Xây dựng ứng dụng phương pháp định lượng bằng HPLC nhằm đánh giá sinh khả dụng viên ketoprofen 200 mg tác dụng kéo dài

w — M BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI • • • • TRẦN KIỂU DUYÊN XÂY DỤNG ỨNG DỤNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG • • • • BẰNG HPLC NHẰM ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG VIÊN KETOPROFEN 200mg TÁC DỤNG KÉO DÀI KHOÁ LUẬN TÓT NGHIỆP Dược sĩ KHOẢ1998 - 2003 tùêễt hưíutíi íLỖlìv \ PGS.TS TRẦN TỬ AN TH.S NGUYỄN THỊ KIÊU ANH Q te ith ự e h iụ i : Bộ MÔN PHÂN TÍCH Cĩliài gian thựe hiên. H À NỘI - 2003 : 3-5/2003 LỜI CẢM ƠN Tôi xỉn chân thành bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới THS . NGUYỄN THỊ KlỀư ANH PGS . TS TRẦN TỬ AN tận tình hướng dẫn hoàn thành khoá luận này. Tôi xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc tới thầy cô môn hoá phân tích tận tình giúp đỡ tạo điều kiện cho trình thực khoá luận này. Tôi xin chân thành cảm ơn Hà nội, ngày 20/5/2003. Sinh Viên TRẦN KIỀU DUYÊN PHỤ LỤC Đặt vấn đề TỔNG QUAN Đại cương Vài nét Ketoprofen Các phương pháp định lượng Một số khái niệm sinh khả dụng ự ‘T Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao l Lịch sử Phương pháp sắc ký Đặc điểm phương pháp 10 Sơ lược vè chương trình tối ưu Modde 5.0 12 ĐÔÌ TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u l 14 Đối tượng phương pháp nghiên cứu 14 Thiết bị 14 Phương pháp nghiên cứu 14 Khảo sát lựa chọn dung môi ckiết 15 Xăy dựng phương pháp định lượng huyết tương 16 Phương phấp xử lý kết 17 KẾT QUẢ THựC NGHIỆM VÀ BÀN LUẬN V 18 Chọn dung môi chiết 18 Khảo sát điều kịên chạy sắc ký 18 Chọn pha động 18 Chọn cột 24 Tìm chuẩn nội 25 Bước sóng 25 Thẩm định phương pháp 25 3.3.1 Xây dựng đường chuẩn huyết tương 25 3.3.2 Khảo sát tính xác 26 3.3.3 Khảo sát tính 27 Sơ đánh giá sinh khả dụng viên ketoprofen 200mg 29 3.4 TDKD Phần k ế t lu ậ n v đề x u ấ t 31 CHÚ GIẢI CHỮ VIẾT TẮT. AUC : Diện tích đường cong. ACN : Acetonitril. AcOH : Acid Acetic IS : Chất chuẩn nôi. KET : Ketoprofen. R : Tỷ số diện tích píc. • T Amax Thời điểm đạt nồng độ cực đại. c^ m ax Nồng độ cực đại huyết tương. TE : Triethinlamin. ĐẶT VẤN ĐỂ Trên giới Việt Nam, song song với nghiên cứu tìm thuốc mói việc nghiên cứu bào chế dạng thuốc cho đạt sinh khả dụng cao, dùng tiện lợi đơn giản đưa cách hướng dẫn sử dụng thuốc đạt hiệu an toàn điều trị vấn đề quan trọng ngành Dược . Do việc đánh giá sinh khả dụrig tương đương sinh học , dược động học thuốc đòi hỏi cấp thiết .