006b) Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn Thái Nguyên Khoa học kỹ thuật Thú y, TËp XIII (sè 4/2006), tr 92 – 96 21 Phạm Sỹ Lăng, Phan Địch Lân, Trơng Văn Dung (1997) Bệnh phổ biến lợn biện pháp phòng trị NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr.193 195 22 Hồ Văn Nam, Nguyễn Thị Đào Nguyên, Trơng Quang, Phùng Quốc Chớng, Chu Đức Thắng, Phạm Ngọc Thạch (1997) Bệnh viêm ruột ỉa chảy lợn Khoa học kỹ thuật Thú y, (số 1/1997), tr.15 21 23 Hoàng Thuỷ Nguyên, Đặng Đức Trạch, Ninh Đức Dự, Nguyễn Hồng Việt, Nguyễn Thị Kê, Lê Thị Oanh (1974) Vi sinh vật Y học, tập NXB Y học, Hà Nội 24 Vũ Văn Ngũ cs (1975) Loạn khuẩn đờng ruột tác dụng điều trị Colisubtil NXB Y học, Hà Nội 25 Nguyễn Thị Ngữ (2005) Nghiên cứu tình hình hội chứng tiêu chảy lợn huyện Chơng Mỹ - Hà Tây, xác định số yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli Salmonella, biện pháp phòng trị Luận văn Thạc sỹ Nông nghiệp, Hà Nội 26 Nguyễn Khả Ngự (2000) Xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli bệnh phù đầu lợn đông sông Cửu Long, chế vacxin phòng bệnh Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Viện Thú y, Hà Nội 71 27 Nguyễn Ngọc Nhiên, Cù Hữu Phú, Khơng Bích Ngọc, Phạm Bảo Ngọc, Đỗ Ngọc Thuý, Đào Thị Hảo (2000) Kết phân lập xác định số đặc tính sinh hoá vi khuẩn gây bệnh viêm vú bò sữa biện pháp phòng trị Kết nghiên cứu KHKT Thú y 1996 2000, Hà Nội, tr.161 170 28 Niconxki.V.V (1986) (Phạm Quân, Nguyễn Đình Trí dịch) Bệnh lợn NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr.35-51 29 Nguyễn Thị Nội (1985) Tìm hiểu vai trò E coli bệnh phân trắng lợn vắc xin dự phòng Luận án PTS khoa học, Hà Nội 30 Nguyễn Thị Nội, Nguyễn Ngọc Nhiên, Cù Hữu Phú, Nguyễn Thị Sở, Trần Thị Thu Hà (1989) Kết điều tra tình hình nhiễm vi khuẩn đờng ruột số sở chăn nuôi lợn Kết nghiên cứu KHKT thú y 1985 1989, Phần 2, Bệnh vi khuẩn, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr.50-63 31 Nguyễn Thị Nội, Nguyễn Ngọc Nhiên, Cù Hữu Phú, Nguyễn Thị Sở, Trần Thị Thu Hà (1989) Nghiên cứu vaccine đa giá Salco phòng bệnh ỉa chảy cho lợn KÕt qđa nghiªn cøu KHKT Thó y 1985 –1989, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr.54 58 32 Nguyễn Thị Oanh, Phùng Quốc Chớng (2003) Tình hình nhiễm Salmonella số đặc tính gây bệnh Salmonella phân lập đợc bò Đắc Lắc Khoa học kỹ thuật Thó Y tËp X, (sè 2/2003), tr 26 – 32 33 Nguyễn Nh Pho (2003) Bệnh tiêu chảy heo NXB Nông nghiệp, TP.Hồ Chí Minh 34 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Vũ Bình Minh Đỗ Ngọc Thuý (1999) Kết phân lập vi khuẩn E coli Salmonella lợn mắc tiêu chảy, xác định số đặc tính sinh vật hoá học chủng vi khuẩn phân lập đợc biện pháp phòng trị Tạp chí Khoa häc kü thuËt Thó Y, tr.47 – 51 72 35 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Vũ Bình Minh, Đỗ Ngọc Thuý (2000) Kết phân lập vi khuẩn E coli Salmomella lợn mắc bệnh tiêu chảy, xác định số đặc tính sinh hoá học chủng vi khuẩn phân lập đợc biện pháp phòng trị Kết nghiên cứu KHKT Thú Y 1996 2000, NXB Nông nghiệp, Hà Nội 36 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Đỗ Ngọc Thuý, Âu Xuân Tuấn, Nguyễn Xuân Huyên, Văn Thị Hờng, Đào Thị Hảo (2004) Lựa chọn chủng E coli để chế tạo Autovacxin phòng bệnh tiêu chảy cho lợn theo mẹ Viện Thú Y 35 năm xây dựng phát triển (1969 2004) NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr.110 