Môi trường nuôi cấy tế bào thực vật

Môi trường nuôi cấy tế bào thực vật Mặc dù nhu cầu dinh dưỡng loại mô nuôi cấy khác môi trường nuôi cấy mô thực vật đặc trưng chứa thành phần sau: - Các nguyên tố đa lượng Bao gồm loại muối nitrogen, potassium, calcium, phosphorus, magnesium sulfur Đây sáu nguyên tố cần thiết cho sinh trưởng thực vật bậc cao - Các nguyên tố vi lượng Bao gồm loại muối sắt, kẽm, mangan, boron, copper, molybdenum cobalt dạng vết - Các phụ gia hữu Một lượng nhỏ loại vitamin (myo-inositol, thiamine, nicotinic acid, pyridoxine, riboflavin…), amino acid (thường cho phép bỏ qua số trường hợp đặc biệt dùng), phụ gia hữu không xác định khác (malt, dịch chiết nấm men, dịch thủy phân casein, nước dừa…) - Các chất kích thích sinh trưởng thực vật Thành phần phụ gia quan trọng định kết nuôi cấy chất điều hòa sinh trưởng Các auxin (IAA dạng tương tự tổng hợp nhân tạo 2,4-D, NAA, IBA, NOA…), cytokinin (zeatin, 2i-P dạng tương tự tổng hợp nhân tạo kinetin, BA…) nhóm chất kích thích sinh trưởng phát sinh hình thái chủ yếu nuôi cấy mô quan thực vật - Nguồn carbon Thường sử dụng sucrose làm nguồn carbon thay cho nguồn carbon thực vật cố định từ khí quang hợp Trong đa số thí nghiệm nuôi cấy, tế bào thực vật khả quang hợp Glucose thường đưa vào môi trường cho hiệu tương đương sucrose, fructose cho hiệu - Các tác nhân làm rắn (tạo gel) môi trường Thường sử dụng agar, loại polysaccharide thu từ số loài tảo thuộc ngành tảo đỏ (Rhodophyta) Một số hợp chất khác thử nghiệm thành công alginate, phytagel, methacel gel-rite Murasghige Skoog (1962) xây dựng môi trường dinh dưỡng (gọi môi trường MS) thích hợp cho hầu hết thí nghiệm nuôi cấy tế bào thực vật Thành phần môi trường nuôi cấy Murashige Skoog (1962) Thànhphần Nồngđộ (mg/L) Thànhphần Nồngđộ (mg/L) 1.Các nguyên tố đa FeSO4.7H2O lượng Na2EDTA.2H2O 370 27,8 37,3 MgSO4.7H2O KH2PO4 KNO3 170 1900 3.Nguồn carbon NH4NO3 1650 Sucrose CaCl2.2H2O 440 2.Các nguyên tố vi 30000 4.Các phụ gia hữu lượng -Các vitamin H3BO3 Thiamine.HCl Pyridoxine.HCl MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O Na2MoO4.2H2O 6,2 Nicotinicacid 0,5 0,5 myo-inositol 22,3 0,5 8,6 100 CuSO4.5H2O CoCl2.6H2O KI 0,25 -Các chất khác 0,025 0,025 0,83 Glycine ... Murasghige Skoog (1962) xây dựng môi trường dinh dưỡng (gọi môi trường MS) thích hợp cho hầu hết thí nghiệm nuôi cấy tế bào thực vật Thành phần môi trường nuôi cấy Murashige Skoog (1962) Thànhphần... yếu nuôi cấy mô quan thực vật - Nguồn carbon Thường sử dụng sucrose làm nguồn carbon thay cho nguồn carbon thực vật cố định từ khí quang hợp Trong đa số thí nghiệm nuôi cấy, tế bào thực vật khả... bào thực vật khả quang hợp Glucose thường đưa vào môi trường cho hiệu tương đương sucrose, fructose cho hiệu - Các tác nhân làm rắn (tạo gel) môi trường Thường sử dụng agar, loại polysaccharide