Nghiên cứu kỹ thuật sản xuất giống nhân tạo sá sùng (sipunculus nudus linnaeus, 1767) tại khánh hòa

iii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan mọi kết quả của đề tài “Nghiên cứu kỹ thuật sản xuất giống nhân tạo sá sùng Sipunculus nudus tại Khánh Hòa” là công trình nghiên cứu của cá nhân tôi

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG

-o0o -

LÊ THỊ THU HƯƠNG

NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT SẢN XUẤT GIỐNG NHÂN TẠO

SÁ SÙNG (Sipunculus nudus Linnaeus, 1767)

TẠI KHÁNH HÒA

LUẬN VĂN THẠC SĨ

KHÁNH HÒA - 2016

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG

-o0o -

LÊ THỊ THU HƯƠNG

NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT SẢN XUẤT GIỐNG NHÂN TẠO

SÁ SÙNG (Sipunculus nudus Linnaeus, 1767)

Người hướng dẫn khoa học:

1.TS Ngô Anh Tuấn

2 TS Võ Thế Dũng Chủ tịch Hội đồng:

TS Nguyễn Tấn Sỹ

Khoa Sau đại học:

KHÁNH HÒA - 2016

iii

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan mọi kết quả của đề tài “Nghiên cứu kỹ thuật sản xuất giống

nhân tạo sá sùng (Sipunculus nudus) tại Khánh Hòa” là công trình nghiên cứu của

cá nhân tôi và chưa từng được công bố trong bất cứ công trình khoa học nào khác cho tới thời điểm này

Khánh Hòa, ngày tháng năm 201

Tác giả luận văn

Lê Thị Thu Hương

iv

LỜI CẢM ƠN

Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến quý thầy, cô Viện Nuôi trồng Thủy sản, Trường Đại học Nha Trang đã giảng dạy và giúp đỡ trong suốt thời gian tôi học tập và nghiên cứu tại Trường

Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến thầy TS Ngô Anh Tuấn, TS Võ Thế Dũng đã tận tình giúp đỡ, hướng dẫn, động viên và tạo mọi điều kiện thuận lợi nhất cho em trong suốt quá trình học tập và thực hiện đề tài

Xin gửi lời cảm ơn tới Ban lãnh đạo Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản III, Phòng Sinh học Thực nghiệm đã tạo điều kiện giúp đỡ trong quá trình học tập và thực hiện luận văn tốt nghiệp

Xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè đã động viện, giúp đỡ tôi trong quá trình học tập và hoàn thành luận văn

Khánh Hòa, ngày tháng năm 201

Tác giả luận văn

Lê Thị Thu Hương

v

MỤC LỤC

LỜI CAM ĐOAN iii

LỜI CẢM ƠN iv

MỤC LỤC v

DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT vii

DANH MỤC BẢNG viii

DANH MỤC HÌNH ix

TRÍCH YẾU LUẬN VĂN x

MỞ ĐẦU 1

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

1.1 Tình hình nghiên cứu về sá sùng trên thế giới 3

1.1.1 Vị trí phân loại và phân bố 3

1.1.2 Đặc điểm hình thái cấu tạo 3

1.1.3 Đặc điểm dinh dưỡng và sinh trưởng 4

1.1.4 Đặc điểm sinh sản 5

1.1.5 Nghiên cứu kỹ thuật sản xuất giống nhân tạo và nuôi thương phẩm 7

1.2 Tình hình nghiên cứu về sá sùng ở Việt Nam 9

CHƯƠNG 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13

2.1 Đối tượng, thời gian và địa điểm nghiên cứu 13

2.2 Nội dung nghiên cứu 13

2.3 Phương pháp nghiên cứu 14

2.3.1 Kỹ thuật nuôi thành thục sá sùng bố mẹ 14

2.3.2 Kỹ thuật kích thích sinh sản sá sùng bố mẹ 15

2.3.3 Kỹ thuật ương nuôi ấu trùng sá sùng giai đoạn trôi nổi 16

2.3.3.1 Ảnh hưởng của thức ăn đến sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng 16

2.3.3.2 Ảnh hưởng của mật độ ương đến sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng 16

2.3.4 Kỹ thuật ương nuôi ấu trùng sá sùng giai đoạn sống đáy 17

2.3.4.1 Ảnh hưởng của thức ăn đến sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng 17

2.3.4.2 Ảnh hưởng của mật độ ương đến sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng 18

vi

2.3.5 Phương pháp thu thập và xử lý số liệu 18

2.3.5.1 Phương pháp xác định các thông số môi trường 18

2.3.5.2 Các công thức tính toán 18

2.3.5.3 Phương pháp xử lý số liệu 19

CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 20

3.1 Kỹ thuật nuôi thành thục sá sùng bố mẹ 20

3.1.1 Điều kiện môi trường bể nuôi 20

3.1.2 Kết quả nuôi thành thục sá sùng bố mẹ 21

3.2 Kỹ thuật kích thích sinh sản 23

3.3 Kỹ thuật ương nuôi ấu trùng sá sùng giai đoạn trôi nổi (Pelagosphera) 25

3.3.1 Ảnh hưởng của thức ăn lên sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng 25

3.3.2 Ảnh hưởng của mật độ ương lên sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng 27

3.4 Kỹ thuật ương nuôi ấu trùng giai đoạn sống đáy 29

3.4.1 Ảnh hưởng của thức ăn lên sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng 29

3.4.2 Ảnh hưởng của mật độ ương lên sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng 31

CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 33

4.1 Kết luận 33

4.2 Kiến nghị 33

TÀI LIỆU THAM KHẢO 34

vii

DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT

viii

DANH MỤC BẢNG

Bảng 3.1: Điều kiện môi trường bể nuôi thành thục 20 Bảng 3.2: Kết quả nuôi thành thục sá sùng bố mẹ 22 Bảng 3.3: Kết quả kích thích sinh sản sá sùng 23 Bảng 3.4: Sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng Pelagosphera sử dụng các loại thức

ăn khác nhau 25 Bảng 3.5: Sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng Pelagosphera ở các mật độ ương khác nhau 28 Bảng 3.6: Sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng giai đoạn sống đáy sử dụng các loại

thức ăn khác nhau 29 Bảng 3.7: Sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng giai đoạn sống đáy ở các mật độ

