Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài

Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dài

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHẠM BẢO TÙNG BƯỚC ĩ)Xu ĐÁNH GIÁ SINH KHẦ DỌNG VIÊN NÉN DICLOFENAC TÀC DỤNG KÉO DÀI ^a ố ^ iên huóng dẫn: PGS.TS. Võ Xuân Minh TS. Phạm Thị Minh Huệ Nơi thực hiện: Bộ môn Bào chế Thời gian thực hiện: tháng 02-05/2005 HÀ NỘI, 0 5-2005 LỜI CẢM ƠN Tôi xin được bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tói: PGS.TS. Võ Xuân Minh TS. Phạm Thị Minh Huệ đã tận tình hướng dẫn tôi trong suốt quá trình định hưóng nghiên cứu và thực hiện khoá luận tốt nghiệp này. Xin chân thành cảm ơn các thầy cô giáo, cán bộ Bộ môn Bào chế, Bộ môn Dược lý Trường đại học Dược Hà Nội, Viện Kiểm Nghiệm-Bộ Y Tế đã giúp đỡ và tạo nhiều điều kiện thuận lợi để tôi hoàn thành khoá luận. Tôi cũng bày tỏ lòng cảm ơn đến gia đình, bạn bè đã luôn động viên khích lệ tôi trong suốt thời gian qua. Hà Nội ngày 20/05/2005 Sinh viên:Phạm 3 ả o Tùng MỤC LỤC ■ ■ Lời cảm ơn Trang Danh mục chữ viết tắt Mục Lục Đ ặt Vấn Đ ề 1 PHẦN 1 - TỔNG QUAN 3 1.1. Natri diclofenac và các dạng bào chê dạng tác dụng kéo dài 3 1.1.1. Natri diclofenac 3 1.1.2. Một số nghiên cứu bào chế diclofenac dạng tác dụng kéo dài 4 1.1.3. Một số dạng bào chế của diclofenac có trên thị trưòíng . 8 1.2. Sinh khả dụng và tương đương sinh học 9 1.2.1. Khái niệm 9 1.2.2. Quy định về đánh giá sinh khả dụng và tương đưomg sinh học 9 1.2.3. Một số nghiên cứu đánh giá sinh khả dụng dạng tác dụng kéo dài của natri diclofenac 14 PHẦN 2 - THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 18 2.1. Nguyên liệu và phương tiện nghiên cứu 18 2.1.1. Nguyên liệu 18 2.1.2. Chế phẩm đối chiếu 18 2.1.3. Thiết bị 18 2.1.4. Súc vật thí nghiệm 19 2.2. Phương pháp nghiên cứu 19 2.2.1. Phương pháp bào chế viên nén Diclofenac-KD 19 2.2.2. Đánh giá tiêu chuẩn chất lượng viên nén Diclofenac-KD 19 2.2.3. Đánh giá sinh khả dụng invivo 22 2.3. Kết quả thực nghiệm và bàn luận 27 2.3. l. Nghiên cứu bào chế viên nén Diclofenac-KD ở quy mô pilot 27 2.3.2. Dự kiến tiêu chuẩn chất lượng viên nén Diclofenac-KD 28 2.3.3. Đánh giá sinh khả dụng invivo viên nén Diclofenac-KD 29 23.3.1 'Xây dựng phương pháp định lượng diclofenac trong huyết tương 29 23.3.2 Thẩm định phương pháp định lượng diclofenac trong huyết tương 31 23.3.3. Đánh giá sinh khả dụng ỉn vivo viên nén Diclofenac-KD và viên đối chiếu 38 2.4. Bàn luận 43 2.4.1. Bào chế viên nén Diclofenac-KD 43 2.4.2. Xây dựng phuofng pháp định lượng diclofenac trong huyết tương 43 2.4.3. Phương pháp đánh giá SKD invivo 44 PHẦN 3 - KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUẤT 45 3.1 Kết luận 45 3.2. Đề xuất 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC CHỮVIẾT t ắ t AUC Area under curve - Diện tích dưới đường cong nồng độ thời gian Cmax Nồng độ dược chất cực đại trong máu CP Chinese pharmacopoeia Dược điển Trung Quốc. DĐVN Dược điển Việt Nam HPLC High performance liquid