ĐẶT VẤN ĐỀ Công nghệ nano đã và đang tạo ra một cuộc cách mạng lớn trong bào chế thuốc hiện đại. Sử dụng công nghệ nano để thiết kế các hệ phân phối thuốc mới đã tạo nên sự phát triển của ngành y học, hứa hẹn những tiến bộ đột phá trong điều trị và chẩn đoán. Khi bào chế thuốc nhãn khoa, vấn đề SKD luôn đƣợc đặt ra với các nhà bào chế, do mắt là một tổ chức có cấu tạo và cơ chế sinh lý phức tạp. Các thuốc nhãn khoa thƣờng có tỉ lệ hấp thu thuốc thấp và thời gian lƣu thuốc trƣớc giác mạc ngắn. NNT là một trong số các hệ bào chế có cấu trúc nano đã và đang nhận đƣợc sự quan tâm của rất nhiều các nhà khoa học trên thế giới. Nhiều nghiên cứu đã chứng minh, NNT làm tăng tỉ lệ hấp thu thuốc vào các mô bên trong mắt [23], tăng thời gian lƣu thuốc trƣớc giác mạc [11], cải thiện SKD và hiệu quả điều trị tại mắt [16], [96]. Các nghiên cứu cũng chỉ ra đây là hệ phân phối thuốc tại mắt tiềm năng cho các DC thuộc nhóm II, III trong bảng phân loại sinh dƣợc học (BCS) [160]. Diclofenac là một DC điển hình của nhóm NSAIDs, có khả năng ngăn chặn sự co đồng tử xảy ra trong quá trình lấy tinh thể đục, làm giảm viêm và đau trong tổn thƣơng biểu mô giác mạc sau phẫu thuật [10]. Diclofenac là một dƣợc chất có độ hòa tan kém, các chế phẩm thuốc nhỏ mắt diclofenac hiện có trên thị trƣờng chủ yếu ở dạng dung dịch có hiệu quả điều trị không cao [58]. Để cải thiện sinh khả dụng của diclofenac khi dùng cho mắt và tiếp cận dạng bào chế thuốc mới theo công nghệ nano, đề tài: ―Nghiên cứu bào chế nano nhũ tƣơng nhỏ mắt diclofenac và bƣớc đầu đánh giá sinh khả dụng của chế phẩm‖ đƣợc tiến hành nghiên cứu với các mục tiêu: 1. Xây dựng đƣợc công thức và quy trình bào chế nano nhũ tƣơng nhỏ mắt diclofenac 0,1% ở quy mô phòng thí nghiệm. 2. Nâng quy mô bào chế, dự thảo đƣợc tiêu chuẩn cơ sở, đánh giá độ ổn định cho nano nhũ tƣơng nhỏ mắt diclofenac 0,1%. 3. Đánh giá đƣợc sinh khả dụng của chế phẩm trên thỏ thí nghiệm và bƣớc đầu thiết lập đƣợc tƣơng quan in vitro – in vivo của chế phẩm.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ĐẶNG THỊ HIỀN NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ NANO NHŨ TƯƠNG NHỎ MẮT DICLOFENAC VÀ BƯỚC ĐẦU ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG CỦA CHẾ PHẨM LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI, 2016 MỤC LỤC Trang BẢNG CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT vii DANH MỤC BẢNG ix DANH MỤC CÁC HÌNH xii ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 THÔNG TIN VỀ DƢỢC CHẤT ACID DICLOFENAC 1.1.1 Công thức hóa học 1.1.2 Đặc tính lý hóa 1.1.3 Tác dụng, định 1.2 NANO NHŨ TƢƠNG 1.2.1 Khái niệm 1.2.2 Thành phần 1.2.3 Kỹ thuật bào chế nano nhũ tƣơng 1.2.4 Đặc tính nano nhũ tƣơng 1.2.5 Ƣu nhƣợc điểm nano nhũ tƣơng 11 1.3 NANO NHŨ TƢƠNG NHỎ MẮT 16 1.3.1 Đặc điểm cấu tạo mắt liên quan đến hấp thu dƣợc chất 16 1.3.2 Một số nghiên cứu nano nhũ tƣơng nhỏ mắt 18 1.3.3 Đánh giá sinh khả dụng nano nhũ tƣơng mắt 22 Chƣơng NGUYÊN LIỆU, TRANG THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.1 NGUYÊN LIỆU, PHƢƠNG TIỆN, ĐỘNG VẬT THÍ NGHIỆM 34 2.1.1 Nguyên liệu 34 2.1.2 Thiết bị 35 2.1.3 Động vật thí nghiệm 36 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 36 2.3 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 36 2.3.1 Phƣơng pháp bào chế nano nhũ tƣơng diclofenac 36 2.3.2 Phƣơng pháp bào chế dung dịch nhỏ mắt diclofenac so sánh 38 2.3.3 Phƣơng pháp đánh giá số đặc tính hệ nano nhũ tƣơng 39 2.3.4 Phƣơng pháp nghiên cứu độ ổn định 45 iv 2.3.5 Phƣơng pháp thử kích ứng mắt 46 