Đái tháo đường (ĐTĐ) bệnh rối loạn trao đổi chất với biểu hiện chung nhất là chứng tăng đường huyết. Hiện nay ĐTĐ là 1 trong 4 bệnh mãn tính đang có tốc độ phát triển nhanh trên toàn thế giới đó là: ĐTĐ, bệnh tim mạch, bệnh phổi và bệnh ung thư chiếm 50% tỷ lệ tử vong trên toàn cầu. ĐTĐ không chỉ mang tính chất của một bệnh mãn tính mà còn kèm theo những biến chứng đa dạng và nguy hiểm như: chủ yếu là ở các mạch máu lớn gây bệnh mạch vành, tai biến mạch máu não, bệnh mạch máu ngoại biên, ở các mạch máu nhỏ là bệnh võng mạc, bệnh thận và bệnh biến chứng về thần kinh 4. WHO cho thấy hiện nay trên thế giới có khoảng 221 triệu người mắc bệnh ĐTĐ và số này tiếp tục tăng lên. Năm 2025 sẽ lên tới 330 triệu người (gần 6% dân số toàn cầu). Tỷ lệ bệnh tăng lên ở các nước phát triển là 42%, nhưng ở các nước đang phát triển (như Việt Nam) sẽ là 170%. Hiện nay, y học hiện đại cũng đã có nhiều loại thuốc chữa bệnh ĐTĐ có hiệu quả: insulin, sulfonylure, biguanides, thyazolidinediones…Tuy nhiên các loại thuốc này đều gây ra các tác dụng phụ và chi phí để chữa trị rất tốn kém đặc biệt là ở những nước đang phát triển. Như vậy đòi hỏi một hướng đi mới trong việc nghiên cứu và điều trị bệnh với nguồn nguyên liệu phong phú, giá cả lại hợp lý 8. Trước khi có các loại thuốc hữu hiệu như ngày nay, ông cha đã biết dùng các loại cây cỏ để điều trị ĐTĐ mà hiện nay dân gian vẫn hay dùng: cây khổ qua, lá vối,.. nhưng chỉ trong số ít được đánh giá về mặt khoa học và y học. Chính vì vậy nghiên cứu các loại loại cây cỏ có tác dụng chữa bệnh càng phải được quan tâm và chú trọng nhiều hơn. Từ những thực tế trên, nhằm góp phần tìm kiếm và nghiên cứu thuốc điều trị ĐTĐ, chúng tôi tiến hành đề tài mang tên: “Nghiên cứu khả năng hạ đường huyết và xác định cấu trúc hợp chất của cao chiết lá chè đắng Ilex kaushe S.Y.Hu”.
Khóa luận tốt nghiệp MỞ ĐẦU Đái tháo đường (ĐTĐ) bệnh rối loạn trao đổi chất với biểu hiện chung nhất là chứng tăng đường huyết. Hiện nay ĐTĐ là 1 trong 4 bệnh mãn tính đang có tốc độ phát triển nhanh trên toàn thế giới đó là: ĐTĐ, bệnh tim mạch, bệnh phổi và bệnh ung thư chiếm 50% tỷ lệ tử vong trên toàn cầu. ĐTĐ không chỉ mang tính chất của một bệnh mãn tính mà còn kèm theo những biến chứng đa dạng và nguy hiểm như: chủ yếu là ở các mạch máu lớn gây bệnh mạch vành, tai biến mạch máu não, bệnh mạch máu ngoại biên, ở các mạch máu nhỏ là bệnh võng mạc, bệnh thận và bệnh biến chứng về thần kinh [4]. WHO cho thấy hiện nay trên thế giới có khoảng 221 triệu người mắc bệnh ĐTĐ và số này tiếp tục tăng lên. Năm 2025 sẽ lên tới 330 triệu người (gần 6% dân số toàn cầu). Tỷ lệ bệnh tăng lên ở các nước phát triển là 42%, nhưng ở các nước đang phát triển (như Việt Nam) sẽ là 170%. Hiện nay, y học hiện đại cũng đã