Để đạt điều này,thì vấn đề phân tích thuốc dịch sinh học , đặc biệt huyết tương khâu định. Các phương pháp phân tích thường dùng để xác định nồng độ thuốc huyết tương sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC), sắc ký khí (GC), sắc ký khí gắn vói khối phổ(GC- MS) phóng xạ miễn dịch, điện mao quản . Trong đó, phương pháp HPLC sử dụng nhiều có tính ưu viêt trội độ xác đảm bảo, tách chất mẫu t ố t , vừa có khả tách vừa định tính, định lượng , ứng dụng với nhiều loại chất khác Ketoprofen thuốc giảm đau,chống viêm có nhu cầu lớn nước ta . Nhưng nhược điểm nhóm thuốc hay gây kích ứng dày phải dùng nhiều lần ngày [1], [6 ]. Để hạn chế tác dụng phụ, tăng khả điều trị tiện lọi cho người sử dụng, người ta nghiên cứu, sản xuất dạng thuốc tác dụng kéo dài (TDKD) nó. Chưa có sản phẩm thuốc TDKD sở nước sản xuất. Dạng bào chế mói giai đoạn nghiên cứu thử nghiệm. Đây hướng nghiên cứu quan trọng Trường Đại học Dược Hà Nội. Trong Dược điển Việt Nam in năm 2002 chưa có chuyên luận thuốc tác dụng kéo dài [2 ].Để đóng góp phần nhỏ vào nghiệp phát triển chung ngành Dược chọn đề tài khoá luận tốt nghiệp là: “ Xây dựng ứng dụng phương pháp định lượng HPLC nhằm đánh giá sinh khả dụng vỉên Ketoprofen 200 mg TDKD ” ❖ Đề tài nhằm hai muc tiêu sau : > Xây dựng thẩm định phương pháp định lượng Ketoprofen huyết tương HPLC. > Bước đầu đánh giá sinh khả dụng invivo viên Ketoprofen 200 mg TDKD. PHẦN TỔNG QUAN ch o 1. ĐẠI CƯƠNG C H ------COOH 1.1. Vài nét Ketoprofen . 1.1.1. Tính chất [8], [9],[10] - Công thức phân tử - Phân tử lượng: 254,29 - Tên khoa học: acid (- benzoyl phenyl) propionic - Tính chất vật lý: Bột kết tinh trắng, không mùi. Thực tế không tan nước 20° c tan hoàn toàn kiềm mạnh, ethanol 96%, aceton, cloroform ether. pKa = 5,94 hỗn hợp methanol - nước (3:1). Hệ số phân bố n- octanol - nước 0,97 (pH = 7,4). Cực đại hấp thụ methanol bước sóng 255 nm. Nhiệt độ nóng chảy khoảng 95°c. 1.1.2. Tác dụng dược lý dược động học [3],[6], [10]. - Tác dụng: ketoprofen thuốc chống viêm phi steroid có tác dụng hạ nhiệt, giảm đau, chống viêm; co khả năng, ức chế trình tổng hợp prostaglandin leukotriene; ức chế kết dính tiểu cầu. - Dược động học:[7][17]. + Hấp thu: dạng viên qui ước viên TDKD khác đặc tính giải phóng hoạt chất. Viên qui ước ketoprofen giải phóng hoạt chất nhanh dày, viên TDKD điều khiển giải phóng hoạt chất pH cao (trong ruột). Dạng viên qui ước, ketoprofen hấp thu tốt nhanh, thòi gian đạt nồng độ cực đại máu từ 0,5 đến giờ. Sau uống viên ketoprofen 200mg TDKD thời gian đạt nồng độ cực đại máu khoảng giờ, nồng độ cực đại trung bình khoảng - mg/1; nồng độ trì ở mức cao sau uống 24 giờ. Khoảng điều trị khoảng 0,4 - mg/1 - Chuyển hoá: chủ yếu, liên kết vói acid glucuronic tạo thành acyl - glucuronic không ổn định. Một nửa chất chuyển hoá chuyển lại thành dạng hợp chất ban đầu chuyển hoá cung cấp dạng chất có hiệu lực. - Thải trừ. Sau uống viên ketoprofen, 50 - 90% thải trừ qua nước tiểu, % thải trừ qua phân. 80% thải trừ qua thận dạng liên kết glucuronic; thời gian bán thải dạng viên qui ước - giờ, dạng viên TDKD từ -7 giờ. Đối vói người lớn tuổi, hấp thu không thay đổi, thời gian bán thải kéo dài giảm thải toàn phần. Ở ngưòi suy gan thận, giảm độ thải huyết tương tăng thời gian bán thải. 1.1.3 Chỉ định [3].