– Công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật là kĩ thuật cho phép nuôi cấy dễ dàng những tế bào thực vật hay mô phân sinh sạch bệnh trong môi trường nhân tạo thích hợp để tạo ra những khối t
Trang 1TIỂU LUẬN NHẬP MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Chuyên đề: Ứng dụng công nghệ nuôi cấy tế bào
Trang 2 Nội dung trình bày:
Trang 31 MỞ ĐẦU
Hiện nay, cây trồng bị lẫn tạp, thoái hóa diễn ra rất phổ biến trên quy mô lớn gây hậu quả nghiêm trọng cho ngành nông nghiệp: dẫn đến năng suất thấp, giảm dần, không ổn định, không chỉ xảy ra đối với các giống mới mà còn cả với những giống ở địa phương lâu đời, làm thiệt hại về năng suất, sản lượng, lãng phí công sức, tiền vốn đầu tư của người lao động Vì thế, công tác phục tráng giống đang là một trong những hướng đi chính giúp giải quyết vấn đề này
Trang 42 NỘI DUNG
2.1 Giới thiệu chung về công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật.
• 2.1.1 Khái niệm.
– Công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật là kĩ thuật
cho phép nuôi cấy dễ dàng những tế bào thực vật hay
mô phân sinh sạch bệnh trong môi trường nhân tạo thích hợp để tạo ra những khối tế bào hay những cây hoàn chỉnh trong ống nghiệm
Trang 5– Công nghệ nuôi cấy mô tế
bào thực vật bao gồm:
• Nuôi cấy cây non và cây
trưởng thành
• Nuôi cây cơ quan
• Nuôi cây phôi
• Nuôi cây mô sẹo (callus)
• Nuôi cây tê bào (huyền phù
tế bào)
• Nuôi cây protoplast
Hình 2.1: Sơ đồ công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật
Trang 6• 2.1.2 CÁC NHÂN TỐ ĐẢM BẢO THÀNH CÔNG
TRONG CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO THỰC VẬT:
– Đảm bảo điều kiện vô
– Chọn mô cấy, xử lí mô cấy
thích hợp trước và sau khi
Trang 7• 2.1.3 CÁC BƯỚC TRONG KỸ THUẬT NUÔI
CẤY MÔ TẾ BÀO THỰC VẬT:
– Tạo vật liệu khởi đầu
– Giai đoạn nhân nhanh
– Giai đoạn tạo cây hoàn chỉnh
– Giai đoạn ra cây
Trang 82.2 Khái niệm phục tráng giống.
• Phục tráng giống tức là dùng các biện pháp nâng cao sức sống của hạt giống, cây trồng, khác phục hiện tượng giống thoái hóa, năng suất và phẩm chất giảm sút dần
• Các biện pháp phục tráng giống:
– Thay đổi cách gây giống
– Thay đổi điều kiện sống
– Chọn lọc và thay đổi liên tục
Trang 92.3 Ứng dụng công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật trong phục tráng giống.
- Tạo giống chống chịu các bệnh virus là một hướng nghiên cứu khả quan Nhưng trong thực tế, chọn tạo giống gặp nhiều khó khăn do thiếu nguồn gen có khả năng chống chịu với các loại bệnh virus khác nhau
- Do vậy, phương pháp có hiệu quả nhất hiện nay vẫn
là tạo ra các vật liệu nhân giống sạch bệnh virus qua nuôi cấy đỉnh chồi, đỉnh sinh trưởng hoặc kết hợp với
xử lý hoá chất, nhiệt độ Trong phục tráng giống, phương pháp chủ yếu được sử dụng là phương pháp
nhân giống invitro.
Trang 10 Phương pháp nhân giống invitro
• 2.3.1 Ưu điểm của vi nhân giống:
– Đưa ra sản phẩm nhanh hơn
– Nhân nhanh với hệ số nhân giống cao
– Sản phẩm cây giống đồng nhất
– Tiết kiệm không gian
– Nâng cao chất lượng cây giống
– Khả năng tiếp thị sản phẩm tốt hơn và nhanh hơn – Lợi thế về vận chuyển
– Sản xuất quanh năm
Trang 11• 2.3.2 Hạn chế của vi nhân giống:
– Hạn chế về chủng loại sản phẩm
– Chi phí sản xuất cao
– Hiện tượng sản phẩm bị biến đổi kiểu hình
Trang 12• 2.3.3 Các phương pháp nhân giống invitro:
– Nuôi cấy mô phân sinh đỉnh
hay đỉnh phân sinh.
– Tái sinh cây hoàn chỉnh từ các
bộ phận khác của cây:
+ Nuôi cấy chồi bất định.
