Điều tra thành phần bệnh nấm, diễn biến một số bệnh nấm chính hại thuốc lá vụ xuân 2005 tại Chi Lăng, tỉnh Lạng Sơn và biện pháp phòng trừ bằng thuốc hoá học

Điều tra thành phần bệnh nấm, mức độ phát sinh phát triển của một số bệnh nấm hại thuốc lá ở giai đoạn vườn ươm vụ xuân 2005 tại Chi Lăng, tỉnh Lạng Sơn..... Điều tra ảnh hưởng của của c

Bộ giáo dục và đào tạo trường đại học nông nghiệp i

-

nguyễn chí thanh

Điều tra thành phần bệnh nấm, diễn biến một

số bệnh nấm chính hại thuốc lá vụ xuân 2005 tại Chi Lăng, tỉnh Lạng Sơn và biện pháp

phòng trừ bằng thuốc hoá học

Luận văn thạc sĩ nông nghiệp

Chuyên ngành : Bảo vệ thực vật Mã số : 4.01.06

Người hướng dẫn khoa học: TS đỗ tấn dũng

Hà nội - 2005

Lời cam đoan

- Tôi xin cam đoan rằng, số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn là trung thực và ch−a từng đ−ợc sử dụng để bảo vệ một học vị nào

- Tôi xin cam đoan rằng, mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn này

đã đ−ợc cám ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn này đã đ−ợc chỉ rõ nguồn gốc

Tác giả luận văn

Nguyễn Chí Thanh

Lời cảm ơn

Có được kết quả nghiên cứu này, tôi xin được bầy tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến:

TS Đỗ Tấn Dũng, Bộ môn Bệnh cây - Nông dược, Khoa Nông học, Trường

Đại học Nông Nghiệp I, người thầy hết sức tận tình và chu đáo Thầy truyền đạt cho tôi những kiến thức và kinh nghiệm quý báu để hoàn thành luận văn nghiên cứu khoa học

Tập thể các thầy cô giáo Bộ môn Bệnh cây - Nông dược, Khoa Nông học, Trường Đại học Nông Nghiệp I đã tận tình giúp đỡ và tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tôi trong thời gian học tập và thực hiện đề tài

Tôi cũng xin bày tỏ lòng biết ơn đến Ban Giám đốc Công ty Cổ phần Ngân Sơn

và cán bộ công nhân viên phòng Kỹ thuật-Đầu tư, Trạm nguyên liệu thuốc lá Bắc Giang đã tạo mọi điều kiện thuận lợi để tôi hoàn thành chương trình đào tạo

Lòng biết ơn sâu sắc cũng xin được dành cho cha, mẹ, vợ con và gia đình đã giúp sức rất nhiều để bản thân hoàn thành luận văn này

Cuối cùng tôi xin chân thành cám ơn, sự giúp đỡ của các đồng chí lãnh đạo và

bà con nông dân huyện Chi Lăng, tỉnh Lạng Sơn, nơi tôi tiến hành các thí nghiệm, nghiên cứu khoa học

Tác giả luận văn

Nguyễn Chí Thanh

Mục lục Trang

Lời cam đoan

Lời cảm ơn

Mục lục

Danh mục các chữ viết tắt

Danh mục các bảng

Danh mục các đồ thị

1 Mở đầu

1.1 Đặt vấn đề

1.2 Mục đích của đề tài

1.3 Yêu cầu của đề tài

2 Tổng quan vấn đề nghiên cứu

2.1 Giới thiệu cây thuốc lá và tình hình sản xuất thuốc lá hiện nay

2.2 Một số kết quả nghiên cứu về bệnh nấm hại thuốc lá ở ngoài nước 2.3 Một số kết quả nghiên cứu ở trong nước về bệnh nấm hại thuốc lá và biện pháp phòng trừ

3 Vật liệu, nội dung và phương pháp nghiên cứu

3.1 Địa điểm nghiên cứu

3.2 Vật liệu nghiên cứu

3.3 Nội dung nghiên cứu

3.4 Phương pháp nghiên cứu

3.5 Phương pháp tính toán và xử lý số liệu

4 Kết quả nghiên cứu

4.1 Điều tra thành phần bệnh nấm, mức độ phát sinh phát triển của một số bệnh nấm hại thuốc lá ở giai đoạn vườn ươm vụ xuân 2005 tại Chi Lăng, tỉnh Lạng Sơn

i

ii iii

v

vi viii

1

1

3

3

4

4

7

36

40

40

40

42

42

47

49

49

4.1.1 Điều tra xác định thành phần và mức độ gây hại của bệnh nấm

hại thuốc lá ở giai đoạn vườn ươm

4.1.2 Diễn biến của một số bệnh nấm chính hại thuốc lá ở vườn ươm:

4.1.3 Nghiên cứu ảnh hưởng của chế độ luân canh đến sự phát sinh và gây hại của bệnh nấm hại thuốc lá ở giai đoạn vườn ươm

4.1.4 Khảo sát hiệu lực phòng trừ một số bệnh nấm hại thuốc lá ở giai đoạn vườn ươm cây con (trên giống C176) của một số thuốc hoá học

4.2 Nghiên cứu xác định thành phần bệnh nấm, diễn biến của một số bệnh nấm hại thuốc lá vụ xuân 2005 ở ruộng sản xuất

4.2.1 Thành phần bệnh nấm hại thuốc lá vụ xuân 2005 ở ruộng sản xuất vùng Chi Lăng, tỉnh Lạng Sơn

4.2.2 Điều tra ảnh hưởng của của chế độ luân canh đến sự phát sinh phát triển của một số bệnh nấm hại thuốc lá ngoài sản xuất

4.2.3 Nghiên cứu đặc điểm hình thái và đặc tính sinh học của một số nấm chính hại thuốc lá vụ xuân năm 2005 tại Chi Lăng, tỉnh Lạng Sơn 4.2.4 Điều tra ảnh hưởng của giống và mật độ trồng đến sự phát sinh phát triển của một số bệnh nấm hại thuốc lá ngoài sản xuất

4.2.5 Nghiên cứu ảnh hưởng phân bón đến sự phát triển của một số bệnh nấm chính hại thuốc lá

4.2.6 Khảo sát hiệu lực phòng trừ một số bệnh nấm chính hại thuốc ở ruộng trồng ngoài sản xuất bằng thuốc hoá học

5 Kết luận và đề nghị

Tài liệu tham khảo

Phụ lục

50

52

55

57

62

62

64

73

79

85

100

105

107

112

Danh môc c¸c ch÷ viÕt t¾t

ORSTOM Organisation RechÌrche Scientifque et Technique Outre-Mer

Thành phần nấm bệnh hại thuốc lá ở giai đoạn vườn ươm

cây con tại huyện Chi Lăng, Lạng Sơn vụ xuân năm 2005

Diễn biến một số bệnh hại chính trên cây thuốc lá (giai

đoạn vườn ươm cây con)………

ảnh hưởng của chế độ luân canh đến một số nấm bệnh

chính hại thuốc lá ở giai đoạn vườn ươm cây con………

Hiệu lực của một số thuốc hoá học đến sự phát triển bệnh

chết rạp trên vườn ươm thuốc lá………

Hiệu lực của một số thuốc hoá học đến sự phát triển bệnh

đốm mắt cua trên vườn ươm thuốc lá………

Thành phần nấm bệnh hại thuốc lá ngoài sản xuất tại

huyện Chi Lăng, tỉnh Lạng Sơn vụ xuân năm 2005………

ảnh hưởng của chế độ luân canh đến bệnh đốm mắt cua

hại thuốc lá ngoài đồng ruộng ………

ảnh hưởng của chế độ luân canh đến bệnh đốm trắng hại

thuốc lá ngoài đồng ruộng………

ảnh hưởng của chế độ luân canh đến bệnh đốm nâu hại

thuốc lá ngoài đồng ruộng………

ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến sự phát triển

của nấm Cercospora nicotianae………

ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến sự phát triển

của nấm Phyllosticta tabaci………

ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến sự phát triển

của nấm Alternaria alternata………

ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự phát triển của một số loài

nấm hại thuốc lá trên môi trường nhân tạo CGA…………

ảnh hưởng của giống đến sự phát sinh phát triển của một

số bệnh nấm hại thuốc lá ngoài đồng ruộng………

bệnh nấm chính hại thuốc lá ngoài đồng ruộng …………

ảnh hưởng của lượng phân Fertibor (Na2B4O7.5H2O) đến

một số bệnh nấm chính hại thuốc lá ngoài đồng ruộng…

ảnh hưởng của thuốc hoá học đến bệnh đốm nâu hại thuốc lá ngoài đồng ruộng………

ảnh hưởng của thuốc hoá học đến bệnh đốm mắt cua hại

thuốc lá ngoài đồng ruộng………

danh mục các đồ thị

4.1 Diễn biến một số bệnh hại chính trên cây thuốc lá (giai

đoạn vườn ươm cây con)……… 54 4.2 Hiệu lực của một số thuốc hoá học đến bệnh hại vườn

4.3 ảnh hưởng của chế độ luân canh đến bệnh đốm mắt cua

hại thuốc lá ngoài đồng ruộng ……… 62 4.4 ảnh hưởng của chế độ luân canh đến bệnh đốm trắng hại

thuốc lá ngoài đồng ruộng……… 69 4.5 ảnh hưởng của chế độ luân canh đến bệnh đốm nâu hại

thuốc lá ngoài đồng ruộng……… 72 4.6 ảnh hưởng của thuốc hoá học đến bệnh hại thuốc lá

1 Mở đầu

1.1 Đặt vấn đề

Cây thuốc lá (Nicotiana tabacum L) là loại cây công nghiệp ngắn ngày

có giá trị kinh tế cao, đươc trồng rộng rãi trên thế giới, từ vĩ độ 45 Bắc đến 30

vĩ độ Nam, nhưng tập trung chủ yếu ở phần vĩ độ Bắc Lá thuốc lá sau khi sơ chế là nguyên liệu chính để sản xuất thuốc lá điếu

Nhiều nước trên thế giới, thuốc lá được coi là một trong những cây công nghiệp có giá trị kinh tế cao Một tấn thuốc lá khô có giá trị bằng 4 tấn lạc và bằng 10 tấn gạo Năm 1993, tổng sản lượng thuốc lá trên toàn thế giới đạt khoảng 8,42 triệu tấn với diện tích trồng là 5,14 triệu ha, chiếm 0,5% diện tích trồng trọt của toàn thế giới (Lucas et al., 1994) [41]

ở Việt Nam, sản lượng thuốc lá nguyên liệu năm 1991 đạt khoảng

31000 tấn (Thống kê của Tổng Công ty Thuốc lá Việt Nam, 2004) [20] Đây

là một nguồn thu quan trọng và ngày càng tăng cho ngân sách nhà nước Năm

1995 Tổng Công ty Thuốc lá Việt Nam nộp vào ngân sách 1.005 tỷ; năm 1996

là 1.167,67 tỷ; năm 1999 là 1.215,77 tỷ và năm 2000 là 13000 tỷ đồng Kim ngạch xuất khẩu mỗi năm cũng tăng: năm 1998 kim ngạch xuất khẩu đạt 1,47 triệu USD, năm 1999 - 1,88 triệu USD và năm 2000 đạt 6 triệu USD (Báo cáo của Tổng Công ty Thuốc lá Việt Nam (2001) [20])

