Nghiên cứu bào chế và bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén phân tán nhanh chứa vi hạt che vị azithromycin

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y NGUYỄN THỊ NGẦN NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VÀ BƢỚC ĐẦU ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG VIÊN NÉN PHÂN TÁN NHANH CHỨA VI HẠT CHE VỊ AZITHROMYCIN Chuyên ngành: Công nghệ dược phẩm Bào chế thuốc Mã số: 60 72 04 02 LUẬN VĂN THẠC SỸ DƯỢC HỌC NGƯỜI HƯỜNG DẪN KHOA HỌC: TS Nguyễn Thạch Tùng TS Phan Thị Hòa HÀ NỘI - 2016 LỜI CẢM ƠN Với kính trọng lòng biết ơn, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới: TS Nguyễn Thạch Tùng TS Phan Thị Hòa người thầy ln quan tâm, tận tình hướng dẫn định hướng cho tơi suốt q trình làm nghiên cứu Tôi xin trân trọng cảm ơn giúp đỡ, tạo điều kiện TS Trần Cao Sơn – Viện Vệ sinh an toàn thực phẩm quốc gia, DS.Trịnh Thành Đạt giúp đỡ thực định lượng thuốc huyết tương, bạn sinh viên làm đề tài Bộ môn Bào chế - Trường đại học Dược Hà Nội, anh chị em đồng nghiệp Khoa Dược- Trường đại học Y dược Thái Bình ln tạo điều kiện giúp đỡ tơi suốt q trình làm thực nghiệm Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè ln động viên, tạo điều kiện cho tơi thực hồn thành luận văn Hà Nội, tháng năm 2016 Học viên Nguyễn Thị Ngần LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan luận văn cơng trình nghiên cứu riêng tơi, chình tơi thực hiện, tất số liệu luận văn chưa công bố cơng trình khác Nếu có sai trái tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm Học viên Nguyễn Thị Ngần MỤC LỤC Trang bìa Lời cảm ơn Lời cam đoan Mục lục Danh mục chữ viết tắt luận văn Danh mục bảng Danh mục hình Trang ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 Vài nét dược chất azithromycin 1.1.1 Công thức cấu tạo 1.1.2 Tính chất lý hóa 1.1.3 Đặc điểm dược động học 1.1.4 Cơ chế tác dụng tác dụng dược lý 1.1.5 Tác dụng không mong muốn 1.1.6 Chỉ định chống định 1.1.7 Liều lượng cách dùng 1.1.8 Các dạng thuốc chứa dược chất azithromycin thị trường 1.2 Vài nét che vị cho chế phẩm thuốc đường uống 1.2.1 Các phương pháp che vị 1.2.2 Các nghiên cứu che vị cho dược chất azithromycin 1.3.Vài nét viên nén phân tán nhanh 1.3.1.Ưu nhược điểm 1.3.2 Các phương pháp bào chế 1.3.3.Các nghiên cứu viên nén phân tán nhanh chứa azithromycin có 13 1.4.Vài nét đánh giá sinh khả dụng 13 1.4.1.Quy định đánh giá sinh khả dụng 14 1.4.2.Phương pháp chiết tách đinh lượng thuốc huyết tương 16 1.4.3.Một số nghiên cứu định lượng azithromycin huyết tương dịch sinh học 19 Chƣơng NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 Nguyên liệu thiết bị nghiên cứu 22 2.1.1 Nguyên liệu 22 2.1.2 Thiết bị 23 2.2 Phương pháp nghiên cứu 23 2.2.1 Phương pháp bào chế viên nén phân tán nhanh chứa vi hạt