[6],: - Thấp khớp mãn tính, đặc biệt viêm đa khớp dạng thấp - Dạng viên nang dùng để giảm đau. 1.14. Chống định :[3]. [6], - Dị ứng vói ketoprofen, aspirin thuốc chống viêm phi steroid loại. - Loét dày - tá tràng tiến triển. - Suy thận nặng, suy gan tế bào nặng. - Phụ nữ có thai (3 tháng cuối) cho bú. 1.1.5. Tác dụng không mong muô'n[3][6], - Đường tiêu hoá, khó chịu vùng dày ruột, đau dày, buồn nôn, nôn mửa, tiêu chảy; nặng loét dày, xuất huyết đường tiêu hoá, thủng ruột. - Nhức đầu, chóng mặt, buồn ngủ. 1.1.6. Liều dùng[3]. [6] - Viên nang: Viên 75 mg, 1viên/lần X lần/ngày. Viên 50 mg, viên/lần X lần/ngày. Uống bữa ăn. - Viên TDKD: Viên 200 mg, lviên/ngày. Uống vào bữa ăn. 1.1.7. Dạng bào chế[3][6]: - Viên nang 25 mg; 50 mg; 75 mg. - Viên nén 100 mg; 150 mg. - Viên bao tan ruột 50 mg. - Viên bao TDKD 200mg. - Viên nang TDKD 100 mg; 150 mg; 200mg. - Thuốc tiêm 100 mg. - Thuốc mỡ 2,5%. 1.2. Các phương pháp định lượng. [11]. [13]. * Phương pháp định lượng ketoprofen dạng nguyên liệu dạng bào chế: - Phương pháp acid - base: [13], [14], [20]. Nguyên tắc : Ketoprofen acid yếu, ta định lượng ketopofen phương pháp acid - bazơ phát điểm tương đương phương pháp đo điện thị đỏ phenol. Phương pháp thường áp dụng định lượng ketoprofen nguyên liệu. Phương pháp HPLC pha đảo: [11], [12], [13], 15]. Sắc ký HPLC pha đảo có đặc điểm pha tĩnh phân cực pha động. Ketoprofen phân cực nên cần chọn pha động phân cực mạnh để rửa giải, pha tĩnh phải có tính chất gần giống ketopofen. Vì lựa chọn HPLC pha đảo hợp lý để định tính, định lượng chất. Áp dụng định lượng ketoprofen huyết tương [7], [10], [12], [14], [15], xác định tạp chất nguyên liệu [9], [11], - Phương pháp quang phổ: [12], [13] Trong công thức cấu tạo Ketoprofen có nhân phenyl, nhiều liên kết đôi nên có khả hấp phụ ánh sáng tử ngoại. Nó có cực đại hấp thụ 255 ran Methanol 75%. ứng dụng điều để định lượng ketoprofen chế phẩm bào chế đánh giá độ hòa tan viên [9] - Phương pháp điện di mao quản điện di mao quản kết hợp với khối phổ (CE - MS): Định lượng ketoprofen huyết tương, nước tiểu tách đồng phân ketoprofen [12], [13]. * Phương pháp HPLC định lượng ketoprofen huyết tương[ll],[15]. Để đánh giá sinh khả dụng viên ketoprofen, phải xác định nồng độ thuốc máu ngưcã sau uống thuốc khoảng nồng độ đó. Do Bảng 3.3 Kết chạy tối ưu hoá dung môi Thông số