Nghiên cứu bào chế nano polyme fluconazol

BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI ============ TRỊNH NGỌC DƢƠNG NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ NANO POLYME FLUCONAZOL KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ HÀ NỘI - 2013 TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI ============ TRẦN THỊ HUỆ NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ HỆ NANO PIROXICAM BẰNG PHƢƠN TỦA KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI ============ TRỊNH NGỌC DƢƠNG NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ NANO POLYME FLUCONAZOL KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Ngƣời hƣớng dẫn: ThS. Nguyễn Thị Mai Anh Nơi thực hiện: Bộ môn Bào chế Bộ môn Công nghiệp Dƣợc HÀ NỘI - 2013 LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn sâu sắc, em xin chân thành cảm ơn: ThS. Nguyễn Thị Mai Anh DS. Đào Minh Huy Là những thày cô đã tận tình hƣớng dẫn, chỉ bảo và giúp đỡ em trong suốt quá trình thực hiện và hoàn thành khóa luận tốt nghiệp. Em cũng chân thành cảm ơn: Các thày cô trong Ban giám hiệu, các bộ môn, phòng Đào tạo và cán bộ các phòng ban trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội đã tận tình dạy dỗ em trong những năm tháng học tập tại trƣờng. Các thày cô và kỹ thuật viên bộ môn Bào chế, bộ môn Công nghiệp Dƣợc trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội đã tạo điều kiện giúp đỡ em trong quá trình thực hiện khóa luận này. Cuối cùng em xin chân thành cảm ơn gia đình và bạn bè đã cổ vũ, động viên giúp đỡ em hoàn thành khóa luận. Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 20 tháng 05 năm 2013 Sinh viên Trịnh Ngọc Dƣơng MỤC LỤC Danh mục các ký hiệu, các chữ viết tắt Danh mục các bảng Danh mục các hình vẽ và đồ thị ĐẶT VẤN ĐỀ 1 Chƣơng I: TỔNG QUAN 2 1.1. Đại cƣơng về hệ nano 2 1.1.1. Khái niệm công nghệ nano 2 1.1.2. Tính chất của tiểu phân nano 2 1.1.3. Ƣu nhƣợc điểm của tiểu phân nano 3 1.1.4. Một số cấu trúc hệ nano vận chuyển thuốc 4 1.2. Nano polyme 4 1.2.1. Giới thiệu 4 1.2.2. Một số phƣơng pháp bào chế nano polyme 5 1.3. Fluconazol 8 1.3.1. Công thức hóa học 8 1.3.2. Tính chất 9 1.3.3. Tác dụng, chỉ định 9 1.3.4. Các dạng bào chế có trên thị trƣờng 10 1.4. Một số nghiên cứu bào chế nano fluconazol 10 Chƣơng II: NGUYÊN VẬT LIỆU, PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1. Nguyên liệu 15 2.2. Phƣơng tiện 15 2.3. Phƣơng pháp nghiên cứu 16 2.3.1. Bào chế nano fluconazol 16 2.3.2. Xác định độ tan của fluconazol 16 2.3.3. Khảo sát ảnh hƣởng của tá dƣợc và thiết bị đến sự hình thành hệ nano 18 2.3.4. Đánh giá một số đặc tính của tiểu phân nano 18 2.3.5. Định lƣợng 19 2.3.6. Đánh giá khả năng giải phóng dƣợc chất từ hệ nano 20 Chƣơng III: KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ NHẬN XÉT 23 3.1. Khảo sát ảnh hƣởng của tá dƣợc và thông số kỹ thuật đến hệ nano 23 3.1.1. Khảo sát ảnh hƣởng của một số thông số kỹ thuật 23 3.1.2. Khảo sát ảnh hƣởng của các tá dƣợc 24 3.2. Đánh giá một số đặc tính của hệ nano 31 3.2.1. Kích thƣớc, phân bố kích thƣớc của tiểu phân 31 3.2.2. Thế Zeta của tiểu phân 32 3.2.3. Hình dạng và