chromatography Sắc ký lỏng hiệu năng cao LOD Limit of determination Giới hạn phát hiện LOQ Limit of quantification Giới hạn định lượng MeCN Acetonitril MeOH Methanol MRT Thòi gian lưu trú trung bình Mean retention time RSD Relative Standard deviation Độ lệch chuẩn tương đối SD Standard deviation Độ lệch chuẩn SKD Sinh khả dụng ti/2 Thời gian bán thải TB Giá trị trung bình TDKD Tác dụng kéo dài TĐSH Tương đương sinh học Thời gian thuốc đạt nồng độ cực đại trong máu USP The United States pharmacopoeia Dược điển Mỹ ĐẶT VÂN ĐỀ ■ Trong những năm gần đây, cùng với sự phát triển khoa học kỹ thuật, công nghệ dược phẩm cũng đã đạt được những tiến bộ vượt bậc. Những công nghệ mới đã giúp tạo ra những dạng bào chế hiện đại, những phương pháp đánh giá chất lượng thuốc tiên tiến. Thuốc tác dụng kéo dài (TDKD) là một trong những phát minh nói trên. Dạng thuốc này có nhiều uu điểm nổi bật: có khả năng kiểm soát được quá trình giải phóng dược chất, duy trì nồng độ thuốc trong máu một thòd gian dài, do đó giảm được số lần dùng thuốc cho bệnh nhân, giảm tác dụng phụ, và nâng cao hiệu quả điều trị. Natri diclofenac là thuốc giảm đau chống viêm phi steroids, đã được nhiều tác giả trong và ngoài nước nghiên cứu bào chế dưới dạng TDKD giúp điều trị hiệu quả các bệnh mạn tính. Mặc dù trên thế giói đã có nhiều biệt dược nổi tiếng chứa natri diclofenac dạng TDKD uy tín lâu năm, nhưng ở nước ta thuốc này vẫn chưa được phát triển, do công nghệ sản xuất và kỹ thuật đánh giá khá phức tạp và tốn kém. Đánh giá sinh khả dụng (SKD) in vivo là một trong những phuofng pháp hiện đại để đánh giá chất lượng thuốc, được coi là phương pháp tin cậy và chính xác giúp các nhà sản xuất lựa chọn được công thức và kỹ thuật sản xuất tối ưu. Hiện nay việc đánh giá SKD in vivo trở thành phép thử bắt buộc khi tiến hành đăng ký lưu hành các dạng thuốc TDKD, đó là thước đo chất lượng đích thực của sản phẩm được sản xuất ra bởi các nhà sản xuất khác nhau. Vói mục đích thăm dò xây dựng phương pháp và đánh giá SKD in vivo viên nén Diclofenac TDKD chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: **Bước đầu đánh giá sinh khả dụng viên nén diclofenac tác dụng kéo dàư’ với ba mục tiêu chính sau: Bào chế viên nén Diclofenac TDKD ở quy mô pilot, và đề xuất một số chỉ tiêu chất lượng sản phẩm. Xây dựng phương pháp chiết xuất và định lượng natri diclofenac trong huyết tương. Sơ bộ đánh giá SKD in vivo viên nén Diclofenac TDKD. PHẦN 1 - TỔNG QUAN 1.1. NATRI DICLOFENAC VÀ CÁC DẠNG BÀO CHẾ TÁC DỤNG KÉO DÀI 1.1.1. Natri diclofenac coo" Na^ Tên khoa học: [2-(2,6-dichloroanilino)phenyl] acetic acid Tính chất hoá lý: Natri diclofenac là một acid yếu, pKa = 4,0, tồn tại dưới dạng bột kết tinh hoặc tinh thể màu trắng đến trắng ngà; dễ tan trong ethanol, methanol (24mg/ml), hơi tan trong nước (9mg/ml ở pH7), ít tan trong aceton (6mg/ml). Hệ số phân bố dầu nước là 13,4. Natri diclofenac hấp thụ tử ngoại thấp, cực đại hấp thụ trong methanol ở 283nm 8 =1,05 X 10^, trong đệm pH 7,2 ở 276nm s =1,01x10^ ; A‘V = 309-351.