Khảo nghiệm vắc xin phòng bệnh phù thũng ở lợn do escherichia coli

Bộ giáo dục đào tạo trờng đại học nông nghiệp hà nội đặng thành tâm KHO NGHIM VC XIN PHềNG BNH PH THNG LN DO ESCHERICHIA COLI luận văn thạc sĩ NÔNG NGHIệP Hà Nội - 2012 Bộ giáo dục đào tạo trờng đại học nông nghiệp hà nội đặng thành tâm KHO NGHIM VC XIN PHềNG BNH PH THNG LN DO ESCHERICHIA COLI luận văn thạc sĩ NÔNG NGHIệP Chuyên ngành : Thú y Mã số : 60.62.50 Ngời hớng dẫn khoa học : ts Hoàng văn hoan TS Nguyễn Bá Hiên Hà Nội - 2012 LI CAM OAN Tụi xin cam ủoan, s liu v kt qu nghiờn cu trỡnh by lun ny l trung thc v cha ủc s dng ủ bo v mt hc v no Tụi xin cam ủoan, mi s giỳp ủ cho vic thc hin lun ny ủó ủc cỏm n v cỏc thụng tin trớch dn lun ủu ủó ủc ch rừ ngun gc Tỏc gi lun ng Thnh Tõm Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip i LI CM N cú ủc kt qu nghiờn cu ny, ngoi s n lc v c gng ca bn thõn, tụi ủó nhn ủc rt nhiu s giỳp ủ t cỏc ủn v v cỏ nhõn Tụi xin ghi nhn v by t lũng bit n ti nhng th, cỏ nhõn ủó dnh cho tụi s giỳp ủ quý bỏu ủú Tụi xin by t lũng bit n sõu sc v kớnh trng s giỳp ủ nhit tỡnh ca thy giỏo TS Hong Vn Hoan v TS Nguyn Bỏ Hiờn, ngi ủó trc tip hng dn tụi thc hin ủ ti ny Tụi xin chõn thnh cm n nhng ý kin ủúng gúp quý bỏu ca cỏc thy, cụ giỏo khoa Thỳ y, cỏc thy, cụ giỏo khoa Sau i hc Tụi xin chõn thnh cm n cỏc ủng lónh ủo ca Trung tõm nghiờn cu ng dng v Chuyn giao cụng ngh Thỳ y Viờn Thỳ y TW cựng cỏc thy cụ v cỏc anh, ch b mụn Vi trựng Vin Thỳ y Tụi xin by t lũng cm n cỏc ủng lónh ủo UBND huyn Tiờn L, cỏc ủng phũng NNPTNT, phũng thng kờ v UBND cỏc xó ủó to ủiu kin v thi gian v cung cp s liu giỳp tụi thc hin ủ ti ny Cm n s c v, ủng viờn v giỳp ủ ca gia ủỡnh, cỏc anh, ch ủng nghip, bn bố quỏ trỡnh hc v thc hin lun H Ni, ngy Thỏng .nm Tỏc gi lun ng Thnh Tõm Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip ii MC LC LI CAM OAN i LI CM N ii MC LC iii DANH MC CC CH VIT TT vi DANH MC BNG vii DANH MC TH ix M U 1 Tớnh cp thit ca ủ ti Mc ủớch ca ủ ti PHN I TNG QUAN TI LIU 1.1 LCH S NGHIấN CU BNH PH U LN DO E.COLI GY RA 1.1.1 Tỡnh hỡnh nghiờn cu trờn th gii 1.1.2 Tỡnh hỡnh nghiờn cu Vit Nam 1.2 c tớnh sinh hc ca vi khun Escherichia coli 1.2.1 c tớnh hỡnh thỏi vi khun 1.2.3 c tớnh sinh húa 1.2.4 Cu trỳc khỏng nguyờn 10 1.2.5 Cỏc yu t gõy bnh ca vi khun E.coli 12 1.3 Bnh phự thng ln vi khun E.coli gõy 19 1.3.1 Nguyờn nhõn gõy bnh 19 1.3.2 c ủim dch t ca bnh 21 1.3.3 Triu chng lõm sng 22 1.3.4 Bnh tớch 23 1.3.5 Phng phỏp chn ủoỏn bnh 24 1.3.6 Phũng v tr bnh 25 1.4 Min dch chng bnh ca ln 26 1.4.1 Min dch khụng ủc hiu 26 1.4.2 Min dch ủc hiu 27 1.5 Mt s hiu bit ủi cng v vc xin 27 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip iii 1.5.1 nh ngha 27 1.5.2 c tớnh c bn ca mt vc xin 28 1.5.3 Cỏc loi vc xin 28 1.5.4 Nguyờn lý 28 1.5.5 Mt s ủiu cn chỳ ý s dng vc xin 28 PHN II NI DUNG, NGUYấN LIU V PHNG PHP NGHIấN CU 31 2.1 Ni dung nghiờn cu 31 2.2 Nguyờn liu dựng nghiờn cu 31 2.2.1 Cỏc loi mụi trng, húa cht s dng quỏ trỡnh nghiờn cu 31 2.2.2 Cỏc mỏy múc s dng quỏ trỡnh nghiờn cu 32 2.2.3 Cỏc ủng vt dựng nghiờn cu 32 2.2.4 Ging vi khun 32 2.2.5 Vc xin s dng thớ nghim 33 2.3 i tng nghiờn cu 33 2.4 a ủim nghiờn cu 33 2.5 Phng phỏp nghiờn cu 33 2.5.1 Phng phỏp xỏc ủnh hiu giỏ khỏng th F4 bng phn ng ngn tr ngng kt hng cu g 33 2.5.2 Phng phỏp ly mu 34 2.5.3 Phng phỏp kim tra ch tiờu vụ trựng 34 2.5.4 Phng phỏp kim tra cỏc ch tiờu an ton theo phng phỏp phõn lụ, phõn ủn 34 2.5.5 Phng phỏp kim tra hiu lc 35 2.5.6 Phng phỏp kim tra ủ di bo qun vc xin 36 2.5.7 Phng phỏp kim tra ủ di dch ca ln sau ủó tiờm phũng vc xin 36 2.5.8 Phng phỏp ủm vi khun 36 2.5.9 phng phỏp nuụi cy vi sinh vt thng quy 37 2.5.10 Phng phỏp x lý s liu 38 PHN III KT QU NGHIấN CU V THO LUN 39 3.1 Mễ T S LC QU TRèNH SN XUT VC XIN PH U BNG CễNG NGH LấN MEN SC KH 39 3.2 KT QU KIM NGHIM VC XIN PH U LN 42 