có nhiều loại thuốc chữa bệnh ĐTĐ có hiệu quả: insulin, sulfonylure, biguanides, thyazolidinediones…Tuy nhiên các loại thuốc này đều gây ra các tác dụng phụ và chi phí để chữa trị rất tốn kém đặc biệt là ở những nước đang phát triển. Như vậy đòi hỏi một hướng đi mới trong việc nghiên cứu và điều trị bệnh với nguồn nguyên liệu phong phú, giá cả lại hợp lý [8]. Trước khi có các loại thuốc hữu hiệu như ngày nay, ông cha đã biết dùng các loại cây cỏ để điều trị ĐTĐ mà hiện nay dân gian vẫn hay dùng: cây khổ qua, lá vối, nhưng chỉ trong số ít được đánh giá về mặt khoa học và y học. Chính vì vậy nghiên cứu các loại loại cây cỏ có tác dụng chữa bệnh càng phải được quan tâm và chú trọng nhiều hơn. Từ những thực tế trên, nhằm góp phần tìm kiếm và nghiên cứu thuốc điều trị ĐTĐ, chúng tôi tiến hành đề tài mang tên: “Nghiên cứu khả năng hạ đường huyết và xác định cấu trúc hợp chất của cao chiết lá chè đắng- Ilex kaushe S.Y.Hu”. 1 Hoàng Thị Chang- K52B Công nghệ Sinh học Khóa luận tốt nghiệp Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. BỆNH ĐÁI THÁO ĐƯỜNG 1.1.1. Vài nét về bệnh đái tháo đường Đái tháo đường là tình trạng rối loạn chuyển hóa glucid gây tăng glucose huyết mãn tính… Đây là hậu quả của thiếu hụt bài tiết insulin hoặc hoạt động kém hiệu quả của insulin hoặc phối hợp cả hai. Kèm theo rối loạn chuyển hóa protid và lipid. Tình hình đái tháo đường trên thế giới và Việt Nam: - Tại Việt Nam, trong 4 thành phố lớn Hà Nội, Huế, Thành phố Hồ Chí Minh, Hải Phòng, tỷ lệ bệnh ĐTĐ là 4%, riêng quận Hoàn Kiếm (Hà Nội) lên tới 7%. Phần lớn người bệnh phát hiện và điều trị muộn, hệ thống dự phòng, phát hiện bệnh sớm nhưng chưa hoàn thiện. Vì vậy, mỗi năm có trên 70% bệnh nhân không được phát hiện và điều trị. Tỷ lệ mang bệnh ĐTĐ ở lứa tuổi 30-64 là 2,7%, vùng đồng bằng, ven biển. Nguyên nhân chính khiến bệnh ĐTĐ gia tăng ở Việt Nam là do nhận thức cộng đồng về phòng bệnh thấp, tỷ lệ bệnh không được phát hiện cao, cán bộ và cơ sở vật chất để theo dõi và điều trị còn rất hạn chế. - Hiện trên thế giới ước lượng có hơn 190 triệu người mắc bệnh tiểu đường và số này tiếp tục tăng lên. Ước tính năm 2010, trên thế giới có 221 triệu người mắc bệnh tiểu đường. Bệnh ĐTĐ có di truyền nhưng với tần suất tương đối nhỏ. Ví dụ: con của những người ĐTĐ typ 1 có khả năng mắc bệnh là 5-6%. ĐTĐ týp 2 có tính chất gia đình. Khả năng mắc bệnh của cặp sinh đôi cùng trứng là 60- 100%. Nguy cơ bị mắc ĐTĐ của bố mẹ bệnh nhân đã được chẩn đoán ĐTĐ typ 2 là 40%, tuy vậy để ngăn chặn bệnh phát triển cần tránh bị béo phì và lối sống tĩnh tại. Hai yếu tố này ta có thể điều chỉnh được [4]. 