Trong thập kỷ 80, diện tích trồng thuốc lá ở miền Bắc đã lên tới 19800

ha, nhưng sản lượng chỉ đạt 14763 tấn Thuốc lá được trồng chủ yếu ở một số tỉnh như Cao Bằng, Lạng Sơn, Bắc Kạn, Thái Nguyên, Bắc Giang, Hà Tây, Hà Nội, Ninh Bình, Thanh Hoá Giống trồng chủ yếu là giống thuốc lá cũ như Bắc Lưu, Trung Hoa Bài, Đại Kim Tinh, Ba Vì,

Lạng Sơn là một trong những vùng trồng thuốc lá truyền thống của

nước ta Tuy nhiên, năng suất và chất lượng của thuốc lá nguyên liệu vẫn còn

ở mức thấp so với tiềm năng Một trong những nguyên nhân chủ yếu làm giảm năng suất, chất lượng thuốc lá nguyên liệu là do tác hại của sâu bệnh Đáng tiếc, cho đến nay vẫn chưa có nhiều công trình nghiên cứu đầy đủ về sâu bệnh hại cây thuốc lá ở tỉnh Lạng Sơn

Từ năm 1988, Tổng Công ty Thuốc lá Việt Nam đã nhập nhiều giống thuốc lá mới (như các giống thuốc lá Virginia, Burley, Oriental) từ Mỹ, Pháp, Zimbabwe nhằm thay thế dần các giống truyền thống sẵn có ở địa phương (Tổng Công ty Thuốc lá Việt Nam, 2010) [20] Hai giống thuốc lá là C176 và K326 (Virginia) có năng suất cao, chất lượng tốt, đã được chọn lọc để thay thế cho các giống thuốc lá cũ ở cả 3 miền Bắc, Trung, Nam (Đào Đức Thức, 2001) [18] và được các nhà máy sản xuất thuốc lá điếu chấp nhận đưa vào sản xuất Đó là bước đột phá quan trọng nhằm nâng cao năng suất và chất lượng thuốc lá Cơ cấu giống thay đổi đã đẩy diện tích trồng thuốc lá tăng nhanh: năm 1997 diện tích thuốc lá đạt 20450 ha; năm 1998 diện tích trồng tăng lên

27294 ha

Sâu bệnh đóng vai trò quan trọng trong nghề trồng thuốc lá và là một trong những nguyên nhân chính gây ra sự giảm sút về năng suất và chất lượng của thuốc lá (Lucas, 1975) [39]

Không kể đến sự gây hại của côn trùng, riêng vai trò gây hại của các bệnh thuốc lá là rất đáng kể Bệnh hại thuốc lá xuất hiện từ giai đoạn cây con trong vườn ươm đến khi trồng ngoài sản xuất, thậm chí cả trong quá trình chế biến và bảo quản Các bệnh phổ biến như bệnh thán thư, bệnh lở cổ rễ, bệnh chết rạp cây con, bệnh sương mai, bệnh đốm nâu (đốm vòng), bệnh đốm trắng, bệnh vết nâu, bệnh phấn trắng, bệnh thối gốc và các bệnh do virus (TMV, PVY), vi khuẩn (vi khuẩn héo xanh, bệnh thối rỗng thân) và tuyến trùng (bệnh tuyến trùng nốt sưng) gây ra; trong đó các bệnh hại do nấm gây ra chiếm đa số, phổ biến và có mức gây hại đáng kể

Việt Nam với điều kiện thời tiết nóng ẩm, mưa nhiều rất thuận lợi cho

sự phát sinh, phát triển của các loại nấm hại thuốc lá Nghiên cứu sự phát sinh phát triển và gây hại của một số bệnh nấm gây hại thuốc lá và đề xuất các khuyến cáo trong phòng trừ bệnh, góp phần nâng cao năng suất, chất lượng của thuốc lá, ổn định vùng sản xuất nguyên liệu được xem là một việc làm thiết thực, có ý nghĩa kinh tế đối với vùng sản xuất thuốc lá Lạng Sơn

Từ những cơ sở trên, xuất phát từ nhu cầu của thực tế sản xuất, được sự phân công của Bộ môn Bệnh cây - Khoa Nông học - Trường Đại học Nông nghiệp I - Hà Nội, dưới sự hướng dẫn của Thày giáo, TS Đỗ Tấn Dũng chúng

tôi thực hiện đề tài: "Điều tra thành phần bệnh nấm, diễn biến một số bệnh

nấm chính hại thuốc lá vụ xuân 2005 tại Chi Lăng, tỉnh Lạng Sơn và biện pháp phòng trừ bằng thuốc hoá học"

1.2 Mục đích của đề tài

Xác định thành phần, mức độ phổ biến, tác hại của các bệnh nấm hại thuốc lá ở giai đoạn vườn ươm và ruộng trồng sản xuất xuân năm 2005; theo dõi diễn biến của một số bệnh nấm chính hại thuốc lá ruộng sản xuất và tìm hiểu hiệu quả của một số thuốc hoá học đối với một số bệnh nấm hại thuốc lá trên đồng ruộng

1.3 Yêu cầu của đề tài

- Điều tra thành phần bệnh nấm hại thuốc lá vàng sấy (Virginia) trên vườn ươm và xác định thành phần, mức độ gây hại của một số nấm gây bệnh chính ở ruộng sản xuất trong vụ Xuân 2005 tại Chi Lăng - Lạng Sơn

- Điều tra ảnh hưởng của một số yếu tố sinh thái kỹ thuật đến diễn biến của một số bệnh nấm chủ yếu hại thuốc lá vụ xuân 2005 tại Chi Lăng - Lạng Sơn và tìm hiểu thêm đặc điểm hình thái và sinh học của một số loài nấm chủ yếu hại thuốc lá ở Lạng Sơn

- Khảo sát khả năng phòng trừ bệnh nấm chính hại thuốc lá ở giai đoạn

vườn ươm và ruộng sản xuất bằng một số loại thuốc hoá học

2 Tổng quan vấn đề nghiên cứu

2.1 Giới thiệu cây thuốc lá và tình hình sản xuất thuốc lá hiện nay

Cây thuốc lá (Nicotiana tabacum L.) thuộc chi Nicotiana do Linacus

đặt tên năm 1753, thuộc họ cà Solanaceae Theo Akehurst (1981) [23] chi

Nicotiana là có nguồn gốc ở Tân thế giới, hiện có 65 loài, nhưng chỉ có 2 loài

là Nicotiana tabacum và Nicotiana rustica là những loài có tầm quan trọng

kinh tế được sử dụng trồng trong sản xuất

Loài Nicotiana tabacum L (còn gọi là thuốc lá hoa hồng) có số lượng

nhiễm sắc thể n = 24 Loài Nicotiana rustica (còn gọi là thuốc lá hoa vàng) có

số lượng nhiễm sắc thể n = 12 ữ 24, được trồng để lấy nguyên liệu sản xuất axit hữu cơ, làm chế phẩm phòng trừ sâu bệnh trong nông nghiệp và một số sản phẩm khác

Chi Nicotiana được các nhà nhân giống thực vật nghiên cứu trước thời

Menden quan tâm và là một đối tượng thích hợp cho các nghiên cứu di truyền

cơ bản Chi Nicotiana được trồng rải khắp từ 450 vĩ Bắc đến 300 vĩ Nam

Theo Goodspesde et al (1954) [35]; Akehurst (1981) [23], những giống

thuốc lá đang được trồng hiện nay (Nicotiana tabacum L.) là cây lưỡng nhị bội (Amphidiploid) 2n = 4x = 48 Loài Nicotiana tabacum L được trồng lấy lá làm nguyên liệu sản xuất thuốc lá điếu Trong loài Nicotiana tabacum L

phân ra thành 6 biến chủng phụ, gồm:

+ N tabacum var Fruticosa

+ N tabacum var Lancifolia

+ N tabacum var Virginia

+ N tabacum var Brasilensis

+ N tabacum var Havanensis

+ N tabacum var Macrophyla

Theo Lê Đình Thụy và CTV (1996) [17], Akehurst (1981) [23], trong 6 biến chủng trên, dựa vào màu sắc nguyên liệu sau khi sơ chế lá để chia thành các nhóm sau:

∗ Nhóm thuốc lá màu tối

- Thuốc sấy lửa trực tiếp (Fire - cured): được trồng nhiều ở Mỹ, ấn Độ

và Nam Phi, có hàm lượng nicotin khá cao (6 - 7%)

- Thuốc lá phơi gió (Dark - air - cured): được trồng nhiều ở Mỹ, Malawi, Brazin, sáng chế theo phương pháp phơi gió như Burley, Morylan, Riogrand

- Thuốc lá xì gà (thuộc chủng N tabacum var Brasilensis.): trồng chủ

yếu ở Cuba và Philippines, được làm khô theo phương pháp phơi gió, để chuyên sản xuất xì gà

Những loại nguyên liệu trên, đẫ tạo được nhiều gu thuốc khác nhau, đã

đáp ứng nhu cầu của người tiêu dùng; trong đó thuốc lá vàng sấy (như Virgina, thuốc lá thơm Oriental, thuốc lá Burley, Riogrand v.v ) chiếm tỷ trọng trên 60% tổng số nguyên liệu thuốc lá sản xuất hàng năm trên thế giới

Trong thế kỷ 20, thuốc lá đã trở thành một trong những cây công nghiệp có ý nghĩa nhất trên thế giới; một trong số rất ít cây trồng không phải

là lương thực, thực phẩm nhưng lại được trồng rộng rãi nhất thế giới

Theo Lê Đình Thụy và CTV (1996) [17], cùng với sự phát triển thuốc lá

trên thế giới, năm 1935 người Pháp đã giống thuốc lá vàng sấy (Virginia) vào trồng ở miền Đông Nam bộ, sau đó phát triển ra các tỉnh miền Bắc nước ta Trước những năm 1980, thuốc lá vàng sấy ở miền Bắc là các giống thuốc lá Cao Bằng, Ba Vì, Đại Kim Tinh, Bắc Lưu, Trung Hoa Bài và các giống nhập nội từ Bungari như 4241, Vir.131 ở miền Nam, các giống thuốc lá nâu phơi

là chủ yếu như giống Ri xanh, Ri trắng, Ri quăn, Ri mốc (nguồn gốc là Riogrand)

Nhìn chung, việc trồng thuốc lá ở nước ta có tốc độ phát triển chậm, năng suất thấp, chất lượng kém, không đáp ứng được nhu cầu tiêu thụ trong nước (Tổng Công ty Thuốc lá Việt Nam, 2001 [20]) Mặc dù một số vùng trồng thuốc lá đã được hình thành như vùng núi ở tỉnh Cao Bằng, Lạng Sơn, vùng trung du như ở tỉnh Bắc Giang, Thái Nguyên, Hà Tây, Ninh Bình, Thanh Hoá, Vĩnh Phúc, Phú Thọ, song hàng năm chúng ta vẫn phải nhập khoảng

