Kiểm nghiệm thuốc theo tiêu chuẩn

Kiểm nghiệm thuốc theo tiêu chuẩn

Chuyên đềChuyên đềKIỂM NGHIỆM THUỐC BẰNG PHƯƠNG PHÁP SINH HỌCKIỂM NGHIỆM THUỐC BẰNG PHƯƠNG PHÁP SINH HỌC I. MỞ ĐẦUI. MỞ ĐẦU Trong ngành Dược có nhiều phương pháp khác nhau để kiểm tra Trong ngành Dược có nhiều phương pháp khác nhau để kiểm tra chất lượng của thuốc như phương pháp hoá học, phương pháp vật chất lượng của thuốc như phương pháp hoá học, phương pháp vật lý, phương pháp sinh học.lý, phương pháp sinh học. Phương pháp hoá, vật lý tiến hành nhanh, chính xác nhưng chỉ Phương pháp hoá, vật lý tiến hành nhanh, chính xác nhưng chỉ áp dụng được với các chất thành phần hoá học đã biết. Một số dược áp dụng được với các chất thành phần hoá học đã biết. Một số dược phẩm có yêu cầu về hiệu lực tác dụng, hoặc những tính chất riêng phẩm có yêu cầu về hiệu lực tác dụng, hoặc những tính chất riêng biệt như độ an toàn của vaccine, độc tính bất thường hay yếu tố gây biệt như độ an toàn của vaccine, độc tính bất thường hay yếu tố gây sốt của một số loại thuốc…Những tiêu chuẩn này không thể xác sốt của một số loại thuốc…Những tiêu chuẩn này không thể xác định được bằng phương pháp lý, hoá mà phải dùng phương pháp định được bằng phương pháp lý, hoá mà phải dùng phương pháp sinh học.sinh học. 1.1. Nguyên tắc1.1. Nguyên tắc••Phương pháp sinh học dựa trên nguyên tắc:Phương pháp sinh học dựa trên nguyên tắc:So sánh hiệu lực tác dụng hoặc các đặc tính riêng của So sánh hiệu lực tác dụng hoặc các đặc tính riêng của chất thử với chất chuẩn tương ứng trong cùng điều chất thử với chất chuẩn tương ứng trong cùng điều kiện và thời gian thí nghiệm.kiện và thời gian thí nghiệm.Trong lĩnh vực kiểm nghiệm thuốc, hai loại thử Trong lĩnh vực kiểm nghiệm thuốc, hai loại thử nghiệm được áp dụng nhiều nhất là:nghiệm được áp dụng nhiều nhất là:- Kiểm nghiệm thuốc bằng phương pháp thử trên động - Kiểm nghiệm thuốc bằng phương pháp thử trên động vậtvật- Kiểm nghiệm thuốc bằng các thử nghiệm vi sinh vật.- Kiểm nghiệm thuốc bằng các thử nghiệm vi sinh vật. 1.2. Chất chuẩn1.2. Chất chuẩnChất chuẩn là một yếu tố quan trọng để đánh giá chất lượng Chất chuẩn là một yếu tố quan trọng để đánh giá chất lượng chất thử. Chất chuẩn được chia làm hai loại: chất thử. Chất chuẩn được chia làm hai loại:  - Chất chuẩn gốc- Chất chuẩn gốc - Chất chuẩn thứ cấp- Chất chuẩn thứ cấpChất chuẩn phải được bảo quản trong các ống thuỷ tinh ở Chất chuẩn phải được bảo quản trong các ống thuỷ tinh ở nhiệt độ thích hợp tuỳ theo mẫu (thường ở nhiệt độ < 5nhiệt độ thích hợp tuỳ theo mẫu (thường ở nhiệt độ < 500C) C) trong điều kiện khô, tránh ánh sáng.trong điều kiện khô, tránh ánh sáng.1.3. Đánh giá kết quả1.3. Đánh giá kết quảThử nghiệm sinh học thường có thời gian thí nghiệm kéo dài Thử nghiệm sinh học