Nghiên cứu nhân giống cây bạch đàn lai u6 bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào

i ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM ĐỖ THÚY LINH NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY BẠCH ĐÀN LAI U6 BẰNG PHƢƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành : Công nghệ sinh học Khoa : CNSH - CNTP Khoá học : 2011 - 2015 Thái Nguyên, năm 2015 ii ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM ĐỖ THÚY LINH NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY BẠCH ĐÀN LAI U6 BẰNG PHƢƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành : Công nghệ sinh học Lớp : K43 - CNSH Khoa : CNSH - CNTP Khoá học : 2011 - 2015 Giảng viên hƣớng dẫn : ThS Dƣơng Mạnh Cƣờng ThS Lê Thị Hảo Thái Nguyên, năm 2015 i LỜI CẢM ƠN Qua tháng thực tập Bộ môn Công Nghệ Tế Bào, Viện Khoa học Sự Sống đến em hoàn thành đề tài Để đạt kết ngày hôm nay, em xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm khoa, Viện Khoa Học Sự Sống, tạo điều kiện giúp đỡ em thời gian qua Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo Th.S Dương Mạnh Cường, Th.S Lê Thị Hảo người thầy, người cô trực tiếp hướng dẫn, tận tình bảo giúp đỡ em suốt trình nghiên cứu, học tập hoàn thành đề tài Cuối em xin chân thành cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè, động viên, giúp đỡ em suốt trình học tập nghiên cứu Em xin chân thành cảm ơn! Thái nguyên, ngày tháng năm 2014 Sinh viên thực Đỗ Thúy Linh ii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 4.1 Kết ảnh hưởng nồng độ BAP đến khả nhân chồi bạch đàn lai U6 (sau 25 ngày nuôi cấy) 32 Bảng 4.2 Kết ảnh hưởng kinetin đến khả nhân chồi bạch đàn lai U6 (sau 25 ngày nuôi cấy) 35 Bảng 4.3 Kết ảnh hưởng kết hợp kinetin IAA đến khả nhân chồi bạch đàn lai U6 (sau 25 ngày nuôi cấy) 37 Bảng 4.4 Kết ảnh hưởng NAA đến khả rễ chồi bạch đàn lai U6 (sau 20 ngày nuôi cấy) 39 Bảng 4.5 Kết ảnh hưởng IAA đến khả rễ chồi bạch đàn lai U6 (sau 20 ngày nuôi cấy) 41 Bảng 4.6 Kết ảnh hưởng IBA đến khả rễ chồi bạch đàn lai U6 (sau 20 ngày nuôi cấy) 42 Bảng 4.7.Kết nghiên cứu ảnh hưởng số giá thể đến tỉ lệ sống bạch đàn lai (sau 60 ngày trồng) 45 iii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 4.1 Biểu đồ thể ảnh hưởng BAP đến khả nhân nhanh chồi bạch đàn 33 Hình 4.1 Ảnh hưởng BAP đến khả nhân chồi bạch đàn lai U6 34 Hình 4.2 Biểu đồ thể ảnh hưởng kinetin đến khả nhân nhanh chồi bạch đàn 35 Hình 4.2 Ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân chồi bạch đàn lai U6 36 Hình 4.3 Biểu đồ thể ảnh hưởng Kinetin kết hợp với IAA đến khả nhân nhanh chồi bạch đàn 37 Hình 4.3 Ảnh hưởng kết hợp kinetin IAA đến khả nhân chồi bạch đàn lai U6 38 Hình 4.4 Biểu đồ thể ảnh hưởng NAA đến khả rễ chồi bạch đàn 40 Hình 4.5 Biểu đồ thể ảnh hưởng IAA đến khả rễ chồi bạch đàn 41 Hình 4.6 Biểu đồ thể ảnh hưởng IBA đến khả rễ chồi bạch đàn 43 Hình 4.6 Ảnh hưởng số chất điều tiết sinh trưởng đến khả rễ chồi giống bạch đàn lai U6 44 iv DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT 2,4-D : 2,4-diclorophenolxy acetic acid BAP : Benzyl amino purin ĐC : Đối chứng Cs : Cộng CT : Công thức CV : Coeficient of Variation ĐTST : Điều tiết sinh trưởng Đất tầng B: Đất IBA : Indole - - butylric acid Kinetin : 6-Furfurylaminopurine LSD : Least Singnificant Difference Test MS : Murashige & Skoog (1962) NAA : 1- Napthalene acetic acid NXB : Nhà xuất TB : Trung bình TDZ : Thidiazuron WPM : Woody Plant Medium v MỤC LỤC PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Yêu cầu đề tài 1.4 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung Bạch đàn 2.1.1 Nguồn gốc phân loại Bạch đàn 2.1.2 Đặc điểm thực vật học 2.2 Giá trị kinh tế cây bạch đàn urophylla 2.3 Khái quát nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.3.1 Sơ lược lịch sử nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.3.2 Khái niệm nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.3.3 Cơ sở khoa học phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.4 Các giai đoạn nuôi cấy mô tế bào thực vật 11 2.4.1 Chuẩn bị mẫu 11 2.4.2 Khử trùng mẫu cấy 11 2.4.3 Tạo chồi nhân nhanh 12 2.4.4 Tạo mô hoàn chỉnh 13 2.4.5 Chuyển in vitro vườn ươm 14 2.5 Các nhân tố ảnh hưởng tới trình nhân giống bạch đàn urophylla 14 2.5.1 Môi trường nghiên cứu 14 2.4.2 Các điều kiện nghiên cứu 19 2.4.3 Vật liệu nghiên cứu 20 2.4.4 Điều kiện vô trùng 20 2.4.5 Buồng nuôi cấy 21 2.5 Tình hình nghiên cứu bạch đàn nước giới 21 2.5.1 Tình hình nghiên cứu nhân giống bạch đàn giới 21 vi 2.5.2 Tình hình nghiên cứu nhân giống bạch đàn nước 22 PHẦN 3: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 25 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu: 25 3.1.2 Phạm vi nghiên cứu 25 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành nghiên cứu 25 3.2.1 Địa điểm nghiên cứu 25 3.2.2 Thời gian tiến hành 25 3.3 Nội dung nghiên cứu 25 3.4 Phương pháp nghiên cứu 26 3.5 Các tiêu theo dõi 31 3.6 Phương pháp xử lý số liệu 31 PHẦN 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 32 4.1 Kết ảnh hưởng số chất điều tiết sinh trưởng đến khả nhân chồi bạch đàn lai U6 32 4.2 Kết ảnh hưởng số chất điều tiết sinh trưởng đến khả rễ chồi bạch đàn lai U6 39 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng số giá thể đến tỷ lệ sống 44 bạch đàn lai 44 PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 47 5.1 Kết luận 47 5.2 Kiến nghị 47 TÀI LIỆU THAM KHẢO 48 I Tiếng Việt 48 II Tiếng Anh 50 PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Trong năm gần đây, công nghiệp Việt Nam ngày phát triển nhanh, có ngành sản xuất giấy đồ gỗ gia dụng Một số công nghiệp lâu năm trọng phát triển đem lại nhiều lợi ích kinh tế cho người nông dân có bạch đàn lai U6 (hay gọi bạch đàn nâu) Bạch đàn lai U6 có tên khoa học Eucalyptus urophylla S.T Blake, thuộc họ Sim Myrtaceae (Hoàng Thị Sản cs, 2009) [13].Là loại mọc tự nhiên có nguồn gốc từ châu Úc, chúng sinh trưởng phổ sinh thái rộng tập trung vùng thấp ven biển, mọc vùng cao (2000m so với mặt biển) hay vùng khô cạn (sa mạc bán sa mạc) Ở Việt Nam gây trồng bạch đàn từ năm 1930 hai miền Nam, Bắc Hiện bạch đàn trồng phổ biến nhiều nơi, mang lại nhiều lợi ích cho người như: Tăng hiệu kinh tế, nâng cao thu nhập nhiều người dân góp phần xóa đói giảm nghèo số tỉnh miền núi Việt Nam (Lê Đình Khả cs, 2002) [5] Giống bạch đàn urophylla loại có khả sinh trưởng nhanh, có biên độ sinh thái rộng, dễ trồng nhiều loại địa hình khác nhau, có khả chịu gió bão sử dụng để làm rừng phòng hộ, chống xói mòn đất đai Ngoài ra, giống bạch đàn có dạng thân thẳng, thon đẹp, tỉa cành tự nhiên tốt, không để lại vết sẹo thân nên thu hút nhiều người trồng số giống bạch đàn khác (Lê Đình Khả, 2003) [6] Bạch đàn lai công nghiệp dài ngày nước ta số quốc gia khác Ở nước ta, bạch đàn lai trồng sau 7-8 năm cho thu hoạch gỗ để làm nguyên liệu chế biến bột giấy Sau 15 năm, Bạch đàn khai thác làm gỗ gia dụng, gỗ xây dựng (Lê Sơn cs, 2005) [14] Hiện nay, nhu