Xác định type virus gây bệnh lở mồm long móng (LMLM) trên lợn nghiên cứu một số yếu tố nguy cơ ảnh hưởng đến quá trình phát sinh và lây lan bệnh LMLM ở lợn trên địa bàn huyện tĩnh gia, tỉnh thanh hóa

B GIÁO D C VÀ ðÀO T O B NÔNG NGHI P VÀ PTNT H C VI N NÔNG NGHI P VI T NAM ð NG VĂN HI P XÁC ð NH TYPE VIRUS GÂY B NH L M M LONG MÓNG (LMLM) TRÊN L N NGHIÊN C U M T S Y U T NGUY CƠ NH HƯ NG ð N QUÁ TRÌNH PHÁT SINH VÀ LÂY LAN B NH LMLM L N TRÊN ð A BÀN HUY N TĨNH GIA, T NH THANH HÓA CHUYÊN NGÀNH: THÚ Y Mà S : 60.64.01.01 NGƯ I HƯ NG D N KHOA H C: 1: TS TR NH ðÌNH THÂU 2: PGS.TS NGUY N TH LAN HÀ N I, NĂM 2014 L I CAM ðOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên c u c a riêng tơi, s li u, k t qu nêu lu n văn trung th c chưa t ng ñư c cơng b b t kỳ cơng trình khác Tơi xin cam đoan r ng thơng tin trích d n lu n văn đ u ñã ñư c ch rõ ngu n g c Hà N i, ngày tháng 10 năm 2014 H c viên ð ng Văn Hi p H c vi n Nông nghi p Vi t Nam – Lu n văn Th c s Khoa h c Nông nghi p Page i L I C M ƠN ð hoàn thành lu n văn này, s n l c c g ng h t c a b n thân, tơi ln nh n ñư c s quan tâm giúp ñ c a th y giáo, cô giáo b n bè ñ ng nghi p Nhân d p này, trư c tiên xin chân thành c m ơn s giúp ñ cu gi ng viên khoa Thú y, H c vi n Nông nghi p Vi t Nam ñã gi ng d y su t th i gian h c t p t i H c vi n Tơi xin bày t lịng bi t ơn sâu s c ñ n th y TS Tr nh ðình Thâu - Trư ng khoa Thú y PGS.TS Nguy n Th Lan – Phó Trư ng khoa Thú y t n tình giúp đ , hư ng d n tơi q trình th c hi n hồn thành lu n văn Tơi xin g i l i c m ơn chân thành ñ n Lãnh ñ o cán b Tr m thú y Tĩnh Gia, Phòng D ch t Chi c c thú y Thanh Hố, Phịng D ch t Cơ quan thú y Vùng III, Tr m Ch n đốn xét nghi m Cơ quan thú y Vùng III b n đ ng nghi p giúp đ tơi su t th i gian qua Tôi xin g i l i c m ơn t i ngư i thân gia đình ln giúp đ , đ ng viên tơi hồn thành lu n văn Hà N i, ngày tháng 10 năm 2014 H c viên ð ng Văn Hi p H c vi n Nông nghi p Vi t Nam – Lu n văn Th c s Khoa h c Nông nghi p Page ii M CL C L I CAM ðOAN .i L I C M ƠN ii M C L C iii DANH M C CH VI T T T v DANH M C B NG vi DANH M C HÌNH vii M ð U 1 Tính c p thi t c a ñ tài M c ñích c a ñ tài 3 Ý nghĩa khoa h c c a ñ tài Chương T NG QUAN TÀI LI U 1.1 B nh l m m long móng 1.1.1 ð nh nghĩa, hình thái, c u t o, phân lo i virus LMLM 1.1.2 S c ñ kháng kh gây b nh 1.1.3 ðư ng xâm nh p ch gây b nh c a virus 1.1.4 Tri u ch ng, b nh tích 12 1.1.5 D ch t h c 14 1.2 Cơ s phân lo i virus LMLM, ch n đốn b ng ph n ng ELISA 17 1.2.1 Cơ s phân lo i virus LMLM 17 1.2.2 Xác ñ nh type virus LMLM b ng phương pháp ELISA 17 1.3 Y u t nguy 19 1.3.1 Khái ni m 20 1.3.2 Phương pháp xác ñ nh y u t nguy 20 1.3.3 T s chênh OR (Odd Ratio) nghiên c u (ñi u tra) h i c u 20 1.4 Tình hình d ch b nh LMLM 21 1.4.1 Trên th gi i 21 1.4.2 T i Vi t Nam 24 Chương N I DUNG, V T LI U VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 30 2.1 N i dung nghiên c u 30 2.2 V t li u phương pháp nghiên c u 30 H c vi n Nông nghi p Vi t Nam – Lu n văn Th c s Khoa h c Nông nghi p Page iii 2.2.1 Tình hình chăn ni l n tình hình d ch LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia t nh Thanh Hóa năm 2013 30 2.2.2 Xác ñ nh type virus gây b nh LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 30 2.2.3 ðánh giá y u t nguy làm phát sinh lây lan b nh LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 34 2.2.4 Th i gian ñ a ñi m nghiên c u 35 Chương K T QU VÀ TH O LU N 36 3.1 Tình hình chăn ni tình hình d ch LMLM l n t i Thanh Hóa năm 2013 36 3.2 Tình hình chăn ni l n tình hình d ch LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 38 3.2.1 ði u ki n t nhiên c a Tĩnh Gia 38 3.2.2 Tình hình chăn nuôi l n t i Tĩnh Gia năm 2013 38 3.2.3 Chăn nuôi l n t i xã H i Ninh, Triêu Dương, Tân Dân, H i Lĩnh c a huy n Tĩnh Gia năm 2013 42 3.2.4 ð c ñi m d ch t c a b nh LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 43 3.3 K t qu xác ñ nh type virus LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 51 3.4 Y u t nguy làm xu t hi n lây lan d ch LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 52 3.4.1 ðư ng giao thơng 53 3.4.2 Chăn nuôi g n ch buôn bán gia súc, gia c m s ng 54 3.4.3 Khơng tiêm phịng b nh truy n nhi m nguy hi m khác 56 3.4.4 Ngu n g c gi ng không rõ ràng 57 3.4.5 Không s d ng thu c sát trùng v sinh tiêu ñ c ñ nh kỳ 59 3.4.6 S d ng nư c ao h cơng c ng đ chăn ni l n 60 3.4.7 Bán ch y l n có d ch 62 3.5 M t s gi i pháp phòng ch ng d ch b nh LMLM c a ñ a phương 63 3.5.1 Các gi i pháp hành 64 3.5.2 Các gi i pháp chuyên môn 64 3.5.3 Các bi n pháp k thu t 65 K T LU N VÀ ð NGH 71 K t lu n 71 ð ngh 72 TÀI LI U THAM KH O 74 H c vi n Nông nghi p Vi t Nam – Lu n văn Th c s Khoa h c Nông nghi p Page iv DANH M C CH VI T T T Ch vi t t t Ch vi t ñ y ñ ARN Axit ribonucleic CI Confident interval ELISA Enzyme linked immuno-sorbent assay FMDV Foot and Mouth Disease Virus LMLM L m m long móng OD Optical Density OR Odd Ratio P P-value TCVN Tiêu chu n Vi t Nam VSTð V sinh tiêu ñ c H c vi n Nông nghi p Vi t Nam – Lu n văn Th c s Khoa h c Nông nghi p Page v DANH M C B NG B ng 3.1 Tình hình d ch LMLM l n t i Thanh Hóa năm 2013 .37 B ng 3.2 T ng ñàn l n t i Tĩnh Gia năm 2013 40 B ng 3.3 Quy mô chăn nuôi l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 41 B ng 3.4 S l n/h chăn nuôi t i xã H i Ninh, Triêu Dương, Tân Dân, H i Lĩnh c a Tĩnh Gia năm 2013 42 B ng 3.5 Tình hình b nh LMLM l n t i xã c a huy n Tĩnh Gia năm 2013 .49 B ng 3.6 Tình hình b nh LMLM theo lo i l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 50 B ng 3.7 K t qu xác ñ nh type virus LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 52 B ng 3.8 K t qu ñi u tra v m i liên h gi a y u t đư ng giao thơng s h chăn ni có d ch LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 53 B ng 3.9 K t qu ñi u tra v m i liên h gi a y u t g n ch buôn bán gia súc, gia c m s ng s h chăn ni có d ch LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 55 B ng 3.10 K t qu ñi u tra v m i liên h gi a vi c khơng tiêm phịng b nh truy n nhi m nguy hi m khác s h chăn ni có d ch LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 56 B ng 3.11 K t qu ñi u tra v m i liên h gi a vi c s d ng ngu n g c gi ng không rõ ràng s h chăn nuôi có d ch LMLM l n đ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 58 B ng 3.12 K t qu ñi u tra v m i liên h gi a vi c không s d ng thu c sát trùng ñ VSTð ñ nh kỳ s h chăn ni có d ch LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 59 B ng 3.13 K t qu ñi u tra v m i liên h gi a vi c s d ng nư c ao h công c ng s h chăn nuôi có d ch LMLM l n đ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 61 B ng 3.14 K t qu ñi u tra v m i liên h gi a vi c bán ch y l n có d ch s h chăn ni có d ch LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 62 H c vi n Nông nghi p Vi t Nam – Lu n văn Th c s Khoa h c Nông nghi p Page vi DANH M C HÌNH Hình 1.1 Hình nh c u trúc virus LMLM Hình 1.2 Hình nh b nh tích “tim v n h ” l n m c b nh LMLM 14 Hình 1.3 S lưu hành theo ñ c ñi m c a virus LMLM thành vùng Th gi i t 2010 – 2013 22 Hình 1.4 B n ñ phân b d