thường có thời gian thí nghiệm kéo dài và phụ thuộc vào nhiều yếu tố như tính chất đáp ứng của sinh và phụ thuộc vào nhiều yếu tố như tính chất đáp ứng của sinh vật thí nghiệm, người làm thí nghiệm, các điều kiện thử vật thí nghiệm, người làm thí nghiệm, các điều kiện thử nghiệm. Các yếu tố này thường không ổn định. Vì vậy kết nghiệm. Các yếu tố này thường không ổn định. Vì vậy kết quả thử nghiệm sinh học phải được đánh giá bằng toán thống quả thử nghiệm sinh học phải được đánh giá bằng toán thống kê. Độ chính xác của phép thử được thể hiện bằng giới hạn kê. Độ chính xác của phép thử được thể hiện bằng giới hạn tin cậy.tin cậy. II. KIỂM NGHIỆM THUỐC BẰNG PHƯƠNG II. KIỂM NGHIỆM THUỐC BẰNG PHƯƠNG PHÁP THỬ TRÊN ĐỘNG VẬTPHÁP THỬ TRÊN ĐỘNG VẬT2.1. Nguyên tắc 2.1. Nguyên tắc Kiểm nghiệm thuốc bằng các phép thử trên động Kiểm nghiệm thuốc bằng các phép thử trên động vật dựa trên sự đáp ứng của động vật thí nghiệm vật dựa trên sự đáp ứng của động vật thí nghiệm đối với các chế phẩm được đưa vào cơ thể một liều đối với các chế phẩm được đưa vào cơ thể một liều lượng theo qui định của từng thí nghiệm đẻ đánh lượng theo qui định của từng thí nghiệm đẻ đánh giá chất lượng của chế phẩm cần thử.giá chất lượng của chế phẩm cần thử. 2.2. Động vật thí nghiệm 2.2. Động vật thí nghiệm Yêu cầu: Động vật thí nghiệm phải đồng đều, thuần Yêu cầu: Động vật thí nghiệm phải đồng đều, thuần khiết về nòi giống, khoẻ mạnh không nhiễm bệnh, không khiết về nòi giống, khoẻ mạnh không nhiễm bệnh, không có thai và được nuôi dưỡng đầy đủ. Chất lượng của động có thai và được nuôi dưỡng đầy đủ. Chất lượng của động vật quyết định sự chính xác của phép thử.vật quyết định sự chính xác của phép thử.2.3. Thử Invivo và Invitro.2.3. Thử Invivo và Invitro.Thử nghiệm được tiến hành trên cơ thể động vật sống Thử nghiệm được tiến hành trên cơ thể động vật sống gọi là Invivo. gọi là Invivo. Phép thử có thể được tiến hành trên các cơ quan cô lập Phép thử có thể được tiến hành trên các cơ quan cô lập của động vật: tim, tử cung, ruột, máu… gọi là thử của động vật: tim, tử cung, ruột, máu… gọi là thử Invitro.Invitro. 2.4. Liều (Dose)2.4. Liều (Dose)Liều là lượng chế phẩm thử đưa vào cơ thể động vật một lần cho Liều là lượng chế phẩm thử đưa vào cơ thể động vật một lần cho từng mục đích thí nghiệm. Ví dụ: Liều LDtừng mục đích thí nghiệm. Ví dụ: Liều LD00, LD, LD5050, LD, LD100100, MLD, , MLD, liều thử chất hạ áp, liều thử chất gây sốt.liều thử chất hạ áp, liều thử chất gây sốt.2.5. Một số thử nghiệm trên động vật áp dụng trong kiểm 2.5. Một số thử nghiệm trên động vật áp dụng trong kiểm nghiệm thuốc nghiệm thuốc 2.5.1. Thử độc tính bất thường2.5.1. Thử độc tính bất thường• • Nguyên tắc:Nguyên tắc:Độc tính bất thường của mẫu thử được đánh giá bằng số chuột Độc