MỞ ĐẦU………………………………………………………………… PHẦN I: TỔNG QUAN………………………………………………... 1.1. Đặc điểm thực vật và tình hình nghiên cứu cây Bách sao (Myoporum Bontoides A. Gray )………………………………… 1.1.1. Đặc điểm thực vật………………………………………… 1.1.2. Tình hình nghiên cứu cây Bách sao……………………… 1.2. Vài nét về terpen và phân loại của chúng……………………… 1.2.1. Các monoterpen mạch hở………………………………… 1.2.2. Các monoterpen mạch vòng……………………………… 1.2.3. Monoterpen khung iridoid và hoạt tính sinh học của chúng………………………………………………………. PHẦN II: TÌM HIỂU MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN…………………………………………... 2.1. Các phương pháp chiết………………………………………….. 2.1.1. Các phương pháp chiết thông thường…………………… 2.2.2. Các phương pháp chiết khác…………………………….. 2.2. Các phương pháp sắc ký phân lập chất……………………….. 2.2.1 Sắc ký cột………………………………………………….. 2.2.2 Sắc ký bản mỏng………………………………………….. 2.2.3 Sắc ký lỏng cao áp………………………………………… 2.3 Các phương pháp phổ phân tích cấu trúc……………………… 2.3.1 Phổ hồng ngoại (IR)………………………………………. 2.3.2 Phối khối lượng (MS)…………………………………….. 2.3.3 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR)……………………. 2.3.3.1 Phổ cộng hưởng từ proton ( 1 H NMR)………….. 2.3.3.2 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân ( 13 CNRM)…………. 2.3.3.3 Một số phổ 2D NMR……………………………… KẾT LUẬN……………………………………………………………... TÀI LIỆU THAM KHẢO………………………………………………
1 MỤC LỤC MỞ ĐẦU………………………………………………………………… PHẦN I: TỔNG QUAN……………………………………………… 1.1 Đặc điểm thực vật tình hình nghiên cứu Bách (Myoporum Bontoides A Gray )………………………………… 1.1.1 Đặc điểm thực vật………………………………………… 1.1.2 Tình hình nghiên cứu Bách sao……………………… 1.2 Vài nét terpen phân loại chúng……………………… 1.2.1 Các monoterpen mạch hở………………………………… 1.2.2 Các monoterpen mạch vịng……………………………… 1.2.3 Monoterpen khung iridoid hoạt tính sinh học chúng……………………………………………………… PHẦN II: TÌM HIỂU MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN………………………………………… 2.1 Các phương pháp chiết………………………………………… 2.1.1 Các phương pháp chiết thông thường…………………… 2.2.2 Các phương pháp chiết khác…………………………… 2.2 Các phương pháp sắc ký phân lập chất……………………… 2.2.1 Sắc ký cột………………………………………………… 2.2.2 Sắc ký mỏng………………………………………… 2.2.3 Sắc ký lỏng cao áp………………………………………… 2.3 Các phương pháp phổ phân tích cấu trúc……………………… 2.3.1 Phổ hồng ngoại (IR)……………………………………… 2.3.2 Phối khối lượng (MS)…………………………………… 2.3.3 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR)…………………… 2.3.3.1 Phổ cộng hưởng từ proton ( H- NMR)………… 2.3.3.2 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (13C-NRM)………… 2.3.3.3 Một số phổ 2D- NMR……………………………… KẾT LUẬN…………………………………………………………… TÀI LIỆU THAM KHẢO……………………………………………… MỞ ĐẦU 4 10 10 10 13 13 13 13 15 15 15 16 16 16 17 18 18 18 19 20 21 Các hợp chất thiên nhiên, đặc biệt hợp chất có tính sinh học đóng vai trị quan trọng đời sống người Chúng dùng để sản xuất thuốc chữa bệnh, chất bảo vệ thực vật, nguyên liệu cho ngành