ch LMLM t i Vi t Nam giai đo n 2006 - 2012 28 Hình 1.5 S phân b d ch b nh LMLM theo th i gian Vi t Nam gi a năm 28 Hình 2.1 Sơ đ đĩa ph n ng ELISA phát hi n kháng nguyên 32 Hình 3.1 Bi u đ th hi n s l n/ h chăn nuôi t i H i Ninh, Triêu Dương, Tân Dân, H i Lĩnh .42 Hình 3.2 Tình hình d ch LMLM l n theo th i gian ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 43 Hình 3.3 Bi u đ th hi n s xã có d ch LMLM theo th i gian ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 45 Hình 3.4 Bi u đ th hi n s h có l n m c b nh LMLM theo ngày ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 46 Hình 3.5 B n đ phân b s xã có d ch LMLM l n đ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 48 Hình 3.6 T l (%) m c b nh LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 201349 Hình 3.7 Bi u đ t l m c b nh LMLM lo i l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 51 Hình 3.8 K t qu phân tích nguy g n đư ng giao thơng 54 Hình 3.9 K t qu phân tích nguy làm phát sinh lây lan b nh LMLM t vi c chăn nuôi g n ch buôn bán gia súc, gia c m s ng 55 Hình 3.10 K t qu phân tích nguy làm phát sinh lây lan b nh LMLM t vi c không tiêm phòng b nh truy n nhi m nguy hi m khác 57 Hình 3.11 K t qu phân tích nguy phát sinh lây lan d ch t vi c s d ng gi ng có ngu n g c khơng rõ ràng 59 Hình 3.12 K t qu phân tích nguy phát sinh lây lan d ch LMLM t vi c khơng s d ng thu c sát trùng đ VSTð ñ nh kỳ .60 Hình 3.13 K t qu phân tích nguy phát sinh lây lan d ch t vi c s d ng nư c ao h công c ng ñ chăn nuôi l n 61 Hình 3.14 K t qu phân tích nguy phát sinh lây lan d ch t vi c bán ch y l n ñang có d ch 63 H c vi n Nông nghi p Vi t Nam – Lu n văn Th c s Khoa h c Nông nghi p Page vii H c vi n Nông nghi p Vi t Nam – Lu n văn Th c s Khoa h c Nông nghi p Page viii M ð U Tính c p thi t c a đ tài Trong nh ng năm g n ñây, ngành chăn ni ngày phát tri n m nh gi m t v trí quan tr ng n n kinh t c a nư c ta ð c bi t, chăn ni l n có nhi u thay ñ i ñáng k , ñáp ng ñư c ph n l n nhu c u v th c ph m cho ngư i dân S n ph m c a ngành chăn nuôi l n cung c p ngu n th c ph m ch y u cho nhân lo i nhi u nư c th gi i, m c tiêu th th t l n tính ñ u ngư i chi m t l cao so v i lo i th t khác Vi t Nam, t l th t l n tính theo ñ u ngư i chi m 72,94% t ng s lo i th t ñư c tiêu th hàng năm Theo T ng c c th ng kê năm 2013: t ng ñàn l n 26,3 tri u Chăn ni l n tr thành ngu n thu nh p quan tr ng ñ i v i h nông dân m t nh ng ngh góp ph n chuy n d ch c u kinh t nông nghi p nư c ta Cùng v i s phát tri n c a chăn ni lưu lư ng v n chuy n ñ ng v t s n ph m ñ ng v t ngày l n, kèm theo s gia tăng v tình hình d ch b nh ðã có r t nhi u b nh du nh p vào nư c ta theo đư ng lưu thơng, v n chuy n có b nh LMLM (Foot and Mouth Disease, FMD) m t nh ng b nh truy n nhi m nguy hi m cho ñ ng v t gu c ch n trâu, bò, l n, dê, c u nh ng lồi đ ng v t hoang dã B nh có tính lây lan nhanh di n r ng, nên T ch c D ch t Th gi i ñã x p vào danh m c b ng A c a b nh truy n nhi m nguy hi m nh t ñ ng v t Virus gây b nh LMLM thu c h Picornaviridae ñư c chia thành type huy t có 70 subtype theo cách phân lo i kinh ñi n, gi a type khơng có mi n d ch chéo cho Thi t h i kinh t b nh LMLM gây r t l n: chi phí tiêu h y gia súc b nh bình qn m t năm c tính kho ng 10 t ñ ng (kho ng 10.000 gia súc/năm, ch y u l n) Hàng năm chi phí cho Chương trình qu c gia phịng ch ng LMLM kho ng 120 t Các ñ a phương ph i chi hàng ch c t ñ ng/năm cho ho t đ ng phịng ch ng d ch Ngồi ra, b nh LMLM làm nh hư ng t i m t s h p ñ ng xu t kh u c a Vi t Nam (C c Thú y, 2013) H