ương khác nhau 31

ix

DANH MỤC HÌNH

Hình 1.1: Con đường phát triển của ấu trùng thuộc ngành Sipuncula 7

Hình 2.1: Sá sùng Sipunculus nudus (Linnaeus, 1767) 13

Hình 2.2: Sơ đồ khối nội dung nghiên cứu 14

Hình 3.1: Bể nuôi thành thục sá sùng bố mẹ 21

Hình 3.2: Sá sùng bố mẹ thành thục sinh dục trong quá trình nuôi 23

Hình 3.3: Sá sùng sinh sản sau khi kích thích 24

Hình 3.4: Tỷ lệ sống của ấu trùng Pelagosphera sử dụng các loại thức ăn khác nhau 27 Hình 3.5: Xác định sinh trưởng của ấu trùng sá sùng giai đoạn sống đáy 30

x

TRÍCH YẾU LUẬN VĂN

Sá sùng (Sipunculus nudus) là loài động vật thuộc ngành sâu đất có giá trị dinh

dưỡng cao và giá trị kinh tế lớn, chúng phân bố chủ yếu ở các bãi triều và rừng ngập mặn ven biển của nước ta Hiện nay, sá sùng cung cấp cho thị trường hoàn toàn là khai thác từ tự nhiên, phục vụ cho tiêu dùng nội địa và xuất khẩu Nhờ giá trị thương phẩm cao nên việc khai thác sá sùng đã mang lại nguồn thu nhập lớn cho người dân ven biển Vì thế, hàng năm ngư dân khai thác sá sùng quá mức, không theo mùa vụ, không đúng kích cỡ đã làm cạn kiệt nguồn lợi sá sùng ở các tỉnh Quảng Ninh, Hải Phòng, Khánh Hòa Do đó, nguồn lợi sá sùng đang cạn kiệt nghiêm trọng Mặc dù ở nước ta,

đã có một số công trình nghiên cứu về đặc điểm sinh học, sinh sản và thử nghiệm sản xuất thành công con giống sá sùng, nhưng các nghiên cứu này mới chỉ được thực hiện

ở quy mô nhỏ, tỷ lệ sống của ấu trùng thấp và không ổn định Do đó, việc thực hiện đề

tài “Nghiên cứu kỹ thuật sản xuất giống nhân tạo sá sùng (Sipunculus nudus) tại

Khánh Hòa” nhằm bổ sung cơ sở khoa học cho việc xây dựng thành công quy trình

sản xuất giống nhân tạo sá sùng, giúp chủ động cung cấp nguồn giống ổn định và có chất lượng cho người nuôi, từ đó phát triển nghề nuôi thương phẩm sá sùng tại Khánh Hòa là hết sức cần thiết và cấp bách

Đề tài được thực hiện nhằm mục tiêu nghiên cứu xây dựng qui trình sản xuất giống nhân tạo sá sùng tại Khánh Hòa từ kỹ thuật nuôi thành thục và kích thích sinh sản sá sùng bố mẹ, tới các kỹ thuật ương nuôi ấu trùng từ giai đoạn trôi nổi đến giai đoạn sống đáy

Sá sùng bố mẹ được nuôi thành thục trong bể xi măng hình chữ nhật và được cho

ăn bằng cá tạp xay nhuyễn Khẩu phần thức ăn hàng ngày từ 6 - 8% khối lượng thân

Sá sùng khi thành thục sinh dục được kích thích sinh sản bằng các phương pháp nhiệt khô, nhiệt ướt và nhiệt đáy Ở giai đoạn ấu trùng trôi nổi, 3 nghiệm thức thí nghiệm ảnh hưởng của thức ăn (tảo tươi, thức ăn tổng hợp và hỗn hợp tảo tươi kết hợp thức ăn tổng hợp) và 4 nghiệm thức mật độ ương (300, 500, 700 và 900 con/L) lên sinh trưởng

và tỷ lệ sống của ấu trùng đã được thực hiện Trong khi đó, ở giai đoạn ấu trùng sống đáy, sử dụng 4 loại thức ăn (tảo tươi, thức ăn tổng hợp, thức ăn chế biến và hỗn hợp

xi

tảo tươi kết hợp với thức ăn chế biến) và 4 mật độ ương khác nhau (250, 300, 350 và

400 con/m2) để đánh giá sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng

Kết quả nghiên cứu cho thấy, sá sùng bố mẹ nuôi thành thục trong bể xi măng sử dụng thức ăn chế biến cho tỷ lệ sống là 74,32 ± 2,9% và tỷ lệ thành thục là 70,56 ± 14,3%

Cả 3 phương pháp kích thích sinh sản bằng nhiệt độ đều có hiệu quả đối với sá sùng, trong đó phương pháp kích thích bằng nhiệt khô sá sùng sinh sản nhanh nhất (50

± 10 phút) nhưng phương pháp kích thích bằng nhiệt đáy cho tỷ lệ thụ tinh và tỷ lệ nở của ấu trùng là cao nhất (tương ứng 88,8 ± 0,1% và 96,2 ± 0,3%)

Trong giai đoạn ương nuôi ấu trùng trôi nổi: tảo tươi là thức ăn tốt nhất cho sinh trưởng (44,1± 0,4 µm/ngày) và tỷ lệ sống (87,8 ± 1,5 %) của ấu trùng Mật độ ương thích hợp nhất là 500 con/L (tốc độ sinh trưởng tuyệt đối về chiều dài: 41,0 ± 0,5 µm/ngày, tỷ lệ sống: 91,2 ± 0,2 %)

Ở giai đoạn ấu trùng sống đáy: thức ăn tốt nhất cho sinh trưởng và tỷ lệ sống của

ấu trùng là tảo tươi kết hợp thức ăn chế biến (tốc độ sinh trưởng tuyệt đối về chiều dài: 0,21mm/ngày, tốc độ sinh trưởng tuyệt đối về khối lượng: 0,0043 g/ngày, tỷ lệ sống: 27,68 %) Mật độ ương thích hợp nhất là 300 con/m2 (tốc độ sinh trưởng tuyệt đối về chiều dài: 0,23 mm/ngày, tốc độ sinh trưởng tuyệt đối về khối lượng: 0,0039 g/ngày, tỷ

lệ sống: 28,3 %)

1

MỞ ĐẦU

Sá sùng (Sipunculus nudus Linnaeus, 1767) là loài động vật thuộc ngành sâu đất,

phân bố chính ở các vùng bãi triều và rừng ngập mặn, nơi có nền đáy cát hoặc cát bùn Theo Đỗ Văn Nhượng (1998), tại Việt Nam sá sùng phân bố với trữ lượng cao ở các bãi triều ven biển của các tỉnh Quảng Ninh, Hải Phòng, Khánh Hòa và một số tỉnh phía Nam Sá sùng là đối tượng có giá trị dinh dưỡng cao và giá trị kinh tế lớn, thịt sá sùng có chứa 17 loại chất khoáng khác nhau, 8 axít amin không thay thế và 10 axít amin có thể thay thế khác (Nguyễn Thụy Dạ Thảo và ctv, 2004) Hiện nay, giá thành

sá sùng trên thị trường dao động từ 200 – 300 nghìn đồng/kg tươi

Những năm gần đây, sá sùng thường được thu mua để xuất khẩu sang một số nước như Trung Quốc, Hàn Quốc Nhờ giá trị thương phẩm cao nên việc khai thác sá sùng đã mang lại nguồn thu nhập lớn cho người dân ven biển Vì thế, hàng năm ngư dân khai thác sá sùng quá mức, không theo mùa vụ, không đúng kích cỡ đã làm cạn kiệt nguồn lợi sá sùng ở các tỉnh Quảng Ninh, Hải Phòng, Khánh Hòa Trong khi đó,