che vị azithromycin đánh giá tiêu chất lượng 23 2.2.2 Phương pháp đánh giá sinh khả dụng 29 2.3 Phương pháp xử lý số liệu 32 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 33 3.1 Kết bào chế viên nén rã nhanh chứa vi hạt che vị azithromycin 33 3.1.1.Khảo sát phụ thuộc nồng độ dược chất với độ hấp thụ quang 33 3.1.2 Kết bào chế vi hạt che vị azithromycin 34 3.1.3 Kết bào chế viên nén phân tán nhanh azithromycin 37 3.2 Kết bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén phân tán nhanh azithromycin 100 mg 52 3.2.1 Kết xây dựng phương pháp phân tích 52 3.2.2 Kết bước đầu đánh giá sinh khả dụng 56 KẾT LUẬN 60 1.Về bào chế viên nén phân tán nhanh chứa vi hạt che vị azithromycin 60 Về bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén rã nhanh azithromycin 61 KIẾN NGHỊ 62 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ, KÝ HIỆU VIẾT TẮT TRONG LUẬN VĂN STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 Phần viết tắt Phần viết đầy đủ AZI Azithromycin ACN Acetonitril AUC Area under the curve (Diện tích đường cong) Cmax Nồng độ đỉnh CT Công thức DCM Dicloromethan DĐVN IV Dược điển Việt Nam IV EtOH Ethanol Eud L100 Eudragit L100 HT Huyết tương Lac 720 Lactose 720 Lac 721 Lactose 721 Lac 80 Lactose mononhydrat LC Liquid chromatography (Sắc ký lỏng) MeOH Methanol MgSt Magnesi stearat MS Mass spectrometry (Khối phổ) NaLSP Natri laurylsulfat NgL Nguyên liệu OFDT Orally fast disintegrating tablets (Viên nén rã nhanh miệng) PEG Poly ethylen glycol PP Phương pháp TCCS Tiêu chuẩn sở TLTK Tmax ROXI Tài liệu tham khảo Thời gian để đạt nồng độ đỉnh Roxythromycin DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Tên bảng Trang Mô hình thiết kế nghiên cứu ngẫu nhiên, mù đơi, phân 14 nhóm song song 1.2 Mơ hình thiết kế nghiên cứu chéo thuốc, giai đoạ 14 1.3 Một số nghiên cứu định lượng azithromycin huyết 19 tương dịch sinh học 2.1 Nguyên liệu sử dụng q trình thực nghiệm 23 2.2 Mơ hình thiết kế thí nghiệm đánh giá sinh khả dụng 31 thỏ 3.1 Kết phụ thuộc nồng độ azithromycin độ hấp thụ 34 quang 3.2 Kết định lượng azithromycin vi hạt che vị AZI 35 3.3 Kết đánh giá khả che vị vi hạt che vị AZI 36 3.4 Kết tốc độ hòa tan azithromycin từ vi hạt che vị 37 3.5 Công thức bào chế viên nén phân tán nhanh chứa vi hạt che 39 vị azithromycin 3.6 3.7 Ảnh hưởng loại tá dược độn tới thời gian rã viên nén Kết tốc độ giải phóng azithromycin từ công thức 40 42 viên nén khác 3.8 Kết tốc độ giải phóng azithromycin từ cơng thức 43 viên nén sử dụng tá dược độn khác 3.9 Ảnh hưởng thành phần tá dược trơn tới thời gian rã 44 viên nén 3.10 Kết ảnh hưởng natri laurylsulfat tới tốc độ hòa tan azithromycin từ viên nén 46 3.11 Ảnh hưởng lượng tá dược siêu rã tới thời gian rã 48 viên nén 3.12 Ảnh hưởng độ cứng tới thời gian