c vi n Nông nghi p Vi t Nam – Lu n văn Th c s Khoa h c Nơng nghi p Page trình đ pháp lu t, s v t ch t trang thi t b cho nghành thú y ñ a bàn t nh - Thành l p qu phòng ch ng d ch b nh ñ ng th i chu n b s v t ch t k thu t ñ bao vây, kh ng ch , tiêu di t m m b nh t i ch d ch LMLM m i ñư c phát hi n - Th c hi n nghiêm vi c tiêm phòng vacxin theo Chương trình Qu c gia kh ng ch b nh LMLM giai ño n 2011 – 2015, t o ñi u ki n thu n l i ñ ngư i chăn ni có th tiêm phịng b sung Qu n lý ch t ch cơng tác tiêm phịng đ ng th i x lý nghiêm trư ng h p vi ph m theo Ngh ñ nh 119/2013/Nð-CP ngày 09/10/2013 c a Chính ph 3.5.3 Các bi n pháp k thu t - Chú tr ng công tác ch n đốn lâm sàng, l y m u g i xét nghi m k p thơì, đ ng th i l p k ho ch giám sát ch ñ ng ñ ñánh giá nguy cơ, ñ nh type virus ñ ch ñ ng chi n lư c tiêm phịng v c xin LMLM thích h p, hi u qu - Ph i th c hi n qu n lý ch t ch ho t ñ ng v n chuy n, buôn bán, gi t m gia súc ñây khâu quan tr ng ki m sốt vi c tn th quy đ nh v phòng, ch ng d ch c a ngư i chăn nuôi Gi m nguy lây lan d ch b nh qua v n chuy n, mua bán gi t m gia súc - ði u tra d ch t , xây d ng b n ñ d ch t c a đ a phương, có k ho ch xây d ng, ki m soát hi u qu vùng an toàn d ch b nh Ki m tra giám sát ch t ch vi c v n chuy n, bn bán gia súc, đ c bi t gia súc làm gi ng ph i ñư c giám sát theo dõi cách ly, có liên h ch t ch v i t nh khác ñ giám sát, theo dõi nh p, xu t gia súc Ph i h p ch t ch v i b ñ i biên phịng, h i quan, quy n nhân dân xã biên gi i phát hi n, x lý nghiêm trư ng h p nh p l u ñ ng v t s n ph m v t t nư c Lào vào ñ a bàn t nh Thanh Hóa H c vi n Nơng nghi p Vi t Nam – Lu n văn Th c s Khoa h c Nông nghi p Page 65 Tri n khai, th c hi n nghiêm túc Quy t ñ nh s 3263/Qð-UBND ngày 19/9/2013 c a UBND t nh Thanh Hóa v vi c Quy ho ch s gi t m gia súc, gia c m đ a bàn t nh Thanh Hóa đ n năm 2020 Tăng cư ng ki m tra gia súc, gia c m trư c ñưa vào gi t m nh m phát hi n, ngăn ch n gia súc m c b nh truy xu t ngu n t đưa bi n pháp ch ng d ch có hi u qu - X lý gia súc ch t, gia súc b nh v sinh tiêu đ c mơi trư ng.V sinh tiêu ñ c chu ng tr i, d ng c chăn nuôi, bãi chăn th gia súc, phương ti n v n chuy n, nơi gi t m gia súc X lý ch t th i, ch t ñ n chu ng theo s hư ng d n giám sát c a cán b thú y - Công tác tiêm phịng Vi c tiêm phịng ph i đư c th c hi n ñúng theo quy ñ nh ñ i v i b nh LMLM C c Thú y hư ng d n Ti n hành tiêm phòng vacxin đ nh kỳ có k ho ch ch ñ ng tiêm b sung ñ m b o ñ t t l 100% ñàn gia súc vùng kh ng ch vùng đ m, tiêm phịng quy trình k thu t, hi n c n ph i tiêm phòng vacxin nh giá type O + type A: Type (O3039 +O Manisa); TypeA (A22Iraq + A May97) ch ñ ng ngu n vacxin d tr ñ tiêm phịng ch ng d ch H c vi n Nơng nghi p Vi t Nam – Lu n văn Th c s Khoa h c Nông nghi p Page 66 K T LU N VÀ ð NGH K t lu n Tình hình chăn ni tình hình d ch LMLM l n t i Thanh Hóa năm 2013 - T ng ñàn l n ñ a bàn t nh 1.337.172 con, l n nái 21.000 con, l n ñ c 4100.con l n th t, l n theo m 1.312.072 - LMLM gia súc ñã x y t i 26 xã c a 09 huy n: Vĩnh L c, H u L c, thành ph Thanh Hóa, Như Thanh, Th ch Thành, Ho ng Hóa, Tĩnh Gia, Nơng C ng, Như Xuân làm t ng s 742 gia súc m c b nh (trong 332 trâu bị, 410 l n) ñã tiêu h y 408 l n m c b nh - Type virus gây b nh LMLM l n t i d ch đ a bàn t nh type O Tình hình chăn ni tình hình d ch LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 - T ng s l n đư c ni t i Tĩnh Gia 32.975 con, có 30 l n ñ c 353 lơn nái, ch y u l n th t l n theo m 32.592 - Tĩnh Gia có 814 h chăn nuôi l n, v i 626 h chăn nuôi quy mô nh l , 