ở nước ta hiện nay mới chỉ có một số công trình nghiên cứu về đặc điểm phân bố, sinh học sinh sản và thử nghiệm sản xuất giống nhân tạo sá sùng tại Khánh Hòa (Đỗ Văn Nhượng, 1998; Nguyễn Thị Thu Hà và ctv, 2004; Nguyễn Minh Châu và ctv, 2012) Mặc dù các kết quả nghiên cứu trên đã sản xuất thành công con giống sá sùng, nhưng các nghiên cứu này mới chỉ thành công ở quy mô nhỏ, tỷ lệ sống của ấu trùng thấp và không ổn định

Xuất phát từ thực tế trên và nhằm bổ sung cơ sở khoa học cho việc xây dựng thành công quy trình sản xuất giống nhân tạo sá sùng, giúp chủ động cung cấp nguồn giống ổn định và có chất lượng cho người nuôi, từ đó phát triển nghề nuôi thương

phẩm sá sùng tại Khánh Hòa, tôi thực hiện đề tài: “Nghiên cứu kỹ thuật sản xuất

giống nhân tạo sá sùng (Sipunculus nudus) tại Khánh Hòa”

Muc tiêu của đề tài: Nghiên cứu các biện pháp kỹ thuật nhằm xây dựng qui trình sản xuất giống nhân tạo sá sùng tại Khánh Hòa

Nội dung nghiên cứu:

- Nghiên cứu kỹ thuật nuôi vỗ sá sùng bố mẹ

2

- Nghiên cứu các phương pháp kích thích sinh sản sá sùng bố mẹ

- Nghiên cứu kỹ thuật ương nuôi ấu trùng sá sùng giai đoạn trôi nổi và sống đáy

Ý nghĩa của đề tài:

- Ý nghĩa khoa học: Kết quả của đề tài sẽ bổ sung những dẫn liệu khoa học về quy trình sản xuất giống nhân tạo sá sùng tại Khánh Hòa, làm cơ sở khoa học cho việc nghiên cứu hoàn thiện và chuyển giao công nghệ sản xuất giống nhân tạo sá sùng tại Khánh Hòa

- Ý nghĩa thực tiễn: Nắm vững các biện pháp kỹ thuật của quy trình sản xuất giống nhân tạo, từ đó chuyển giao quy trình cho người dân, giúp chủ động cung cấp con giống ổn định và có chất lượng cho nuôi thương phẩm, giảm áp lực lên nguồn lợi

tự nhiên, đa dạng hóa các đối tượng nuôi, tạo việc làm, nâng cao thu nhập cho người dân ven biển ở Khánh Hòa

3

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tình hình nghiên cứu về sá sùng trên thế giới

1.1.1 Vị trí phân loại và phân bố

Kết quả nghiên cứu đặc điểm phân loại sá sùng được Edmonds (2000) thực hiện dựa trên kết quả phân tích cấu trúc phân tử rARN 18S, rARN 28S và ADN H3 histone

Hệ thống phân loại như sau:

Ngành: Sipuncula Sedgwick, 1898

Lớp: Sipunculida Gibbsy & Culter, 1987

Bộ: Sipunculiformes Gibbsy & Culter, 1987

Họ: Sipunculidae Gray, 1828

Giống: Sipunculus Linnaeus, 1767

Loài: S nudus Linnaeus, 1767

Ngành sâu đất Sipuncula có phân bố rất rộng, chúng được phát hiện từ vùng biển nhiệt đới đến Nam Cực, từ vùng triều cho đến những vùng biển sâu, tập trung nhiều nhất ở khu vực Thái Bình Dương, Ấn Độ Dương và Biển Đông (Culter, 1994) Trong

đó loài sá sùng S nudus tập trung sống chủ yếu ở vùng triều, nơi có nền đáy cát hoặc

bùn cát

1.1.2 Đặc điểm hình thái cấu tạo

Hình thái cấu tạo ngoài của sá sùng, theo mô tả của Richard (2003) như sau: cơ thể có hình trụ tròn giống như sâu, dài khoảng 15 cm (có thể đến 25 cm), chia làm 2 phần: phần vòi ngắn có thể co thụt ra phía trước và phần thân lớn phía sau Phần vòi chiếm khoảng 1/6 cơ thể và có đường kính nhỏ hơn rất nhiều so với phần cơ thể Đỉnh vòi có một vòng vành, lưng rạn ra, nếp nhăn to nhỏ không giống nhau, tạo thành vành, miệng nằm ở giữa Bao quanh miệng và vòng vành là một vòng xúc tu nhỏ dùng để kiếm ăn và trao đổi khí Lỗ hậu môn ở phần lưng, đó là một lỗ nhỏ trên một gờ thấp Dựa vào lỗ hậu môn có thể xác định được phần phía trước và phần sau của cơ thể, đồng thời xác định được mặt lưng, mặt bụng, bên trái, bên phải cơ thể Lỗ thận nằm ở mép thân vòi, phía trước lỗ hậu môn (Richard, 2003)

Về hình thái cấu tạo trong, sá sùng gồm có hai khoang trong cơ thể: khoang xúc

tu và khoang trong Khoang xúc tu phía trên được giới hạn bởi đĩa miệng và các xúc

4

tu Khoang cơ thể ở phía dưới rộng hơn nhiều so với khoang xúc tu và là khoang chính của cơ thể Hai khoang này đươc tách nhau bởi một vách ngăn chính trong đĩa miệng Kết quả nghiên cứu của Ruppert và Rice (1995) về chức năng trao đổi khí của các rãnh trên cơ thể sá sùng cho thấy, mỗi rãnh nằm dưới bề mặt của cơ thể được tạo bởi các bó cơ dọc có nhiệm vụ lưu chuyển dịch thể xoang và nhân tố vận chuyển oxy chỉ trong vòng vài micromet Dịch thể xoang vận chuyển từ phần vòi đến phần cuối thân với tốc độ khoảng 0,7mm/s Dịch thể xoang lưu chuyển được là nhờ có các lông mao nằm trên các rãnh này Thể tích của các rãnh chiếm khoảng 8% tổng thể tích của

cơ thể

Chức năng tuần hoàn và hô hấp của sá sùng do xoang cơ thể đảm nhận, chúng giống như hệ thống vận chuyển chất lỏng được chia thành ngăn trước và ngăn sau Các xúc tu ở đĩa miệng và khoang cơ thể có vai trò quan trọng quá trình hô hấp của sá sùng Từ khoang xúc tu, ôxy được ôxy hoá và chuyển xuống khoang thân nhờ hệ thống lông mao và cơ bụng Từ đây, ôxy được vận chuyển trực tiếp đến các mô (Richard, 2003)

1.1.3 Đặc điểm dinh dưỡng và sinh trưởng

Ấu trùng sá sùng giai đoạn Trochophora (ấu trùng bánh xe) dinh dưỡng bằng noãn hoàng, từ giai đoạn trôi nổi (Pelagosphera) trở đi chúng dinh dưỡng ngoài, thức