2.3.6 Phƣơng pháp nghiên cứu sinh khả dụng 48 2.3.7 Phƣơng pháp xây dựng tƣơng quan in vitro – in vivo 52 2.3.8 Phƣơng pháp ghi xử lý số liệu 54 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 55 3.1 THẨM ĐỊNH PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH LƢỢNG DƢỢC CHẤT TRONG MẪU NANO NHŨ TƢƠNG VÀ MÔI TRƢỜNG GIẢI PHÓNG 55 3.1.1 Tính đặc hiệu phƣơng pháp 55 3.1.2 Xác định tính tuyến tính 55 3.1.3 Xác định độ 57 3.1.4 Xác định độ lặp lại 58 3.1.5 Kết luận 58 3.2 XÂY DỰNG CÔNG THỨC VÀ QUY TRÌNH BÀO CHẾ NANO NHŨ TƢƠNG 59 3.2.1 Bào chế nano nhũ tƣơng kỹ thuật siêu âm 59 3.2.2 Bào chế nano nhũ tƣơng kỹ thuật siêu âm kết hợp đồng hóa áp suất cao 80 3.2.3 Bào chế nano nhũ tƣơng kỹ thuật phân cắt tốc độ cao 84 3.3 NÂNG QUY MÔ BÀO CHẾ 98 3.3.1 Khảo sát lựa chọn thời gian siêu âm nâng quy mô 98 3.3.2 Đánh giá tính lặp lại quy trình nâng quy mô bào chế 103 3.4 DỰ THẢO TIÊU CHUẨN CHẤT LƢỢNG CỦA NANO NHŨ TƢƠNG NHỎ MẮT DICLOFENAC 105 3.5 ĐÁNH GIÁ ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA NANO NHŨ TƢƠNG NHỎ MẮT 106 3.6 KHẢO SÁT ĐẶC TÍNH CỦA MẪU NANO NHŨ TƢƠNG ĐƢỢC LỰA CHỌN ĐỂ ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG 107 3.7 THỬ KÍCH ỨNG MẮT TRÊN THỎ 108 3.8 NGHIÊN CỨU SINH KHẢ DỤNG CỦA NANO NHŨ TƢƠNG NHỎ MẮT TRÊN THỎ THÍ NGHIỆM 109 3.8.1 Thẩm định phƣơng pháp định lƣợng diclofenac dịch tiền phòng 109 3.8.2 Đánh giá sinh khả dụng thông số dƣợc động học 117 3.9 XÂY DỰNG TƢƠNG QUAN IN VITRO – IN VIVO TRONG THIẾT KẾ CÔNG THỨC NANO NHŨ TƢƠNG NHỎ MẮT DICLOFENAC 121 3.9.1 Đánh giá giải phóng dƣợc chất in vitro 121 v 3.9.2 Mô hình hóa đồ thị giải phóng 123 3.9.3 Thiết lập tƣơng quan 124 3.9.4 Ứng dụng tƣơng quan in vitro – in vivo xây dựng tiêu giải phóng dƣợc chất nano nhũ tƣơng 126 Chƣơng BÀN LUẬN 128 4.1 VỀ ACID DICLOFENAC 128 4.2 VỀ BÀO CHẾ NANO NHŨ TƢƠNG 129 4.2.1 Về công thức bào chế 129 4.2.2 Về thiết bị bào chế 132 4.2.3 Về nhiệt độ nhũ hóa 133 4.2.4 Về tỉ lệ dƣợc chất pha dầu nano nhũ tƣơng nhỏ mắt diclofenac 134 4.2.5 Về cấu trúc nano nhũ tƣơng 135 4.2.6 Về nâng quy mô bào chế 136 4.3 VỀ KHẢ NĂNG GIẢI PHÓNG IN VITRO CỦA NANO NHŨ TƢƠNG NHỎ MẮT DICLOFENAC 137 4.4 VỀ NGHIÊN CỨU ĐỘ ỔN ĐỊNH 140 4.5 VỀ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ 140 4.6 VỀ NGHIÊN CỨU TÍNH KÍCH ỨNG 141 4.7 VỀ ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG IN VIVO VÀ THIẾT LẬP TƢƠNG QUAN IN VITRO – IN VIVO 142 4.7.1 Về định lƣợng diclofenac dịch tiền phòng 144 4.7.2 Về lựa chọn mô hình dƣợc động học 145 4.7.3 Về xây dựng tƣơng quan in vitro – in vivo 146 KẾT LUẬN 148 ĐỀ XUẤT 149 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ CÓ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC vi BẢNG CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT ADC Acid diclofenac AIC The Akaike information criterion (Tiêu chuẩn thông tin Akaike) ANOVA Analysis of variance (Phân tích phƣơng sai) AUC The area under the curve (Diện tích dƣới đƣờng cong) AUMC Area under the first moment curve (Diện tích dƣới đƣờng cong nồng độ × thời điểm) BCS Biopharmaceutics Classification System (Hệ thống phân loại sinh dƣợc học) CĐDH Chất đồng diện hoạt CDH Chất diện hoạt Cmax Maximum concentration (Nồng độ thuốc tối đa) COX Cyclooxygenase Cre Cremophor CT Công thức CTBC Công thức bào chế CTCL Chỉ tiêu chất lƣợng CTTƢ Công thức tối ƣu D/N Dầu/nƣớc DAD Diode Array Detector (Detector mảng quang diod) DC Dƣợc chất DD Dung dịch ĐNH Đồng hóa ECD Electron capture detector (Detector điện hóa) FDA Food and Drug Administration (Cơ quan quản lý