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip iv 3.2.1 Mu 42 3.2.2 Kt qu kim tra vụ trựng lụ vc xin 42 3.2.3 Kt qu kim tra an ton vc xin 43 3.2.4 Kt qu kim tra hiu lc vc xin 45 3.3 KT QU XC NH KHNG TH KHNG E.COLI GY BNH LN 48 3.3.1 Kt qu xỏc ủnh khỏng th khỏng E.coli gõy bnh phự thng ln sau tiờm vc xin phự ủu 30 ngy 48 3.3.2 Phõn b hiu giỏ khỏng th 49 3.4 XC NH THI GIAN BO QUN VC XIN 51 3.4.1 Kt qu kim tra vụ trựng ca lụ vc xin phự ủu sau cỏc thi ủim 3, 6, 9, 10 thỏng 52 3.4.2 Kim tra ch tiờu an ton ca vc xin phự ủu thi gian bo qun 3, 6, 9, 10, 12 thỏng 54 3.4.3 Kim tra ch tiờu hiu lc ca vc xin phự ủu thi gian bo qun 3, 6, 9, 10 thỏng 55 3.5 KT QU NG DNG VC XIN PH U TRấN THC A 61 3.5.1 Xỏc ủnh an ton ca vc xin phự ủu trờn ln ng dng vo thc t sn xut trờn bn huyn Tiờn l - tnh Hng Yờn 61 3.5.2 Kt qu kim tra hiu lc ca vc xin phự ủu bng phng phỏp th nghim lõm sng ti huyn Tiờn L - Hng yờn 63 3.6 XC NH HIU GI KHNG TH HèNH THNH LN SAU KHI TIấM PHềNG VC XIN PH U 68 3.6.1 Xỏc ủnh hiu giỏ khỏng th 68 3.6.2 Xỏc ủnh thi gian dch bo h 69 PHN IV KT LUN V NGH 73 4.1 KT LUN 73 4.2 NGH 73 TI LIU THAM KHO 74 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip v DANH MC CC CH VIT TT NN-PTNT Nụng nghip v phỏt trin nụng thụn UBND U ban nhõn dõn TW Trung ng ED Edema disease( bnh phự thng) EDP Edema disease pathogenic(yu t gõy bnh phự ủu) Hly Hemolysin(yu t gõy dung huyt) JICA Japan International cooperation Agency(t chc hp tỏc quc t Nht bn) LT Heat- Labile enterotoxin( c t khụng chu nhit) ST Heat-Stable enterotoxin( c t chu nhit) ADN Acid Deoxyribonucleotide PCR Polymerase Chain Reaction(phn ng nhõn gen) ETEC Enterotoxingenic Escherichia coli(c t ủng rut vi khun E.coli) VTEC Verotoxigenic Escherichia coli TCN Tiờu chun nghnh PRRS Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome (Hi chng ri lon hụ hp v sinh sn ln) BHI Brain Heart Infusion Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip vi DANH MC BNG Bng 3.1 Kt qu kim tra vụ trựng lụ vc xin phự ủu 43 Bng 3.2 Kt qu kim tra an ton vc xin trờn ủng vt thớ nghim 44 Bng 3.3 kt qu kim hiu lc ca vc xin trờn chut bch 46 Bng 3.4 kt qu xỏc ủnh kh nng bo h ca vc xin phự ủu phũng bnh phự thng ln 47 Bng 3.5 kt qu xỏc ủnh khỏng th khỏng E.coli sau tiờm vc xin phự ủu 30 ngy 49 Bng 3.6 Phõn b hiu giỏ khỏng th huyt ln sau 30 ngy tiờm vc xin phự ủu 50 Bng 3.7 Kt qu kim tra vụ trựng vc xin phự ủu sau cỏc thi ủim 3, 6, 9, 10 thỏng 53 Bng 3.8 Kt qu kim tra vụ trựng vc xin phự ủu sau 12 thỏng 54 Bng 3.9 Kt qu kim tra ch tiờu an ton vc xin phự ủu sau 3, 6, 9, 10, 12 thỏng bo qun 55 Bng 4.10 Kt qu kim tra hiu lc vc xin phự ủu sau thỏng 56 Bng 3.11 Kt qu kim tra hiu lc vc xin phự ủu sau thỏng 57 Bng 3.12 Kt qu kim tra hiu lc vc xin phự ủu sau thỏng 58 Bng 3.13 Kt qu kim tra hiu lc vc xin phự ủu sau 10 thỏng 59 Bng 3.14 Kt qu kim tra hiu lc vc xin phự ủu sau 12 thỏng 60 Bng 3.15 Kt qu xỏc ủnh an ton vc xin phự ủu trờn ln 62 Bng 3.16 ỏnh giỏ kh nng bo h ln nuụi ủó tiờm phũng vc xin phự ủu ti xó c Thng Tiờn l 63 Bng 3.17 ỏnh giỏ kh nng bo h ln nuụi ủó tiờm phũng vc xin phự ủu ti xó Hi Triu Tiờn l 65 Bng 3.18 ỏnh giỏ kh nng bo h ln nuụi ủó tiờm phũng vc xin phự ủu ti xó Ngụ Quyn Tiờn l 66 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip vii Bng 3.19 Kt qu bo h ln sau tiờm phũng vc xin phự ủu ti huyn Tiờn L - Hng Yờn 67 Bng 3.20 Kt qu xỏc ủnh khỏng th hỡnh thnh sau tiờm phũng vc xin phự ủu phũng bnh phự thng ln 69 Bng 3.21 Kt qu phõn b khỏng th khỏng E.coli huyt ln sau thỏng tiờm phũng vc xin phự ủu 70 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip viii S ln cht nghi mc bnh phự thng ln ch yu trung thụn Lc Dc v Lng Tr ni cú t l tiờm phũng bnh phự thng cho ln thp C th, thụn Lc Dc tiờm phũng khụng tt nờn t l ln cht nghi bnh lờn ti 14.2%, ủú thụn Lng Tr t l cht cng lờn ủn 12.5% nhúm ln khụng tiờm vc xin Cú th thy rng t l cht nghi