cấu trúc tiểu phân 33 3.3. Xác định hiệu suất quy trình bào chế nano fluconazol 34 3.4. Sơ bộ đánh giá khả năng giải phóng dƣợc chất từ hệ nano 35 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 38 KẾT LUẬN 38 KIẾN NGHỊ 39 Phụ lục Danh mục các ký hiệu, các chữ viết tắt HPLC Sắc ký lỏng hiệu năng cao (High performance liquid chromatography) HPMC Hydroxypropyl methyl cellulose KHV Kính hiển vi NLC Hệ vận chuyển lipid có cấu trúc nano (Nanostructured lipid carrier) PBS Đệm phosphate (Phosphate Buffered Saline) PDI Chỉ số đa phân tán (Polydispersion index) PEG Polyethylen glycol PG Propylen glycol PLA Poly (d,l-lactic acid) PVA Alcol polyvinic SLN Nano lipid rắn (Solid lipid nanoparticle) TEM KHV điện tử truyền qua (Transmission Electron Microscopy) Danh mục các bảng Bảng Tên Trang 1.1 Một số cấu trúc của hệ nano 4 2.1 Nguyên liệu sử dụng trong quá trình thực nghiệm 15 3.1 Công thức bào chế nano fluconazol 23 3.2 Công thức bào chế nano fluconazol sử dụng các dung môi khác nhau 25 3.3 Kích thƣớc tiểu phân nano fluconazol bào chế với các hệ dung môi khác nhau 25 3.4 Kích thƣớc tiểu phân nano fluconazol với tỉ lệ dung môi khác nhau 26 3.5 Công thức bào chế nano fluconazol với lƣợng Eudragit RS 100 thay đổi 26 3.6 Kích thƣớc tiểu phân fluconazol bào chế với lƣợng Eudragit RS 100 thay đổi 26 3.7 Công thức bào chế nano fluconazol với các chất nhũ hóa khác nhau 27 3.8 Kích thƣớc, thế Zeta của mẫu khi dùng các chất nhũ hóa khác nhau 27 3.9 Kích thƣớc, thế Zeta của mẫu với các nồng độ PVA khác nhau 28 3.10 Nồng độ fluconazol trong dịch ly tâm ở các nồng độ PVA khác nhau 28 3.11 Độ tan của fluconazol trong diclomethan và nƣớc ở điều kiện phòng thí nghiệm 29 3.12 Công thức bào chế nano fluconazol với thể tích pha ngoại thay đổi 30 3.13 Kích thƣớc, thế Zeta và hiệu suất quy trình bào chế khi thay đổi 30 thể tích pha ngoại 3.14 Công thức bào chế nano fluconazol đƣợc lựa chọn 30 3.15 Kích thƣớc của tiểu phân nano trong các môi trƣờng khác nhau (n=2) 31 3.16 Thế Zeta của tiểu phân nano trong các môi trƣờng khác nhau (n=2) 32 3.17 Hiệu suất quy trình bào chế nano fluconazol 35 3.18 Phần trăm fluconazol giải phóng từ hỗn dịch fluconazol nguyên liệu và hỗn dịch nano trong 7 giờ (n=2) 36 4 Công thức bào chế nano fluconazol 38 Danh mục các hình vẽ, đồ thị Hình Tên Trang 1.1 Sơ đồ phƣơng pháp nhũ hóa bay hơi dung môi 5 1.2 Sơ đồ phƣơng pháp keo tụ ion 6 1.3 Sơ đồ phƣơng pháp nhũ hóa khuếch tán dung môi 7 1.4 Sơ đồ phƣơng pháp kết tủa 7 1.5 Sơ đồ phƣơng pháp thẩm tích 8 1.6 Công thức hóa học của fluconazol 9 2.1 Sơ đồ quy trình bào chế nano polyme fluconazol 17 2.2 Hệ thống đánh giá giải phóng thuốc qua màng Hanson Research 21 3.1 Đồ thị biểu diễn sự thay đổi kích thƣớc của tiểu phân nano fluconazol trong các môi trƣờng khác nhau 31 3.2 Đồ thị biểu diễn sự thay đổi thế Zeta của tiểu phân nano fluconazol trong các môi trƣờng khác nhau 32 3.3 Ảnh chụp hệ tiểu phân nano fluconazol qua KHV điện tử truyền qua a) Độ phóng đại 4000x b) Độ phóng đại 12000x 33-34 3.4 Đồ thị biểu diễn phần trăm fluconazol giải phóng trong 7 giờ của hỗn dịch fluconazol nguyên liệu và hỗn dịch nano 36 1 ĐẶT