Bài giảng các phương pháp nuôi cấy tế bào chương 3 ths nguyễn thành luân

5/17/2013 TRƢỜNG ĐH CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TPHCM KHOA CNSH & KTMT BÀI GIẢNG CÁC PHƢƠNG PHÁP NUÔI CẤY TẾ BÀO Chƣơng III HỆ THỐNG NUÔI CẤY TẾ BÀO VI SINH VẬT GV: Nguyễn Thành Luân luannt@cntp.edu.vn Hệ thống nuôi cấy TB VSV Bể phản ứng sinh học (bioreactor) hay gọi hệ thống lên men (fermenter system) loại thiết bị chủ yếu sử dụng nuôi cấy tế bào VSV Sự biến đổi hóa sinh tiến hành tế bào sống thành phần tế bào in vivo (enzyme) • Trong phòng thí nghiệm, tế bào thường nuôi cấy bình tam giác máy lắc ổn nhiệt (thermal shaker) chế tạo hệ thống khác dựa dụng cụ có • Dựa đòi hỏi mô hình/hệ thống nuôi cấy tế bào VSV: điều kiện môi trường, tốc độ nuôi cấy & thời gian nuôi cấy 5/17/2013 Các dạng hệ thống Theo cấu tạo thiết bị: • Hệ thống nuôi cấy thùng khuấy (Stirred Tank) nuôi cấy hình ống (Plug Flow) • Hệ thống nuôi cấy lắng ly tâm (Segregated Reactor) • Nuôi cấy đồng (homogenous reactor) không đồng (heterogenous reactor) Phân loại hệ thống nuôi cấy • Theo mô hình – Nuôi cấy mẻ (batch culture), mẻ bổ sung chất (fed-batch culture) & liên tục (continuous culture) – Nuôi cấy dạng cột (spin column culture) & nuôi cấy dạng vòng (loop culture) – Nuôi cấy cân phản ứng tế bào – Nuôi cấy mô & nuôi cấy tế bào lần – Nuôi cấy bổ trợ TB (Cell support system) – Bể phản ứng nuôi cấy tế bào (Cell bioreactors) Hệ thống nuôi cấy thùng khuấy Hình: Sơ đồ hệ thống nuôi cấy dùng sản xuất penicillin Là dạng lên men liên tục nuôi cấy tế bào Đối với hoạt động sản xuất quy mô lớn, hệ thống nuôi cấy thùng khuấy (stirred-tank fermenter, STF) sử dụng rộng rãi để thiết kế cho trình nuôi cấy quy mô công nghiệp 5/17/2013 Điều kiện vận hành hệ thống • Cường độ pha trộn (mixing intensity) khác cách chọn loại cánh khuấy (impeller) thích hợp tốc độ khuấy khác • Nó dùng cho hai trường hợp lên men hiếu khí (aerobic) yếm khí (anaerobic) phạm vi rộng loại tế bào khác bao gồm vi sinh vật, động vật thực vật,… Ƣu điểm hệ thống • Là hệ thống lên men quy mô lớn phát triển công nghiệp dược, bia, rượu… • Do hệ lên men thùng khuấy thường làm thép không rỉ hoạt động điều kiện ôn hòa nên tuổi thọ thiết bị lâu Nhƣợc điểm hệ thống • Bộ phận (cánh) khuấy tiêu thụ lượng lớn công suất gây nguy hiểm cho hệ thống nuôi cấy tế bào mẫn cảm với lực trượt (shear force) tế bào động vật có vú tế bào thực vật  khả dụng cho nuôi cấy VSV • Lực trượt chất lỏng hỗn hợp tạo gradient tốc độ thành phần tốc độ cao chất lỏng rời khỏi vùng trung tâm, tốc độ vị trí cánh khuấy (có khoảng cách chiều rộng cánh khuấy) giảm 5/17/2013 • Khi tỷ lệ chiều rộng cánh khuấy đường kính tăng cấu hình tốc độ có dạng đặc trưng parabol mà trở nên tù tạo lực trượt gradient tốc độ lớn dần lên  Hạn chế việc ứng dụng thành công hệ thống lên men thùng khuấy nuôi cấy tế bào động vật tế bào thực vật Hệ lên men dòng nút (plug-flow fermenter, PFF) • Còn gọi hệ lên men mẻ (batch fermenter) hệ lên men lý tưởng có khả pha trộn tốt cho thành phần đồng kết cấu thời điểm • Chất dinh dưỡng (cơ chất) tế bào vào đầu ống hình trụ tế bào sinh trưởng chúng qua ống Hệ lên men dòng nút (plug-flow fermenter, PFF) 5/17/2013 • Nuôi cấy theo đường ống dài thiếu phận khuấy nên ngăn cản pha trộn hoàn toàn chất lỏng  tế bào thay đổi dựa tính chất chiều dòng chảy • Một hệ lên men dòng ống mà biến thiên hướng tâm gọi hệ lên men dòng nút (PFF) Nuôi cấy mẻ tế bào (Batch culture) • Đơn giản & sử dụng rộng rãi sản xuất vaccine quy mô công nghiệp & sản phẩm rRNA protein • Cho phép sinh trưởng & sản sinh tế bào bình chứa kín HỆ THỐNG NUÔI CẤY MẺ 5/17/2013 Nuôi cấy mẻ tế bào (Batch culture) • Hạn chế môi trường (do cung cấp lần) nên không chất, TB dừng phát triển chết  dễ thoái hóa TB hệ thống • Nếu muốn tiếp tục nuôi cấy, phải tạo môi trường phụ bổ sung việc thêm tế bào môi trường nuôi cấy cũ vào môi trường dinh dưỡng ban đầu (tăng sinh) Nuôi cấy mẻ (batch culture) • Tốc độ khởi đầu phản ứng xúc tác tự động chậm nồng độ chất ban đầu thấp • Tốc độ phản ứng tăng lên tế bào sinh sản sau đạt đến tốc độ tối đa • Khi lượng chất giảm sản phẩm độc tích lũy, tốc độ phản ứng giảm xuống giá trị thấp Cách lắp đặt hệ thống mẻ quy mô phòng thí nghiệm nhỏ Nguyên liệu: • 250 mL Erlenmeyer flask • Vải mùng /miếng gạt y tế vừa với Pasteur pipette • Không khí bơm vào môi trường trì nồng độ CO2 O2 • Kéo, mỡ (cotton) 5/17/2013 • Bƣớc 1: Cắt lớp mỡ (10 X 10 cm) đặt vào miếng vải mùng chuẩn bị • Bước 2: Gấp góc miếng vải mùng lại thành khối tròn cho góc • Bước 3: Lấy đầu nhọn kéo khoan lỗ nhỏ cho Pasteur pipette • Cho Pasteur pipette đâm xuyên qua lỗ cố định miệng bình Erlenmayer 5/17/2013 • Thêm môi trường tế bào nuôi cấy vào bình, cho không khí vào bình thông qua máy sục khí • Đặt môi trường nuôi cấy ánh sáng/dưới ánh đèn nuôi cấy VSV tự dưỡng Các pha tăng trƣởng hệ thống Các pha Sự tăng trƣởng Mật độ tế bào Đặc điểm lag zero Thích nghi học tế bào với thay đội diều kiện sống Gia tốc Gia tăng Không đáng kể Pha log (exponential) Tăng liên tục Gia tăng mật độ thay đổi môi trường tế bào Chậm phát triển TB Giảm sút nhanh Tác dụng điều kiện thay đổi xuất Ổn định zero hay nhiều thành phần dinh dưỡng (hoặc ánh sáng) bị cạn kiệt đến mức nguy hại cho phát triển tế bào Suy vong Tiêu cực (độc tố) Quãng thời gian pha ổn định giảm sút tỷ lệ tế bào phụ thuộc hoàn toàn vào cấu tạo tế bào VSV Hệ thống nuôi cấy liên tục (Continuous culture system) Môi trường nuôi cấy chứa đựng bể chứa lớn Không khí thổi vào khu vực rỗng bình chứa Áp lực không khí đẩy môi trường qua đường ống kết nối với môi trường chứa tế bào nuôi cấy Bằng việc đóng mở khóa đường ống môi trường, kiểm soát việc thêm môi trường vào bình nuôi cấy 5/17/2013 Hệ thống nuôi cấy liên tục (Continuous culture system) Sơ đồ hệ thống nuôi cấy liên tục Hệ thống nuôi cấy liên tục (Continuous culture system) • Hệ thống nuôi cấy liên tục sử dụng rộng rãi cho mục đích sản xuất công nghiệp & nghiên cứu (theo Kubitschek 1970; Tempest 1970; Veldkamp 1976, 1977; Rhee 1980; Munawar cộng sự, 1989) • Được nghiên cứu nhiều nghiên cứu VSV phương pháp