7000 tấn nguyên liệu thuốc lá / năm từ Trung Quốc, Triều Tiên, Zimbabwe,

Mỹ và một số nước khác

Để giải quyết những khó khăn về nguyên liệu cho nhà máy, Tổng Công

ty Thuốc lá Việt Nam chú trọng giải quyết bằng phương án nhập nội giống,

đầu tư cơ sở vật chất, phát triển vùng nguyên liệu như: giống, phân bón, kỹ thuật, lò sấy, trực tiếp thu mua sản phẩm cho nông dân Kết quả của chủ trương này đã góp phần đáp ứng một lượng đáng kể nguyên liệu cho các nhà máy sản xuất thuốc lá điếu và giảm lượng thuốc phải nhập khẩu Hiện nay ngành thuốc lá nước ta đã xuất khẩu được một lượng khá lớn: năm 1998 xuất khẩu 873,97 tấn, thu được 1,47 triệu USD; năm 1999 xuất khẩu 1135 tấn, thu 1,882 triệu USD và năm 2000 xuất khẩu 2840 tấn, giá trị thu tới 6.0 triệu USD

Để đạt được mục tiêu về kế hoạch từ 2000 - 2010 về chất lượng, năng suất trong điều kiện khí hậu, đất đai của Việt Nam (năng suất đạt 2 - 2,5 tấn/

ha, sản lượng đạt 59 000 tấn năm 2005, xuất khẩu 13 000 - 14000 tấn, kim

ngạch xuất khẩu đạt 33 triệu USD, chất lượng nguyên liệu đạt từ 50 - 70% lá loại 1 + 2), chúng ta phải tập trung giải quyết hàng loạt vấn đề như giống, thời

vụ, vùng trồng thuốc lá, kỹ thuật thâm canh, kỹ thuật sơ chế và bảo vệ thực vật

là một yêu cầu cấp bách của sản xuất

2.2 Một số kết quả nghiên cứu về bệnh nấm hại thuốc lá

ở ngoài nước

Bệnh hại thuốc lá là mối đe dọa thường xuyên trong sản xuất với mức

độ gây hại biến động từ nhẹ đến mất trắng Trong các loại bệnh, đáng chú ý nhất là nhóm các bệnh nấm gây hại Chúng có thể gây hại cho cây con thuốc lá từ giai đoạn vườn ươm, giai đoạn trồng sản xuất đến giai đoạn bảo quản sản phẩm ở các bộ phận khác nhau của cây như rễ, thân, lá, hoa, quả, (Dlayten Davis et al (1999) [31]

Theo Lucas (1994) [41], có tới 30 loại bệnh gây hại thuốc lá Trong đó

một số bệnh gây hại nghiêm trọng như bệnh đen thân (Phytophthora

nicotianae), bệnh thán thư (Collectotrichum nicotianae), bệnh đốm mắt cua

(Cercospora nicotianae), bệnh đốm nâu (Alternaria alternata), bệnh phấn trắng (Erysiphe cichoracearum),

Theo Lucas (1975) [39], bệnh thuốc lá rất đa dạng Trên cây con cũng

có nhiều loại bệnh gây hại như bệnh chết rạp, bệnh thán thư, bệnh mốc xanh

(Peronospora tabacina), bệnh tàn lụi cây con (Olpidium brassicae), ,

Bệnh hại rễ, thân như bệnh đen thân, bệnh thối đen rễ (Thielaviopsis

basicola), bệnh lở cổ rễ (Rhizoctonia solani), bệnh thối gốc (Sclerotinia sclerotiorum)

Bệnh hại lá trong giai đoạn trồng sản xuất như bệnh đốm mắt cua, bệnh

đốm nâu, bệnh phấn trắng, bệnh thối xám (Botrytis cinerea)

Cũng theo Lucas (1994) [41] một số bệnh hại rễ, thân, lá ở vườn ươm

và ruộng trồng ngoài sản xuất vẫn có thể tiếp tục gây hại trong quá trình bảo

quản như nấm: Botrytis cinerea, Sclerotinia sclerotiorum, Pythium spp,

Alternaria alternata Ngoài các bệnh gây hại trên đồng ruộng tồn tại theo sản

phẩm thuốc lá vào trong kho bảo quản ra còn có các một số bệnh gây hại

trong bảo quản thuốc lá như nấm Aspergillus sp., Penicillium sp., Alternaria

sp., Cladosporium sp và nấm Chaetomium sp Các nấm gây hại trong bảo

quản đều chịu được nhiệt độ cao và ẩm độ thấp

2.2.1 Một số nghiên cứu cơ bản về bệnh nấm hại chính giai đoạn vườn ươm

2.2.1.1 Bệnh chết rạp (Pythium spp.)

Bệnh chết rạp được Raciborki (1896) công bố lần đầu tiên tại Java và bảy năm sau Clinton (1903) ở Conn đã mô tả bệnh gây hại trên các cây trồng trong nhà kính, bệnh gây hại lớn trên vườn ươm Năm 1973, Sheidow cho rằng bệnh chết rạp là bệnh phổ biến (Đào Đình Thức dẫn theo, 2001 [18])

Nấm Pythium spp có phổ ký chủ rộng Theo Middleton cho rằng loài

nấm P ultimum gây hại hơn 90 loài cây; loài P debaryanum 139 loài cây và nấm P aphanidermatum gây hại 50 loài cây (dẫn theo Nguyễn Văn Biếu và CTV,1996) [1], Mc.Carter et al (1970) [44] công bố rằng loài P myriotylum

là một loài nấm đất rất phổ biến ở Đông Nam nước Mỹ Nhưng khả năng gây hại không đồng đều ở các mẫu thu thập ở các vùng khác nhau Các loài nấm

Pythium spp gây bệnh chết rạp và thối thân cây thuốc lá chủ yếu là do các

loài P aphanidermatum, P ultimum và P debaryanum

∗ Về hình thái nấm: Lucas (1975) [39] cho biết loài nấm P

aphanidermatum có sợi dẹt Bọc bào tử động (zoosporangium), hình ống phân

nhánh hoặc không phân nhánh, nảy mầm tạo bào tử động (zoospore) Bào tử

động kích thước trung bình từ 7,5 - 12àm Mỗi bọc bào tử động có thể có trên

100 bào tử Lông roi bào tử dộng của nấm Pythium spp Tương tự như lông roi bào tử động của nấm Phytophthora spp Bao đực hình mái vòm, hình thành ở

đầu hoặc ở giữa sợi nấm, kích thước trung bình từ 9 - 11 ì 11 - 15àm; có thể

hình thành bất kỳ dọc theo cuống bao trứng hoặc có thể sinh ra trên sợi nấm khác Một trong 2 bao đực áp vào bao trứng mọc ở đầu cuống Bao trứng hình cầu (kích thước trung bình từ 22 - 27àm), tạo ra một bào tử trứng (kích thước trung bình từ 17 - 19àm), chứa một không bào trung tâm, trong đó chứa nhiều chất dự trữ Bào tử trứng nảy mầm tạo ống mầm

Loài P debaryanum có bọc bào tử động hình cầu hoặc hình ô van, mọc

ở đầu hoặc giữa sợi nấm, kích thước từ 15 - 26àm, nảy mầm tạo ra ống mầm hoặc bào tử động Bao trứng hình cầu, nhẵn, mọc ở giữa hoặc ở đầu sợi nấm, kích thước 15 - 28àm Bao đực có thể sinh ra từ cuống bao trứng hoặc trên sợi nấm Khi giao phối có từ 1 - 6 bao đực trên một bao trứng Bào tử trứng nhẵn, hình cầu, kích thước từ 12 - 20àm, nảy mầm ở nhiệt độ thấp tạo ra ống mầm, rồi tạo bọc bào tử động và bào tử động

Loài P ultimum giống với loài P debaryanum Tuy nhiên bao đực của loài P.ultimum phồng lên sinh ra cạnh bao trứng (kích thước trung bình

20,6àm) và cong mạnh lên, thường chỉ có 1 bao đực/1bao trứng Sau giao phối tạo bào tử trứng có kích thước trung bình là 17àm

Ngoài việc tạo ra bào tử trứng, bọc bào tử động và bào tử động, các loài

nấm thuộc họ Pythiaceae còn tạo hậu bào tử trên các sợi nấm

Theo Mc Carter et al (1970) [44] độc tính của các mẫu phân lập các

loài nấm P aphanidermatum và loài P myriotylum rất khác nhau Theo Howker (Delon et al dẫn theo, 1987 [29]) vách tế bào của loài Pythium sp

cấu tạo bằng cellulose, tế bào chất chứa các thể golgi và mitochondria hình trứng, có nhân không đều về hình dạng và kích thước với nhiều lỗ ở màng nhân Không bào chỉ có trên sợi nấm già

Theo Lucas (1975) [39], các loài Pythium sp thích hợp ở các nhiệt độ khác nhau Loài P aphanidermatum cần nhiệt độ để sợi nấm phát triển, bọc

bào tử động nảy mầm là 12 - 15 oC; một số mẫu phân lập khác, nấm này có thể

sinh trưởng ở nhiệt độ đến 46oC Trái lại, với loài P ultimum thì khoảng nhiệt

độ thích hợp cho sự sinh trưởng của sợi nấm giao động từ 4 - 28 - 390C; cho bọc bào tử động nảy mầm là 20oC Một số mẫu nấm phân lập khác lại có thể sinh trưởng ở nhiệt độ 10oC Các loài và chủng của nấm Pythium sp có phản ứng khác nhau với độ pH của môi trường Một số chủng của loài Pythium sp

sinh trưởng tốt ở biên độ pH rộng

Nấm Pythium sp có thể là nấm duy nhất có khả năng tổng hợp sterol và

cần sterol để sinh sản hữu tính, hình thành bọc bào tử động Sterol có tác dụng kích thích nấm sinh trưởng, tăng khả năng chống chịu với nhiệt độ cao, tạo các enzym phân huỷ pectin Thành phần enzym có tác dụng gây thối cây phụ thuộc vào loài và môi trường dinh dưỡng Một số enzym phân giải cellulose cũng có thể được tạo ra

∗ Quan hệ ký sinh ký chủ

Các loài nấm Pythium sp Thường có tính kí sinh yếu; có khả năng xâm

nhập qua vách mỏng của mô non Nấm sử dụng enzym để phân huỷ pectin Trên tế bào cây thành thục, vách tế bào dày, nấm thường xâm nhập qua vết thương hoặc qua các lỗ hở tự nhiên vào trong tế bào và gian bào, gây hại trong vài ngày Vết bệnh sẽ úng nước, các liên kết bị thối ướt do hoạt động của

enzym phân huỷ pectin và cellulose Nấm Pythium sp tồn tại trong đất ở dạng

hoại sinh hoặc kí sinh yếu trên rễ có chất hữu cơ đang phân huỷ Nấm không tạo ra bọc bào tử động Bào tử trứng ngủ nghỉ trong đất có độ pH thấp Các chất tiết ra từ rễ cây kích thích bào tử trứng và bọc bào tử động nảy mầm tạo

ra ống mầm Theo Stangheltini et al (1971) [60], bào tử trứng hình thành trong mô kí chủ bị thối rữa và giải phóng bào tử trứng trong đất Bệnh chết rạp cây con thuốc lá phụ thuộc vào nhiều yếu tố môi trường để phát bệnh như nguồn bệnh, nhiệt độ, độ ẩm, bản chất các chất tiết ra từ rễ, phản ứng của đất,

hệ vi sinh vật đất, sự có mặt các chất dinh dưỡng trong đất

∗ ảnh hưởng của nhiệt độ và ẩm độ tới bệnh:

Bệnh chết rạp có thể xuất hiện ở bất kỳ nhiệt độ nào thích hợp cho cây sinh trưởng Nhưng bệnh thường phát sinh nặng ở dưới nhiệt độ tối thích của cây Cây thuốc lá sinh trưởng ở nhiệt độ 26 - 30 oC, vì thế bệnh thường phát sinh phát triển mạnh khi nhiệt độ dưới 24 oC trong nhiều ngày Ruộng không thông thoáng (trồng dày), ẩm độ đất cao, bệnh thường phát triển mạnh Độ ẩm

đất là một trong những yếu tố quan trọng nhất ảnh hưởng đến sự phát triển bệnh Độ ẩm đất tạo điều kiện thích hợp (giảm O2) để các chất tiết ra từ rễ và

hạt khuyếch tán, giúp nấm tấn công và phát triển mạnh hơn Loài Pythium sp

gây thiệt hại nhẹ khi đất có độ pH dưới 5; bệnh nặng khi pH đất từ 5,2 - 8,5 Theo Beach, (1949) [24] ở đất dư thừa các chất hoà tan sẽ làm tăng tỷ lệ bệnh

Điều đó giải thích nguyên nhân bệnh thường nặng ở các vườn ươm bón quá nhiều đạm và các phân bón hữu cơ giàu đạm

2.2.1.2 Bệnh lở cổ rễ (Rhizoctonia solani Kuhn)

Theo Lucas (1975) [39], Rhizoctonia solani là loại nấm phổ biến trên

thế giới, gây hại cho nhiều loài thực vật Nấm được mô tả lần đầu ở Đức khi bệnh gây hại trên khoai tây và trên vườn ươm thuốc lá ở Mỹ năm 1904

Nấm Rhizoctonia solani có phổ kí chủ rộng, có thể gây hại trên 230 loài

cây trồng thuộc 66 họ thực vật Theo Lucas (1975) [39], Dlayten Davis et al (1999) [31], trên vườn ươm thuốc lá bệnh gây thiệt hại từ 0,5 - 1%, làm thiếu cây giống; cây bệnh sinh trưởng yếu

∗ Phân loại và hình thái của nấm Rhizoctonia solani

Bệnh Rhizoctonia solani, giai đoạn sinh sản hữu tính có nhiều tên như

Hypochnus cucumeris Frank, Hypochnus solani Prilliex và Delacroix, Corticium solani (Prill and Delaer) Hội thảo về loài Rhizoctonia solani sp tổ

chức ở Mỹ năm 1965 đề nghị tên gọi của giai đoạn sinh sản hữu tính của nấm

này là: Thanatephorus cucumeris (Frank) Donk

Theo Parmeter et al (1970) [51] cho rằng loài R solani có các đặc điểm

sinh học sau: Tế bào nhiều nhân trong sợi sinh dưỡng non, có lỗ vách ngăn, phân nhánh gần vách ngăn (xa trên sợi nấm non), thắt lại ở gốc nhánh, hình thành một vách ngăn trên sợi nhánh gần gốc nhánh, tạo sắc tố nâu

Theo Flentje et al (1963) [33], tế bào nấm có nhiều nhân (4 - 14 nhân)

Tế bào ở tầng sinh đảm có 2 nhân Có 6 nhiễm sắc thể đơn bội Bào tử đảm thường có một nhân Bào tử đảm nảy mầm thành ống mầm, phát triển thành một sợi đơn bào, rồi phân chia để tạo sợi nấm đa bào nhiều nhân

Theo Lucas (1975) [39] các siêu cấu trúc của loài nấm này gồm: lỗ vách ngăn, nhân, mitochondria, không bào, lưới nội chất, ribosom, thể vùi, lipid, hạt glycogen, vi ống dày từ 6 - 10àm Mitochondria đa dạng hình (hình gậy tưới hình xoắn ốc) có 2 màng, màng trong gồm các nếp gấp cài răng lược, màng nhân có các lỗ không đều nối với nội chất

∗ Sinh lý bệnh

Các chủng của loài Rhizoctonia solani phát triển ở các ngưỡng nhiệt độ

khác nhau Theo Sherwood (Đào Đình Thức dẫn theo, 2001)[18], các mẫu nấm trên thuốc lá có nhiệt độ tối thích là 28oC, trong khi đó chủng hại khoai tây có nhiệt độ tối thích là 24oC Không chủng nấm nào của loài nấm này sinh trưởng thuận lợi trong điều kiện nhiệt độ dưới 5oC hoặc trên 35oC Hạch nấm nảy mầm trong khoảng nhiệt độ từ 8oC - 35oC, thích hợp nhất là 23oC - 25oC;

nhưng có thể khác nhau tuỳ theo chủng của loài nấm Rhizoctonia solani

ảnh hưởng của pH: các chủng của loài nấm Rhizoctonia solani có phản ứng với pH khác nhau, nấm không sinh trưởng ở pH < 3,8, pH tối thích từ 4,5

- 7,0 Có một số chủng sinh trưởng tốt ở biên độ pH rộng ánh sáng có thể giúp tạo hoặc ức chế các chất peroxide trong môi trường và các phenol ức chế

sinh trưởng một số mẫu nấm của loài Rhizoctonia solani Nồng độ các chất

thẩm thấu cao (>3%) ức chế sinh trưởng của nấm (khi bổ sung NaCl hoặc sucrose) Tính chịu CO2 của các mẫu phân lập của loài nấm Rhizoctonia solani

cũng khác nhau Nấm có tế bào chất mang tính khử mạnh, có hệ thống duy trì năng lượng Điều đó có thể giải thích nấm vừa có thể gây hại trên nhiều loại

cây trồng, vừa duy trì khả năng hoại sinh trong đất Hạch nấm của Rhizoctonia

solani đôi khi hình thành trong quá trình nuôi cấy và trên mô cây đang thối,

nhưng dễ bị ức chế bởi tác động đối kháng vi khuẩn Bacillus subtilis ở trong

đất (Lucas et al., 1991) [40] Hạch thường được hình thành trên bề mặt ký chủ

và giới hạn ở các mô trong quá trình gây bệnh ở ẩm độ, nhiệt độ thích hợp, hạch nấm nảy mầm, hình thành sợi sinh trưởng Độ thành thục hay ngủ nghỉ của hạch không ảnh hưởng tới sự nảy mầm Khi môi trường thay đổi, thì hạch nấm có thể nảy mầm nhiều lần Hạch nấm nảy mầm kém tốt ở độ ẩm trên 90% Nhiệt độ thích hợp để hạch nấm nảy mầm từ 10 - 36oC Các chất tiết ra

từ rễ, từ hạt cũng kích thích hạch nấm nảy mầm Hàm lượng CO2 cao thường

ức chế hạch nấm nảy mầm Khả năng chống chịu điều kiện ngoại cảnh phụ

thuộc vào từng chủng của loài nấm Rhizoctonia solani

Theo Parmeter (1970) [51] nấm có thể hình thành bào tử đảm trong nuôi cấy, khi chuyển nấm từ môi trường giàu dinh dưỡng sang môi trường nghèo dinh dưỡng Nấm sinh sản hữu tính ở ẩm độ 65% (sinh sản kém ở ẩm

độ trên 90% hoặc dưới 30%) ở độ pH từ 4,0 - 7,6 và nhiệt độ từ 20 - 30oC thì nấm có thể hình thành đảm Bào tử đảm và sự phát tán bào tử theo chu kỳ sáng

và tối Theo Flentje (1963) [33] độ ẩm đất và chất dinh dưỡng ảnh hưởng tới

sự hình thành đảm; còn nhiệt độ và ánh sáng lại không ảnh hưởng

∗ Quá trình xâm nhập vào cây kí chủ của loài Rhizoctonia solani

Các chất tiết ra từ cây con nảy mầm và rễ kích thích sự sinh trưởng của

nấm Rhizoctonia solani.Các chất này có thể là cacbonhydrat và amino acide

Chúng kích thích nấm sinh trưởng từ rễ, kích thích hạch, bào tử đảm nảy mầm Nấm xâm nhập trực tiếp vào mô, làm mất màu và chết mô rễ Tiếp đó, nấm xâm nhập qua các mô chết, qua các vết thương và lỗ hở tự nhiên

∗ Sự phát triển và truyền lan của bệnh

Parmeter (1970) [51] cho rằng: nấm R solani là loài có tốc độ sinh

trưởng sợi nhanh Khi hoại sinh, nấm có thể sử dụng nhiều chất dinh dưỡng, vì thế nó có thể sống tồn tại trên tàn dư thực vật trong thời gian khá dài Nấm tồn tại trong đất ở dạng hạch nấm, sợi nấm, bào tử đảm ở rễ cây dại hoặc các cây trồng trong hệ thống luân canh nhiều năm Cây con cũng mang nguồn bệnh từ vườn ươm ra ruộng sản xuất Khi trời lạnh, ẩm, bệnh phát triển mạnh Trong

điều kiện ngoại cảnh thích hợp, nấm có thể hình thành hạch Hạch là nguồn bệnh quan trọng có thể phát tán nhờ củ giống, hạt giống, rễ Nước tưới tiêu cũng là con đường giúp bệnh truyền lan Trong lây nhiễm, triệu chứng bệnh sẽ xuất hiện sau 5 - 10 ngày trên cây đang sinh trưởng; còn ở cây con, triệu

chứng bệnh biểu hiện sau 2 - 3 ngày Sự tồn tại của hạch nấm R solani có thể

giữ sức sống đến 6 năm và hạch nấm trong nước vô trùng ở các nhiệt độ khác nhau có thể tồn tại 2 năm Thời gian sống của hạch nấm giảm dần khi nhiệt độ

và ẩm độ cao

Theo Papavizas et al (1966) [50] bào tử đảm sẽ mất sức sống trong 6 tuần ở điều kiện khô hạn Nấm nuôi cấy trên môi trường PDA có thể sống

được 9 năm khi phủ dầu khoáng, ở nhiệt độ phòng Trái với loài Pythium sp

đất ẩm ướt, loài nấm R solania ưa ẩm độ trung bình và có thể tồn tại trên đất cát khô Bệnh do R solani phát sinh phát triển trong khoảng nhiệt độ rộng

Bệnh gây hại nặng ở giai đoạn vườn ươm, khi nhiệt độ khoảng 20oC hoặc thấp hơn (Lucas, 1975 [39]), Dleyton Davis et al., 1999 [31])

2.2.1.3 Bệnh thán thư (Collectotrichum nicotianae (Averna) Sacc.)

Bệnh thán thư là bênh gây hại chủ yếu ở vườn ươm ở giai đoạn trồng sản xuất, thuốc lá tuy có nhiễm, nhưng bị hại nhẹ hơn