188 h chăn nuôi quy mô trang tr i, gia tr i - ð c ñi m d ch t b nh LMLM l n t i Tĩnh Gia năm 2013: ð t d ch kéo dài 53 ngày, b t ñ u bùng phát ngày 25/2/2013 qua ñ t d ch cao ñi m ch y u vào tháng 3, làm 357 l n m c b nh tiêu h y 355 Ngày 26/4/2013 ngày cu i có l n m c b nh LMLM Tĩnh Gia công b b t d ch LMLM vào ngày 17/5/2013 ðây có th tháng x y d ch LMLM năm c a huy n Tĩnh Gia năm 2013 - T l m c b nh LMLM cao nh t l n ñ c, l n nái sau l n th t l n theo m K t qu xác ñ nh type virus gây b nh LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 Type virus gây b nh LMLM l n t i Tĩnh Gia năm 2013 type O Xác ñ nh ñư c 07 y u t nguy làm phát sinh lây lan b nh LMLM ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013: 71 l n - ðư ng giao thơng qua: Có liên quan làm tăng nguy lây lan phát sinh d ch LMLM l n g p 4,64 l n - H chăn nuôi g n khu v c ch bn bán gia súc, gia c m s ng: Có liên quan làm tăng nguy lây lan phát sinh d ch LMLM l n g p 3,84 l n - Các h chăn nuôi l n không tiêm phòng b nh truy n nhi m nguy hi m khác: Có liên quan làm tăng nguy lây lan phát sinh d ch LMLM l n g p 4,69 l n - Ngu n g c gi ng khơng rõ ràng: Có liên quan làm tăng nguy lây lan phát sinh d ch LMLM l n lên 3,52 l n - Các h chăn nuôi l n không s d ng thu c sát trùng đ VSTð đ nh kỳ: Có liên quan làm tăng nguy phát sinh lây lan d ch LMLM l n g p 2,71 l n - S d ng nư c ao h cơng c ng đ chăn ni th i gian có d ch: Có liên quan làm tăng nguy phát sinh lây lan d ch LMLM g p 4,99 l n - Bán ch y l n th i gian có d ch: Có liên quan làm tăng nguy phát sinh lây lan d ch LMLM l n t i Tĩnh Gia năm 2013 g p 3,15 l n ð ngh ð ch ñ ng phòng, ch ng ngăn ch n nguy tái bùng phát tr l i d ch LMLM l n x y t i Tĩnh Gia nói riêng t nh Thanh Hố nói chung, đ ngh : - Tăng cư ng tác giám sát, báo cáo d ch b nh đ n t n thơn, xóm - Tăng cư ng cơng tác ki m d ch đ ng v t, ki m sốt gi t m ñ a bàn ð c bi t công tác ki m tra giám sát nh p l n gi ng v ni t i đ a phương cơng tác ki m sốt gi t m - Tri n khai th c hi n nghiêm túc bi n pháp phòng tránh y u t nguy ñã xác ñ nh ñư c: + Không s d ng nư c ao h công c ng đ chăn ni, ngu n nư c u ng s d ng ph i ñ m b o v sinh thú y, thư ng xuyên v sinh gi i, phun thu c tiêu ñ c kh trùng ñ nh kỳ khu v c chăn nuôi, không bán ch y l n m c b nh LMLM 72 + Nh ng h chăn ni l n g n đư ng giao thơng chính, ch bn bán đ ng v t s n ph m ñ ng v t c n có nh ng bi n pháp phịng ch ng b nh t t: có hàng rào b o v , chu ng tr i ñư c che ch n, cách ly v i bên ngoài, + Khi ch n gi ng ph i ñ m b o rõ ngu n g c, ñ t ch t lư ng ñư c nh p t nh ng s uy tín, b o đ m đư c tiêm phịng đ y đ lo i vacxin c a b nh truy n nhi m nguy hi m khác, có gi y ch ng nh n ki m d ch v n chuy n ñ ng v t + H n ch ngư i l , khách tham quan, nh t lái buôn vào chu ng tr i q trình chăn ni, đ c bi t có d ch x y ñ b o ñ m an toàn d ch b nh cho ñàn l n c a m i h chăn ni + Tun truy n, v n đ ng ngư i chăn nuôi l n t ng thôn ký cam k t th c hi n không: Không gi u d ch; Không mua gia súc b nh, s n ph m gia súc b nh; không bán ch y gia súc b nh; không th rông, không t v n chuy n gia súc b m c b nh LMLM kh i vùng d ch; không v t xác gia súc nghi b nh LMLM b a bãi 73 TÀI LI U THAM KH O I Tài li u ti ng Vi t Lê Thanh An, Tr n Qu c S u, Tr n Anh Châu (2012) "Y u t nguy c a b nh l m m long móng gia súc t i m t s xã có d ch t i t nh Th a Thiên Hu " Khoa h c k thu t Thú y, XIX: 97-99 Tr n H u C n (1996) "Nghiên c u ñ c ñi m d ch t b nh L m m long móng Trâu Bị Vi t Nam xác đ nh bi n pháp phịng ch ng" Lu n án Phó Ti n s Nông nghi