VSV môi trường tảo, nấm, VK kỵ khí gây độc cho môi trường (ecotoxicology theo Rhee 1980, 1989) • Hệ thống nuôi cấy liên tục sử dụng từ nghiên cứu Novik and Szilard (1950) với phát triển hệ thống “chemostat”, Monod (1950) người đặt tên hệ thống nuôi cấy “bactogen” Lắp đặt hệ thống nuôi cấy liên tục phòng thí nghiệm • Chuẩn bị môi trường nuôi cấy bể chứa khoảng 6-7 lít môi trường • Thêm vào 500mL sau thêm 100 mL môi trường nuôi cấy ngày đảm bảo tỷ lệ pha loãng 20% thể tích đạt 6-7 lít tuần 5/17/2013 Hệ thống nuôi cấy liên tục (Continuous culture system) • Fogg and Thake (1987) làm rõ ràng hệ thống nuôi cấy liên tục “turbidostat” “chemostat” • Trong hệ thống “turbidostat”, môi trường dinh dưỡng thêm vào số lượng tế bào đạt ngưỡng kỳ vọng đo lường qua mật độ quang (OD) tế bào Tại điểm này, môi trường bắt đầu thêm vào tế bào đạt thu nhận Nếu số lượng cho phép, tiến hành pha loãng lặp lai từ đầu • Trong hệ thống chemostat, môi trường trì tỷ lệ định kiểm soát hoàn toàn tỷ lệ sinh trưởng độ phân bố tế bào Phân biệt Chemostat vs Turbidostat Turbidostat Chemostat Turbidostat vs Chemostat Các yếu tố Turbidostat Chemostat PP kiểm tra tốc độ sinh Bên Bên trƣởng Tỷ lệ sinh trƣởng tế Bằng gần đạt µmax Từ – gần đạt µmax bào Tác dụng việc gia Chỉ gia tăng chất phản tăng nồng độ ứng có thay đổi Gia tăng điều kiện gia tăng nồng độ chất chất dinh dƣỡng máy đo cường độ ánh bể nuôi cấy sáng (photometer) Thể tích nuôi cấy Cố định Cố định Điều kiện môi trƣờng Cố định Cố định Thời gian nuôi cấy Không xác định Không xác định Các biến đổi µmax tỷ lệ Các loại đột biến đƣợc Biến đổi µmax dạng pha loãng cao, đột chọn lọc qua việc nuôi khác loại biến Ks nơi có tỷ lệ pha cấy kéo dài biến đổi trung gian loãng thấp số dạng biến đổi trung gian 10 5/17/2013 Turbidostat vs Chemostat • Trong chemostat, tốc độ dòng chảy cài đặt giá trị đặc biệt tốc độ sinh trưởng nuôi cấy điều chỉnh tốc độ dòng chảy • Hoạt động chemostat dễ dàng turbidostat, thực cách đặt máy bơm tốc độ dòng chảy không đổi Turbidostat vs Chemostat • Turbidostat đòi hỏi thiết bị cảm quang (optical sensing device) điều chỉnh (controller) • Turbidostat thực với tế bào có khả hấp thụ ánh sáng tảo, TB thực vật, VSV quang dưỡng (photocells) Batch vs continuous culture • Trong nuôi cấy liên tục, dinh dưỡng cung cấp đến tế bào theo tỷ lệ định không đổi theo thể tích định, lượng tế bào tương đương (Số lượng TB nuôi cấy đạt pha ổn định tế bào nuôi cấy vào ra)  ổn định • Nuôi cấy mẻ tạo sinh khối nhiều & thời gian sử dụng chất nhanh dễ bị thay đổi chất (do VSV sử dụng & biến đổi theo pha) 11 5/17/2013 Batch vs continuous culture • Nuôi cấy liên tục đáp ứng nhu cầu dinh dưỡng TB khó thay đổi chất VSV (in vivo)  phức tạp • Nuôi cấy mẻ đòi hỏi việc đáp ứng nhu cầu sinh trưởng TB dễ dàng chuyển qua chất khác (in vitro)  đơn giản Batch vs continuous culture • Hầu hết hệ lên men sản xuất hệ thống nuôi cấy liên tục (cánh khuấy) hoạt động với nồng độ tế bào mà giá trị tối thiểu đòi hỏi thời gian lưu ngắn • Nếu nồng độ cuối tế bào hướng tới pha