ăn chủ yếu là các loài tảo nổi và mùn bã hữu cơ

Theo Lan và ctv (2003), thức ăn ưa thích của sá sùng là vật chất hữu cơ lơ lửng

trong nước, cặn vẩn hữu cơ trên nền đáy và các loại vi tảo như Platymonas

subcordiformis, Isochrysis galbana, Dicrateria sp., Pavlova viridis, Chaetoceros muelleri và Phaeodactylum tricornutum Sá sùng trưởng thành có tập tính kiếm ăn ban

đêm, ban ngày chui rúc trong nền đáy (Hutchings and Peyrot, 2002) Do tập tính sống chui rúc trong nền đáy, nên sá sùng luôn vươn vòi nhô lên khỏi bề mặt đáy và sự co rút của vòi kết hợp với cơ thân đã tạo ra dòng chảy giúp chúng dễ dàng bắt mồi Khi vòi duỗi ra, vành xúc tu bao quanh miệng làm nhiệm vụ thu lượm, giữ thức ăn sau đó vòi

co lại và chuyển thức ăn vào khoang miệng

5

Theo Lan và ctv (2007), thời gian phát triển của ấu trùng sá sùng từ giai đoạn trôi nổi đến giai đoạn sống đáy kéo dài trong khoảng 13 – 15 ngày Sau 7 – 10 ngày kể từ khi chuyển xuống đáy, ấu trùng sá sùng chuyển thành con non với chiều dài khoảng 1

cm Trong điều kiện nuôi thương phẩm, sá sùng đạt kích cỡ thương phẩm với chiều dài

10 - 14 cm, khối lượng 80 - 120 con/kg sau 5 - 7 tháng nuôi Cũng giống như các loài sinh vật khác, trong thời gian đầu của quá trình nuôi sá sùng có tỉ lệ tăng trưởng về chiều dài tăng nhanh hơn so với khối lượng, về sau tốc độ tăng trưởng về chiều dài giảm dần và tăng trưởng về khối lượng nhanh hơn (Lan và ctv, 2003)

1.1.4 Đặc điểm sinh sản

Sá sùng là loài phân tính, sinh sản theo phương thức noãn sinh Theo Richard (2003), sá sùng có cấu tạo gồm 2 tuyến sinh dục chạy ngang qua cơ co rút vùng bụng, các tế bào sinh dục không phát triển và thành thục trong cơ quan sinh dục nên cơ quan sinh dục của sá sùng khi thành thục không phình to như các loài khác Các tế bào sinh dục sau khi chín sẽ được phóng vào khoang bụng, tại đây chúng sẽ hoàn tất quá trình thành thục và sẽ trở thành tế bào trứng hoặc tinh trùng

Khi đến giai đoạn thành thục, sản phẩm sinh dục của sá sùng là trứng và tinh trùng được phóng vào trong môi trường nước để thụ tinh tạo thành hợp tử nhờ sự co bóp của thành cơ thể Hình dạng ngoài của ấu trùng sá sùng rất giống hình dạng ấu trùng Trochophora của giun đốt, có 2 lá giữa xếp đối xứng 2 bên, mỗi lá giữa sau đó hình thành 3 - 4 túi thể xoang và các túi thể xoang sau đó mới tập trung thành túi đôi thể xoang và cuối cùng là túi thể xoang chung Ấu trùng Trochophora sau đó phát triển thành ấu trùng Pelagosphera sống trôi nổi trong môi trường nước biển rồi chuyển xuống sống đáy giống như cá thể trưởng thành (Edmonds, 2000)

Theo Lan và Yan (2002) trứng sá sùng trải qua 5 giai đoạn phát triển trong khoang cơ thể và kéo dài khoảng 10 tháng: giai đoạn phân cắt tế bào (1-2 µm); giai đoạn phát triển nguyên sinh chất (3 - 30 µm); giai đoạn hình thành nang trứng (30 – 70 µm); giai đoạn trứng chín muồi (70 - 160 µm) và giai đoạn trứng ở ngoài môi trường nước (>160 µm) Các tế bào sinh dục đực trải qua 4 giai đoạn: giai đoạn phân cắt tế

sá sùng vào thời điểm ban đêm sẽ cao hơn nhiều so với thời điểm ban ngày

Theo Guo & Li (1993), tại vùng biển của thành phố Xiamen, Trung Quốc, sá sùng rụng trứng vào khoang cơ thể kéo dài từ tháng 7 đến tháng 10 hàng năm và tỉ lệ đực cái khi tham gia sinh sản là 1:1 Trong khi đó, kết quả nghiên cứu của Lan & Yan

(2002) thì mùa vụ sinh sản của sá sùng S nudus ở vùng biển Guangxil, Trung Quốc

diễn ra từ tháng 4 đến tháng 9, trong đó mùa vụ chính là tháng 5 đến tháng 8 Rice (1976) đã nghiên cứu sự phát triển ấu trùng của các loài trong lớp Sipunculida và cho thấy chúng đều có giai đoạn phát triển ấu trùng trải qua theo một trong bốn con đường: (1) Dinh dưỡng noãn hoàng - phát triển trực tiếp không qua thời kỳ phù du; (2) Một thời kỳ phù du - dinh dưỡng noãn hoàng: Trochophore; (3) Hai thời kỳ phù du – dinh dưỡng noãn hoàng: Trochophora và Lecithotrophic Pelagosphera; (4) Hai thời kỳ phù

du – dinh dưỡng noãn hoàng và dinh dưỡng phù du: Trochophora và Planktotrophic

Pelagosphera Loài sá sùng S nudus có sự phát triển ấu trùng theo con đường thứ 4 với

tổng thời gian biến thái của ấu trùng kéo dài từ 1 đến 3 tháng

Tuy nhiên, theo kết quả nghiên cứu của Wu (1999), thời gian phát triển của ấu trùng sá sùng ngắn hơn nhiều và phụ thuộc vào nhiệt độ nước Theo đó, ở nhiệt độ nước là 250C, thời gian phát triển phôi từ khi thụ tinh đến khi xuất hiện ấu trùng Pelagosphera dao động từ 50 - 52h, nhưng nếu nhiệt độ nước trong khoảng 28 – 290C thì thời gian phát triển phôi và ấu trùng rút ngắn lại chỉ còn 38 – 40h Ở nhiệt độ nước

28 – 290C, giai đoạn biến thái của ấu trùng Pelagosphera kéo dài trong khoảng 13- 15 ngày để chuyển sang giai đoạn sống đáy

7

Hình 1.1: Con đường phát triển của ấu trùng thuộc ngành Sipuncula

1.1.5 Nghiên cứu kỹ thuật sản xuất giống nhân tạo và nuôi thương phẩm

Hiện nay các nghiên cứu về sá sùng trên thế giới chủ yếu tập trung vào nghiên cứu hệ thống phân loại, đặc điểm sinh học sinh sản, trao đổi chất và thành phần sinh hóa, trong khi đó các nghiên cứu về kỹ thuật sản xuất giống nhân tạo thì còn khá hạn chế do quy trình sản xuất giống nhân tạo sá sùng mới chỉ thành công ở quy mô thí nghiệm (Zhang & Dai, 2011)