2 Hoàng Thị Chang- K52B Công nghệ Sinh học Khóa luận tốt nghiệp 1.1.2. Triệu chứng lâm sàng và cận lâm sàng a. Triệu chứng lâm sàng Triệu chứng lâm sàng của bệnh đái tháo đường điển hình bao gồm: đái nhiều, uống nhiều, sút cân, mờ mắt, đôi khi ăn nhiều chóng đói thường gặp ở bệnh nhân mắc đái tháo đường trẻ tuổi ( týp 1). Triệu chứng lâm sàng xuất hiện khi glucose huyết tăng cao vì vậy vấn đề chuẩn đoán không khó khăn và thường quá muộn với nhiều biến chứng. Nhiều trường hợp phát hiện đái tháo đường do tình cờ khám sức khỏe định kỳ hoặc vào viện vì lý do khác: tai biến mạch máu não, nhồi máu cơ tim, tăng huyết áp, chấn thương, đục thủy tinh thể… Nhiều trường hợp đến muộn, các triệu chứng lâm sàng không điển hình trong khi đó nổi bật các triệu chứng của các biến chứng nặng nề: biến chứng tim mạch, bệnh lý thần kinh ngoại vi, nhiễm trùng, biến chứng chuyển hóa… Ngày nay nhờ tiêu chuẩn chuẩn đoán đái tháo đường đã hạ thấp mức glucose huyết xuống còn 126mg/dl vì vậy triệu chứng lâm sàng của bệnh ít được quan tâm khai thác [10]. b. Xét nghiệm cận lâm sàng - Glucose huyết: glucose huyết >126mg/dl lúc đói đã nhịn ăn 8-10 giờ và làm 2 lần liên tiếp được chuẩn đoán là đái tháo đường. Glucose niệu: ít có giá trị chẩn đoán. - HbA1c (trong hồng cầu ở máu có chất vận chuyển oxy gọi là hemoglobin (Hb), chất này có đặc tính kết hợp tự nhiên với đường glucose một cách bền vững, khi đó gọi là HbA1c): bình thường < 6,4%. - Mỡ máu: cholesterol, triglycerid, HDL (high density lipoprotein- cholesterol có tỷ trọng cao), LDL (low density lipoprotein- cholesterol có tỷ trọng thấp) thường tăng. - Định lượng insulin: bình thường hoặc tăng trong đái tháo đường typ 2. Giảm trong đái tháo đường týp 1. 3 Hoàng Thị Chang- K52B Công nghệ Sinh học Khóa luận tốt nghiệp - ICA (Islet Cell Antibodies), GAD (Glutamic Acid Decarboxylase) (+) trong đái tháo đường týp 1. Xét nghiệm khác: - Soi đáy mắt phát hiện tổn thương võng mạc do đái tháo đường. - Điện cơ: phát hiện tổn thương thần kinh ngoại vi do đái tháo đường. - Chụp XQ phổi: phát hiện sớm lao phổi không triệu chứng. - Siêu âm Doppler màu động mạch cảnh, chi dưới mạch lớn…phát hiện mảng xơ vữa. - Điện tim, nghiệm pháp gắng sức: phát hiện sớm suy vành. - Siêu âm tụy: phát hiện sỏi – xơ tụy. - Tổng phân tích nước tiểu: tìm thể ceton, protein niệu, tế bào niệu - Microoalbumin niệu: bình thường < 20µg/ phút [9]. 1.1.3. Chẩn đoán Tiêu chuẩn chẩn đoán: WHO 2001 - Chẩn đoán xác định ĐTĐ ( bệnh nhân nhịn đói ít nhất 8 giờ) khi có một trong các tiêu chuẩn sau: + Đường máu huyết tương >126 mg/dl (>7mmol) hoặc đường máu bất kỳ >200 mg/ml (>11.1mmol.l). - Chẩn đoán rối loạn dung nạp glucose: (Uống 75 gr đường trong 250 ml nước trong vòng 5 phút) [13]. Bảng 1. Tiêu chí chẩn đoán rối loạn dung nạp glucose 1.1.4. Phân loại đái tháo đường Đái tháo đường thường được phân ra làm 2 loại chủ yếu: 4 Hoàng Thị