kỹ thuật định nhóm máu hệ ABO

Định nhóm máu hệ ABO lần 1 bằng 2 phư ơng pháp huyết thanh mẫu và hồng cầu mẫu.. Định nhóm máu hệ ABO lần 2 bằng 2 phư ơng pháp huyết thanh mẫu và hồng cầu mẫu do KTV khác làm... Nhóm

Kỹ thuật định nhóm

máu hệ ABO

Qui trình định nhóm máu hệ ABO

Mục tiêu:

Đảm bảo thực hiện đúng các bước tiến hành của kỹ thuật định nhóm máu hệ ABO Xác định chính xác nhóm máu

hệ ABO cũng như kiểm tra đầy đủ các thủ tục hành chính là một khâu quan trọng để đảm bảo truyền máu an toàn,

có hiệu lực cho người bệnh.

Các bước của qui trình

1 Chuẩn bị và kiểm tra dụng cụ, sinh phẩm.

2 Nhận bệnh phẩm: Kiểm tra phiếu yêu cầu xét nghiệm và ống máu của bệnh nhân.

3 Định nhóm máu hệ ABO lần 1 bằng 2 phư

ơng pháp huyết thanh mẫu và hồng cầu

mẫu.

4 Định nhóm máu hệ ABO lần 2 bằng 2 phư

ơng pháp huyết thanh mẫu và hồng cầu

mẫu (do KTV khác làm).

5 Đối chiếu kết quả giữa 2 lần định nhóm:

- Nếu kết quả phù hợp: Đóng dấu nhóm máu

vào phiếu xét nghiệm.

- Nếu kết quả không phù hợp: Kiểm tra lại

toàn bộ các bước từ lúc nhận bệnh phẩm.

6 Ghi ngày tháng năm, BS, KTV định nhóm kí

nháy vào phiếu xét nghiệm.

7 Vào sổ kết quả định nhóm máu.

8 Bác sỹ trưởng khoa kí phiếu xét nghiệm.

Các bước của qui trình

Kỹ thuật định nhóm máu hệ ABO

Mục tiêu học tập Khi bạn học xong bài này bạn phải có khả năng:

1 Hiểu nguyên lý của kỹ thuật.

2 Thực hiện một cách chính xác các kỹ thuật

định nhóm máu hệ ABO.

3 Xác định nguyên nhân và tránh những lầm

lẫn thông thường trong định nhóm máu.

4 Biết cách kiểm tra chất lượng huyết thanh

mẫu và hồng cầu mẫu

5 Xác định được các dụng cụ cần thiết để tiến

hành các kỹ thuật xác định nhóm máu hệ

ABO.

Nguyên lý của kỹ thuật

Nguyên lý của kỹ thuật được dựa trên nguyên lý của phản ứng ngưng kết Nhóm máu hệ ABO đư

ợc xác định nhờ sự có mặt của kháng nguyên trên bề mặt hồng cầu và kháng thể có trong

huyết thanh, người bình thường trong huyết

thanh có kháng thể tự nhiên chống lại kháng

nguyên mà kháng nguyên đó lại không có trên

bề mặt hồng cầu của chính mình Nhóm máu hệ ABO được xác định bằng hai phương pháp là

huyết thanh mẫu và hồng cầu mẫu.

Nhãm m¸u trªn BM hång cÇu Kh¸ng nguyªn trong huyÕt thanh Kh¸ng thÓ

A A Kh¸ng thÓ chèng B

B B Kh¸ng thÓ chèng A

AB A vµ B Kh«ng cã kh¸ng thÓ

O Kh«ng cã Kh¸ng thÓ chèng B

Kh¸ng thÓ chèng B

§Æc ®iÓm nhãm m¸u hÖ ABO

Dụng cụ và thuốc thử

A Dụng cụ:

Ly tâm ống thẳng.

Tủ lạnh bảo quản thuốc thử huyết thanh mẫu, hồng cầu mẫu và mẫu máu.

Quầy lạnh sâu để bảo quản mẫu huyết thanh

Hộp sáng hoặc gạch men trắng.

Bình cách thuỷ 370C (hoặc tủ ấm hoặc bình giữ

nhiệt)

Bình đựng nước muối.

