Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý, lâm sàng bệnh giun đũa chó ở thành phố thái nguyên tỉnh thái nguyên và dùng thuốc điều trị

--- --- PHẠM THỊ MINH THƯ Tên đề tài: NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ, LÂM SÀNG BỆNH GIUN ĐŨA CHÓ Ở THÀNH PHỐ THÁI NGUYÊN, TỈNH THÁI NGUYÊN VÀ DÙNG THUỐC ĐIỀU TRỊ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP

-  -

PHẠM THỊ MINH THƯ

Tên đề tài:

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ, LÂM SÀNG BỆNH GIUN ĐŨA CHÓ Ở

THÀNH PHỐ THÁI NGUYÊN, TỈNH THÁI NGUYÊN

VÀ DÙNG THUỐC ĐIỀU TRỊ

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC

Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành : Thú y Khoa : Chăn nuôi Thú y Khóa học : 2010 - 2014

Thái Nguyên – 2014

-  -

PHẠM THỊ MINH THƯ

Tên đề tài:

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ, LÂM SÀNG BỆNH GIUN ĐŨA CHÓ Ở

THÀNH PHỐ THÁI NGUYÊN, TỈNH THÁI NGUYÊN

VÀ DÙNG THUỐC ĐIỀU TRỊ

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC

y, cô giáo hướng dẫn và sự nhất trí của Trạm Thú y Thành phố Thái Nguyên,

tỉnh Thái Nguyên, em thực hiện nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu đặc điểm

bệnh lý, lâm sàng bệnh giun đũa chó ở thành phố Thái Nguyên - tỉnh Thái Nguyên và dùng thuốc điều trị”

Trong quá trình thực hiện đề tài em đã nhận được sự quan tâm của nhà trường, Khoa Chăn nuôi Thú y, cán bộ Trạm Thú y thành phố Thái Nguyên, bạn bè và gia đình

Nhân dịp này em xin gửi lời cảm ơn đến Ban giám hiệu Nhà trường, khoa Chăn nuôi Thú y - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, Trạm Thú

y thành phố Thái Nguyên đã tạo điều kiện thuận lợi giúp em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp này Đặc biệt, em xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc tới cô giáo hướng dẫn TS Lê Minh đã tận tình hướng dẫn chỉ bảo giúp đỡ em trong quá trình thực hiện đề tài

Em xin gửi lời cảm ơn tới tập thể lớp 42-TY đã quan tâm, giúp đỡ, động viên em trong suốt quá trình thực tập, rèn luyện tại trường

Một lần nữa em xin kính chúc toàn thể thầy, cô giáo trong khoa Chăn nuôi Thú y sức khỏe, hạnh phúc và thành đạt Chúc cán bộ công nhân viên Trạm Thú y thành phố Thái Nguyên, tỉnh Thái Nguyên công tác tốt, chúc các bạn sinh viên mạnh khỏe và thành công trong cuộc sống

Em xin chân thành cảm ơn!

Thái Nguyên, ngày tháng năm 2014

Sinh viên

Phạm Thị Minh Thư

lý thuyết và thực tế sản xuất Trên giảng đường Đại học, sinh viên được cung cấp tất cả các kiến thức về lý thuyết trong khuôn khổ chương trình giảng dạy Trong quá trình học tập luôn có những buổi thực hành, những đợt đi thực tập giáo trình nhằm giúp sinh viên hoàn thiện hơn về kiến thức thực tế Song, vẫn còn những hạn chế

Trong quá trình đào tạo ở nhà trường, giai đoạn thực tập tốt nghiệp luôn chiếm một vị trí rất quan trọng đối với sinh viên trước khi ra trường Giai đoạn thực tập tốt nghiệp giúp sinh viên làm quen với kiến thức chuyên môn Bên cạnh

đó, qua quá trình làm việc tại cơ sở, sinh viên có thể nắm bắt được cách thức quản lý cũng như việc phân công lao động trong cơ sở mình, được tiếp xúc với các cán bộ kỹ thuật, các hộ nông dân - những người thầy thực tiễn giúp cho sinh viên tác phong làm việc sáng tạo để có thể đáp ứng được những yêu cầu của thực tiễn sau này, góp phần vào sự phát triển của nền kinh tế đất nước

Xuất phát từ nguyện vọng của bản thân, yêu cầu của cơ sở, được sự đồng ý của Ban Chủ nhiệm khoa Chăn nuôi Thú y, Trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên, được sự giúp đỡ của giảng viên hướng dẫn TS Lê Minh, chúng

tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý, lâm sàng

bệnh giun đũa chó ở thành phố thái Nguyên - tỉnh Thái Nguyên và dùng thuốc điều trị”

Do thời gian và trình độ còn hạn chế, bước đầu còn bỡ ngỡ với công tác nghiên cứu khoa học nên bản khóa luận không tránh khỏi những thiếu sót, rất mong nhận được sự góp ý của Quý thầy cô và các bạn đồng nghiệp để bản khóa luận được hoàn thiện hơn

Thái Nguyên, ngày tháng năm 2014

Sinh viên

Phạm Thị Minh Thư

Bảng 4.1 Tỷ lệ và cường độ nhiễm giun đũa ở chó tại 3 xã, phường của

thành phố Thái Nguyên 27

Bảng 4.2 Thời gian trứng giun đũa phát triển thành trứng có sức gây nhiễm bệnh trong phân ở ngoại cảnh 31

Bảng 4.3 Kết quả gây nhiễm cho chó 34

Bảng 4.4 Biểu hiện lâm sàng của chó bị bệnh giun đũa chó do gây nhiễm 36

Bảng 4.5 Biểu hiện lâm sàng của chó bị bệnh giun đũa chó tự nhiên 38

Bảng 4.6 Bệnh tích bệnh giun đũa chó do gây nhiễm 40

Bảng 4.7 Tỷ lệ tiêu bản có bệnh tích vi thể do gây nhiễm giun đũa cho chó 41 Bảng 4.8 So sánh số lượng hồng cầu, số lượng bạch cầu và hàm lượng huyết sắc tố của chó trước và sau khi gây bệnh giun đũa 43