Theo Lan và ctv (2005), ấu trùng sá sùng đạt tỷ lệ sống trên 80% và tốc độ tăng trưởng chiều dài từ 46 - 52 μm/ngày khi khẩu phần thức ăn gồm men bánh mì và các

loài tảo nổi như: Platymonas subcordiformis (mật độ 4000 đến 6000 tế bào/ml),

Isochrysis galbana và Chaetoceros muelleri (15000 đến 20000 tế bào/ml) Kết quả

nghiên cứu trên cũng cho thấy, tảo I galbana và C muelleri là thức ăn thích hợp cho

sá sùng ở giai đoạn ấu trùng trôi nổi và tảo P subcordiformis thích hợp cho sinh

trưởng của sá sùng giai đoạn sống đáy Ở giai đoạn trôi nổi, thời gian biến thái ấu trùng có quan hệ mật thiết với sự thay đổi của nhiệt độ nước theo hàm Logistic, trong

đó nhiệt độ nước thích hợp cho ấu trùng sá sùng giai đoạn trôi nổi là 27,5 - 320C nhưng khi chuyển sang giai đoạn sống đáy thì nhiệt độ nước dao động trong khoảng 30

- 340C sẽ cho tỷ lệ biến thái đạt trên 20% (Lan và ctv,2007)

8

Tại Trung Quốc, sá sùng có phân bố với trữ lượng lớn tại các tỉnh miền Nam và tại đây cũng đã hình thành nghề nuôi thương phẩm sá sùng nhưng nguồn giống chủ yếu là khai thác từ tự nhiên (Xiaodong và ctv, 2008) Theo Jiang và ctv (2010) khi nuôi thương phẩm trong ao, chất đáy có ảnh hưởng quan trọng tới sinh trưởng và tỷ lệ sống của sá sùng Kết quả nghiên cứu cho thấy, chất đáy là cát pha lẫn mùn bã hữu cỡ

là thích hợp nhất cho sinh trưởng và phát triển của sá sùng với tỷ lệ sống lên tới 80,2% Nghiên cứu của Zeng và ctv (2010) về ảnh hưởng của nhiệt độ và độ mặn lên sinh trưởng và tỷ lệ sống của sá sùng giai đoạn trưởng thành cho thấy, ngưỡng nhiệt độ

và độ mặn thích hợp nhất cho sinh trưởng và phát triển của sá sùng trưởng thành dao động trong khoảng 16 – 340C và 21 – 42‰

Trong khi đó, Dai và ctv (2009) cho rằng sá sùng ở giai đoạn giống là loài rộng muối và rộng nhiệt, nhưng chúng có khả năng thích nghi với ngưỡng nhiệt độ và độ mặn thấp tốt hơn so với ngưỡng nhiệt độ và độ mặn cao Kết quả nghiên cứu cho thấy,

tỷ lệ sống của sá sùng ở giai đoạn giống là 60% khi độ mặn giảm đột ngột từ 20‰ tới 5‰ nhưng tỷ lệ sống là 0% nếu độ mặn tăng đột ngột từ 20‰ tới 50‰ Tuy nhiên, nếu

sự tăng hay giảm độ mặn diễn ra chậm (trong vòng 12 giờ) thì tỷ lệ sống của sá sùng giống có thể đạt 85% ở độ mặn 5‰ và 60% ở độ mặn 50‰ Tương tự, khi nhiệt độ giảm đột ngột từ 250C xuống còn 50C thì tỷ lệ sống của sá sùng sẽ giảm xuống còn 70% nhưng tỷ lệ sống của chúng là 0% khi nhiệt độ tăng đột ngột từ 250C lên 350C (Dai và ctv, 2009)

Lin và ctv (2012) đã nghiên cứu thành công kỹ thuật sản xuất giống nhân tạo sá sùng tại Xiamen, Trung Quốc Kết quả nghiên cứu cho thấy, sá sùng bố mẹ có thể thành thục và sinh sản trong điều kiện nuôi vỗ Trong quá trình ương giống, nhiệt độ (28,5-30,50C) và độ mặn (26 – 32‰) được duy trì trong khoảng thích hợp thì ấu trùng Pelagosphera trải qua 9 – 13 ngày biến thái và trở thành con giống sau khoảng 30 ngày với kích cỡ khoảng 1 – 2,8 cm

Liu và ctv (2012) đã theo dõi biến động của các yếu tố môi trường trong quá trình nuôi thương phẩm sá sùng trong ao đất từ nguồn giống nhân tạo Kết quả nghiên cứu cho thấy, điều kiện môi trường thích hợp nhất cho sinh trưởng và phát triển của sá sùng dao động trong khoảng: nhiệt độ: 21,1 – 33,20C, độ mặn: 23 – 31‰, hàm lượng

9

DO: 4,9 – 8,8 mg/L, COD: 1,07 – 3,99 mg/L, BOD: 1,68 – 5,24 mg/L, TAN: 0,004 – 0,160 mg/L

1.2 Tình hình nghiên cứu về sá sùng ở Việt Nam

Tại Việt Nam, sá sùng phân bố rải rác ở vùng triều ven biển và đảo xa bờ thuộc các tỉnh như Hải Phòng, Quảng Ninh, Khánh Hòa và thành phố Hồ Chí Minh, nhưng tập trung chủ yếu ở một số huyện đảo như Tiên Yên, Móng Cái, Vân Đồn (Quảng Ninh); Cần Giờ (thành phố Hồ Chí Minh); Vạn Ninh, Nha Trang, Cam Ranh (Khánh Hòa) (Đỗ Văn Nhượng, 1998; Nguyễn Thị Thu Hà và ctv, 2004; Nguyễn Văn Thanh, 2010; Tôn Nữ Mỹ Nga và ctv, 2011a)

Kết quả nghiên cứu của Nguyễn Thụy Dạ Thảo và ctv (2004) khẳng định sá sùng

là loài hải sản có giá trị dinh dưỡng cao cần được chú ý bổ sung vào khẩu phần ăn hàng ngày nhằm nâng cao thể trọng, sức khoẻ do thịt chúng chứa 17 nguyên tố khoáng (Al, Si, Mg, Ca, Fe, V, Mn, Ti, Ni, Cr, Cu, Pb, Zn, Na, P), 8 axit amin không thay thế (phenylalanine, lysine, threonine, methionine, leucine, isoleusine, valine, tryptophane)

và 10 axit amin thay thế Bên cạnh đó, nghiên cứu của Nguyễn Thị Thu Hà và ctv (2004) cũng cho thấy sá sùng là loài thực phẩm có giá trị dinh dưỡng cao, chúng không những được sử dụng như loài hải đặc sản cao cấp mà còn được sử dụng như loại dược liệu quý giá