thuốc – thực phẩm) GP Giải phóng GPDC Giải phóng dƣợc chất GTTB Giá trị trung bình HLB Hydrophilic-lipophilic balance (Hằng số cân dầu/nƣớc) HPLC High performance liquid chromatography (Sắc ký lỏng hiệu cao) HQC High quality control sample (Mẫu kiểm chứng nồng độ cao) IPM Isopropyl myristat IVIVC In vitro – in vivo correlation (tƣơng quan in vitro – in vivo) vii kl Khối lƣợng KTG Kích thƣớc giọt LC-MS Liquid chromatography–mass spectrometry (Sắc ký lỏng khối phổ) LLOQ Lower limit of quantification (Giới hạn định lƣợng dƣới) LQC Lower quality control sample (Mẫu kiểm chứng nồng độ thấp) MCT Medium-chain triglycerides (triglycerid có acid béo mạch trung bình) MQC Middle quality control sample (Mẫu kiểm chứng nồng độ trung bình) MRT Mean residence time (Thời gian lƣu trung bình) MT Môi trƣờng MTPT Môi trƣờng phân tán N/D Nƣớc/dầu NaDC Natri diclofenac NSAIDs Nonsteroidal anti-inflammatory drugs (thuốc chống viêm không steroid) NNT Nano nhũ tƣơng PdI Polydispersity index (chỉ số đa phân tán) PEG Polyethylen glycol PG Propylen glycol PL Phụ lục RSD Relative standard deviation (Độ lệch chuẩn tƣơng đối) SD Standard deviation (Độ lệch chuẩn) SKD Sinh khả dụng TB Trung bình TCCS Tiêu chuẩn sở TEM Transmission electron microscopy (Hiển vi điện tử truyền qua) Tmax Maximum time (Thời gian đạt nồng độ thuốc tối đa) tt Thể tích Tw Tween USA The United States of America (Hợp chủng quốc Hoa Kỳ) viii DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 1.1: Độ tan amlodipin loại dầu nano nhũ tƣơng 25 ± 1oC (n = 3) 11 Bảng 1.2: Một số chế phẩm nano nhũ tƣơng nhỏ mắt 21 Bảng 1.3: Một số đặc điểm giải phẫu, sinh lý mắt ngƣời mắt thỏ 24 Bảng 1.4 Một số điều kiện chạy sắc ký định lƣợng ADC dịch tiền phòng 26 Bảng 2.5: Nguyên liệu sử dụng 34 Bảng 2.6: Các thiết bị sử dụng nghiên cứu nano nhũ tƣơng nhỏ mắt diclofenac 35 Bảng 2.7 Thành phần tá dƣợc bào chế nano nhũ tƣơng acid diclofenac 36 Bảng 2.8 Điều kiện bảo quản chu kỳ lấy mẫu kiểm tra theo dõi độ ổn định NNT ADC 45 Bảng 2.9: Hệ thống phân loại tổn thƣơng mắt 47 Bảng 2.10: Các mô hình giải phóng khác đƣợc sử dụng để phân tích liệu in vitro 53 Bảng 3.11: Sự phụ thuộc diện tích pic nồng độ acid diclofenac 56 Bảng 3.12: Kết khảo sát độ phƣơng pháp HPLC 57 Bảng 3.13: Kết khảo sát độ lặp lại phƣơng pháp HPLC 58 Bảng 3.14: Các thành phần công thức NNT ADC 62 Bảng 3.15: Các biến độc lập 63 Bảng 3.16: Các biến phụ thuộc 64 Bảng 3.17: Thiết kế thí nghiệm bào chế NNT kỹ thuật siêu âm 65 Bảng 3.18: Ảnh hƣởng thời gian siêu âm tới số tiêu chất lƣợng chế phẩm nano nhũ tƣơng bào chế theo CT 16 (n = 3) 66 Bảng 3.19: Phần trăm giải phóng DC, độ bền, KTG TB, zeta PdI NNT ADC 67 Bảng 3.20: Kết luyện mạng neuron nhận tạo FormRules 2.0 68 Bảng 3.21: Giá trị R2luyện cho biến đầu vào 76 Bảng 3.22: Thành phần công thức NNT đƣợc lựa chọn 77 ix Bảng 3.23: Kết phần trăm dƣợc chất giải phóng dự đoán 78 Bảng 3.24: Phần trăm DC giải phóng NNT thực tế (n = 3) 78 Bảng 3.25: Một số tiêu chất lƣợng mẫu NNT bào chế theo công thức tối ƣu (n = 3) 79 Bảng 3.26 Thành phần công thức nano nhũ tƣơng đƣợc lựa chọn bào chế thiết bị siêu âm kết hợp đồng hóa áp suất cao 81 Bảng 3.27: Kết đo kích thƣớc giọt thời điểm đồng hóa áp suất cao khác (n = 3) 82 Bảng 3.28: Một số tiêu chất lƣợng NNT bào chế thiết bị siêu âm, siêu âm + ĐNH sau thời gian 12 phút (n = 3) 83 Bảng 3.29: Các thành phần công thức bào chế nano nhũ tƣơng diclofenac với kỹ thuật phân cắt tốc độ cao 85 Bảng 3.30: Các biến độc lập 86 Bảng 3.31: Các biến phụ thuộc 86 Bảng 3.32: Thiết kế