Bảng 4.9 So sánh công thức bạch cầu của chó trước và sau khi gây bệnh 45

Bảng 4.10 Hiệu lực của một số loại thuốc điều trị giun đũa cho chó 46

Bảng 4.11 Các chỉ tiêu sinh lý của chó nhiễm giun đũa 48

Bảng 4.12 Tỷ lệ chó có phản ứng sau khi dùng thuốc 49

Hình 1.1: Trứng giun Toxocara canis 4

Hình 1.2: Giun đũa Toxocara canis 4

Hình 1.3 Trứng giun Toxascaris leonina 5

Hình 1.4 Toxascaris leonina 5

Hình 1.5 Sơ đồ vòng phát triển Toxocara canis 6

Hình 1.6 Sơ đồ vòng phát triển của Toxascaris leonina 7

Hình 4.1 Biểu đồ về tỷ lệ nhiễm của chó ở các xã, phường 28

thuộc thành phố Thái Nguyên 28

Hình 4.2 Biểu đồ về cường độ nhiễm tại các xã, phường 29

thuộc thành phố Thái Nguyên 29

to : nhiệt độ

TT : thể trọng

T.canis : Toxocara canis

T leonina : Toxascaris leonina

1.1 Tính cấp thiết của đề tài 1

1.2 Mục đích nghiên cứu 2

1.3 Mục tiêu nghiên cứu 2

1.4 Ý nghĩa của đề tài 2

PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

2.1 Cơ sở khoa học của đề tài 3

2.1.1 Đặc điểm sinh học của giun đũa chó 3

2.1.2 Bệnh giun đũa chó (Toxocariosis) 7

2.2 Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước 15

2.2.1 Tình hình nghiên cứu trong nước 15

2.2.2 Tình hình nghiên cứu ngoài nước 16

PHẦN 3 : ÐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18

3.1 Ðối tượng, địa điểm, thời gian nghiên cứu 18

3.2 Vật liệu nghiên cứu 18

3.3 Nội dung nghiên cứu 19

3.4 Phương pháp nghiên cứu 19

3.5 Phương pháp xử lý số liệu 25

PHẦN 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 27

4.1 Tỷ lệ và cường độ nhiễm giun đũa chó ở một số xã, phường của thành phố Thái Nguyên, tỉnh Thái Nguyên 27

4.2 Nghiên cứu khả năng phát triển của trứng giun đũa chó ở ngoại cảnh 30

4.3 Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý và lâm sàng bệnh giun đũa chó 33

4.3.1 Kết quả gây nhiễm cho chó 33

4.3.2 Biểu hiện lâm sàng của chó bị bệnh giun đũa do gây nhiễm 35

4.3.5 Nghiên cứu một số chỉ tiêu huyết học của chó bị bệnh và chó khỏe 42

4.4 Đánh giá hiệu quả của một số thuốc điều trị bệnh giun đũa chó 46

4.4.1 Hiệu lực của thuốc điều trị bệnh giun đũa chó 46

4.4.2 Độ an toàn của một số thuốc điều trị bệnh giun đũa chó 48

PHẦN 5: KẾT LUẬN, TỒN TẠI VÀ ĐÊ NGHỊ 50

5.1 Kết luận 50

5.2 Tồn tại 51

5.3 Đề nghị 51

TÀI LIỆU THAM KHẢO 54

I Tài liệu tiếng việt 54

II Tài liệu nước Ngoài 56

III Tài liệu Internet 56

PHẦN 1: MỞ ĐẦU

1.1 Tính cấp thiết của đề tài

Những năm gần đây, nền kinh tế ngày càng phát triển, đời sống con người nâng cao thì nhu cầu về tinh thần được nhiều người quan tâm Người ta nuôi chó phục vụ nhiều mục đích khác nhau Nuôi chó không chỉ để làm cảnh, trông nhà mà đối với nhiều người chó là người bạn trung thành gần gũi, thân thiện Chính vì vậy nhiều giống chó được nhập về Việt Nam làm phong phú thêm chủng loại và loại chó ở nước ta

Song, chó lại là loài vật mẫn cảm với các tác nhân gây bệnh Chó được nuôi ngày một nhiều thì vấn đề dịch bệnh xảy ra trên chó càng khó kiểm soát, không những gây thiệt hại kinh tế chó nhiều hộ chăn nuôi mà còn ảnh hưởng đến sức khỏe con người Bệnh truyền nhiễm do vi khuẩn, virus và ký sinh trùng đã, đang làm chết nhiều chó ở tỉnh Thái Nguyên, gây thiệt hại kinh tế cho nhiều hộ chăn nuôi Bệnh giun, sán là một trong những bệnh ký sinh trùng phổ biến nhất ở chó Các nhà khoa học nước ta đã xác định được 26 loài

giun, sán ký sinh ở chó, trong đó bệnh giun đũa chó là một bệnh khá phổ biến

Mặt khác, ranh giới sinh học giữa các loài hiện nay đang bị phá vỡ, điển hình như sự truyền lây giun đũa chó sang người Trong mấy năm trở lại đây người nhiễm ấu trùng giun đũa chó khá phổ biến với những biểu hiện bệnh lý như: đau bụng, ho, rối loạn giấc ngủ, kém phát triển tinh thần và thể lực, ăn uống kém, sốt, viêm hạch cổ Đây cũng là một vấn đề đáng quan tâm của bệnh ký sinh trùng truyền lây sang người nói chung và bệnh giun đũa chó nói riêng trong giai đoạn hiện nay

Xuất phát từ yêu cầu cấp thiết của việc khống chế dịch bệnh, đảm bảo sức khỏe cho đàn chó và sức khoẻ của con người, đặc biệt là người chăn nuôi

ở tỉnh Thái Nguyên, chúng tôi thực hiện đề tài: "Nghiên cứu đặc điểm bệnh

lý, lâm sàng bệnh giun đũa chó ở thành phố Thái Nguyên - tỉnh Thái Nguyên và dùng thuốc điều trị”

1.2 Mục đích nghiên cứu

- Nghiên cứu tình hình nhiễm giun đũa chó nuôi tại các địa phương thuộc thành phố Thái Nguyên

- Nghiên cứu khả năng phát triển của trứng giun đũa chó ở ngoại cảnh

- Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý và lâm sàng bệnh giun đũa chó

- Đánh giá hiệu quả của một số thuốc điều trị bệnh giun đũa chó

1.3 Mục tiêu nghiên cứu

Làm sáng tỏ và bổ sung thêm những thông tin khoa học về bệnh giun đũa ở chó, từ đó có cơ sở khoa học xây dựng quy trình phòng trị bệnh giun

đũa cho chó có hiệu quả cao

1.4 Ý nghĩa của đề tài

* Ý nghĩa khoa học: Kết quả nghiên cứu của đề tài là những thông tin

khoa học về tình hình nhiễm giun đũa ở chó, khả năng phát triển của trứng giun đũa chó ở ngoại cảnh, biểu hiện triệu chứng lâm sàng và bệnh tích bệnh giun đũa chó nuôi tại một số xã, phường của thành phố Thái Nguyên – tỉnh Thái Nguyên

* Ý nghĩa thực tiễn:

Kết quả nghiên cứu của đề tài là những minh chứng về tác hại của giun đũa ký sinh ở chó, đồng thời là những khuyến cáo có ý nghĩa cho những hộ chăn nuôi chó trên địa bàn thành phố Thái Nguyên và các địa phương khác Kết quả nghiên cứu có thể ứng dụng để chẩn đoán và phòng trừ bệnh giun đũa cho chó, góp phần khống chế bệnh, bảo vệ sức khỏe của người và vật nuôi

PHẦN 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1 Cơ sở khoa học của đề tài

2.1.1 Đặc điểm sinh học của giun đũa chó

2.1.1.1 Vị trí của giun đũa chó trong hệ thống phân loại động vật

Theo Nguyễn Thị Lê và cs (1996) [14], hệ thống phân loại giun đũa ký sinh ở chó như sau:

Lớp: Nematoda Rudolphi, 1808

Bộ: Ascaridida Skrjabin và Schulz, 1940 Phân bộ: Ascaridina Skrjabin, 1915

Họ: Anisakidae Skrjabin et Karokhin, 1945

Giống: Toxocara Stiles, 1905

Loài Toxocara canis Werner, 1782 Loài Toxascaris leonina Linstow, 1902

Ký chủ cuối cùng: chó Nơi ký sinh: dạ dày, ruột non

2.1.1.2 Đặc điểm hình thái, kích thước, cấu tạo giun đũa chó

* Giun đũa Toxocara canis (Werner 1782)

Theo mô tả của Nguyễn Thị Kim Lan (2012) [9], giun đũa Toxocara canis có đặc điểm như sau:

T.canis có kích thước lớn, màu vàng nhạt, đầu hơi cong về phía bụng,

miệng có 3 môi bao quanh, trên mỗi môi đều có các răng nhỏ Thực quản hình trụ, đặc biệt giữa thực quản và ruột có đoạn phình to như dạ dày

Giun đực dài 50 – 100 mm, đầu có cánh dài, hẹp, hơi giống mũi giáo,

có hai gai giao cấu bằng nhau, dài 0,75 – 0,95 mm

Giun cái dài 90 – 180 mm, đuôi thẳng Lỗ sinh dục cái ở khoảng 1/4 phía trước thân Giun cái đẻ trứng, trứng hình tròn hoặc hình ovan, đường kính 0,068 – 0,075 mm, có 4 lớp vỏ dày, trên vỏ trứng có những nếp nhăn nhỏ mịn, tế bào phôi xếp thành khối bên trong

Lê Thị Hải (2011) [5] cho biết:

Trứng giun đũa chó T canis có hình cầu, vỏ xù xì thô nhám, có màu

vàng xám; có 3 màng, trong đó: màng ngoài cùng dầy, xù xì, có màu vàng xám, màng trong nhẵn và mỏng, màng trong cùng bao bọc phôi bào khi chưa phân chia là khối màu xám

Sau khoảng 2 – 3 ngày phôi bào trong trứng bắt đầu phân bào thành 2; 3; 4… phôi bào

Trong quá trình phôi bào biến đổi, nhân lên liên tục trong trứng thì hình thái của trứng gần như không thay đổi Sau đó trứng giun đũa chó tiếp tục phát triển thành trứng có ấu trùng bên trong

Trứng có ấu trùng A1: trứng vẫn có hình tròn, vỏ có màu xám nhạt, vỏ mỏng hơn vỏ trứng ở trạng thái ban đầu, có thể nhìn thấy ấu trùng bên trong nhưng ấu trùng ở giai đoạn này còn ngắn và mập, ấu trùng hầu như không vận động

Trứng có ấu trùng A2: trứng vẫn không có sự thay đổi hình thái, vỏ màu xám nhạt và mỏng hơn rất nhiều so với vỏ trứng ban đầu Ấu trùng bên trong phát triển dài hơn và thon hơn, có thể nhìn thấy các tế bào tiền cơ quan tiêu hoá, ấu trùng hoạt động mạnh với cường độ khá cao

Trứng có ấu trùng A3: vỏ rất mỏng, mất màu và không còn xù xì như trước nữa Quan sát dưới kính hiển vi thấy ấu trùng có dạng hình giun, nhìn thấy tiền cơ quan tiêu hoá, lúc đầu chuyển động rất mạnh nhưng sau đó chuyển động chậm dần và ngược lại

Hình 1.1: Trứng giun Toxocara canis

* Giun đũa Toxascaris leonina (Linstow, 1902)

Theo Lê Thị Hải, 2011 [5], giun đũa T.leonina có đặc điểm:

T.leonina có màu vàng nhạt, đầu có 3 môi, thực quản hình trụ, không

có đoạn phình to như loài T.canis

Giun đực dài 20 – 60 mm Lỗ sinh dục ở cuối cơ thể, hai gai giao hợp bằng nhau

Giun cái dài 65 – 100 mm, lỗ sinh dục cái ở phía trước thân, trứng hình ovan, có 4 lớp vỏ dày, vỏ ngoài cùng nhẵn, tế bào phôi xếp thành khối kín trong trứng, đường kính 0,075 – 0,085mm

Hình 1.3 Trứng giun Toxascaris leonina Hình 1.4 Toxascaris leonina

(Nguồn: http://quizlet.com/34163414/ectoparasitos-flash-cards/ [32])

2.1.1.3 Vòng đời của giun đũa chó

* Giun đũa Toxocara canis (Werner, 1782)

Giun cái trưởng thành ký sinh ở dạ dày, ruột non, đẻ trứng Trứng giun theo phân được thải ra môi trường bên ngoài, gặp điều kiện ngoại cảnh (nhiệt độ,

độ ẩm, ánh sáng) thích hợp, trứng phát triển thành ấu trùng cảm nhiễm, ấu trùng vẫn nằm trong vỏ trứng Khi xâm nhập vào trong đường tiêu hóa của chó qua thức ăn nước uống, ấu trùng cảm nhiễm phá vỡ vỏ trứng và chui ra khỏi trứng, bắt đầu quá trình di hành trong cơ thể ký chủ Ấu trùng xuyên qua niêm mạc ruột, vào máu, theo hệ thống tuần hoàn đến gan, về tim, lên phổi đến nhánh khí quản lên hầu, theo đờm trở lại ruột non phát triển tới dạng giun trưởng thành

Một số ấu trùng sau khi vào phổi tiếp tục theo hệ thống tuần hoàn về các

tổ chức cư trú làm thành kén nhưng vẫn có khả năng gây nhiễm nếu các động vật cảm nhiễm khác ăn phải Ấu trùng còn qua hệ tuần hoàn của chó mẹ khi có chửa và nhiễm vào bào thai Ở bào thai, ấu trùng cư trú chủ yếu ở gan và phổi

Do vậy chó con sau khi được sinh ra đã mang mầm bệnh, đến 14 ngày tuổi đã gây bệnh cho chó con và khi 30 ngày tuổi đã thành giun trưởng thành Thời gian hoàn thành vòng đời từ 26 - 28 ngày (Skrjabin và cs, 1963)[16]

Sơ đồ vòng đời giun T.canis được mô tả như sau:

Thức

ăn nước uống

Hình 1.5 Sơ đồ vòng phát triển Toxocara canis

Sprent quan sát thấy ấu trùng Toxacara canis ở giai đoạn hai dài 0,335 - 0,444 mm và ký sinh trong các mô khác nhau của chó Các ấu trùng này lột xác lần hai ở gan, phổi, tim hoặc trong thành dạ dày Ở đây, chúng lột xác lần

ba và trở thành ấu trùng giai đoạn bốn và chuyển đến ruột chó Ấu trùng giai đoạn bốn lột xác lần thứ tư trong ruột chó dài 5,3 - 7,4 mm Spent cho biết, ở chó sơ sinh, ấu trùng giai đoạn ba chỉ ở phổi Sau 3 ngày, ấu trùng này chuyển vào ruột chó, ở đó, 23 ngày sau, chúng phát triển thành giun trưởng thành (Phan Địch Lân và cs, 1989) [12]

