Góp phần nghiên cứu nhân giống vô tính một số cây thuốc thuộc đề tài bảo tồn nguồn gen cây thuốc, tại Trường ĐHDHN

Từ xưa con người đã biết lợi dụng tính chất sinh sản vô tính của cây cỏ để áp dụng vào việc nhân giống và trồng trọt như việc giâm cành, chiết cành, ghép cành và gần đây là việc nuôi cấy

BỘ Y T Ế

TRƯỜNG ĐẠI HỌC ■ ■ Dược HÀ NỘI■ ■

Sinh viên

CHUON PISETH

CÂY THUỐC THUỘC DÊ TÀI BẢO TỒN NGUỒN GEN CÂY THUỐC,

(KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Dược s ĩ ĐẠI HỌC 1996 - 2001)

Cùng vói sự giúp đỡ của các thầy cô giáo trong Bô môn Thực vật,

đã tạo điều kiện thuận lọi, giúp đỡ tôi hoàn thành khoá luận này

Tôi xin chân thành cảm ơn những sự giúp đỡ quý báu đó

Sinh Viên

CHUON PISETH

CHÚ GIẢI CHỮ VIẾT TẮT

1 BT: Bình thường

2 B.tẻ: Bánh tẻ

3 IBA: Acid indol Butyric

4 NNA: Acid Naphtyl Acetic

5 SL: Số lượng

6 TB: Trung bình

MỤC LỤC

TrangLời cảm ơn

Chú giải chữ viết tắt

2.1 Vài nét về tình hình nghiên cứu nhân giống cây thuốc 3

I ĐẶT VẤN ĐỂ

Trong tự nhiên, thực vật không những chỉ sinh sản hữu tính, mà còn sinh sản vô tính, sự sinh sản không qua sự kết hợp giữa các tế bào mang tính đực và tính cái Sự sinh sản vô tính bao gồm sinh sản bằng bào tử, bào tử phân sinh, sinh sản bằng chồi, cành, củ, rễ, lá Những thực vật bậc thấp chủ yếu là sinh sản

vô tính, còn ở thực vật bậc cao sinh sản hữu tính là chính Tuy nhiên điều đó chỉ

có ý nghĩa tương đối vì có thực vật vừa sinh sản hữu tính vừa sinh sản vô tính

Từ xưa con người đã biết lợi dụng tính chất sinh sản vô tính của cây cỏ để

áp dụng vào việc nhân giống và trồng trọt như việc giâm cành, chiết cành, ghép cành và gần đây là việc nuôi cấy mô, tế bào Ưu điểm của việc nhân giống vô tính là: dễ kiếm nguyên liệu, tiết kiệm thời gian, cây sớm ra hoa kết quả và giữ được đặc tính di truyền của cây mẹ, và trong nhiều trường hợp cho hệ số nhân giống cao

Hiện nay có rất nhiều loài cây thuốc đang có nguy cơ bị diệt chủng do sự mất đi hệ sinh thái, và sự khai thác quá mức cần được bảo vệ và phát triển, Để tăng cường số lượng cá thể đảm bảo tính an toàn cần thiết phải nghiên cứu nhân giống vô tính, vì các cây còn lại thường là những cây non phải chờ một thời gian dài mới có thể ra hoa kết quả

Bộ môn Thực vật trong quá trình nghiên cứu cây thuốc ở vườn Quốc gia Ba

Vì đã nhận thấy có nhiều cây thuốc đang bị khai thác quá mức, ngày càng trở nên hiếm và có nguy cơ bị diệt chủng, cần phải nhân giống ngay để đảm bảo tính an toàn về giống và có thể cung cấp giống cho nhân dân địa phương trồng để thu hoạch Với sự cần thiết đó chứỉig tôi thực hỉệỉì khóa luận : ”Góp phần nghiên cứu

nhân giống vô tính một số cây thuốc thuộc đề tài bảo tồn nguồn gen cây thuốc tại trường đại học Dược Hà Nội”

Vì thời gian có hạn chúng tôi chỉ nghiên cứu nhân giống 4 loài mà nhân dân xã Ba Vì dùng nhiều trong các bài thuốc của họ và là những cây thuốc quí hiếm ở địa phương đó là các loài:

- Cốt khí dây: Ventilago leiocarpa Benth., họ Táo ta (Rhamnaceae).

- Hoàng đằng: Fibraurea tinctoria Lour., họ Tiết dê (Menispermaceae)

- Râu hùm: Tacca chantrieri André họ Râu hùm cTaccaceae)

- Cây đìa sản: I le x , họ (Aqiàfoliaceae) (cây thuốc của dân tộc Dao)

II TỔNG QUAN

2.1 Vài nét về tình hình nghiên cứu nhân giống cây thuốc.

Hiện nay đang có sự suy thoái về đa dạng sinh học trong đó có cây thuốc

Sự bảo tồn nguồn gen sinh vật nói chung và cây thuốc nói riêng là nhiệm vụ vô cùng quan trọng, ảnh hưởng trực tiếp đến cuộc sống con người

Trong lĩnh vực cây thuốc có rất nhiều cơ quan, nhiều tác giả đang hoạt động tích cực để góp phần bảo tồn nguồn gen cây thuốc

