Nghiên cứu phân lập các hợp chất tritecpen từ lá cây mâm xôi (rubus alceaefolius poir )

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP MỞ ĐẦU Trong điều kiện phát triển xã hội chất lượng sống người nâng lên, tuổi thọ tăng lên… Tuy nhiên với phát triển người phải đối đầu với nguy mắc nhiều bệnh hiểm nghèo Nguyên nhân ôi nhiễm bầu không khí, ôi nhiễm nguồn nước…Việc nghiên cứu tìm loại thuốc có nguồn gốc từ thiên nhiên có hiệu cao, dễ tìm nguồn nguyên liệu, tác dụng phụ, độc tính để ứng dụng y học, nông nghiệp mục đích khác phục vụ lợi ích người vấn đề nhà khoa học quan tâm Nằm khu vực nhiệt đới gió mùa có nhiều điều kiện thuận lợi cho thảm thực vật phát triển : nhiệt độ trung bình 15-280C, độ ẩm cao, lượng mưa lớn… nước ta có kho tài nguyên thiên nhiên vô giá với nguồn dược liệu phong phú đa dạng thuộc loại bậc giới Theo tài liệu công bố [1] Việt Nam có khoảng 12000 loài thực vật, từ xa xưa nhân dân ta biết dùng loại thảo dược để chữa bệnh có nhiều thuốc quý lưu truyền đến ngày Các thuốc có nhiều ưu điểm chữa bệnh độc tính, tác dụng phụ, dễ tìm nguyên liệu Nguồn kinh nghiệm quý báu xuất phát từ thuốc cổ truyền có vai trò quan trọng với phát triển ngành y học nói chung ngành Hóa học hợp chất thiên nhiên nói riêng Ngày với hỗ trợ máy móc đại giúp người phân lập nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học từ thiên nhiên, với đa dạng thiên nhiên Việt Nam hứa hẹn nơi tìm nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học góp phần quan trọng việc tìm phương thuốc chữa bệnh hiểm nghèo PHẠM TUẤN ANH K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Cây Mâm xôi sử dụng rộng rãi dân gian để chữa số bệnh tiêu hóa [4] : chữa chậm tiêu, ăn, số bệnh gan, dùng cho phụ nữ sau sinh để hồi sức…Chính lí em chọn đề tài “ Nghiên cứu phân lập hợp chất tritecpen từ Mâm xôi” Nhiệm vụ khóa luận Phân lập số hợp chất tritecpen từ Mâm xôi Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập phương pháp phổ PHẠM TUẤN ANH K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Những nghiên cứu tổng quan Mâm xôi 1.1.1 Thực vật học Cây Mâm xôi hay gọi đùm đũm có tên khoa học Rubus alceaefolius Poir, thuộc họ Hoa hồng - Rosaceae Đây loài bụi nhỏ, thân leo có gai to dẹt Cành mọc vươn dài, có nhiều lông Lá đơn, mọc so le, hình bầu dục, hình trứng gần tròn, chia thùy nông, không đều, gân chân vịt, mép khía răng, mặt màu lục sẫm phủ lông lởm chởm, mặt có nhiều lông mềm, mịn màu trắng xỉn, cuống dài có gai, kèm sớm rụng Cụm hoa mọc kẽ đầu cành thành chùm ngắn, bắc giống kèm, hoa màu trắng, cánh hoa 5, mỏng hình tròn, nhị nhiều thường dài cánh hoa, nhị dẹt, noãn nhiều Quả hình cầu, gồm nhiều hạch tụ họp lại dáng Mâm Xôi có tên Mâm xôi, chín màu đỏ tươi, ăn Cây hoa tháng 2-3, tháng 5-7 [1, 2] Hình 1.1.1 Cây Mâm xôi Rubus