* Giun đũa Toxascaris leonina (Linstow, 1902)

Giun cái trưởng thành ký sinh ở ruột non của ký chủ cuối cùng Giun

đẻ trứng, trứng theo phân ra ngoài, gặp điều kiện thuận lợi, phát triển thành trứng có ấu trùng gây nhiễm, ấu trùng vẫn nằm trong trứng Trứng lẫn vào thức ăn, nước uống, vào đường tiêu hóa của ký chủ, ấu trùng được giải phóng

ở ruột, chúng chui qua niêm mạc ruột tới tĩnh mạch của rồi vào gan, theo hệ tuần hoàn đến phổi, phế nang, lên yết hầu, ấu trùng cảm nhiễm theo đờm lên miệng rồi được nuốt trở lại ruột non Tại đây ấu trùng lột xác 3 lần rồi phát triển thành dạng trưởng thành Thời gian hoàn thành vòng đời từ 55 – 72 ngày (Skrjabin và cs, 1963 [16])

Vòng đời phát triển của Toxascaris leonina được mô tả như sau:

T.leonnina

( ruột non chó)

Hình 1.6 Sơ đồ vòng phát triển của Toxascaris leonina

2.1.2 Bệnh giun đũa chó (Toxocariosis)

2.1.2.1 Dịch tễ học bệnh giun đũa chó

Nghiên cứu dịch tễ học cho ta cơ sở phòng trị bệnh ký sinh trùng

có hiệu quả Sự phát triển của ký sinh trùng phụ thuộc vào nhiều yếu tố khác nhau

Trứng

Chó nuốt

Trứng có ấu trùng có sức gây bệnh

Ấu trùng

Niêm mạc ruột Máu

Gan

Phổi

Hầu

* Động vật cảm nhiễm

Chó và hầu hết các loài thú ăn thịt họ chó (Canidae) đều nhiễm giun đũa Toxocara canis Các tác giả trong và ngoài nước đều có nhận xét: chó

cũng như thú ăn thịt khác bị nhiễm giun nặng ở giai đoạn còn non và nhẹ hơn

ở giai đoạn trưởng thành (Trịnh Văn Thịnh, 1963; Đoàn Văn Phúc và Phạm Văn Khuê, 1993) (Dẫn theo Hoàng Minh Đức, 2008) [2]

* Tuổi cảm nhiễm

Qua nghiên cứu của nhiều tác giả, hầu hết các tài liệu cho thấy: chó nhiễm giun đũa chủ yếu ở giai đoạn tuổi còn non (chiếm 60%) và nhiễm nặng hơn chó trưởng thành Skrjabin K.I và Petrov A.M (1963) [16] cho biết: chó

80 - 90 ngày tuổi mới thấy nhiễm giun đũa Toxascaris leonina, chó 2 tháng tuổi nhiễm nặng giun đũa Toxocara canis Thậm chí chó 15 - 21 ngày tuổi đã thấy nhiễm Toxocara canis do vòng đời phát triển của loại này qua bào thai

William Heinemann (1978) [28] điều tra sự nhiễm Toxocara canis ở

các lứa tuổi khác nhau của chó, tác giả cho biết: chó dưới 1 năm tuổi tỷ lệ nhiễm là 45%, trên 1 năm tuổi là 20%

Chó con nhiễm giun đũa nặng vì cơ thể có sức đề kháng yếu với mầm bệnh, dễ mẫn cảm với các loài giun Mặt khác, giun đũa truyền cho chó non ngay từ khi còn trong bụng mẹ (qua bào thai)

Theo Skrjabin và Petrov (1963) [16]: ở chó lớn, bệnh do Toxocara canis thấy ít hơn so với chó con, điều đó nói lên rằng: chó trưởng thành có sức đề kháng (miễn dịch) đối với bệnh Toxocara canis

Tác giả cũng cho biết chó mắc bệnh sớm nhất vào tuần tuổi thứ năm, chó trưởng thành mắc bệnh nhẹ hơn chó non Chó trưởng thành được nuôi

dưỡng tốt, có sức đề kháng cao với giun đũa Toxocara canis Người ta làm

thực nghiệm gây nhiễm 15.000 trứng giun đũa có sức gây bệnh cho 3 chó hai năm tuổi, cả 3 chó đều không bị bệnh khi nuôi dưỡng tốt Nhưng chó bị mắc

bệnh ngay sau khi giảm tiêu chuẩn vitamin A trong thức ăn Chó và các loài

thú ăn thịt trưởng thành khác ít bị nhiễm Toxocara canis, điều này chứng tỏ

rằng: chó trưởng thành có sức đề kháng với bệnh và được duy trì khi được nuôi dưỡng và chăm sóc tốt

Qua kết quả nghiên cứu thực tế của nhiều tác giả, tỷ lệ nhiễm giun đũa qua các lứa tuổi chó khác nhau

* Mùa vụ

Phan Địch Lân và cs (1989) [12] cho biết: chó con từ 1 - 3 tháng tuổi bị nhiễm bệnh hầu hết các tháng trong năm Chó con, ngoài con đường lây nhiễm trực tiếp (do ăn phải trứng giun cảm nhiễm), còn bị lây nhiễm ấu trùng từ lúc còn trong bào thai thông qua máu của con mẹ

Bệnh lây nhiễm và phát sinh nhiều vào mùa hè và mùa thu, nhiệt độ nóng, ẩm ướt và điều kiện thích hợp để trứng phát triển Mùa đông thời tiết lạnh sẽ hạn chế sự phát triển của ấu trùng và ấu trùng có thể bị chết Vì vậy, mùa đông chó ít mắc bệnh giun đũa hơn

Ở nước ta, do điều kiện nóng, ẩm gần như quanh năm nên trứng giun

có thể phát triển thành ấu trùng trong trứng, ở bất cứ tháng nào và lây nhiễm cho chó cũng như loài ăn thịt khác Nhiệt độ thích hợp để trứng phát triển thành ấu trùng là 20 - 300C Tuy nhiên, chó con thường bị nhiễm nặng trong những tháng nóng ẩm từ mùa hè sang thu

1.1.2.2 Bệnh lý lâm sàng của chó bệnh

Khi nghiên cứu về bệnh lý lâm sàng, các tác giả đều cho thấy: bệnh xảy

ra ở thể cấp và mãn tính Tuỳ theo số lượng giun và sức đề kháng của chó mà biểu hiện lâm sàng nặng hay nhẹ khác nhau

- Thể cấp tính: thường xảy ra ở chó non, sức đề kháng yếu, chó hay nôn mửa là do giun tròn kích thích vào niêm mạc ruột, đặc biệt chó nhiễm nhiều giun đũa, cuộn thành từng búi trong ruột, chó nôn ra cả giun

Skrjabin K.I (1963) [16] cho biết: giun đũa tiết độc tố, phá hoại hồng cầu và mạch máu ngoại biên, gây rối loạn tiêu hoá, ảnh hưởng đến quá trình trao đổi chất của chó dẫn đến viêm đường tiêu hoá, gây ỉa chảy, suy nhược

cơ thể Ngoài ra, độc tố của giun còn gây các triệu chứng thần kinh: co giật, sùi bọt mép

