3. Vật liệu, nội dung và ph−ơng pháp nghiên cứu
3.4. Ph−ơng pháp nghiên cứu
3.4.1. Ph−ơng pháp điều tra bệnh nấm hại thuốc lá trên v−ờn −ơm và ruộng trồng sản xuất
- Điều tra thành phần, mức độ gây hại, diễn biến bệnh nấm hại thuốc lá
ở vùng Chi Lăng - Lạng Sơn theo ph−ơng pháp điều tra của Cục Bảo vệ thực vật (1987) [3], Đặng Vũ Thị Thanh và CTV (1997) [15].
Điều tra tại các khu vực trồng thuốc lá tại 3 xã: xã Quang Lang, xã
Th−ợng C−ờng và xã Gia Lộc, huyện Chi Lăng, tỉnh Lạng Sơn. Các điểm điều tra đ−ợc chọn là các ruộng đại diện cho giống, thời vụ, chân đất, công thức luân canh, có diện tích từ 360m2 trở lên (đối với cây con ở vườn ươm mỗi
điểm điều tra là 1 ô có kích th−ớc 0.2m x 0.2m). Điều tra 5 điểm chéo góc, cố
định điểm điều tra, định kỳ 7 ngày/ 1 lần.
- Điều tra bổ xung thành phần bệnh theo ph−ơng pháp điều tra ngẫu nhiên 10 ngày/ lần trên các ruộng trồng thuốc lá thuộc huyện Chi Lăng, tỉnh Lạng Sơn. Chỉ tiêu theo dõi: tỷ lệ bệnh (%), chỉ số bệnh (%).
∗ Điều tra tình hình bệnh nấm hại thuốc lá ở ruộng sản xuất
Mỗi ruộng thí nghiệm điều tra 5 điểm chéo góc, định kỳ 7 ngày/ 1 lần.
Đối với bệnh hại trên lá: Đếm tổng số lá bị bệnh, số lá bị bệnh theo từng cấp bệnh, tính tỷ lệ bệnh (%), chỉ số bệnh (%).
Phân cấp bệnh: theo thang 5 cấp của Cục Bảo vệ thực vật (1987) [3], Lê L−ơng Tề (1997) [14].
Cấp 0: lá không có bệnh
Cấp 1: diện tích lá bị bệnh < 10%
Cấp 2: diện tích lá bị bệnh từ 10 - 25%
Cấp 3: diện tích lá bị bệnh > 25 - 50%
Cấp 4 : diện tích lá bị bệnh > 50%
Đối với bệnh hại toàn cây (thân): đếm tổng số cây bị bệnh, tính tỷ lệ bệnh.
∗ Đánh giá mức độ phổ biến ( tỷ lệ bệnh) và mức độ gây hại ( chỉ số bệnh) của bệnh:
+ Mức độ bệnh nhẹ: TLB (%) hoặc CSB (%) <10%
++ Mức độ bệnh trung bình: TLB (%) hoặc CSB (%) từ 10 - 20%
+++ Mức độ bệnh nặng: TLB (%) hoặc CSB (%) >20%
∗ Điều tra tình hình gây hại của một số bệnh nấm chủ yếu (bệnh đốm nâu, bệnh đốm mắt cua, bệnh đốm trắng) ở ruộng sản xuất tại Chi Lăng - Lạng Sơn.
Chọn ruộng có điều kiện chăm sóc bình th−ờng. Trên mỗi ruộng chọn 5
điểm chéo góc, mỗi điểm 10 cây cố định (trường hợp có cây nào chết sẽ theo dõi bệnh trên cây kế tiếp). Đối với bệnh hại lá, đếm toàn bộ số lá bị hại và cấp bệnh tương ứng. Đối với bệnh hại thân (cây), mỗi điểm 50 cây, đếm số cây bị
bệnh. Mỗi chỉ tiêu theo dõi đ−ợc bố trí nhắc lại 3 lần.