alceaefolius Poir PHẠM TUẤN ANH K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP 1.1.2 Phân bố, sinh thái Theo Đỗ Huy Bích cộng [1], giới chi Rubus có khoảng 400 loài, hầu hết bụi, mọc thẳng hay bụi trườn, phân bố chủ yếu vùng ôn đới, cận nhiệt đới vùng nhiệt đới Bắc bán cầu Một vài loài trồng lấy Ở Việt Nam, chi có 51 loài, thứ, Mâm xôi loài phân bố tương đối rộng rãi khắp tỉnh vùng núi thấp, trung du đồng Cây ưa sáng ẩm, thường mọc trùm lên bụi leo khác ven rừng ẩm, rừng núi đá vôi, đồi, trảng bụi ưa sáng đất sau nương rẫy Ở vùng đồng bằng, Mâm xôi mọc lẫn lùm bụi quanh làng, hai bên đường Cây sinh trưởng, phát triển nhanh Những bị chặt phá hoa nhiều hàng năm Cây có khả tái sinh mạnh sau bị chặt phá 1.1.3 Công dụng Lá, cành rễ Mâm xôi có vị nhạt, tính bình, có tác dụng nhiệt, tán ứ, tiêu viêm, huyết, kích thích tiêu hóa, giúp ăn ngon miệng Cành phơi khô, nấu nước uống thay chè, dùng cho phụ nữ sau đẻ sức người ăn không tiêu, đầy bụng Ngoài cành Mâm xôi dùng phối hợp với Mộc thông, Ô rô để chữa viêm tuyến vú, viêm gan cấp mãn tính Quả có vị ngọt, tính bình, dùng thay vị Phúc bồn tử y học cổ truyền, có tác dụng bổ gan thận, giữ tinh khí, làm tráng dương, mạnh sức Quả dùng chữa thận hư, liệt dương, di tinh, đái són, đái buốt [1, 2] Ở Ấn Độ người ta dùng Mâm xôi làm thuốc chữa bệnh đái dầm trẻ em Nước sắc vỏ thân dùng làm thuốc điều kinh, chữa tiêu chảy Ở Trung Quốc, Mâm xôi sử dụng y học cổ truyền để chữa albumin niệu, viêm tuyến vú viêm gan mãn tính Ở số vùng PHẠM TUẤN ANH K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Trung Quốc, sử dụng để chữa số bệnh ung thư định Theo kết nghiên cứu Cui C - B cộng sự, rễ Mâm xôi thể hoạt tính ức chế mạnh chu kỳ tế bào pha G0/G1 dòng tế bào tsFT210 (Chu kỳ tế bào, đường để tế bào sinh sôi, trình sinh học kiểm soát chặt chẽ thực tế ung thư tăng sinh vô hạn độ không mong muốn tế bào ung thư với thoái hóa chu kỳ tế bào Do đó, chất ức chế chu kỳ tế bào có khả tiềm tàng điều trị ung thư) [6] 1.1.4 Thành phần hoá học Theo sách thuốc Việt Nam [1, 2], Mâm xôi chứa axit hữu (chủ yếu axit xitric, malic, salycilic), đường, pectin Lá chứa tanin Tuy nhiên, công trình nghiên cứu công bố loài R alceaefolius Mới có nhà khoa học Trung Quốc nghiên cứu loài nghiên cứu thuốc mọc Trung Quốc Còn Việt Nam hoàn toàn chưa có nghiên cứu thuốc quí Theo tra cứu chúng tôi, từ R alceaefolius mọc Trung Quốc, năm 1998 Gan L đồng nghiệp phân lập được: axit corosolic (1), axit tormentic (2), niga-inchigoside F1 (3), trachelosperoside E-1 (4) suavissimoside R1 (5) [7] Năm 2000, Gan L đồng nghiệp lại công bố phân lập alcesefoliside (6), hyperoside (7), vomifoliol (8), β-sitosterol (9), daucosterol (10) dotriacontyl alcohol (11) [8] Năm 2002, nhóm nghiên cứu Cui C - B công bố phân lập rubuphenol (12) sanguiin H-2 ethyl ester (13), axit ellagic (14), ethyl gallate (15), 1,2,3,4,6-penta-O-galloylβ-D-glucopyranose (16) 1,2,3,6-tetra-O-galloyl-β-D-glucopyranose (17) [6] Dưới dẫn cấu trúc số hợp chất phân lập từ loài R alceaefolius PHẠM TUẤN ANH K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Các hợp chất phân lập từ Rubus alceaefolius OH O O HO HO OH OH HO HO OH HO O O H H HO HO O O H H OH OH HO HO O H O H HO H OH HO OH OH OH OH OH OH OH OH HO O OH O HO O O OH OH HO O OH O O HOOC OH OH OH OH OH OH OH HO OH O O O OH O OH OH HO O O OH PHẠM TUẤN ANH 12 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP OH HO O OH HO O O HO O OH O O HO OH H O OH C OH O O CH3CH2 OH O O O O O HO OH O O O O OH HO OH OH HO OH OH HO 14 13 OH O O G= O CH2CH3 OH C GO OH O RO HO OG GO OH OG OH 16: R=G; 17: R=H 15 1.2 Giới thiệu lớp chất tritecpen [3, 4, 5] 1.2.1 Giới thiệu chung Tecpen lớp hợp chất thiên nhiên mà cấu trúc phân chia thành đơn vị isopren, chúng có công thức chung (C5H8)n n  Căn vào số đơn vị isopren hợp thành người ta phân loại sau: Loại tecpen Khung cacbon Số lượng C Monotecpen (iso-C5)2 10 Secquitecpen (iso-C5)3 15 C15H24, C15H24O, C15H22O Đitecpen (iso-C5)4 20 C20H32, C20H32O, C20H30O Tritecpen (iso-C5)6 30 C30H50, C30H50O Tetratecpen (iso-C5)8 40 C40H56 PHẠM TUẤN ANH Thí dụ C10H16, C10H8O, C10H16O K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Ngoài thiên nhiên, người ta gặp số polime mà phân tử chúng gồm hàng chục ngàn mắt xích iso-C5 Đó politecpen, quen thuộc cao su thiên nhiên mà mắt xích iso-C5 có liên kết đôi cấu hình cis: CH3 C C H3C H poli - cis - isopren Dưới số công thức Tecpen CH3 CH2 6 H2C H2C CH2 CH HC H2C CH2 CH2 C H3C CH3 C H2C Mirxen CH3 Oximen Mirxen (C10H16) tách từ tinh dầu Myria acris (Nguyệt quế) Oximen tách từ Ocimum basilicum (một loài húng quế) CHO CHO Geranial Xitronelal Silvestren Geranial (Xitral-a), Xitronelal chất tách từ tinh dầu hoa hồng, tinh dầu sả, có mùi thơm đặc trưng Silvestren tách từ tinh dầu Pinuc Silvestris PHẠM TUẤN ANH K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP O OH Mentol Menton Limonen Mentol Menton tách từ tinh dầu bạc hà, Limonen tách từ vỏ cam chanh Sabinen Cedren Camphen Sabinen tách từ dầu Juniperus Sabina, Cedren tách từ Hoàng đàn, Camphen có nhiều tinh dầu long não Các tritecpen phân bố rộng rãi giới thực vật, năm bảy mươi có khoảng 500 hợp chất tritecpen xác định cấu trúc Một số tritecpen có tác dụng sinh lý, dược lý như: kháng khuẩn, kháng nấm, kháng viêm kháng số dạng ung thư, có tác dụng lên hệ thần kinh trung ương, điều hoà nội tiết, hạ cholesterol máu chống xơ vữa động mạch Các dẫn xuất chứa oxi tritecpen có nhiều thường dạng đa vòng, dạng vòng sáu cạnh hay gặp tự nhiên đặc biệt Fiđelin Fidelanol PHẠM TUẤN ANH