Đang tải... (xem toàn văn)
dsfdsgfd
THỰC TẬP BUỔI MỤC TIÊU Trình bày ý nghĩa thực xác bước làm kháng sinh đồ. Biết cách đọc kết kháng sinh đồ Trình bày thao tác chiết xuất huyết để làm xét nghiệm vi sinh Trính bày phương pháp pha lỗng huyết thanh. KHÁNG SINH ĐỒ MỤC ĐÍCH: 1. Tìm nhạy cảm đề kháng VK đối với kháng sinh 2. Kiểm tra xem thuốc kháng sinh tác dụng 3. Thăm dò, điều tra tính kháng sinh dược liệu NGUN TẮC THỰC HIỆN: Ni VK điều kiện có tiếp xúc với kháng sinh nồng độ định. VK mọc VK kháng lại loại KS VK khơng mọc VK nhạy với loại KS PHƯƠNG PHÁP: 1. PP đĩa giấy ( PP Kirby – Bauer): định tính 2. PP pha lỗng MIC ( PP tìm nồng độ ức chế tối thiểu): định lượng PP đĩa giấy ( Kirby – Bauer) Ngun tắc: khuếch tán K S CÁCH THỰC HIỆN: cm Ống VK chuẩn độ đục 2- m 5c , Mt NA hay MHA ủ 370C/24h BẢNG TIÊU CHUẨN ĐỂ TRẢ LỜI KẾT QUẢ KHÁNG SINH ĐỒ THEO PHƯƠNG PHÁP KIRBY - BAUER TÊN KHÁNG SINH KÝ HIỆU NỒN G ĐỘ mg Ampicillin Bacill ( G- ) Cocci ( G+) Penicillin A 10 P 10 Staphylococci Vi trùng khác Cephalexin Oxacillin Gentamycin Kanamycin Neomycin Streptomycin Tobramycin Erythromycin Lincomycin Clindamycin Novobiocin Polymycin B Colistin Rifampicin Chloramphenic ol Tétracyclin Quinoseptyl Bactrim Nitrofurantoin ĐƯỜNG KÍNH (mm) Thạch Mueller Hinton Thạch thường Trung Kháng Nhạy cảm (NA) nhạy cảm gian ≤ 11 ≤ 20 12-13 21-28 ≥ 14 ≥ 29 ≤ 20 21-28 ≥ 29 Như thạch MH ≤ 11 12-21 ≥ 22 Như MHA X M G K N S t E L l v b c R 30 01 10 30 30 10 10 15 02 02 30 300 10 30 ≤ 14 ≤9 ≤ 12 ≤ 13 ≤ 12 ≤ 11 ≤ 11 ≤ 13 ≤7 ≤ 14 ≤ 17 ≤8 ≤8 ≤ 11 15-17 10-13 14-17 13-16 12-14 12-13 14-17 8-9 15-16 18-21 9-11 9-10 12-18 ≥ 18 ≥ 14 ≥ 13 ≥ 18 ≥ 17 ≥ 15 ≥ 14 ≥ 18 ≥ 10 ≥ 17 ≥ 22 ≥ 12 ≥ 11 ≥ 19 C 30 ≤ 12 15-17 ≥ 18 Như MHA T U B n 30 01 25 300 ≤ 14 ≤ 12 ≤ 10 ≤ 14 15-18 13-16 11-15 15-16 ≥ 19 ≥ 17 ≥ 16 ≥ 17 Như MHA 10 14 12 Như MHA 12 Như MHA PP PHA LỖNG LIÊN TIẾP:( MIC) Tìm nồng độ tối thiểu kháng sinh ức chế tăng trưởng vi khuẩn Ngun tắc: Dựa liên quan độ pha lỗng kháng sinh tăng trưởng vi khuẩn nồng độ kháng sinh khác nhau. 1/8 1/16 0,5ml mt dd 0,5ml mt dd 0,5ml mt dd 0,5ml mt dd 0,5ml mt dd 1/32 1/128 1/256 0,5ml mt dd 0,5ml mt dd 0,5ml mt dd 1/64 10 0,5m l Bỏ ng 0,5m lố ng 0,5m lố ng 0,5m lố l ốn g5 0,5m ng 0,5m lố 0,5m l ốn g3 0,5ml KS ng 0,5ml KS 200µg/ml 1/4 0,5m lố 1/2 0,5ml mt dd ĐỌC KẾT QUẢ: Kiểm tra ống Tìm ống cuối tìm MIC (µg/m) Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC): nồng độ tối thiểu kháng sinh ngăn cản tăng trưởng vi khuẩn CÁCH LẤY MÁU CHIẾT XUẤT HUYẾT THANH PHA LỖNG HUYẾT THANH Dụng cụ: Pipet ống nghiệm vơ trùng, phiến nhựa Kỹ thuật: Thường pha lỗng theo hệ số Dd pha lỗng: nước muối sinh lý hay dung dịch đệm Pha lỗng huyết theo hệ số bắt đầu với độ lỗng 1:10 Pha ống huyết có độ lỗng 1:5 Ống NMSL (ml) Huyết (ml) Độ lỗng 0,5 0,5 ml huyết 1:5 1:10 Ống Ống phần huyết phần NMSL Ống Ống 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 1:20 1:40 1:80 1:160 THỰC HÀNH 1. Làm đĩa kháng sinh đồ 2. Đọc kết buổi 4. [...]... CHIẾT XUẤT HUYẾT THANH PHA LOÃNG HUYẾT THANH Dụng cụ: Pipet ống nghiệm vô trùng, phiến nhựa Kỹ thuật: Thường pha loãng theo hệ số 2 Dd pha loãng: nước muối sinh lý hay dung dịch đệm Pha loãng huyết thanh theo hệ số 2 bắt đầu với độ loãng 1:10 Pha 1 ống huyết thanh có độ loãng 1:5 Ống 1 NMSL (ml) Huyết thanh (ml) Độ loãng 0,5 0,5 ml huyết thanh 1:5 1:10 Ống 2 Ống 3 1 phần huyết thanh 4 phần . ống huyết thanh có độ loãng 1:5 1 phần huyết thanh 4 phần NMSL Ống 1 Ống 2 Ống 3 Ống 4 Ống 5 NMSL (ml) Huyết thanh (ml) Độ loãng 0,5 0,50,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 ml huyết thanh 1:5 1:10. cản được sự tăng trưởng của vi khuẩn CÁCH LẤY MÁU CHIẾT XUẤT HUYẾT THANH