nhm bnh phự thng ln ti cỏc h chn nuụi trờn ủi bn xó c Thng cũn rt cao, nguyờn nhõn mt phn cụng tỏc tiờm phũng ti cỏc h chn nuụi xó ủt t l rt khiờm tn ủú ln nhim bnh thng cú t l cht rt cao v rt khú ủiu tr gia sỳc ủó nhim mm bnh Trong ủú ton b s ln ủc tiờm phũng vc xin ca Trung tõm nghiờn cu ng dng v Chuyn giao cụng ngh Thỳ y ủt hiu qu phũng bnh quỏ trỡnh nuụi rt tt, khụng cú bt k ln no sau ủó ủc tiờm phũng b cht nghi nhim vi khun bnh phự thng ln Nh vy hiu qu phũng bnh ca vc xin phự ủu chn nuụi l rt tớch cc tip tc ủỏnh giỏ ủc hiu qu bo h ca vc xin phự ủu chỳng tụi tip tc tin hnh th nghim trờn din rng ti cỏc h chn nuụi ti xó Hi Triu, kt qu th hin ti bng sau: Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip 64 Bng 3.17 ỏnh giỏ kh nng bo h ln nuụi ủó tiờm phũng vc xin phự ủu ti xó Hi Triu Tiờn l S Ln tiờm Ln tiờm Ln cht nghi b phũng khụng tiờm phự thng ln ỏnh ln giỏ ó Cha bo tiờm tiờm h phũng phũng theo Thụn dừi con (%) (%) (%) Bc Hi 109 84,40 17 15,60 0 23.5 Tt Nam Hi 152 126 82,89 26 17,11 0 3.8 Tt Nam Triu 230 206 89,57 24 10,43 0 8.3 Tt Bc Triu 120 45 37,50 0,83 11.1 Tt 611 499 81,67 112 18,33 0.2 12 10.7 T.hp 92 (%) 75 62,50 Qua bng trờn ta thy 3/4 thụn xó Hi Triu cú t l tiờm phũng trờn 80%, nhiờn t l ln cht nghi nhim bnh l khỏ cao, c th thụn Bc Triu t l tiờm phũng ủt 62.5% nhng t l ln cht nghi nhim bnh phự thng ln cao nht ti 11.1%, thụn Bc Hi cú t l tiờm phũng l 84.4% nhng nhng ln khụng tiờm phũng t l cht lờn ti 23.5% Nh vy khụng tiờm phũng vc xin ủi vi bnh phự thng thỡ t l mc bnh cht l rt cao Qua ủiu tra chỳng tụi thy, ti nhng xó nhiu h chn nuụi trang tri hoc chn nuụi thõm canh thng xuyờn tiờm phũng rt ủy ủ ủi vi bnh phự thng ln T l tiờm phũng thp thng trung vo cỏc h chn nuụi nh l, s lng ớt v hu ht cỏc trng hp ln cht nghi nhim phự thng ln trung chớnh vo nhúm ủi tng chn nuụi nh l m rt ớt xut hin ti cỏc Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip 65 h chn nuụi trang tri Trong thụn chỳng tụi theo dừi ủi vi nhúm ln khụng ủc tiờm phũng vc xin phự ủu 100% cỏc thụn ủu cú ln cht, t l ln cht nghi nhim chim t l 10.7%, ủõy l thit hi ủỏng k chn nuụi Trong tng s 499 ln ủc tiờm phũng vc xin phự ủu ch cú nht ln ủó tiờm phũng ti thụn Bc Triu b cht nghi nhim bnh phự thng ln, nhng thụn cú t l tiờm phũng vc xin cao thỡ s ln nghi cht bnh phự thng ln thp Nh vy cú th thy hiu lc phũng bnh ca vc xin phự ủu ủi vi bnh phự thng ln l rt tt, ủiu ny chng t vc xin phự ủu ca Trung tõm nghiờn cu ng dng v chuyn giao cụng ngh Thỳ y sn xut ủem li hiu qu tt phũng bnh v cn thit cú th khng ủnh thờm na v hiu qu phũng bnh ca vc xin phự ủu chỳng tụi tip tc tin hnh theo dừi v thu thp s liu ti xó Ngụ Quyn Tiờn L Kt qu th hin qua bng s kiu sau: Bng 3.18 ỏnh giỏ kh nng bo h ln nuụi ủó tiờm phũng vc xin phự ủu ti xó Ngụ Quyn Tiờn l Ln tiờm Ln tiờm Ln cht nghi b phũng khụng tiờm phự thng ln S ln Thụn ó tiờm theodừi (%) (%) phũng Cha tiờm phũng ỏnh giỏ bo h (%) (%) Trnh M 215 176 81,86 18,14 0.5 12.8 Tt i Li 268 130 48,51 138 51,49 2.3 2,99 Tt Ni Linh 230 103 44,78 127 55,22 0 11 5.7 Tt T.hp 713 409 57,36 304 42,64 0.9 24 7.7 Tt 39 Kt qu bng trờn cho thy, lụ thớ nghim vi s tiờm phũng 409 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip 66 theo dừi tng s 713 sau tiờm thỏng cú cht tng s theo dừi chim 0.9 % Trong ủú lụ ủi chng khụng tiờm phũng vc xin chỳng tụi theo dừi 304 con, cú 24 cht, chim t l 7.7%, ủú ti thụn Trnh M t l cht nghi nhim bnh cao nht ton xó chim 12.8% trờn tng ủn theo dừi Nh vy, t l mc bnh cht ca ln sau tiờm phũng vc xin phự ủu ca chỳng tụi ti xó c Thng cú cao nht ba xó theo dừi T kt qu trờn cho thy hiu qu tiờm phũng ca vc xin phự ủu trờn bn hp l cú hiu qu, ủõy l c s ủ chỳng tụi tip tc khng ủnh thng hiu ủi vi ngi chn nuụi T nhng kt qu trờn chỳng tụi cú bng tng hp v vic tiờm phũng vc xin phự ủu nh sau: Bng 3.19 Kt qu bo h ln sau tiờm phũng vc xin phự ủu ti huyn