tĩnh, hệ lên men mẻ chọn lựa tốt nuôi cấy cánh khuấy (liên tục - CSTF), thời gian lưu cần thiết cho nuôi cấy mẻ ngắn CSTF Các hệ thống nuôi cấy khác 12 5/17/2013 Mục đích • Nhằm để cải thiện nhược điểm hệ thống nuôi cấy thùng khuấy (tiêu thụ công suất lớn) yêu cầu đặc biệt trình nuôi cấy định – Sục khí tốt hơn, – Chuyển nhiệt hiệu quả, – Tách giữ lại tế bào, – Bất động tế bào, – Giảm bớt thiết bị giá thành sản phẩm, – Không thiết kế cho quy mô lớn Hệ thống nuôi cấy dạng cột Các hệ lên men cột: (a) cột bong bóng (bubble column), (b) cột hình nón (tapered column), (c) cột bong bóng có khay sàng lọc (sieve-tray bubble column), (d) cột bong bóng có khay sàng lọc với bơm bên ngoài, (e) cột nhồi (packed-bed) với bơm bên Hệ lên men cột bong bóng • Hệ lên men đơn giản hệ lên men cột bong bóng (còn gọi hệ lên men tháp-tower fermenter), thường bao gồm bình trụ dài, có phận phun khí đáy • Tuy nhiên, hệ lên men cột bong bóng thường bị hạn chế trường hợp lên men hiếu khí việc tăng bong bóng cung cấp pha trộn đầy đủ cho sinh trưởng tối ưu 13 5/17/2013 Hệ lên men chóp có khay sàng lọc • Hệ lên men cột hình chóp ngược trì lưu tốc không khí cao đơn vị diện tích phần thấp hệ lên men mà có nồng độ tế bào cao • Một vài khay sàng lọc cài đặt cột để tăng hiệu tiếp xúc khí-chất lỏng phá vỡ kết khối bong bóng khí (hệ lên men có khay sàng lọc) Hệ lên men cột nhồi • Để tăng cường pha trộn mà phần chuyển động bên • Dịch lên men (môi trường) bơm quay vòng (tuần hoàn) cách dùng bơm chất lỏng bên Hệ thống nuôi cấy dạng vòng Các hệ lên men vòng: (a) Lực đẩy không khí, (b) Lực đẩy không khí có bơm bên ngoài, (c) Áp lực chu kỳ ICI 14 5/17/2013 Hệ thống nuôi cấy dạng vòng • Hệ lên men vòng hệ lên men thùng (tank fermenter) cột (column fermenter) có vòng lưu thông chất lỏng, • Nó ống thông gió vòng bên • Tùy thuộc vào lưu thông chất lỏng tạo nào, phân loại thành ba kiểu: lực đẩy không khí (air-lift), vòng khuấy (stirred loop) vòi phun (jet loop) Hệ lên men áp lực chu kỳ ICI • Thuộc Imperial Chemical Industries Ltd., England • Là hệ lên men dùng lực đẩy không khí với vòng bên (outer loop) phát triển cho lên men hiếu khí đòi hỏi có chuyển nhiệt • Môi trường không khí đưa vào phần cao thấp Vai trò việc bơm không khí • Cung cấp oxygen cần thiết cho sinh trưởng tế bào • Tạo lưu thông tự nhiên chất lỏng hệ lên men thông qua vòng Bộ phận trao đổi nhiệt để làm lạnh môi trường lỏng cài đặt vào vòng • Hệ lên men chứng minh tạo tốc độ hấp thụ oxygen cao đơn vị thể tích 15 5/17/2013 Ƣu & nhƣợc điểm hệ thống nuôi cấy Fed-batch culture Fed-batch culture  Hệ thống nuôi cấy mẻ bổ sung chất trình công nghệ hóa hệ thống nuôi cấy mẻ việc bổ sung chất dinh dưỡng để kiểm soát sinh trưởng VSV  Sử dụng bể phản ứng sinh học nhằm thu nhận lượng tế bào với mật độ cao  Hầu hết dung dịch bổ sung (feed solution) đậm đặc nhằm hạn chế việc pha loãng nhiều lần bể phản ứng sinh học  Kiểm soát việc thêm chất trực tiếp ảnh hưởng đến tỷ lệ sinh trưởng VSV hạn chế việc trao đổi chất tràn lan  VD: Bổ sung acetate cho nuôi cấy Escherichia