thí nghiệm cho NNT nhỏ mắt acid diclofenac 87 Bảng 3.33: Các đặc tính vật lý nano nhũ tƣơng diclofenac (n=3) 88 Bảng 3.34: Kết luyện mạng neural nhận tạo FormRules 2.0 90 Bảng 3.35 Tỉ lệ dƣợc chất pha dầu số mẫu NNT (n = 3) 96 Bảng 3.36 Một số tiêu chất lƣợng mẫu nano nhũ tƣơng (CTTƢ 2) đƣợc bào chế thiết bị phân cắt tốc độ cao 97 Bảng 3.37: Kết kích thƣớc giọt trung bình tỉ lệ DC đƣợc nhũ tƣơng hóa mẫu NNT có thời gian siêu âm khác (n = 3) 99 Bảng 3.38: Kết tỉ lệ DC giải phóng theo thời gian siêu âm (n = 3) 101 Bảng 3.39: Kết xác định số thông số NNT sau thời gian bảo quản tháng 40±2oC, độ ẩm 75±5% so sánh với NNT bào chế (n = 3) 102 Bảng 3.40: Thành phần công thức bào chế nâng quy mô 1000 ml 103 Bảng 3.41: Kết đánh giá chất lƣợng NNT quy mô 100 ml 1000 ml (n = 3) 104 Bảng 3.42: Dự thảo tiêu chuẩn chất lƣợng cho nano nhũ tƣơng nhỏ mắt diclofenac 105 Bảng 3.43: Đánh giá phần trăm giải phóng dƣợc chất CTTƢ (n = 3) 108 x Bảng 3.44 Bảng chấm điểm đánh giá tính kích ứng mắt thỏ 109 Bảng 3.45: Đáp ứng pic mẫu trắng mẫu chuẩn thời điểm trùng với thời gian lƣu diclofenac 110 Bảng 3.46: Tƣơng quan nồng độ diclofenac dịch tiền phòng diện tích pic 111 Bảng 3.47: Nồng độ diclofenac mẫu chuẩn tính theo phƣơng trình hồi quy 112 Bảng 3.48: Xác định giới hạn định lƣợng dƣới (LLOQ) 113 Bảng 3.49: Kết thẩm định độ đúng, độ lặp lại ngày 113 Bảng 3.50: Kết thẩm định độ đúng, độ lặp lại khác ngày 114 Bảng 3.51: Độ ổn định mẫu sau xử lý bảo quản nhiệt độ phòng 24 116 Bảng 3.52: Nồng độ dƣợc chất dịch tiền phòng mắt trái mắt phải thỏ (n = 6) 117 Bảng 3.53: Tỉ lệ GP in vivo NNT so với dung dịch 119 Bảng 3.54: Các thông số dƣợc động học tính toán nhờ phần mềm Phoenix WinNonlin 6.3 120 Bảng 3.55: Kết AIC môi trƣờng GP với mô hình GP khác 123 Bảng 3.56 Giá trị AIC theo tƣơng quan mức độ GP in vitro điều kiện thử GP mức độ GP in vivo dƣợc chất 125 Bảng 3.57 Phần trăm giải phóng dƣợc chất từ NNT ADC qua môi trƣờng pH 5,8 (n = 3) 126 Bảng 3.58 Tiêu chuẩn chất lƣợng nano nhũ tƣơng nhỏ mắt diclofenac 127 xi DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 1.1: Công thức cấu tạo acid diclofenac [142] Hình 1.2: Phƣơng pháp ĐNH áp suất cao [99] Hình 1.3: Một số trình phá vỡ cấu trúc nhũ tƣơng [89] Hình 1.4: Cấu tạo lớp điện kép [38] 10 Hình 1.5: Cấu tạo giải phẫu mắt [2] 17 Hình 1.6: Sơ đồ bình Franz [97] 22 Hình 1.7: Mô hình thử nghiệm kỹ thuật thẩm tách micro [102] 23 Hình 1.8: Mô hình đánh giá khả thấm dƣợc chất qua giác mạc phƣơng pháp vi thẩm tích [83] 25 Hình 1.9: Một số mô hình ngăn cho thuốc nhỏ mắt 28 Hình 2.10: Sơ đồ quy trình bào chế nano nhũ tƣơng nhỏ mắt diclofenac 37 Hình 2.11: Ảnh minh họa cho mức độ tách pha NNT 41 Hình 3.12: Đồ thị biểu diễn phụ thuộc tuyến tính nồng độ acid diclofenac diện tích pic 56 Hình 3.13: Mặt đáp biểu diễn ảnh hƣởng lƣợng CDH thân nƣớc lƣợng Transcutol HP đến phần trăm giải phóng ADC sau 69 Hình 3.14: Mặt đáp biểu diễn ảnh hƣởng lƣợng CDH thân nƣớc lƣợng Span 80 đến phần trăm giải phóng ADC sau 70 Hình 3.15: Mặt đáp biểu diễn ảnh hƣởng lƣợng Span 80 lƣợng Transcutol HP tới phần trăm giải phóng ADC sau 71 Hình 3.16: Mặt đáp biểu diễn ảnh hƣởng lƣợng CDH thân nƣớc lƣợng dung môi pha dầu tới độ bền NNT ADC 72 Hình 3.17: Mặt đáp biểu diễn ảnh hƣởng pH loại hệ đệm tới độ bền NNT ADC 73 Hình 3.18: Mặt đáp biểu diễn ảnh hƣởng loại hệ đệm lƣợng CDH thân nƣớc tới KTG T NNT ADC 74 Hình 3.19: Mặt đáp biểu diễn ảnh hƣởng lƣợng CDH thân nƣớc loại hệ đệm tới zeta NNT ADC 75 Hình 3.20: Mặt đáp biểu diễn ảnh hƣởng lƣợng Span 80 pH