Góp phần nghiên cứu cây hồi núi tỉnh quảng nam

Xu hướng của xã hội ngày nay là trử vc với thiên nhiên vì vậy những hương liệu giờ đây được sử dụng chủ yếu không phải là những sản phẩm tổng hợp hoá học mà từ các nguồn tinh dầu được cấ

BỘ YTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI

GÓP PHAN NGHlễN cứu cnv HỔI NÚI

TỈNH QUẢNG NAM

KHOA LUẬN TỐT NGHIỆP

Người thực hiện: Nguyễn Thị lan Phương

LỜI CẢM ƠN

Nhân dịp báo cáo công trình tốt nghiệp Dược sĩ Đại Học, em xin trân trọng cảm ơn sự giúp đỡ nhiệt tình và quý báu của PGS, TS Nguyễn Thị Tâm

đã trực tiếp hướng dẫn em hoàn thành công trình tốt nghiệp này

Em cũng xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến:

_ - _ , ,

• KS Trần Quang Thuý - y iện Dinh Dưỡng Hà Nội đã giúp em nghiên cứu thành phần hoá học

• KS Trần Quang - Viện Dinh Dirỡiig Hà Nội

• TS Nguyễn Viết Thàn - đã giúp em nghiên cứu đặc điểm vi học

• DS Đặng Ngọc Phái - sở Y Tê tỉnh Quảng Nam đã cung cấp nguyên liệu cho em

Em cũng xin chân thành cảm ơn toàn thể các thầy cô trong bộ môn Dược liệu, các phòng ban, cùng toàn thể các thầy cô giáo trong trường đã dành cho em sự quan tâm, dạy dỗ và giúp đỡ em trong những năm học tại trường

Hà Nội ngày 20 - 5 -2000

Sinh viên

Nguyễn Thị Lan Phương

MỤC LỤCt •

Trang

PHẦN II: TỔNG QUAN

công bố trong nước và thế giới

3.1.2 Phương pháp nghiên cứu

PHẦN I

Hiện nay khi xã hội ngày càng phát triển, đời sống của con người càng được nâng cao thì vấn đề sử dụng hương liệu trong các lĩnh vực như: Thực phẩm, mỹ phẩm và cả lĩnh vực làm thuốc ngày càng được coi trọng Xu hướng của xã hội ngày nay là trử vc với thiên nhiên vì vậy những hương liệu giờ đây được sử dụng chủ yếu không phải là những sản phẩm tổng hợp hoá học mà từ các nguồn tinh dầu được cất từ cỏ cây, hoa lá là chủ yếu

Tinh dầu Hồi là một trong những nguồn nguyên liệu được đùng rất nhiều và là một trong những tinh dáu có giá trị kinh tế cao ở Việt Nam Tinh

dầu Hồi dược cất từ cây Hồi có lên khoa học là Illicinm verum Hook f họ Hồi Illicium Tuy nhiên ở Việt Nam ngoài loài lllicium verurn H o o k.f kể trên còn có nhiều loài khác nữa cũng thuộc chi Illicium đã được phát hiện ở

các vùng núi cao của đất nước (Lạng Sơn, Nghệ An, Ninh Bình, Sa Pa ) nhưng chúng lại không cho tinh dầu có giá trị mà chỉ được coi là Hồi độc Vì vậy để đóng góp một phần nhỏ bé trong việc nghiên cứu, phân loại, khai thác

sử dụng và chống nhầm lẫn một sô loài Ihuộc chi ỉììicium mọc hoang ở đất

nước ta Chúng tôi đã lấy mẫu Hồi núi mọc hoang tại tỉnh Quảng Nam để làm

đề tài nghiên cứu nhằm thực hiện những mục tiêu sau đây:

ỉ Nghiên cứu về đặc điểm hình thái và giải phẫu cửa lá và quả Hồi núi được lấy ở Quảng Nam.

2 Xác định hàm lượng tỉnh dầu, thành phần hoá học của tỉnh dầu trong lá và quả.

3 Xác định loài cho mẩu Hồi núi Quảng Nam này

PHẨN II

TổNG QUAN2.1 NHŨNG NGHIÊN c ứ u VỂ CHI ILLICIUM ĐÃ Đ ư ợ c CỐNG B ố TRONG NƯỚC VÀ THẾ GIỚI 16, 10, 20, 22].