coli, lactic acid cho Lactobacillus, ethanol cho Saccharomyces cerevisiae), hạn chế oxygen nuôi cấy kỵ khí 16 5/17/2013 Hệ thống nuôi cấy dạng túi (Bag system) Hệ thống nuôi cấy chai xoay (Roller bottle system) Các dạng bể phản ứng sinh học • Cánh khuấy đơn giản (Simple Stirred Tank Bioreactor) • Airlift Bioreactor (Vận chuyển khí) • Membrane Stirred Tank Bioreactor (cánh khuấy màng lọc) • Spin Filter Stirred Tank Bioreactor (cánh khuấy cột lọc) • Vibromixer (máy trộn gây chấn động) • Fluidized Bed Bioreactor (Thảm lỏng) 17 5/17/2013 Các dạng bể phản ứng sinh học • Hollow fiber bioreactor • Multiple membrane plate bioreactor KẾT THÚC CHƢƠNG III Tài liệu tham khảo • Asenjo JA and Merchuk JC 1995 Bioreactor System Design Marcel Dekker, Inc New York, USA • Atkinson B and Mavituna F 1991 Biochemical Engineering and Biotechnology Handbook 2nd ed Stockton Press, New York, USA • Flickinger MC and Drew SW 1999 Encyclopedia of Bioprocess Technology: Fermentation, Biocatalysis and Bioseparation John Wiley & Sons, New York, USA • Lee JM 2001 Biochemical Engineering Prentice Hall, Inc USA • Shuler ML and Kargi F 2002 Bioprocess Engineering-Basic Concepts 2nd ed Prentice Hall, Inc NJ, USA • Vogel HC and Todaro CL 1997 Fermentation and Biochemical Engineering Handbook (Principles, Process Design, and Equipment) 2nd ed Noyes Publications New Jersey, USA 18 5/17/2013 CHÂN THÀNH CẢM ƠN & CHÚC CÁC BẠN MAY MẮN 19 [...]... hiện được với các tế bào có khả năng hấp thụ ánh sáng như tảo, TB thực vật, VSV quang dưỡng (photocells) Batch vs continuous culture • Trong nuôi cấy liên tục, dinh dưỡng được cung cấp đến tế bào theo 1 tỷ lệ nhất định không đổi và theo 1 thể tích nhất định, lượng tế bào cũng tương đương (Số lượng TB nuôi cấy đạt được pha ổn định ở cả tế bào nuôi cấy đi vào và đi ra)  ổn định • Nuôi cấy mẻ tạo ra... nồng độ tế bào mà ở đó giá trị của là tối thiểu do nó đòi hỏi thời gian lưu ngắn nhất • Nếu nồng độ cuối cùng của tế bào được hướng tới ở trong pha tĩnh, thì hệ lên men mẻ là chọn lựa tốt hơn nuôi cấy cánh khuấy (liên tục - CSTF), vì thời gian lưu cần thiết cho nuôi cấy mẻ là ngắn hơn của CSTF Các hệ thống nuôi cấy khác 12 5/17/20 13 Mục đích • Nhằm để cải thiện hoặc nhược điểm của hệ thống nuôi cấy thùng... nhược điểm của hệ thống nuôi cấy thùng khuấy (tiêu thụ công suất lớn) hoặc các yêu cầu đặc biệt của một quá trình nuôi cấy nhất định – Sục khí tốt hơn, – Chuyển nhiệt hiệu quả, – Tách hoặc giữ lại tế bào, – Bất động tế bào, – Giảm bớt thiết bị và giá thành của sản phẩm, – Không được thiết kế cho quy mô lớn Hệ thống nuôi cấy dạng cột Các hệ lên men cột: (a) cột bong bóng (bubble column), (b) cột hình nón... trưởng của VSV và hạn chế việc trao đổi cơ chất tràn lan  VD: Bổ sung acetate cho nuôi cấy Escherichia coli, lactic acid cho Lactobacillus, ethanol cho Saccharomyces cerevisiae), hạn chế oxygen trong nuôi cấy kỵ khí 16 5/17/20 13 Hệ thống nuôi cấy dạng túi (Bag system) Hệ thống nuôi cấy chai xoay (Roller bottle system) Các dạng bể phản ứng sinh học • Cánh