Tiờn L - Hng Yờn S Xó Ln tiờm Ln tiờm Ln cht nghi b phự phũng khụng tiờm thng ln ln ó tiờm theo dừi (%) (%) phũng ỏnh Cha tiờm phũng (%) giỏ bo h (%) c Thng 698 412 59.3 286 40.97 0 33 11.5 Tt Hi Triu 611 499 81.67 112 18.33 0.2 12 10.7 Tt Ngụ Quyn 713 409 57.36 304 42.64 0.9 24 7.8 Tt 2022 1320 65.28 702 34.72 0.3 69 9.8 T.hp Qua bng trờn ta thy, t l ca bnh ln cht nghi nhim bnh phự thng ln nhúm thớ nghim cú tiờm phũng vc xin thp hn hn so vi nhúm ủi chng khụng tiờm phũng hu ht cỏc xó ủu xut hin ca bnh cht ủc Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip 67 nghi mc bnh trờn, nhiờn nu cú t l tiờm phũng cao s gim thiu s lng cht Qua kt qu tiờm phũng vc xin phự ủu ti cỏc h chn nuụi, chỳng tụi nhn thy hiu qu phũng bnh phự thng ln ca vc xin phự ủu Trung tõm nghiờn cu ng dng v Chuyn giao cụng ngh Thỳ y l khỏ tt v phự hp vi ủiu kin chn nuụi ti Hng Yờn xỏc ủnh hiu giỏ khỏng th hỡnh thnh ủn ln sau tiờm phũng vc xin phự ủu chỳng tụi tin hnh kim tra khỏng th hỡnh thnh mỏu sau tiờm phũng 3.6 XC NH HIU GI KHNG TH HèNH THNH LN SAU KHI TIấM PHềNG VC XIN PH U 3.6.1 Xỏc ủnh hiu giỏ khỏng th Kim tra khỏng th hỡnh thnh sau tiờm phũng vc xin phự ủu l bin phỏp ủỏnh giỏ giỏn tip hiu lc v hiu qu phũng bnh ca vc xin Trc tiờm vc xin, ly mỏu nhng ln chun b tiờm, cht huyt v kim tra khỏng th bng phn ng ngng kt vi khỏng nguyờn l cỏc chng vi khun ging ti ủn v cung cp, ủó xỏc ủnh khụng cú khỏng th mỏu Chỳng tụi kim tra khỏng th hỡnh thnh ca 20 ln la tui tun tui, sau tiờm phũng bng vc xin phự ủu nhm rỳt kt lun v hiu lc phũng bnh phự thng ln vi khun E.coli gõy Kt qu trỡnh by trỡnh by bng sau: Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip 68 Bng 3.20 Kt qu xỏc ủnh khỏng th hỡnh thnh sau tiờm phũng vc xin phự ủu phũng bnh phự thng ln La TT S mu HT S mu HT kim tra (+) T l huyt (%) a ủim ly tui mu ln Ln Ln Ln (tun) (tiờm phũng) (tiờm phũng) (tiờm phũng) Cú K Cú K Cú K Xó c Thng 20 20 19 95 Xó Hi Triu 22 20 21 95.45 4.55 Xó Ngụ Quyn 20 20 20 100 Ghi chỳ : Khụng cú tiờm phũng; cú: cú tiờm phũng Kt qu kim tra khỏng th hỡnh thnh sau tiờm phũng vc xin phự ủu cho thy, kim tra 20 ln cú t l mu dng tớnh cỏc xó c Thng l 19/20 mu (+) chim 95 % , ti xó Ngụ Quyn l 20/20 mu (+) 100% v xó Hi Triu l 21/22 mu (+) chim 95.45% Qua bng trờn ta cng thy khỏng th mỏu ln khụng tiờm phũng vc xin phự ủu thi ủiim tun tui chim t l rt thp tng s mu kim tra Vỡ vy, vic tiờm phũng sm cho heo trc tỏch m l cn thit Ngoi so sỏnh khỏng th hỡnh thnh sau tiờm phũng vc xin phự ủu cỏc xó cho thy mc dự cú nhng cỏ th khụng sinh dch sau tiờm vc xin nhng c xó trờn ủu cú t l ủỏp ng dch cao hn mc cho phộp l 70%, theo chỳng tụi kt qu trờn hon ton ủỏp ng ủc yờu cu ca mt vc xin phũng bnh cho gia sỳc 3.6.2 Xỏc ủnh thi gian dch bo h Chỳng tụi ủỏnh giỏ kh nng trỡ ủỏp ng dch sau tiờm Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip 69 phũng vc xin bng cỏch tin hnh thớ nghim tiờm phũng vc xin phự ủu cho 15 ln Trc tiờm chỳng tụi ly mỏu, cht huyt v kim tra khỏng th khỏng E.coli mỏu bng phn ng ngng kt vi khỏng nguyờn, tt c nhng ln cú khỏng th khỏng E.coli mỏu s khụng ủc lm thớ nghiờm La tui ca ln chỳng tụi chn tiờm phũng l nhng ln ủt 14 ngy tui, mi ủc tiờm vi liu dch ml/con Sau ủc tiờm phũng, ln ủc tin hnh nuụi v chm súc, sau thỏng gõy dch s tin hnh ly mỏu kim tra khỏng th hỡnh thnh mỏu ca ln ủó dch bng vc xin phự ủu Tip theo ủnh kỡ vo cỏc thỏng 2, 3, 4, tip tc ly mỏu kim tra khỏng th cú mỏu Bng 3.21 Kt qu phõn b khỏng th khỏng E.coli huyt ln sau thỏng tiờm phũng vc xin phự ủu i S tng mu ln HT Thi tui 15 Cng mu 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024 1 15 6 1 15 (thỏng) 14 ngy Hiu giỏ khỏng th gian ly 1/2 1/4 1/8 1/16 10 5 15 15 13 Qua kt qu kim tra khỏng th hỡnh thnh mỏu ca ln ủc gõy dch bng vc xin phự ủu cho thy, kim tra 15 mu huyt ca 15 ln ủó tiờm phũng sau thỏng, t l mu dng tớnh l 100% (15/15 mu) ủú