Qua tham khảo tài liệu, cho tiến nay clã có 16 loài thuộc chi ỉllicium

được công bố Những loài này phân bố ở vùng Bắc Mỹ, Đại Tây Dương, Việt Nam, Trung Quốc, Nhật Ban, Lào, Campuchia

1 / anisatum Hồi IĨ1ỌC ớ Nhật Bán Qủa hình sao, màu nâu

2 I arbornescens Hay ta: Hồi Đài Loan mọc ở độ cao 1000 - 2500m

Quả đại 12 - 16 noãn

3 ỉ.ỷargesii Franch: Đại Hồi Farges có ở Sa Pa Việt Nam Quả đại 10 -

12 noãn

4 ỉ.ỷìoridanum Hồi Florida mọc ở Tây Nam của nước Mỹ.

5 / griffithii H ook.f et Tltoms: Hồi núi mọc hoang ở Cao Bằng, Lạng

Sơn, Hoà Bình, Lang Bian, Bảo Lộc Quả đại 10 - 13 noãn

6 / griffithìi vơr.cambodianum Finet et Gagnep Mọc hoang ở vùng

núi Kon Tum, Lang Bian Quả đại 8-13 noãn

7 1 henryi Dìels Hồi đỏ có ở vùng Hà Nam Thiểm Tây (Trung Quốc)

Quả đại 8 noãn

8 / lanceolatum A c Smith Hồi dại phân bố ở phía nam Trường

Giang (Trung Quốc) Quả đại 10-13 noãn, cuống hoa dài

9 / majus Hook eí Thom Đại Hồi to được phát hiện trên dãy

Fansipan Quả đại 14-15 noãn

10 I micranthum Dum Đại Hồi hoa nhỏ, có ở vùng núi cao Quả đại

7-8 noãn

11 / parvi/lorum M ern Đại Hồi hoa nhỏ có ở vùng núi Bạch Mã,

Dana Quả đại 7-8 noãn

12 / petelơtii A c Sm Đại Hồi Petelot Có ở Lô-sui-tông gần Sa Pa

Quả đại 7 noãn

13 / religiosum Sieb Hồi sao (Star - Anis) có ở Nhật bản.

14 I ternstroemioicìes A c Smit/ỉ Hồi hậu bì tương có ở vùng Quảng

Đông (Trung Quốc) Quả đại 12-14 noãn, cuống hoa ngắn

15 / tsai L c Sm Đại Hồi Sa mọc hoang có ở Fansipan (Rừng thưa

Cây gỗ nhỏ hoặc bụi, ihirờng thơm lá đơn nguyên, mọc thành chùm 3-4

lá tạo thành vòng giả Hoa đẹp, lưỡng tính, đều Đế hoa lồi Bao hoa xếp xoắn thường nhiều, những chiếc ngoài cùng thường nhỏ và đồi khi là dạng lá bắc, những chiếc ở trong lớn dần, nhưng những chiếc trong cùng lại nhỏ và đôi khi chuyển tiếp thành nhị lép Nhị thường nhiều (4 - 50) xếp xoắn ốc, lá noãn nhiều ( 5 - 2 1 thường 7 - 1 5 ) xếp vòng và thường bị ép mạnh ở bên sườn Quả gồm nhiều đại xoè thành hình sao

ở Việt Nam cũng như trên thế giới chỉ có loài / verum Hook / đã

được nghiên cứu khai thác sử dụng và tinh dổu quả của loài này là một trong những tinh dầu được sử dụng lâu đời trên thế giới còn những loài khác đang

là đối tượng nghiên cứu về thực vật học cũng như thành phần hoá học Trong

những loài đó thì loài l griffithii tìook f et Thoms là loài được nghiên cứu

nhiều hơn cả

2.2.1.1 l.verum H ook.f (Đại hồi, Bát giác hồi hương ) [3, 5]

Cây nhỏ cao 2 - 6m, hình dạng toàn cAy thon, hình quả trám, thân mọc thẳng cành đễ gãy Lá mọc gần thành chùm 3 - 4 lá ở đầu cành hoặc 5-6 lá, dài 8 - 12cm, rộng 3 - 4 cm, dòn vò nál có mùi thơm

Hoa mọc đơn độc ở kẽ lá, cánh hoa có thể màu trắng, màu hồng hoặc tím hồng

Quả Hồi 6 - 8 đại (có khi 8 - 10 đại) xếp hình sao, đường kính trung bình 2,5 - 3cm, dày 6 - 1 0 mm, cuống quả dài 2 - 4 cm Quả tươi mềm có màu xanh, khi chín khô cứng có màu nau sầm Trên mỗi đại sẽ nứt làm hai, để lộ một hạt màu nâu nhạt, nhẵn bóng