3.4.2. Phương pháp chẩn đoán và giám định bệnh
Chẩn đoán và giám định bệnh nấm hại thuốc lá theo phương pháp nghiên cứu đ−ợc trình bày trong các công trình của Lê L−ơng Tề (1997) [13], Vũ Khắc Nh−ợng, Hà Minh Trung (1983) [11], Đặng Vũ Thị Thanh, Hà Minh Trung (1997) [15], Nguyễn Văn Tuất (1997) [20], Vũ Triệu Mân và Lê L−ơng TÒ (1998) [9], Lucas et al. (1991) [40].
3.4.3. Tìm hiểu đặc điểm sinh học của một số loại nấm gây bệnh
Thí nghiệm đ−ợc thực hiện tại Bộ môn Bệnh cây, Khoa Nông học, Tr−ờng ĐHNN I - Hà Nội, đ−ợc tiến hành theo ph−ơng pháp nghiên cứu của
Đ−ờng Hồng Dật (1979) [5], (1984) [6], Lê L−ơng Tề (1997) [14], Dhing O.D
& Sinclar J.B. (1984) [30].
- Các loài nấm sau khi đ−ợc phân lập từ vết bệnh đ−ợc nuôi cấy trên môi tr−ờng PGA.
- Tìm hiểu ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến sự phát triển của nấm (các môi tr−ờng đ−ợc sử dụng là PGA, MA, CGA). Chỉ tiêu theo dõi: đo
đ−ờng kính tản nấm sau 3, 5, 7, 9 ngày nuôi cấy.
- Tìm hiểu ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự phát triển của 3 loài nấm hại chính (đốm mắt cua, đốm trắng, đốm nâu) trên môi trường nhân tạo CGA.
3.4.4. Tìm hiểu ảnh hưởng của một số yếu tố sinh thái kỹ thuật đến sự phát sinh và phát triển của một số bệnh chính hại thuốc lá
∗ ảnh hưởng của giống thuốc lá đến sự phát sinh, phát triển của bệnh.
Tiến hành điều tra, theo dõi diễn biến của một số bệnh hại chính trên 2 giống thuốc lá C176 và K326 đang đ−ợc trồng phổ biến ở Chi Lăng - Lạng Sơn. Chỉ tiêu theo dõi: tỷ lệ bệnh (%), chỉ số bệnh (%). Đánh giá mức độ nhiễm bệnh trên từng giống.
∗ ảnh hưởng của mật độ trồng đến sự phát sinh, phát triển của bệnh.
Thí nghiệm gồm 3 công thức, mỗi công thức nhắc lại 3 lần, diện tích mỗi ô thí nghiệm là 25 m2, thí nghiệm trên giống thuốc lá K326 trong điều kiện vụ xuân năm 2005 trên nền phân bón 60kgN/ ha với tỷ lệ N: P2O5: K2O là 1: 1,25: 1,70
Chỉ tiêu theo dõi: tỷ lệ bệnh (%), chỉ số bệnh (%) Công thức I: 60cm x 110cm (16 000cây/ ha ) Công thức II: 55cm x 105cm (18 000cây/ ha) Công thức III: 50 cm x 100cm (20 000cây/ ha)
∗ ảnh hưởng của chế độ luân canh đến sự phát sinh, phát triển của bệnh.
Thí nghiệm đ−ợc tiến hành trên 3 công thức luân canh:
Công thức I: Lúa mùa - đất bỏ hoá - thuốc lá xuân Công thức II: Lúa mùa - khoai lang - thuốc lá xuân Công thức III: Lúa mùa - khoai tây - thuốc lá xuân
∗ ảnh hưởng của các loại phân bón đơn đến sự phát sinh, phát triển của bệnh.
Để tìm hiểu ảnh hưởng của lương phân NPK khác nhau và tác động của Bo đến sự phát sinh của bệnh chúng tôi đã bố trí thí nghiệm trên nền phân giống nhau làm đối chứng (l−ợng N,P,K theo tỷ lệ 60kg N + 75kg P2O5 + 100kg K2O và không bón Bo).
Để tìm hiểu tác động của từng yếu tố (N, P2O5, K2O và B) , chúng tôi sẽ thay đổi hàm l−ợng của yếu tố đó theo nh− đã định.