Bệnh thán thư được phát hiện đầu tiên ở Braxin vào năm 1922 do Averna; sau đó vài năm, Boning đã mô tả bệnh ở Đức và cùng thời gian đó

bệnh cũng được công bố ở Nhật (Lucas ,1975 [39]) Theo Nakamara H (1948) [46] bệnh cũng được công bố ở Mỹ vào năm 1935 Bệnh cũng xuất hiện ở úc, Formosa, ấn Độ, Triều Tiên, Nyasaland, Rhodesia và Tanganyika Bệnh thán thư được coi là bệnh quan trọng nhất ở giai đoạn vườn ươm Theo Mc Grew,

khi cho nhiễm 42 loài Nicotianae và 14 giống thương mại bằng nấm thán thư, tất cả các giống đều mẫn cảm đối với bệnh Sierert đã thử 60 loài Nicotianae,

14 tổ hợp lai khác loài và khoảng 1000 dòng Nicotianae tabacum đều thấy mẫn cảm với nấm Collectotrichum nicotianae

∗ Phân loại và hình thái

Theo Lucas (1975) [39] nấm Collectotrichum nicotianae, họ

Melanconiaceae, bộ Melanconiales, đặt tên nấm là C nicotianae Còn Boning

cho là nấm là C tabacum và Gloeosporium nicotianae giống nhau

Theo Tiffany et al (1954) [62] loài Collectotrichum sp gồm nhiều chủng Sự khác nhau duy nhất giữa loài Collectotrichum sp và loài

Gloeosporium nicotianae là sự có hay không có lông gai trên đĩa cành

(acervulus), tuy sự hình thành lông gai cũng không chắc chắn

Sợi nấm Collectotrichum sp đa bào, phân nhánh, lúc đầu trong suốt sau

có màu tối Trên cây kí chủ, bào tử phân sinh hình thành trên đĩa cành Đĩa cành hình thành từ một khối sợi nấm, dạng thể đệm ngay dưới biểu bì Sợi nấm phát triển làm vỡ biểu bì và bào tử phân sinh được hình thành trên cành bào tử phân sinh ngắn Trên môi trường nhân tạo, nấm hình thành nhiều khối bào tử màu hồng với lông gai màu đen (kích thước trung bình từ 2 - 6 ì 75 - 100àm) Bào tử phân sinh đơn bào, trong, hình thon dài, kích thước là 10 - 20

ì 4 - 5àm và có thể có không bào xuất hiện thường ở tâm bào tử

∗ Quá trình xâm nhập vào cây ký chủ

Theo Takimoto và Gronin (Lucas dẫn theo, 1975 [39]) bào tử hình thành vòi áp và xâm nhập qua bề mặt lá Không thấy nấm xâm nhập qua khí

khổng hoặc qua vết thương Sau khi xâm nhập, nấm hình thành sợi sơ cấp, gồm các tế bào phình lớn Các tế bào bên cạnh bị nấm xâm nhập bằng các sợi nấm nhỏ hơn, hình thành từ sợi sơ cấp Trong điều kiện nhiệt và ẩm độ thích hợp, triệu chứng bệnh biểu hiện sau 4 - 5 ngày Theo Wolf và Flower (Lucas dẫn theo, 1975 [39]) cho thấy khi cấy nấm trong 2 - 5 tuần trên 4 môi trường nhân tạo lỏng, thì thấy có 2 loại độc tố đã hình thành trong môi trường Một loại gây héo và một loại gây triệu chứng chết hoại

∗ Sinh lý nấm

Theo nhiều kết quả nghiên cứu về sinh lý của nấm được thực hiện ở Triều Tiên và Nhật Bản những thông tin rất khác nhau Nhiệt độ tối thích cho nấm sinh trưởng là 25 - 31oC (Matsumoto,1946 [43]); Tiffany et al (1954) [62]; 20 - 30oC, nhiệt độ tối thiểu là 5oC và tối đa là 35oC Theo Riley (1955) [54]; Debagh (1954) [28] nấm sinh trưởng tốt trên nhiều loại môi trường có các muối vô cơ chứa N và gluco Theo Lucas (1975) [39] thì pH tối thiểu để nấm sinh trưởng là 5 - 8,5, ánh sáng trắng kích thích nấm hình thành bào tử

∗ Sự phát triển và lan truyền của bệnh

nấm có thể qua đông trên nhiều cây kí chủ, trên tàn dư cây bệnh và trong đất Cole (1959) [25] thấy nấm gây bệnh có thể tồn tại 13 - 17 tuần trong điều kiện đất khô, nhưng không tồn tại trong đất ướt Vanwyck (1963) [66] cho rằng nguồn bệnh cũng tồn tại trên hạt Bệnh lan truyền từ vườn ươm

ra ruộng trồng sản xuất qua cây giống nhiễm bệnh ở ruộng trồng, nấm lan truyền bằng bào tử nhờ gió, mưa Bệnh phát triển trong phạm vi nhiệt độ tương

đối rộng Riley (1983) (Lucas dẫn theo,1994) [41], ẩm độ là yếu tố quan trọng nhất để bệnh phát triển Trong thí nghiệm nhà kính, nhiệt độ tối thích để nấm sinh trưởng là 18 - 22oC Bệnh phát triển cần ẩm độ cao sau khi nhiễm ít nhất

là 22 giờ ở vườn ươm, trong điều kiện nhiệt độ thấp, ánh sáng yếu, ẩm độ cao, bệnh phát triển mạnh Bệnh gây hại nặng trên đất thoát nước kém và

thường xuất hiện trên chân đất có độ pH cao

2.2.2 Một số bệnh nấm chính hại thuốc lá ở ruông sản xuất

2.2.2.1 Bệnh đốm nâu (Alternaria alternata (Fr) Keissler)

Bệnh được ghi nhận đầu tiên ở Bắc Califonia (Mỹ) vào năm 1892 Theo Lucas (1975) [39], bệnh đốm nâu gây thiệt hại trực tiếp đến thuốc lá do tạo ra các vết đốm trên lá Bệnh làm giảm chất lượng lá do làm biến đổi thành phần hoá học của lá (tỷ lệ đường/ nitơ tăng lên khi chỉ số bệnh tăng) Theo Hopkins (1956) [37] bệnh đốm nâu là bệnh quan trọng ở Rhodesia từ năm 1931, sau đó bệnh trở nên nghiêm trọng và phân bố rộng ở Trung Phi, Colombia, Achentina, Venezuela; bệnh cũng có mặt ở Nhật Bản, úc, Canada và một số nước châu âu Bệnh dường như nặng hơn ở những vùng ấm, ẩm Năm 1956 thiệt hại do bệnh gây ra ước tính vào khoảng 10 triệu USD ở Bắc Califonia (Mỹ) Từ năm 1963, thiệt hại hàng năm do bệnh gây ra vào khoảng 0,5% tổng sản lượng thuốc lá ở Mỹ (Collins,1973 [26] )

Nấm gây bệnh trên nhiều loài và nhiều chủng khác nhau, trên các ký chủ khác nhau Neergaard (1945) [47] đã phát hiện 40 loài cây ký chủ của nấm Fukuda (1968) [46] đã lây nhiễm thành công trên 56 loài cây trồng thuộc 19 họ thực vật

∗ Hình thái nấm

Bệnh đốm nâu do nấm Alternaria alternata thuộc họ Dematiaceae, bộ

Moniliales, lớp nấm bất toàn Deuteromycetes

Theo Simmon, nấm A alternata có bào tử phân sinh và cành bào tử

phân sinh màu nâu vàng Bào tử phân sinh hình thành trên cành bào tử phân sinh, một cuống ngắn, mọc đơn, thẳng hoặc hơi cong, nhẵn, có từ 1 - 3 vách ngăn ngang, kích thước trung bình là 20 - 46 ì 4,6àm; tế bào gốc đôi khi hơi phồng lên Bào tử phân sinh có nhiều hình dạng: hình trứng, hình chuỳ, hình quả lê thon đầu hoặc hình bầu dục Bào tử phân sinh có một lỗ ở gốc, không

có mỏ khi chúng hình elíp, hoặc có mở ngắn, thon nhọn hoặc hình trụ, có kích thước trung bình là 2 - 3àm, mỏ có thể dài 2,5àm, thường chiều rộng bằng 1/4

- 1/3 chiều dài của bào tử Mỏ bào tử có màu nhạt hơn thân của bào tử phân sinh Thân bào tử phân sinh có kích thước trung bình là 30,9 ì 12,6àm, có 3 -

8 vách ngăn ngang và có 1 - 2 vách ngăn dọc, vách tế bào nhăn hơi gợn nhẹ

Theo Neergaard (1945) [47], sự biến động mạnh về hình dáng, kích thước và vách ngăn của bào tử phân sinh là những khó khăn trong giám định loài Nhiều nhà nghiên cứu khác cũng cho thấy môi trường sống có ảnh hưởng

đến hình thái

∗ Sinh lý nấm

Theo Stavery et al (1970) [64] nhiệt độ tối thích để nấm sinh trưởng là

25 - 30oC, tối thiểu là 5oC và tối đa là 38oC Trên môi trường nhân tạo PDA, nấm hình thành bào tử sau 48 giờ nuôi cấy Theo Norse (1973) (Lucas dẫn theo, 1991) [40], cho biết có đến 94 - 99% bào tử nảy mầm sau 48 giờ nuôi cấy Bào tử phân sinh và sợi nấm giữ được sức sống sau 4 tháng trong đá lạnh hoặc làm khô ở - 10oC và chịu được nhiệt độ 46oC trong 2 ngày Fukuda (1970) (Lucas dẫn theo, 1975) [39], thấy hầu hết bào tử phân sinh chỉ sống

được 5 phút ở nhiệt độ 53oC trong điều kiện khô ẩm ở nhiệt độ 125oC và khô thời gian sống của bào tử phân sinh còn ngắn hơn

ảnh hưởng của pH: Theo Wills (1969) [68], nấm A alternata sinh trưởng tốt trên môi trường PDA với biên độ pH rộng (pH tối thích là 5,5; tối

thiểu là 3,0 và tối đa là 10,2) Sự sinh trưởng và sinh bào tử của nấm A

alternata thay đổi mạnh theo cơ chất Trên môi trường PDA sẽ tăng cường sự

sinh bào tử, còn môi trường Czapek và CMA thì nấm khó sinh bào tử Bào tử phân sinh, cành bào tử phân sinh và sợi nấm già trên môi trường có màu xanh

ô liu tối về sau hoá thành đen Trong môi trường không thích hợp, nấm có thể

tạo nhiều sợi ký sinh Loài A alternata là loài sinh vật cạnh tranh yếu Trên

môi trường, nấm A alternata thường bị các vi sinh vật khác sinh trưởng lấn át

và giết chết Bào tử và sợi nấm bị phân huỷ sau 36 - 48 giờ Tuy bào tử tồn tại trong mô cây đang phân huỷ nhanh rất kém, nhưng thân thuốc lá chứa lignin thường bị phân huỷ chậm, nên nấm có thể tồn tại được ánh sáng cực tím, thiếu nguồn cacbon, sợi nấm dễ bị tổn thương ẩm độ là yếu tố kích thích nấm hình thành cành bào tử phân sinh