VẤN ĐỀ Hơn 50 năm qua, công nghệ nano đƣợc nghiên cứu liên tục trên thế giới và đang đƣợc phát triển ứng dụng trên nhiều lĩnh vực ở Việt Nam. Trong ngành dƣợc, những dạng thuốc nano đã góp phần không nhỏ vào sự phát triển của công nghệ bào chế hiện đại. Thuốc nano có thể áp dụng cho tất cả các đƣờng dùng, tuy nhiên, tác dụng trên da là cách dùng đƣợc xem là ít độc nhất đối với cơ thể. Trong bào chế thuốc điều trị bệnh ở da, các nhà khoa học phải đối mặt với hai thách thức lớn: một là thuốc phải xuyên qua đƣợc lớp sừng và thấm qua lớp biểu bì; hai là thuốc phải đƣợc lƣu giữ lâu trên da (ít hấp thu qua da để vào vòng tuần hoàn chung gây tác dụng toàn thân). Đây là hai vấn đề đối nghịch nhau và khó giải quyết ở những dạng thuốc bôi thông thƣờng. Những đặc tính mới của thuốc nano có thể đƣợc ứng dụng để giải quyết hai khó khăn này, cải thiện hiệu quả điều trị các bệnh ở da. Fluconazol là thuốc chống nấm tổng hợp thuộc nhóm triazol đƣợc chỉ định điều trị nhiễm nấm Candida ở miệng họng, thực quản, âm đạo hoặc toàn thân. Hiện nay, fluconazol chủ yếu đƣợc dùng qua đƣờng uống và tiêm truyền trong khi những chế phẩm tác dụng tại chỗ trên da còn hạn chế. Do vậy để có thể bƣớc đầu xây dựng phƣơng pháp bào chế dạng dùng qua da của fluconazol bằng cách ứng dụng công nghệ nano, chúng tôi tiến hành đề tài ―Nghiên cứu bào chế nano polyme fluconazol ‖, với hai mục tiêu chính sau: 1- Bào chế hệ tiểu phân nano polyme fluconazol. 2- Đánh giá một số đặc tính của hệ tiểu phân nano polyme fluconazol. [...]... cấu trúc của hệ nano Nano lipid Nano polyme Các cấu trúc khác - Liposom - Dendrime - Niosom - Ethosom - Nano polyme - Nano nhũ tƣơng - SLN - Micell - NLC 1.2 Nano polyme 1.2.1 Giới thiệu Nano polyme đã đƣợc ứng dụng từ những năm 1990 với mục đích kiểm soát giải phóng dƣợc chất Polyme sử dụng có thể có nguồn gốc tự nhiên hoặc nhân tạo Các phƣơng pháp bào chế nano polyme thuộc hai nhóm là polyme hóa monome... Transgel) 1.4 Một số nghiên cứu bào chế nano fluconazol Bhalaria M và cộng sự nghiên cứu bào chế ethosom fluconazol bằng phƣơng pháp đồng nhất hóa theo quy trình: - Hòa tan fluconazol trong hỗn hợp dung môi ethanol và PG (1) - Phân tán phosphatidyl cholin đậu nành trong nƣớc (2) 11 - Phối hợp (1) vào (2), sau đó lần lƣợt siêu âm và đồng nhất ở áp suất cao Tác giả cũng đồng thời bào chế liposom fluconazol nhƣ... bào chế hệ nano Các mẫu đƣợc bào chế với các thành phần nhƣ trong bảng 3.2 Kích thƣớc tiểu phân ngay sau khi bào chế đƣợc tổng kết ở bảng 3.3 25 Bảng 3.2: Công thức bào chế nano fluconazol sử dụng các dung môi khác nhau Thành phần Fluconazol 100 mg Eudragit RS 100 100 mg Dung môi 1 5 ml Dung môi 2 2,5 ml PVA 2g Nƣớc Pha nội Số lƣợng 100 ml Pha ngoại Bảng 3.3: Kích thƣớc tiểu phân nano fluconazol bào. .. - Màng thẩm tích Spectra/Por 4 - Máy đo kích thƣớc tiểu phân Zetasizer Nano ZS90 Malverin - Cân phân tích, tủ sấy, tủ sấy chân không, tủ lạnh, máy lọc nén, nhiệt kế… 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.3.1 Bào chế nano fluconazol Bào chế nano fluconazol bằng phƣơng pháp nhũ hóa bay hơi dung môi Bước 1: - Tạo dung dịch dƣợc chất: hòa tan fluconazol và