hm lng khỏng th ủt giỏ tr cao nht ủ pha loóng 1/1024 cú mu, ủ pha loóng thp nht cú s xut hin phn ng ngng kt 1/32 cú mu, ti ủ pha loóng 1/64 cú mu huyt dng tớnh Nh vy sau thỏng tiờm phũng, khỏng th mỏu ca ln ủó xut hin v tng cao, ủỏp Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip 70 ng ủc kh nng bo h ủi vi mn bnh Ti thi ủim thỏng v thỏng sau tiờm phũng, hm lng khỏng th sau pha loóng gõy phn ng ngng kt khỏng nguyờn ch yu ủ pha loóng 1/64 (14mu) v 1/128 (10 mu), nhiờn xut hin phn ng ngng kt ủ pha loóng cao nh 1/1024 cú mu, ủ pha loóng 1/512 cú mu, 1/256 cú mu thỏng th sau tiờm phũng, hm lng khỏng th mỏu bt ủu gim so vi cỏc thỏng trc ủú, hiu giỏ khỏng th cỏc mc ủ pha loóng 1/32 cú mu, 1/64 cú 10 mu, 1/128 cú mu, 1/256 cú mu Nh vy t thỏng th tr ủi hm lng khỏng th mỏu bt ủu gim, nhiờn ủ kh nng bo h dch tt cho ủn Ti thi ủim thỏng sau tiờm phũng, hiu giỏ khỏng th cỏc mc ủ pha loóng 1/32 cú mu, 1/64 cú mu, 1/128 cú mu Vy hm lng khỏng th xut hin cao nht vo thi ủim t sau - thỏng sau tiờm vc xin, nh vy cú th ủỏp ng tt kh nng phũng bnh sau tiờm nu nh chỳng ta tiờm ủỳng thi ủim quy ủnh nờn tiờm ủi vi bnh phự thng ln Qua trờn chỳng tụi thy cng thy rng sau khong - thỏng tiờm phũng vc xin hm lng khỏng th cú mỏu bt ủu gim, kộo theo gim kh nng bo h cho c th ủng vt trc tỏc nhõn gõy bnh, nhiờn qua kim tra chỳng tụi nhn thy rng khụng cú bt k mu no cú hm lng khỏng th mỏu gim di ủ pha loóng 1/32 vũng thỏng Mc dự vy vic gim hm lng khỏng th mỏu thng rt ớt nh hng ti kh nng bo h ủi vi bnh phự thng ln bi bnh mc phi v gõy thit hi trung ch yu vo khong thỏng ủu sau sinh, sau ủú t l mc v cht gim v rt ớt xut hin Kt qu xỏc ủnh hm lng khỏng th ủc th hin qua biu ủ di ủõy: Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip 71 S 10 10 1/32 1/64 1/128 66 1/256 1/512 3 2 11 1 11 1/1024 Thỏng Hỡnh 3.3 Biu ủ biu din s phõn b khỏng th khỏng E.coli huyt ln thỏng sau tiờm phũng vc xin phự ủu Qua biu ủ cho thy cỏc ct biu th khỏng th hỡnh thnh ln ủó tiờm phũng trung ủt giỏ tr ủ pha loóng 1/64 ủn 1/256 khong thi gian t dn thỏng sau tiờm phũng v ủt giỏ tr cao ch yu sau thỏng 2-4 thỏng tiờm phũng, giỏ tr khỏng th pha loóng cao nht cỏc cỏc thỏng ủt 1/1024 Tuy nhiờn hm lng khỏng th mỏu thỏng th cú hin tng gim mnh hn cỏc thỏng trc Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip 72 PHN IV KT LUN V NGH 4.1 KT LUN Vc xin ủt ch tiờu vụ trựng tuyt ủi thi gian s dng Vc xin an ton 100% ủi vi chut v ln thi gian bo qun 10 thỏng k t ngy sn xut Hiu lc bo h ca vc xin phự ủi vi ln ủt 80 -100% thi gian t 1-5 thỏng sau tiờm phũng Nh vy theo quy ủnh ca c quan qun lý nh nc hiu lc ca vc xin l tt Qua vic tin hnh th nghim trờn din rng bn huyn Tiờn L Hng yờn vi tng cng 1320con ln, la tui 14-90 ngy tui cho hiu qu phũng bnh tt cng nh an ton tuyt ủi quỏ trỡnh s dng 4.2 NGH Tiờm cho ln 14 ngy tui nh k (9 thỏng- 12 thỏng) kim tra cht lng ging vi khun sn xut vacxin nh tng cng ging qua chut v qua ln ủ vi khun n ủnh khỏng nguyờn tớnh, ủc lc v cỏc yu t gõy bnh nhm ủm bo cht lng v hiu lc ca vacxin phũng bnh phự ủu k tha chuyn giao cụng ngh t b mụn Vi trựng trc ủú Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip 73 TI LIU THAM KHO B Nụng Nghip v Phỏt trin nụng thụn (2008), chin lc phỏt trin chn nuụi ủn nm 2020 NXBNN H Ni, P6-9 Cc thỳ y (1994) Quy trỡnh kim nghim vc xin thỳ y NXB Nụng nghip H ni, P11- 46 Bựi Xuõn ng (2001), bnh phự ủu ln Escherichia coli gõy ln ca Hi Phũng v bin phỏp phũng tr Tp trớ khoa hc k thut Thỳ y, IX, P98-99 Nguyn Ngc Hi, Tụ Minh Chõu (2000), Tỡm hiu nguyờn nhõn ca hi chng thn kinh phự mt heo sau cai sa Tp trớ khoa hc k thut thỳ y VII, P27-35 Nguyn Bỏ Hiờn, Trn Th Lan Hng (2009), Giỏo trỡnh dch hc thỳ y, NXB Nụng nghip H ni, P63-64, 67, 72, 77, 79 Nguyn Bỏ Hiờn, Hunh Th M L, Lờ Vn Lónh, Ngc Thỳy (2012), Giỏo trỡnh bnh truyn nhim thỳ y Phm Khc Hiu, Bựi Th Tho (1999), Mt s kt qu nghiờn cu