Chang- K52B Công nghệ Sinh học Thời điểm Đường máu mao mạch Đường máu huyết tương Lúc đói < 6,1 mmol/l > 7,8 mmol/l Sau 2h < 7 mmol/l > 7,8 mmol/l Khóa luận tốt nghiệp - Đái tháo đường týp 1 hay còn gọi là đái tháo đường gầy, thường xảy ra ở người trẻ. Ở loại này, sự bài tiết insulin bị tiêu hủy do sự phá hủy tự miễn tế bào β của đảo tụy Langerhans, nơi tiết insulin. - Đái tháo đường týp 2 hay còn gọi là đái tháo đường béo, thường gặp ở người nhiều tuổi hơn. Ở loại này, insulin được bài tiết bình thường, lưu thông trong máu nhưng không có tác dụng do có quan hệ chặt chẽ với tính kháng insulin ở cơ quan đích. Ngoài ra còn có những dạng ít gặp hơn: - Đái tháo đường do thái nghén: đái tháo đường khởi phát trong khi mang thai. - Đái tháo đường thứ phát ở một số bệnh (bệnh lý tụy ngoại tiết hoặc phụ thuộc những hormon khác với insulin), những đái tháo đường gây ra do điều trị, đái tháo đường liên quan đến dinh dưỡng. - Cũng có những trường hợp dung nạp không hoàn toàn glucose, tình trạng trên có thể được coi là tình trạng tiền đái tháo đường [10]. a. Đái tháo đường typ 1. Ở ĐTĐ týp 1, tuyến tụy của bệnh nhân hầu như hoặc không có khả năng sản sinh ra insulin- một loại hormon nhằm giúp chuyển hóa đường trong máu thành năng lượng trong các tế bào. Nguyên nhân là do hệ miễn dịch tự hủy hoại các tế bào β trong tuyến tụy có nhiệm vụ sản sinh ra insulin. Tác nhân kích thích để cho hệ miễn dịch tấn công tế bào β vẫn chưa biết rõ. Bởi vậy, trước đây còn gọi ĐTĐ týp 1 là bệnh tự miễn. Bệnh chiếm khoảng 10- 20% các trường hợp ĐTĐ. Bệnh nhân mắc bệnh ĐTĐ týp 1 buộc phải tiêm insulin hằng ngày. Để hạ đường máu, ngoài tiêm insulin người bệnh còn phải điều chỉnh và phối hợp thuốc theo chế độ ăn và hoạt động thể lực. Hạ glucose huyết là nguy cơ tiềm ẩn, đe dọa tính mạng của người bệnh ĐTĐ týp 1. Do đó, chiến lược dự phòng nhằm tác động vào các giai đoạn sớm nhằm ngăn chặn sự diễn tiến của bệnh được xem như là phương thức tốt nhất giúp hạn chế những tổn thương nặng nề về tinh thần và vật chất cho mỗi cá nhân và cho toàn xã hội [6]. 5 Hoàng Thị Chang- K52B Công nghệ Sinh học Khóa luận tốt nghiệp b. Đái tháo đường týp 2 Cơ chế bệnh sinh của đái tháo đường týp 2 chủ yếu là kháng insulin và rối loạn bài tiết insulin, cả hai quá trình này tương trợ nhau suy kiệt tế bào β: - Rối loạn bài tiết insulin: rối loạn sản xuất insulin cả về chất lượng và số lượng. + Mất pha sớm: rối loạn nhịp tiết. + Bất thường về số lượng insulin: ban đầu là đa tiết insulin suy kiệt giảm tiết. + Bất thường về chất lượng insulin: tăng Proinsulin trong máu. - Kháng insulin: + Kháng insulin ở cơ: không tổng hợp được glycogen ở cơ, chuyển hóa glucose ở cơ kém. Rối loạn quá trình oxy hóa glucose trong tế bào cơ + Giảm chuyển GLUT4 từ trong tế bào tương ra màng tế bào để vận chuyển glucose dưới tác dụng của insulin. + Giảm Phosphoryl hóa để chuyển glucose thành G 6 P ở cơ. - Kháng insulin ở gan: + Tăng glucagon dẫn đến tăng tạo glucose từ glycogen + Tăng hoạt tính enzyme phosphoethanol- pyruvat- carboxykinase dẫn đến tăng tạo glucose mới ở gan. + Giảm số lượng receptor ở các tổ chức phụ thuộc insulin [11]. 1.1.5. Biến chứng bệnh đái tháo đường Bệnh ĐTĐ có nhiều biến chứng ở tất cả các cơ quan trong cơ thể; chủ yếu là biến chứng thần kinh. Biến chứng thần kinh trong bệnh đái tháo đường được chia thành các nhóm tổn thương sau: - Biến chứng thần kinh ngoại vi: Thường xuất hiện sớm cùng với tình trạng tiến triển của bệnh. Tổn thương chủ yếu ở chi trên và chi dưới, bao gồm các triệu chứng: đau cơ, cảm giác tê bì, kiến bò, kim châm; nóng bỏng hay tê lạnh, thậm chí rát bỏng ở đầu ngón tay, ngón chân. Đau hay tê tự phát xảy ra vào ban đêm, không có chu kỳ, không khu trú ở một chỗ. Điều đặc biệt là đau cả lúc nghỉ ngơi, nhưng lại giảm đi khi vận động. Đây là dấu hiệu phân biệt với tổn thương các mạch máu ở chi dưới trong bệnh đái tháo đường. - Khi tổn thương thần kinh ngoại vi nặng do đái tháo đường, bệnh nhân có thể bị teo cơ, liệt nhẹ. Do cảm giác ở bàn chân giảm, mức độ sừng hoá ở 6 Hoàng Thị Chang- K52B Công nghệ Sinh học Khóa luận tốt nghiệp da tăng lên, có thể xuất hiện các ổ loét da giữa các vùng sừng hoá mà người bệnh không biết. - Biến chứng thần kinh vận động: Thường ít gặp hơn và có khả năng hồi phục tốt nếu được điều trị tích cực bệnh đái tháo đường. Trong biến chứng này, các dây thần kinh bị viêm với các biểu hiện: sụp mi mắt (do tổn thương dây thần kinh số 3), lác ngoài (dây thần kinh số 4), liệt mặt (dây thần kinh số 7), mất vận động nhìn ngoài (dây số 6), điếc (dây số 8). Hình 1. Hoại tử ở chân Hình2. Vị trí xuất huyết ở mắt - Biến chứng thần kinh thực vật (nội tạng): Các biến chứng này thường kết hợp với các biến chứng thần kinh ngoại vi, nên được coi là rối loạn thần kinh nội tạng. Có thể gặp: nhịp tim nhanh khi nghỉ, giảm sự tiết mồ hôi, giảm sự co giãn của đồng tử (ảnh hưởng đến việc điều tiết của mắt), giảm trương lực cơ hệ tiêu hoá (gây buồn nôn, nôn hay đầy bụng sau khi ăn, có thể bị táo bón hay tiêu chảy về đêm), giảm co bóp cơ bàng quang (gây ứ đọng nước tiểu), liệt dương hay xuất tinh sớm ở nam giới. Các biến chứng thần kinh nói trên cũng có thể gặp ở một số bệnh lý khác. Nhưng nếu đã bị bệnh đái tháo đường thì bạn nên quan tâm đến việc theo dõi các biến chứng và kiểm soát chặt chẽ lượng đường huyết dưới sự hướng dẫn của bác sĩ chuyên khoa [13]. 