p Nguy n Ti n Dũng (2000) "B nh L m m long móng" T p chí KHKT Thú y, VII: 8-16 ðào Tr ng ð t (2000) "ð góp ph n vào vi c ñ u tranh phòng ch ng b nh LMLM" Khoa h c k thu t Thú y, VII: 6-7 Lê Minh Hà (2000) “ B nh lý d ch t h c b nh l m m long móng” T p chí KHKT Thú y, 3: 43-47 Nguy n Bá Hiên, Huỳnh Th M L , Lê Văn Lãnh, ð Ng c Thúy (2012) “B nh truy n nhi m Thú y” NXB Nông Nghi p Hà N i, 111 Chi c c Thú y Thanh Hóa (2012) “T ng k t công tác Thú y năm 2012 gi i pháp ch y u năm 2013” Chi c c Thú y Thanh Hoá (2014) “Báo cáo t ng k t công tác Thú y năm 2013 nhi m v , gi i pháp ch y u năm 2014” Nguy n Văn Hưng, Nguy n Vi t Không, Trương Văn Dung, Tr n Văn Châu (2009) "Nghiên c u s phân b lưu hành c a virus LMLM vùng duyên h i mi n Trung" Khoa h c k thu t Thú y, XVI: 9-12 Văn ðăng Kỳ (2008) "M t s ñ c ñi m b nh L m m long móng bi n pháp phịng ch ng" T p chí KHKT Thú y, 7: 63-69 Ngô Thanh Long (2013) "Báo cáo h i ngh phịng ch ng L m m long móng t i Ngh An ngày 22 tháng 11 năm 2013" Nguy n Hoa Lý, Tô Liên Thu (2009) "Thu c kh trùng tiêu đ c dùng chăn ni thú y bi n pháp s d ng" Khoa h c k thu t Thú y, XVI: 82-93 Phòng d ch t (2013) "Báo cáo t ng k t công tác phòng ch ng d ch b nh gia súc, gia c m năm 2013 phương hư ng năm 2014" C c Thú y Nguy n Vĩnh Phư c (1978) "Giáo trình b nh truy n nhi m gia súc" NXB Nông nghi p Hà N i: 185-203 74 Nguy n Như Thanh (2001) "Giáo trình Vi sinh v t ñ i cương" NXB Nông nghi p Hà N i Nguy n Như Thanh, Nguy n Bá Hiên Tr n Th Lan Hương (2001) "Giáo trình Vi sinh v t Thú y" NXB Nông nghi p Hà N i: 254-259 Tô Long Thành (2000) “Cơ s phân l virus l m m long móng” T p chí KHKT Thú y, VII: 17-21 Tô Long Thành, Nguy n Th Nguy t, Lê Văn Phan Trương Văn Dung (2005) "Phân l p virus L m m long móng t d ch t i t nh Qu ng Tr " T p chí KHKT Thú y, 11: 15-21 Tơ Long Thành, Bùi Quang Anh, Hoàng Văn Năm, ð ng M nh Hồ, Ngơ Thanh Long, Nguy n Thu Hà (2006) “K t qu ch n đốn b nh, giám sát s lưu hành c a virut l a ch n vacxin phòng ch ng b nh l m m long móng c a c c thú y (1985- 2006)" T p chí Khoa h c k thu t thú y, 3: 70-74 Nguy n Thu Th y, Nguy n Văn Long, Phan Quang Minh, Nguy n Bá Hiên Hồng ð o Ph n (2013) "ð c m d ch t không gian th i gian c a d ch l m m long móng t i Vi t Nam, giai ño n 2006-2012" Khoa h c k thu t Thú y, VI: 1-10 Nguy n Thu Th y, Nguy n Văn Long, Phan Quang Minh, Tr n Th Thu Phương, Nguy n Quang Anh, Nguy n Ng c Ti n, Nguy n ðăng Th , Ngơ Thanh Long, Hiên NB (2014) "M c đ lưu hành virus LMLM y u t nguy t i m t s t nh tr ng ñi m t tháng 10 ñ n tháng 12 năm 2012" T p chí Khoa h c Phát tri n, XII: 345-353 C c Thú y (2013) "Báo cáo H i ngh phòng ch ng LMLM năm 2013" II Tài li u nư c B W J Mahy (Ed.) (2005) "Foot-and-Mouth Disease Virus" Springer-Verlag: 28-35 Callens M (1997) "Differentiation of the seven serotypes of foot-andmouth disease virus by reverse transcriptase polymerase chain reaction" J Virol Methods, 67: 35-44 Callis J J and Kercher P.D (1986) ”Foot and mouth disease, Disease of Swine” Sixth Edition IOWA State University press Ames Iowa, USA Dohoo I.R (2003) "Veterinary epidemiologic research" University of Prince Edward Island: 499-518 75 Domingo H,Baranowski E,Escarmis C,and Sobrino F (2002) "Foot - and - mouth disease virus" Comparative Immunology, Microbiology and Infectious Diseases, 25: 297-308 Eble.P.L (2007) "Serological and mucosal immune responses after vaccination and infection with FMDV in pigs" Epub, 25 EUFMD (2013) "Global Foot-and-Mouth Disease Situation - June, 2013" Hyattsville M.D (1991) “ Foot and mouth disease Emergency disease guideline” Animal and Plant Health Inspection Service United States Department of Agriculture Nguyen Van Long (2013) "The Epidemiology of Avian Influenza in the Mekong River Delta of Viet Nam" Animal and Biomedical Sciences: 224 Phan.L.V.Tung,N.Lee.K.N,Ko.Y.J,Lee.H.S,Van.C.N,Thuy.D.M,Thi.H.D,Kim.S.M,Cho I.S,and Park.J.H (2010b) "Heterogenneity and genetic variations of serotypes O and Asia foot-and-mouth disease viruses isolated in Vietnam" Veterinary Microbiology: 220-229 Riemann H (2008) "The epidemiology of FMD Potential impact of foot and muoth disease in California" University California Issuses center: 7-12 Taylo D.J (1986) “ Foot and Mouth Disease” Pig Disease - 4th Edition, Burlington Press, Glasgow, Scotland 76 PH L C 1: M T S HÌNH NH B NH LMLM L N TRÊN ð A BÀN HUY N TĨNH GIA, T NH THANH HÓA 77 PH L C 2: QUY TRÌNH HỒN NGUN VÀ GI NGUN LI U C A PH N NG ELISA TRONG XÁC ð NH TYPE VIRUS LMLM TRÊN ð A BÀN HUY N T NH GIA, T NH THANH HÓA 2.1 Gi kháng th b t b y-(Trapping Antibody Stocks) Hoàn nguyên rabbit antiserum c a virus LMLM serotype O, A, C Asia d ng đơng khơ v i 0,5ml dung d ch Diluen ñư c cung c p s n b kít T t c rabbit antiserum có th pha lỗng 1/1000 coating buffer s d ng Gi nhi t ñ +1 ñ n +8oC Nên chi t nh nguyên li u thành nhi u ng nh đ tránh đơng rã nhi u l n 2.2 Gi kháng th phát hi n-(Detecting antiserum Guinea Pig Stocks) Hoàn nguyên guinea pig antiserum c a virus LMLM serotype O, A, C Asia d ng đơng khơ v i 0,5ml dung d ch Diluen đư c cung c p s n b kít T t c Guinea pig antiserum có th pha loãng 1/100 Buffer B s d ng Gi nhi t ñ +1 ñ n +8oC Nên chi t nh nguyên li u thành nhi u ng nh ñ tránh đơng rã nhi u l n 2.3 Gi Conjugate Hồn ngun Conjugate d ng đơng khơ v i 1ml dung d ch Diluent ñư c cung c p s n b kít Nguyên li u pha loãng 1/200 Buffer B s d ng Gi nhi t ñ âm -30oC ñ n -5oC Nên chi t nh nguyên li u thành nhi u ng nh ñ tránh ñông rã nhi u l n 2.4 Gi Antigen Hoàn nguyên Antigen serotype O, A, C Asia d ng đơng khơ v i ml dung d ch Diluen ñư c cung c p s n b kít Gi Antigen nhi t đ âm -30oC ñ n -5oC Nên chi t nh nguyên li u thành nhi u ng nh đ tránh đơng rã nhi u l n 78 2.5 Dung d ch ñ m cho ch t phát màu (Chromogen Buffer) Phosphate-Citrate Buffer pH 5,0; pha viên 100ml nư c kh ion/nư c c t hai l n ñ t o thành dung d ch 0,05M phosphate citrate buffer v i pH ñ t ñư c 5,0 (pH 5,0) Gi nhi t đ +1 đ n +8oC khơng q m t tu n 2.6 Ch t phát màu (Chromogen) Viên OPD (30mg), m t viên có th pha v i 50ml c a Phosphate-Citrate Buffer pH 5,0 Gi nhi t ñ âm -5oC ñ n -30oC, l nâu ñ tránh ánh sáng Gi không 1-2 tháng Nên chi t nh nguyên li u thành nhi u l nh ñ tránh ñông rã nhi u l n 2.7 Gi ho t ch t (Substrate) H2O2 d ng viên Pha loãng m t viên hydrogen peroxide (H2O2 ) d ng viên v i 10ml nư c kh ion vô trùng t o thành dung d ch hydrogen peroxide H2O2 3% Gi nhi t o ñ +1 ñ n +8 C t i Nên chi t nh nguyên li u thành nhi u ng nh đ tránh đơng rã nhi u l n 2.8 Dung d ch ñ m dùng ñ ph ñĩa (Coating Buffer) 0,05 M Carbonate/bicarbonate pH 9,6 ± 0,05 Pha m t viên 100 ml nư c c t l n ho c nư c kh ion Dán nhãn gi +1 ñ n +8oC không tu n 2.9 Dung d ch pha m u ( Sample Buffer) 0,04 M Phosphate Buffer Saline (PBS), pH 7,4 ± 0,02 Pha m t viên PBS 50 ml nư c kh ion ho c nư c c t l n Dán nhãn gi +1 đ n 80C khơng q hai tu n Nên chia nh kho ng 25 ml gi 300C ñ n -50C 2.10 Dung d ch Buffer A (dùng pha lỗng Antigen) 0,01 M c a PBS đ t pH 7,4 ± 0,20 c ng v i 0,05% Tween 20 Ví d : Pha viên PBS m t lít nư c c t l n ho c nư c kh