tính bất thường của mẫu thử được đánh giá bằng số chuột nhắt sống và chết trong thời gian 48 giờ sau khi chuột nhận được nhắt sống và chết trong thời gian 48 giờ sau khi chuột nhận được một lượng thuốc thử thích hợp bằng đường tiêm hoặc đường một lượng thuốc thử thích hợp bằng đường tiêm hoặc đường uống.uống.Thí nghiệm này thường được áp dụng cho các thuốc đông dược Thí nghiệm này thường được áp dụng cho các thuốc đông dược có dược liệu độc như ô đầu, phụ tử hay các chế phẩm đông dược có dược liệu độc như ô đầu, phụ tử hay các chế phẩm đông dược mới.mới. • • Động vật thí nghiệm : Động vật thí nghiệm :  Dùng chuột nhắt trắng khoẻ mạnh, nếu chuột cái không Dùng chuột nhắt trắng khoẻ mạnh, nếu chuột cái không được có thai, cân nặng từ 18g đến 22g.được có thai, cân nặng từ 18g đến 22g. • • Nguyên tắc tiến hành:Nguyên tắc tiến hành:Chất thử được hoà tan trong NaCl 0,9% hoặc nước cất pha Chất thử được hoà tan trong NaCl 0,9% hoặc nước cất pha tiêm để tạo dung dịch có nồng độ quy định cho từng chuyên tiêm để tạo dung dịch có nồng độ quy định cho từng chuyên luận.luận.Thí nghiệm được thử trên 5 chuột, cho mỗi chuột 0,5 ml Thí nghiệm được thử trên 5 chuột, cho mỗi chuột 0,5 ml dung dịch chất thử bằng một trong các đường dùng sau:dung dịch chất thử bằng một trong các đường dùng sau: + Tiêm tĩnh mạch+ Tiêm tĩnh mạch + Tiêm màng bụng+ Tiêm màng bụng + Tiêm dưới da+ Tiêm dưới da + Uống+ Uống • • Đánh giá kết quả:Đánh giá kết quả:Sau 48Sau 48hh dùng thuốc ở lần thứ nhất, nếu không có chuột dùng thuốc ở lần thứ nhất, nếu không có chuột nào chết, mẫu thử đạt yêu cầu. Nếu có một hay nhiều nào chết, mẫu thử đạt yêu cầu. Nếu có một hay nhiều chuột chết trong thời gian trên phải làm lại thí nghiệm chuột chết trong thời gian trên phải làm lại thí nghiệm lần thứ hai.lần thứ hai.Thí nghiệm lần thứ hai được tiến hành với 10 chuột Thí nghiệm lần thứ hai được tiến hành với 10 chuột cân nặng từ 20g. Sau 48cân nặng từ 20g. Sau 48h h nếu không có chuột nào chết nếu không có chuột nào chết thì mẫu thử đạt yêu cầu. Nếu có một hay nhiều chuột thì mẫu thử đạt yêu cầu. Nếu có một hay nhiều chuột chết, mẫu thử không đạt yêu cầu.chết, mẫu thử không đạt yêu cầu. 2.2.2. Thử chất gây sốt2.2.2. Thử chất gây sốt• • Nguyên tắc:Nguyên tắc:Là một phương pháp sinh học để kiểm tra chất Là một phương pháp sinh học để kiểm tra chất lượng mẫu thử, dựa trên sự tăng thân nhiệt của thỏ lượng mẫu thử, dựa trên sự tăng thân nhiệt của thỏ sau khi được tiêm thuốc thử cần thử vào tĩnh mạch sau khi được tiêm thuốc thử cần thử vào tĩnh mạch tai.tai.Các dịch tiêm truyền yêu cầu bắt buộc phải thử Các dịch tiêm truyền yêu cầu bắt buộc phải thử chất gây sốt. Các thuốc tiêm nếu ghi trên nhãn chất gây sốt. Các thuốc tiêm nếu ghi trên nhãn “không có chất gây sốt” hoặc có thể