công nghiệp, thực phẩm… Theo trung tâm liệu thực vật Quốc gia, thực vật rừng ngập mặn nước ta có khoảng 47 họ với 100 lồi phân bố theo khu vực Có khoảng 21 lồi số có giá trị làm dược liệu nhiều thuốc nam nhân dân sử dụng, thời kỳ chiến tranh, để chữa bệnh viêm nhiễm, sốt rét, u nhọt,… Tuy nhiên, nghiên cứu hóa học hoạt tính sinh học từ thực vật rừng ngập mặn nước ta hạn chế Ở Việt Nam họ Bách (Myoporaceae) có lồi Bách (Myoporum bontoides A Gray) thuộc chi Myoporum Cây mọc vùng ngập mặn ven biển cửa sông từ Bắc vào Nam, nhiều khu vực phía Đơng Bắc Dân gian thường sử dụng loài để trị viêm nhiễm da, đau họng, đau mắt tai Trong năm gần có số cơng trình giới nghiên cứu thành phần hóa học số hoạt tính sinh học Bách (Myoporum bontoides A Gray) mọc ven biển Trung Quốc, Nhật Tuy nhiên Việt Nam chưa có cơng trình nghiên cứu lồi Do em lựa chọn đề tài: Nghiên cứu tổng quan Bách (Myoporum bontoides A Gray) Việt Nam tìm hiểu số phương pháp nghiên cứu hóa học hợp chất thiên nhiên Nhằm tìm hiểu tình hình nghiên cứu nước giới lồi này, góp phần làm sở định hướng cho việc nghiên cứu thực nghiệm thời gian tới thành phần hóa học hoạt tính sinh học Bách Sao PHẦN I: TỔNG QUAN 1.1 Đặc điểm thực vật tình hình nghiên cứu Bách (Myoporum 1.1.1 Bontoides A Gray ) Đặc điểm thực vật Theo Trung tâm Dữ liệu Thực vật Quốc gia, họ Bách (Myoporaceae) giới gồm có chi 180 lồi, phân bố nước nhiệt đới Ở Việt Nam có chi lồi Bách (Myoporum Bontoides A Gray.) thuộc chi Myoporum Cây bách bụi, phát triển dòng thủy triều cửa biển, thích ứng với muối cát mơi trường đá phát triển bình thường vùng cửa sơng khơng muối đất Nó trồng dọc theo bờ biển để phủ xanh môi trường, bảo vệ chống lại gió thủy triều cố định cát, cao khoảng m, chi nhánh vòng, với vết sẹo sưng lên Nhánh non dẹp, dày dày, khơng lơng, bìa ngun hay có hàm răng, gân phụ không rõ, cuống dài 1,5 cm Hoa 1-3 nách lá, cọng dài 2,5 cm, đài cao 4mm, tam giác, khơng lơng, vành hình quặn, tía, ống dài, có lơng mịn, tai 1× 0,5cm , tiểu nhụy 4, noẵn 6-8 buồng, noẵn treo Quả nhân cứng có từ 6-8 nhân, hột nhỏ, có phơi nhũ [1] Cây phân bố Nam Nhật Bản, Đài Loan, Trung đến miền Nam Trung Quốc Ở Việt Nam thường xuyên ghi lại rừng ngập mặn, đặc biệt tìm thấy rừng ngập mặn khu vực phía đơng bắc ( vịnh Hạ Long ) Ở Trung Quốc, nước sắc Bách sử dụng y học dân gian để chữa số bệnh da, sốt, thần kinh,… Hợp chất (R)-myoporon, furanosesquiterpen, thành phần tinh dầu Bách thể hoạt tính chống lại lồi sâu tơ Plutella xylostella, loại sâu bướm phá hoại loài rau họ cải có tính kháng thuốc cao [2] 4 Một số nơi cịn sử dụng lồi để điều trị vết thương nhỏ da tổn thương nhiễm thứ cấp, người ta sử dụng để trị đau họng, đau mắt tai Hình 1: Cây Bách Sao (Myoporum Bontoides A.Gray) 1.1.2 Tình hình nghiên cứu Bách Trong năm gần đây, thành phần hóa học hoạt tính sinh học Bách bắt đầu nghiên cứu giới Năm 2008, Moe Kanemoto cộng phân lập mười sáu hợp chất từ dịch chiết metanol Bách sao, có hợp chất mới, hai dẫn xuất clo có khung iridoid myopochlorin (1) myobontioside A (2), iridoid glucoside myobontioside B (3), acetogenin glucoside myobontioside C (4), acyclic monoterpen glucoside myobontiosides D (5) Mười dẫn xuất biết decaffeoylverbascoside (6), cimidahurine (7) , verbascoside (8) , isoverbascoside (9), oxoverbascosid , hai phenylpropanoids , meliotoside axit ferulic -D-glucopyranosyl, bốn glucosides flavonoid, 7- O D-glucopyranosides apigenin (10), luteolin (11) , tricin (12) , chrysoeriol (13) [2] 10 11 12 13 Năm 2008, Deng Yecheng cộng nghiên cứu khả ức chế chống lại loại nấm gây bệnh từ dịch chiết metanol Bách sao, kết cho thấy chất chiết xuất từ thân bách dùng làm chất ức chế hoạt động chống lại bảy loại nấm Chất có hoạt tính cao xác định epingaione (14), chất có khả ức chế lại bảy loại nấm [3] 7 14 Năm 2011, Huang Li-Lan công phân lập dẫn xuất flavanonol (2R, 3R) -3,5,7-trihydroxyflavanon-3-axetat (15) Cấu trúc chất xác định nhờ phương pháp phổ MS, NMR X-ray đơn tinh thể Đây hợp chất lần phân lập từ Bách Hợp chất thể hoạt tính ức chế chống lại loài nấm Magnaporthe grisea với giá trị EC50 = 199,41 μg/mL Đây loại nấm gây bệnh đạo ôn lúa, bệnh diễn 85 quốc gia toàn giới, năm người ta ước tính bệnh tiêu diệt lượng lúa đủ để nuôi 60 triệu người [4] 15 Trong năm gần đây, Cây Bách Sao (Myoporum bontoides A.Gray) nghiên cứu giới Ở Việt Nam chưa có cơng trình nghiên cứu hóa sinh học này, phần tổng quan làm sở tiền đề cho nghiên cứu hóa sinh học Cây Bách Sao thời gian tới 1.2 Vài nét terpen phân loại Tecpen có nguồn gốc từ đơn vị isopren, có cơng thức phân tử C H Các công thức phân tử tecpen (C H )n n số lượng đơn vị isopren liên kết Đây gọi quy tắc Isopren quy tắc C5 Các đơn vị isopren liên kết với để hình thành chuỗi mạch hở xếp để tạo thành vịng [5] Tecpen phân loại theo số lượng đơn vị isoprene phân tử : 1.2.1 Loại tecpen Số lượng C Ví dụ Monoterpen 10 Sesquiterpen 15 Geraniol, limonen, tecpineol Farnesenes, farnesol Diterpen 20 Cafestol, cembren Sesterterpen 25 Geranylfarnesol Triterpen 30 Triterpene squalen Sesquaterpen 35 Ferrugicadiol Tetraterpen 40 Polyterpen Gồm nhiều chuỗi đơn vị isopren Một số monoterpen mạch hở Geraniol (16) có tinh dầu hoa hồng Xitroneol (17) có tinh dầu xả Các hợp chất có mùi thơm đặc trưng, đơn hương quý dùng công nghiệp hương liệu thực phẩm,… 16 1.2.2 Một số monoterpen mạch vòng 17 Mentol (18 ) có tinh dầu bạc hà, đưa vào kẹo bánh, kem đánh răng,…mà dùng làm thuốc chữa bệnh Cis-terpin-1,8 (19) dùng làm thuốc ho ( long đàm, giảm tiết đàm ) Cineol-1,8 (20) điều chế từ cis-terpin-1,8 có ứng dụng sát trùng trị ho 18 19 20 1.2.3 Monoterpen khung iridoid hoạt tính sinh học chúng Monoterpen khung iridoid monoterpen dạng vòng ghép bao gồm vòng cyclopentan dị vòng cạnh chứa oxi Chất điển hình cho khung Iridomyrmecin (21) 21 Các Iridoid khoa học chứng minh có khả