rã độ mài mòn 49 viên nén 3.13 Ảnh hưởng lượng tá dược kiềm tới tốc độ hòa tan 50 azithromycin viên nén 3.14 Kết đánh giá tiêu chất lượng viên nén phân tán 52 nhanh AZI 100 mg 3.15 Tiêu chuẩn chất lượng cho viên nén phân tán nhanh 53 azithromycin 100 mg 3.16 Các ion phân tử ion phân tích khối phổ 53 AZI ROXI 3.17 Kết thẩm định độ phương pháp phân tích 54 3.18 Kết thẩm định độ lặp lại phương pháp phân tích 55 3.19 Kết phụ thuộc tỷ lệ diện tích pic chuẩn so với 56 nội chuẩn nồng độ azithromycin huyết tương 3.20 Nồng độ azithromycin huyết tương thỏ theo thời gian 57 uống Zithromax 3.21 Nồng độ azithromycin huyết tương thỏ theo thời gian 58 uống viên nén phân tán nhanh CT16 3.22 Thông số dược động học đánh giá sinh khả dụng thỏ 60 DANH MỤC CÁC HÌNH Tên sơ đồ Hình Trang 1.1 Sơ đồ máy khối phổ 17 1.2 Sơ độ ba tứ cực 18 3.1 Đồ thị biểu diễn mối tương quan nồng độ 34 azithromycin độ hấp thụ 3.2 Đồ thị thể tốc độ hòa tan azithromycin vi 37 hạt giải phóng theo thời gian 3.3 Đồ thị thể tốc độ hòa tan azithromycin 43 công thức viên nén khác 3.4 Đồ thị thể ảnh hưởng natri lauryl sulfat tới tốc độ 46 hòa tan azithromycin viên nén 3.5 Đồ thị thể ảnh hưởng lượng tá dược tạo kiềm tới tốc 51 độ hòa tan azithromycin viên nén 3.6 Đường chuẩn azithromycin huyết tương trắng 56 3.7 Nồng độ azithromycin huyết tương thỏ theo thời 58 gian uống Zithromax 3.8 Nồng độ azithromycin huyết tương thỏ theo thời 59 gian uống viên nén phân tán nhanh CT16 3.9 Nồng độ trung bình azithromycin huyết tương thỏ uống Zithromax viên nén CT16 59 ĐẶT VẤN ĐỀ Trong năm gần đây, chế phẩm rã nhanh, phân tán nhanh, giải phóng nhanh quan tâm phát triển mạnh mẽ ngành công nghiệp dược phẩm Viên nén phân tán nhanh giúp giảm thời gian rã viên, tăng tốc độ hòa tan, tăng tốc độ hấp thu dược chất thuận tiện sử dụng cho đối tượng bệnh nhân cao tuổi, bệnh nhân nhi bệnh nhân bị chứng khó nuốt (như bệnh thực quản, tâm thần hay nằm liệt giường) [31], [40] Azithromycin kháng sinh macrolid bán tổng hợp Thuốc có phổ tác dụng rộng vi khuẩn gram (+), gram (-), kỵ khí; dùng phổ biến trường hợp nhiễm khuẩn đường hô hấp, da, mô mềm, đường sinh dục, Do đó, để thuận tiện cho đối tượng bệnh nhân sử dụng tăng hiệu điều trị, azithromycin nên bào chế dạng viên nén phân tán nhanh Tuy nhiên, viên nén phân tán nhanh miệng đòi hỏi dược chất, nguyên liệu bào chế phải có mùi vị dễ chịu mà azithromycin lại có vị đắng, khó uống nên trước bào chế viên nén phân tán nhanh, azithromycin cần bào chế che vị thích hợp Hiện nay, có nhiều nghiên cứu bào chế che vị cho azithromycin [11], [16], [28], [30] nên áp dụng kết nghiên cứu để nghiên cứu bào chế viên nén phân tán nhanh azithromycin Bên cạnh đó, để khẳng định hiệu dạng bào chế mới, bước đầu tiến hành đánh giá hấp thu dược chất từ dạng bào