[4], [5], [37], [45]. Tác dụng dược lý: Diclofenac là một thuốc chống viêm phi steroid, có tác dụng chống viêm giảm đau, hạ sốt. Theo các tài liệu hiện nay [6], thuốc được chỉ định trong điều trị thấp khớp và viêm khớp cấp hoặc mạn tính, thoái hoá khófp, viêm đốt sống cứng khớp. Người lófn uống 75-150mg/ngày; trẻ em: uống l-3mg/kg thể trọng/ngày, chia làm 2-3 lần. Tổng liều tối đa của natri diclofenac là 150mg/ngày. Tác dụng phụ hay gặp nhất là ở đường tiêu hoá trên vói các triệu chứng như: đau bụng, buồn nôn, nôn, ỉa chảy, viêm loét đường tiêu hoá. Thuốc làm kéo dài thời gian chảy máu, giảm tiểu cầu và giảm bạch cầu. [ 6 ], [35]. Dược động học: Diclofenac hấp thu nhanh và hầu như hoàn toàn qua đưòfng tiêu hoá. SKD đường uống đạt khoảng 50% so vói đường tiêm tĩnh mạch. Với viên natri diclofenac dạng TDKD, nồng độ thuốc cực đại trong huyết tương đạt khoảng 0,8|xg/ml sau khi uống thuốc 2-3h [23]. Diclofenac phân bố rộng khắp các mô và dịch cơ thể. Thể tích phân bố biểu kiến là 0,12 - 0,17 1/kg. Thuốc liên kết cao với protein huyết tưoíng (99,7%). Khoảng 50-60% liều dùng đưcmg uống bị chuyển hoá qua gan lần đầu chủ yếu do bị glucuronic hoá sau khi hydroxyl hoá. Thời gian bán thải trong huyết tưofng là 1,2 - 2h. Diclofenac thải trừ khỏi cơ thể dưới dạng đã chuyển hoá, phần lớn qua nước tiểu từ 50-70%, thải trừ hết sau 96 giờ. Hệ số thanh thải huyết tương trung bình khoảng 263 - 350 ml/phút. [6], [23], [44], [35]. 1.1.2. Một sô nghiên cứu bào chê diclofenac dạng tác dụng kéo dài Diclofenac thường được sử dụng để điều trị các bệnh mạn tính, nên người bệnh thường phải dùng thuốc nhiều lần trong thời gian kéo dài. Do vậy, chế phẩm diclofenac TDKD rất có ý nghĩa trong điều trị. Trên thế giới cũng như trong nước, đã có nhiều công trình nghiên cứu bào chế natri diclofenac dưới dạng thuốc uống TDKD, sử dụng nhiều loại tá dược vói những cơ chế giải phóng dược chất khác nhau. Những nghiên cứu ở ngoài nước gồm: Hệ màng bao khuếch tán: Màng bao khuyếch tán thường là một màng polyme không tan trong dịch tiêu hoá, có khả năng kiểm soát tốc độ giải phóng dược chất. Ampol Mitrevej, Nuttanan Sinchaipanid và các cộng sự [24] đã nghiên cứu sử dụng phức hợp chitosan-alginat và chitosan-pectin làm màng bao film cho pellet diclofenac TDKD. Pellet được bao bằng chitosan-alginat 1% hay chitosan- pectin 3% đều cho TDKD tốt. Thử độ hoà tan cho thấy dược chất giải phóng khoảng 60% sau 12h và 85% sau 24h. Trong một công trình nghiên cứu về công thức bào chế và độ ổn định của dạng siêu vi nang (nanocapsules) chứa natri diclofenac, ss. Guteưes, H. Fessi và các cộng sự [42] đã sử dụng tá dược là poly(DL-lactide). Siêu vi nang natri diclofenac TDKD được bào chế bằng kỹ thuật polyme hoá liên pha, dựa trên nguyên tắc phản ứng giữa 2 monome trong pha dầu và nước khi nhũ tương hoá sẽ tạo màng polyme bao lấy hoạt chất tạo thành vi nang. Sau đó các vi nang được đóng vào nang hoặc dập viên