1.1.6. Bệnh béo phì a. Vài nét về bệnh béo phì Tổ chức Y tế thế giới định nghĩa béo phì là: tình trạng tích lũy mỡ quá mức và không bình thường tại một vùng cơ thể hay toàn thân đến mức 7 Hoàng Thị Chang- K52B Công nghệ Sinh học Khóa luận tốt nghiệp ảnh hưởng tới sức khỏe. Béo phì là tình trạng sức khỏe có nguyên nhân dinh dưỡng. Thường thường một người trưởng thành khỏe mạnh, dinh dưỡng hợp lý, cân nặng của họ dao động trong giới hạn nhất định. "Cân nặng nên có" của mỗi người thường ở vào độ tuổi 25-30. Hiện nay, Tổ chức y tế thế giới thường dùng chỉ số khối cơ thể (Body Mass Index - BMI) để nhận định tình trạng gầy béo. Người bị béo phì ngoài thân hình phì nộn, nặng nề, khó coi còn có nguy cơ mắc nhiều bệnh như rối loạn lipit máu, tăng huyết áp, sỏi mật, đái tháo đường, xương khớp và ung thư. Một số hình ảnh béo phì: Hình 3. Người bị bệnh béo phì Để có chỉ số khối cơ thể (BMI), người ta dùng công thức sau đây: W = Cân nặng (kg)H = Chiều cao (m). Chỉ số BMI bình thường nên có ở giới hạn 20-25, trên 25 là thừa cân và trên 30 là béo phì. Đó là chỉ số dành cho người châu Âu và châu Mỹ. Đối với người châu Á, BMI bình thường có giới hạn từ 18.5-23. Một điều cần chú ý nữa là vùng chất mỡ tập trung. Mỡ tập trung nhiều quanh vùng eo lưng tạo nên dáng người "quả táo tàu" thường được gọi là béo kiểu "trung tâm", kiểu phần trên hay béo kiểu dáng đàn ông và mỡ tập trung ở phần háng tạo nên vóc người "hình quả lê" hay còn gọi là béo phần thấp hay 8 Hoàng Thị Chang- K52B Công nghệ Sinh học Khóa luận tốt nghiệp kiểu dáng đàn bà. Vì vậy bên cạnh theo dõi chỉ số BMI nên theo dõi thêm tỷ số vòng bụng/vòng mông, khi tỉ số này vượt quá 0,9 ở nam giới và 0,8 ở nữ giới thì các nguy cơ tǎng huyết áp, bệnh tim mạch, bệnh đái đường đều tǎng lên rõ rệt. Béo phì không tốt đối với sức khoẻ. Trước hết, người béo phì dễ mắc các bệnh tǎng huyết áp, bệnh tim mạch do mạch vành, đái đường hay bị các rối loại dạ dày, ruột, sỏi mật [6,11]. b. Mối quan hệ giữa bệnh béo phì và đái tháo đường typ 2 Trong cơ thể người béo phì tồn tại một trạng thái bệnh lý đặc thù gọi là chất đề kháng insulin. Sau khi ăn, một lượng đường khá lớn được hấp thụ vào trong máu thông qua huyết dịch mà tuần hoàn đến mọi nơi trong cơ thể. Nhờ có insulin đường mới đi vào tế bào được cơ thể sử dụng. Lượng đường glucose trong máu được duy trì trong một phạm vi an toàn nhất định cũng nhờ insulin. Sở dĩ insulin có đủ khả năng phát huy tác dụng đó là đầu tiên nó kết hợp với insulin thụ thể ở trên màng tế bào sau đó dẫn dắt một loạt những chất truyền tín hiệu khác trong tế bào, đem thông tin ”có đường” được truyền vào các tầng lớp sâu trong tế bào. Sự trao đổi chất diễn ra trong bản thân tế bào để chuyển hóa đường thành năng lượng. Cơ chế vận chuyển, chuyển hóa glucose ở người béo phì có rất nhiều hạn chế do: - Số lượng insulin thụ thể trên màng tế bào bị giảm sút. - Chức năng của từng thụ thể đơn