Từ năm 1990 Viện Dược liệu đã có đề án bảo tồn nguồn gen và giống cây thuốc, bộ môn Thực vật đã tham gia đề án này Một trong những nhiệm vụ quan trọng của đề án là bảo nguồn gen cây thuốc dân tộc Hiện có một số loài cây thuốc đang bị khai thác quá mức dẫn tới nguy cơ bị tiêu diệt cần được nghiên cứu bảo tồn

Thực hiện nhiệm vụ này Th.s Trần Văn ơn, Nguyễn Thị Ngọc Diệp [4] cùng với bà con người Dao đã nghiên cứu nhân giống bằng giâm cành và đã thành công với nhiều cây thuốc quí hiếm tại xã Ba Vì

PGS,TSKH Trần Công Khánh [8] nghiên cứu trồng và tái sinh cây râu hùm

đã kết luận có thể nhân giống cây này từ những đoạn thân rễ, tỷ lệ nẩy mầm cao

Cây hoàng đằng được ghi trong sách đỏ [10], cây cốt khí dây, cây râu hùm, cây đìa sản là nhũng cây thuốc được người Dao tại Ba Vì dùng rất nhiều trong các bài thuốc của họ, hiện đang có nguy cơ bị tiêu diệt cần được nhân giống và phát triển trồng để thu hái và bảo tồn Việc nhân giống các cây này là rất cần cho chiến lược bảo tồn đa đạng sinh vật nói chung và cây thuốc nói riêng đặc biệt quan trọng đối với người Dao tại Ba Vì

2.2 Đại cương về nhân giống vô tính

Nhân giống vô tính cây có thể chia làm hai loại:

2.2.1 Nhân giống vô tính tụ nhiên

Nhân giống vô tính tự nhiên là lợi dụng khả năng tự phân chia của các cơ quan sinh dưỡng của cơ thể cây trồng, cùng với việc hình thành các cơ quan m ớ i, tạo thành một cá thể mới có khả năng sống độc lập và mang các đặc tính tình trạng của cây mẹ [12 ]

Hình thức nhân giống vô tính:

Tách chồi : Là tách các chồi nách , chồi ngầm , chồi thân, chồi ngọn, bao gồm: thân, lá và các rễ bất định mọc ở thân ngầm hoặc thân khí sinh Các chồi này sau khi tách ra có thể đem trồng ngay hoặc cần huấn luyện, bồi dưỡng trong vườn ươm đến khi đủ tiêu chuẩn mới đem trồng ra vườn sản xuất

Những cây giống loại này thường nhanh ra quả nhưng thường mang các mầm mống sâu bệnh [12 ]

Chú ý: lấy những chồi sinh trưởng khỏe, mập, không bị sâu bệnh ký sinh

Chỉ sử dụng những chồi ở vị trí có đủ ánh sáng, không lấy những chồi mọc ở vị

trí quá thấp (nếu là chồi thân) Cần làm vườn nhân và huấn luyện cây giống để tạo độ đồng đều cao trong lô trồng ở vườn sản xuất Trước khi trồng cần phải bỏ bớt lá già, cắt gọn bớt rễ già, phần thân ngầm bị sùng hà, và có thể xử lý thuốc chống nấm, vi khuẩn và sâu hại [6,12 ]

2.2.2 Nhân giống vô tính nhân tạo

Nhân giống vô tính nhân tạo là sử dụng các biện pháp kỹ thuật cơ giới, hóa học, sinh học để thay đổi các yếu tố môi trường, các yếu tố nội sinh trong một bộ phận cơ thể thực vật để tạo khả năng tái sinh các cơ quan đã mất đi hoặc chưa hình thành của nó hoặc là gắn một bộ phận của cây này vào một bộ phận của câv

2.2.2.I Phương pháp giâm cành

So với các phương pháp ghép mắt, ghép cành và chiết cành thì phươngpháp giâm cành thông dụng hơn và dễ làm hơn Phương pháp này cũng cho hệ số nhân giống cao Ví dụ từ một cây chanh quí mà ta muốn nhân ra, nếu ta chiết cành thì chỉ được độ vài chục cây, nhưng nếu giâm cành ta có thể được hàng nghìn cây Phương pháp này đơn giản , mọi người đều có thể làm được [6 ]

Đa số cây cối đều có thể giâm cành được, ví dụ:

- Cây nông nghiệp: bắp cải, khoai tây

- Cây lâm nghiệp: bạch đàn, thông, quế, trẩu V V

- Cây công nghiệp: cà phê, chè, hồ tiêu

- Cây ăn quả: cam, chanh, quýt, bưởi, nho, dâu, mơ, mận, gioi

- Cây hoa, cây cảnh: hồng, cúc, cẩm chướng, thược dược, si, đa, trúc đào, đai vàng, trà mi

có thể dưới các bóng rợp của các cây to Khung của nhà giâm cành tốt nhất là

khác, tạo thành một cơ thể mới hoàn chỉnh, sống độc lập với cây mẹ và mang đặctính di truyền của cây mẹ Hình thức nhân giống vô tính nhân tạo gồm: giâmcành, chiết và ghép [12]

khung tre, hoặc chỉ cần đóng cọc ,che cót Trong điều kiện ở Việt Nam hiện nay

nhà giâm cành lợp giấy poli ethylen, xung quanh che cót là rất thích hợp để có thể điều chỉnh ánh sáng, độ ẩm và nhiệt độ Quy cách kích thước cho một vườn