thành dạng thuốc sử dụng. Hệ cốt trơ khuếch tán: Hệ này được bào chế theo nguyên tắc phân tán natri diclofenac dạng bột mịn vào một cốt trơ xốp, không tan trong đường tiêu hoá. Trong nghiên cứu bào chế vi cầu chứa natri diclofenac, các tác giả [30] đã sử dụng ethylcellulose làm tá dược tạo cốt trơ. Vi cầu được bào chế bằng kỹ thuật nhũ tương và bốc hcd dung môi: hoà tan natri diclofenac, ethylcellulose trong hỗn hợp dung môi gồm methanol, dicloromethan, và aceton. Natri alginat, pectin, gelatin và một số tá dược khác được sử dụng làm tá dược điều khiển tốc độ giải phóng. Tạo nhũ tưofng trong môi trường nước có chất nhũ hoá, nhờ khuấy trộn. Lọc và sấy khô để thu được vi cầu. Một số tác giả cũng tiến hành bào chế vi cầu nhưng dùng tá dược polyvinyl alcohol. Bào chế vi cầu bằng cách tạo nhũ tưofng nước trong dầu đã được tài iiệu [40] mô tả, vói pha nước là dung dịch natri diclofenac trong polyvinyl-alcolhol và glutaraldehyde; pha dầu là hỗn hợp dầu parafin. Nhũ tương được hình thành bằng cách khuấy trộn sau đó thêm acid hydrocloric để tạo vi cầu. Ehba. Hosni [28] đã nghiên cứu bào chế viên nén natri diclofenac TDKD từ vi hạt có chứa polycarbophyl với 2 cỡ hạt khác nhau (0,18 - 0,33mm và 0,5- 0,8mm). Natri diclofenac được hoà tan vào trong ethanol. Polycarbophyl với 2 cỡ hạt nghiên cứu được thêm vào dung dịch thuốc nói trên. Sau khi polycarbophyl trưcỉng nở, tiến hành bay hơi cồn để thu được vi cầu chứa dược chất, có thể sử dụng để dập thẳng thành viên nén. Hệ cốt sơ nước ăn mòn: Tá dược tạo cốt thường là sáp hoặc chất béo đóng vai trò là khung mang thuốc. Natri diclofenac được phân tán trong cốt dưới dạng bột mịn. Đây là phương pháp được sử dụng tương đối phổ biến và đã được áp dụng để bào chế một số biệt dược nổi tiếng của nước ngoài như Voltaren LP 100, Voldal LP 100. [...]... 10000 viên - Bào chế viên nén theo phương pháp xát hạt ưót, sơ đồ X 1 2.2.2 Đánh giá tiêu chuẩn chất lượng viên nén DicIofenac-KD Xác định độ cứng của viên Thiết bị đo: Máy đo độ cứng của viên nén ERWEKA-TBH200 Đo lực gây vỡ viên của 20 viên, lấy giá tn trung bình và độ lệch chuẩn Hình 2.1 : Sơ đồ bào chế viên nén Diclofenac- KD Xác định độ đồng đều khối lượng Tiến hành theo DĐVN ni Thử với 20 viên, ... của diclofenac dạng TDKD Tên Dạng bào chế Tuổi thọ Công ty sản xuất Supsyde CR Viên nang 24th Raptakos and Brett Co., Ltd Dicloran SR Viên nén bao 36th Strides Arcolab ltd Voltaren L.p Viên nén bao 60th Novatis Pharma AG Umeran SR 100 Viên mini đóng nang 36th Umedica Laboratories Pvt Ltd 24th Cavi-Medic InC Novo-Difenac SR Viên nén 1.2 SINH KHẢ DỤNG VÀ TƯƠNG ĐƯƠNG SINH HỌC 1.2.1 Khái niệm Sinh khả dụng: ... 