tớnh khỏng thuc ca vi khun gõy bnh thỳ y Kt qu nghiờn cu khoa hc k thut chn nuụi thỳ y, Nh xut bn Nụng nghip H Ni, P134-138 Nguyn Th Kim Lan (2003), Tỡnh hỡnh bnh phự thng ln ln E.coli mt s phng thuc tnh Thỏi Nguyờn Tp trớ khoa hc Thỳ y X, P64-68 Nguyn Th Ni, Nguyn Ngc Nhiờn, Cự Hu Phỳ, Nguyn Th S, Trn Th Thu H (1989), Kt qu ủiu tra v tỡnh hỡnh nhim vi khun ủng rut ti mt s c s chn nuụi ln, Kt qu nghiờn cu khoa hc v k thut thỳ y 1985-1989, NXB Nụng nghip H Ni Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip 74 10 Lờ Thanh Ngh v cs (2005), Nghiờn cu mt s ủc ủim dch t ca bnh phự thng ln t 21 ngy tui ủn 90 ngy tui ti huyn Súc Sn H Ni v bin phỏp phũng tr Lun Thc s khoa hc Nụng nghip 11 Nguyn Kh Ng (2000), Xỏc ủnh cỏc yu t gõy bnh ca E.coli bnh phự thng ln ln ti ng bng sụng Cu Long, ch vc xin phũng bnh Lun ỏn Tin s Nụng nghip 12 Nguyn Nh Thanh (2001), Vi sinh vt thỳ y, NXBNN H Ni, P 84 13 Phm Ngc Thch (2004), Theo dừi mt s ch tiờu lõm sng v sinh lý mỏu ln mc bnh phự thng ln Tp trớ khoa hc k thut Thỳ y III, P35 14 Cự Hu Phỳ, Nguyn Ngc Nhiờn, V Bỡnh Minh, Ngc Thỳy (2000), Kt qu phõn lp vi khun E.coli v Salmonella ln mc bnh tiờu chy, xỏc ủnh mt s ủc tớnh sinh húa ca cỏc chng vi khun phõn lp ủc v bin phỏp phũng tr Khoa hc k thut thỳ y 1996 2000, P171-176 15 Trnh Quang Tuyờn (2006), Xỏc ủnh cỏc yu t gõy bnh ca E.coli bnh tiờu chy v phự thng ln ln chn nuụi trung Lun ỏn Tin s Nụng nghip 16 Xng sn xut thc nghim Vin Thỳ y 2003, H s ủng ký sn xut vaccine E.coli phự ủu ln TI LIU NC NGOI 17 Bertchinger H U., Bachaman M., Mettler G (1990), Adhesive fimbriae produced in vivo by E.coli O139:K12(B):H1 asssociated with enterotoxaemia in pigs, P265-281 18 Bosworth B T (1998), Hemoltyic E.coli an edema disease, P1-5 19 Cavalieri S J., Snyder I S (1982), Cytotoxic activity of partially purified Escherichia coli alpha heamolysin, P11-21 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip 75 20 Carter G R., Chengapan M M., Rober T S.(1995), Essentials veternary microbiology, P45-49 21 Clarence M., Fraser A M (1986), The merk veterinary manual, P186 22 Clugston R E., Neilson N O., Roe W E (1974), Experimental edema disease of swine (E.coli enteroxemia) The development of hypertension after the intravenous administration of ED principle, P29-33 23 De Graaf F K., Gasstra W (1994), Fimbriae of enterotoxigenic E.coli In fimbriae : Adhesion, Genetic, Biogenesis and vaccine, P53-85 24 Dobrescu L (1983), New biological effect of edema disease principle and its use as an in vitro for this toxin, P31-34 25 Docic M, Bilkei (2003), The vaccination of weaned pigs against edema disease, P465-466 26 Evans D J Jr., Evan D G., Gorbach S L (1973), Production of vascular permeability factor by enterotoxigenic E.coli isolated from man, P735-730 27 Garabal J I, Vazquez F., Blanco J., Blanco M.(1997), Serogroups of E.coli isolated from piglet in Spain.P110-125 28 Holland R E (1990), Some infectious cause of diarrHly in young farm animals, P345-376 29 Kyriakis S C (1997), The efficacy of enrofloxacin in-feed mdication by plying different programmes for control of post weaning oederma disease in weaned pignet, P523-530 30 Moon H W (1993), Vaccine for preventing enterotoxigenic E.coli infectins in fawrm animals, P 200-213 31 Moon H W., Kohler E M., Schneider R A.,(1980) Prevalence of pilus antigen, enterotoxin types, and enterotoxinpathogennicity among K88negative enterotoxigenic E.coli from neonanatal pigs, P220-230 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip 76 32 Francis D H., Willgohs J A (1991), Evaluation of a live avirulent Escherichia coli vaccine for K88+ , LT+ enterotoxigenic colibacillosis in weaned pigs, P1051-1055 33 Frydendahl K (2002), Prevalence of serogoups and virulence genes in Escherichia coli associated with postweaning diarrhoea and edema disease in pigs and a