ươm nhỏ: chiều rộng từ 2,5- 4m, dài 5-10m , chiều cao l,6-l,8m (chiều cao ở bên

sườn mái chỉ cần từ 0,8- lm cũng có thể thấp hơn Nền nhà giâm cành chia thành các luống rộng từ l-l,2m và cao 10 -15cm, mặt bằng phẳng, xung quanh các luống có xây một hàng gạch đơn 2 lớp bao quanh Khoảng cách giữa các ô gạch 30-40 cm , để đi lại chăm bón dễ dàng Trong các ô rải một lớp cát non sạch dày10-20 cm cũng có thể dùng chất nền là 1/3 cát sạch với 1/3 mùn cưa sạch có ngâm qua nước vôi trong phơi khô Cát non hoàn toàn có thể là chất nền phổ biến cho nhiều loại cây[6,7,12 ]

Dụng cụ tưới ẩm có thể là máy phun mù hoặc bình phun thuốc trừ sâu rửa sạch [6,7,12 ]

* Chọn cành g iâ n i:

Nên chọn những cành “ bánh tẻ”, có thể non hơn hoặc già hơn tùy thuộc vào

chủng loại cây Nguyên tắc chung là chọn những cành ở lưng chừng tán và những cành ở cành cấp cao; loại trừ những cành có sâu bệnh [6,7,12].

* Kỹ thuật giâm cành:

Cắt cành giống vào thời gian không có nắng vào sáng sớm và chiều tối Tránh cắt cành lúc chưa có nắng to, cành lá sẽ bị mất nước đột ngột tỷ lệ ra rễ sẽ kém Cành cắt xong cần được phun nước cho ướt lá rồi dựng đứng trong xô hoặc thùng có từ 5-7cm nước sạch, sau đó đậy lại bằng một tấm vải màu tối đã thấm ướt [6,7,12 ]

Cành sẽ được chuẩn bị lại để xử lý trong phòng thoáng mát Cát cành từng đoạn dài từ 5-7 cm, có từ 2-4 lá tùy diện tích mắt lá Đối với những cây dễ ra rễ,

sau khi cắt xong cắm thẳng vào nền giâm, tuy nhiên nếu được xử lý bằng hóa

chất ở nồng độ thấp cây sẽ ra rễ nhanh hơn, nhiều hơn và có tỷ lệ cây xuất vườn

sẽ cao hơn Đối với những cây khó ra rễ nhất thiết phải được xử lý bằng các chất điều tiết sinh trưởng Những chất thường dùng và cho hiệu quả cao là NNA Có một số cây phản ứng tốt với IBA Thông thường dùng từ 2.000- 8.000 DDĨĨ1 tùv loại cây trồng Cũng có thể sử dụng ở nồng độ thấp hơn Cành đã cắt để trong khay hoặc chậu nhôm nhỏ, nhúng từng cành hoặc 20 cành một vào trong dung dịch chất điều tiết sinh trưởng đã pha trong thời gian từ 5-10 giây Nhúng ngập gốc cành từ 1-2 cm Nồng độ hóa chất càng cao, cành càng non thì thời gian xử

lý càng nhanh; ngược lại cành già, nồng độ thấp thì thời gian phải lâu hơn

Khoảng cách và mật độ cắm cành tùy thuộc vào cành to hay nhỏ, tùy thuộc vào thời vụ giâm cây [6,7,12 ]

Từ sau cắm cành đến lúc cây ra rễ phải thường xuyên duy trì độ ẩm không khí trên mắt lá ở mức 90-95%, nhưng cũng có thể thay đổi tùy loại cây, nhiệt độ thích hợp cho từng loại cây từ 21- 27°c [7,12 ]

* Thời vụ giâm cành và chuyển cây ra vườn ươm:

Có hai thời vụ giâm cành tốt là vụ xuân từ 10/2 đến 20/4 và vụ thu từ 20/9 đến 20/10 Tuy nhiên có rất nhiều loại cây có khả năng ra rễ tốt trong điều kiện

vụ hè Mùa đông nhiệt độ thấp, nếu lại hanh khô cây rất khó ra rễ Nhiều nhà trồng trọt hay cắm cành các cây nhiệt đời vào vụ đông (tháng 12- 1) vì nhiệt độ thấp nên dễ điều khiển ẩm độ, cành cây hô hấp ít nên lá lâu rụng

Khi rễ của các cành giâm đã mọc đủ dài, và hơi chuyển màu từ trắng sang vàng thì phải ra bầu kịp thời [7,12 ]

2.22.2 Phương pháp chiết cành:

Chiết cành có nhiều hình thức: vít cành xuống rồi đắp đất lên một đoạngiữa, khi cây ra rễ mới tách ra khỏi thân mẹ rồi đem trồng Chặt rễ để mầm mọc lên chỗ đầu rễ tổn thương, sau đó tách đem trồng cũng là một hình thức chiết

- Kỹ thuật ch iết:

Các cây mẹ để chiết cành là những cây ưu tú trong những khu vực riêng biệt Trước khi chiết một tháng, bón thúc cây mẹ một lần hoặc có thể phun phân lên lá để hiệu quả đạt nhanh chóng, tiến hành tỉa bỏ những cành già yếu, cành bị sâu bệnh

Cành chiết là cành bánh tẻ đường kính gốc cành từ 0,5- 1,5 cm, dài 40- 60cm tùy loại cây, thường có hai nhánh Cành nhỏ có khả năng ra rễ tốt hơn cành

to, sinh trưởng mạnh hơn, nhưng chiết cành nhỏ quá sẽ dễ gẫy do không mang nổi bầu đất

Khoanh vỏ bóc đi ít nhất cũng phải có chiều dài 3-4cm tùy theo cành to,

nhỏ Bóc vỏ xong, lấy dao cạo hết chất nhòn trên mặt gỗ ở dưới vỏ để loại bỏ

tầng sinh libe-gỗ Để khô 2-3 ngày rồi đắp đất lên (dùng đất vườn hay đất ao phơi khô, đập nhỏ rồi trộn với mùn cưa, trấu hoặc rơm rác mục, rễ bèo tây), Nếu đắp đất ngay khi tầng sinh libe-gỗ còn sống sẽ hình thành cầu dinh dưỡng mới, sẽ không ra rễ Phía trên, phía dưới bầu chiết buộc hai vòng dây để giữ chặt bầu quanh chỗ khoanh vỏ đã bóc Buộc hơi lỏng vòng dưới phòng khi nước mưa lọt vào trong bầu, không thoát ra được và làm thối rễ[7,12 ]

Trường hợp khó ra rễ có thể dùng chất kích thích: IBA, NAA v,v, 6-8 tuần

lễ sau khi chiết thi cành bắt đầu ra rễ

Đợi khoảng vài tuần lễ khi rễ ra nhiều thì cắt cành chiết đem giâm vào luống ương Che nắng và năng tưới, giữ ẩm khoảng 5-6 tuần lễ nữa, khi cành ra

rễ thứ sinh mới đem trồng

Nên chiết vào mùa mưa khoáng tháng 5,6 vì về mùa mưa cây lên nhựa, nhiệt độ không quá cao, nắng ít soi vaò bầu chiết, đất trong bầu không bị khô thuận lợi cho việc ra rễ nhanh Hình thức chiết đơn giản, dễ làm và chỉ thích hợp cho một số loại cây trồng nhất định Trồng cây bằng cách chiết cành chóng cho thu hoạch, cây con mang đủ đặc tính di truyền của cây mẹ So với cây giâm cành, cây gốc ghép, cây chiết mau “ cỗi “ hơn, dễ bị sâu bệnh phá hại, vì vậy cần phải chăm bón cẩn thận [7,12 ]

2.2.23 Nhân giống bằng phương pháp ghép :

Ghép là sự kết hợp một bộ phận của cây này với một bộ phận của cây khác

để tạo thành một tổ hợp ghép, cùng sinh trưởng và phát triển như là một cây thống nhất

- Ghép cành:

Ghép đoạn cành là một phương pháp tương đối phổ biến trong nhân giống cây; áp dụng trong trường hợp ghép các loại cây khó lấy mắt (gỗ cứng, vỏ mỏng giòn, khó bóc), hoặc ghép trong thời vụ mà nhiệt độ và độ ẩm thấp, sự vận chuyển nhựa trong cây kém Nhiều khi kết hợp giữa đoạn cành và ghép mắt để tận dụng cành ghép [7,12 ]

* Chọn cành cây :

Chọn những cành ra trong vụ xuân hoặc trong vụ hè trong năm (nếu là ghép trong vụ thu), đoạn cành có màu xanh xen kẽ với đôi vạch màu nầú (bánh

tẻ), lá to, mầm ngủ to, Sau khi cắt cành ghép, loại bỏ hết lá, bó lại thành từng bó,

giữ ẩm để đem đến vườn ươm

* Kỹ thuật cắt cành: [7,12 ].

Dùng kéo sắc cắt cành , cắt ngọn gốc ghép ở vị trí cách mặt đất 10-15cm

.Sau đó tay trái giữ gốc ghép, tay phải dùng dao cắt vát một đoạn dàì l,5-2cm

Lấy một đoạn cành có 2-3 mầm ngủ, lát cắt cắt phải nhẵn, phẳng và đường kính

của gốc ghép và cành ghép phải tương đương Sau khi ghép dùng nilong bản

mỏng quấn kín vết ghép và đầu cành ghép lại, buộc càng chặt càng tốt Có thể cắt

gốc ghép và cành ghép thành hình lưỡi gà giống nhau để gài cành ghép cho chắc

* Thời gian ghép cành:

Nếu trong thời gian tiến hành ghép mà gặp hạn thì phải tưới nước và sau

ghép 3 ngày phải tưới nước cho vườn gốc ghép Sau ghép 30-35 ngày có thể mở

dây buộc để kiểm tra tỷ lệ cây sống Ghép theo hình thức này, cây chóng bật

mầm

Có thể ghép cành theo nhiều hình thức khác như ghép nêm, ghép dưới vỏ,

ghép chẻ bên.[7,12 ]

* Ghép mắt:

Là phương pháp ghép rất phổ biến, áp dụng cho nhiều Loại giống cây khác

nhau; thao tác thuận tiện; có thể thu hoạch và bảo quản, vận chuyển cành ghép đi

xa, hệ số nhân giống cao, cây ghép ít bị nhiễm bệnh Có nhiều cách ghép mắt:

- Phương pháp ghép cửa sổ: Gốc ghép và cành ghép có đường kính tương

đối lớn, chuyển động nhựa tốt, dễ bóc vỏ Cành lấy ghép là những cành ”bánh

tẻ”, đường kính gốc cành từ 6-10mm tùy mùa ghép và tùy theo giống loài Mỗi

cành có từ 6-8 mầm ngủ ở các nách lá to Chú ý chọn những cành ngoài bìa tán,

không có sâu bệnh Dùng dao ghép mở ”cửa số” trên thân gốc ghép, cách mặt đất

từ 10-20cm Nếu đất ẩm thì mở cửa số cao, đất khô cần ghép thấp hơn Kích thước miệng ghép ”cửa số” 1x2 cm Bóc một miệng vỏ trên cành ghép có mắt ngủ ở giữa, kích thước đúng bằng miệng ghép đã mở Đặt mắt ghép vào ”cửa số”

đã mở của gốc ghép, đậy cửa số lại và quấn dây ni lông mỏng cho thật chặt Sau ghép 15-20 ngày có thể mở dây buộc và cắt vỏ miếng vỏ đậy ở ngoài của gốc ghép Sau mở dây buộc 7 ngày cắt ngọn gốc ghép cắt ngọn gốc ghép cách vết ghép 2cm và nghiêng một góc 45°về phía ngược chiều với mặt ghép Ghép cửa số thường có tỷ lệ sống cao nhất [7,12 ]

- Phương pháp ghép chữ T:

Ghép chữ T là một phương pháp phổ biến ở tất cả các nước trồng cây đang phát triển; tốc độ ghép nhanh, có thể kết hợp từng cặp công nhân, một ngưòi ghép một người buộc dây Phương pháp này cũng đòi hỏi gốc ghép và cành ghép phải đang trong thời kỳ chuyển nhựa mạnh

Chọn cành ghép non hơn so với ghép cửa sổ một chút

Mở miệng gốc ghép như sau: Dùng dao ghép rạch một đường ngang lcm cách mắt đất từ 10-20cm Sau đó từ điểm giữa rạch một đường vuồng gốc với đường rạch trên dài 2 cm, làm thành hình chữ T, dùng mũi dao tách vỏ theo chiều dọc vết ghép Mắt có kèm theo cuống lá, dài 1,5-2 cm, có một lớp gỗ rất mỏng ở phía trong Lát cắt phải thật “ngọt” tránh dập nát tế bào ở phía trong Tay phải cầm cuống lá gài mắt vào khe dọc chữ T đã mở, đẩy nhẹ cuống lá xuống Dùng dây ni lông mỏng và bền buộc chặt và kín vết ghép lại buộc càng chặt càng tốt

Tuỳ theo mùa vụ và giống loài cây mà sau khi ghép 15-20 ngày có thể mở dây buộc, kiểm tra sức sống của mắt ghép nếu mắt ghép xanh, cuống lá vàng và

rụng đi là chắc sống, Từ 7-10 ngày sau khi mở dây buộc có thể cắt ngọn gốc ghép [7,12].

Chọn những cành ghép mập khoẻ, còn màu xanh hoặc mới xuất hiện một vài vạch nâu, đã bắt đầu “ tròn mình” Dùng đao cắt vát một lát hình lưỡi gà từ trên xuống, cách mặt đất từ 10- 20 cm, có độ dày gỗ bằng 1/5 đường kính gốc ghép Nếu cành ghép có đường kính nhỏ hơn gốc ghép thì vết ghép cắt mỏng hơn chiều dài ở miệng ghép chừng l-l,2cm cắt một miếng tương tự, có cuống lá và mầm ngủ ở giữa đặt nhanh vào vết ghép, buộc chặt và kín bằng dây nilông Sau khi ghép 18-30 ngày có thể mở dây buộc và cắt ngọn gốc ghép Vết cắt ngọn gốc ghép cách vết ghép 1,5- 2cm [12]

III THựC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ

3.1 Nguyên liệu và phương pháp nghiên cứu

3.1.1 Nguyên liệ u :

- Cây dây cốt khí: lấy mẫu tại trường đại học Dược Hà Nội và Vườn quốc gia Ba Vì

- Cây râu hùm: lấy mẫu tại khu đệm Vườn quốc gia Ba Vì

- Cây hoàng đằng: lấy mẫu tại khu đệp Vườn quốc gia Ba Vì

- Cây đìa sản: lấy mẫu tại xã gia Ba Vì

3.1.2 Phương pháp nghiên cứu

* Mô tả thực vật theo mẫu phiếu mô tả cây có hoa trong tài liệu [9]