K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI O KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP HO Fridelin (C30H50O) Fridelanol (C30H50O) Hợp chất squalen với cấu hình trans chất tiền thân sinh học tất tritecpen squalen Sự đóng vòng squalen theo cách khác tạo nên đa dạng hợp chất tritecpen 1.2.2 Các nhóm Tritecpen 1.2.2.1 Sự đóng vòng squalenoxit chuỗi thuyền - ghế - thuyền – ghế Sự đóng vòng squalenoxit chuỗi thuyền - ghế - thuyền - ghế dẫn đến hình thành cation cầu nối hình vẽ sau: HO R Cation biến đổi tiếp tạo thành hợp chất khác nhau, sau số hợp chất tiêu biểu: PHẠM TUẤN ANH 10 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI a KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Đo CD3OD, b125 MHz, c500 MHz, * tín hiệu bị che khuất Để xác định vị trí nhóm kiểm tra giá trị độ dịch chuyển hoá học vị trí, phổ HMBC đo Trên phổ HMBC, vị trí C-28 (COOH) khẳng định tương tác H-18 với C-28 Hai nhóm OH C-2 C-3 xác định tương tác HMBC H-3 ( 3,36) với C-2 ( 66,5), C-4 ( 38,5), C-5 ( 48,3), C-23 ( 28,7) C-24 ( 22,1) Các tương tác chi tiết phổ HMBC cho phép khâu nối giá trị phổ chi tiết đưa Bảng 3.1 Hình 3.1.f Phổ HMBC hợp chất (1) PHẠM TUẤN ANH 38 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Hình 3.1.g Phổ HMBC hợp chất (1) HO 19 17 HO O 28 OH HO Hình 3.1.h Một số tương tác phổ HMBC hợp chất (1) Các kết phân tích nêu đem so sánh với kiện phổ hợp chất Axit Euscaphic (Axit 2,3,19-trihydroxyurs-12-en-28-oic) [9] trùng khớp hoàn toàn giá trị phổ tương ứng cho phép khẳng định hợp chất (1) axit 2,3,19-trihydroxyurs-12-en-28-oic Hợp chất PHẠM TUẤN ANH 39 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP tìm thấy từ loài Euxaphis japonica, Coleus amboinicus, Jacaranda caucana Pygeum acuminatum Tuy nhiên lại lần phân lập từ Rubus alceaefolius Poir 3.5 Hợp chất RA17-1 (Axit cericic) (2) Phổ NMR hợp chất (2) tương tự phổ tương ứng hợp chất (1) Điều cho thấy chúng tecpenoit Tuy nhiên chi tiết chúng có khác rõ rệt Trên phổ NMR (2), hai nhóm hydroxyl (H 3,80/C 69,4; H 3,06/C 85,8), nhóm axit C 182,1, nối đôi nội vòng ba lần (C 144,4/H 5,33; C 144,4) xuất thêm nhóm CH2OH với độ dịch chuyển hoá học chuyển hoá học đặc trưng cho nhóm hydroxyl bậc hai (C 66,1/3,39 (1H, br s)/ 4,05 (1H, d, J = 11,0 Hz) Chú ý phổ 1H-NMR (2) thấy xuất nhóm metyl bậc bốn Như hợp chất không thuộc khung Ursane hợp chất (1) Các giá trị C 69,4 85,4 hai nhóm hydroxyl phù hợp với hợp chất có khung pentacyclic mà có nhóm 2-OH -OH [10] Hình 3.2.a Phổ 1H-NMR (2) PHẠM TUẤN ANH 40 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP 29 HO 30 20 21 19 12 14 10 23 22 O 16 15 28 OH 27 HO 17 26 25 HO 18 13 11 24 CH2OH Hình 3.2.b Cấu trúc hoá học (2) Hình 3.2.c Phổ 13C-NMR (2) PHẠM TUẤN ANH 41 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Hình 3.2.d