lẻ cũng bị suy giảm. - Những thụ thể sau khi được insulin kích hoạt chức năng truyền tín hiệu vào sâu bên trong tế bào lại bị tổn thương. - Số lượng phân tử vận chuyển glucose giảm. - Chức năng gan chuyển hóa glucose thành đường nguyên chất để tồn trữ lại không bảo đảm. Với những nguyên nhân trên, chất đề kháng insulin được sản sinh ra, lượng glucose trong máu vì thế rất khó chuyển vào tế bào, đây chính là hiện tượng đề kháng insulin. 9 Hoàng Thị Chang- K52B Công nghệ Sinh học Khóa luận tốt nghiệp Với người béo phì, thời kỳ đầu mới phát béo, chức năng sản xuất insulin còn bình thường nhưng dần dần do sự đề kháng insulin tăng lên làm hiệu quả hoạt động của chất này giảm sút. Để khắc phục hiện tượng này, tuyến tụy hoạt động quá sức dẫn đến chức năng sản sinh ra insulin ở tụy giảm dần, lúc này insulin trong cơ thể sẽ không đủ để duy trì việc chuyển hóa đường trong máu ở mức bình thường nữa. Do vậy đái tháo đường xuất hiện [6]. Hình 4. Béo phì làm tăng mức độ axit béo có thể gây ra bệnh tiểu đường [14] 1.1.7. Điều trị Mục tiêu điều trị: tùy từng người mắc bệnh cụ thể nhưng nhìn chung: - Đưa đường máu về càng gần giá trị bình thường càng tốt. - Phòng tránh và chữa trị những biến chứng có thể có. Để đạt được mục tiêu này cần dựa vào: - Chế độ ăn uống hợp lý. - Tránh lối sống tĩnh tại bằng vận động cơ bắp thích hợp. - Thuốc hạ đường huyết khi cần thiết. a. Chế độ ăn cho người ĐTĐ Mục tiêu dài hạn của chế độ ăn là giữ cân nặng ổn định ở mức lý tưởng. 10 Hoàng Thị Chang- K52B Công nghệ Sinh học Gan Gan tăng giải phóng glucose và triglyxerid Hệ cơ xương Kháng insulin Tăng glucose, rối loạn chuyển hóa mỡ Phá hủy tế bào β Tế bào β của tuyến tụy Sản xuất insulin giảm Tăng axit béo trong máu Mô mỡ nội tạng [...]... thường còn chuột uống cao cồn đường huyết giảm từ 24,2mmol/l xuống còn 8,3mmol/l (đường huyết vẫn còn ở mức tương đối cao so với chuột bình thường) So sánh tác dụng hạ đường huyết giữa cao cồn và cao nước thì cao nước có tác dụng hạ đường huyết tốt hơn Điều này có thể giải thích là do khả năng tách chiết của nước tốt hơn so với cồn, một số hợp chất của lá chè đắng có tác dụng hạ đường huyết tan trong... và hữu hiệu nhất hiện nay được dùng để xác định cấu trúc hóa học của các hợp chất hữu cơ nói chung và hợp chất thiên nhiên nói riêng Với việc sử dụng kết hợp các kỹ thuật phổ NMR một chiều và hai chiều, các nhà nghiên cứu có thể xác định chính xác cấu trúc của các hợp chất, kể cả cấu trúc lập thể của phân tử Nguyên lý chung của các phương pháp NMR (phổ proton và cacbon) là sự cộng hưởng khác nhau của. .. độ đường huyết có xu hướng giảm nhưng không đều ở lô béo tiêm đệm và lô thường tiêm đệm nồng độ đường huyết đã trở về mức bình thường, chỉ có lô béo tiêm STZ là vẫn còn ở mức cao: 22,2 