comparion of diagoostic approaches P169-183 34 Nagy B (1992), Suseceptibility of porcine intestine to pilus-mediated adhesion by some isolates of pilited enterotoxigenic E.coli icreases with age 35 Parma A E et (2000), Toxigenic E.coli isolated from pigs in Argentina, P270-280 36 Parry S H., Rooke D M (1985), Adhensins and colonization factor of E.coli : Riviews and method Pulished for the society for general Microbilogy by academic press, P79-156 37 Paton A W., Morana R., paton J C (2001), Neutralization of shiga toxin Stx1, Stx2e, and Stx2e by recombinant bacteria expressing mimics Of globotriose and globotetraose Infect Immun, P1967-1970 38 Rippinger P., Bertchinger H U.,Imberchets H., Nagy B (1995), Designnations F18ab and F18ac for the related fimbrial types F107, 2134P and 8813 of Escherichia coli isolated from porcine posweaning diarrhoea and oedema disease, P281-295 39 Schofield F W., Davis D (1955), Oedema desease (entero-toxaemia) in swine, P242-245 40 Shanks P L (1938), An unusual condition affecting the digestive organs of the pigs P356-370 41 Sith H W.(1963a), The hemolysins of Escherichia coli J Pathol Bacterial, P 195-219; 42 Smith H W, (1963b), The heamolysins of Escherichia coli P195-210 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip 77 43 Smith H W., Halls H (1968), The production of oedema disease and diarrhoea in weaned pigs by the oral administration of Escherichia coli: factor that influence the course of the experimental disease, P45-60 44 Orskov I., Orkov F., Sojka W J (1961), Simultaneous occurrence of E.coli B and Lantigen in strains from disease swine Influence of cultivation temperature Two new Ecoli Kantigen: K87 and K88, P404-422 45 Orkov F (1978), Virulence factor of the bacterial cell surface, P630-633 46 Timoney J F (1950), Odema disease of swine, P748-760 47 Verdonck F., Cox E., Ampe B (2003), Open status of pig-breeding farm in assosited with slightly higherseroprevevalence of F18+ E.coli in north Belgium, P133-140 48 Nagy B., Fekete P Z (1999), Enterotoxigenic Echerichia coli (ETEC) in farm animals, P260-284 49 Nagy B., Whip S C., Imberechts H., Beerchinger H U (1997), Biological relationship between F18ab and F18ac fimbriae of enterotoxigenic Echerichia coli from weaned pigs with oedema disease or diarrhoea, P1-11 50 Johansen M., Andresen L O., Jorsal S E (1997) Prevention of edema disease in pigs by vaccination with verotoxin 2e toxiod, P280-285 51 Wasteson Y., Lund A., Olsvik O (1992), Characterization of E.coli strains isolated from pigs with Edema Disease, P179-190 52 Wilson R A., Francis D H (1986), Fimbriae anterotoxins assoted with E.coli serogroups isolated from pigs with colibacilosis, P213-220 53 Zinner S H., Peter G (1983), The protenial role of sell wall core glycolipids in the bactercmin medical Microbiology volum Immunizationn against bacterial, P71-90 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun thc s khoa hc nụng nghip 78 [...]... triệu chứng như lợn bị bệnh ngoài tự nhiên Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 18 1.3 Bệnh phù thũng ở lợn do vi khuẩn E .coli gây ra Ở Việt Nam, bệnh phù thũng ở lợn do E .coli gây ra ñược gọi với tên khác nhau: Bệnh phù ñầu lợn con, bệnh phù ñầu lợn, bệnh phù thũng ở lợn Trong luận văn này chúng tôi thống nhất tên gọi bệnh là bệnh phù thũng ở lợn ( Edema Disease)... cho kết quả phòng bệnh rất tốt và phù hợp với thực tế Theo quy ñịnh của nhà nước bất kỳ loại vắc xin nào trước khi xuất xưởng, lưu hành trên thị trường ñều phải ñạt ñược các chỉ tiêu ñã ñược quy ñịnh Do vậy, chúng tôi tiến hành nghiên cứu ñề tài: Khảo nghiệm vắc xin phòng bệnh phù thũng ở lợn do Escherichia coli ” làm cơ sở khoa học ñể sản xuất vắc xin phòng bệnh phù thũng cho ñàn lợn nuôi ở Việt Nam... cứu về bệnh phù thũng ở lợn tuy nhiên hàng năm vẫn có một số lượng rất