+ Nhân giống thông qua giai
đoạn callus
Trang 13- Nhân giống thông qua phát sinh phôi vô tính:
+ Mẫu mô trực tiếp tạo chồi và
cây hoàn chỉnh
+ Mẫu mô phát sinh callus và
callus tạo chồi.
+ Mẫu mô phát sinh callus,
callus phát triển phôi (hoặc
nuôi cấy dịch huyền phù tế
bào phát sinh phôi) và từ phôi
thu được cây hoàn chỉnh
Trang 14Các bước trong quy trình nhân giống vô tính in vitro :
• Nuôi cấy đỉnh sinh trưởng.
• Tạo thể nhân giống invitro.
• Nhân giống invitro.
• Tái sinh thành cây hoàn chỉnh invitro.
• Chuyển cây ra vườn ươm để thuần hóa.
• Nhân giống invitro.
• Tạo cây con bầu đất.
• Đưa các cây ra đồng ruộng.
• Chọn lọc cây đầu dòng
Trang 15• 2.3.4 Kết quả trong thực tiễn sản xuất.
Cây rau
– Hầu hết các loài rau trừ một vài trường hợp ngoại lệ đều
được nhân giống bằng hạt Truyền bệnh virus qua hạt vừa mới được chứng minh ở loài virus gây bệnh khảm ở xà
lách và đậu, vì vậy ở những cây trồng này cần phải chọn lọc những cây làm giống và thông qua biện pháp trồng trọt
cách ly để tạo ra hạt giống sạch virus Phương pháp sử
dụng có hiệu quả nhất hiện nay là phương pháp nuôi cấy đỉnh phân sinh hoặc xử lý nhiệt.
– Ví dụ: Nhân giống thành công trên nấm, xúp lơ, xà lách…
Trang 16 Cây hoa.
– Bước đầu người ta chỉ tập trung làm sạch bệnh ở
những cây hoa có ý nghĩa kinh tế quan trọng (ví dụ:
hoa cúc, hoa anh túc, hoa thủy tiên ) Hiện nay,
người ta bắt đầu nuôi cấy các loài hoa khác như hoa
đồng tiền, hoa ly, hoa lan…
Trang 17 Cây ăn quả
– Vì việc xử lý nhiệt đối với các cây thân gỗ và việc nuôi cấy đỉnh phân sinh của chúng khó khăn hơn nhiều so với các loài cây thân thảo cho nên từ lâu người ta đã sử dụng phương pháp thử để tìm ra các vật liệu sạch bệnh ban đầu
– Quá trình xử lý nhiệt đối với cây ăn quả đến nay thường được tiến hành chủ yếu ở những đoạn cành mà các mắt của chúng sẽ được sử dụng để ghép sau này Thành công trong xử lý nhiệt ở cây ăn quả không bao giờ đạt được 100% Ở mỗi đối tượng ít nhất còn lại
một thậm chí một số loài còn tới bốn virus không bị
mất hoạt tính khi xử lý nhiệt
Trang 19 Nuôi cấy thành công tế bào sâm Ngọc Linh
– Chỉ với một vài tế bào tách chiết từ rễ của sâm Ngọc Linh, bằng kỹ thuật sinh khối tế bào, các nhà khoa học của Học viện Quân y có thể sản xuất sâm Ngọc Linh với số lượng lớn trong vòng 15 ngày
– Ban đầu các tế bào sâm Ngọc Linh được tạo ra và duy trì trong môi trường thạch, sau đó nuôi cấy trong môi trường lỏng
Trang 20• 2.3.5 Quy trình phục tráng giống một số cây trồng
Quy trình cơ bản phục tráng giống Lan bằng phương
pháp nuôi cấy mô in-vitro:
Trang 22 Quy trình phục tráng giống chuối tiêu hồng.
Nuôi cấy đỉnh sinh trưởng Tạo cụm chồi
Cây bầu đất Nhân cụm chồi
Chăm sóc trên vườn ươm Tái sinh cây in vitro
Trang 24 Quy trình nhân nhanh, tạo và bảo quản củ khoai tây in vitro.
Đưa mẫu sạch vào nuôi cấy Bảo quản củ in vitro
Nhân nhanh Thu hoạch củ in vitro
Trang 25
3 KẾT LUẬN
Qua việc nghiên cứu về ứng dụng công nghệ nuôi cấy tế bào thực vật trong phục tráng giống có thể thấy rằng nó rất có hiệu quả đối với cây lương thực và cây thực phẩm
Việc ứng dụng công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật trong lĩnh vực phục tráng giống sẽ ngày một đạt nhiều kết quả cao hơn trong thời gian tới, một triển vọng mới trong công tác giống đã và đang được mở
ra nhờ vào ngành công nghệ sinh học