Nhiệt kế

Pipet Pasteur.

ống nghiệm để định nhóm (50 x 7 mm) nhựa hoặc thuỷ tinh.

Giá đựng ống nghiệm để tiến hành kỹ thuật.

Lam kính.

Bút chì kính, bút dạ

Giấy đo pH

Bông thấm

Cốc mỏ thuỷ tinh

Que thuỷ tinh

Kính hiển vi

Tủ sấy dụng cụ

Dụng cụ và thuốc thử

B Thuốc thử:

 Huyết thanh mẫu: Chống A, chống B, chống AB, chống H, chống A1.

 Hồng cầu mẫu: Hồng cầu mẫu A, B, O.

 Nước muối 0,9 %

 Nước cất hoặc nước không có ion.

 Huyết thanh AB

 Enzyme Papain

Tiến hành kỹ thuật

1 Định nhóm trên phiến đá:

 Phương pháp huyết thanh mẫu

Trên một phiến đá: Nhỏ 3 giọt huyết thanh mẫu chống A, chống B, chống

AB vào 3 vị trí khác nhau

Thêm 1 giọt hồng cầu cần định nhóm 10-20% (được pha trong nước muối 0,9%, huyết thanh hoặc huyết tương).

Trộn đều huyết thanh mẫu với hồng cầu của bệnh nhân cần định nhóm bằng một que thuỷ tinh thành một vòng tròn có đường kính 2-3 cm Lắc nhẹ liên tục trong vòng 2 phút rồi đọc kết quả.

 Phương pháp hồng cầu mẫu

 Trên một phiến đá: Nhỏ 2 giọt huyết thanh của bệnh nhân cần định

nhóm vào 2 vị trí khác nhau.

 Thêm 1 giọt hồng cầu mẫu A, 1 giọt hồng cầu mẫu B 10-20%.

 Trộn đều huyết thanh của bệnh nhân với hồng cầu mẫu thành một vòng

tròn có đường kính 2-3 cm Lắc nhẹ liên tục trong vòng 2 phút rồi đọc kết quả.

2 Định nhóm trong ống nghiệm:

 Phương pháp huyết thanh mẫu:

 Nhỏ 1 giọt huyết thanh mẫu chống A, chống B, chống AB vào

3 ống nghiệm khác nhau.

 Thêm 1 giọt hồng cầu cần định nhóm 2-5 % (được pha trong nước muối 0,9%, huyết thanh hoặc huyết tương) vào mỗi ống nghiệm trên.

 Lắc đều, ly tâm 1000 vòng/phút/ 1 phút

 Nghiêng nhẹ thành ống nghiệm, đọc kết quả bằng mắt thường

và trên kính hiển vi

 Phương pháp hồng cầu mẫu:

 Nhỏ 1 giọt huyết thanh của bệnh nhân vào 2 ống nghiệm khác nhau.

 Thêm 1 giọt hồng cầu mẫu A, 1 giọt hồng cầu mẫu B, 1 giọt hồng cầu mẫu O 2-5% vào mỗi ống nghiệm trên.

 Lắc đều, ly tâm 1000 vòng/phút/ 1 phút

B

A

B

A

B

A

B

A

Kháng thể- + HC cần Đ.Nhóm

0 +

+ 0

+ +

O

A B

AB

Nhận định kết quả

AB AB AB AB

0 + + +

Nhóm máu

A

B

A

B

A

B

A

Hồng cầu + HT cần đ nhóm

+ 0

0 +

0 0

O

A

B

AB

Nhận định kết quả

Nhóm máu

Những nguyên nhân sai lầm trong định

nhóm máu hệ ABO

1 Tay nghề của cán bộ làm xét nghiệm.

2 Dụng cụ làm xét nghiệm bẩn.

3 Kỹ thuật nghèo nàn Đọc kết quả quá nhanh

hoặc để quá lâu mới đọc kết quả Tỷ lệ giữa huyết thanh mẫu và hồng cầu mẫu không tư

ơng ứng.

4 Huyết thanh mẫu, hồng cầu mẫu hỏng, biến

chất, nhiễm trùng, quá hạn sử dụng.

5 Mẫu máu cần định nhóm bị nhiễm trùng

Xin tr©n träng c¶m ¬n