Phổ 13C-NMR (2) Bảng 3.2 Kết phổ NMR (2a** [10]) (2) C C C a,b H a,c HMBC 2a [10] (J, Hz) H to C 47,4 47,3 0,93 /1,98* 2 68,6 69,4 3,80 (1H, dt, 11,5, NOESY Ha-24, H-25 4,5) 85,7 85,8 3,06 (1H, d*) 43,9 44,1 - 56,5 57,0 1,00 * 19,4 19,7 1,41/1,65 * 33,6 33,9 1,33/1,51* PHẠM TUẤN ANH 42 2, 4, 23, 24 H3-23 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP 40,0 40,5 - 14 48,5 49,1 1,79* 10 38,5 39,0 - 11 28,8 28,4 2,27 (1H, dt, 10,5, 3,5)/1,63* 12 123,6 124,4 5,33 (1H, d, 3,5) 9, 14, 18 13 144,9 144,4 - 14 42,1 42,4 - 15 29,1 29,3 1,04* 16 24,5 24,9 1,98* 17 46,0 46,4 - 18 44,8 44,9 3,07* 28 19 81,2 82,3 3,25 (1H, d, 4,0) 17, 20, 21 20 35,7 35,8 - - 21 28,3 29,2 1,63*/1,75* 22 29,9 33,7 1,63*/1,78* 23 24,1 23,6 1,24 (3H, s) 24 65,6 66,1 3,39 (1H, br s)/ 4,05 3, 4, 5, 23 H-29, H-12 3, 4, 5, 24 (1H, d, 11,0) 25 17,3 17,1 0,97 (3H, s) 1, 5, 9, 10 26 17,5 17,4 0,74 (3H, s) 7, 8, 9, 14 27 24,8 25,0 1,29 (3H, s) 12 28 180,9 182,1 - - PHẠM TUẤN ANH 43 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI a KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP 29 29,1 28,5 0,94 (3H, s) 19, 20, 30 30 24,8 25,0 0,96 (3H, s) 20, 21 Đo CD3OD, b125 MHz, c500 MHz, * tín hiệu bị che khuất,** Số liệu NMR axit Cericic Tuy nhiên, phổ 13C-NMR số tín hiệu bị che khuất trùng vào với vùng píc dung môi, chúng xác định xác phổ 13CNMR dãn rộng vùng tín hiệu (Hình 3.2.d) Kết kiểm tra phổ hai chiều HSQC Chi tiết giá trị độ dịch chuyển hoá học C H Bảng 3.2 sau phân tích kỹ phổ HSQC 1H-NMR Hình 3.2.e Phổ HSQC (2) PHẠM TUẤN ANH 44 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Hình 3.2.f Phổ HSQC dãn rộng (2) Để xác định vị trí nhóm kiểm tra độ dịch chuyển hoá học proton cacbon, phổ HMBC thực Chi tiết phân tích tương tác phổ Bảng 3.2 Hình 3.2.g-h PHẠM TUẤN ANH 45 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Hình 3.2.g Phổ HMBC dãn rộng (2) PHẠM TUẤN ANH 46 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Hình 3.2.h Phổ HMBC (2) Trên phổ HMBC, tương tác H-3 ( 3,06) với C-2 ( 69,4)/ C-4 ( 44,1)/ C-23 ( 23,6 với C-24 ( 66,1) chứng tỏ hai nhóm OH phải gắn C-2 C-3 Tương tự vậy, tương tác H-18 ( 3,07) C-28 ( 182,1) H-22 ( 1,78) với C-28 chứng tỏ nhóm 28-COOH Ngoài nhóm OH lại khẳng định C-19 tương tác HMBC H19 ( 3,25) với C-20 ( 35,8), C-21 ( 29,2) với C-17 ( 46,4) Như cấu trúc dự kiến (2) đưa Hình 3.2.b hợp chất axit 2,3,19,24-tetrahydroxyolean-12-en-28-oic Các giá trị phổ hợp chất so sánh với giá trị phổ (2) đưa Bảng 3.2 PHẠM TUẤN ANH 47 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Hình 3.2.i Phổ NOESY (2) Tất 29 vị trí trùng khớp, có giá trị C-22 có chênh lệch 3,8 ppm so với tài liệu [11] Để kiểm tra giá trị này, tham khảo giá trị tương ứng hợp chất gần tương tự [seicicoside: C-22 =33,0 [12], arjungenin: C-22 =33,1 [13] thấy giá trị C-22 =33,7 hợp chất (2) hoàn toàn phù hợp Ngoài ra, hoá học lập thể (2) kiểm tra lại phổ NOESY Trên phổ này, tương tác H-2 ( 3,80) với H-24 ( 4,05) với H-25 ( 0,97) khẳng định chúng phía không gian H-2 (hay 2-OH) Nhóm 3-OH khẳng định nhờ tương tác H-3 ( 3,06) với H-23 ( 1,24) Thêm vào đó, nhóm 19-OH PHẠM TUẤN ANH 48 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP khẳng định tương tác H-19 ( 3,25) với H-29 ( 0,94) H-12 ( 5,33) phổ NOESY (2) Cuối công thức phân tử (2) xác định C30H48O6, xuất píc m/z 505 [M+H]+ phổ ESI (2) Hình 3.2.j Phổ ESI-MS (2) PHẠM TUẤN ANH 49 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KẾT LUẬN Đã thu thập mẫu lượng lớn Mâm xôi loài TS Trần Huy Thái, Viện Sinh thái Tài nguyên Sinh vật, Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam xác định Rubus alceaefolius Poir (Rosaceae) Bằng phương pháp sắc ký kết hợp, hợp chất tritecpen phân lập từ dịch chiết metanol Mâm xôi (R alceaefolius) Các hợp chất là: Axit Euscaphic (1) Axit Cericic (2) Cấu trúc hóa học (1) (2) 29 30 30 29 HO HO 20 21 21 19 19 12 13 11 10 HO 14 24 16 15 HO 28 23 22 O 16 28 OH 15 27 HO 14 10 OH 17 26 25 O 18 13 11 27 17 22 26 25 HO 12 18 20 24 CH2OH 23 Axit Cericic (2) Axit Euscaphic (1) Cấu trúc hợp chất xác định nhờ vào phương pháp phổ đại phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều (1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT 135 DEPT 90), hai chiều (HSQC, HMBC NOESY), Phổ khối lượng phun mù điện tử (ESI) PHẠM TUẤN ANH 50 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Nhu, Nguyễn Tập Trần Toàn (2004), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Võ Văn Chi (1997), Từ điển Cây thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội Phan Tống Sơn (1996), Hoá học terpen, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Từ điển Bách khoa Dược học (1999), NXB Từ điển Bách Khoa, Hà Nội Nguyễn Hữu Đĩnh, Đỗ Đình Rãng (2007), Hóa học hữu 1, NXBGD , Hà Nội Tài liệu tiếng Anh Cui C -B., Zhao Q., Cai B., Yao X and Ossadsa H (2002), Two new and four known polyphenolics obtained as new cell-cycle inhibitors from Rubus aleaefolius Poir., Journal of Asian Natural Products Research, Vol (4), pp 243–252 Gan L., Zhao Y., Zhang J., and Jiang F(1998), Isolation and identification of triterpenoids from Rubus alceaefolius Poir., Zhongguo Zhong Yao Za Zhi, Vol 23 (6), pp 361-362 Gan L., Wang B.,8 Liang H., Zhao Y., and Jiang F(2000), Chemical constituents from Rubus alceaefolius Poir., Journal of Beijing Medical University, Vol 32 (3), pp 226-228 Gray L G Yi, A I and Waterman P G (1989), Pentacyclic Triterpenes PHẠM TUẤN ANH 51 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP from the Fruits of Rosa sterilis, Journal of Natural Products, Vol 52, pp 162-167 