đầu Thông số đầu vào Số thí nghiệm Thứ tự ACN AcOH TE H2Ovđ oc Rs T tiến hành 33,5 0,25 0,1 100, 1,14 1,954 25 13 43,5 ỏ,25 0,1 100 1,15 1,443 5,13 10 33,5 0,75 0,1 100 1,11 1,485 25,59 43,5 0,75 0,1 100 1,07 0,804 8,09 33,5 0,25 0,5 100 1,25 1,805 8,30 12 43,5 0,25 0,5 100 1,19 1,099 7,37 33,5 0,75 0,5 100 1,15 2,100 22,86 43,5 0,75 0,5 100 1,10 1,259 9,19 33,5 0,5 0,3 100 1,16 2,245 18,76 10 16 38,5 0,50 0,3 100 1,12 1,644 9,56 11 38,5 0,25 0,3 100 1,20 1,805 8,31 12 38,5 0,75 0,3 100 1,14 1,691 10,14 13 15 38,5 0,5 0,1 100 1,11 1,308 12,86 14 14 38,5 0,5 0,5 100 1,18 1,623 10,98 15 11 38,5 0,5 0,3 100 1,14 1,934 12,96 16 17 38,5 0,5 0,3 100 1,15 1,816 13,51 17 38,5 0,5 0,3 100 1,14 2,094 13,38 20 Từ kết thu tính (X, Rs, t R2 R2 Adj Q2 Q N a 0,9693 0,9298 0,5551 0,774 17 Rs 0,9700 0,9315 0,8974 0,947 17 t 0,9160 0,8112 - 0,2881 17 Hình 3.4 minh họa kết chạy pha động Hình 3.5 R2 □ Q2 ■ Kết thống kê 17 pha động Trong đó: R2 adj: Giá trị biểu thị phù hợp thí nghiệm bố trí thí nghiệm chương trình(tính phù hợp chương trình). Q2: Giá trị biểu thị phù hợp thí nghiệm Ta có R2 > 0,9 ( r > 0,999) Q2 > 0,56 (q > 0,75). Nhận thấy: Thông số t có Q2 < loại bỏ thông số tói thay đổi tỷ lệ pha động. 21 Có phương trình hồi quy, biểu diễn phụ thuộc a Rs theo biến độc lập, tính toán để kiểm định tính phù hợp mô hình thí nghiệm. Ta có phương trình sau: a: K = 1.15 - 0,02 X! - 0,04 x + 0,03 x 3- 0,01 Xj2+ 0,02 x 22- 0,01 x 32 - 0,005 Xj x 2- 0.01 x x - 0.01 R s : K = 1.88 - 0.334 Xj - 0,077 x + 0,09 x + 0,09 Xj2 - 0,104 x 220,387. x 32- 0,038 Xi x 2- 0.044 X2 X3 + 0.195 x ,x . Các giá trị có PTO< 0,05 hệ số hồi quy có ý nghĩa thống kê .Từ phương trình hồi quy ta bề mặt đáp biến phụ thuộc theo biến độc lập. Được biểu diễn hình sau: Mặt đáp 22 Investigation: U ntitled (M L R ) Observed S electivity factor N=17 R2=*0. 9 R2 A d j . = . DF=7 Q 2=0.5 5 R S D -0 .0 1 Hình 3.7 a. Bảng dự đoán thực tế thu hệ chọn lọc huesti^icn Ưtitled(Mi^ Ffesditicn - I I I I I I I I I I I I _ I _ I — J— I— I— I _ J— I _ _1 _ L - . -I _ J- I I I I I I I I I I I I .1 _ -L . _1 _ l___ I ----- L _ I_I — 1— —I — — L — I— . I I I I I I I I I I _Ị _ Ị___ I _ _ I___ I _ J___ I ___ L _ l_ I I I I I I I I I ■ _ị - I I I u "-T- 4-- 11 - I I II I - - ----- -------------------1 - ị- . -4 _ t------1- -i- - I ----- I I I I I . _1 _ l___l _ -L ■“ ^M II- iII I I I____ I _ Ị_ _ l _ I I I II III I II JI II II|Qr 1I II I II II II II II II _ II II I [ ~ I I r “ I I - 1 - r - \ - t K t - | “ r “ 1“ “ r ■ | ~ T I I I I I I I I I I I I I I I I I I II I -ỉ - I I___I I_________ I L IJ _ i I_______________________________I ______ I r n - T - 1— I - r I 1I 1I I I I ị- T - r - T- I I r I I I I I - Ị - ị— I - 4- I I - t T - I 19 J. - I------ \fTJL . ---- - -----1I I I I “ r— _l _ 1_ I _ I__ I _ I I I I I I r _ I I I I I i I I I I I I \- T I I I I I I \ - T - r - r -\ I I I I I I I Iỉ I I I 1I I I I Q80 Q90 1.00 1.10 1.2D 1.30 1.40 ISD 1.60 1.7D 1.80 1.90 200 210 22D 230 Redđed N=17 P^0.sr70 R2AỊj.