* Phương pháp nhân giống

Trong thực nghiệm này chúng tôi nhân giống vô tính bằng phương phápgiâm cành

+ Nền giâm cành: Được xây bờ cao 25 cm, có lỗ thoát nước, đáy có lát

gạch để chống sự thâm nhập của giun và các côn trùng Đổ cát sạch cao 20 cm và luôn luôn được giữ ẩm Để đảm bảo độ ẩm chúng tôi dùng bình phun mù để tránh làm hỏng cành giâm và phun đều trên bề mặt giâm cành để tạo được môi trường ẩm trong cả nhà giâm cành

+Thu mẫu: Các cây cốt khí dây, hoàng đằng và đìa sản: cắt đoạn dây dài

bao gồm nhiều mẫu, nhiêù lá nhúng ngay vào xô nước để giữ ẩm cho cây tươi vàg đảm bảo cành sống, cây râu hùm: lấy đoạn thân rễ dài 15-30cm

+ Cắt đoạn cành giâm:

Cây cốt khí dây: Lấy đoạn cành ở ngọn gồm 1 chồi và 2, 3 mấu ,cắt sát

mấu thứ 3, cắt cuống lá sát cành đối với lá ở gốc và lá giữa, giữ lại lá ở mấu trên

và chồi ngọn[6 ,7,12]

Đoạn cành bánh tẻ: gồm 3 mấu cắt sát ở 2 mẫu đầu, các lá mấu gốc và

mấu giữa cắt sát đoạn cành, lá trên giữ lại 1/2 lá (ảnh số 2 xem phụ lục) [6,7,12 ]

Cây hoàng đằng, đìa phản chọn đoạn thân (gồm 3 mấu) giống như ở cành cắt bánh tẻ của cây cốt khí dây.(ảnh số 3 xem phụ lục)

- Cây râu hùm cắt thân rễ thành từng khoanh dài 2-4 cm nếu đoạn thân quá to có thể chia mỗi khoanh thành 4 hoặc 6.(ảnh số 4 xem phụ lục)+ Cắm cành giâm : Các cành dùng chất kích thích sinh trưởng (fitohoocmon) được nhúng gốc khoảng 0,5cm trong thời gian 5-6 giây Mỗi cành giâm được cắm vào nền giâm sâu 0,5-2cm, nghiêng 45° Sau khi cắm xong phun nước cho lá tươi và giữ ẩm

+ Chăm sóc và theo dõi:

- Thường xuyên giữ ẩm

- Loại bỏ cành hỏng, chết, có nấm, sâu hại để tránh lây lan

- Theo dõi sự sinh trưởng và phát triển của cành cắm

Sau khi giâm cành chúng tôi theo doĩ trong thời gian 8 tuần sự phát triển của cây như sự vàng lá, rụng lá, ra sẹo, ra rễ và đánh ra bầu tính tỷ lệ phân trăm nhận xét và đánh giá cho từng lô cây đã được giâm cành

3.2 Kết quả nghiên cứu:

3.2.1 Cây cốt khí dâỳỉ Ventỉíago leiotữrpữ Bêhth.,họ táo ta Rhamnaceae.

Bụi leo, cành xám Lá hình thoi, nhẫn, dài 6-10cm, gốc tròn dầu thon, lúc khô màu nâu, gân phụ 6-8 cặp, cuồng là dài 4-5 mm Cụm hoa chùm cao 4-8 cm

ở nách lá và ngọn nhánh, cuống hoa có lông, 51á đài, hình tam giác, 5 cánh hoa, dài gấp đôi lá dài, 5nhị; bầu có lông 2vòi nhụy Quả có cánh mầu nâu, nhẫn bóng, dài 3,5 cm Mang đài tạo thành vòng đen giữa quả; cành tròn ở đỉnh Ra

hoa tháng 2-3, quả tháng 5-6 (ảnh 5) Phân bố ở Bắc Thái, Ba Vì, Hòa bình

Quảng trị

Bộ phận dùng rễ và dây Thu hái rễ và dây quanh năm, rửa sạch thái lát, phơi khô dùng dần Dùng điều trị khí huyết suy nhược, kính nguyệt không đều phong thấp gân cốt đau, tứ chi tê dại, tê ngã hay bị đánh tổn thương Liều dùng 20g- 40g dạng thuốc sắc

Đồng bào dân tộc Dao thường dùng dây chữa tê thấp đau nhức như các loại cốt khí củ [1,5]

(Ảnh5: cây cốt khí dây )

* Bố trí thực nghiệm

Tại Hà Nội:

Lô Cịi 20 ngọn cành có sử dụng chất kích thích, giâm ngày 18/02/2001

Lô c 2: 20 ngọn cành không sử dụng chất kích thích, giâm ngày 18/02/2001

Lô c 3: 25 cành có sử dụng chất kích thích, giâm ngày 22/02/2001

Lô c 4: 25 cành không sử dụng chất kích thích, giâm ngày 22/02/2001

Lô C5: 25 cành có sử dụng chất kích thích, giâm ngày 01/03/2001

Lô c 6: 25 cành không sử dụng chất kích thích, giâm ngày 01/03/2001

Tại Ba Vì

Lô C7: 25 cành có sử dụng chất kích thích, giâm ngày 24/03/2001

Lô C8: 25 cành không sử dụng chất kích thích, giâm ngày 24/03/2001

* Kết quả giâm cành: (Xem phụ lục từ bảng 1 - 8 )