10 Mahato S B and Kundu A P (1994), 13C-NMR spectra of pentacyclic triterpenoids-A compilantion and some salient features, Phytochemistry, Vol 37, pp 1517-1575 11 Yeo H., Park S Y and Kim J (1998), A-ring contracted triterpenoid from Rosaceae multiflora, Phytochemistry, Vol 48, pp 1399-1401 12 Terreaux C., Maillard M P., Gupta M P and Hostettmann K (1996), Triterpenes and triterpene glycosides from Paradrymonia macrophyla, Phytochemistry, Vol 42, pp 495-499 13 Nandy A K., Podder G., Niranjan P S and Mahato S B (1989), Triterpenoids and their glucosides from Terminalia bellerica, Phytochemistry, Vol 28, pp 2769-2772 PHẠM TUẤN ANH 52 K32A- KHOA HÓA HỌC [...]... H3-2 5), 0,74 (s, H3-2 6), 1,29 (s, H32 7), 0,94 (s, H3-2 9) và 0,96 (s, H3-3 0) 13 C-NMR (125MHz, MeOD),  (ppm): 47,3 (C- 1), 69,4 (C- 2), 85,8 (C- 3), 44,1 (C- 4), 57,0 (C- 5), 19,7 (C- 6), 33,9 (C- 7), 40,5 (C- 8), 49,1 (C- 9), 39,0 (C1 0), 28,4 (C-1 1), 124,4 (C-1 2), 144,4 (C-1 3), 42,4 (C-1 4), 29,3 (C-1 5), 24,9 (C-1 6), 46,4 (C-1 7), 44,9 (C-1 8), 82,3 (C-1 9), 35,8 (C-2 0), 29,2 (C-2 1), 33,7 (C-2 2), 23,6 (C-2 3), 66,1... (s, H3-2 7), 1,21 (s, H3-2 9) và 0,97 (3H, d, J = 6,5 Hz, H3-3 0) 13 C-NMR (125MHz, MeOD),  (ppm): 41,7 (C- 1), 66,5 (C- 2), 79,1 (C- 3), 38,5 (C- 4), 48,3 (C- 5), 18,4 (C- 6), 32,9 (C- 7), 40,0 (C- 8), 47,1 (C- 9), 37,7 (C1 0), 23,9 (C-1 1), 129,2 (C-1 2), 138,5 (C-1 3), 41,5 (C-1 4), 28,4 (C-1 5), 25,8 (C-1 6), 47,9 (C-1 7), 53,5 (C-1 8), 73,4 (C-1 9), 41,6 (C-2 0), 26,3 (C-2 1), 37,9 (C-2 2), 28,7 (C-2 3), 22,1 (C-2 4), 16,5... MeOD),  (ppm): 0,93/1,98 (H2- 1), 3,80 (1H, dt, J = 11,5, 4,5 Hz, H- 2), 3,06 (H- 3), 1,00 (H- 5), 1,41/1,65 (H2- 6), 1,33/1,51 (H2- 7), 1,79 (H- 9), 2,27 (1H, dt, J = 1,5, 3,5 Hz, Ha-11/ 1,63 (Hb-1 1), 5,33 (1H, d, J = 3,5, H-1 2), 1,04 (H2-1 5), 1,98 (H2-1 6), 3,07 (H-1 8), 3,25 (1H, d, J = 4,0 Hz, H-1 9), 1,63/1,75 (H2-2 1), 1,63/1,78 (H2-2 2), 1,24 (s, H3-2 3), 3,39 (brs, Ha2 4), 4,05 (d, J = 11,0 Hz, Hb-2 4), 0,97... metanol của cây Mâm xôi PHẠM TUẤN ANH 29 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI 2 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP RA1B (40 g) Silica gel CC CHCl3/MeOH 100/0-0/100 RA3A (10g) RA3B (5g) RA3C (8g) RA3D (2g) Silica gel CC CHCl3/MeOH/EtOAc: 20/1/1 RA11B (10mg) RA3E (15g) Silica gel CC n-hexan/axeton/ EtOAc: 10/10/1 RA17-1 (60mg) Sơ đồ 3.2.2 Phân lập các hợp chất RA11-B và RA17-1 từ cây Mâm xôi Bột... (ppm):1,23/1,62 (H2- 1), 3,95 (1H, ddd, J = 10,3, 4,1, 3,0 Hz, H- 2), 3,36 (1H, d, J = 3,0 Hz, H- 3), 3,39 (H- 5), 1,37/1,98 (H2- 6), 1,32/1,54 (H2- 7), 1,21 (H- 9), 2,01 (H2-1 1), 5,35 (1H, dd, J = 3,0, 11,0 Hz, H-1 2), 1,06/1,75 (H2-1 5), 1,59 (Ha-16/2,50 (1H, dt, J =13,1, 4,4 Hz, Hb1 6), 2,59 (H-1 8), 1,23 (H-2 0), 1,29/1,68 (H2-2 1), 1,65/1,77 (H2-2 2), 