=0.932 EF=7 (£=0.Q91 FSD0.0999 Hình 3.7 b Bảng dự đoán thực tế thu độ phân giải 23 U' Lựa chọn chương trình tối ưu. Căn vào sắc đồ thông số đầu a, Rs thu thông số phụ thuộc chọn a > 1.14, Rs > 1.8 Dựa mặt mục tiêu biến phụ thuộc a, Rs chương trình thực phép tối ưu phương pháp đơn hình theo bảng 3.5. Bảng 3.5 Điều kiện tối ưu lựa chọn Đầu Độ ảnh hưởng Mức độ ảnh hưởng a Minimine 0,5 Rs Maximine t Exclude Kết tỉ lệ thành phần dung môi : ACN - AcOH - TE = 39.25 : 0.65 : 0.33và dự đoán a =1.145, Rs = 1.8.Thực thí nghiệm lần với điều kiện kết thể bảng : a Thông số đầu Rs 1,800 Dư kiến 1,145 1,743 Thưc tế 1,128 0,968 %(Sai số) 0,939 Với mục đích đơn giản chuẩn bị pha động sắc đồ thu có píc sắc nét tách hoàn định chọn pha động với tỉ lệ (ACN AcOH- TE -H20 = 38.5 : 0.5: 0.3: 60.7) 3.2.2 Cột sắc ký: Chúng dùng kỹ thuật sắc ký phân bố pha đảo. Qua khảo sát cho thấy cột c 18AB phù hợp. 3.2.3Tìm chất chuẩn nội: 24 Định lượng ketoprofen huyết tương đòi hỏi công đoạn xử lý mẫu phức tạp, gây mẫu dẫn đến kết phân tích không định lượng theo phương pháp dùng nội chuẩn cần thiết, Chất nội chuẩn lựa chọn phải có công thức hóa học gần giống ketoprofen, không phản ứng vói ketoprofen, đồng thời phải tách kAỏi ketoprofen ổn định điều kiện sắc ký, Vì không tìm nội chuẩn nêu tài liệu tham khảo, nên phải khảo sát để có nội chuẩn thích hợp vói yêu cầu phân tích, Khảo sát khả tách ketoprofen vói ibuprofen, naproxen, Dựa sắc ký đồ thu được, xác định thời gian lưu tRcủa chất, tính độ phân giải Rs ketoprofen chất, thời gian phân tích ,Trước có đề tài nghiên cứu chọn Ibuprofen làm chất chuẩn nội , nhận thấy thòi gian phân tích mẫu lâu, tỉ lệ thành phần dung môi hữu cao (50-60%),Vì thay Ibuprofen Naporoxen giảm tỷ lệ thành phần dung môi hữu xuống cụ thể (ACN :AA:TE:H20=38,5:0,5: 0,3:60,7) Trong trình làm đảm bảo điều kiện tương đối tốt kết tin cậy 3.2.3 Bước sóng Tiến hành pha Ketoprofen chuẩn pha động đem quét phổ u v cho điểm cực đai hấp phụ 253nm, Từ kết khảo sát ta đưa điều kiện chạy sắc ký : Pha tĩnh : Cột nucleosil 5|xm (4,6*250mm) Pha động : (ACN :AcOH:TE :H20= 38,5:0,5:0,3:60,7) Lưu lượng dòng :0,9ml/phút Thể tích tiêm mẫu: 50ịi1, 3.3 Thẩm định phương pháp xây dựng 3.3.1 Xây dựng đường chuẩn huyết tương Chuẩn bị thang chuẩn huyết tương vói nồng độ ketoprofen (KET) từ 0,5 -ỉ- 5|ig/ml nồng độ nội chuẩn (IS) 25 Ịig/ml, Xử lý mẫu sơ đồ 1,1. 