loại bỏ gốc tự có hại, kiểm soát lượng cholesterol, tăng cường lượng, bảo vệ tim mạch, tăng cường hệ thống miễn dịch,giảm viêm nhiễm, chống đột biến tế bào, giúp não hoạt động khỏe Các Iridoid sinh từ thực vật chế phòng vệ chống nhiễm trùng mối đe dọa khác Đây nhóm chất tìm thấy từ nhiều lồi thực vật dùng làm thuốc Trong thiên nhiên nhóm chất thường tồn dạng iridoid glucoside Một số chất iridoid glucoside có hoạt tính mạnh như: aucubin (22), catalpol (23) 10 Aucubin hợp chất iridoid glucoside, thành phần iridoid gồm có 10 cacbon với cacbon 11 tích, có phần đường -D-glucozơ liên kết O-glucozit Catalpo iridoid glucoside Sản phẩm tự nhiên nằm lớp học iridoid glycosid , mà đơn giản monoterpene với đường phân tử đính kèm Mặc dù hoạt tính catalpol nhiều Iridoids khác không thiết lập đầy đủ, có chứng chức họ để kích thích sản xuất vỏ thượng thận nội tiết tố , làm tăng sản xuất hormone giới tính Catalpol trưng bày chống viêm hoạt động làm tăng sản xuất nội tiết tố androgen sinh tuyến thượng thận, dẫn đến gia tăng khối lượng bắp 22 23 PHẦN II: TÌM HIỂU MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN 2.1 Các phương pháp chiết, tách phân lập hợp chất từ thực vật 2.1.1 Các phương pháp chiết tách thông thường Chiết q trình lơi kéo hợp chất từ pha sang pha khác Tùy vào đặc tính pha chiết kĩ thuật hỗ trợ, người ta phân loại thành nhiều hình thức chiết khác Các hình thức chiết khác như: 11 Chiết lỏng - lỏng (LLE) trình chiết mà hai pha chất lỏng không trộn lẫn.Thông thường dung môi phân cực (nước) dung môi phân cực ( hữu cơ) Chiết lỏng- rắn: việc hấp thụ chất dung dịch vào bề mặt chất hấp phụ, sau sử dụng dung mơi thích hợp nhiệt độ để giải hấp chất đưa vào thiết bị phân tích Vi chiết pha rắn(SPE): Trong chiết pha rắn, việc lựa chọn vật liệu hấp phụ quan trọng để đạt hiệu lôi kéo hợp chất hữu từ pha lỏng tốt *Chất hấp thụ phân cực: Sử dụng chất hấp thụ phân cực để tách chất phân tích hịa tan dung môi không phân cực Chất hấp thụ phân cực phổ biến dung SPE pha thường silica (SiO 2), alumina (Al2O3) Magie silicat (MgSiO3 Florisil) … 2.1.2 Các phương pháp tách, chiết khác a Chiết với hỗ trợ siêu âm Trong trình chiết xuất, đơi sóng siêu âm sử dụng để tăng hiệu chiết Sóng siêu âm với tần số 20 KHz thường sử dụng Sóng siêu âm có tác dụng làm tăng hịa tan chất tan vào dung mơi tăng q trình khếch tán chất tan Sóng siêu âm cường độ cao phá vỡ cấu trúc tế bào, thúc đẩy trình chiết Chiết với hỗ trợ sóng siêu âm thường sử dụng chuẩn bị mẫu phân tích thay cho phương pháp ngâm lạnh hay chiết Soxhlet cổ điển Khi đó, người ta nhúng bình chiết vào bể siêu âm có chứa nước, sóng siêu âm phát từ đầu phát truyền qua môi trường nước vào hỗn hợp chiết b Chiết với hỗ trợ vi sóng Khi chiếu xạ điện từ tần số 2450MHz (bức xạ vi sóng dải sóng điện từ) vào môi trường chất phân cực, phân tử chịu đồng thời 12 hai tác động: dẫn truyền ion quay lưỡng cực tác dụng lực