ion Cho vào 500uL c a Tween 20 đ n lít dung d ch đ m PBS, sau l c đ u Dán nhãn gi nhi t đ +1 đ n +8oC khơng q tu n 79 2.11 Dung d ch Buffer B (dùng pha loãng Guinea pig Conjugate) 0,01M c a PBS pH 7,4± 0,20; c ng 0,05% Tween 20; c ng 5% s a Skim milk 2.12 Nư c r a (Wash Buffer) 0,002 M c a PBS pH 7,4± 0,20 Ví d : Pha viên PBS lít nư c c t l n ho c nư c kh ion Dán nhãn gi nhi t đ phịng khơng q tu n 2.13 Dung d ch kh trùng 0,2% Acid Citric Pha 2g acid citric m t lít nư c kh khống ho c nư c c t hai l n Dán nhãn gi nhi t đ phịng 2.14 Dung d ch d ng ph n ng (Stopping Solution) 1,25M Sulphuric Acid Ví d : L y 68 ml c a sulphuric acid n ng ñ ñ m ñ c (18 Mol) pha 932 ml nư c c t l n ho c nư c kh ion Dán nhãn gi nhi t đ phịng Lưu ý: Cho t ng gi t acid vào nư c không bao gi làm ngư c l i 80 PH L C 3: PHI U ðI U TRA C NG HOÀ Xà H I CH NGHĨA VI T NAM ð c l p - T - H nh phúc PHI U ðI U TRA D CH LMLM Ngày ñi ñi u tra:……………………………………………………………… Cán b ñi u tra:……………………………………………………………… Tên ch h ho c ch s :………………………………………………… Huy n:……………………Xã……………………………………………… Thơn, xóm…………………………………………………………………… T ng ñàn l n:……………………………………………………… Có d ch LMLM: Có d ch □ Khơng có d ch S lư ng l n □ d ch LMLM năm 2013: T ng s :……………………………………………………………………… M c b nh:…………………………………………………………………… Các tri u ch ng l n m: S t cao □ rũ, ăn □ Ch y nư c b t tr ng □ Có m n nư c quanh mi ng, vành mũi □ Có n t loét □ vành móng chân Con v t l i khó khăn □ Móng b long □ Lo i hình chăn ni: H gia đình □ Gia tr i □ Trang tr i □ Khác (ghi rõ n u có):………………………………………………………… 81 M c đích ni: Ni làm gi ng □; Nuôi gi t th t □ Ngu n gi ng: T s n xu t □ Mua N u mua nơi khác, ghi rõ nơi khác □ ñâu:…………………………………………… Ngu n nư c u ng c a gia súc: Nư c máy □; Nư c gi ng □; Nư c ao h □ Ngu n th c ăn: Th c ăn cơng nghi p: có □ khơng □ Th c ăn t nhiên: có □ không □ Th c ăn t n d ng, th c ăn th a: có □ khơng □ ðư ng giao thơng chính: có □ khơng □ Ch : có □ không □ Cơ s gi t m gia súc: có □ khơng □ Ao h cơng c ng: □ Sơng, kênh, r ch: □ 10 ð a m chăn ni g n: 11 Trong vịng tu n trư c x y d ch LMLM năm 2013 có đ n thăm chu ng l n khơng: Có □ Khơng □ 12 Gia súc c a gia ch có thư ng xuyên ti p xúc v i đ ng v t khác: Có □ Khơng □ N u có ghi rõ đ ng v t gì:……………………………………………… 13 Chu ng tr i đư c v sinh kh trùng thư ng xun: Có □ Khơng □ 14 C u trúc chu ng nuôi: Kiên c □; 15 Phân, ch t th i có Có Xi măng □; V t li u khác □ b ng nhi t sinh h c ho c b biogas không: □ Không 82 □ 16 ðàn l n có đư c tiêm phòng vacxin LMLM trư c x y d ch LMLM năm 2013 hay khơng: Có □ Khơng □ 17 ðàn l n có đư c tiêm phịng vacxin b nh truy n nhi m khác trư c x y d ch LMLM năm 2012 hay khơng: Có □ Khơng □ N u có, ghi rõ vacxin b nh gì:……………………………………………… 18 Các bi n pháp x lý có d ch LMLM: Gi gia súc m ñ ñi u tr □ Bán ch y gia súc m □ M th t gia súc m ñ ăn th t □ Báo cho thú y s □ Ch ký cán b ñi u tra Ch ký cán b thú y Ch ký c a ch h s chăn nuôi ð ng Văn Hi p 83 ... t phát t nhu c u th c ti n trên, ti n hành th c hi n ñ tài: ? ?Xác ñ nh type virus gây b nh l m m long móng (LMLM) l n Nghiên c u m t s y u t nguy nh hư ng đ n q trình phát sinh lây lan b nh LMLM. .. ch LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia t nh Thanh Hóa năm 2013 30 2.2.2 Xác ñ nh type virus gây b nh LMLM l n ñ a bàn huy n Tĩnh Gia năm 2013 30 2.2.3 ðánh giá y u t nguy làm phát. .. hình b nh LMLM l n đ a bàn huy n Tĩnh Gia, t nh Thanh Hóa năm 2013 - Ch n đốn, đ nh type virus LMLM ñ a bàn xã: H i Ninh, Tân Dân c a huy n Tĩnh Gia năm 2013 - ðánh giá y u t nguy gây b nh LMLM t