Lá, cuống, hoa, quả đều chứa tinh dầu

2.2.1.2 / grỉffithii f et Thoms (Hồi núi): [3,6]

Câyto, cao 10 - 20m, lá hình bầu dục, không rụng đai nhẵn Mặt trên phiến lá xanh đậm, mặt dưới nhạt hơn lá dài 10 - 14cm, rộng 4 - 5cm, có 5 - 7 đôi gân phụ nổi rõ ở mặt dưới Lá tập trung thành từng cụm 4 - 5 lá giống như mọc thành vòng giả, cuống lá dài 2 - 4 cm

Hoa màu đỏ hồng hoặc màu trắng ngà, mọc đơn độc hoặc thành chùm

từ 2-4 hoa ở kẽ lá Cuống hoa có thể đài từ 2 - 4cm, hoặc ngắnl - 1,5 cm.

Quả gồm nhiều đại (10 - 13 đại) mọc toả theo hình nan hoa, hai bên dẹt,

lá noãn cụt ở phía gốc, đầu có mỏ hẹp và dài bằng lá noãn đầu cong lên giống chiếc liềm

- Vỏ quả ngoài: Tế bào biểu bì có lỗ khí, phủ một lớp cutin lồi lên.

- Vỏ quả giữa: gồm những tổ chức rão ra ở vùng ngoài và sít nhau ở vùng trong Có nhiều bó libe gỗ, nhiều tế bào tiết tinh dổu rãi rác, nhiều thể cứng hình dáng đặc biệt

- Vỏ quả trong: Gồm 1 dãy tế bào có hình dạng khác nhau tuỳ nơi quan sát Phần bao bọc khoang quả gồm các tế bào hình chữ nhật màng tương đối mỏng, xếp thành hình giậu Phẩn tương írng với đường nứt gồm các lế bào mô cứng màng rất dày và có các ống trao đổi v ề phía trong được tăng cường bởi

1 khối tế bào mô cứng hình nhiều cạnh, màng rất dày

2 2 2 2 ỉ grỉffìthìì H ook.f et Thorns.

Theo nghiên cứu của một số lác giả [6, 7] về đặc điểm vi học của lá và

quả của loài / grífflthii H ook.Ị et T h o m khồng có sự khác biệt so với loài

/ verum Hook / chỉ có sự vắng mặt của thể cứng trong mô mềm của phiến

lá, gân lá và tế bào vỏ quả giữa Thay vào dó là sự xuấl hiện của những tế bào

mò cứng bao quanh bó libe gỗ của gân lá

2.3 PHẢN BỐ, THU HÁI:

2.3.1 Phân bô [1 0 ,1 2 ,1 6 ]

Chi ỉlỉicium phân bố rất rộng có mặt ở hổu hết các khu vực trên thế giới

như ở Đông Bắc Ấn Độ, Miến Điện, Đông Dương, Trung Quốc, Indonexia, Phillipin và cả tới Đông Nam Bắc Mỹ (từ Floril dến Luician), phía đông

Mêhicô, các đảo CuBa, Haiti, nhưng phần lớn các loài ở Trung Quốc.

Tại Việt Nam hầu hết các loài thuộc chi ỉlliciiim phân bố rải rác khắp đất nước Riêng đối với loài l.ventm Hook f là được trồng ở một số vùng thuộc miền núi phía Bắc nước ta đặc biệt là ở tỉnh Lạng Son còn các loài khác

đều mọc hoang ở hẩu hết các tỉnh miền núi phía Bắc, miền Trung và Nam Trung Bộ

2.3.2 Thu hái [3]

Hiện nay trừ loài ỉ.vem m Hook / được trồng và sử dụng còn hầu hết

các loài Hồi mọc hoang khác đều không thấy khai thác và sử dụng, thường chỉ thấy hái nhầm hay pha lẫn với Đại hồi íhạt với mục đích giả mạo

Quả loài / verum Hook f được thu hái vào hai vụ trong một năm Vụ

chính gọi là vụ mùa vào tháng 8, và vụ chiêm vào tháng 12

2.4 THÀNH PHẦN HOÁ HỌC:

Những nghiên cứu về thành phần hoá học của các loài thuộc chi

Illicium đặc biệt là loài ỉ.verum Htìũk / đã được nghiên cứu từ rất lâu và

trong những năm gần đây các công trình nghiên cứu về các loài Hồi ndi mọc

hoang ở nước ta cũng bước đầu có nhiều kết quả và các nghiên cứu được tiến

hành chủ yếu từ loài ỉ.griffithii H ook.f et Thoms.