Theo Lucas (1975) [39], sự sinh sản của bào tử phụ thuộc vào các mẫu nấm phân lập, ẩm độ, nhiệt độ (tạo ít bào tử ở nhiệt độ dưới 160C hoặc trên

32oC) và ánh sáng (là yếu tố quan trọng nhất Nấm không sinh bào tử trong

điều kiện tối liên tục Fukuda (1968) [34] thấy chất lượng ánh sáng ảnh hưởng tưới hình thành bào tử Bước sóng từ 362 - 380nm làm tăng khả năng hình thành bào tử

Theo Verma (1963) [67]; Panadey (1966) [48]; Lucas (1975) [39], nấm

A alternata có hệ enzym rất phong phú, nên có thể hình thành bào tử trên

nhiều loại môi trường khác nhau Nấm A alternata tạo ra nhiều chất chuyển

hoá gây độc như các chất dibenzo - pyron Một số chất có thể gây độc cho nhiều nấm, vi khuẩn, virus, thực vật bậc cao và động vật máu nóng Acid temazonic là một chất độc hình thành cả trong lá thuốc lá và trên môi trường nuôi cấy, đã gây ra quầng vàng của vết bệnh trên lá thuốc lá Mikami et al (1972) [45]

∗ Quan hệ ký chủ

Khi nảy mầm, bào tử phân sinh cần có giọt nước và có thể nảy mầm ngay trên bề mặt lá Khi nảy mầm trong nước, nấm có xu hướng tạo nhiều sợi nấm, nhưng không xâm nhập được vào mô lá Làm khô giọt nước chứa bào tử,

sẽ kích thích nấm xâm nhập Nhiều nghiên cứu đều thống nhất: bào tử phải bị khô trên bề mặt lá trước khi nảy mầm và sau đó bị làm ướt lại thì mới dễ xâm nhiễm Bào tử nảy mầm thường tạo ống mầm Chỉ những sợi sinh trưởng mạnh với kích thước 3 - 5àm, mới có khả năng xâm nhập Nấm có thể xâm nhập

trực tiếp qua khí khổng (mang tính cơ hội) Các vị trí thích hợp cho nấm xâm nhập là tế bào gốc lông lá, mép lá, các tổn thương do côn trùng Dường như ở

đầu vụ, nấm chỉ có thể xâm nhập vào những bộ phận suy yếu trên lá Về sau, khi cây bắt đầu ra hoa, bào tử nảy mầm tạo ra những sợi nấm ngắn (kích thước trung bình là 5 - 20àm), có vòi áp ở đầu và có thể xâm nhập vào bất kỳ vị trí nào trên lá hoặc cây

Theo Lucas (1975) [39] cho biết vết bệnh đốm nâu trên giống mẫn cảm gồm 3 phần: tâm chết hoại có nấm xâm nhập, một quầng biến màu hoặc màu vàng sáng không có nấm xâm nhập và ngoài cùng là một quầng viền Sự hình thành quầng là phản ứng của ký chủ với các chất chuyển hoá do nấm tiết ra

∗ Chu kỳ bệnh

Nấm qua đông ở dạng sợi trong tàn dư cây bệnh Sự hình thành bào tử phân sinh của nấm diễn ra vào mùa xuân, khi điều kiện thời tiết thuận lợi Theo Ramm (1963) [55], sự xâm nhiễm lần đầu xuất hiện trên các lá ở vị trí thấp nhất Sự tái xâm nhiễm do bào tử mới sinh được lan truyền nhờ gió và nước Sau nhiều chu kỳ xâm nhiễm, nấm có thể tấn công cây khoẻ vào bất kỳ giai đoạn nào kể cả lá non, chồi bên, lá thành thục, quả và thân Khi trời ấm lâu, nấm hình thành nhiều vết bệnh (thậm chí trên 200 vết/ lá) Bào tử hình thành trên vết bệnh, rất thuận lợi để bệnh có thể phát triển thành dịch

Theo Lucas (1975) [39] sau khi cây chết, nấm có thể tồn tại trên tàn dư cây ở dạng sợi trong nhiều tháng Gió là tác nhân chính giúp cho bào tử lan truyền bệnh với khoảng cách xa Bào tử nấm cũng có thể lan truyền nhờ nước mưa Nhiệt độ tối thích cho bệnh phát triển là 26,5 - 31oC Có nhiều thông tin khác nhau về nhiệt độ tối thích của của nấm: 30oC (Tisdale et al, 1963 [63]); thì nhiệt độ tối thích là; 25oC (Riley, 1949) [53]; 22oC (Ramm et al., 1963) [55] và 28oC (Stavely et al.,1970 [59]) Nhiệt độ tối thích để ống mầm phát triển trên lá là 22,5oC ở nhiệt độ này tốc độ phát triển của ống mầm tăng gấp

2 lần ở 20oC và gấp 3 lần ở nhiệt độ 15oC Ramm (1963) [55] cho rằng bệnh

nặng trong thời gian trời ẩm ớt ẩm độ là yếu tố quan trọng nhất đối với sự phát triển của bệnh ở nhiều nước, ban đêm có sương và nhiệt độ trung bình từ

15 - 25oC rất thích hợp cho nấm bệnh đốm nâu gây hại thuốc lá phát sinh, phát triển

2.2.2.2 Bệnh đốm mắt cua (Cercospora nicotianae Ell Et Ev)

Theo Davide et al (1960) [27] bệnh phát hiện đầu tiên ở Bắc Califonia

do Ellis và Everhart Từ năm 1960, bệnh đã trở thành một trong những dịch hại quan trọng trên thuốc lá ở vùng Trung Mỹ; phổ biến nhất ở Honduras, Nicaragoa, Jamaica và Panama Bệnh cũng quan trọng trên thuốc lá Xì gà ở Philippines Trước năm 1960, bệnh được đánh giá là nghiêm trọng nhất trên thuốc lá sấy ở Trung Phi

∗ Phân loại hình thái

Nấm gây bệnh do loài Cercospora nicotianae, thuộc họ Dematiaceae,

bộ Moniliales, lớp nấm bất toàn Deuteromycetes

Bào tử phân sinh biến động mạnh về hình thái và kích thước Theo Chupp (1966) (Sober dẫn theo,1968 [56]), kích thước bào tử phân sinh là 35 -

150 ì 3,4àm Theo Sobers (1968) [56] kích thước bào tử phân sinh là 25 - 370

ì 3,4 - 6,1àm Chất dinh dưỡng và nhiệt độ có ảnh hưởng đến chiều dài của bào tử phân sinh Bào tử phân sinh thon thẳng tưới cong, đa bào, không màu Cành bào tử phân sinh màu nâu, đa bào phân nhánh ít, kích thước trung bình

là 20 - 600 ì 4 - 5àm Cành mọc thành cụm, thường sinh ra từ các thể đệm của nấm bệnh trong mô ký chủ

đốm mắt cua trên thuốc lá Raeber et al (1964) [52] đã thử trên 28 loài

Nicotianae kể cả loài N tabacum và N rustica, cho thấy các loài N repanda,

N sylvestris, một chủng N debneyi và tổ hợp lai N repanda, N sylvestris

đều nhiễm bệnh

Các giống thuốc lá đang được dùng trong sản xuất, có rất ít giống kháng được bệnh này (Lucas, 1975 [39] ); (Lucas, 1994 [41]) Stavely (1968)

[57] đã thử 990 giống N tabacum và chỉ tìm thấy 31 giống kháng bệnh

Diachum et al (1941) [32] thấy nấm sinh bào tử dễ dàng ở nhiệt độ

27oC trong bóng tối và trên môi trường agar có chứa dịch chiết thuốc lá Nhiệt

độ tối thích cho sự sinh bào tử của nấm là 27oC, tối thiểu là 7oC và tối đa là

34oC Yen ở Formosa (1956) [69] cho biết nhiệt độ tối thích là 30oC Stavely

et al (1968) [57] lại chỉ ra rằng nhiệt độ tối thích cho nấm sinh bào tử là 18oC, tối thích cho sợi nấm sinh trưởng là 26oC Các tác giả trên đều cho rằng khả năng sinh bào tử của nấm tăng lên dưới tác động của ánh sáng huỳnh quang và nấm sinh trưởng tốt vào buổi trưa và buổi chiều; sinh bào tử tốt nhất ở nhiệt độ thấp hơn vào buổi sáng sớm Stavely và Nimmo thấy rằng môi trường V8 agar

và một loại môi trường tổng hợp có chứa DL - Leucin, sucrose, nấm men và các chất khoáng giúp cho nấm sinh trưởng và sinh bào tử thuận lợi nhất

Mức pH tối thích để nấm sinh bào tử là 4,5 - 5,0 trên môi trường V8 agar và pH 6,5 trên môi trường tổng hợp Theo Steinberg nấm sinh trưởng cần thiamine, biotin, N, P, K, Mg, S, Ca, Fe, Zn, Cu, Mn, Mo (Lucas, 1975 [39])

∗ Quan hệ ký chủ

Theo Van Schreven (1948) [65] nấm xâm nhập vào lá qua khí khổng Bào tử cần nước tự do trên lá để nảy mầm ở thời tiết ấm, vết bệnh xuất hiện trong vòng một tuần Cunningham cho biết khi vết bệnh bắt đầu phát triển, mô lá hình thành quá trình hoá sẹo bao quanh vết bệnh và giới hạn kích thước vết bệnh Do nấm tiết ra độc tố cercosporin hoặc các chất liên quan đã làm

chết một số mô Loài C nicotianae được xem như là một ký sinh yếu, thường

chỉ gây hại vào các mô đã già Park et al (1940) [49] cho rằng nấm cũng đã xâm nhiễm trên các lá đang phát triển ở những cây bị nhiễm nặng thì hàm lượng alkaloid, đường khử và phenol ít hơn từ 18 - 46% so với lá khoẻ tương ứng, còn hàm lượng N thì lại cao hơn khoảng 6,5% Nấm có thể qua đông trên tàn dư thuốc lá và các cây ký chủ khác Vào mùa xuân bào tử phân sinh hình thành và phát tán nhờ gió hoặc nhờ nước và bệnh bắt đầu xuất hiện Nấm gây bệnh có thể được lan truyền từ vườn ươm ra ruộng trồng sản xuất qua cây giống nhiễm bệnh Bệnh lan truyền nhanh khi trời ấm, đặc biệt là khi có mưa Bào tử chỉ nảy mầm thuận lợi khi tiếp xúc với bề mặt lá ẩm ướt hoặc ở ẩm độ cao Khi trời khô nóng, vết bệnh thường nhỏ hơn 1 - 2mm và khi trời mưa ẩm vết bệnh có thể lớn hơn ánh sáng có vai trò quan trọng trong sự phát triển của bệnh Sự tương tác giữa ánh sáng, acid ascorbic, độc tố cercosporin và cả các chất khử, ảnh hưởng tưới kích thước, màu sắc của vết bệnh trên ruộng