chế mơ hình động vật, góp phần đánh giá sinh khả dụng cần thiết Chính lý mà tiến hành đề tài: “Nghiên cứu bào chế bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén phân tán nhanh chứa vi hạt che vị azithromycin” 48 nghiên cứu mục 3.1.3.2 (chọn tá dược trơn hỗn hợp MgSt + Aerosil + NaLSP) kết hợp với CT có sử dụng tá dược kiềm (mục 3.1.3.5), thực nghiệm cho thấy viên nén sử dụng lượng tá dược rã 1% (CT16, CT20) dễ dập viên hơn, viên dễ đảm bảo độ đồng khối lượng viên đảm bảo yêu cầu cần thiết Do đó, lựa chọn lượng tá dược siêu rã 1% cho viên nén phân tán nhanh 3.1.3.4 Nghiên cứu ảnh hưởng độ cứng tới thời gian rã viên nén Độ cứng viên nén ảnh hưởng lớn tới thời gian rã mà ảnh hưởng tới độ mài mòn viên, viên cứng khó rã mài mòn ngược lại viên rã nhanh độ cứng kém, độ mài mòn cao, viên khơng đạt độ bền học Chính thế, tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng độ cứng tới hai yếu tố độ mài mòn thời gian rã viên để tìm độ cứng viên thích hợp, từ tìm lực nén dập viên phù hợp Kết sau: Bảng 3.12 Ảnh hưởng độ cứng tới thời gian rã độ mài mòn viên nén (*n=6, X±SD; **n=3, X±SD) Độ cứng (kg) 3-4 – 9,5 Thời gian rã (giây) 53 (5,26)* 89 (4,64)* Độ mài mòn (%) 1,03 (0,18)** 0,79 (0,32)** Nhận xét: từ bảng 3.12 cho thấy: độ cứng viên nén tăng độ mài mòn giảm thời gian rã tăng Đó tăng lực nén, tăng độ cứng cho viên lực liên kết tiểu phân tăng, độ xốp viên giảm, nước khó thâm nhập vào viên làm thời gian rã viên kéo dài Như vậy, chọn độ cứng viên - kg cho viên nén rã nhanh thời gian rã đạt yêu cầu 60s độ mài mòn gần với giới hạn cho phép (dưới 1%) 49 3.1.3.5 Nghiên cứu ảnh hưởng lượng tá dược kiềm tới mức độ giải phóng azithromycin từ viên nén môi trường pH 6,8 Do AZI dược chất có tính base nên dễ bị phân hủy acid dày, nồng độ AZI cao xuống ruột non giải phóng, hòa tan mơi trường dày cần giảm bớt tính acid Do đó, cần sử dụng thêm tá dược tạo kiềm công thức bào chế Theo kết khảo sát nghiên cứu Hồng Tùng [16] tá dược tạo kiềm tối ưu sử dụng hỗn hợp CaCO3 NaH2PO4 với tỉ lệ 2:1 (kl/kl) Kết nghiên cứu tốc độ hòa tan viên nén với lượng tá dược tạo kiềm khác công thức bào chế sau: Bảng 3.13 Ảnh hưởng lượng tá dược tạo kiềm mức độ giải phóng azithromycin từ viên nén (n=3, X±SD) (%) AZI giải phóng Thời gian (phút) CT16 (Kiềm 100) CT20 (Kiềm 75) CT18 (Kiềm 50) 15 65,52 ± 2,85 (%) 64,07 ± 3,02 (%) 59,98 ± 1,63 (%) 30 80,57 ± 3,02 (%) 81,20 ± 1,59 (%) 79,62 ± 1,04 (%) 60 89,01 ± 1,93 (%) 89,26 ± 2,16(%) 88,46 ± 1,60 (%) 90 93,89 ± 2,96 (%) 94,19 ± 3,32 (%) 92,66 ± 1,67 (%) 120 99,16 ±1,87(%) 98,35 ± 2,51 (%) 96,85 ± 1,70 (%) 50 Hình 3.5 Đồ thị thể ảnh hưởng lượng tá dược tạo kiềm tới mức độ giải phóng azithromycin từ viên nén (n=3, X ± SD) Nhận xét: lượng tá dược tạo kiềm sử dụng so với hàm lượng AZI công thức là: CT16 (1:1); CT20 (3:4) CT18 (1:2), (kl/kl) Từ bảng 3.13 hình 3.5 cho thấy: tỷ lệ (%) AZI giải phóng CT16, CT20, CT18 khơng khác nhiều mơi trường pH 6,8 nhiên CT16 có lớn Điều giải thích cho viên nén vào mơi trường pH 6,8 tá dược kiềm không làm tăng pH môi trường lên mà thêm vào viên nén CT16 rã nhanh CT20 (53s với 58s) CT20 rã nhanh CT18 (58s với 65s) Viên rã nhanh nên giải phóng vi hạt mơi trường nhanh dược chất hòa tan nhanh Chính vậy, chọn lượng tá dược tạo kiềm:lượng AZI =1:1 (kl/kl) cho công thức viên nén phân tán nhanh AZI Kết nghiên cứu phù hợp với kết nghiên cứu trước Hoàng Tùng [16] Vậy, qua nghiên cứu trên, CT16 (với tá dược độn Avicel PH101, tá dược trơn MgSt+Aerosil+NaLSP, tá dược rã Disolcel 1%, lượng tá dược kiềm 100 mg) chọn làm công thức bào chế viên nén phân tán nhanh để tiến hành xây dựng tiêu chuẩn chất lượng đánh giá sinh khả dụng tương đối 51 3.1.3.6 Kết đánh giá số tiêu chất lượng viên nén phân tán nhanh chứa vi hạt che vị azithromycin Với công thức viên nén CT16 trên, tiến hành bào chế mẻ, mẻ 150 viên, sau tiến hành kiểm tra số tiêu chất lượng viên nén phân tán nhanh AZI 100 mg Kết thể bảng 3.14 sau: Bảng 3.14 Kết đánh giá số tiêu chất lượng viên nén phân tán nhanh AZI 100 mg TT Chỉ tiêu Cảm quan Thời gian rã Đồng khối lượng Độ hòa tan Độ mài mòn Định lượng Kết Viên nén màu trắng, tròn đều, không mùi, không bị bong mặt hay sứt mẻ 53±5,29 (giây) (%) chênh lệch so với KLTB viên từ 0,5% đến 2,8% Từ 75,93% đến 85,21% lượng AZI hòa tan sau 30 phút Từ 0,85% đến 1,03% Hàm lượng AZI viên nén từ 97,39% đến 106,22% so với hàm lượng ghi nhãn Trên sở đó, tiến hành xây dựng tiêu chuẩn chất lượng cho viên nén phân tán nhanh sau 52 Bảng 3.15 Tiêu chuẩn chất lượng cho viên nén phân tán nhanh AZI 100 mg Chỉ tiêu TT Yêu cầu chất lƣợng Tính chất Viên nén tròn đều, màu trắng, khơng mùi, không bong mặt, sứt mẻ Thời gian rã Không 60 giây Đồng khối ± 5% so với KLTB viên lượng Độ hòa tan Khơng 75 % lượng azithromycin hòa tan so với lượng ghi nhãn sau 30 phút Độ mài mòn Khơng q 1% Định lượng Hàm lượng azithromycin từ 90%-110% so với lượng ghi nhãn 3.2 Kết bƣớc đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén phân tán nhanh azithromycin 100 mg 3.2.1 Kết xây dựng phương pháp phân tích 3.2.1.1 Xác định điều kiện phân tích Điều kiện phân tích xác định trình bày mục 2.2.2 Kết thu sau: Bảng 3.16 Các ion phân tử ion phân tích khối phổ azithromycin roxithromycin Tên chất AZI ROXI Mảnh mẹ Mảnh CE (eV) Ghi 115.9 49 Định tính 591.1 29 Định lượng 119.9 61 Định tính 157.9 37 Định lượng 749.5 837.5 53 3.2.1.2 Thẩm định phương pháp phân tích  Độ (độ thu hồi) Chuẩn bị mẫu AZI có nồng độ là: 10ng/ml; 50ng/ml; 100ng/ml thêm vào mẫu 20ng/ml nội chuẩn ROXI Ở nồng độ tiến hành phân tích lần kết thể qua bảng 3.17 sau: Bảng 3.17 Kết thẩm định độ phương pháp phân tích Nồng độ thực 10ng/ml Nồng độ thực 50ng/ml Nồng độ thực 100ng/ml TT Nông độ thu (ng/ml) % thu Nông độ thu (ng/ml) % thu Nông độ thu (ng/ml) 11,0123 110,12% 48,5826 97,17% 100,5988 100,60% 10,0245 100,25% 50,3638 100,73% 99,1111 99,11% 11,4646 114,65% 47,1204 94,24% 96,6034 96,60% 10,9878 109,88% 49,7857 99,57% 99,8524 99,85% 10,7909 107,91% 49,9785 99,96% 96,7119 96,71% 11,4587 114,59% 48,0397 96,08% 95,0168 95,02% X 10,9565 109,56% 48,9785 97,96% 97,9824 97,98% % thu Nhận xét: Kết khảo sát phương pháp phân tích có độ biến thiên từ 97,96% đến 109,75%, điều cho thấy phương pháp có độ cao  Độ lặp lại Được tiến hành thẩm định độ đúng, kết đánh giá dựa độ lệch chuẩn tương đối Cụ thể sau: 54 Bảng 3.18 Kết thẩm định độ lặp lại phương pháp phân tích TT Nơng độ thực 10ng/ml Nông độ thực 50ng/ml Nông độ thực 100ng/ml Nông độ Nông độ Nông độ thu (ng/ml) thu (ng/ml) thu (ng/ml) 11,0123 48,5826 100,5988 10,0245 50,3638 99,1111 11,4646 47,1204 96,6034 10,9878 49,7857 99,8524 10,7909 49,9785 96,7119 11,4587 48,0397 95,0168 TB 10,9565 48,9785 97,9824 4,85% 2,59% 2,23% RSD Nhận xét: Bảng 3.18 cho thấy: kết khảo sát độ lặp lại phương pháp phân tích tiến hành nồng độ với giá trị RSD từ 2,23% đến 4,85% Do phương pháp có độ lặp lại đạt yêu cầu  Khoảng tuyến tính đường chuẩn Để xác định khoảng tuyến tính phương pháp định lượng, tiến hành phân tích dãy dung dịch chuẩn với nồng độ AZI 5; 10; 20; 50; 100; 200 ng/ml mẫu cho thêm 20 ng/ml nội chuẩn ROXI Các mẫu pha dịch chiết huyết tương trắng để loại trừ ảnh hưởng Kết khảo sát phụ thuộc tín hiệu vào nồng độ AZI thể bảng 3.19 hình 3.6 sau 55 Bảng 3.19: Kết phụ thuộc tỷ lệ diện tích pic chuẩn so với nội chuẩn nồng độ azithromycin huyết tương Nồng độ AZI (ng/ml) SAZI/SROXI 0,103 10 0,215 20 0,475 50 1,117 100 2,450 200 4,830 Hình 3.6 Đường chuẩn azithromycin huyết tương trắng Nhân xét: bảng 3.19 hình 3.6 cho thấy: nồng độ AZI huyết tương nằm khoảng nồng độ từ ng/ml đến 200 ng/ml có mối tương quan tuyến tính với tỷ số diện tích pic chuẩn AZI nội chuẩn ROXI với hệ số tương quan R² = 0,9996 >0,995 phương trình hồi quy y = 0,0243x - 0.0302 Ngoài ra, thơng số kỹ thuật LC- MS/MS trình bày PL 1.1 56 3.2.2 Kết bước đầu đánh giá sinh khả dụng Tiến hành đánh giá sinh khả dụng đường uống mơ hình thỏ mục 2.2.2 công thức viên nén phân tán nhanh azithromycin 100 mg (CT16) chế phẩm đối chiếu bột pha hỗn dịch Zitromax 600 mg Kết trình bày sau Bảng 3.20 Nồng độ azithromycin huyết tương thỏ theo thời gian uống Zithromax Thỏ Nồng độ azithromycin (ng/ml) Thỏ Thỏ Thỏ Trung bình 10,065 16,438 5,869 10,790 ± 5,322 15 33,886 18,161 17,860 23,302 ± 9,169 30 73,119 20,451 27,919 40,496 ± 28,487 45 54,049 15,731 23,376 31,052 ± 20,268 60 64,431 13,612 21,976 