tới zeta NNT ADC 76 Hình 3.21: Đồ thị % DC giải phóng theo thời gian mẫu NNT bào chế theo CTTƢ dự đoán thực tế 78 xii PHỤ LỤC7: PHIẾU KIỂM NGHIỆM (MỤC 3.4) PHỤ LỤC 8: TIÊU CHUẨN CƠ SỞ CỦA NANO NHŨ TƢƠNG NHỎ MẮT DICLOFENAC (MỤC 3.4) PHỤ LỤC 9: NGHIÊN CỨU ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA NANO NHŨ TƢƠNG NHỎ MẮT DICLOFENAC (MỤC 3.5) Bảng PL 9.1 : Kết đánh giá độ ổn định nano nhũ tƣơng nhỏ mắt diclofenac mẻ 001 40±2oC/75±5% ĐK thực 5±3oC ĐK CTCL Tính bảo chất quản Th điểm Giới hạn TT Định Định % DC GP KTG tính lƣợng giờ TB (%) (nm) PdI Thế Độ zeta nhớt (mV) (cP) pH Độ vô % NT khuẩn hoá tháng Đạt Đạt Đạt 101,0 8,0 12,7 20,4 134,7 0,267 -45,5 4,6 6,99 Đạt 97,9 tháng Đạt Đạt Đạt 100,4 8,1 12,9 20,5 137,5 0,269 -44,1 4,8 6,92 Đạt 97,1 tháng Đạt Đạt Đạt 99,7 8,3 13,0 20,6 140,2 0,271 -42,3 4,9 6,85 Đạt 96,4 tháng Đạt Đạt Đạt 99,1 8,4 13,2 20,8 143,1 0,274 -40,4 5,0 6,80 Đạt 95,7 tháng Đạt Đạt Đạt 101,0 8,0 12,7 20,4 134,7 0,267 -45,5 4,6 6,99 Đạt 97,9 tháng Đạt Đạt Đạt 100,1 8,2 12,9 20,6 138,2 0,270 -43,3 4,8 6,93 Đạt 97,1 tháng Đạt Đạt Đạt 99,2 8,3 13,1 20,8 141,8 0,273 -41,5 4,9 6,87 Đạt 96,3 tháng Đạt Đạt Đạt 98,3 8,5 13,3 21,0 145,5 0,276 -39,2 5,1 6,81 Đạt 95,4 tháng Đạt Đạt Đạt 101,0 8,0 12,7 20,4 134,7 0,267 -45,5 4,6 6,99 Đạt 97,9 tháng Đạt Đạt Đạt 99,9 8,3 13,0 20,7 142,2 0,271 -42,8 4,9 6,91 Đạt 96,4 tháng Đạt Đạt Đạt 98,8 8,5 13,2 20,9 147,3 0,274 -40,1 5,1 6,81 Đạt 94,9 tháng Đạt Đạt Đạt 97,4 8,8 13,4 21,2 153,7 0,279 -37,6 5,3 6,74 Đạt 93,9 Bảng PL 9.2 : Kết đánh giá độ ổn định nano nhũ tƣơng nhỏ mắt diclofenac mẻ 002 40±2oC/75±5% ĐK thực 5±3oC ĐK CTCL Tính bảo chất quản Th điểm Giới hạn TT Định Định % DC GP KTG tính lƣợng TB giờ (%) (nm) PdI Thế Độ zeta nhớt (mV) (cP) pH Độ vô % NT khuẩn hoá tháng Đạt Đạt Đạt 100,1 7,8 12,8 19,6 130,6 0,260 -46,0 4,5 7,23 Đạt 96,4 tháng Đạt Đạt Đạt 99,5 7,9 12,9 19,7 132,7 0,263 -44,1 4,7 7,15 Đạt 95,7 tháng Đạt Đạt Đạt 98,9 8,0 13,0 19,8 135,2 0,266 -42,1 4,8 7,09 Đạt 95,2 tháng Đạt Đạt Đạt 98,2 8,1 13,1 20,0 137,6 0,269 -40,4 4,9 7,03 Đạt 94,5 tháng Đạt Đạt Đạt 100,1 7,8 12,8 19,6 130,6 0,260 -46,0 4,5 7,23 Đạt 96,4 tháng Đạt Đạt Đạt 99,4 7,9 13,0 19,7 133,5 0,263 -44,3 4,7 7,14 Đạt 95,7 tháng Đạt Đạt Đạt 98,4 8,1 13,1 19,9 137,2 0,266 -42,0 4,8 7,05 Đạt 94,7 tháng Đạt Đạt Đạt 97,5 8,3 13,3 20,1 140,3 0,270 -40,2 5,0 6,97 Đạt 93,9 tháng Đạt Đạt Đạt 100,1 7,8 12,8 19,6 130,6 0,260 -46,0 4,5 7,23 Đạt 96,4 tháng Đạt Đạt Đạt 98,9 8,0 13,1 19,8 136,2 0,265 -43,0 4,7 7,15 Đạt 95,3 tháng Đạt Đạt Đạt 97,5 8,2 13,3 20,0 142,2 0,268 -40,6 5,0 7,06 Đạt 94,3 tháng Đạt Đạt Đạt 96,4 8,4 13,6 20,3 148,9 0,273 -37,8 5,2 6,99 Đạt 93,0 Bảng PL 9.3 : Kết đánh giá độ ổn định nano nhũ tƣơng nhỏ mắt diclofenac mẻ 003 40±2oC/75±5% ĐK thực 5±3oC ĐK CTCL Tính bảo chất quản Th điểm Giới hạn TT Định Định % DC GP KTG tính lƣợng TB giờ (%) (nm) PdI Thế Độ zeta nhớt (mV) (cP) pH Độ vô % NT khuẩn hoá tháng Đạt Đạt Đạt 99,3 7,7 12,9 19,9 126,5 0,269 -46,9 4,7 7,15 Đạt 96,3 tháng Đạt Đạt Đạt 98,7 7,8 13,0 20,1 128,7 0,272 -45,0 4,8 7,07 Đạt 95,8 tháng Đạt Đạt Đạt 98,1 7,9 13,1 20,2 131,1 0,274 -43,3 5,0 7,02 Đạt 95,1 tháng Đạt Đạt Đạt 97,5 8,0 13,3 20,3 133,7 0,276 -41,7 5,1 6,95 Đạt 94,5 tháng Đạt Đạt Đạt 99,3 7,7 12,9 19,9 126,5 0,269 -46,9 4,7 7,15 Đạt 96,3 tháng Đạt Đạt Đạt 98,5 7,9 13,0 20,1 129,2 0,272 -44,5 4,9 7,07 Đạt 95,6 tháng Đạt Đạt Đạt 97,7 8,1 13,2 20,3 132,9 0,275 -42,6 5,0 7,01 Đạt 94,9 tháng Đạt Đạt Đạt 97,0 8,2 13,4 20,5 135,4 0,278 -40,3 5,2 6,95 Đạt 94,0 tháng Đạt Đạt Đạt 99,3 7,7 