Kolevatova (1959), Brumpt (1949) cho biết: chó nôn dữ dội là do tác động cơ giới của giun bám vào tá tràng, tạo các vết tổn thương làm ruột tăng nhu động gây nôn (dẫn theo Skrjabin K.I., 1963) [16]

Nguyễn Thị Kim Lan và cs (1999) [7] cho biết: ấu trùng giun còn mang

vi khuẩn đến các cơ quan tổ chức gây viêm

Theo Ngô Huyền Thuý (1996) [24], chó bị bệnh giun đũa có biểu hiện gầy còm, thiếu máu, niêm mạc nhợt nhạt, lông xù, rối loạn tiêu hóa, ỉa ra máu Chó chết với tỷ lệ cao 62 - 85% do rối loạn chất điện giải, hạ huyết áp, trụy tim mạch Chó 2 – 6 tháng tuổi nôn mửa liên tục, mồm có nhiều nước dãi,

nhiều con nôn ra cả giun đũa Toxocara canis, có những cơn đau bụng vật vã,

kêu rên giãy dụa (do nhiễm nhiều giun đũa)

Đỗ Dương Thái, Trịnh Văn Thịnh (1978) [22] nhận xét: khi mắc bệnh giun đũa, chó thường gầy còm, lông xù, bụng to, ăn uống thất thường, đi tả

hoặc đi táo, có khi có triệu chứng như động kinh, nôn mửa, chất chứa nôn ra

có mùi hắc như mùi bơ để lâu Khi bội nhiễm giun đũa, chó run rẩy, thỉnh thoảng lên cơn co giật, giẫy dụa, chảy nước dãi Chó 3 tháng tuổi nhiễm giun đũa có biểu hiện viêm phúc mạc, xoang bụng tích nước Thời kỳ ấu trùng di hành qua phổi gây viêm phổi, tắc ống dẫn mật

Theo Kolevatova A L (1959): trong điều kiện được nuôi dưỡng tốt thì sau một thời gian nhất định, chó có thể tự khỏi bệnh và phục hồi sức khoẻ (dẫn theo Hoàng Minh Đức, 2008 [2])

Khi mắc bệnh do giun đũa Toxocara canis, chó gầy còm, suy nhược do

giun chiếm đoạt chất dinh dưỡng, chó ăn kém, hay nôn mửa, chậm lớn và hầu như không tăng trọng, bụng to làm cho người ta nhầm với với bệnh viêm gan

ở chó con và hội chứng còi xương Độc tố của giun tác động lên hệ thần kinh làm cho súc vật non biểu hiện run rẩy, co giật

Phạm Sỹ Lăng và cs (1993) [10] quan sát thấy 6 chó con 45 ngày tuổi

có biểu hiện triệu chứng trên, khi được tẩy giun, bình quân mỗi chó thải ra 48 giun đũa trưởng thành

Phạm Sỹ Lăng và cs, (1989) [11] cho biết: hội chứng viêm ruột cấp và mãn tính cũng thấy rõ ở chó với các triệu chứng như: nôn mửa, ỉa chảy, phân tanh khắm Chó con 1 - 2 tháng tuổi ỉa phân trắng xám, lỏng, đau bụng, rên rỉ, lăn lộn, có con nôn ra giun và ỉa ra giun, chó có hội chứng thần kinh như đi lại run rẩy, loạng choạng giống như trạng thái thần kinh của bệnh care, chỉ khác là không tăng nhiệt độ Chó trưởng thành bị nhiễm giun chỉ thể hiện gầy còm, thỉnh thoảng nôn khan và ít biểu hiện triệu chứng lâm sàng như chó con

Trường hợp chó nhiễm nhẹ (số lượng Toxascaris leonina ít), thường

không có biểu hiện bệnh lý Nếu chó nhiễm nặng, số lượng giun có thể đến vài trăm con trong ruột non chó thì bệnh lý thể hiện rõ

1.1.2.3 Bệnh tích

Theo Sprent (1955), ấu trùng giun đũa Toxocara canis khi di hành

trong máu có thể làm tắc mao mạch, tắc ống dẫn mật và gây viêm nhiễm ở đó

Giun đũa Toxascaris leonina trưởng thành với số lượng nhiều có thể gây tắc

ruột và thủng ruột non của chó (dẫn theo Hoàng Minh Đức, 2008 [2])

Trịnh Văn Thịnh (1963) [19] nhận xét: ấu trùng giun đũa gây những tổn thương ở phổi, phế nang khi nhanh chóng di hành

Phạm Văn Khuê và cs (1993) [6] cho biết: viêm gan, viêm túi mật,

viêm phổi ở chó non do quá trình di hành của ấu trùng Toxocara canis,

hoặc giun đũa trưởng thành chui vào túi mật phá hoại chức năng hoạt động của các cơ quan

2.1.2.4 Biện pháp phòng, chống bệnh giun đũa ở chó

* Điều trị bệnh:

Ngày nay, có rất nhiều loại hóa dược đã được nghiên cứu trong và ngoài nước được sử dụng để điều trị và phòng bệnh giun sán cho gia súc và gia cầm Trong số đó có nhưng loại thuốc dễ sử dụng có hiệu lực cao, an toàn và đang được áp dụng điều trị cho động vật

- Piperazin

Sloan (1954) dùng cho chó với liều 200mg/kg TT và mèo liều 100mg/kg đều có hiệu lực tẩy giun đũa Sprent và English (1958) cho rằng: Piperazin adipate liều 200mg/kg tẩy được giun đũa trưởng thành Chó con 1 - 2 tuần tuổi, khi điều trị có thể ngăn ngừa sự sinh sản của giun, từ đó phòng sự phát tán của trứng ra khỏi môi trường Tuy nhiên, thuốc này không ngăn được chó con bị nhiễm trước khi sinh (dẫn theo Hoàng Minh Đức, 2008 [2])

Theo Hayes và Medaniel (1959), hợp chất Piperazin được dung nạp tốt (dẫn theo Soulsby E.J.L, 1965 [28])

- Mebendazol

Biệt dược của Mebendazol là Vermox, là một loại hóa dược an toàn, có thể tẩy được nhiều loại giun tròn ở chó mèo với liều 60 - 100mg/kg TT, hiệu lực đạt 93% (Phan Địch Lân và cs, 1989 [12])

- Mebenvet

Là chế phẩm chứa 10% hoạt chất Mebendazol, liều dùng 0,6 - 1 gam/kg

TT, chia thuốc thành 2 liều tẩy vào 2 buổi sáng, có tác dụng tẩy giun móc, giun đũa, giun lươn (Trần Minh Châu và cs, 1988 [1])

Những loại thuốc trên dùng để điều trị giun tròn cho chó, tẩy định kỳ 3 - 6 tháng một lần

- Febendazol

Nghiên cứu ở Mỹ, Burke và cs (1982) nhận xét: thuốc Fenbendazol có khả năng chống lại giun tròn, liều 50mg/kg TT, dùng liên tục trong 3 ngày (dẫn theo Arundel H.J., 2000 [24])