cầu sử dụng người ngày cao làm cho lượng gỗ giấy tiêu thụ ngày nhiều việc sản xuất chưa đáp ứng đủ yêu cầu diện tích trồng bạch đàn ngày thu hẹp dần lượng giống đưa thị trường chưa đáp ứng đủ yêu cầu người trồng (Đoàn Thị Mai cs, 2010) [10] Do đó, để đáp ứng cho thị trường sản xuất giấy sản xuất đồ gia dụng, cần phải có số lượng giống với chất lượng đảm bảo, ổn định đồng Trong đó, việc sản xuất giống hạt hay công nghệ giâm hom cho hiệu sản xuất không cao nguyên nhân như: Hệ số nhân giống chưa cao, giống sản xuất không hoàn toàn bệnh, sản xuất phụ thuộc vào thời vụ, khó khăn việc vận chuyển nơi khác nhau… gây ảnh hưởng đến giống suất sau (Nguyễn Đức Thành, 2000) [18] Nhằm đáp ứng nhu cầu thực tiễn trên, tiến hành đề tài: “Nghiên cứu nhân giống bạch đàn lai U6 phương pháp nuôi cấy mô tế bào” 1.2 Mục đích đề tài Nghiên cứu nhân giống bạch đàn lai U6 phương pháp nuôi cấy mô tế bào 1.3 Yêu cầu đề tài + Xác định ảnh hưởng số chất điều tiết sinh trưởng đến khả nhân chồi bạch đàn lai U6 + Xác định ảnh hưởng số chất điều tiết sinh trưởng đến khả rễ chồi bạch đàn lai U6 + Xác định ảnh hưởng số giá thể đến tỉ lệ sống bạch đàn lai U6 vườn ươm 42 * Nhận xét: Qua bảng 4.4 hình 4.4, sau 20 ngày nuôi cấy ta thấy môi trường không bổ sung IAA ta thấy số rễ đạt 1,01 rễ/cây, rễ ngắn, màu nâu Mặt khác, môi trường có bổ sung IAA số rễ/cây chiều dài TB rễ tăng dần theo công thức Trong đó, công thức môi trường bổ sung IAA với nồng độ 0,4 mg/l cho số rễ/cây cao đạt 2,92 số rễ/cây, chiều dài rễ 1,6 cm Bảng 4.6 Kết ảnh hƣởng IBA đến khả rễ chồi bạch đàn lai U6 (sau 20 ngày nuôi cấy) Chiều dài Công Nồng độ Tỷ lệ Số rễ/ thức IBA ( mg/l) rễ (%) (rễ) CT1(ĐC) 0,0 31.54 1.01 0.26 Nâu CT2 0,1 94.4* 3.8* 1.60* Trắng CT3 0,2 83.3* 3.4* 2.00* Trắng CT4 0,3 96.4* 4.3* 1.90* Trắng CT5 0,4 83.2* 3.1* 1.60* Trắng CT6 0,5 87.0* 3.6* 1.80* Trắng LSD 5.03 0.95 0.12 CV% 3.50 1.60 4.20 TB rễ Màu sắc rễ (cm) Ghi chú: (*) Chất lượng rễ xấu; (**) Chất lượng rễ trung bình; (***) Chất lượng rễ tốt; ns: sai khác ý nghĩa; * sai khác có ý nghĩa 43 Hình 4.6 Biểu đồ thể ảnh hưởng IBA đến khả rễ chồi bạch đàn (sau 20 ngày nuôi cấy) * Nhận xét: Qua bảng 4.6 hình 4.6, nhận thấy tỷ lệ rễ biến động từ 31.54% đến 96,40% Sau 20 ngày nuôi cấy, môi trường không bổ sung IBA ta thấy tỷ lệ rễ đạt 31.54%, số rễ/cây đạt 1.01 rễ, chiều dài rễ ngắn, chất lượng rễ kém, rễ có màu nâu Trong môi trường có bổ sung IBA, ta thấy nồng độ IBA 0,3 mg/l cho tỷ lệ rễ tốt đạt 96,40 %, số rễ/cây đạt 4.30 rễ, chiều dài rễ cao, chất lượng rễ tốt, rễ có màu trắng Tăng nồng độ IBA tỷ lệ rễ tăng nhẹ từ 83,20% lên 87,00%, chất lượng rễ trung bình Theo tác giả Lê Sơn cs (2002) nghiên cứu nuôi cấy mô thành công cho giống bạch đàn lai U29C3 Kết cho thấy môi trường rễ thích hợp môi trường MS* bổ sung IBA nồng độ 1.5mg/l tỷ lệ rễ đạt 97.3% (Lê Sơn cs, 2002) [13] Darus H Ahmas thuộc viện nghiên cứu lâm nghiệp Malaysia đưa kết rễ Bạch đàn E pellita Những chồi nhân nhanh có chiều cao >0,5cm cấy vào môi trường tạo rễ chất điều hoà sinh trưởng tốt 44 cho tạo rễ IBA 1000 ppm với tỷ lệ rễ 40% (O L Gamborg, G C Phillips, 1997) [26] So sánh kết nghiên cứu với công trình công bố cho thấy kết nghiên cứu tác giả có khác nhau, điều giải thích khác biệt giống bạch đàn thành phần môi trường tác giả khác nên dẫn đến kết khác IBA 0,0mg/l IBA 0,3mg/l Hình 4.6 Chồi bạch đàn lai U6 môi trƣờng rễ có bổ sung chất điều tiế sinh trƣởng (sau 25 ngày nuôi cấy) 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng số giá thể đến tỷ lệ sống bạch đàn lai Đây giai đoạn cuối quy trình nhân giống in vitro, có ý nghĩ định đến hiệu phương pháp nhân giống Các có đủ rễ, thân, từ bình nuôi cấy đưa vườn ươm Cây đưa vườn ươm có tỷ lệ sống cao hiệu kỹ thuật nhân giống lớn, ý nghĩa thuyết phục khả ứng dụng cao 45 Bảng 4.7.Kết nghiên cứu ảnh hƣởng số giá thể đến tỉ lệ sống bạch đàn lai (sau 60 ngày trồng) Công Giá thể thức CT1 Đất tầng B ( ĐC) CT2 50% đất tầng B + 50% trấu hun CT3 50% đất tầng B + 50% bã nấm CT4 50% đất tầng B+ 30% trấu hun + 20% bã nấm CT5 50% đất tầng B + 30% trấu hun + 20% phân gà Tỷ lệ sống Số Số (cây) sống (cây) 30 15 50,00 30 27 90,00 30 21 70,00 30 16 53,33 30 19 63,33 (%) sau 60 ngày CV% 5,9 LSD 7,3 * Nhận xét: Qua bảng 4.7 ta thấy CT2 cho tỷ lệ sống cao đạt 90%, CT tỷ lệ sống thấp đạt 50% sau 30 ngày nuôi cấy Với giá trị LSD đạt 7,3 công thức 2, công thức 3, công thức sai khác có ý nghĩa với đối chứng Theo dõi kết sau 60 ngày trồng, tỷ lệ sống in vitro giá thể đất tầng B + trấu hun (1:1) đạt 90% sinh trưởng phát triển tốt Trên giá thể đất tầng B phát triển (lá vàng, thối gốc), tỷ lệ sống thấp đạt 50% Theo Đoàn Thị Mai cs (2000), đưa giá thể thích hợp cho Bạch đàn 45% đất tầng B + 45% trấu hun + 10% phân chuồng hoai mục cho tỷ lệ 46 phát triển đạt 93.33% sinh trưởng phát triển tốt (Đoàn Thị Mai cs,2000) [9] Kết lý giải sau: Giá đất tầng B + trấu hun với tỷ lệ 1:1 có độ tơi xốp, giàu dinh dưỡng dễ thích nghi, bị úng hay thối rữa, phát triển tốt Giá thể có chứa 100% đất tưới nước, đất dễ bị sít xuống, độ tơi xốp, khó thoát nước, rễ bị chẹt khó hút nước chất dinh dưỡng Kết luận: Giá thể thích hợp cho sinh trưởng phát triển Bạch đàn gian đoạn vườn ươm đất tầng B + trấu hun với tỷ lệ 1:1, cho tỷ lệ sống cao, phát triển tốt 47 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Môi trường MS* có bổ sung 30g/l saccarose + 100mg/l myo inositol + 5,5g/l agar + BAP 0,6 mg/l; pH = 5,7 thích hợp cho nhân nhanh chồi bạch đàn in vitro cho hệ số nhân chồi đạt 3,55 lần chiều cao trung bình chồi đạt 3,47cm Môi trường MS* có bổ sung saccarose 30g/l + myo inositol 0,1g/l + agar 5,5g/l + IBA 0,3mg/l; pH= 5,7 môi trường rễ thích hợp tạo hoàn chỉnh cho trung bình số rễ/cây đạt 4,30 rễ/cây chiều dài trung bình rễ đạt 1,90 cm, tỷ lệ rễ đạt 96,40% Giá thích hợp cho Bạch đàn nuôi cấy mô cho ỷ lệ sống cao đất tầng B + trấu hun với tỷ lệ 1:1 cho tỷ lệ sống đạt 90,00 %, phát triển tốt 5.2 Kiến nghị Cần tiếp tục đưa giống bạch đàn nuôi cấy mô sản xuất diện rộng để khảo sát sinh trưởng, phát triển, suất kiểm tra chất lượng giống Đưa công nghệ sản xuất bạch đàn kỹ thuật nuôi cấy mô quy mô công nghiệp nhằm cung cấp giống phục vụ sản xuất, thương phẩm 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tiếng Việt Nguyễn Thị Lý Anh cs (2008), Nhân giống bạch đàn urophylla U6 kỹ thuật thủy canh, Tạp chí Khoa học Phát triển 2008: Tập VI, Số 4: 305-311 Ngô Xuân Bình (2010), Nuôi cấy mô tế bào thực vật - Cơ sở lý luận ứng dụng, NXB Khoa học - Kỹ thuật, Hà Nội Phạm Tiến Dũng (2003), Xử lý kết thí nghiệm máy tính IRRISTAT 4.0 Windows, NXB Nông Nghiệp Đặng Ngọc Hùng (2009), Nghiên cứu nhân giống dòng bạch đàn lai UE35 UE56 Eucalyptus urophylla E Exserta phương pháp nuôi cấy mô, luận văn thạc sĩ lâm sinh, trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên Lê Đình Khả cs (2002), Công nghệ nhân giống sản xuất giống trồng, giống lâm nghiệp giống vật nuôi, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, trang 