khuấy đơn giản (Simple Stirred Tank Bioreactor)... nhồi • Để tăng cường sự pha trộn mà không có các phần chuyển động bên trong • Dịch lên men (môi trường) có thể được bơm ra ngoài và quay vòng (tuần hoàn) bằng cách dùng một bơm chất lỏng ở bên ngoài Hệ thống nuôi cấy dạng vòng Các hệ lên men vòng: (a) Lực đẩy không khí, (b) Lực đẩy không khí có bơm bên ngoài, (c) Áp lực chu kỳ ICI 14 5/17/20 13 Hệ thống nuôi cấy dạng vòng • Hệ lên men vòng là hệ lên men... theo từng pha) 11 5/17/20 13 Batch vs continuous culture • Nuôi cấy liên tục đáp ứng được nhu cầu dinh dưỡng của TB nhưng khó thay đổi cơ chất và VSV (in vivo)  phức tạp • Nuôi cấy mẻ đòi hỏi việc đáp ứng nhu cầu sinh trưởng của TB nhưng dễ dàng chuyển qua cơ chất khác (in vitro)  đơn giản hơn Batch vs continuous culture • Hầu hết các hệ lên men sản xuất là một hệ thống nuôi cấy liên tục (cánh khuấy)... trưởng của tế bào • Tạo ra sự lưu thông tự nhiên của chất lỏng trong hệ lên men thông qua một cái vòng Bộ phận trao đổi nhiệt để làm lạnh môi trường lỏng được cài đặt vào trong cái vòng đó • Hệ lên men này đã được chứng minh là tạo ra một tốc độ hấp thụ oxygen cao trên một đơn vị thể tích 15 5/17/20 13 Ƣu & nhƣợc điểm của hệ thống nuôi cấy cơ bản Fed-batch culture Fed-batch culture  Hệ thống nuôi cấy mẻ... bổ sung cơ chất là quá trình công nghệ hóa hệ thống nuôi cấy mẻ bằng việc bổ sung cơ chất dinh dưỡng để kiểm soát sinh trưởng VSV  Sử dụng trong bể phản ứng sinh học nhằm thu nhận lượng tế bào với mật độ cao  Hầu hết dung dịch bổ sung (feed solution) là đậm đặc nhằm hạn chế việc pha loãng nhiều lần trong bể phản ứng sinh học  Kiểm soát việc thêm các cơ chất trực tiếp ảnh hưởng đến tỷ lệ sinh trưởng... thường bị hạn chế ở trường hợp lên men hiếu khí và việc tăng các bong bóng không thể cung cấp một sự pha trộn đầy đủ cho sự sinh trưởng tối ưu 13 5/17/20 13 Hệ lên men chóp và có khay sàng lọc • Hệ lên men cột hình chóp ngược có thể duy trì lưu tốc không khí cao trên một đơn vị diện tích ở phần thấp hơn của hệ lên men mà ở đó có nồng độ tế bào cao • Một vài khay sàng lọc có thể được cài đặt trong cột...5/17/20 13 Turbidostat vs Chemostat • Trong chemostat, tốc độ dòng chảy được cài đặt ở một giá trị đặc biệt và tốc độ sinh trưởng của nuôi cấy sẽ điều chỉnh tốc độ dòng chảy này • Hoạt động chemostat dễ dàng hơn turbidostat, do nó có thể được thực hiện bằng cách đặt máy bơm ở một tốc độ dòng chảy không đổi Turbidostat vs Chemostat • ... culture) – Nuôi cấy cân phản ứng tế bào – Nuôi cấy mô & nuôi cấy tế bào lần – Nuôi cấy bổ trợ TB (Cell support system) – Bể phản ứng nuôi cấy tế bào (Cell bioreactors) Hệ thống nuôi cấy thùng... cho hệ thống nuôi cấy tế bào mẫn cảm với lực trượt (shear force) tế bào động vật có vú tế bào thực vật  khả dụng cho nuôi cấy VSV • Lực trượt chất lỏng hỗn hợp tạo gradient tốc độ thành phần tốc...5/17/20 13 Các dạng hệ thống Theo cấu tạo thiết bị: • Hệ thống nuôi cấy thùng khuấy (Stirred Tank) nuôi cấy hình ống (Plug Flow) • Hệ thống nuôi cấy lắng ly tâm (Segregated Reactor) • Nuôi cấy đồng