1,02 (s, H3-2 3), 0,88 (s, H3-2 4), 0,96 (s, H3-2 5), 0,78 (s, H3-2 6), 1,28... (C-2 2), 23,6 (C-2 3), 66,1 (C-2 4), 17,1 (C-2 5), 17,4 (C-2 6), 25,0 (C-2 7), 182,1 (C-2 8), 28,5 (C-2 9) và 25,0 (C-3 0) 3.4 Hợp chất RA11-B (Axit Euscaphic) ( 1) [9] Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton 1H-NMR của hợp chất ( 1) có dạng phổ của một hợp chất tritecpen Ngoài tín hiệu  5,35 ppm của một nối đôi đã bị thế ba vị trí còn xuất hiện thêm hai tín hiệu của hai proton thuộc vào các cacbon nối với nguyên tử... ký cột với chất hấp phụ là silica gel, với các hệ dung môi CHCl 3/MeOH/EtOAC và n-hexan/axeton/ EtOAC nhận được các hợp chất RA11-B (10mg) và RA17-1 (60mg) (Sơ đồ 2) 3.3 Hằng số vật lí và các dữ kiện phổ của các hợp chất Các chất đã phân lập được chúng tôi tiến hành phân tích cấu trúc bằng các phương pháp vật lí như sau: Đo điểm nóng chảy, độ quay cực, kết hợp với PHẠM TUẤN ANH 30 K32A- KHOA HÓA... phổ HSQC và các giá trị của chúng được đưa ra chi tiết trên bảng 3.1 Hình 3.1.d Phổ HSQC của hợp chất ( 1) PHẠM TUẤN ANH 35 K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI 2 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Hình 3.1.e Phổ HSQC dãn rộng của hợp chất ( 1) Bảng 3.1 Kết quả phổ NMR của hợp chất ( 1) H a,c HMBC (J, Hz) (H – C) C [8] C a,b 1 41,4 (t) 41,7 (t) 1,23/1,62 (m)* 2 65,2 (d) 66,5 (d) 3,95 (1H,... là những dung môi phân cực hơn các hidrocacbon thế clo Người ta cho rằng các dung môi thuộc nhóm rượu sẽ thấm tốt hơn qua màng tế bào nên quá trình chiết với các dung môi này sẽ thu được lượng lớn các thành phần trong tế bào Trái lại clorofoc khả năng phân cực thấp hơn có thể rửa giải các chất nằm ngoài tế bào Các ancol phần lớn là các chất chuyển hóa phân cực cùng với các hợp chất phân cực trung bình... việc phân lập các hợp chất hữu cơ nói chung và các hợp chất thiên nhiên nói riêng 1.4.1 Đặc điểm chung của phương pháp sắc kí Sắc kí là phương pháp tách các chất dựa vào sự khác nhau về bản chất hấp thụ và sự phân bố khác nhau của chúng giữa hai pha động và tĩnh Sắc kí gồm có pha tĩnh và pha động Khi tiếp xúc với pha tĩnh, các cấu tử của hỗn hợp sẽ phân bố giữa pha động và pha tĩnh tương ứng với các ... tài “ Nghiên cứu phân lập hợp chất tritecpen từ Mâm xôi Nhiệm vụ khóa luận Phân lập số hợp chất tritecpen từ Mâm xôi Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập phương pháp phổ PHẠM TUẤN ANH... cấu trúc số hợp chất phân lập từ loài R alceaefolius PHẠM TUẤN ANH K32A- KHOA HÓA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Các hợp chất phân lập từ Rubus alceaefolius. .. Fridelanol (C30H50O) Hợp chất squalen với cấu hình trans chất tiền thân sinh học tất tritecpen squalen Sự đóng vòng squalen theo cách khác tạo nên đa dạng hợp chất tritecpen 1.2.2 Các nhóm Tritecpen 1.2.2.1