Eudragit RS 100 vào dung môi (dung dịch 1) - Tạo dung dịch... Nhiệt độ phòng thí nghiệm - 17000 vòng /phút Ly tâm lấy tủa - 45 phút - 4 0C Nƣớc bão hòa fluconazol 25 ml nƣớc Rửa tủa 20 ml × 2 lần Phân tán lại Hình 2.1: Sơ đồ quy trình bào chế nano polyme fluconazol 18 2.3.3 Khảo sát ảnh hưởng của tá dược và thiết bị đến sự hình thành hệ nano Thay đổi các điều kiện bào chế nano fluconazol bao gồm: - Thay đổi một số yếu tố kĩ thuật: + Nhiệt độ khi phối hợp dung dịch... hóa monome và phân tán polyme Ba cơ chế giải phóng dƣợc chất chính tại mô tế bào của tiểu phân nano polyme: - Polyme trƣơng nở, sau đó dƣợc chất khuếch tán ra ngoài - Phản ứng xúc tác enzyme gây ra vỡ, thoái hóa polyme làm giải phóng lõi dƣợc chất - Dƣợc chất bị tách ra khỏi polyme và giải phóng hoặc phản hấp phụ từ tiểu phân nano đã trƣơng nở Các polyme thƣờng đƣợc sử dụng: - Polyme tự nhiên: chitosan,... đến 90,2% Công thức tối ƣu giải phóng nhiều gấp 5 lần chế phẩm thị trƣờng cho thấy vi nhũ tƣơng có khả năng cải thiện hiệu quả dùng đƣờng da của fluconazol [28] Yadav M và Ahuja M đã bào chế nano polyme fluconazol bằng phƣơng pháp nhũ hóa tạo liên kết chéo với polyme cordia chiết từ quả cây C obliqua theo quy trình: - Nhũ hóa dung dịch fluconazol và polyme trong nƣớc vào diclomethan chứa chất diện hoạt... đƣợc bào chế với lƣợng Eudragit thay đổi từ 100 mg đến 500 mg, các thành phần còn lại nằm trong bảng 3.5 Kết quả đo kích thƣớc tiểu phân đƣợc ghi ở bảng 3.6 Bảng 3.5: Công thức bào chế nano fluconazol với lƣợng Eudragit RS 100 thay đổi Thành phần Fluconazol Thay đổi Diclomethan 7,5 ml PVA 2g Nƣớc Pha ngoại 100 mg Eudragit RS 100 Pha nội Số lƣợng 100 ml Bảng 3.6: Kích thƣớc tiểu phân fluconazol bào chế. .. lƣợng: X = S nano Cchuan   50 S chuan Vnano Trong đó: X : Nồng độ fluconazol có trong mẫu S nano : Diện tích pic dung dịch thử Schuan : Diện tích pic dung dịch chuẩn đã biết trƣớc nồng độ Cchuan : Nồng độ dung dịch fluconazol chuẩn Vnano : Thể tích hỗn dịch đã hút Công thức tính hiệu suất: H = X m fluconazol  25 100 Trong đó: H : Phần trăm khối lƣợng fluconazol có trong mẫu so với fluconazol ban... giai đoạn nhũ hóa trong quy trình bào chế đƣợc thay đổi Đánh giá ảnh hƣởng của các yếu tố này dựa vào kích thƣớc tiểu phân của sản phẩm thu đƣợc Bảng 3.1: Công thức bào chế nano fluconazol Thành phần 100 mg 100 mg Diclomethan 5 ml Ethanol 2,5 ml PVA 2g Nƣớc cất Pha ngoại Fluconazol Eudragit RS 100 Pha nội Số lƣợng 100 ml 3.1.1.1 Nhiệt độ trong quá trình nhũ hóa Bào chế mẫu trong các điều kiện nhiệt . của fluconazol bằng cách ứng dụng công nghệ nano, chúng tôi tiến hành đề tài Nghiên cứu bào chế nano polyme fluconazol ‖, với hai mục tiêu chính sau: 1- Bào chế hệ tiểu phân nano polyme fluconazol. . Transgel). 1.4. Một số nghiên cứu bào chế nano fluconazol Bhalaria M. và cộng sự nghiên cứu bào chế ethosom fluconazol bằng phƣơng pháp đồng nhất hóa theo quy trình: - Hòa tan fluconazol trong. nghiên cứu bào chế nano fluconazol 10 Chƣơng II: NGUYÊN VẬT LIỆU, PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1. Nguyên liệu 15 2.2. Phƣơng tiện 15 2.3. Phƣơng pháp nghiên cứu 16 2.3.1. Bào chế nano fluconazol