166 - 182 Lê Đình Khả (2003), Chọn tạo nhân giống cho số loài trồng rừng chủ yếu Việt Nam, NXB Nông nghiệp, Hà Nội Nguyễn Hoàng Lộc (2006), Giáo trình công nghệ tế bào, Nhà xuất đại học Huế, TP Huế Đoàn Thị Mai (2004), Báo cáo kết thực đề tài: KC.04.08 Hoàn thiện quy trình nhân nhanh giống trồng rừng suất cao công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật cho số dòng keo lai, bạch đàn lai keo tràm, Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam Đoàn Thị Mai cs (2000), Kết bước đầu nhân giống bạch đàn lai phương pháp nuôi cấy mô phân sinh, Tạp chí Lâm Nghiệp, số 10 2000 49 10 Đoàn Thị Mai cs (2010), Báo cáo tổng hợp kết khoa học, Nghiên cứu nhân nhanh giống keo lai tự nhiên, keo lai nhân tạo, bạch đàn uro, bạch đàn lai nhân tạo( chọn tạo) lát hoa công nghệ tế bào, Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam 11 Đoàn Thị Nga, 1997,Trung tâm nghiên cứu nguyên liệu giấy Phù Ninh, Ứng dụng công nghệ nuôi cấy mô nhân hom lâm nghiệp Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam 12 Nguyễn Hoàng Nghĩa (2000), Chọn giống bạch đàn Eucalyptus theo sinh trưởng kháng bệnh Việt Nam, NXB Nông nghiệp, Hà Nội 13 Hoàng Thị Sản cs (2009), Giáo trình Phân loại học thực vật, NXB Giáo dục 14 Lê Sơn cs (2005), Nhân giống số loài trồng rừng có suất, chất lượng cao phương pháp nuôi cấy mô, Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam 15 Nguyễn Ngọc Tân, Trần Hồ Quang (1997).Nhân giống lai bạch đàn liễu bạch đàn trắng phương pháp nuôi cấy mô.Kết nghiên 117 cứu Khoa học chọn giống rừng.Nhà xuất nông nghiệp, trang 103- 107 16 Nguyễn Ngọc Tân cs (1997) Nhân giống Keo Lai nuôi cấy mô phân sinh.Kết nghiên cứu Khoa học chọn giống rừng Tập 2, Chủ biên Lê Đình Khả Nhà xuất Nông nghiệp, trang 147 - 152 17 Nguyễn Quang Thạch (2000), Giáo trình sinh lý thực vật, NXB Nông nghiệp, Hà Nội 18 Nguyễn Đức Thành (2000), Nuôi cấy mô tế bào thực vật - nghiên cứu ứng dụng, NXB Nông nghiệp, Hà Nội 19 Nguyễn Kim Thanh (2005), Giáo trình sinh lý học thực vật, Nxb Giáo dục, Hà Nội 50 20 Nguyễn Quang Thạch cs (2009), Giáo trình sở công nghệ sinh học, Nxb Nông Nghiệp, Hà Nội 21 Đỗ Năng Vinh (2002), Công nghệ sinh học trồng, Nxb Nông Nghiệp, Hà Nội 22 Vũ Văn Vụ cs (2008), Giáo trình công nghệ sinh học, Nxb Giáo Dục II Tiếng Anh 23 Bhat K M and Hwanok Ma (2002), Teak growers unite, in ITTO tropical forest update, pp - 24 Dodd J H., Roberts L W.(1999), Experiments in plant tissue culture, Cambridge University press, United Kingdom 25 Eldridge K, J Davidson, C Harwood and G van Wyk (1996) Eucalyptus provenances for short rotation forestry Experiment Station, HARC, April 10,1996 25 Harwood, C E., 1998 Eucalyptus pellita, An annotated Biography CSIROnForestry and Forest Products, Australia 70 pp 26 Gamborg O L, G C Phillips (1997), “Plant Cell, Tissue and Organ culture-bG Fundamental Methods cell spinger”, Lab Manual 27 Higa, A.R., & Resende, M D V., 1994 Breeding acacia mearnsii in Southern Brazil.Australia Tree Species Research in China ACIAR Proceedings, No.48, Ed A G Brown, pp 158 - 160 28 Sharma J K (1994), Pathological investigations in forest nurseries and plantations in Vietnam, FAO VIE/92/022 Hanoi, Vietnam 46 p 29 Trindate, H Ferreina, J G Pais, M S Aloni, R (1990), The role of Cytokinin and auxin in rapid multiplication of shoots of Eucalyptus globolus grown in vitro, Aust For 53(4), pp 221-223 Kết ảnh hƣởng BAP đến khả nhân nhanh chồi bạch đàn BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE BAP 25/ 5/15 11:20 :PAGE VARIATE V003 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 4.90185 980370 638.00 0.000 R 120333E-01 601666E-02 3.92 0.055 * RESIDUAL 10 153663E-01 153663E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 4.92925 289956 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCTBC FILE BAP 25/ 5/15 11:20 :PAGE VARIATE V004 CCTBC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 2.02885 405770 71.10 0.000 R 653333E-02 326667E-02 0.57 0.586 * RESIDUAL 10 570668E-01 570668E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 2.09245 123085 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BAP 25/ 5/15 11:20 :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 3 HSNC 1.51000 1.75000 1.65000 3.00000 2.11000 2.49000 CCTBC 1.60000 1.90000 2.09000 2.60000 1.81000 1.65000 SE(N= 3) 0.226321E-01 0.436145E-01 5%LSD 10DF 0.713145E-01 0.137431 MEANS FOR EFFECT R R NOS 6 HSNC 2.05333 2.08500 2.11667 CCTBC 1.91833 1.94167 1.96500 SE(N= 6) 0.160033E-01 0.308401E-01 5%LSD 10DF 0.504269E-01 0.971783E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BAP 25/ 5/15 11:20 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE OBS HSNC CCTBC GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T (N= 18) SD/MEAN | NO BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | | | 18 2.0850 0.53848 0.39200E-01 1.9 0.0000 18 1.9417 0.35084 0.75543E-01 3.9 0.0000 |R | | 0.0549 0.5858 | | | Kết ảnh hƣởng Kinetin đến khả nhân nhanh chồi bạch đàn BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE KI 25/ 5/15 11:32 :PAGE VARIATE V003 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 7.41820 1.48364 256.24 0.000 R 270000E-02 135000E-02 0.23 0.798 * RESIDUAL 10 579005E-01 579005E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 7.47880 439929 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCTBC FILE KI 25/ 5/15 11:32 :PAGE VARIATE V004 CCTBC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 16.6894 3.33788 ****** 0.000 R 490000E-02 245000E-02 0.75 0.499 * RESIDUAL 10 325014E-01 325014E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 16.7268 983929 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KI 25/ 5/15 11:32 :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 3 HSNC 1.51000 3.60000 2.80000 3.00000 3.16000 2.81000 CCTBC 1.60000 4.75000 3.65000 3.23000 3.45000 2.62000 SE(N= 3) 0.439319E-01 0.329147E-01 5%LSD 10DF 0.138431 0.103716 MEANS FOR EFFECT R R NOS 6 HSNC 2.82833 2.81333 2.79833 CCTBC 3.19500 3.22000 3.23500 SE(N= 6) 0.310646E-01 0.232742E-01 5%LSD 10DF 0.978856E-01 0.733380E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KI 25/ 5/15 11:32 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE OBS HSNC CCTBC GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T (N= 18) SD/MEAN | NO BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | | | 18 2.8133 0.66327 0.76092E-01 2.7 0.0000 18 3.2167 0.99193 0.57010E-01 1.8 0.0000 |R | | 0.7979 0.4989 | | | Kết ảnh hƣởng kết hợp BAP với kinetin đến khả nhân nhanh chồi bạch đàn BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE KI+IA 25/ 5/15 11:47 :PAGE VARIATE V003 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 5.10180 1.02036 316.23 0.000 R 481333E-01 240667E-01 7.46 0.011 * RESIDUAL 10 322667E-01 322667E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 5.18220 304835 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCTBC FILE KI+IA 25/ 5/15 11:47 :PAGE VARIATE V004 CCTBC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 2.97865 595730 184.63 0.000 R 481334E-01 240667E-01 7.46 0.011 * RESIDUAL 10 322666E-01 322666E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 3.05905 179944 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KI+IA 25/ 5/15 11:47 :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 3 HSNC 3.60000 4.16000 4.60000 5.10000 4.32000 3.60000 CCTBC 3.60000 3.16000 3.93000 4.40000 3.32000 3.60000 SE(N= 3) 0.327957E-01 0.327956E-01 5%LSD 10DF 0.103340 0.103340 MEANS FOR EFFECT R R NOS 6 HSNC 4.16667 4.23000 4.29333 CCTBC 3.60500 3.66833 3.73167 SE(N= 6) 0.231900E-01 0.231900E-01 5%LSD 10DF 0.730727E-01 0.730726E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KI+IA 25/ 5/15 11:47 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE OBS HSNC CCTBC GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T (N= 18) SD/MEAN | NO BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | | | 18 4.2300 0.55212 0.56804E-01 1.3 0.0000 18 3.6683 0.42420 0.56804E-01 1.5 0.0000 |R | | 0.0105 0.0105 | | | Kết ảnh hƣởng NAA đến khả rễ chồi bạch đàn BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR/C FILE RARENAA 25/ 5/15 13:52 :PAGE VARIATE V003 SR/C LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 11.6464 2.32928 ****** 0.000 R 533332E-03 266666E-03 0.25 0.786 * RESIDUAL 10 106672E-01 106672E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 11.6576 685741 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDTBR FILE RARENAA 25/ 5/15 13:52 :PAGE VARIATE V004 CDTBR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 2.40280 480560 223.86 0.000 R 533334E-03 266667E-03 0.12 0.884 * RESIDUAL 10 214666E-01 214666E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 2.42480 142635 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLRR FILE RARENAA 25/ 5/15 13:52 :PAGE VARIATE V005 TLRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 1151.20 230.241 87.96 0.000 R 2.25275 1.12637 0.43 0.666 * RESIDUAL 10 26.1753 2.61753 * TOTAL (CORRECTED) 17 1179.63 69.3901 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RAREIAA 25/ 5/15 13:52 :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS SR/C CDTBR TLRR 1.13000 0.310000 60.2400 2.20000 1.02000 74.2200 3 3.34000 1.05000 65.4400 3.55000 1.45000 83.3400 2.85000 1.35000 70.1333 2.37000 1.10000 61.2400 SE(N= 3) 0.188567E-01 0.267499E-01 0.934083 5%LSD 10DF 0.594180E-01 0.842897E-01 2.94333 MEANS FOR EFFECT R R NOS SR/C CDTBR TLRR 2.58000 1.04000 68.6083 2.57333 1.04667 69.2800 2.56667 1.05333 69.4183 SE(N= 6) 0.133337E-01 0.189150E-01 0.660496 5%LSD 10DF 0.420149E-01 0.596019E-01 2.08125 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RARENAA 25/ 5/15 13:52 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T |R | (N= 18) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | SR/C 18 2.5733 0.82809 0.32661E-01 1.3 0.0000 0.7856 CDTBR 18 1.0467 0.37767 0.46332E-01 4.4 0.0000 0.8842 TLRR 18 69.102 8.3301 1.6179 2.3 0.0000 0.6658 Kết ảnh hƣởng IBA đến khả rễ chồi bạch đàn BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR/C FILE RAREIBA 25/ 5/15 13:30 :PAGE VARIATE V003 SR/C LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 2.39700 479400 72.31 0.000 R 147000E-01 734998E-02 1.11 0.369 * RESIDUAL 10 663001E-01 663001E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 2.47800 145765 