lớn lợn chết vì bệnh này, vì vậy việc nghiên cứu sản xuất ra vắc xin phòng bệnh phù thũng ở lợn có hiệu quả là một việc rất cần thiết 1.3.1 Nguyên nhân gây bệnh Bệnh phù thũng ở lợn, là bệnh truyền nhiễm, hay xảy ra trên lợn sau cai sữa với các ñặc ñiểm nổi bật như gây chết ñột ngột, thủy thũng và có triệu chứng thần kinh do cảm... hoặc nội bì của lợn, sau 24 -96 giờ cũng xuất hiện triệu chứng bị bệnh như co giật, tê liệt, mất ñiều hòa, phù thũng ở lợn và chết Không có sự liên quan về giống lợn trong quá trình phát sinh bệnh, tuy nhiên việc mẫn cảm với EDP ñóng vai trò quan trọng trong dịch tễ của bệnh phù thũng ở lợn Một số lợn lớn khoảng 40Kg và lợn sơ sinh cũng mẫn cảm với EDP Bệnh phù thũng ở lợn do các chủng E .coli O138O139O141... sinh ra những con vật mẫn cảm Ở Việt Nam hiện nay vắc xin phòng bệnh phù thũng ở lợn ñược Trung tâm nghiên cứu ứng dụng và chuyển giao công nghệ Thú y - Viện Thú y sản xuất có tên gọi là vắc xin phù ñầu là vắc xin vô hoạt ñược bán trên thị trường Vắc xin có hiệu lực phòng bệnh và ñược nhà nước cấp phép lưu hành trên thị trường có thể sử dụng tiêm phòng ñể phòng bệnh - Trị bệnh Mục ñích ñiều trị ban ñầu... 2012)[6] và tên vắc xin ñược gọi theo cơ sở Trung tâm nghiên cứu ứng dụng và Chuyển giao công Thú y của Viện Thú y TW sản xuất là vắc xin phù ñầu Trên thế giới bệnh phù thũng ở lợn ñược mô tả lần ñầu tiên vào khoảng những năm 40 của thế kỷ trước, tuy nhiên người ta vẫn chưa rõ nguyên nhân và ñược ñặt tên như là bệnh loạng choạng, bệnh phù thũng Sau ñó bệnh phù thũng ở lợn ñược phát hiện ở nhiều nước trên... Bosworth (1998)[18] cho rằng, vi khuẩn E .coli gây dung huyết chính là nguyên nhân gây tiêu chảy ở lợn con sơ sinh và bệnh phù thũng ở lợn con sau cai sữa Việc sử dụng vắc xin phòng bệnh phù thũng ở lợn là tạo ra kháng thể ngăn cản sự bám dính của vi khuẩn trong ñường tiêu hóa Verotoxin và Enterotoxin là hai yếu tố ñộc lực quan trọng gây bệnh Trong các Serotyp gây bệnh có một số chủng mang ñộc tố như STa,... (2003)[25], ñã nghiên cứu sử dụng vắc xin có chứa giải ñộc tố VT2E tiêm cho lợn con, vắc xin ñã giảm tỷ lệ bệnh phù thũng ở lợn xuống còn 6,9% Việc sử dụng vắc xin có các yếu tố kháng nguyên F4, F18 với ETEC và VTEC tiêm phòng cho lợn con ñã ñược nghiên cứu trên thế giới 1.1.2 Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam Bệnh phù thũng ở lợn do vi khuẩn E .coli gây ra ñã ñược nhiều nhà nghiên cứu Thú y trong nước quan tâm... tuần và tuổi lợn con mắc bệnh nằm trong khoảng 4-12 tuần ðôi khi bệnh phù thũng ở lợn xuất hiện rất sớm có khi 4 ngày tuổi hoặc rất muộn ở lợn con Biện pháp cai sữa sớm lợn con cũng là một yếu tố có thể làm gia tăng sự xuất hiện bệnh Về ñặc trưng, bệnh phù thũng ở lợn thường thấy xuất hiện ở những lợn con phát triển nhanh khoẻ mạnh và thông thường những lợn con tốt nhất trong ñàn mắc bệnh ñầu tiên... ngành chăn nuôi lợn hướng công nghiệp phát triển nở rộ Schofield (1985)[39], khi quan sát cho rằng số lượng lợn mắc bệnh tăng lên cùng với việc tăng khẩu phần ăn của lợn và ông gọi là bệnh lợn loạng choạng ðầu tiên ông ñã thông báo rằng có sự xuất hiện số lượng lớn vi khuẩn E .coli dung huyết trong ruột lợn con bị chết vì bệnh phù thũng ở lợn Ngày nay, bệnh phù thũng ở lợn ñã phát hiện ở nhiều nước trên ... nhn ủnh sai lm cho rng vc xin khụng cú hiu lc hoc vc xin gõy phn ng, vc xin gõy bnh Cht b tr ca vc xin: B tr keo phốn gi l vc xin keo phốn, b sung du khoỏng gi l vc xin nh du Cn lc ủu trc s dng... k loi vc xin no trc xut xng, lu hnh trờn th trng ủu phi ủt ủc cỏc ch tiờu ủó ủc quy ủnh Do vy, chỳng tụi tin hnh nghiờn cu ủ ti: Kho nghim vc xin phũng bnh phự thng ln Escherichia coli lm c... nghiờn cu trung vo lnh vc vc xin phũng bnh phự thng ln vi khun E .coli gõy 1.2 c tớnh sinh hc ca vi khun Escherichia coli 1.2.1 c tớnh hỡnh thỏi vi khun Vi khun E .coli l mt trc khun hỡnh gy ngn,