111 37 Nguyễn VÜnh Ph−íc (1974) Vi sinh vËt Thó y, tËp vµ NXB Khoa häc kü thuËt, Hµ Néi 38 Ngun VÜnh Ph−íc (1978) BƯnh trun nhiƠm gia sóc NXB Nông nghiệp, Hà Nội 39 Trơng Quang (2005) Kết nghiên cứu vai trò gây bệnh E coli hội chứng tiêu chảy lợn 60 ngày ti Khoa häc kü tht Thó Y, tËp XII, (sè 1/2005), tr.27 32 40 Trơng Quang, Phạm Hồng Ngân, Trơng Hà Thái (2006) Kết nghiên cứu vai trò gây bệnh E coli bệnh tiêu chảy bê, nghÐ Khoa häc kü thuËt Thó y, TËp XIII, (sè 4/2006), tr.11 -17 41 Hồ Soái, Đinh Thị Bích Lân (2005) Xác định nguyên nhân chủ yếu gây bệnh tiêu chảy lợn xí nghiệp lợn giống Triệu Hải Quảng Trị thử nghiệm phác đồ điều trÞ Khoa häc kü tht Thó y, tr.26 – 34 42 Nguyễn Văn Sửu, Nguyễn Quang Tuyên, Trần Thị Hạnh (2005) Kết xác định số đặc tính sinh hoá yếu tố gây bệnh vi khuẩn Salmonella spp phân lập đợc từ bê, nghé bị tiêu chảy số tỉnh miền núi phía Bắc Khoa học kü thuËt Thó Y tËp XII, (Sè 1/2005), tr.33 – 40 73 43 LêThị Tài (1997) ô nhiễm thực phẩm với sức khoẻ ngời gia súc Những thành tựu nghiên cứu phòng chống bệnh vật nuôi Viện thú y quốc gia, tr.65-66 44 Lê Văn Tạo cs (1993) Nghiên cứu chế tạo vắc xin E coli uống phòng bệnh phân trắng lợn Tạp chí Nông nghiệp công nghiệp thực phẩm, 9/1993, Hà Nội , tr.324 325 45 Lê Văn Tạo cs (1996) Xác định yếu tố gây bệnh di truyền b»ng Plasmid vi khuÈn E coli ph©n lËp tõ lợn bị bệnh phân trắng chọn chủng sản xuất vắc xin Báo cáo Hội thảo REI, Hà Nội 46 Lê Văn Tạo (1997a) Bệnh Escherichia coli gây Những thành tựu nghiên cứu phòng chống bệnh vật nuôi, tài liệu giảng dạy sau đại học cho bác sĩ thú y kỹ s chăn nuôi Viện thú y quốc gia, Hà nội, tr.207- 210 47 Lê Văn Tạo (1997b) Bệnh vi khuẩn Salmonella gây lợn Những thành tựu nghiên cứu phòng chống bệnh vật nuôi, tài liệu giảng dạy sau đại học cho bác sĩ thú y kỹ s chăn nuôi Viện Thú y Quốc gia, Hà nội, tr.213 217 48 Lê Văn Tạo, Nguyễn Ngũ, Nguyễn Thiên Thu, Đặng Văn Tuấn (2003) Độc lực mét sè u tè g©y bƯnh cđa vi khn E coli phân lập từ bê tiêu chảy tỉnh Nam trung bé Khoa häc kü thuËt Thó Y, tËp X, (số 3/2003) 49 Nguyễn Nh Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hơng (1997) Vi sinh vật thú y NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr.81 84 50 Nguyễn Nh Thanh (2001) Dịch tễ học thú y NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr.22-23 51 Phạm Ngọc Thạch (1996) Một số tiêu lâm sàng, phi lâm sàng trâu viêm ruột ỉa chảy biện pháp phòng trị Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, tr.20 32 52 Phạm Ngọc Thạch (2005) Hội chứng tiêu chảy gia súc Trờng Đại học Nông nghiệp I Hà Nội Khoa Chăn nuôi thú y , Hà Nội, Tr.2 -3 74 53 Nguyễn Văn Thiện (1997) Phơng pháp nghiên cứu chăn nuôi NXB Nông nghiệp, Hà Nội 54 Nguyễn Văn Thiện, Nguyễn Khánh Quắc, Nguyễn Duy Hoan (2002) Giáo trình phơng pháp nghiên cứu chăn nuôi NXB Nông nghiệp, Hà Nội 55 Trịnh Văn Thịnh (1985a) Bệnh nội khoa ký sinh trùng thú y NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr.78 82 56 Trịnh Văn Thịnh (1985b) Bệnh lợn ë ViƯt nam NXB Khoa häc kü tht, Hµ Nội, tr.90-95 57 Đỗ Ngọc Thuý, Darren Trot, Alan Frost, Kirsty Townsend, Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Nguyễn Xuân Huyên, Âu Xuân Tuấn, Văn Thị Hờng Vũ Ngọc Q (2002) TÝnh kh¸ng kh¸ng sinh cđa c¸c chđng Escherichia coli phân lập từ lợn tiêu chảy số tØnh miỊn B¾c ViƯt Nam Khoa häc