Theo Lucas (1975) [39] đã thông báo rằng ở những cây thuốc lá nhiễm virus TMV thì rất mẫn cảm với bệnh đốm mắt cua Khi bón tăng đạm thì làm tăng tính mẫn cảm của cây đối với bệnh Theo Lucas (1994) [41] ở chân ruộng

đất thịt nặng, địa thế tháo nước khó khăn, trồng mật độ dày, thiếu thông thoáng thì bệnh đốm mắt cua phát triển và gây hại nặng

2.2.2.3 Bệnh đốm trắng (Phyllosticta nicotianae)

Bệnh gây hại cho thuốc lá chủ yếu ở giai đoạn cây đã lớn và gây hại khá lớn cho nhiều nước trồng thuốc lá Nấm có tính ký sinh yếu, thường thấy trên lá già hoặc lá sinh trưởng yếu

Nấm Phyllosticta nicotianae thuộc họ Sphaeropsidaceae, bộ

Sphaeropsidales, lớp nấm bất toàn Deuteromycetes Theo Ellis và Everhart

(1893) bào tử phân sinh có kích thước là 3,5 ì 1,5àm và tên là Phyllosticta

nicotianae Năm 1922, Wolf đã mô tả một loại nấm gây bệnh đốm thuốc lá

với triệu chứng là các vết đốm không đều, màu nâu, tâm màu nâu đậm, nhạt

dần ra phía mép lá, vết bệnh có quầng màu xanh vàng, kích thước trung bình

từ 1 - 10mm Quả cành của nấm có kích thước là 15 - 150àm, quả cành nằm chìm trong mô bệnh, bào tử phân sinh có kích thước là 10 ì 3 - 3,5àm Nhiều

tác giả cho rằng loài nấm này đồng nhất với loài Phyllosticta nicotianae do

các tác giả Ellis và Everhart đặt tên

Tại Rhodesia có bệnh đốm thủng gây hại trên cây thuốc lá do

Phyllosticta sp gây ra Theo Hopkin (1956) [37], bệnh xuất hiện trên cây con

trong vườn ươm thiếu đạm Triệu chứng bệnh phổ biến nhất là các vết đốm trắng kích thước có thể lên tưới 15mm Trên ruộng sản xuất, nấm tạo ra các vết đốm trắng nhỏ, vết đốm bị thủng, đôi khi cả mô giữa gân bị biến mất để trơ lại gân lá Trên viền quanh lỗ thủng có các quả cành, bào tử phân sinh có hình trụ, hình trứng với kích thước trung bình là 3 - 5 ì 2 - 2,6 àm

Stavery et al (1969) [58] đã phát hiện thấy một loài nấm Phyllosticta

sp khác gây bệnh trên thuốc lá ở Florida vào năm 1968 Vết bệnh hình tròn

thô, màu nâu nhạt, đường kính khoảng 6mm, có một viền rõ rệt nhưng không

có quầng Các phần chết hoại trong vết bệnh thường ròn, dễ thủng, để lại một

lỗ tròn thô Căn cứ vào hình thái, các tác giả cho rằng loài nấm này giống với

loài P tabaci do Hopkin đã mô tả và đặt tên Hai loài nấm khác có tên là

Phyllosticta capsulicola và Phyllosticta nicotianae cũng được phát hiện và mô

tả trên cây thuốc lá Tuy nhiên, khi xét đến các yếu tố ảnh hưởng đến kích thước quả cành, bào tử phân sinh và sự đa dạng trong mỗi loài nấm trên, các

tác giả cho rằng 4 loại nấm Phyllosticta sp ở trên là các loài nấm khác nhau

Nấm tồn tại trên đồng ruộng dưới dạng các bào tử phân sinh nằm trong quả cành trên tàn dư cây thuốc lá bị bệnh Theo Lucas (1975) [39] thì nhiệt độ tối thích để nấm sinh trưởng là 22oC và nhiệt độ tối đa là 30oC

2.2.2.4 Bệnh vết nâu (Ascochyta nicotianae)

Loài nấm Ascochyta nicotianae thuộc họ Sphaeropsidaceae, bộ

Sphaeropsidales, lớp nấm bất toàn Deuteromycetes Bào tử phân sinh hình

thành trong quả cành, có dạng hình trứng hay trứng dài, thường có một vách ngăn, trong suốt hoặc hơi nâu, kích thước trung bình là 8 - 10 ì 3 - 4àm

Bệnh xuất hiện và gây hại trên cây con ở vườn ươm và trên ruộng trồng Theo Saccardo (1884), nấm gây bệnh vết nâu với hình dạng không đều trên lá thuốc lá già ở Parma (ý) Về sau, có nhiều báo cáo về bệnh vết nâu do nấm

Ascochyta nicotianae gây ra được công bố Bệnh đươc Johle phát hiện lần đầu

tại vùng Tenn ( Mỹ) Fournont đã mô tả lại loài nấm Ascochyta sp mới gây loét thân thuốc lá và đặt tên nấm là A ducometii Loài nấm này đã được Saccardo mô tả vào năm 1984 và đặt tên A nicotianae Từ năm 1958, bệnh đã

được phát hiện thấy ở Bắc và Nam California, bệnh cũng xuất hiện và gây hại

ở các nước như Đan Mạch, ý, Nhật Bản, Puertorico, Rumania, Nga và

Rhodesia Nhiều mẫu nấm của loài Ascochyta sp trên các cây đậu, đậu đũa,

đậu tương, cà chua, khoai tây, ớt, bông, thuốc lá, khoai sọ, đã được Crossan

lây chéo Đặc điểm hình thái và sinh lý của các mẫu nấm loài Ascochyta sp rất giống nhau, bất kể nguồn gốc Crossan cho rằng các loài Ascochyta

gossypii, Ascochyta althaeina, Ascochyta nocotianae, Ascochyta capsici và Ascochyta lycopersici đều là loài Ascochyta phaerolorum do Saccardo mô tả

đầu tiên

∗ Sinh lý nấm

Nấm sinh trưởng tốt trên nhiều loại môi trường nhân tạo Nhiệt độ tối thích cho sinh trưởng là 22oC và nhiệt độ tối đa là 30oC Theo Person thì nấm

có thể tồn tại trong nước vô trùng khoảng 20 - 25 tháng ở nhiệt độ là 10 -

20oC mà nấm vẫn không mất độc tính và khả năng gây bệnh (Lucas, 1975 [39])

2.2.2.5 Bệnh thối xám (Botrytis cinerea Pers)

Theo Lucas (1975) [39] nấm thường xuất hiện vào thời điểm cây con

sắp đem trồng và gây hại nặng trong điều kiện thời tiết ẩm ướt Năm 1885 bệnh được phát hiện đầu tiên ở Đức, về sau bệnh được phát hiện ở tất cả các nước trồng thuốc lá trên thế giới

∗ Phân loại, hình thái nấm

Nấm gây bệnh thối xám do loài Botrytis cinerea thuộc họ Moniliaceae,

bộ Moniliales, lớp nấm bất toàn Deuteromycetes

Sợi nấm đa bào, phân nhánh; khi già sợi nấm chuyển màu nâu đậm Các sợi nấm khí sinh, bào tử phân sinh có màu xám khói, cành bào tử phân sinh có vách màu nâu Ngay dưới đỉnh cành là các nhánh thứ cấp Cuống đính cành bào tử phân sinh từ các nhánh thứ cấp mở rộng để tạo ra các bào tử phân sinh

đơn bào Bào tử phân sinh trong suốt có dạng hình trứng, kích thước trung bình là 6 - 9 ì 8 - 11àm Các cụm bào tử phân sinh bao quanh trục thân chính Khi bào tử phân sinh thành thục, nhánh mang bào tử đổ gục, tách ra từ vách ngăn để lại vết sẹo trên trục chính của cành bào tử phân sinh

∗ Sinh lý nấm:

Nấm gây bệnh có thể tạo hạch nấm cứng, màu đen, vỏ thô nháp với hình dạng bất kỳ ở bên trong hoặc trên mô cây ký chủ Hạch nấm gồm các tế bào vách dày, trong suốt, bên ngoài là một vòng nhu mô giả gồm các tế bào sợi nấm có màu nâu đen, kích thước đồng đều từ 5 - 10àm Trong điều kiện ngoại cảnh nhất định, nấm có thể sinh ra các bào tử phân sinh nhỏ, đơn bào hình ô van, trong suốt có đường kính là 2,0 - 2,5àm Các bào tử phân sinh

hình thành từ các thể bình (phialide) dạng hình tam giác Thể bình có thể sinh

ra từ sợi nấm riêng rẽ hoặc hình thành từ cụm sợi nấm lớn Loài B cinerea có

thể tạo ra bào tử sau 5 ngày nhiễm bệnh Nhiệt độ tối thích để nấm sinh trưởng

và phát triển trên môi trường nuôi cấy là 22 - 25 oC

∗ Quan hệ ký sinh ký chủ

Nấm xâm nhập vào cây qua tầng cutin và tiết ra men cutinase với

lượng hạn chế phân huỷ màng nguyên sinh Thành phần và điều kiện sinh trưởng của mô cây ký chủ có ảnh hưởng đến khả năng xâm nhiễm và tạo các

enzyme của nấm như pectinolytic và cellulolytic Các enzyme này có vai trò

quan trọng trong quá trình xâm nhiễm và gây thối mô bệnh Nấm tồn tại trong

đất dưới dạng hạch nấm Khi nảy mầm, hạch nấm tạo ra sợi nấm, hình thành cành bào tử phân sinh và bào tử phân sinh Hạch nấm nảy mầm thuận lợi trong

điều kiện nhiệt độ tương đối cao và ẩm độ cao Bào tử phân sinh lan truyền nhờ gió và nước Thuốc lá bấm ngọn dễ bị lây bệnh qua vết thương xây xát Hạch nấm thường hình thành nhiều trên bề mặt mô bệnh

2.2.2.6 Bệnh héo vàng (Fusarium oxysporum f sp.nicotianae, Schlecht)

Bệnh nấm Fusarium sp là bệnh phổ biến ở Nam Phi ở Mỹ, bệnh gây

hại nghiêm trọng trên diện tích trồng thuốc lá ở vùng Nam California Bệnh thường gây hại trên đất cát ven sông trồng thuốc lá Burley ở vùng Ky Người

ta vẫn chưa biết nguyên nhân, tại sao bệnh chỉ gây bệnh trên những vùng giới hạn nào đó, mặc dù tác nhân gây bệnh phân bố rất rộng trong đất ở Mỹ, bệnh

được phát hiện đầu tiên trên vùng trồng thuốc lá ở California vào năm 1916 Lamondia et al (1987) [42] cho rằng đây là bệnh nghiêm trọng nhất trên thuốc lá vùng Connecticut

Theo Delon et al (1987) [29] bệnh cũng được ghi nhận ở Canada, Fomosa, Hà Lan, ấn Độ, Trung ấn, ý, Nhật Bản, Nicaragoa, Philippines, Nga, Nam Phi, Venezuela và Uganda Đây là một trong những loại bệnh nghiêm trọng ở nhiều nước trồng thuốc lá