tích từ 15ml “không có chất gây sốt” hoặc có thể tích từ 15ml trở lên cũng phải thử chất gây sốt.trở lên cũng phải thử chất gây sốt. • • Động vật thí nghiệm:Động vật thí nghiệm:Thực hiện trên thỏ trưởng thành, khoẻ mạnh, đực hoặc Thực hiện trên thỏ trưởng thành, khoẻ mạnh, đực hoặc cái (không có thai) nặng từ 1,5kg trở lên.cái (không có thai) nặng từ 1,5kg trở lên.Thỏ được nuôi đầy đủ với các chất kháng sinh. Nhiệt độ Thỏ được nuôi đầy đủ với các chất kháng sinh. Nhiệt độ nhà chăn nuôi và phòng thí nghiệm không chênh lệch nhà chăn nuôi và phòng thí nghiệm không chênh lệch nhau quá 3nhau quá 300C. Trong 3 ngày trước ngày thí nghiệm , thỏ C. Trong 3 ngày trước ngày thí nghiệm , thỏ được lấy nhiệt độ 3 lần/ngày vào buổi sáng, mỗi lần cách được lấy nhiệt độ 3 lần/ngày vào buổi sáng, mỗi lần cách nhau 1nhau 1hh. . Chỉ dùng thỏ có nhiệt độ từ 38 - 39,8Chỉ dùng thỏ có nhiệt độ từ 38 - 39,800C. Trong thời gian C. Trong thời gian lấy nhiệt độ không cho thỏ ăn, nhưng cólấy nhiệt độ không cho thỏ ăn, nhưng có thể cho uống thể cho uống nước. Những con thỏ có sự chênh lệch nhiệt độ giữa các nước. Những con thỏ có sự chênh lệch nhiệt độ giữa các lần đo trong ngày ≥0,6lần đo trong ngày ≥0,600C không được dùng để thí C không được dùng để thí nghiệm.nghiệm. [...]... thử với chất chuẩn tương ứng trong cùng điều chất thử với chất chuẩn tương ứng trong cùng điều kiện và thời gian thí nghiệm. kiện và thời gian thí nghiệm.  Trong lĩnh vực kiểm nghiệm thuốc, hai loại thử Trong lĩnh vực kiểm nghiệm thuốc, hai loại thử nghiệm được áp dụng nhiều nhất là: nghiệm được áp dụng nhiều nhất là:  - Kiểm nghiệm thuốc bằng phương pháp thử trên động - Kiểm nghiệm thuốc bằng... đáy ống nghiệm. - Trong môi trường đặc, vi khuẩn tạo thành các khuẩn lạc có đặc tính riêng về hình dạng, kích thước, màu sắc. Những tính chất trên giúp cho việc xác định vi khuẩn trong quá trình kiểm nghiệm thuốc.  II. KIỂM NGHIỆM THUỐC BẰNG PHƯƠNG II. KIỂM NGHIỆM THUỐC BẰNG PHƯƠNG PHÁP THỬ TRÊN ĐỘNG VẬT PHÁP THỬ TRÊN ĐỘNG VẬT  2.1. Nguyên tắc 2.1. Nguyên tắc  Kiểm nghiệm thuốc bằng... bất thường hay yếu tố gây sốt của một số loại thuốc Những tiêu chuẩn này không thể xác sốt của một số loại thuốc Những tiêu chuẩn này không thể xác định được bằng phương pháp lý, hoá mà phải dùng phương pháp định được bằng phương pháp lý, hoá mà phải dùng phương pháp sinh học. sinh học.  III. KIỂM NGHIỆM THUỐC BẰNG CÁC PHÉP III. KIỂM NGHIỆM THUỐC BẰNG CÁC PHÉP THỬ VI SINH VẬT THỬ VI SINH...  1.2. Chất chuẩn 1.2. Chất chuẩn  Chất chuẩn là một yếu tố quan trọng để đánh giá chất lượng Chất chuẩn là một yếu tố quan trọng để đánh giá chất lượng chất thử. Chất chuẩn được chia làm hai loại: chất thử. Chất chuẩn được chia làm hai loại:  - Chất chuẩn gốc - Chất chuẩn gốc  - Chất chuẩn thứ cấp - Chất chuẩn thứ cấp  Chất chuẩn phải được bảo quản trong các ống thuỷ tinh ở Chất chuẩn phải... phương pháp thử trên động - Kiểm nghiệm thuốc bằng phương pháp thử trên động vật vật  - Kiểm nghiệm thuốc bằng các thử nghiệm vi sinh vật. - Kiểm nghiệm thuốc bằng các thử nghiệm vi sinh vật.  • • Đánh giá kết quả: Đánh giá kết quả:  Sau 48 Sau 48 h h dùng thuốc ở lần thứ nhất, nếu khơng có chuột dùng thuốc ở lần thứ nhất, nếu khơng có chuột nào chết, mẫu thử đạt yêu cầu. Nếu có một hay... phẩm cần thử. Chuyên đề Chuyên đề KIỂM NGHIỆM THUỐC BẰNG PHƯƠNG PHÁP SINH HỌC KIỂM NGHIỆM THUỐC BẰNG PHƯƠNG PHÁP SINH HỌC I. MỞ ĐẦU I. MỞ ĐẦU Trong ngành Dược có nhiều phương pháp khác nhau để kiểm tra Trong ngành Dược có nhiều phương pháp khác nhau để kiểm tra chất lượng của thuốc như phương pháp hoá học, phương pháp vật chất lượng của thuốc như phương pháp hoá học, phương pháp... nghiệm thuốc bằng các phép thử trên động Kiểm nghiệm thuốc bằng các phép thử trên động vật dựa trên sự đáp ứng của động vật thí nghiệm vật dựa trên sự đáp ứng của động vật thí nghiệm đối với các chế phẩm được đưa vào cơ thể một liều đối với các chế phẩm được đưa vào cơ thể một liều lượng theo qui định của từng thí nghiệm đẻ đánh lượng theo qui định của từng thí nghiệm đẻ đánh giá chất lượng của chế... được nồng độ 10 nồng độ 10 -1 -1 sau đó pha các nồng độ tiếp theo 10 sau đó pha các nồng độ tiếp theo 10 -2 -2 , 10 , 10 -3 -3 , , …tuỳ theo yêu cầu thí nghiệm. …tuỳ theo yêu cầu thí nghiệm.  Mẫu thử là chất lỏng khơng hồ lẫn vào nước như dạng Mẫu thử là chất lỏng không hoà lẫn vào nước như dạng dầu, kem hoặc thuốc mỡ c dầu, kem hoặc thuốc mỡ c ần ần th th êm êm một lượng chất nhũ một lượng... sinh vật cố tổng hợp kháng sinh, vitamin, acid amin, vi sinh vật cố định đạm ở thực vật… định đạm ở thực vật…  Để phục vụ cho việc kiểm nghiệm thuốc bằng các thử Để phục vụ cho việc kiểm nghiệm thuốc bằng các thử nghiệm vi sinh vật, ta cần tìm hiểu một số đặc điểm nghiệm vi sinh vật, ta cần tìm hiểu một số đặc điểm chính của hai nhóm vi sinh vật là vi khuẩn và vi nấm. chính của hai nhóm vi sinh... vào nhiều yếu tố như tính chất đáp ứng của sinh vật thí nghiệm, người làm thí nghiệm, các điều kiện thử vật thí nghiệm, người làm thí nghiệm, các điều kiện thử nghiệm. Các yếu tố này thường khơng ổn định. Vì vậy kết nghiệm. Các yếu tố này thường khơng ổn định. Vì vậy kết quả thử nghiệm sinh học phải được đánh giá bằng toán thống quả thử nghiệm sinh học phải được đánh giá bằng tốn thống kê. Độ . là:- Kiểm nghiệm thuốc bằng phương pháp thử trên động - Kiểm nghiệm thuốc bằng phương pháp thử trên động vậtvật- Kiểm nghiệm thuốc bằng các thử nghiệm. lĩnh vực kiểm nghiệm thuốc, hai loại thử Trong lĩnh vực kiểm nghiệm thuốc, hai loại thử nghiệm được áp dụng nhiều nhất là :nghiệm được áp