12,9 19,9 126,5 0,269 -46,9 4,7 7,15 Đạt 96,3 tháng Đạt Đạt Đạt 98,0 8,0 13,1 20,2 133,1 0,274 -44,2 4,9 7,05 Đạt 95,0 tháng Đạt Đạt Đạt 96,6 8,2 13,3 20,4 139,3 0,278 -41,5 5,2 6,97 Đạt 93,5 tháng Đạt Đạt Đạt 95,6 8,5 13,5 20,7 146,8 0,282 -39,2 5,5 6,91 Đạt 92,3 PL 10: CÁC LUẬT NHÂN QUẢ (Mục 3.2.1 3.2.3) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y1 X6(2)X5(2)X2(2) Mô hình con: Nếu X6 thấp X5 thấp X2 thấp Nếu X6 thấp X5 thấp X2 cao Y1 thấp (0,07) Y1 thấp (0,46) cao (0,93) cao (0,54) Nếu X6 thấp X5 cao X2 thấp Nếu X6 thấp X5 cao X2 cao Y1 thấp (0,67) Y1 thấp (0,53) cao (0,33) cao (0,47) Nếu X6 cao X5 thấp X2 thấp Nếu X6 cao X5 thấp X2 cao Y1 thấp (0,46) Y1 thấp (0,74) cao (0,54) cao (0,26) Nếu X6 cao X5 cao X2 thấp Y1 thấp (0,73) cao (0,27) Nếu X6 cao X5 cao X2cao Y1 thấp (0,59) cao (0,41) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y2 X5(2) Mô hình con: Nếu X5 thấp Y2 thấp (0,33) Nếu X5 cao Y2 thấp (0,55) cao (0,67) cao (0,45) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y3 X5(3) Mô hình con: Nếu X5 thấp Y3 thấp (0,38) Nếu X5 trung bình Y3 thấp (0,19) Nếu X5 cao Y3 thấp (0,56) cao (0,62) cao (0,81) cao (0,44) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y4 X6(2) Mô hình con: Nếu X6 thấp Nếu X6 cao Y4 thấp (0,32) Y4 thấp (0,54) cao (0,68) cao (0,46) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y5 X6(3) Mô hình con: Nếu X6 thấp Y5 thấp (0,36) cao (0,64) Nếu X6 trung bình Y5 thấp (0,18) cao (0,82) Nếu X6 cao Y5 thấp (0,57) cao (0,43) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y6 X6 (3) Mô hình con: Nếu X6 thấp Y6 thấp (0,27) cao (0,73) Nếu X6 trung bình Nếu X6 cao Y6 thấp (0,10) Y6 thấp (0,53) cao (0,90) cao (0,47) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y7 X2(2)X4(2)X9(2)+X7(3) Mô hình con: Nếu X2 thấp X4 thấp X9 thấp Nếu X2 thấp X4 thấp X9 cao Nếu X2 thấp X4cao X9 thấp Nếu X2 thấp X4 cao X9 cao Nếu X2 cao X4 thấp X9 thấp Nếu X2 cao X4 thấp X9 cao Nếu X2 cao X4 cao X9 thấp Nếu X2 cao X4 cao X9 cao Mô hình con: Nếu X7 = Phosphat Nếu X7 = Citrat Nếu X7 = Borat Y7 thấp (0,22) cao (0,78) Y7 thấp (0,47) Y7 thấp (0,58) Y7 thấp (0,44) Y7 thấp (0,97) Y7 thấp (1.00) Y7 thấp (0,72) Y7 thấp (0,58) cao (0,53) cao (0,42) cao (0,56) cao (0,03) cao (0,00) cao (0,28) cao (0,42) Y7 thấp (0,80) Y7 thấp (0,68) Y7 thấp (0,15) cao (0,20) cao (0,32) cao (0,85) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y8 X2(2)X7(3) Mô hình con: Nếu X2 thấp X7 = Phosphat Y8 thấp (0,70) Nếu X2 thấp X7 = Citrat Y8 thấp (0,86) Nếu X2 thấp X7 = Borat Y8 thấp (0,80) Nếu X2 cao X7 = Phosphat Y8 thấp (0,55) Nếu X2 cao X7 = Citrat Y8 thấp (0,32) Nếu X2 cao X7 = Borat Y8 thấp (0,75) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y9 X2(2)X7(3)X6(2)+X9(3) cao (0,30) cao (0,14) cao (0,20) cao (0,45) cao (0,68) cao (0,25) Mô hình con: Nếu X2 thấp X7 = Phosphat X6 thấp Y9 thấp (0,14) cao (0,86) Nếu X2 thấp X7 = Phosphat X6 cao Y9 thấp (0,31) cao (0,69) Nếu X2 thấp X7 = Citrat X6 thấp Y9 thấp (0,25) cao (0,75) Nếu X2 thấp X7 = Citrat X6 cao Nếu X2 thấp X7 = Borat X6 thấp Nếu X2 thấp X7 = Borat X6 cao Y9 thấp (0,37) Y9 thấp (0,58) Y9 thấp (0,79) cao (0,63) cao (0,42) cao (0,21) Nếu X2 cao X7 = Phosphat X6 thấp Nếu X2 cao X7 = Phosphat X6 cao Y9 thấp (0,34) Y9 thấp (0,13) cao (0,66) cao (0,87) Nếu X2 cao X7 = Citrat X6 thấp Y9 thấp (0,02) cao (0,98) Nếu X2 cao X7 = Citrat X6 cao Y9 thấp (0,05) cao (0,95) Nếu X2 cao X7= Borat X6 thấp Y9 thấp (0,00) cao (1.00) Nếu X2 cao X7 = Borat X6 cao Mô hình con: Y9 thấp (0,49) cao (0,51) Nếu X9 thấp Nếu X9 trung bình Nếu X9 cao Y9 thấp (0,18) Y9 thấp (0,17) Y9 thấp (0,38) cao (0,82) cao (0,83) cao (0,62) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Y10 X2(2) Mô hình con: Nếu X2 thấp Y10 thấp (0,80) Nếu X2 cao Y10 thấp (0,58) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Z1 X4(2)X6(2)X5(2) Mô hình con: Nếu X4 thấp X6 thấp X5 thấp Z1 thấp (0,13) Nếu X4 thấp X6 thấp X5 cao Z1 thấp (0,46) Nếu X4 thấp X6 cao X5 thấp Nếu X4 thấp X6 cao X5 cao Nếu X4 cao X6 thấp X5 thấp Nếu X4 cao X6 thấp X5 cao Nếu X4 cao X6 cao X5 thấp Nếu X4 cao X6 cao X5 cao Z1 thấp (0,81) Z1 thấp (0,55) Z1 thấp (0,95) Z1 thấp (0,88) Z1 thấp (0,68) Z1 thấp (0,20) cao (0,20) cao (0,42) cao (0,87) cao (0,54) cao (0,19) cao (0,45) cao (0,05) cao (0,12) cao (0,32) cao (0,80) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Z2 X6(3)X7(2)+X5(3)X2(3)+X8(2)X7(3)X3(2) Mô hình con: Nếu X6 thấp X7 thấp Z2 thấp (0,00) cao (1.00) Nếu X6 thấp X7 cao Nếu X6 trung bình X7 thấp Nếu X6 trung bình X7 cao Z2 thấp (0,54) Z2 thấp (0,78) Z2 thấp (0,40) cao (0,46) cao (0,22) cao (0,60) Nếu X6 cao X7 thấp Nếu X6 cao X7 cao Z2 thấp (0,45) Z2 thấp (0,58) cao (0,55) cao (0,42) Nếu X5 thấp X2 = IPM:Migl (1:1) Z2thấp (0,98) cao (0,02) Nếu X5 thấp X2 = Migl Z2 thấp (0,97) cao (0,03) Nếu X5 thấp X2 = IPM Nếu X5 trung bình X2 = IPM:Migl (1:1) Z2 thấp (0,82) Z2 thấp (0,70) cao (0,18) cao (0,30) Nếu X5 trung bình X2 = Migl Nếu X5 trung bình X2 = IPM Nếu X5 cao X2 = IPM:Migl (1:1) Nếu X5 cao X2 = Migl Nếu X5 cao X2 = IPM Z2 thấp (0,69) Z2 thấp (0,76) Z2 thấp (0,79) Z2 thấp (0,71) Z2 thấp (0,69) cao (0,31) cao (0,24) cao (0,21) cao (0,29) cao (0,31) Mô hình con: Nếu X8 thấp X7 thấp X3 thấp Nếu X8 thấp X7 thấp X3 cao Nếu X8 thấp X7 trung bình X3 thấp Nếu X8 thấp X7 trung bình X3 cao Nếu X8 thấp X7 cao X3 thấp Nếu X8 thấp X7 cao X3 cao Nếu X8 cao X7 thấp X3 thấp Z2 thấp (0,71) Z2 thấp (0,56) Z2 thấp (0,64) Z2 thấp (0,72) Z2thấp (0,48) Z2 thấp (0,22) Z2 thấp (0,96) cao (0,29) cao (0,44) cao (0,36) cao (0,28) cao (0,52) cao (0,78) cao (0,04) Nếu X8 cao X7 thấp X3 cao Nếu X8 cao X7 trung bình X3 thấp Nếu X8 cao X7 trung bình X3 cao Nếu X8 cao X7 cao X3 thấp Nếu X8 cao X7 cao X3 cao Z2 thấp (0,87) Z2 thấp (0,69) Z2 thấp (0,71) Z2 thấp (0,51) Z2 thấp (0,40) cao (0,13) cao (0,31) cao (0,29) cao (0,49) cao (0,60) Mô hình con: - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Z3 X6(3) Mô hình con: Nếu X6 thấp Z3 thấp (0,29) cao (0,71) Nếu X6 trung bình Z3 thấp (0,73) cao (0,27) Nếu X6 cao Z3 thấp (0,89) cao (0,11) - Các luật nhân cho biến phụ thuộc Z4 X4(3)+X3(2)X5(2) Mô hình con: Nếu X4 thấp Nếu X4 trung bình Z4 thấp (0,41) Z4 thấp (0,39) cao (0,59) cao (0,61) Nếu X4 cao Z4 thấp (0,67) cao (0,33) Nếu X3 thấp X5 thấp Z4 thấp (0,39) cao (0,61) Nếu X3 thấp X5 cao Nếu X3 cao X5 thấp Z4thấp (0,65) Z4 thấp (0,19) cao (0,35) cao (0,81) Nếu X3 cao X5 cao Z4 thấp (0,33) cao (0,67) Mô hình con: [...]... diclofenac và bƣớc đầu đánh giá sinh khả dụng của chế phẩm đƣợc tiến hành nghiên cứu với các mục tiêu: 1 Xây dựng đƣợc công thức và quy trình bào chế nano nhũ tƣơng nhỏ mắt diclofenac 0,1% ở quy mô phòng thí nghiệm 2 Nâng quy mô bào chế, dự thảo đƣợc tiêu chuẩn cơ sở, đánh giá độ ổn định cho nano nhũ tƣơng nhỏ mắt diclofenac 0,1% 3 Đánh giá đƣợc sinh khả dụng của chế phẩm trên thỏ thí nghiệm và bƣớc đầu. .. Polysorbat 80 tuyến lệ đạo sau phẫu Nhũ tƣơng dầu thuật khúc xạ hoặc phẫu thuật khác Allergan Tăng tiết nƣớc mắt ở bệnh nhân có sự giảm Nhũ tƣơng tiết nƣớc mắt do viêm anion