- Ivermectin

Là thuốc trị ký sinh trùng do Công ty cổ phần dược và vật tư Thú y (Hanvet) sản xuất Thuốc có nguồn gốc từ nấm, thuộc nhóm các Imidazol – thiazol, dẫn xuất của Imidazole

Tinh chất: thuốc có dạng bột kết tinh màu trắng, không hòa tan trong nước Là sản phẩm lên men của nấm mốc Streptomyces avermitilis Thuốc dung nạp khá tốt, được bào chế dưới dạng dung dịch tiêm

Thuốc có tác động bằng cách phong bế sự dẫn truyền xung động thần kinh của ký sinh trùng do tăng hiệu quả phóng kích thích axit gamma aminobutyric Chất trung gian hóa học này can thiệt chủ yếu vào các loại giun tròn Phổ loạt lực rộng với các loại giun tròn

- Bí đỏ

Bí đỏ còn gọi là bí ngô, bí rợ, tên khoa học là Cucurbita pepo, họ Bầu

bí Dây bí đỏ mọc lan trên mặt đất Hiện nay có nhiều loài mà quả có hình dáng và màu sắc khác nhau: hình cầu, hình cầu dẹt, hình trụ; vỏ nâu, vỏ vân,

vỏ sẫm màu; thịt đỏ, thịt hồng, thịt vàng; có loại nặng trên 100kg Trong số đó

có khá nhiều loài lai giống

Tác dụng: điều trị giun sán cho gia súc

Cách dùng: Hạt bí ngô (bí đỏ) 40 g, rang cho hơi vàng, lột vỏ cho ăn lúc sáng sớm, khi đói (Nguyễn Quang Tính, 2014 [25])

- Hạt cau

Cây cau còn gọi là binh lang, tân lang, có tên khoa học: Arecaceae Cau

là cây nhiệt đới có thân trụ, thẳng đứng, cao 15 – 20 m, có nhiều vòng sẹo đều đặn của vết lá rụng Hoa đực ở trên nhỏ, màu trắng, thơm, hoa cái to hơn ở dưới Quả hạch hình trứng thuôn đầu, vở quả nhẵn bóng, còn non màu lục sau vàng, vỏ quả giữa nhiều xơ

- Tác dụng: Theo y học cổ truyền, hạt cau vị chát, tính ôn, có tác dụng diệt trùng, trừ giun sán, tiêu tích, hành thủy

- Cách điều trị giun đũa chó bằng hạt cau: Hạt cau khô thái nhỏ 80g cùng 2 bát trược, sắc lấy 1 bát, chia uống dần trong 1 giờ cho hết Hoặc sáng sớm cho ăn 80g hạt bí ngô đã rang chín, sắc 80g hạt cau với nước, lây 600ml

Uống nước sắc hạt cau sau khi ăn hạt bí 2 giờ, sau đó uống thuốc tẩy để tẩy giun ra ngoài (Nguyễn Quang Tính, 2014 [25])

- Hằng ngày quét dọn phân trong chuồng nuôi và sân chơi, tẩy uế 2 lần một tháng và dội nước sôi

- Không để chó nhà tiếp xúc với chó thả rông

- Tẩy giun cho chó trưởng thành theo kế hoạch lần đầu vào lúc 70 - 80 ngày tuổi, sau đó 2 tuần phải xét nghiệm phân với súc vật non và tẩy 2 lần đối với tất cả các chó và thú vật khác

Một số tác giả trong nước như Đỗ Hài (1972) [4], Phan Địch Lân và Phạm Sỹ Lăng (1989) [12], Phạm Văn Khuê và Đoàn Văn Phúc (1993) [6] đề ra một số biện pháp phòng bệnh giun đũa cho chó như sau:

- Sử dụng thuốc tẩy giun sán định kỳ đối với chó nhiễm giun: 3 tháng tẩy một lần bằng các loại thuốc Piperazinadipate, Mebenvet, Mebendazol

- Thực hiện vệ sinh thú y, tẩy uế chuồng nuôi 1 lần/tháng bằng thuốc sát trùng Crezin 1%, đun nước sôi dội chuồng, vệ sinh khu vực xung quanh chuồng,

ủ phân bằng vôi bột để diệt trứng giun và ấu trùng

- Cho chó ăn uống đảm bảo vệ sinh, đầy đủ cả về lượng lẫn chất để giúp cho con vật có sức đề kháng chống lại bệnh ký sinh trùng nói chung và bệnh giun đũa nói riêng

2.2 Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước

2.2.1 Tình hình nghiên cứu trong nước

Ở nước ta với điều kiện nhiệt đới gió mùa ẩm quanh năm nên các bệnh ký sinh trùng nói chung và bệnh giun đũa nói riêng gây nhiều tác hại đáng kể đến loài chó Vì vậy, đã có nhiều công trình nghiên cứu về bệnh do ký sinh trùng gây nên ở vật nuôi, trong đó có các công trình nghiên cứu về bệnh giun sán ở chó

Theo Phan Lục (1997) [15] chó ta nhiễm giun đũa với tỷ lên 29%, trong

đó 17 - 20 ngày tuổi bị nhiễm nặng với triệu chứng rõ ràng Chó con từ sơ sinh đến 4 tháng tuổi nhiễm 52%, tuổi chó càng tăng tỷ lệ nhiễm giun đũa ngày càng giảm và chó trưởng thành (trên 1 năm tuổi) chỉ chiếm 12%

Phạm Sỹ Lăng và cs (1993) [10] mổ khám 23 chó chết và xét nghiệm phân của 574 chó cảnh ở vườn thú Thủ Lệ đã phát hiện 5 loài giun tròn ký sinh

ở chó với tỷ lệ nhiễm: A caninum 72%; T canis 20,4; T leonine 29,4%; T vulpis 17,1%; Strongyloides canis 14,2%

Ngô Huyền Thúy và cs (1994) [23] xét nghiệm mẫu phân chó ở Hải

Phòng và Hà Nội thấy nhiễm 5 loại giun tròn, tỷ lệ lần lượt là : T canis 27,8%

và 27 %; T leonina 17,8% và 21,9%; A canium 67,7% và 62,3%; U stenocephala: 66,1% và 64,9%; T.vulpis: 3,4% và 12,4%

Ngô Huyền Thúy (1996) [24] xét nghiệm mẫu phân chó nuôi tại Hà Nội thấy nhiễm 12 loài thuộc 12 giống giun sán, mổ khám 516 chó thấy tỷ lệ nhiễm

giun tròn, sán dây, sán lá, lần lượt là 98,5%; 36,8% và 10,4% Chó mắc T canis

biểu hiện gầy còm, thiếu máu, niêm mạc nhợt nhạt, lông xù rối loại tiêu hóa, ỉa

ra máu Chó chết với tỷ lệ cao 62 - 85% do rối loạn chất điện giải, hạ huyết áp trụy tim mạch Chó 2 - 6 tháng tuổi nôn mửa liên tục, mồm có nhiều nước dãi,

nhiều con nôn ra cả giun đũa T canis, có những con đau bụng vật vã, kêu rên

dãy dụa (do nhiễm nhiều giun đũa)