33,340 ± 27,251 90 19,771 10,375 16,034 15,393 ± 4,732 120 18,091 9,945 13,400 13,812 ± 4,093 240 8,972 11,163 10,067 ± 1,549 360 8,673 10,498 9,585 ± 1,292 480 7,897 10,218 9,057 ± 1,642 1440 7,267 9,845 8,556 ±1,823 Thời gian (phút) 57 Hình 3.7 Nồng độ azithromycin huyết tương thỏ theo thời gian uống thuốc đối chiếu Zithromax Bảng 3.21 Nồng độ azithromycin huyết tương thỏ theo thời gian uống viên nén phân tán nhanh AZI 100 mg (CT16) Thỏ Thời gian (phút) Nồng độ AZI (ng/ml) Thỏ Thỏ Thỏ Trung bình 21,539 22,688 13,910 19,379 ± 4,702 15 103,467 24,818 41,142 56,476 ± 41,251 30 112,559 52,584 80,176 81,773 ± 30,002 45 74,849 35,763 71,731 60,781 ± 21,724 60 49,549 24,253 69,823 47,875 ± 22,831 90 45,737 20,067 57,096 40,967 ± 18,967 120 36,220 16,272 43,911 32,135 ± 14,265 240 28,023 14,103 33,415 25,180 ± 9,959 360 26,225 13,556 27,560 22,447 ± 7,734 480 22,797 13,512 22,907 19,739 ± 5,391 1440 22,121 13,212 19,773 18,369 ± 4,763 58 Hình 3.8 Nồng độ azithromycin huyết tương thỏ theo thời gian uống thuốc thử viên nén phân tán nhanh AZI 100 mg (CT16) Nhận xét: Nồng độ thuốc huyết tương thỏ khác khác nhau, điều chứng tỏ hấp thu cá thể khác uống thuốc đối chiếu thuốc thử Hình 3.9 Nồng độ trung bình azithromycin huyết tương thỏ uống Zithromax viên nén phân tán nhanh AZI 100 mg (CT16) Đồ thị nồng độ AZI huyết thỏ thể pha hấp thu (Cmax) pha thải trừ thuốc với số lượng mẫu lấy 11 thời điểm Dựa 59 vào nồng độ AZI huyết tương thỏ xác định số thông số dược động học sau: Bảng 3.22 Thông số dược động học đánh giá sinh khả dụng thỏ Tmax Cmax AUC 0-24h SKD tương Chế phẩm (phút) (ng/ml) (ng.h/ml) đối Zithromax 30 40,97 234,58 Viên nén CT16 30 81,77 544,32 232,04% Nhận xét: từ hình 3.9 bảng 3.22 có số nhận xét sau: - Tmax: chế phẩm đối chiếu (bột pha hỗn dịch Zithromax) chế phẩm thử (viên nén rã nhanh có cơng thức CT16) 30 phút - AUC 0-24h: viên nén rã nhanh có cơng thức CT16 cao gấp 2,32 lần Zithromax (544,32 với 234,58 ng.h/ml) - Cmax: viên nén rã nhanh có cơng thức CT16 cao gấp lần Zithromax (81,77 với 40,97 ng/ml) Như vậy, chứng tỏ mức độ hấp thu cường độ tác dụng viên nén phân tán nhanh CT16 cao so thuốc đối chiếu Zithromax Điều giải thích sau: AZI dược chất có tính base yếu, bị phân hủy mơi trường acid mạnh Khi cho thỏ uống viên nén phân tán nhanh CT16, thành phần viên có sử dụng tá dược tạo kiềm nên thuốc qua dày (môi trường pH 1,2) tá dược tạo kiềm làm tăng pH lên, tốc độ phân hủy AZI giảm, xuống ruột non hấp thu vào máu Chính vậy, mà lượng AZI hấp thu từ viên nén phân tán nhanh CT16 cao so với Zithromax Qua bước đầu đánh giá sinh khả dụng cho thấy, viên nén phân tán nhanh có triển vọng cải thiện sinh khả dụng cho AZI Tuy nhiên thời gian kinh phí hạn hẹp nên đề tài có số hạn chế như: cỡ mẫu nhỏ, mơ hình đánh