25 Tiến hành sắc ký điều kiện xây dựng kết thu biểu thị diện tích pic (A) ketoprofen IS, từ tính tỷ số diện tích pic (Rket/is )và trình bày bảng 3.6 Qcet(M-ỗ/hiI) 0,5 Aket 62017 127960 248544 354000 662609 Ais 890123 990445 913491 817215 873127 R-ket/is 0,0697 0,1292 0,2751 0,4332 0,7589 DƯQNG CHƯAN Sau sử lý ta có phương trình hồi quy Y = 0,1544 X - 0,0219 Trong đ ó ; Y tỉ số diện tích pic Keto IS X nồng độ Ketoprofen 0.8 0.7 0.6 0-5 «* OA- 0.3 0.2 ■ O.I rt r ụ y 0A54AX - 0*0219 * Ỉ' > Kỹ : Sử dụng tương đối thành thạo dụng cụ thí nghiệm, tiếp cận, sử dụng nhiều máy móc đại máy sắc ký lỏng hiệu cao, máy ly tâm số máy khác hỗ trợ. 3.2. Ỷ nghĩa thưc t ế : 3.2.1. Xây dựng chương trình sắc ký lỏng hiệu cao để định ỉượnị ketoprofen huyết tương cụ thể là: * Lựa chọn dung môi chạy sắc ký: Dùng phương pháp tối ưu hoá để bố trí thí nghiệm, lựa chọn hệ dung môi hợp lý định lượng ketoprofen huyết tương. Bố trí thí nghiệm theo mô hình bậc hai, tâm trực giao (3 biến độc lập, biến phụ thuộc). Tối ưu hoá thi nghiệm theo phương pháp khảo sát mặt mục tiêu. Trên 17 thí nghiệm lựa chọn hệ dung môi tối ưu (ACN : AcOH : TE : H20 = 38,5: 0,5 : 0,3 : 60,7 ). * Phương pháp chiết KET huyết tương: Tôi lựa chọn dung môi chiết dicloromethan. Dùng acid H3PO4 IM đưa KET dạng phân tử, dùng dung môi chọn lọc dicloromethan để chiết, quy trình chiết cải tiến thời gian chiết ngắn hơn, hiệu suất chiết = 91%, độ lặp lại (RSD% < 3,55%) vói n= . 32 * Chương trình chạy sắc ký - Cột : C18(AB 5fj.m (4,6*250mm) - Pha động : ACN:AcOH :TE H20 = 38,5: 0,5 : 0,3 60,7 - Bước sóng : 253 nm - Lưu lượng dòng : 0,9ml/phút, Thẩm định phương pháp định lượng Ketoprofen huyết tương: Cho tính tốt (khả tìm lại 103,4%). Tính xác đảm bảo RSD%< 3,55%. Độ tương quan tuyến tính chắt chẽ diện tích píc nồng độ khoảng khảo sát(0.5- 5|ig/ml). Việc dùng nội chuẩn cho kết xác khách quan hơn. Với kết thẩm định đảm bảo phương pháp áp dụng để phân tích ketoprofen huyết tương . 3.2.2.Sơ đánh giá sinh khả dụng viên KET 200mg tác dụng kéo dài: Thực vói ngưòi tình nguyện : kết thu sau : AUC (|!g,h/ml) 65,08 Tl/2 (h) 5,21 Tmax (h) 7,44 Cmax (fig/ml) 3,57 Các giá trị tương đương với tài liệu công bố, Tmax khoảng 7giờ c max khoảng 3,4 mg/1 T1/2 (h) 4h-7 h ĐỂ XUẤT Tiến hành đánh giá sinh khả dụng tên số cá thể nhiều để thu kết xác khách quan . 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VỆT 1. Bộ Y tế (2001), Bảng phân loại quốc tế bệnh tật ICD -10, NXB Y học, tr. 485 2. Bộ Y tế (2002), Dược điển Việt Nam 3, PL 75 - 76. 3. Bộ Y tế (2000), Thuốc biệt dược nước, NXB khoa học kỹ thuật, tr. 1002. > 4. Võ Xuân Minh (1896), Thuốc tác dụng kéo dài dùng qua đường uống, tài liệu học tập sau đại học. 5. ĐH Dược Hà nội.Trường ĐH Dược Hà Nội (1998). Hóa Phân Tích 2, tr. 7483. 