Theo Lucas (1975) [39]; Dleyten Davis et al (1999) [31] cho rằng các tác nhân gây bệnh gồm nhiều chủng có phổ ký chủ rộng Bệnh héo vàng thuốc

lá có tên là bệnh héo Fusarium sp, có khi người ta còn gọi là bệnh héo mạch dẫn và đã được mô tả trên 20 loài cây ký chủ kể cả loài N arentsii, N glauca

và N rustica Một số loài nấm Fusarium sp gây héo vàng cũng ký sinh trên

nhiều loại cây trồng mà không biểu hiện triệu chứng

Nấm gây bệnh héo vàng Fusarium oxysporum f sp.nicotianae thuộc họ

Tuberculariaceae, bộ Moniliales, lớp nấm bất toàn Deutoromycetes

Wollenweber và Reinking đã chia loài Fusarium sp thành 16 nhóm với vài loài ngoại lệ, trong đó các loài nấm Fusarium sp gây héo thuộc nhóm

Elegans nên chỉ có một loài F oxysporum với nhiều dạng dựa vào tính gây

bệnh trên các loài cây ký chủ

∗ Hình thái nấm

Trên môi trường nuôi cấy, tản nấm thường có màu trắng hồng, tía nhạt hoặc có màu tím violet Bào tử phân sinh hình thành trên cành bào tử phân sinh, nhánh dạng vòng xoắn, ngắn mọc thành từng cụm riêng rẽ Bào tử phân sinh có 2 loại: bào tử nhỏ (microconidi) đơn bào, trong suốt hình elíp, kích thước trung bình là 5 - 12 ì 2,5 - 3àm và bào tử phân sinh lớn (macroconidi) thường có 3 - 5 vách ngăn ngang hình lưỡi liềm, trong suốt, kích thước trung bình là 40 - 50 ì 2,4 - 5àm Bào tử phân sinh lớn có tính biến động mạnh về hình dáng và kích thước Hậu bào tử nhẵn, hình cầu có 1 - 2 tế bào hình thành

ở đầu hoặc giữa sợi, kích thước trung bình vào khoảng 8àm Hậu bào tử có khả năng sống trong nước trong một thời gian dài khoảng 7 năm

Nấm Fusarium sp có khả năng biến dị lớn Nấm thường mất độc tính

trên môi trường nuôi cấy trong nhiều ngày và thường sinh đột biến Theo

Papavizas (1966) [50] thì loài Fusarium sp là loài có tính biến động mạnh về

hình thái, tính gây bệnh và đặc tính sinh lý

∗ Sinh lý nấm

Nhiệt độ tối thích cho nấm sinh trưởng trên môi trường là 28 - 30 oC, nấm không sinh trưởng ở nhiệt độ dới 7oC hoặc trên 35oC Nấm có khả năng sinh trưởng trên phạm vi pH rộng, pH tối thích là 6,0 - 7,0

Theo Tole (1966) [64] khi hàm lượng O2 giảm xuống dưới nồng độ O2

trong không khí thì nấm sinh trưởng kém; khi nồng độ CO2 cao (80 - 100%)

sẽ ức chế sự sinh trưởng của nấm và khả năng hình thành bào tử phân sinh giảm khi nồng độ CO2 ở mức 20%

Theo Lucas (1975) [39]; Dleyton Davis et al (1999) [31] một số chủng của loài nấm này chỉ tấn công một loài cây trồng (ví dụ chủng gây hại trên cây

cà chua) Trái lại một số chủng khác (như chủng nấm hại cây cải bắp) lại có thể tấn công trên nhiều loại cây trồng Các giống thuốc lá có khả năng tính

kháng khác nhau với các chủng của loài nấm Fusarium oxysporum

∗ Quan hệ ký sinh ký chủ

Nấm xâm nhập vào rễ, qua vết thương để xâm nhập vào mạch libe, mạch xylem của các nhu mô bó mạch; ruột, vỏ và mạch phloem không bị nấm xâm nhập nhưng sợi nấm lại phát triển trong bó mạch dẫn Bào tử phân sinh nhỏ di chuyển lên lá nhờ sự thoát hơi nước Sau khi bệnh phát triển, hệ thống mạch dẫn hoá nâu do hoạt tính của enzyme tác động lên bó mạch Lá cây bệnh giảm hàm lượng đường và tăng chất nhựa dính Bệnh ảnh hưởng xấu đến

tỷ lệ C/ N làm giảm chất lượng lá Triệu chứng bệnh có thể xuất hiện từ 7 - 10 ngày sau khi nấm xâm nhiễm ở điều kiện thích hợp Khi cây bị héo nặng rồi chết do hệ thống mạch dẫn đã không vận chuyển đủ nước (gây thiếu nước) và dinh dưỡng từ rễ lên lá Bản thân tản nấm và bào tử phân sinh, các nốt hoá sần, chất gôm, chất gel và chất polysaccaride cũng làm tắc mạch dẫn Khi tế bào bị phân huỷ, tàn dư của chúng sẽ tích luỹ và làm vít tắc bó mạch Các sản phẩm thuỷ phân cellulose và pectin cũng góp phần vít tắc bó mạch Sự biến đổi về

độ nhớt của dòng vận chuyển là yếu tố chính gây ra hiện tượng héo Theo Messiaen, các chất điều hoà sinh trưởng giúp cây chống chịu là nhờ cây hấp thụ canxi hiệu quả hơn và tăng hàm lượng đường của thân Mạch dẫn hoá nâu hoặc nâu đen là do dới tác động của men polyphenoloxydase, các polyphenol

bị oxy hoá thành quinol, rồi bị polyme hoá để thành melanin

Đặc điểm phát triển: loài nấm Fusarium sp là một loại nấm đất, có thể

sống trong đất một thời gian dài mà không cần có cây thuốc lá Hậu bào tử có thể tồn tại lâu trong khoảng 5 - 7 năm và nảy mầm khi có tác động kích thích của cây chủ Nấm thường xâm nhập qua các vết thương rễ, rồi nhanh chóng

vào mạch dẫn Khi cây chết, nấm lại về đất Nấm Fusarium sp lan truyền bằng

nhiều con đường như cây nhiễm bệnh (biểu hiện hay không biểu hiện triệu

chứng), đất nhiễm bệnh Bệnh héo vàng thuốc lá do nấm Fusarium sp gây hại

phát triển thuận lợi trên đất cát pha, nhiệt độ từ 28 - 310C Bệnh héo vàng còn phát triển mạnh khi mật độ tuyến trùng nốt sưng hại rễ cao Bệnh xuất hiện trên cả 3 loại đất: đất chua, kiềm và trung tính (Lucas, 1975 [39]; Dleyton Davis et al.,1999 [31] )

2.2.3 Biện pháp phòng chống bệnh nấm hại thuốc lá ở ngoài nước

2.2.3.1 Phòng chống bệnh nấm hại cây con thuóc lá ở vườn ươm

Nấm gây hại ở vườn ươm cây con đa phần thuộc nhóm nấm định cư, tác nhân gây bệnh tồn tại chủ yếu trong đất Các loài nấm này tồn tại nhờ khả năng tự điều chỉnh theo điều kiện môi trường và có thể sống hoại sinh cùng với các vi sinh vật khác Nhiều loài nấm có thể tồn tại không giới hạn trong

điều kiện thiếu cây ký chủ, chúng có phổ ký chủ rộng (các bệnh như bệnh thối

rễ, thối thân, thối hạt, chết héo cây con) Biện pháp luân canh cây con ít có giá trị trong phòng trừ các loại bệnh hại này Biện pháp phòng trừ bệnh nấm hại cây con ở vườn ươm quan trọng nhất là xử lý đất vườn ươm (cả trong nhà kính) và phun thuốc phòng trừ cho cây con sau khi cây mọc và phát triển, kết hợp với quản lý và chăm sóc vườn ươm để tạo ra cây giống sạch bệnh

Cây giống thuốc lá khoẻ, đầy đủ số lượng và kịp thời vụ là yếu tố vô cùng quan trọng trong sản xuất thuốc lá nguyên liệu Trồng giống thuốc lá bị bệnh, cây sẽ sinh trưởng và phát triển chậm, các tác nhân gây bệnh tiếp tục gây hại cho cây thuốc lá ở ruộng sản xuất, làm giảm năng suất và chất lượng nguyên liệu, gây thiệt hại kinh tế cho người sản xuất Để phòng chống các loại

nấm bệnh gây hại ở vườn ươm thuốc lá, cần phải :

Bố trí vườn ươm ở nơi ít gió, đất giữ ẩm tốt, không nóng, sạch cỏ dại và nguồn bệnh, được luân canh với cây trồng nước Vị trí vườn ươm tốt đáp ứng các yêu cầu: độ dốc vừa phải, đủ ánh sáng, chắn gió, thông thoáng

Xử lý hạt giống bằng dung dịch AgNO3 ở nồng độ 0,1%, hạt được ngâm trong 5 - 10 phút hoặc có thể xử lý hạt ở nhiệt độ 52oC trong 20 phút

Có thể xử lý hạt thuốc lá ở nhiệt độ 45oC, sau đó tăng lên 95oC với mức mỗi phút tăng lên 1oC và từ 95oC lên 120oC với mức cứ 2 phút tăng lên 1oC, mang

lại hiệu quả phòng trừ bệnh đốm nâu (Alternaria alternata) và bệnh vi khuẩn

tốt như khi xử lý AgNO3

Các bệnh thối đen rễ, lở cổ rễ có thể tồn tại trên các vật liệu, dụng cụ

Do vậy, cần khử trùng các dụng cụ bằng dung dịch Formon nồng độ 1/200 (dung dịch gốc là 40%) hoặc đun sôi (luộc) trong vòng 1 giờ cũng có hiệu quả tốt (Lucas, 1975 [39])

Có thể khử trùng đất bằng phương pháp xông hơi, phun thuốc và bằng nhiệt trước khi gieo trồng (Lucas,1975 [39] ) và Gottlieb,1971 [36])

Đốt là phương pháp khử trùng được sử dụng sớm nhất, nhưng đến nay vẫn được sử dụng rộng rãi (ở những nơi gỗ và nhiên liệu sẵn có) để diệt trừ cỏ dại và bệnh Trước khi gieo hạt, rơm rạ, củi khô, được rải đều trên bề mặt luống khoảng 3 - 4cm Vật liệu được đốt cháy ở nhiều điểm, để cháy khoảng

90 phút hoặc đốt sao cho đất nóng đến độ sâu khoảng 10cm Sau khi đốt xong, các vật liệu thô không cháy hết phải loại ra khỏi vườn ươm

Xông hơi là phương pháp khử trùng thích hợp với điều kiện nhà kính, vườn ươm (sử dụng nhiều ở miền Bắc nước Mỹ) Dùng phương pháp bón đối lưu do Shamel tạo ra đầu tiên Một nồi đun sôi tạo hơi kiểu để bàn được dùng

để tạo hơi Khi xử lý xông hơi, đất phải tương đối khô, xốp để tạo điều kiện cho hơi xâm nhập Nhiệt độ xông hơi cần đạt tưới 600C ở độ sâu 15cm thì việc xông hơi mới có hiệu quả, thời gian xử lý tối thiểu là 20 phút