2.2.1 Phương pháp bào chế viên nén Diclofenac- KD Lê Thị Thu Huyền và cộng sự [17] đã nghiên cứu xây dựng công thức bào chế viên nén Diclofenac- KD sử dụng tá dược là gôm xanthan ở quy mô phòng thí nghiệm 6000 viên; viên nén đạt các chỉ tiêu chất lượng đề ra Trên cơ sở đó, chúng tôi nghiên cứu phát triển bào chế viên nén Diclofenac- KD trên quy mô pilot vói công thức như sau: Natri diclofenac lOOmg Gôm xanthan... quả đánh giá SKD của chế phẩm [46] - Tương đưong sinh học: là khái niệm chỉ hai chế phẩm thuốc có SKD khác nhau không đáng kể khi dùng cùng một mức liều trong cùng điều kiện thử nghiệm [19], [46] Hai khái niệm trên có thể khác nhau nhưng quá trình đánh giá SKD và TĐSH in vivo thực chất là tương tự Đánh giá SKD để xác định mức độ chất lượng và khả năng phát huy tác dụng của sản phẩm Đánh giá TĐSH để đánh. .. 300x3,9mm C18 ụBondapack MeCN:0,03%acid phosphoric pH3,5 (45:55) " " TLTK 34 ' 1.2.3 Một số nghiên cứu đánh giá sinh khả dụng dạng tác dụng kéo dài của natri diclofenac Meena Rani và cs [36] đã nghiên cứu so sánh in vitro và SKD in vivo của các dạng bào chế có chứa natri diclofenac có cốt là polyme, dạng viên bao màng thẩm thấu và hệ bofm thẩm thấu Nghiên cứu dùng 2 chế phẩm đối chứng là Voltaren SR lOOmg... Độ hoà tan 1 0 -1 5 % 90 - 100% Tốc độ khuấy: 100 ± 4 vòng/phút r:37±oyc Định lượng: đo u v ỞẴ=305nm 2.3.3 Đánh giá sinh khả dụng in vivo viên nén Diclofenac- KD 23.3.1 Xây dựng phương pháp định lượng diclofenac trong huyết tương ❖ Khảo sát dung môi chiết diclofenac: Tiến hành thử nghiệm chiết diclofenac từ huyết tương bằng 2 cách: + Kết tủa protein bằng acid percloric + Chiết lỏng - lỏng bằng dung... cho thấy các dạng bào chế có màng thẩm thấu, và bơm thẩm thấu có khả năng duy trì nồng độ trong máu lâu hơn thể hiện trên: giá trị nhỏ hơn và viên đối chiếu (Cn,ax~0,5|ig/ml, kéo dài hơn (Cn,ax~0,34|ig/ml, T„,a^~6 h) so với T m a x ~ 4h) Điều đó chứng tỏ viên có TDKD rõ rệt Các tác giả [31] đã tiến hành đánh giá SKD tương đối in vivo của viên Clofen (dạng cốt HPMC) so vói Voltaren SR lOOmg trên 12 ngưòi... thích hợp lắm trong đánh giá SKD (do hệ tiêu hoá của thỏ khác xa của ngưòi), nhưng vẫn được sử dụng khi cần nghiên cứu thăm dò một yếu tố nào đó ở trong nước, đã có nhiều đề tài nghiên cứu về các dạng thuốc TDKD của natri diclofenac, nhưng nghiên cứu về SKD và TĐSH của các chế phẩm diclofenac thì còn rất hạn chế Chúng tôi chưa tìm được nghiên cứu nào về đánh giá SKD in vivo dạng viên nén diclofenac TDKD... Đánh giá TĐSH để đánh giá chất lượng của thuốc nghiên cứu nhằm tìm bằng chứng tưcmg đương phục vụ cho xét cấp phép lưu hành và khả năng thay thế cho các chế phẩm phát minh [26], 1.2.2 Quy định về đánh giá sinh khả dụng và tương đương sinh học Tổ chức y tế thế giới, hiệp hội các nước Đông Nam Á, và một số các nước tiên tiến khác đã có tài liệu hướng dẫn, quy định chung cho việc đánh giá SKD và TĐSH Các... tích natri diclofenac trong dịch sinh học, Tác giả Lê Hậu và các cộng sự [11] đã dùng phuofng pháp kết tủa tạp protein với acid Phuofng pháp này cũng được một số tác giả khác sử dụng [34],[28],[29] Mẫu dịch sinh học trong đánh giá SKD thường có nồng độ rất thấp, do đó, cần thiết phải áp dụng các phương pháp phân tích hiện đại và thiết bị có độ nhạy cao Một số phuofng pháp định lượng hay được sử dụng nhất