hoặc dị ứng theo mùa Allergan Điều trị chứng khô mắt 21 Nhũ tƣơng anion 1.3.3 Đánh giá sinh khả dụng của nano nhũ tƣơng trên mắt 1.3.3.1 Đánh giá sinh khả dụng in vitro Đánh giá sinh khả dụng in vitro của nano nhũ tƣơng đƣợc thực hiện trên... viêm và đau trong tổn thƣơng biểu mô giác mạc sau phẫu thuật [10] Diclofenac là một dƣợc chất có độ hòa tan kém, các chế phẩm thuốc nhỏ mắt diclofenac hiện có trên thị trƣờng chủ yếu ở dạng dung dịch có hiệu quả điều trị không cao [58] Để cải thiện sinh khả dụng của diclofenac khi dùng cho mắt và tiếp cận dạng bào chế thuốc mới theo công nghệ nano, đề tài: Nghiên cứu bào chế nano nhũ tƣơng nhỏ mắt. .. của giác mạc nên tăng độ hấp thu DC qua giác mạc [55] Một số chế phẩm nano nhũ tƣơng nhỏ mắt đƣợc trình bày ở Bảng 1.2 20 Bảng 1.2: Một số chế phẩm nano nhũ tƣơng nhỏ mắt [134] Chế phẩm Thành phần Cationorm® Cyclosporine A Vekacia ® Cyclosporine A Hãng sản xuất Chỉ định Dạng thuốc Novagali Giảm triệu chứng khô Nhũ tƣơng cation mắt Novagali Điều trị viêm kết mạc Nhũ tƣơng cation theo mùa ở trẻ nhỏ Nhũ. .. thƣớc nano có ƣu điểm rõ rệt vì làm tăng thời gian lƣu so với thuốc nhỏ mắt thông thƣờng và cải thiện đáng kể SKD của thuốc nhỏ mắt [114] Cơ chế tăng tính thấm ở mắt của NNT đƣợc tìm hiểu rõ hơn trong nghiên cứu so sánh tính thấm của indomethacin trên mắt thỏ của cả 2 loại NNT mang điện tích dƣơng và điện tích âm Góc tiếp xúc với giác mạc của giọt nƣớc muối sinh lý, 18 nhũ tƣơng mang điện tích âm, nhũ. .. dài và giữ chức năng nhƣ hệ kiểm soát đƣa thuốc [118] Dạng bào chế nhũ tƣơng có thể kéo dài thời gian lƣu của giọt thuốc nhỏ mắt trên lớp biểu mô giác mạc, từ đó làm tăng tính thấm của DC vào các mô bên trong mắt Vì vậy, mắt không hấp thu DC theo cơ chế DC đƣợc giải phóng ra khỏi giọt dầu, hòa vào màng nƣớc mắt, mà theo cơ chế phân bố trực tiếp từ giọt dầu vào màng tế bào trên bề mặt mắt Do vậy, nhũ. .. pH = 3 và ít thay đổi ở pH = 4 và 8 [106] Thêm nữa, trong nghiên cứu cũng chỉ ra rằng pH còn ảnh hƣởng tới KTG và thế zeta của NNT NNT aspirin đƣợc bào chế gồm các thành phần: Lauroglycol 90, Transcutol, Cre EL, và nƣớc loại ion NNT đƣợc bào chế bằng kỹ thuật siêu âm và vi lƣu Các tác giả đã tiến hành đánh giá ảnh hƣởng của pH (2 - 10) tới sự hình thành KTG của NNT aspirin sau khi đƣợc bào chế bằng... định tới giác mạc, có tính thấm cao vào sâu các mô bên trong mắt và thủy dịch cũng nhƣ có thể dễ dàng tiệt trùng [141] NNT cũng chịu ảnh hƣởng của hàng rào bảo vệ mắt, cấu trúc dễ bị phá vỡ bởi các ion trong nƣớc mắt và hoạt động cơ học của mắt Các dạng thuốc nhỏ mắt thông thƣờng khi đƣợc nhỏ vào mắt sẽ bị rửa trôi nhanh chóng, điều này cũng xảy ra tƣơng tự với pha nƣớc của dạng thuốc nano nhũ tƣơng,... EL và Cremophor® RH 40), tyloxapol, PEG succinat phù hợp với đặc điểm sinh lý tại mắt do rất ít gây kích ứng mắt Chúng thƣờng đƣợc sử dụng với nồng độ 0,5 đến 3% kl/tt [24] b Độ ổn định bị ảnh hưởng bởi nhiệt độ và pH, khó khăn trong quá trình bảo quản Để nghiên cứu ảnh hƣởng của pH và nhiệt độ tới sự ổn định của chế phẩm NNT ramipril, Sheikh Shafiq và Faiyaz Shakeel đã bào chế 5 ml mỗi CT NNT sử dụng. .. triển của ngành y học, hứa hẹn những tiến bộ đột phá trong điều trị và chẩn đoán Khi bào chế thuốc nhãn khoa, vấn đề SKD luôn đƣợc đặt ra với các nhà bào chế, do mắt là một tổ chức có cấu tạo và cơ chế sinh lý phức tạp Các thuốc nhãn khoa thƣờng có tỉ lệ hấp thu thuốc thấp và thời gian lƣu thuốc trƣớc giác mạc ngắn NNT là một trong số các hệ bào chế có cấu trúc nano đã và đang nhận đƣợc sự quan tâm của