điện trường.cả hai tác động làm sinh nhiệt lòng khối vật chất làm cho việc gia nhiệt nhanh hiệu nhiều so với phương pháp dẫn nhiệt truyền thống Trong chiết xuất , chiếu xạ vi song vào môi trường có chứa tiêu phân dược liệu vào dung môi phân cực, phân tử dung môi chất phân cực dao động nóng lên nhanh chóng làm tăng khả hịa tan chất vào dung mơi Thêm vào vi song làm phá hủy cấu trúc vách tế bào thực vật làm chất tan giải phóng trực tiếp vào dung mơi chiết làm cho q trình chiết chuyể thành hịa tan đơn giản Điều làm cho việc chiết xuất nhanh làm dịch chiết nhiều tạp chất c Chiết siêu giới hạn Nguyên tắc phương pháp sau: Trong điều kiện áp suất binh thường nâng nhiệt độ chất lỏng tới điểm sôi nó, chất lỏng hóa Tuy nhiên, tiếp tục tăng nhiệt độ đồng thời tăng áp suất hệ lên nhiệt độ áp xuất định đó, người ta thu “chất lỏng” gọi chất lỏng tới hạn Chất lỏng không giống với chất lỏng trạng thái thông thường mà mang đặc tính chat khí chất lỏng nên có khả hịa tan chất đồng thời có độ nhớt thấp khả khếch tán cao dung để hịa tan chất ứng dụng vào chiết xuất chất dược liệu d Chiết áp suất cao Khả hòa tan chất dung môi phụ thuộc nhiều vào nhiệt độ Vì chiết xuất người ta thường tăng nhiệt độ để giảm lượng dung môi thời gian chiết Tuy nhiên việc tăng nhiệt dộ để chiết có giới hạn nhiệt độ sơi dung mơi Khi hóa dung mơi khơng cịn khả hòa tan chất Để khác phục điều này, người ta tiến hành chiết áp suất cao dựa vào nguyên tắc : nhiệt độ sôi chất lỏng tăng áp suất tăng Khi tăng nhiệt độ lên 10 0C khả 13 hòa tan dung mơi lên gấp rưỡi Trong q trình chiết áp suất, dung môi chiết đưa tới nhiệt độ áp suất gần với vùng giới hạn 2.2 Các phương pháp sắc ký phân lập chất 2.2.1 Sắc ký cột Sắc ký cột phương pháp sắc ký mà pha tĩnh nhồi cột hình trụ hở đầu tráng long mao quản có đường kính hẹp Tùy theo tính chất lượng chất lượng mẫu mà người ta chọn pha tĩnh phù hợp với loại chất Chất hấp phụ chất phân cực chất không phân cực Pha tĩnh nhồi vào cột theo phương pháp nhồi khơ nhồi ướt Thơng thường người ta hịa tan hỗn hợp chất nghiên cứu vào dung môi ( pha động) với lượng vừa đủ nạp lên cột theo cách phù hợp cho chất nghiên cứu lan thành lớp phẳng lên cột, sau tiến hành sắc ký 2.2.2 Sắc ký mỏng Sắc ký lớp mỏng kỹ thuật tách chất tiến hành cho pha động di chuyển qua pha tĩnh đặt hỗn hợp chất cần tách Phương pháp sắc kí lớp mỏng bao gồm pha tĩnh lớp mỏng chất hấp phụ, thường sicagel , aluminium oxit xenlulozơ phủ mặt phẳng chất trơ Pha động bao gồm dung dịch cần phân tích hịa tan dung mơi thích hợp hút lên sắc kí mao dẫn, tách dung dịch thí nghiệm dựa tính phân cựccủa thành phần dung dịch Trong trình di chuyển qua lớp hấp phụ, cấu tử hỗn hợp mẫu thử di chuyển lớp mỏng, theo hướng pha động, với tốc độ khác Kết quả, ta thu sắc ký đồ lớp mỏng Cơ chế chia tách chế hấp phụ, phân bố, trao đổi ion, sàng lọc phân tử hay phối hợp đồng thời nhiều chế tùy thuộc vào tính chất chất