Đánh giá đáp ứng miễn dịch của gà, vịt được tiêm phòng vaccine cúm gia cầm h5n1 (chủng RE 5) tại hà nội

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM  NGÔ THỊ HOA TRANG ĐÁNH GIÁ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA GÀ, VỊT ĐƯỢC TIÊM PHÒNG VACCINE CÚM GIA CẦM H5N1 (CHỦNG RE-5) TẠI HÀ NỘI LUẬN VĂN THẠC SĨ CHUYÊN NGÀNH : THÚ Y MÃ NGÀNH : 60.62.01.05 NGƯỜI HƯỚNG DẪN : 1. PGS. TS. TÔ LONG THÀNH 2. PGS. TS. PHẠM NGỌC THẠCH HÀ NỘI – 2014 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng: - Đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. - Các kết quả nghiên cứu trong luận văn là trung thực, khách quan và chưa được sử dụng để bảo vệ một học vị nào. - Mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn đã được cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn đều đã được chỉ rõ nguồn gốc. Hà Nội, ngày tháng năm 2014 Tác giả luận văn Ngô Thị Hoa Trang Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ii LỜI CẢM ƠN Trong suốt 2 năm học tập và hoàn thành luận văn, ngoài sự nỗ lực của bản thân, tôi đã nhận được sự giúp đỡ, hướng dẫn tận tình của nhiều cá nhân và tập thể, cho phép tôi được tỏ lòng biết ơn và cảm ơn chân thành tới: Ban Giám hiệu Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội, Ban Đào tạo, Ban Chủ nhiệm Khoa Thú y, Trung tâm Chẩn đoán Thú y Trung Ương, Chi Cục Thú y Hà Nội, các thầy cô giáo khoa Thú y đã giúp đỡ, tạo điều kiện để tôi học tập, tiếp thu kiến thức của chương trình học. Thầy hướng dẫn khoa học: PGS.TS. Tô Long Thành và PGS.TS. Phạm Ngọc Thạch. Nhân dịp hoàn thành luận văn, cho phép tôi được gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình, người thân cùng bạn bè và đồng nghiệp đã động viên giúp đỡ tôi vượt qua mọi khó khăn trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu, thực hiện đề tài. Một lần nữa tôi xin bày tỏ lòng biết ơn, cảm ơn chân thành tới những tập thể, cá nhân đã tạo điều kiện giúp đỡ tôi hoàn thành chương trình học tập. Hà Nội, ngày tháng năm 2014 Tác giả luận văn Ngô Thị Hoa Trang Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình viii MỞ ĐẦU 1 CHƯƠNG I TỔNG QUAN CÁC VẤN ĐỀ CẦN NGHIÊN CỨU 3 1.1 Giới thiệu chung về bệnh cúm gia cầm 3 1.1.1 Khái niệm về bệnh cúm gia cầm 3 1.1.2 Lịch sử bệnh cúm gia cầm 3 1.1.3 Tình hình dịch bệnh cúm A/H5N1 trên thế giới 4 1.1.4 Tình hình dịch bệnh cúm A/H5N1 ở Việt Nam 7 1.1.5 Triệu chứng và bệnh tích của bệnh cúm gia cầm 11 1.2 Dịch tễ học bệnh cúm gia cầm 12 1.2.1 Phân bố dịch bệnh 12 1.2.2 Động vật cảm nhiễm 13 1.2.3 Vật mang virus 13 1.2.4 Mùa vụ mắc bệnh 14 1.2.5 Sự truyền lây 14 1.3 Virus học mầm bệnh cúm gia cầm 15 1.3.1 Đặc điểm hình thái, cấu trúc của virus cúm type A 15 1.3.2 Đặc tính kháng nguyên của virus cúm type A 17 1.3.3 Độc lực của virus 18 1.3.4 Sức đề kháng của virus cúm 19 1.3.5 Sự tiến hóa của virus cúm A/H5N1 20 1.3.6 Cơ chế xâm nhiễm và gây bệnh của virus