Nhắc lại Công thức thí nghiệm
1 Công thức I Công thức II Công thức III Công thức IV 2 Công thức II Công thức III Công thức IV Công thức I 3 Công thức III Công thức IV Công thức I Công thức II
Sơ đồ thí nghiệm (sử dụng cho cả 4 loại phân bón)
Các thí nghiệm đều có 4 công thức, nhắc lại 3 lần, bố trí theo kiểu ngẫu nhiên, diện tích ô 25m2. Mật độ trồng 50cm x 100cm ( 50cây thuốc lá/ô), trên 2 giống C176 và K326 ; trong vụ Xuân 2005. Chỉ tiêu theo dõi cho các thí nghiệm: tỷ lệ bệnh (%), chỉ số bệnh (%):
Liều l−ợng của từng loại phân bón cho từng công thức nh− sau:
+ Đối với phân N: Công thức I (đối chứng, nền): 60N/ ha Công thức II: 70kg N/ ha
Công thức III: 80kg N/ ha Công thức IV: 90kg N/ ha
+ Đối với phân P2O5: Công thức I (đối chứng, nền): 75kg P2O5/ ha Công thức II: 90 kg P2O5/ ha
Công thức III: 115 kg P2O5/ ha Công thức IV: 130 kg P2O5/ ha
+ Đối với phân K2O: Công thức I (đối chứng, nền): 100kg K2O / ha Công thức II: 110 kg K2O / ha
Công thức III: 120 kg K2O / ha Công thức IV: 130 kg K2O / ha + §èi víi ph©n Fertibor (Na2B4O7.5H2O):
Công thức I (đối chứng, nền): Không borax Công thức II: 2,4kg Na2B4O7.5H2O / ha Công thức III: 2,7kg Na2B4O7.5H2O / ha Công thức IV: 3,0kg Na2B4O7.5H2O / ha
∗ ảnh hưởng của tỷ lệ N: P2O5: K2O đến sự phát sinh, phát triển của bệnh.
Thí nghiệm gồm 3 công thức (l−ợng N = 60kg/ ha), mỗi công thức nhắc lại 3 lần, diện tích mỗi ô thí nghiệm là 25m2. Thí nghiệm trên 2 giống C176 và K326 vô xu©n 2005.
Công thức I : tỷ lệ N : P2O5 : K2O là 1 : 1,25 : 1,70
Công thức II : tỷ lệ N : P2O5 : K2O là 1 : 1,50 : 2,00 Công thức III: tỷ lệ N : P2O5 : K2O là 1: 1,75 : 2,25 Cách bón phân nh− sau :
Bón lót 50% đạm + 100% lân + 50% kali.
Tưới thúc đợt 1: 50% đạm + 50% kali sau trồng 25 ngày.
Chỉ tiêu theo dõi: tỷ lệ bệnh (%), chỉ số bệnh (%) ở các công thức.
3.4.5. Tìm hiểu hiệu lực của một số thuốc hoá học để phòng trừ bệnh hại thuốc lá:
* Trên v−ờn −ơm: Thí nghiệm đ−ợc tiến hành vào giai đoạn 40 ngày sau gieo. Trên mỗi ô điều tra theo 5 điểm chéo góc cố định; mỗi điểm 10 cây.
Đếm số cây bệnh và phân cấp cây bệnh theo tỷ lệ bị hại trên toàn cây.
Các thuốc dùng: Ridomil 72MZ 2.5/1000;
Viben-C 50WP 2.5/1000
Zineb Bull 80WP 4.5/1000 600l/ha Phun 1 lần vào lúc cây con đ−ợc 45 ngày sau gieo.
* Trên ruộng sản xuất: Trên mỗi ô điều tra theo 5 điểm chéo góc cố
định, mỗi điểm 10 cây liền nhau. Nếu có cây chết sẽ chọn cây kế tiếp. Đếm số lá điều tra, số lá bị bệnh của từng loại bệnh và phân cấp lá bệnh.
Các thuốc dùng: Ridomil 72MZ 2.5/1000;
Viben-C 50WP 2.5/1000