làm pha tĩnh dung môi làm pha động 2.2.3 Sắc ký lỏng cao áp 14 Trong sắc ký lỏng cao áp (HPLC), để tăng hiệu tách cột sắc ký, người ta thường sử dụng chất nhồi cột với đường ksinh nhỏ , thường 10μm với đường kính xoang xốp bên hạt đạt từ 80.10 -10-120.10-10cho phân tích phân tử nhỏ 300.10-10 dùng cho phân tích đại phân tử Do kích thước hạt nhỏ, để dung mơi chảy qua với dịng tối ưu người ta phải dùng bơm để nén với áp suất cao (có thể tới 400 atm) để đẩy dịng dung mơi qua cột 2.3 Các phương pháp phổ phân tích cấu trúc [6] 2.3.1 Phổ hồng ngoại (IR) Phổ hồng ngoại chất thường ghi vùng 4000 cm -1 đến 500 cm-1 Khi phân tử hấp phụ xạ trình quay,dao động quay lẫn dao động phân tử khác hấp phụ vùng xạ khác Các dao động nhóm phân thành loại dao động hóa trị dao động biến dạng , loại dao động phân thành nhiều kiểu dao động khác - Dao động hóa trị dao động làm thay đổi chiều dài liên kết không làm thay đổi góc liên kết nguyên tử phân tử, bao gồm - dao động hóa trị đối xứng dao động bất hóa trị đối xứng Dao động biến dạng dao động làm thay đổi góc liên kết ko làm thay đổi chiều dài liên kết nguyên tử phân tử, bao gồm dao động biến dạng đối xứng dao động biến dạng bất đối xứng Ngồi cịn dao động dạng quạt, dạng du dạng xoắn 2.3.2 Phổ khối lượng (MS) Phương pháp khối phổ lượng phương pháp phân tích quan trọng phổ khối lượng cung cấp thơng tin phân tích định tính, định lượng nguyên tố, thành phần cấu trúc hợp chất vô hữu Phương pháp phổ khối lượng khác với phân tích phổ khác cách Nó khơng phụ thuộc vào độ hấp phụ xạ điện từ mà khảo sát dựa xảy phân tử bị bắn phá chum electron mang lượng cao Nếu electron mang lượng cac khoảng 10eV ( 1eV= 230,5 kcal/mol ) va chạm với 15 phân tử chất hữu cơ, lượng làm cho va chạm đủ để bật số electron phân tử Một số phương pháp khối phổ lượng: Phổ EI-MS ( Electron Impact Ionization Mass Spectroscopy ) dựa vào phân mảnh ion tác dụng chùm ion bắn phá lượng khác nhau, phổ biến 70eV Phổ ESI-MS (Electron Stray Ionization Mass Spectroscopy ) gọi phổ phun mù điện tử Phổ thực với lượng bắn phá thấp nhiều so với phổ EI-MS, phổ thu chủ yếu pic ion phân tử pic đặc trưng cho phá vỡ mức liên kết có lượng thấp, dễ bị phá vỡ Phổ FAB (Fast Atom Boming Mass Spectroscopy ) phổ bắn phá nguyên tử nhanh lượng thấp, phổ thu pic ion phân tử Phổ khối lượng phân dải cao (High-resolution Mass Spectroscopy) cho phép xác định pic ion phân tử ion mảnh với độ xác cao Kết dải phổ khối lượng phân dải cao với kết phân tích nguyên tố cho phép xác định xác cơng thức cộng hợp chất 2.2.3 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) 2.3.3.1 Phổ cộng hưởng từ nhân proton ( H- NMR) Phổ cộng hưởng từ proton ( H- NMR) ứng dụng cộng hưởng từ hạt nhân máy quang phổ NMR hydro-1 hạt nhân phân tử chất, để xác định cấu trúc phân tử Trong mẫu mà tự nhiên hydro (H) sử dụng, thực tế tất hydro bao gồm đồng vị H (H-1, tức có proton cho hạt nhân) Một đầy đủ nguyên tử H gọi Protium Các loại dung mơi sử dụng phải dertri hóa, vd: D 2O, CO3OD, CD3Cl, (CD3)2SO,… 2.3.3 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C (13C-NMR) 16 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C (13C-NMR) tương tự phổ cộng hưởng từ proton, cho phép xác định số lượng nguyên tử C phân tử hợp chất hữu Phổ 13C (13C-NMR) có ý nghĩa quan trọng việc xác định cấu trúc chất Độ dịch chuyển hóa học nằm vùng rộng nhiều so với phổ proton 2.3.3.3 Một số phổ 2D- NMR Phổ HSQC ( Heteronuclear Single Quantum Coherence) cho tín hiệu C với H liên kết trực tiếp Phổ HMBC ( Heteronuclear Multiple Bond Correlation) cho tín hiệu C với H gián tiếp qua liên kết Phổ 1H- 1H COSY ( 1H- 1H Chemical Shift Correlation Spectroscopy): Phổ H- 1H COSY biểu diễn tương tác xa H- H, chủ yếu proton đính với cacbon liền kề Nhờ phổ mà phần phần tử ghép nối lại với Tín hiệu thu phổ COSY có hình dạng dấu thập Phổ NOESY ( Nuclear Overhause Effect Spectroscopy): Phổ hai chiều 1H1 H COSY có hiệu ứng NOE gọi NOESY Phổ biểu diễn tương tác xa không gian proton không kể đến liên kết mà tính đến khoảng cách định không gian ( khoảng Dựa vào kết phổ xác định cấu trúc khơng gian phân tử Tương tự phổ COSY, có hai nhóm proton tương tác với tín hiệu tương tác chúng thể bốn đỉnh hình vng, hai đỉnh nằm đường chéo 17 KẾT LUẬN Các chất phân lập từ Cây Bách Sao thuộc nhóm iridoid glucoside flavonoid glucoside Các nghiên cứu chứng minh chất từ Cây Bách Sao (Myoporum bontoides A.Gray) có khả bảo vệ gan thận Chất (-)-Epingaione chứng minh hoạt động phổ rộng gây ức chế nấm gây bệnh thực vật hứa hẹn khai thác loại thuốc diệt nấm tương lai gần 18 TÀI LIỆU THAM KHẢO Phạm Hoàng Hộ, Cây cỏ Việt Nam, Nhà xuất Trẻ 1999 Moe Kanemoto , Katsuyoshi Matsunami , Hideaki Otsuka , Takakazu Shinzato , Choken Ishigaki ,Yoshio Takeda ,(2008), Phytochemistry vol.69 2517–2522 Deng Yecheng, Yang Zhen, Yu Yanzhen Bi Xiulian,(2008), Pest Manag Sci vol 64:203–207 Huang Li, Lan Li Jie, Wen Ni Chun, Lin Gu Wen, Xiang Li Chun, Yuan Chinese J Struct Chem Vol 30, No 1298~1304 GS.TSKH Phan Tống Sơn, Bài giảng hóa học hợp chất thiên nhiên, Hà Nội 2004 Nguyễn Đình Triệu ,Các phương pháp vật lý đại ứng dụng hóa học, ĐHQGHN 2012 19 Một số trang web tìm kiếm: www.sciencedirect.com www.wikipedia.com www.google.com ... lựa chọn đề tài: Nghiên cứu tổng quan Bách (Myoporum bontoides A Gray) Việt Nam tìm hiểu số phương pháp nghiên cứu hóa học hợp chất thiên nhiên Nhằm tìm hiểu tình hình nghiên cứu nước giới loài... đây, Cây Bách Sao (Myoporum bontoides A .Gray) nghiên cứu giới Ở Việt Nam chưa có cơng trình nghiên cứu hóa sinh học này, phần tổng quan làm sở tiền đề cho nghiên cứu hóa sinh học Cây Bách Sao. .. TÌM HIỂU MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN 2.1 Các phương pháp chiết, tách phân lập hợp chất từ thực vật 2.1.1 Các phương pháp chiết tách thơng thường Chiết q trình lơi kéo hợp