2.4.1 I.verum Hook f.

2.4.Ĩ.1 Lá: [17]

- Đại Hồi Trung Quốc có khoảng i% tinh dầu Tinh dẩu này có chứa

lượng Anethol ít hơn là tinh dổu quả

- Tinh dầu lá Đại hồi Việt Nam chứa 1% tinh dầu, thành phần chính của tinh dầu là Anethol

2.4.1.2 Quả: [17]

II Hàm lượng:

- 2,5 - 3% tính theo nguyên liệu tươi.

- 7 - 8% tính theo nguycn liệu khô

Dược Điển Việt Nam II - lập 3 quy định: quá Đại Hồi phải chứa ít nhất

2.4.2 I griíTithii Hook f et Thoms.

Theo nghiên cứu mới nhất của Nguyễn Thị Tâm và cộng sự [6, 7, 18]

đã nghiên cứu tinh dầu quả của một loài Hồi núi mọc hoang ở phía Bắc với

hàm lượng Saữol > 70% Tác giả đã nghicn cứu tinh dổu lá, cành, vỏ thân, vỏ

rễ của các loại Hồi núi ở Lạng Sưn, Nghệ An, Ninh Bình và dã xác dịnh được

3 tuýp khác nhau:

- Tuýp 1: Hồi núi mọc ở xã Hồng Phong, huyện Cao lộc, tỉnh Lạng Sơn

có hàm lượng tinh đẩu trong lá dáng ké (2,39-4,75%) được đặc trưng bởi lượng Safrol rất cao (60%)

- Tuýp 2: Được phát hiện ở xã Tan Mỹ, huyện Văn Lang, tỉnh Lạng Sơn có hàm lượng tinh dầu (rong lá 3,38% đặc trưng bởi lượng Methyl eugenol cao (22,8%)

- Tuýp 3: Hồi núi Ninh Bình có hàm lượng tinh dầu trong lá, cành, vỏ thân, vỏ rễ lần lượt là 1,8%, 1,6%, 0,8% và 0,9% được đặc trưng bởi hàm lượng Linalool cao trong cả lá (30,3%), cành (33,4%), và vỏ thân (22,6%)

Ngoài ra Subhash và cộng sự dã nghiên cứu quả của loài / griffìthii

H ook.f et Tltoms ở Ấn Độ dã xác (.lịnh (lược hàm lưựng tinh dẩu trong quá

0,5% với 27 thành phán trong đó thành phồn chính là: Linalool (19,6%); p - Methoxy phenyl acetol (11,8%); Terpinen - 4 - ol (11,0%); Limonene (10,6%); và Saírol (10,1%) [21]

Tại Việt Nam, Nguyễn Xuân Dũng và cộng sự đã nghiên cứu tinh dầu quả Hồi núi ở Lâm Đồng cũng thuộc loài này bằng phương pháp sắc ký khí

và khối phổ đã xác định được hàm lượng tinh dầu trong quả là: 2,0% với hơn

70 thành phần trong đó a - Pinene (19,4%); Linalooỉ (19,0%); Limoncnc (13,2%) và 1,8 - Cineole (9,3%) là những thành phần chiếm tỉ lệ cao [19]

Ngoài 2 loài trên theo tài liệu số [17] tác giả đã nghiên cứu loài /

religiosum Sieb và / parviflorum M e n với các kết quả:

/ religiosum Sieb: - Tinh dổu lá: Hàm lượng tinh dầu trong lá là 1%

với các thành phần hoá học chính: Saírol,

Cineol, Linalool và không có Anethol.