Theo Nguyễn Thị Thu Hà và ctv (2004) khi nghiên cứu về đặc điểm phân bố của

sá sùng loài S nudus tại Quảng Ninh đã kết luận chúng có phân bố chủ yếu từ vùng

trung triều cho đến vùng hạ triều, sống chui rúc trong nền đáy ở độ sâu khoảng 40 cm Chúng thường xuất hiện ở bãi triều và bãi cát nằm phía ngoài rừng ngập mặn, nơi có thời gian ngập nước dài (10 – 18 giờ/ngày), chất đáy chủ yếu là cát (chiếm hơn 80%) với thành phần cấp hạt có kích thước 0,05 – 0,1 mm và hàm lượng kim loại nặng thấp Theo Nguyễn Quang Hùng và ctv (2005), một số đặc điểm sinh học sinh sản của

sá sùng S nudus tại vùng biển Quảng Ninh được xác đinh như sau: mùa vụ sinh sản

chính của sá sùng là khoảng từ tháng 3 đến tháng 8, trong đó mùa vụ đẻ rộ nhất vào khoảng tháng 6 đến tháng 7 Khối lượng cá thể sá sùng bắt gặp mang trứng dao động

từ 6,589 g đến 19,042 g Sức sinh sản tuyệt đối trung bình đạt khoảng 113.667 trứng

10

Sức sinh sản tương đối trung bình đạt khoảng 10.937 trứng/g Hệ số thành thục trung bình là 10,5%

Tại vùng biển Cam Ranh, Khánh Hòa, loài sá sùng S robustus có phân bố với trữ

lượng cao tại các bãi triều với chất đáy là cát (tỷ lệ 63,2 – 82,5%) và mùn bã hữu cơ (tỷ lệ 17,5 – 36,8%) (Tôn Nữ Mỹ Nga và ctv, 2011a) Cũng theo nhóm tác giả thì đây

là loài phân tính đực cái riêng biệt, với tỷ lệ đực cái trung bình tương ứng là 0,91:1 Sức sinh sản tuyệt đối trung bình là 2.121.367 trứng/cá thể, sức sinh sản tương đối trung bình là 120.777 trứng/g cơ thể và mùa vụ sinh sản chính của chúng từ tháng 3 đến tháng 4 hàng năm với tỷ lệ thành thục sinh dục lên tới 82,5% (Tôn Nữ Mỹ Nga và ctv, 2011b)

Những nghiên cứu đầu tiên về khả năng sản xuất giống nhân tạo sá sùng đã được

thực hiện từ năm 2009 tại Khánh Hòa Theo đó, sá sùng S nudus có thể thành thục và

sinh sản trong bể xi măng, tuy nhiên số lượng trứng trong các lần sinh sản ít và chưa phát triển được tới giai đoạn ấu trùng trôi nổi (Lê Thị Nhàn và Nguyễn Văn Cảnh, 2009) Tiếp theo đó, đề tài nghiên cứu một số đặc điểm sinh học và xây dựng quy trình

kỹ thuật sản xuất giống nhân tạo sá sùng (S nudus) đã được triển khai thực hiện tại

Khánh Hòa và lần đầu tiên đã thành công trong việc sản xuất giống nhân tạo sá sùng tại Việt Nam Một số kết quả chính của đề tài đạt được như sau: Tỷ lệ đực: cái trung bình của sá sùng tại vùng biển Khánh Hòa là 0,73:1 với mùa vụ sinh sản kéo dài từ tháng 3 đến tháng 9 Sá sùng thành thục sinh dục lần đầu khi kích thước cơ thể đạt trên

11 cm với sức sinh sản tuyệt đối trung bình đạt 474.451 trứng/cá thể và sức sinh sản tương đối dao động trong khoảng 2.039 - 73.592 trứng/g cá thể (Nguyễn Minh Châu

và ctv, 2012a)

Tỷ lệ sống trung bình của sá sùng bố mẹ trong quá trình nuôi thành thục đạt 70,43 % và tỷ lệ thành thục dao động từ 52,50 - 59,50 % Phương pháp kích thích sá sùng bố mẹ sinh sản hiệu quả nhất là phương pháp kích thích bằng nhiệt độ (khô và ướt) Trong giai đoạn ương nuôi ấu trùng, tảo nổi là thức ăn thích hợp nhất cho ấu trùng giai đoạn trôi nổi; trong khi đó, thức ăn tổng hợp và tảo đáy thích hợp nhất cho giai đoạn ấu trùng sống đáy Mật độ ương thích hợp nhất là 200 – 600 con/L (giai đoạn

11

trôi nổi) và 200 – 250 con/m2 (giai đoạn sống đáy) trong điều kiện độ mặn 25 – 30 ‰ (Nguyễn Minh Châu và ctv, 2012b) Mặc dù, lần đầu tiên đã sản xuất thành công con giống nhân tạo tại Khánh Hòa, nhưng các kết quả nghiên cứu trên mới chỉ là những nghiên cứu thử nghiệm ban đầu,được thực hiện ở các thể tích nhỏ, tỷ lệ ra giống không

ổn định và thấp, mới chỉ đạt khoảng 1 – 2 % Vì vậy, hiện nay, quy trình kỹ thuật sản xuất giống nhân tạo sá sùng vẫn chưa được nghiên cứu hoàn thiện và chưa được chuyển giao cho người dân ứng dụng vào thực tế sản xuất

Dựa trên những thành công ban đầu khi nghiên cứu sản xuất giống nhân tạo sá sùng, Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản III tiếp tục là đơn vị chủ trì thực hiện đề

tài nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật nuôi thương phẩn sá sùng S nudus trong

năm 2012 – 2014 (Võ Thế Dũng và ctv, 2014b)

Khi nghiên cứu nuôi thương phẩm sá sùng trong bể xi măng, Võ Thế Dũng và ctv (2013) cho rằng sử dụng chất đáy là cát bùn (tỷ lệ 1:1) sẽ cho tỷ lệ sống của con giống là cao nhất (77%) sau 2 tháng nuôi với chiều dài trung bình là 5,0 cm/con và khối lượng trung bình 2,1 g/con Trong khi đó, khẩu phần thức ăn tốt nhất cho sá sùng trong giai đoạn này là hỗn hợp gồm thức ăn chế biến (cá tạp, bột cá, bột đậu nành và

cám gạo) kết hợp với tảo tươi (Chaetoceros sp., Platymonas sp., Navicula sp và

Nitchia sp.) sẽ cho sinh trưởng chiều dài và tỷ lệ sống của sá sùng là cao nhất (tương

ứng 5,0 cm và 76%) (Võ Thế Dũng và ctv, 2013)

Theo Võ Thế Dũng và ctv (2014a) khi nghiên cứu về ảnh hưởng của mật độ lên sinh trưởng và tỷ lệ sống của sá sùng nuôi thương phẩm trong bể xi măng thì ở mật độ ương 50 con/m2 sau 60 ngày nuôi sẽ cho tốc độ tăng trưởng về chiều dài (0,057 cm/ngày) và tỷ lệ sống (75,8%) của sá sùng là cao nhất Tuy nhiên, kết quả này không

có sự sai khác có ý nghĩa thống kê so với sinh trưởng và tỷ lệ sống của sá sùng khi nuôi ở mật độ 100 con/m2 (tương ứng 0,055 cm/ngày và 75,3%) Do đó, để đảm bảo hiệu quả kinh tế cao nhất, nhóm tác giả đã đề nghị sử dụng mật độ 100 con/m2 để nuôi thương phẩm sá sùng trong bể xi măng (Võ Thế Dũng và ctv, 2014)