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDTBR FILE RAREIBA 25/ 5/15 13:30 :PAGE VARIATE V004 CDTBR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 5.19100 1.03820 175.77 0.000 R 213333E-02 106667E-02 0.18 0.838 * RESIDUAL 10 590667E-01 590667E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 5.25220 308953 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLRR FILE RAREIBA 25/ 5/15 13:30 :PAGE VARIATE V005 TLRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 541.139 108.228 12.93 0.001 R 131.809 65.9044 7.87 0.009 * RESIDUAL 10 83.6910 8.36910 * TOTAL (CORRECTED) 17 756.639 44.5082 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RAREIBA 25/ 5/15 13:30 :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS SR/C CDTBR TLRR 3.43000 0.410000 83.3300 3.77000 1.60000 94.4400 3 3.35000 2.02000 83.3000 4.27000 1.90000 96.4400 3.12000 1.64000 83.2200 3.60000 1.83000 87.0333 SE(N= 3) 0.470107E-01 0.443722E-01 1.67024 5%LSD 10DF 0.148132 0.139818 5.26298 MEANS FOR EFFECT R R NOS SR/C CDTBR TLRR 3.55500 1.55333 84.9983 3.59000 1.56667 87.3433 3.62500 1.58000 91.5400 SE(N= 6) 0.332416E-01 0.313759E-01 1.18104 5%LSD 10DF 0.104745 0.988665E-01 3.72149 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RAREIBA 25/ 5/15 13:30 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T |R | (N= 18) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | SR/C 18 3.5900 0.38179 0.81425E-01 2.3 0.0000 0.3688 CDTBR 18 1.5667 0.55584 0.76855E-01 4.9 0.0000 0.8381 TLRR 18 87.961 6.6714 2.8929 3.3 0.0005 0.0089 Kết ảnh hƣởng IAA đến khả rễ chồi bạch đàn BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR/C FILE RAREIAA 25/ 5/15 13:12 :PAGE VARIATE V003 SR/C LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 12.8712 2.57424 937.20 0.000 R 133333E-01 666667E-02 2.43 0.137 * RESIDUAL 10 274672E-01 274672E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 12.9120 759529 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDTBR FILE RAREIAA 25/ 5/15 13:12 :PAGE VARIATE V004 CDTBR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 3.20860 641720 307.04 0.000 R 271000E-01 135500E-01 6.48 0.016 * RESIDUAL 10 209002E-01 209002E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 3.25660 191565 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLRR FILE RAREIAA 25/ 5/15 13:12 :PAGE VARIATE V005 TLRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 1920.73 384.146 24.75 0.000 R 6.81008 3.40504 0.22 0.808 * RESIDUAL 10 155.183 15.5183 * TOTAL (CORRECTED) 17 2082.73 122.513 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RAREIAA 25/ 5/15 13:12 :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS SR/C CDTBR TLRR 1.01000 0.260000 65.5700 2.82000 1.04000 75.2000 3 3.31000 1.30000 83.3300 3.19000 1.35000 88.8500 3.60000 1.60000 98.0000 2.99000 1.21000 87.0333 SE(N= 3) 0.302584E-01 0.263946E-01 2.27437 5%LSD 10DF 0.953455E-01 0.831703E-01 7.16663 MEANS FOR EFFECT R R NOS SR/C CDTBR TLRR 2.78667 1.07833 82.7750 2.82000 1.12833 82.3800 2.85333 1.17333 83.8367 SE(N= 6) 0.213960E-01 0.186638E-01 1.60822 5%LSD 10DF 0.674194E-01 0.588103E-01 5.06757 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RAREIAA 25/ 5/15 13:12 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T |R | (N= 18) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | SR/C 18 2.8200 0.87151 0.52409E-01 1.9 0.0000 0.1372 CDTBR 18 1.1267 0.43768 0.45717E-01 4.1 0.0000 0.0157 TLRR 18 82.997 11.069 3.9393 4.7 0.0000 0.8082