giá động vật thỏ, chưa phản ánh xác mơ hình tiêu hóa người nên kết nghiên cứu mang tính chất tham dò Do cần tiếp tục nghiên cứu mơ hình khác quy mơ lớn 60 KẾT LUẬN Từ kết nghiên cứu, đề tài đưa kết luận sau: 1.Về bào chế viên nén phân tán nhanh chứa vi hạt che vị azithromycin  Về bào chế vi hạt che vị azithromycin - Đã bào chế vi hạt che vị phương pháp bốc dung môi với tỷ lệ AZI:Eud L100 (tỷ lệ 1:4 kl/kl) hỗn hợp dung môi sử dụng DCM:EtOH (tỷ lệ 1:1 (v/v)) Vi hạt có khả che tốt vị đắng AZI với nồng độ AZI 23,97 µg/ml (so với ngưỡng đắng AZI 32,34 µg/ml) - Đã xác định hàm lượng AZI vi hạt 19,64% - Đã xác định tốc độ giải phóng AZI từ vi hạt tốt môi trường đệm phosphate pH 6,8  Về bào chế viên nén phân tán nhanh chứa vi hạt che vị azithromycin 100 mg Đã nghiên cứu ảnh hường tá dược lực nến tới thời gian rã tốc độ hòa tan AZI từ viên nén Kết luận công thức viên nén phân tán nhanh lựa chọn sau: Thành phần Vi hạt che vị tương đương 100 mg azithromycin Khối lượng cho viên (mg) 510 Aerosil Natri laurylsulfat Mg stearat disolcel 3,5 * Tá dược kiềm 100 Avicel PH101 23,5 Khối lượng viên 650 (*Tá dược kiềm gồm: CaCO3 : NaH2PO4 = 2:1 (kl/kl)) 61 - Bước đầu xây dựng tiêu chuẩn chất lượng cho chế phẩm viên nén nghiên cứu gồm tiêu về: cảm quan, thời gian rã, độ đồng khối lượng, độ mài mòn, độ hòa tàn, định Về bƣớc đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén rã nhanh azithromycin - Đã tiến hành thẩm định lựa chọn phương pháp chiết lỏng – lỏng để xử lý mẫu phương pháp LC-MS/MS để định lượng AZI huyết tương với độ từ 97,96 % đến 109,75 % độ lặp lại với RSD từ 2,23 % đến 4,85 % - Đã định lượng AZI huyết tương thỏ xác định Tmax chế phẩm nhau: 30 phút; Cmax 40,97 ng/ml Zithromax 81,98 ng/ml với viên nén phân tán nhanh; AUC0-24h 234,58 ng.h/ml Zithromax 544,32 ng.h/ml viên nén phân tán nhanh Bước đầu kết luận viên nén phân tán nhanh AZI có sinh khả dụng cao so với chế phẩm đối chiếu Zithromax 62 KIẾN NGHỊ - Nghiên cứu độ ổn định viên nén bào chế theo công thức lựa chọn - Mở rộng quy mô bào chế viên nén phân tán nhanh chứa vi hạt che vị azithromycin - Tiếp tục hoàn thiện quy trình đánh sinh khả dụng viên nén phân tán nhanh azithromycin ... chế vi n nén phân tán nhanh chứa vi hạt che vị azithromycin xây dựng tiêu chuẩn chất lượng vi n nén bào chế Bước đầu đánh giá sinh khả dụng tương đối vi n nén phân tán nhanh chứa vi hạt che vị. .. bước đầu đánh giá sinh khả dụng 56 KẾT LUẬN 60 1.Về bào chế vi n nén phân tán nhanh chứa vi hạt che vị azithromycin 60 Về bước đầu đánh giá sinh khả dụng vi n nén rã nhanh azithromycin. .. che vị AZI 35 3.3 Kết đánh giá khả che vị vi hạt che vị AZI 36 3.4 Kết tốc độ hòa tan azithromycin từ vi hạt che vị 37 3.5 Công thức bào chế vi n nén phân tán nhanh chứa vi hạt che 39 vị azithromycin