Cũng ở giai đoạn nuôi thương phẩm nhưng khi nuôi trong ao dùng chất đáy là cát bùn với tỷ lệ 1:1 sẽ cho sinh trưởng (5,04 cm) và tỷ lệ sống (76%) của sá sùng cao hơn

12

so với sử dụng chất đáy hoàn toàn là cát hoặc bùn Sau 5 tháng nuôi, sử dụng thức ăn

là hỗn hợp tảo nổi kết hợp với thức ăn chế biến ở mật độ nuôi 50 con/m2 sẽ cho kết quả tốt nhất về sinh trưởng và tỷ lệ sống của sá sùng (Võ Thế Dũng và ctv, 2014b) Theo Võ Thế Dũng và ctv (2015), kích cỡ giống có ảnh hưởng tới tốc độ tăng trưởng và tỷ lệ sống của sá sùng giống khi nuôi thương phẩm trong bể xi măng Kết quả nghiên cứu cho thấy, với kích cỡ giống trung bình khi thả là 2 cm sẽ cho tỷ lệ sống (79,5%) cao hơn so với cỡ giống 1 cm (tỷ lệ sống 69,6%) Tương tự, sinh trưởng về chiều dài và khối lượng của sá sùng giống cỡ 2 cm (5,94 cm và 2,93 g) cũng cao hơn

so với cỡ giống 1 cm (5,34 cm và 2,32 g)

13

2 CHƯƠNG 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng, thời gian và địa điểm nghiên cứu

Đối tượng nghiên cứu:

- Tên khoa học: Sipunculus nudus (Linnaeus, 1767)

- Tên tiếng Việt: sá sùng

- Tên tiếng Anh: Peanut worm

Thời gian nghiên cứu: từ tháng 5 đến tháng 12 năm 2014

Địa điểm nghiên cứu: Phòng Sinh học Thực nghiệm, Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản III

Hình 2.1: Sá sùng Sipunculus nudus (Linnaeus, 1767)

2.2 Nội dung nghiên cứu

- Nghiên cứu kỹ thuật nuôi thành thục sá sùng bố mẹ

-Nghiên cứu kỹ thuật kích thích sá sùng bố mẹ sinh sản

- Nghiên cứu kỹ thuật ương nuôi ấu trùng sá sùng giai đoạn trôi nổi và sống đáy

- 16 g/con, không dị hình, dị dạng và hoàn toàn khỏe mạnh Sá sùng được vận chuyển

về địa điểm nghiên cứu bằng phương pháp vận chuyển ướt Sử dụng thùng xốp có bổ sung đáy là bùn cát và cấp nước biển lọc sạch để vận chuyển sá sùng Phương pháp vận chuyển bằng ô tô và dùng đá lạnh để hạ nhiệt độ của thùng xốp xuống khoảng 24-

Nghiên cứu kỹ thuật sản xuất giống nhân tạo sá sùng (Sipunculus nudus, 1767)

tại Khánh Hòa

Kỹ thuật kích thích sinh sản

Kích thích bằng nhiệt khô

Kích thích bằng nhiệt ướt

Ảnh hưởng của thức

ăn

Ảnh hưởng của mật

độ

Kích thích bằng nhiệt đáy

độ thành thục của sá sùng bố mẹ Sá sùng bố mẹ thành thục là sá sùng có sản phẩm sinh dục phát triển ở giai đoạn IV trở lên

2.3.2 Kỹ thuật kích thích sinh sản sá sùng bố mẹ

Chuẩn bị bể đẻ: bể đẻ là bể xi măng hình chữ nhật, có thể tích 6m3 Bể đẻ được cấp nước biển lọc sạch có các yếu tố môi trường (độ mặn, pH, oxy hòa tan) tương đương với bể nuôi thành thục và trên nền đáy bổ sung lớp cát mịn (dày 10 cm) cho sá sùng vùi mình

Sau khi kiểm tra thấy sá sùng thành thục sinh dục sẽ tiến hành kích thích sinh sản Sử dụng 3 phương pháp sốc nhiệt độ để kích thích sá sùng sinh sản:

- Sốc nhiệt độ bằng cách nâng nhiệt độ lớp cát lót đáy (nhiệt đáy): cát được phơi ngoài trời nắng khoảng 2h, khi đạt tới nhiệt độ 34 - 360C sẽ được chuyển vào trong bể

đẻ Sau đó đưa sá sùng bố mẹ vào bể đẻ và phủ lớp cát nóng này lên trên Sau 20 phút thì cấp nước biển lọc sạch có nhiệt độ 28 – 300C vào bể để kích thích sá sùng sinh sản

- Sốc nhiệt độ bằng thay đổi nhiệt độ nước (nhiệt ướt): sử dụng cây nâng nhiệt để nâng nhiệt độ nước trong bể lên 34 – 360C, sau đó chuyển sá sùng vào bể khoảng 20 phút sẽ dùng đá lạnh để hạ nhiệt độ nước của bể đẻ xuống còn 26 – 280C để kích thích

sá sùng sinh sản

2.3.3 Kỹ thuật ương nuôi ấu trùng sá sùng giai đoạn trôi nổi

2.3.3.1 Ảnh hưởng của thức ăn đến sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng

Ấu trùng sá sùng giai đoạn Pelagosphera 1 ngày tuổi được bố trí ngẫu nhiên vào trong các bể kính hình chữ nhật (thể tích 10 lít) với mật độ 300 con/L Sử dụng 3 nghiệm thức thí nghiệm tương ứng với 3 loại thức ăn khác nhau:

Nghiệm thức 1: tảo tươi (hỗn hợp của 3 loại tảo Nannochloropsis oculata,

Isochrysis sp và Chaetoceros sp.) với mật độ 10.000tb/mL

Nghiệm thức 2: thức ăn tổng hợp (Lansy, Fripak), liều lượng cho ăn 1g/ngày Nghiệm thức 3: hỗn hợp tảo tươi kết hợp với thức ăn tổng hợp với tỷ lệ cho ăn 1:1

Ấu trùng được cho ăn 4 lần/ngày vào 7h, 12h, 17h và 22h Ở nghiệm thức 3, tỷ lệ phối trộn khẩu phần thức ăn như sau: tảo tươi được cho ăn 2 lần/ngày vào lúc 7h và 17h, trong khi thức ăn tổng hợp được cho ăn vào thời điểm 12h và 22h Hàng ngày, thay 20% lượng nước trong bể nuôi kết hợp si phông đáy Theo dõi các yếu tố môi trường trong bể ương như: nhiệt độ, độ mặn, pH, oxy hòa tan