cúm A trong tế bào vật chủ 26 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iv 1.4 Miễn dịch chống bệnh của gia cầm 28 1.4.1 Miễn dịch không đặc hiệu 28 1.4.2 Miễn dịch đặc hiệu 30 1.4.3 Miễn dịch chủ động 31 1.4.4 Miễn dịch thụ động 32 1.4.5 Những yếu tố ảnh hưởng đến sự hình thành kháng thể 32 1.5 Chẩn đoán bệnh 33 1.5.1 Chẩn đoán dựa vào dịch tễ học 33 1.5.2 Chẩn đoán dựa vào triệu chứng và bệnh tích 33 1.5.3 Chẩn đoán phòng thí nghiệm 33 1.6 Phòng chống bệnh cúm gia cầm 34 1.6.1 Phòng bệnh 34 1.6.2 Chống dịch 38 CHƯƠNG 2 NỘI DUNG – NGUYÊN LIỆU – PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 40 2.1 Nội dung nghiên cứu 40 2.2 Địa điểm nghiên cứu 40 2.3 Vật liệu và phương pháp nghiên cứu 40 2.3.1 Vật liệu nghiên cứu 40 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu 40 2.3.3 Phương pháp xử lý số liệu. 45 CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 46 3.1 Tình hình chăn nuôi gia cầm ở Hà Nội 46 3.2 Diễn biến dịch cúm A/H5N1 trên địa bàn thành phố 49 3.2.1 Diễn biến dịch cúm A/H5N1 theo thời gian 49 3.2.2 Diễn biến dịch cúm A/H5N1 theo quy mô chăn nuôi 51 3.2.3 Diễn biến dịch cúm theo loài (gà và thủy cầm) 54 3.3 Kết quả tiêm phòng vaccine cúm gia cầm giai đoạn 2010 – 2014 55 3.4 Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể của gia cầm sau tiêm phòng 58 3.5 Kiểm tra độ dài miễn dịch và hiệu giá kháng thể của gia cầm sau tiêm phòng 60 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page v 3.5.1 Kết quả kiểm tra hiệu giá huyết thanh kháng virus cúm A/H5N1 trên gà. 61 3.5.2 Kết quả kiểm tra hiệu giá huyết thanh kháng virus cúm A/H5N1 trên vịt. 64 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 68 1 Kết luận 68 2 Đề nghị 68 TÀI LIỆU THAM KHẢO 69 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT HPAI Highly Pathogenic Avian Influenza LPAI Low Pathogenic Avian Influenza HA Hemagglutination HI Hemagglutination Inhibition KN Kháng nguyên. KT Kháng thể. OIE Office Internationale des Epizooties WHO World Health Organization FAO Food and Agriculture Organnization GMT Geometric Mean Titre. PBS Phosphate Buffered Saline. BNN&PTNT Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn. HGKT Hiệu giá kháng thể TLBH Tỷ lệ bảo hộ . . . . . Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vii DANH MỤC BẢNG STT Tên bảng Trang 1.1 Tổng số trường hợp nhiễm cúm gia cầm A/H5N1 ở người 7 1.2 Một số đặc điểm triệu chứng của gia cầm mắc cúm A/H5N1 11 3.1 Tổng đàn gia cầm Thành phố Hà Nội từ 2010 đến 2014 47 3.2 Tình hình dịch cúm A/H5N1 trên địa bàn Hà Nội 49 3.3 Tình hình dịch cúm A/H5N1 theo quy mô đàn 52 3.4 Tình hình dịch cúm A/H5N1 theo loài gia cầm 54 3.5 Thống kê kết quả tiêm phòng vaccine cúm gia cầm Thành phố Hà Nội từ 2010 đến T6/2014 56 3.6 Kết quả giám sát huyết thanh sau tiêm phòng 58 3.7 Hiệu giá kháng thể của trại gà 1 61 3.8 Hiệu giá kháng thể của trại gà 2 62 3.9 Tỷ lệ bảo hộ và GMT của 2 trại gà thí nghiệm 62 3.10 Hiệu giá kháng thể của trại vịt 1 64 3.11 Hiệu giá kháng thể của trại vịt 2 65 3.12 Tỷ lệ bảo hộ và GMT của 2 trại vịt thí nghiệm 65 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page viii DANH MỤC HÌNH STT Tên hình Trang 1.1 Bản đồ các quốc gia xảy ra dịch cúm A/H5N1 5 1.2 Biểu đồ biểu diễn dịch cúm A/H5N1 ở người tại Việt Nam theo thời gian 10 1.3 Mối quan hệ lây nhiễm và thích ứng các loài vật chủ của virus cúm A. 15 1.4 Hình thái và cấu trúc virus cúm gia cầm 16 1.5 Mô hình cấu trúc kháng nguyên Haemalutinin và Neurminidase 17 1.6 Cây phát sinh loài dựa trên gen HA các virus cúm A/H5N1 độc lực cao (WHO) 21 1.7 Sự tiến hóa của các clade virus H5N1 theo thời gian (WHO) 22 1.8 Sự phân bố của các clades virus cúm gia cầm trên thế giới từ 2003 – 2009 23 1.9 Thời gian xuất hiện của các clade H5N1 ở Việt Nam từ 2001-2007 24 1.10 Sự phân bố các clade virus H5N1 khác nhau theo không gian 25 1.11 Mô hình cơ chế xâm nhiễm và nhân lên của virus cúm A ở tế bào chủ 27 1.12 Sơ đồ chẩn đoán bệnh cúm gia cầm (TTCĐ) 34 3.1 Bản đồ Thành phố Hà Nội 46 3.2 Tổng đàn gia cầm Thành phố Hà Nội từ 2010 đến 2014 48 3.3 Diễn biến dịch cúm A/H5N1 tại Hà Nội 50 3.4 Biến động tình hình mắc cúm A/H5N1 theo quy mô đàn 53 3.5 Biến động tỷ lệ loài mắc bệnh 55 3.6 Tỷ lệ tiêm phòng vaccine cúm gia cầm tại TP Hà Nội từ 2010 đến T6/2014 57 3.7 Giám sát huyết thanh sau tiêm phòng giữa gà và vịt 59 3.8 Kết quả giám sát huyết thanh sau tiêm phòng 59 3.9 Biến động hiệu giá kháng thể trung bình của trại gà 1 63 3.10 Biến động hiệu giá kháng thể trung bình của trại gà 2 63 3.11 Biến động hiệu giá kháng thể trung bình của trại vịt 1 66 3.12 Biến động hiệu giá kháng thể trung bình của trại vịt 2 66 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 1 MỞ ĐẦU Cúm gia cầm thể độc lực cao (Highly Pathogenic Avian Influenza - HPAI) do virus cúm A/H5N1 gây ra là bệnh truyền nhiễm nguy hiểm có tốc độ lây lan nhanh với tỷ lệ chết cao trong đàn gia cầm khi bị nhiễm bệnh. Bệnh xảy ra ở khắp nơi trên thế giới, gây thiệt hại về kinh tế và có ảnh hưởng lớn đến tình hình chính trị, xã hội. Bệnh cúm gia cầm thể độc lực cao được Tổ chức Dịch tễ Thế giới (OIE) xếp vào bảng A các bệnh truyền nhiễm cực kỳ nguy hiểm. Từ cuối năm 2003 trở lại đây, bệnh cúm gia cầm đã, đang và dự đoán trong nhiều năm nữa vẫn là mối đe dọa nguy hiểm cho sự phát triển của ngành chăn nuôi gia cầm ở nước ta và cho sức khoẻ cộng đồng. Do đó, phòng chống dịch cúm gia cầm là một trong những chương trình phòng chống dịch bệnh cấp quốc gia. Việt Nam và một số nước trên thế giới đã tiến hành đồng bộ các biện pháp như tiêu hủy đàn gia cầm, cấm lưu thông tiêu thụ gia cầm và sản phẩm gia cầm, kiểm soát giết mổ và các biện pháp an toàn sinh học Mặc dù những biện pháp này đã cho những kết quả nhất định song rất tốn kém và gây thiệt hại lớn về kinh tế. Vì