Võ Thị Hải Lê (2007) [13] mổ khám 324 chó ở thành phố Vinh cho biết :

tỷ lệ nhiễm T canis là 12,34%; T leonina 17,28%; A canium: 67,59% Trứng T leonina khi làm khô ở phòng thí nghiệm để 45 ngày vẫn không chết, khoảng 100

ngày trứng mới chết Nhưng khi phơi khô dưới ánh nắng trực tiếp của mùa hè, với nhiệt độ 330 C thì sau 3 ngày trứng mới chết Ở nhiệt độ lớn hơn 400C trứng

T leonina bị tiêu diệt

2.2.2 Tình hình nghiên cứu ngoài nước

Werner (1982) lần đầu phát hiện ra giun tròn T canis ký sinh ở ruột non

chó và chó sói Petrov A.M (1941) và Sprent (1959) nghiên cứu phát hiện ra

vòng đời, phương thức nhiễm vào vật chủ của loài T.canis (dẫn theo Hoàng

Minh Đức, 2008 [2])

Watkins và Havey (1942) đã tìm thấy ở ruột non chó, cáo vùng tây nam

nước Anh và vùng Shorophier loài T canis (dẫn theo Ngô Huyền Thúy, 1996 [24])

Nghiên cứu ở Liên Xô cũ, Skrjabin K.I và Petrov A.M (1963) [16] cho

biết: chó nhiễm T.canis có khả năng nhiễm qua bào thai Vì vậy, chó con mới

sinh ra kiểm tra phân đã thấy trứng giun đũa Chó trưởng thành ít nhiễm hơn chó còn non

Mile và Hansbory (1982) kiểm tra 1720 chó tại Leipzia (Đức) cho biết tỷ

lệ nhiễm T canis 5,4%; T leonina 38%

Theo Sprent (1955), ấu trùng giun đũa T canis khi di hành trong máu có thể làm tắc mao mạch, tắc ống dẫn mật và gây viêm nhiễm ở đó Giun đũa T leonina trưởng thành với số lượng nhiều có thể gây tắc ruột và thủng ruột non

của chó (dẫn theo Phan Địch Lân và cs, 1989 [12])

PHẦN 3 ÐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG

VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.1 Ðối tượng, địa điểm, thời gian nghiên cứu

3.1.1 Đối tượng nghiên cứu

- Chó ở các lứa tuổi nuôi tại thành phố Thái Nguyên - tỉnh Thái Nguyên

- Trứng giun đũa và trứng giun đũa có ấu trùng có sức gây bệnh

- Chó bị bệnh giun đũa tự nhiên và do gây nhiễm

3.1.2 Ðịa điểm nghiên cứu

- Ðịa điểm triển khai: các xã thuộc thành phố Thái Nguyên - tỉnh Thái Nguyên

- Ðịa điểm xét nghiệm mẫu:

+ Mẫu phân được xét nghiệm tại phòng thí nghiệm bộ môn Bệnh động vật - Khoa Chăn nuôi thú y – Trường Ðại học Nông Lâm Thái Nguyên

+ Mẫu máu được xét nghiệm tại phòng khám đa khoa Minh Đức (314 Lương Ngọc Quyến – thành phố Thái Nguyên)

+ Bệnh tích vi thể được thực hiện tại Bệnh viên Đa khoa Thái Nguyên

3.1.3 Thời gian nghiên cứu

Từ ngày 9 tháng 6 năm 2014 đến ngày 24 tháng 11 năm 2014

3.2 Vật liệu nghiên cứu

3.2.1 Mẫu nghiên cứu

- Mẫu phân chó các lứa tuổi

- Mẫu máu chó mắc bệnh giun đũa và chó khỏe

- Ruột non, dạ dày của chó bị bệnh giun đũa (xác định bệnh tích đại thể và vi thể)

3.2.2 Dụng cụ, thiết bị và hóa chất

- Các dụng cụ mổ khám: Kéo, dao, khay mổ khám và một số vật dụng khác

- Kính hiển vi điện, lamen, lam kính, kính lúp

- Máy xác định các chỉ số huyết học Osmetech OPTI – CCA/Blood Gas Analfzen

- Thuốc nhuộm Hematocylin - Eosin, hoá chất và các dụng cụ thí nghiệm khác

3.3 Nội dung nghiên cứu

3.3.1 Tỷ lệ và cường độ nhiễm giun đũa ở chó tại một số xã, phường của thành phố Thái Nguyên

3.3.2 Nghiên cứu khả năng phát triển của trứng giun đũa ở ngoài ngoại cảnh

3.3.3 Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý và lâm sàng bệnh giun đũa ở chó

3.3.3.1 Kết quả gây nhiễm cho chó

3.3.3.2 Biểu hiện lâm sàng của chó bị bệnh giun đũa

- Biểu hiện lâm sàng của chó bị bệnh giun đũa do gây nhiễm

- Biểu hiện lâm sàng của chó bị bệnh giun đũa tự nhiên

3.3.2.3 Bệnh tích bệnh giun đũa chó của chó bị bệnh do gây nhiễm

- Bệnh tích đại thể bệnh giun đũa chó do gây nhiễm

- Bệnh tích vi thể bệnh giun đũa chó do gây nhiễm

3.3.2.4 Nghiên cứu một số chỉ tiêu huyết học của chó bị bệnh và chó khỏe

3.4 Phương pháp nghiên cứu

3.4.1 Phương pháp lấy mẫu

Mẫu được thu thập tại các nông hộ và gia đình theo phương pháp lấy mẫu chùm nhiều bậc

- Mẫu phân: Lấy mẫu phân mới thải của chó các lứa tuổi ở các xã,

phường của thành phố Thái Nguyên, tỉnh Thái Nguyên; mẫu phân chó gây

nhiễm và mẫu phân chó trước và sau khi sử dụng thuốc điều trị với lượng 20 - 30g/mẫu Để riêng mỗi mẫu phân vào một túi nilon nhỏ và có ghi nhãn: địa điểm, tuổi chó, giống, thời gian lấy mẫu (những thông tin này cũng được ghi vào nhật ký đề tài) Mẫu được xét nghiệm ngay trong ngày

- Mẫu máu: Lấy máu của chó trước và sau gây nhiễm giun đũa do

nhiễm ở tĩnh mạch rìa tai, mỗi chó lấy 1 ml máu

- Bệnh phẩm: Ruột non và dạ dày của chó bị bệnh giun đũa do gây

nhiễm nhân tạo

3.4.2 Phương pháp xét nghiệm mẫu:

- Phương pháp xác định tỷ lệ nhiễm giun đũa chó

Tất cả các mẫu phân đều được xét nghiệp bằng phương pháp Fulleborn với dung dịch muối NaCl bão hoà, tìm trứng giun đũa chó dưới kính hiển vi, độ phóng đại 100 lần Những mẫu có trứng giun đũa chó được đánh giá là có nhiễm, ngược lại là không nhiễm

- Phương pháp xác định cường độ nhiễm giun đũa ở chó:

Đếm số trứng giun đũa chó trong 1gam phân bằng buồng đếm Mc Master cải tiến (Nguyễn Thị Kim Lan và cs, 2008) [8] và phân thành 4 mức

độ theo số trứng/g phân đếm được

Phương pháp này được tiến hành như sau:

Cân 4 gam phân vào cốc thủy tinh, thêm nước lã sạch (100 - 150 ml), khuấy tan phân, lọc bỏ cặn bã thô Nước lọc để lắng trong 1 - 2 giờ, gạn bỏ nước, giữ lại cặn Cho 56 ml dung dịch nước muối bão hòa, khuấy đều cho tan cặn Trong khi đang khuấy, lấy công tơ hút hút 1ml dung dịch phân nhỏ đầy 2 buồng đếm Mc Master Để yên 5 phút rồi kiểm tra dưới kính hiển vi (độ phóng đại 10x10) Đếm toàn bộ số trứng trong những ô của hai buồng đếm, rồi tính theo công thức sau:

Số trứng/ 1 gam phân = Tổng số trứng ở 2 buồng đếm x 60

Thí nghiệm được bố trí vào 2 mùa: Hè và Thu

Lấy phân của những chó nhiễm giun đũa nặng cho vào 10 chậu nhựa

có đường kính 15 cm và chiều cao 10 cm (mỗi chậu được coi là 1 mẫu, khoảng 400 - 500g phân), trong đó 5 mẫu được để tự nhiên trong điều kiện nhiệt độ và ẩm độ không khí bình thường của từng mùa

3.4.4 Phương pháp gây nhiễm cho chó

Sau đó chia chó làm 2 lô thí nghiệm:

Lô 1 (gồm 3 chó): gây nhiễm cho chó qua đường tiêu hoá, cho chó nuốt trứng giun đũa chó có sức gây bệnh với số lượng lớn với 3 liều gây nhiễm khác nhau

Lô 2 (gồm 3 chó): Lô đối chứng (không gây nhiễm)

* Phương pháp thu thập trứng giun đũa có sức gây bệnh

Sử dụng phương pháp Darling thu nhận trứng giun từ những mẫu phân

đã được nuôi cấy trứng đến giai đoạn trứng chứa ấu trùng có sức gây bệnh Ly tâm toàn bộ các mẫu phân nuôi cấy, sau đó dùng que cấy vớt hết lớp màng trên

bề mặt nước của ống nghiệm cho vào cốc thuỷ tinh chứa 30 ml nước sạch

* Phương pháp xác định số lượng trứng giun đũa có sức gây bệnh dùng để gây nhiễm cho chó thí nghiệm

Dùng đũa thuỷ tinh quấy nhẹ nhàng cốc nước chứa trứng giun đũa để trứng phân bố đều trong cốc Lấy pipet hút 5ml ở 5 vị trí khác nhau (mỗi vị trí hút 1ml) nhỏ vào buồng đếm Mc Master để đếm số trứng trung bình có trong 1ml nước và tính được liều gây nhiễm

Liều gây nhiễm

Hàng ngày, lấy mẫu phân tươi của chó để xét nghiệm tìm trứng giun đũa và theo dõi biểu hiện lâm sàng của chó gây nhiễm, theo dõi thời gian bắt đầu thải trứng và số lượng trứng giun trong 1g phân

Mổ khám chó bị bệnh sau khi gây nhiễm để tìm trứng giun đũa ký sinh, kiểm tra bệnh tích đại thể, lấy mẫu làm tiêu bản vi thể

3.4.5 Phương pháp theo dõi các biểu hiện lâm sàng của chó bị bệnh giun đũa

Chúng tôi sử dụng phương pháp chẩn đoán cơ bản là quan sát những biểu hiện của chó: Thể trạng, ăn uống, vận động, niêm mạc và trạng thái phân

3.4.6 Phương pháp xét nghiệm máu để xác định một số chỉ số huyết học của chó bị bệnh giun đũa và chó khỏe

- Số lượng hồng cầu, bạch cầu, hàm lượng huyết sắc tố được xác định bằng máy ABX Micros tại phòng Huyết học – phòng khám Đa Khoa Minh Đức

- Công thức bạch cầu được xác định bằng phương pháp Tristova: Làm tiêu bản máu, nhuộn Giemsa, đếm số lượng từng loại bạch cầu và tính tỷ lệ phần trăm của mỗi loại

- Nghiên cứu biến đổi bệnh lý vi thể bằng phương pháp làm tiêu bản

tổ chức học theo quy trình tẩm đúc parafin, nhuộm Hematoxilin – Eosin, đọc kết quả dưới kính hiển vi quang học Labophot – 2 và chụp ảnh bằng máy ảnh gắn trên kính hiển vi

- Phương pháp làm tiêu bản vi thể các phần của cơ quan tiêu hoá của chó theo thứ tự các bước sau:

+ Lấy bệnh phẩm: Cắt phần bệnh phẩm có nhiều giun đũa ký sinh (ruột non của chó)

+ Cố định bằng dung dịch Formol 10% với tỷ lệ 1 phần bệnh phẩm với 9 phần Formol

+ Sau khi cố định, rửa tổ chức dưới vòi nước chảy nhẹ từ 12 - 24 giờ

để loại bỏ Formol có trong tổ chức

+ Khử nước: Dùng cồn tuyệt đối để rút nước trong bệnh phẩm ra + Làm trong tiêu bản: Ngâm bệnh phẩm qua hệ thống Xylen để làm trong bệnh phẩm

+ Tẩm parafin: Ngâm bệnh phẩm đã làm trong vào các cốc đã đựng parafin nóng chảy, để ở tủ ấm nhiệt độ 560C

+ Đổ Block: Rót parafin nóng chảy vào khuôn giấy rồi đặt miếng tổ chức (bệnh phẩm) đã tẩm parafin vào Khi parafin đông đặc hoàn toàn thì bóc khuôn Sửa lại Block cho vuông vắn

+ Cắt và dán mảnh: Cắt bệnh phẩm trên máy cắt microtocom, độ dày mảnh cắt 3 - 4 µ m Dán mảnh cắt lên phiến kính bằng dung dịch Mayer (lòng trắng trứng gà 1 phần, glyxerin 1 phần; 1 ml hỗn hợp trên pha trong 19 ml nước cất)

+ Nhuộm tiêu bản bằng phương pháp Hematoxilin– Eosin Phương pháp như sau: Tẩy nến bằng Xylen, sau đó ngâm tiêu bản tổ chức vào cồn Ethanol 96% trong 5 phút Tiêu bản tổ chứcđược rửa dưới dòng nước chảy nhẹ trong 5 phút và nhuộm Hematoxilin trong 5 phút, sau đó lại rửa nước trong 15 phút và nhuộm Eosin trong 1 - 2 phút Rửa nước (dưới dòng nước chảy nhẹ) và làm khô tiêu bản trong dung dịch cồn có nồng độ tăng dần 96% đến 100% với thời gian giảm dần từ 5 phút đến 2 phút

i i i

X

X X

- Số trung bình =∑=n1 i

i X X

i i i

X

X X