+ Lô C|I cành cắt ngọn có chất kích thích sau 8 tuần thu được 10 cành ra rễ

và ra bầu (50%) , độ dài trung bình của rễ là 2,5cm, số rễ trung bình là 5,3- 6 cành chết (30%), 4 cành còn lại chưa có sẹo (20%)

+ Lô Q : đoạn cành cắt ở ngọn không sử dụng chất kích thích 16 (80%) cành chết trước tuần thứ 8, số còn lại vẫn chưa ra sẹo

So sánh lô Cj với lô c 2 thấy rằng cùng điều kiện như nhau, ngọn cành có dùng chất kích thích ra rễ cho tỷ lệ nẩy mầm cao hơn, ngọn cành không có chất kích thích sinh trưởng khả năng nẩy mầm rất kém, hầu như không ra rễ

+ Lô c 3: Tuần thứ 7 có 2 cành cây chết (8%), 18 cành hình thành sẹo Đến tuần thứ 8 có 18 cành mọc rễ (72%), độ dài trung bình của rễ là l,65cm,

số rễ trung bình là 6,8 Có 5 cành (20 %) còn sống nhưng chưa mọc sẹo và mọc

rễ, và 18 cây rả bầu (72%), một số cành có xu hướng thối trong vài tuần tiếp

theo Kết quả trên cho thấy dùng cành bánh tẻ và dùng chất kích thích thì đạt kết

quả ra rễ cao (72%)

+ Lô c 4

- Tuần thứ 6 và thứ 7 có 4 cành (16%) chết, 15 cành mọc sẹo (60%)

- Tuần thứ 8 CÓ15 cành (60%) mọc rễ.Độ dài trung binh của rễ là 1,85 cm và số

rễ trung bình là 3,9 c ả 15 cành đã được trồng ra bầu và sống cả 15 cây Còn lại

6 cành sống bình thường phần lớn chúng bị đen gốc không có khả năng ra rễ

So sánh kết quả của 2 lô c 3 và C4 ta thấy nhân giống bằng cành bánh tẻ

trong cùng điều kiện như nhau những cành có chất kích thích có tỷ lệ ra rễ

(72%), số lượng rễ trung bình (6,8) và độ dài trung bình (l,85cm), cao hơn so với

cành không sử dụng chất kích thích (60%), (3,9), (l,65cm) (ảnh số 6 xem phụ

lục)

+ LôC5

Tuần thứ 7 có 4 cành chết (16%), 16 cành ra sẹo (64%)

Tuần thứ 8 có 16 cành (64%) ra rễ, độ dài trung bình của rễ là 2,4 cm

và số rễ trung bình là 3,45 các cành này đựoc đánh trồng ra bầu Còn lại 5

cành (20 %) sống nhưng chưa ra sẹo và mọc rễ trong đó có 3 cành có thể

ra sẹo và rễ trong tuần tiếp theo, 2 cành đen gốc, không có khả năng ra

sẹo

+ Lô C(j

- Tuần thứ 6 và thứ 7có 5 cành chết (20%) có 14 cành ra sẹo làl4/25 (56%),

-Tuần thứ 8 có 14 cành (56%) mọc rễ độ dài trung bình là 2,9cm và số rễ trung bình là 2,45 và ra bầu được 14 cây (56%) có 6 cành sống bình thường nhưng rong đó có 2 cây thể mọc rễ và 4 cành đen gốc và chế trong tuần tới.

Cũng như lô c 3 và lô c 4 lô C5, 6 cho thấy nhân giống bằng cành bánh tẻ trong cùng điều kiện như nhau cành có chất kích thích có tỷ lệ ra rễ cao hơn (64%) so với cành bánh tẻ không sử dụng chất kích thích (56%),v ề số lượng trung bình rễ của lô c 5 (3,45) nhiều hơn so với lô c 6 (2,45) và độ dài trung bình của rễ lô C5 (2,4cm) ngắn hơn lô c 6 (2,9cm) (ảnh 7 xem phụ lục)

+ LÔ Q

Tuần thứ 4 và thứ 5 có 19/25 (76%) cành cây mọc sẹo

Tuần thứ 6 có 2 cành chết, 19/25 (76%) Là cành mọc rễ Theo kết quả của

lô này những đoạn cành bánh tẻ có sử dụng chất kích thích thì khả năng phát triển ra rễ cao (76%) Độ đài của rễ là l,86cm và số rễ trung bình là 3,62

+ Lô Cg

Tuần thứ 4 và thứ 5 có 16/25 (64%) cành cây ra sẹo, 16/25 (64%), mọc rễ 16/25 (64%), 2/25(8%) cành chết Số lượng trung bình của rễ là 2,36 và độ đài trung bình của là 3,25cm

Kết quả của 2 lô Cj, 8 cho thấy nhân giống bằng cành bánh tẻ trong cùng điều kiện như nhau, cành có chất kích thích có tỷ lệ ra rễ cao hơn (76%) so với cành bánh tẻ không sử dụng chất kích thích (64%) v ề số lượng trung bình rễ của

lô Q (3,62) nhiều hơn so với lô c 8 (2,36) và độ dài trung bình của rễ ở lô c 7

(l,86cm) ngắn hơn lô Cg(3,25cm).(ảnh số 8 xem phụ lục )