kü tht Thó y, TËp IX, (sè 2-2005), tr.21 - 27 58 Bïi Trung Trực, Nguyễn Việt Nga, Thái Quốc Hiếu, Lê Thanh Hiếu, Nguyễn Ngọc Tuân, Trần Thị Dân (2004) Phân lập định typ kháng nguyên vi khuẩn E coli phân heo nái, heo tỉnh Tiền Giang Khoa häc kü thuËt Thó y, (sè 1), tr.12 – 19 59 Hoàng Văn Tuấn, Lê Văn Tạo, Trần Thị Hạnh (1998) Kết điều tra tình hình tiêu chảy lợn trại giống hớng nạc Khoa học kỹ tht Thó Y , TËp V, (sè4/1998) 60 Ngun Quang Tuyên (1996) Nghiên cứu đặc tính số chủng vi khuẩn Salmonella gây bệnh tiêu chảy bê nghé biện pháp phòng trị Luận án PTS KHNN, Hà Nội 61 Trịnh Quang Tuyên (2004) Phân lập xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli từ lợn bị tiêu chảy nuôi trại lợn Tam Điệp Khoa học Kỹ thuật Thú y (số 4), tr.22 – 28 62 Ngun Ph−íc T−¬ng (1994) Thc biệt dợc Thú y NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr.363 -364 75 63 Tạ Thị Vịnh, Đặng Thị Hoè (2002) Một số kết sử dụng chế phẩm sinh học để phòng trị bệnh tiêu chảy lợn Khoa häc kü thuËt Thó y, tËp IX, (sè 4/2002), tr.54-56 64 Nguyễn Hữu Vũ, Nguyễn Đức Lu (2000) Thuốc Thú y cách sử dụng NXB Nông nghiệp, Hµ Néi, tr.326 - 328 II TIÕNG ANH 65 Carter G.R, Chengapa.M.M, Rober T.S.A.W (1995) Essentials of veterinary Microbiology A warerly Company, 1995, p.45-49 66 Casey, T A., Nagy, B & Moon, H W (1992) Pathogenicity of porcine enterotoxigenic Escherichia coli that not express K88, K99, F41, or 987P adhesins American Journal of Veterinary Research 53, 1488-1492 67 Dean E A, Whipp S C & Moon H W (1989) Age-specific colonization of porcine intestinal epithelium by 987P-piliated enterotoxigenic Escherichia coli Infection and Immunity 57, 82-87 68 Dean-Nystrom E A & Samuel, J E (1994) Age-related resistance to 987P fimbria-mediated colonization correlates with specific glycolipid receptors in intestinal mucus in swine Infection and Immunity 62, 4789-4794 69 Do.T.N, Cu.H.P, Van.H.T, Tran.N.P.T & Trott.D.J (2006) Virulence factors of E coli isolates obtained from pigs with post-weaning diarrhoea or oedema disease in Vietnam In IPVS, pp 336 Copenhagen, Denmark 70 Fairbrother.J.M (1992) Enteric colibacillosis Diseases of swine IOWA State University Press/AMES, IOWA U.S.A 7th Edition, 1992, p489 – 496 71 Falkow, S (1975) Plasmid which contribute to pathogenity In infection multiple drug resistance Pion Ltd London 72 Isaacson, R E., Nagy, B & Moon, H W (1977) Colonization of porcine small intestine by Escherichia coli: Colonization and adhesion factors of pig enteropathogens that lack K88 Journal of Infectious Diseases 135, 531-539 76 73 Giannella, R A (1976) Suckling mouse model for detection of heatstable Escherichia coli enterotoxin: characteristics of the model Infection and Immunity 14, 95-99 74 Guinee, P A M & Jansen, W H (1979) Behavior of Escherichia coli K antigens K88ab, K88ac, and K88ad in immunoelectrophoresis, double diffusion, and haemagglutination Infection and Immunity 23, 700-705 75 Ketyle I Emodyl, Kentrohrt (1975) Mouse lang Oedema caused by a toxin substance of Escherichia coli strains Acta Microbiol, A cad-Sci Hung-25, P.307-317 76 Khooteng Hoat (1995) Hội thảo khoa học Cục thú y ngµy 1011/3/1995, Hµ Néi, tr 2-13 77 Konowalchuk, J., Speirs, J I & Stavric, S (1977) Vero response to a cytotoxin of Escherichia coli Infection and Immunity 18, 775-779 78 Links, I., Love, R & Greenwood, P (1985) Colibacillosis in newborn piglets associated with class enterotoxigenic Escherichia coli In Infectious diarrhoea of the young: strategies for control in humans and animals, pp 281-287 Edited by S Tzipori Geelong, Australia: Elsevier Science Publishers 79 Nagy, B., Arp, L H., Moon, H W & Casey, T A (1992) Colonization of the small intestine of weaned pigs by enterotoxigenic Escherichia coli that lack known colonization factors Veterinary Pathology 29, 239-246 80 Nagy, B., Awad-Masalmed, M., Bodoky, T., Munch, P & Szekrenyi, M T (1996) Association of shiga-like toxin type II (SLTII) and heat stable enterotoxins with F18ab, F18ac, K88 and F41 fimbriae of Escherichia coli from weaned pigs In Proceedings of 14th Congress International Pigs Veterinary Society, pp 264 Bologna Italy 81 Nagy, B & Fekete, P Z (1999) Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) in farm animals Veterinary Research 30, 259-284 77 82 NCCLS (1999) Performance standards for antimicrobial disk and dilution susceptibility tests for bacteria isolated from animals; Approved Standard Pennsylvania, USA: The National Committee for Clinical Laboratory Standards 83 Orskov, I Orskov, F Sojka, W.J Wittig, W (1964) K antigens K88ab (L) and K88ac (L) in E coli A new O antigen: O147 and a new K antigen K89 (B) Acta Pathologica et Microbiologica Scandinavica sect, B 62, P 439-447 84 Orskov, F (1978) Vilurence Factor of the bacterial cell surface J Infect., P 630 85 Posposchil A, Wood.R.L, and Anderson.T.D (1990) Peroxidase antiperoxidase and immunogold labeling of Salmonella typhimurium and Salmonella choleraesuis var, kunzendorf in tissues of experimentally infected swine Am.J.Vet.Res.51, p 619 – 624 86 Rippinger.P., Bertschinger.H U., Imberechts.H., Nagy.B., Sorg.I., Stamm.M., Wild.P & Wittig W (1995) Designations F18ab and F18ac for the related fimbrial types F107, 2134P and 8813 of Escherichia coli isolated from porcine postweaning diarrhoea and from oedema disease Veterinary Microbiology 45, 281-295 87 Schwartz.K.J (1992) Salmonella in Midwestern swine Proc 94th Annu.Meet U.S Anim Heath Assocc 88 Smith.H.W & Halls.S (1967) Observations by the ligated segment and oral inoculation methods on Escherichia coli infections in pigs, calves, lambs and rabbits Journal of Pathology and Bacteriology 93, 499-529 89 Wilcock.B.P and Olander.H.J (1978) Influence of oral antibiotic feeding on the duration and serverity of clincal disease,growth performance and pattern of sheding in swine inoculated with Salmonella typhimurium Am.J.Vet.Med.172,1978, p472 –477 90 Wilcock.B.P, Schwartz.K.J (1992) Salmonellosis Diseases of swine IOWA State University Press/AMES IOWA U.S.A 7th Edition1992, p 570 – 583 78 ... sau cai sữa nuôi tỉnh Lào Cai đề xuất biện pháp phòng trị" 1.2 Mục tiêu nghiên cứu - Phân lập giám định vi khuẩn E coli Salmonella từ mẫu bệnh phẩm phân lợn tiêu chảy - Xác định đặc tính sinh học. .. ngời ta đ phân loại vi khuẩn E coli thành loại sau: Enterotoxigenic E coli (ETEC), Enteropathogenic E coli (EPEC), Adherence Enteropathogenic E coli (AEEC) Verotoxingenic E coli (VTEC) (Lê Văn... khuẩn E coli Salmonella hội chứng tiêu chảy lợn sau cai sữa - Phân lập, xác định tỷ lệ nhiễm vi khuẩn từ mẫu bệnh phẩm phân lợn tiêu chảy - Xác định số lợng vi khuẩn E coli Salmonella phân lợn tiêu