thế, song song với việc áp dụng các biện pháp đồng bộ khác, việc sử dụng vaccine tiêm phòng để tạo đáp ứng miễn dịch chủ động chống lại bệnh cúm là một biện pháp hỗ trợ tích cực và không thể thiếu trong việc phòng và hạn chế bệnh. Chính vì vậy, trong công tác phòng và chống dịch, việc giám sát khả năng đáp ứng miễn dịch với vaccine của gia cầm là nhiệm vụ bắt buộc. Hà Nội là trung tâm chính trị, văn hoá, khoa học, kinh tế và giao dịch quốc tế của cả nước; nơi có dân số lớn thứ hai của Việt Nam, với số lượng người nước ngoài đến sống và làm việc cũng như du lịch ngày càng nhiều. Nhu cầu sử dụng thực phẩm tươi sống ngày càng tăng cả về số lượng và chất lượng. Cũng chính từ nhu cầu sử dụng đó mà vấn đề lưu thông, buôn bán gia cầm cũng trở nên nhộn nhịp, khó kiểm soát. Dịch cúm gia cầm ngày càng lan rộng và diễn biến phức tạp trên cả nước nói chung và trên địa bàn Hà Nội nói riêng. Việc sử dụng vaccine được xem như một biện pháp hỗ trợ tích cực trong việc phòng và hạn chế bệnh. Nhằm đánh giá mức độ bảo hộ trước bệnh cúm gia cầm của gà và vịt sau khi tiêm phòng [...].. .vaccine trong điều kiện đại trà, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: Đánh giá đáp ứng miễn dịch của gà, vịt được tiêm vaccine cúm gia cầm H5N1 (chủng Re5 ) tại Hà Nội * Mục tiêu nghiên cứu - Đánh giá mức độ thiệt hại do bệnh cúm gia cầm gây ra tại Hà Nội - Đánh giá được đáp ứng miễn dịch và tỷ lệ bảo hộ trên đàn gà và vịt sau khi được tiêm vaccine cúm gia cầm - Đánh giá hiệu quả của việc tiêm phòng. .. hình dịch bệnh cúm A /H5N1 ở Việt Nam Dịch cúm gia cầm H5N1 bùng phát tại Việt Nam vào cuối tháng 12/2003 ở các tỉnh phía Bắc, sau đó đã nhanh chóng lan tới hầu hết các tỉnh/ thành trong cả nước chỉ trong một thời gian ngắn Đây là lần đầu tiên dịch cúm gia cầm H5N1 xảy ra tại Việt Nam, có tới hàng chục triệu gia cầm bị tiêu hủy, gây thiệt hại nặng nề cho nền kinh tế quốc dân Tính đến nay, dịch cúm gia cầm. .. Đánh giá hiệu quả của việc tiêm phòng trong chương trình phòng chống cúm gia cầm H5N1 trên địa bàn thành phố Hà Nội * Ý nghĩa khoa học và thực tiễn - Các kết quả thu được là cơ sở đánh giá hiệu quả của việc sử dụng vaccine trong phòng bệnh cúm gia cầm - Định hướng và xây dựng kế hoạch cho chương trình phòng bệnh cúm trong phạm vi thành phố Hà Nội và là tư liệu tham khảo cho các tỉnh khác trong cả nước... khống chế thành công dịch cúm gia cầm trong phạm vi cả nước, từ ngày 1/10/2007 dịch đã tái phát tại 15 xã, phường của 9 huyện, thị thuộc 6 tỉnh Tổng số gia cầm mắc bệnh chết và tiêu huỷ 7.488 con (1.024 gà, chiếm 13,71 % và 6.464 vịt chiếm 86,28%) Từ sau đợt dịch thứ 5, ở Việt Nam trở thành dịch lưu hành, các ổ dịch nhỏ, lẻ xuất hiện rải rác quanh năm * Năm 2008: Dịch cúm gia cầm đã xuất hiện tại 80 xã... huyện, quận, thị xã của 27 tỉnh, thành phố Tổng số gia cầm chết và buộc phải tiêu hủy là 106.508 con (gồm 40.525 con gà, 61.027 con vịt và 