Kết quả nhân giống của 8 lô được thể hiện ở bảng 1

Bảng 1: KẾT QUẢ NHÂN GIỐNG CÂY CỐT KHÍ DÂY

Ngọncành

Theo số liệu thu được của bảng trên chúng ta thấy

- Có thể nhân giống cây cốt khí dây bằng phương pháp giâm cành, sau thời gian 6-8 tuần là có cây con để đem trồng

- Cành bánh tẻ có tỷ lệ ra bầu, số lượng trung bình của rễ, độ dài trung bình của rễ lớn hơn so với ngọn cành

- Những cành có dùng chất kích thích sinh trưởng cho tỷ lệ ra rễ cao hơn các lô tương ứng không dùng chất kích thích khoảng 10%

- Ngọn cành nếu không được dùng chất kích thích thì hầu như không không ra rễ

Như vậy để đạt được hiệu quả cao nên chọn cành bánh tẻ có sử dụng chất kích thích Mặc dù vậy cũng có thể dùng cành bánh tẻ không sử dụng chất kích thích hiệu quả tuy thấp hơn Tuy vậy trong trường hợp không có chất kích thích

và nếu có nhiều nguyên liệu thì có thể dâm cành bánh tẻ không cần dùng chất kích thích nhưng không dùng ngọn cành

3.2.2 C ây h oàn g đằng: Fibraurea tỉnctorìci Lour, họ Tiết dê

(.Menispermaceae)

* Mổ tả thực vật

Dây leo to có rễ và thân già màu vàng, Lá mọc so le, dài 9-20cm, rộng 4-10

cm, cứng, nhẫn; phiến lá bầu dục, đầu nhọn, gốc lá tròn hay cắt ngang, có ba

ngân chính rõ; cuống dài, hơi ngắn phình lên ở hai đầu Hoa nhỏ, màu vàng lục, đơn tính, khác gốc, mọc thành chuỳ dài ở kẽ lá dễ rụng, phân nhánh hai lần, dài

30-40cm Hoa có lá dài hình tam giác; hoa đực có 6 nhị, chỉ nhị hơi hẹp và đài hơn bao phấn; hoa ca í có 3 lá noãn Qủa hạch hình trái xoan, khi chín màu vàng Mùa hoa tháng 5-7 (ảnh 9)

Bộ phận dùng là rễ và thân già, nơi sống và thu hái: Đông dương và

Malaixia mọc hoang ở ven rừng nơi ẩm mát vùng núi, gặp nhiều từ Nghệ An vào

tới các tỉnh tây nguyên và Đồng Nam bộ Thu hái rễ và thAn cây vào tháng 8-9, cạo sạch, lớp bần bên ngoài, chặt từng đoạn, phơi khôhay sấy khô Thành phần hoá học trong hoàng đằng là alcaloid mà chất chính là Palmatin 1-3,5% và một ít Jatrorrhizin columbamin và berberin Tính vị và tác dụng hoàng đằng có vị đắng tính lạnh, có tác dụng thanh nhiệt, tiêu viêm, sát trùng Palmatin có tác đụng ức chế đối với các vi khuẩn đường ruột, thường dùng chữa các loại sưng viêm, chữa đau mắt, sôt rét, kiết lị, viêm ruột ỉa chảy, viêm tai, lở ngứa ngoài da và cũng

dùng làm thuốc bổ đắng [1,2,10,'% 13 ].

Lô H,: 20 thân leo có sử dụng chất kích thích, giâm ngày 25/03/2001

LôH2: 20 thân leo không sử dụng chất kích thích, giâm ngày 25/03/2001 Tại vườn Ba Vì

Lô H3: 35 cành có sử dụng chất kích thích, giâm ngày 24/03/2001

Lô H4: 35 cành không sử dụng chất kích thích, giâm ngày 24/03/2001

(Ảnh9: cây hoàng

* Kết quả nhân giống: (xem phụ lục từ bảng 13 ,14,15,16)

+ Lô HịI 20 cành giâm có sử dụng chất kích thích, giâm tại Hà Nội ngày25/03/2001 sau 6 tuần theo dõi

- Tuần thứ 4 có 12/20 ( là 60%)cành cây mọc sẹo

- Tuần thứ 7, 8 có 10 cành ra rễ tương với 50%

Như vậy theo kết quả của bảng trên cho thấy cành không sử dụng chất kích thích khả năng ra rễ chậm hơn (7-8 tuần sau khi giâm)

Kết quả của 2 bảng trên cho thấy cành cây hoàng đằng có sử dụng chất kích thích có số lượng mọc rễ cao hơn (60%) và sớm hơn so với cành không sử dụng chất kích thích (ảnh số 10 xem phụ lục)

+ Lô H3: 35 đoạn cành sử dụng chất kích thích điều hoà sinh trưởng, giâm tại vườn ươm Ba Vì sau 6-8 tuần theo dõi

- Đến tuần thứ 5 có 3/35 (8,57%) cành chết

- Đến tuần thứ 6 có 28/35 (chiếm 80%) cành mọc sẹo, có 28/35 (80%) cành mọc rễ ,độ dài trung bình của rễ là 2,05cm và số rễ trung bình là 4,6; 28 cây con ra bầu Còn lại 4 cành sống và có thể ra rễ