Mỗi nghiệm thức thí nghiệm được lặp lại 4 lần và kết thúc khi ấu trùng đã chuyển hết sang giai đoạn xuống đáy Xác định các chỉ tiêu: sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng

2.3.3.2 Ảnh hưởng của mật độ ương đến sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng

Ấu trùng sá sùng giai đoạn Pelagosphera 1 ngày tuổi được bố trí ngẫu nhiên vào trong các bể kínhhình chữ nhật (thể tích 10 lít) Sử dụng 4 nghiệm thức thí nghiệm tương ứng với 4 mật độ ương khác nhau: 300; 500; 700 và 900 con/L

17

Ấu trùng được cho ăn 4 lần/ngày vào 7h, 12h, 17h và 22h với thức ăn thích hợp nhất từ kết quả của thí nghiệm mục 2.3.3.1 Hàng ngày thay 20% lượng nước trong bể nuôi kết hợp si phông đáy để duy trì chất lượng nước trong xô thí nghiệm Thường xuyên theo dõi các yếu tố môi trường trong bể ương như: nhiệt độ, độ mặn, pH, oxy hòa tan

Mỗi nghiệm thức thí nghiệm được lặp lại 4 lần và kết thúc khi ấu trùng đã chuyển hết sang giai đoạn xuống đáy Xác định các chỉ tiêu: sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng

2.3.4 Kỹ thuật ương nuôi ấu trùng sá sùng giai đoạn sống đáy

2.3.4.1 Ảnh hưởng của thức ăn đến sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng

Ấu trùng sá sùng mới xuống đáy (1 ngày tuổi) được bố trí ngẫu nhiên vào các bể composite có diện tích (1m2) với mật độ 300 con/m2 Sử dụng 4 nghiệm thức thí nghiệm tương ứng với 4 loại thức ăn khác nhau:

Nghiệm thức 1: tảo tươi (hỗn hợp của 3 loại tảo N oculata, Isochrysis sp và

Chaetoceros sp.), mật độ tế bào 10.000tb/mL

Nghiệm thức 2: thức ăn tổng hợp (Lansy, Fripak), liều lượng 1g/ngày

Nghiệm thức 3: thức ăn chế biến (cá tạp, bột cá, cám gạo)

Nghiệm thức 4: hỗn hợp tảo tươi (N oculata, Isochrysis sp và Chaetoceros sp.)

kết hợp với thức ăn chế biến với tỷ lệ cho ăn là 1:1

Ấu trùng được cho ăn 4 lần/ngày vào 7h, 12h, 17h và 22h Ở nghiệm thức 4, tỷ lệ phối trộn khẩu phần thức ăn như sau: tảo tươi được cho ăn 2 lần/ngày vào lúc 7h và 17h, trong khi thức ăn chế biến được cho ăn vào thời điểm 12h và 22h Hàng ngày thay 20% lượng nước trong bể nuôi kết hợp si phông đáy Theo dõi các yếu tố môi trường trong bể ương như: nhiệt độ, độ mặn, pH, oxy hòa tan

Mỗi nghiệm thức thí nghiệm được lặp lại 4 lần và kết thúc khi ấu trùng đạt cỡ giống cấp 1 (0,5 – 1cm) Xác định các chỉ tiêu: sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng

18

2.3.4.2 Ảnh hưởng của mật độ ương đến sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng

Ấu trùng sá sùng mới xuống đáy (1 ngày tuổi) được bố trí ngẫu nhiên vào trong các bể thí nghiệm có diện tích 1m2 với 4 mật độ khác nhau: 250, 300, 350 và 400 con/m2 Ấu trùng được cho ăn 4 lần/ngày vào 7h, 12h, 17h và 22h bằng thức ăn thích hợp nhất từ kết quả của thí nghiệm mục 2.3.4.1 Hàng ngày, thay 20% nước trong bể nuôi kết hợp si phông đáy Theo dõi các yếu tố môi trường trong bể ương như: nhiệt

độ, độ mặn, pH, oxy hòa tan

Mỗi nghiệm thức thí nghiệm được lặp lại 4 lần và kết thúc khi ấu trùng đạt cỡ giống cấp 1 (0,5 – 1cm) Xác định các chỉ tiêu: sinh trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng

2.3.5 Phương pháp thu thập và xử lý số liệu

2.3.5.1 Phương pháp xác định các thông số môi trường

- Nhiệt độ: Đo bằng nhiệt kế bách phân, chính xác đến 1oC

- Độ pH: Độ pH đo bằng máy WQC-22A chính xác đến 0,1

19

Tỷ lệ thụ tinh: (%) 100

M

N Tt

Trong đó: N là tổng số trứng thụ tinh; M là tổng số trứng sinh sản

Tỷ lệ nở: (%)  100

N

X Tn

Trong đó: X là tổng số ấu trùng Trochophora; N là tổng số trứng thụ tinh

2.3.5.3 Phương pháp xử lý số liệu

Các số liệu được thu thập, tính toán và trình bày dưới dạng giá trị trung bình ± sai số chuẩn (MEAN±SE) trên phần mềm Microsoft Office Excel, 2010 và SPSS phiên bản 22,0

Sử dụng phép phân tích phương sai một yếu tố (one-way ANOVA) để kiểm định

sự khác nhau của các giá trị trung bình giữa các nghiệm thức Đánh giá sự sai khác của các giá trị trung bình sau phân tích phương sai (Post Hoc Test) bằng kiểm định Duncan Khác nhau giữa các giá trị được xác định ở mức ý nghĩa p < 0,05

20

3 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kỹ thuật nuôi thành thục sá sùng bố mẹ

3.1.1 Điều kiện môi trường bể nuôi

Trong quá trình nuôi thành thục, diễn biến của điều kiện môi trường bể nuôi được duy trì trong khoảng thích hợp như sau:

Bảng 3.1: Điều kiện môi trường bể nuôi thành thục

Giá trị pH (7,5 – 8,3) và DO (5,5 ± 1,2 mgO2/l) trong quá trình nuôi thành thục cũng nằm trong ngưỡng thích hợp cho sinh trưởng và phát triển của sá sùng.So sánh với kết quả nghiên cứu của Nguyen Thi Thu Ha và ctv (2007) khi nghiên cứu về các đặc điểm môi trường của sá sùng phân bố tại vùng biển Quảng Ninh cho thấy giá trị

pH tại đây giao động trong khoảng hẹp hơn (6,9 – 7,8) nhưng giá trị độ mặn và DO lại

có biên độ dao động rộng hơn nhiều (độ mặn: 20 – 31,5‰, DO: 6,2 – 7,9 mgO2/l) Theo tác giả thì biên độ dao động của các yếu tố môi trường tại bãi phân bố của sá sùng được quyết định bởi vị trí của bãi, chế độ thủy triều, sóng và lưu tốc dòng chảy Tại Quảng Ninh, sá sùng phân bố chủ yếu ở các bãi triều ven các cửa sông, rừng ngập