- Tinh dầu quả: Hàm lượng tinh dầu trong quả là

0,044% trong đó chứa Eugcnol, Saííol và có thổ 1 terpen khác là Shikimen

/ parviflorum M err: linh tlỉìu lá cỏ hàm lượng : cứ 26 kg được liệu tươi

cất được i 2,1 g tinh dầu với thành phần hoá học chủ yếu là saừol (90%)

Quả Hồi còn được dùng trong kỹ nghệ thực phẩm, làm gia vị, làm thơm bánh kẹo, pha nước uống

- Trong Đông Y: Đại Hồi có tác đụng khứ hàn, kiện tỳ, khai vị và thường được dùng trong các đơn thuốc: Cảm hàn, đau bụng thổ tả; hôi miệng, đau lưng, chữa cổ trướng và thủng trướng mạn tính; Đại tiểu tiện không lợi

- Tinh dầu Hồi chủ yếu dùng để chế rượu mùi, rượu khai vị Ngoài ra còn là nguồn nguyên liệu để tổng hợp Hoocmon

Đối với các loài khác, hiện nay không Ihấy nhân dân ta sử dụng, , thường chỉ do dùng nhầm gây ra những vụ ngộ độc do tinh dầu có chứa chất độc như tinh dẩu Hồi nuí: Có chứa Shikimin, Shikimitoxin làm nôn mửa, rát họng, đau bụng, chân tay lạnh, chảy nước rãi

PHẦN III

THỰC NGHIỆM3.1 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU:

3.1.1 Nguyên liệu:

Cây Hồi núi mọc hoang ở vùng núi cao thuộc thôn 2, xã Trà Linh, huyện Trà My, tỉnh Quảng Nam

Lấy mẫu: Lá và quả

Thời gian lấy mẫu: - Lá: Tháng 8 năm 1999

- Ọuả: Tháng 10 nam 1998

3.1.2 Phương pháp nghiên cứu:

3.1.2.1 Mô tà đặc điếm hình thái:

- Quan sát cây tại nơi mọc.

- Mô tả về hình thái

- Thu thập mẫu, chụp ảnh

- Làm mẫu cAy khô

3.1.2.2 Nghiên cứu về đặc điểm vi học:

- Vi phẫu lá và quả: tiến hành nhuộm kép theo tài liệu " Thực tập

dược liệu " (Bộ môn Dược liệu trường Đại Học Dược Hà Nội) và chụp ảnh vi phẫu qua kính hiển vi

- Soi bột lá và bột qua của cây Hồi núi Quang Nam

3.1.2.3 Xác định hàm lượng tỉnh dầu:

- Việc định lượng tinh dầu được tiến hành trên dụng cụ định

lượng tinh đầu cải tiến của Bộ môn Dược liệu trường Đại Học Dược Hà Nôi với độ chính xác 0,02 mỉ

- Thời gian cất (kể từ lúc sôi): 3h (đối với lá)

6h (đối với quả)-Hàm lượng tinh dầu tính trên dược liệu tươi và khô tuyệt đối

3.1.2.4 Phân tích tinh dầu bằng sắc ký khí và khối p h ổ (GC-MS):

Tiến hành tại Viện Dinh Dưỡng Hà Nội

Hoa mọc đơn độc ở kẽ lá Hoa nở vào mùa xuân từ tháng 1 đếntháng 4.

Hoa lúc đầu màu trắng sau gán Ihành quả chuyển màu hồng, hoa có mùi thơm Do điều kiện lấy mẫu quá khó khăn vì cây Hồi núi mọc trên triền núi cao, giao thông không thuận lợi cho nên chúng tôi không thể lấy mẫu hoa

Quả to, gồm 12-13 đại xếp thành hình sao, đường kính trung bình

từ 3,5-4,5 cm Khi còn tươi qua có màu xanh, khi chín khô cứng có màu nâu đen, trên mỗi đại nứt làm hai để lộ 1 hạt nhẵn bóng, có màu nâu nhạt Quả thường có vào mùa hè, chín vào mùa thu Độ dài của cuống quả: 2-3 cm

Chúng tôi đà tiến hành đo kích thước của lá trên cùng một cành, đo đường kính của quả, độ dài cuống quả, cân khối lượng từng quả, đếm số noãn

có trong một quả và số hạt lép có trong từng quả Số lần đo là 10 trên các lá

và quả khác nhau Kết quả được trình bày ở bảng 1,2 và ảnh:

-

12-Bảngl: Kích thước trung bình của lá trong 10 lần đo.

Bảng 2: Kích thước trung bình của quả, cuống quả, khối lượng

trung bình quả và sô noãn, sô liạt lép có trong 1 quả.

LẦN ĐO CUỐNG QUẢ QUẢ

Dài ịcm) Dường kính (cm) Sơ no án Ị quả Sờ' hạt lép / ợi/íí A7iơỉ /iạm£ / ỢMÉ?

Ảnh mẫu Hồi Núi Quảng Nam

14