6. Vỉdal Việt Nam 2001, tr. 462 - 5. 7. Bộ Y Tế - Trường đại học dược Hà Nội. Dược lâm sàng đại cương. Trang 839. 8. Trường đại học khoa học tự nhiên .khoa hoá -Xử lý số liệu kế hoạch hoá thực nghiệm Trang 40-66 9. Từ văn Mặc . Phần tích hoá lý NXB khoa học kỹ thuật Hà nội (1995) Trang 293-338. 10.Từđiển bách khoa dược học 1999. Nhà xuất từ điển Bách Khoa.Trang 158 11. Nghiên cứu xây dựng phương pháp định lượng Ketprofen huyết tương (2002)Vũ thị Loan (trangl2-19). 12. Nghiên cứu ứng dụng phương pháp phân tích vào đánh giá singh khả dụng viên keepprofen 200 mg tác dụng kéo dài (2002) (trang 22-41) TIẾNG ANH 13. A.Roda, L. Sabatini, M. Mirasoli, M. Baraldini, E. Roda (2002), Bioavailability of a new ketoprofen formulation for once - daily oral administration, J. of Phar 241, p. 165 - 172. 14. British Pharmacopoeia Commission (1898), British Pharmacopoeia, Vol 1, p. 766 - 7. 15. European phamacopecia - 1997 trang 1073 - 1074. 16. Heitmeier s, Blaschke G (1999), Direct assay of nonopioid analgesics and their metabolites in human urine by capillary electrophoresis and capillary electrophoresis - mass spectrometry, J chromatogr B 721(1), 109 -125. Ì1.HPLC metthods pharmaceutical analysis p 494-518 J. 18. Merck & com. (1996), Merck index 12th, p. 695. 19. Michael E. Winter et al (1980). Basic Clinical Pharmacokinetics, p. 5-9. 20. Rhone - Poulenc Rorer specia, Film coated tablets of Profenid L.p 200mg, specification and test methods of finished product. ( TCCS) 21. Royal Pharmaceutical Society LD (1999), Martindale 32nd, p.714 -5. 22. USP XXIV, 2000, p.946. [...]...đó phương pháp được lựa chọn phải vừa có khả năng định tính, định lượng, có độ nhậy cao, đồng thòi đáp ứng được độ chính xác và tin cậy cho định lượng Có nhiều tác giả đã nghiên cứu và đã sử dụng các điều kiện để định lượng ketoprofen trong huyết tương bằng phương pháp HPLC Dung môi chiết và các điều kiện sắc ký định lượng ketoprofen trong huyết tương được trình... tính đúng của phương pháp, cho thấy có độ chính xác cao (RSD . KIỂU DUYÊN XÂY DỤNG ỨNG DỤNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG • • • • BẰNG HPLC NHẰM ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG VIÊN KETOPROFEN 20 0mg TÁC DỤNG KÉO DÀI KHOÁ LUẬN TÓT NGHIỆP Dược sĩ KHOẢ1998 - 2003 tùêễt. dụng phương pháp định lượng bằng HPLC nhằm đánh giá sinh khả dụng của vỉên Ketoprofen 200 mg TDKD ” ❖ Đề tài nhằm hai muc tiêu sau : > Xây dựng và thẩm định phương pháp định lượng Ketoprofen. 25 mg; 50 mg; 75 mg. - Viên nén 100 mg; 150 mg. - Viên bao tan ở ruột 50 mg. - Viên bao TDKD 20 0mg. 4 - Viên nang TDKD 100 mg; 150 mg; 20 0mg. - Thuốc tiêm 100 mg. - Thuốc mỡ 2,5%. 1.2. Các phương