4.506 con ngan) Chỉ xuất hiện các điểm dịch ở những đàn gia cầm quy mô từ 100 - 2000 con, không được tiêm phòng vaccine (44,59%), hoặc đàn thuỷ cầm mới tiêm phòng một mũi (16,21%), ổ dịch trên thủy cầm chiếm 52,70% Các ổ dịch xuất hiện thường được địa phương bao... 59.829 con gia cầm mắc bệnh; tổng số gia cầm chết và tiêu hủy là 79.522 con (giảm 88% so với năm 2012) (HNCTY, 2013) * Năm 2014: Theo báo cáo của chi cục thú y, trong 6 tháng đầu năm 2014 dịch bệnh cả nước vẫn tiếp tục có diễn biến phức tạp: 34 Tỉnh, Thành có dịch cúm gia cầm, số gia cầm tiêu hủy là 135.742 con Hình 1.2 Biểu đồ biểu diễn dịch cúm A /H5N1 ở người tại Việt Nam theo thời gian Cúm A /H5N1 độc... hiện dịch cúm gia cầm do virus H5N1, đặc biệt là tại Indonesia, dịch cúm gia cầm dây Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 5 dưa kéo dài, tại một số quốc gia Châu Phi - nơi được cho là virus cúm gia cầm có nguy cơ biến đổi cũng đã phát dịch Các nước khác trong khu vực như: Lào, Campuchia, Myanma, Malaysia, Trung Quốc, Thái Lan cũng đã tái phát dịch Các quốc gia có... tái bùng phát hàng năm tại nhiều địa phương trong cả nước Để thuận lợi cho việc đánh giá về dịch tễ học có thể chia quá trình dịch từ khi xuất hiện vào cuối năm 2003 đến nay thành những đợt dịch sau: * Đợt dịch thứ nhất từ tháng 12/2003 đến 30/3/2004: Cuối tháng 12 năm 2003, dịch cúm gia cầm thể độc lực cao với tác nhân gây bệnh là virus cúm gia cầm H5N1 Đây là lần đầu tiên bệnh xuất hiện tại Việt Nam... 2 CHƯƠNG I TỔNG QUAN CÁC VẤN ĐỀ CẦN NGHIÊN CỨU 1.1 Giới thiệu chung về bệnh cúm gia cầm 1.1.1 Khái niệm về bệnh cúm gia cầm Bệnh cúm ở gia cầm (Avian Influenza) còn gọi là bệnh cúm gà hay cúm của loài chim Đây là một bệnh truyền nhiễm gây ra bởi virus cúm type A thuộc họ Orthomyxoviridae Virus cúm gia cầm gây bệnh cho gà, vịt, ngan, ngỗng, gà tây, chim cút, đà điểu, các loài chim cảnh và chim hoang... 1.1.5.1 Triệu chứng Virus cúm gia cầm độc lực cao thường gây bệnh rất trầm trọng cho gia cầm và thông thường tỷ lệ tử vong cao đặc biệt là với gia cầm cạn Các loài thủy cẩm, dã cầm và một số loài lông vũ khác có thể có độ mẫn cảm thấp hơn, nhưng có thể trở thành động vật mang trùng (Lê Văn Năm, 2004) Bảng 1.2 Một số đặc điểm triệu chứng của gia cầm mắc cúm A /H5N1 Trên gà Trên thủy cầm (vịt, ngan) - Chết . cứu - Đánh giá mức độ thiệt hại do bệnh cúm gia cầm gây ra tại Hà Nội. - Đánh giá được đáp ứng miễn dịch và tỷ lệ bảo hộ trên đàn gà và vịt sau khi được tiêm vaccine cúm gia cầm. - Đánh giá. Page 2 vaccine trong điều kiện đại trà, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: Đánh giá đáp ứng miễn dịch của gà, vịt được tiêm vaccine cúm gia cầm H5N1 (chủng Re- 5) tại Hà Nội * Mục. GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM  NGÔ THỊ HOA TRANG ĐÁNH GIÁ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA GÀ, VỊT ĐƯỢC TIÊM PHÒNG VACCINE CÚM GIA CẦM H5N1 (CHỦNG