mg/ml ( đường huyết tăng ổn định hơn sau 10 ngày tiêm) 3.3 NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG HẠ ĐƯỜNG HUYẾT CỦA CAO THÔ VÀ CAO PHÂN ĐOẠN TRÊN MÔ HÌNH CHUỘT NHẮT MÔ PHỎNG ĐTĐ TYP 2 3.3.1 Tác dụng của cao nước nóng và cao cồn trên chuột... tương ứng với định lượng glucose trong máu cần định lượng 20 Hoàng Thị Chang- K52B Công nghệ Sinh học Khóa luận tốt nghiệp 2.2.6 Xác định cấu trúc hóa học các hợp chất Cấu trúc hóa học của các hợp chất hữu cơ được xác định dựa vào các phương pháp phổ kết hợp Tùy thuộc vào cấu trúc hóa học của từng hợp chất mà người ta sử dụng những phương pháp phổ cụ thể Cấu trúc càng phức tạp thì yêu cầu phối hợp các phương... dụng hạ glucose huyết của dịch chiết phân đoạn lên chuột ĐTĐ typ 2 Sau khi đã khảo sát chiết mẫu bằng nước nóng và cao cồn ở phần trên chúng tôi nhận thấy chiết bằng nước nóng thu được khối lượng cao nhiều hơn và có tác dụng hạ đường huyết tốt nên chúng tôi quyết định chiết cao tổng bằng nước nóng rồi mới tiến hành chiết phân đoạn Mục đích chiết phân đoạn là xác định phân đoạn có hoạt tính đồng thời xác. .. xác định cấu trúc của hoạt chất có trong phân đoạn đó a Tác dụng hạ đường huyết Sau khi gây được chuột ĐTĐ týp 2 chúng tôi bắt đầu phân lô lại và cho chuột uống dịch chiết, lần lượt đo đường huyết vào lúc 0h, 3 ngày, 7 ngày, 10 ngày, 20 ngày Chúng tôi đã thu được kết quả dưới đây: Bảng 8 Nồng độ glucose huyết của chuột sau khi điều trị bằng dịch chiết phân đoạn T LĐT 0h 3 ngày 7 ngày 10 ngày 20 ngày Cao. .. nghĩa thông kê p< 0,01 KĐT: lô chuột không điều trị, LĐT: lô điều trị, GH: glucose huyết Hình 12 Đồ thị biểu diễn nồng độ glucose huyết của chuột sau điều trị Nhận xét: 30 Hoàng Thị Chang- K52B Công nghệ Sinh học Khóa luận tốt nghiệp - Qua đồ thị ta thấy tác dụng hạ đường huyết của cao cồn và cao nước khá mạnh Sau khi cho uống dịch chiết 20 ngày, đường huyết của chuột uống cao nước giảm từ 23,6 mmol/l... hiện và thu lại ở đầu kia Trong quá trình chạy sắc ký cần chú ý đến tốc độ chảy, thường với tốc độ chảy chậm việc tách chất thường rõ nét hơn [7] Dưới đây là hình minh họa sắc ký cột: Hình 8 Sự di chuyển các chất trong sắc ký cột 2.2.5 Phương pháp định lượng glucose huyết Máu sử dụng để định lượng đường huyết là máu toàn phần lấy từ đuôi chuột Định lượng đường huyết bằng máy đo đường huyết tự động và. .. đoạn dịch chiết lá chè đắng đến khả năng hạ đường huyết cho thấy rằng: với cùng liều điều trị 500mg/kg cao n-hexan có tác dụng mạnh nhất và rõ nhất giảm 69% ( p< 0,01) sau 20 ngày điều trị thì đường huyết của chuột đã trở về mức bình thường, cao choloroform giảm tương đối tốt 57% (p< 0,05), và cao nước giảm 55%, cuối cùng cao ethylaxetat giảm thấp nhất 52% (p< 0,05) Đây là một kết quả khá khả quan trong... dụng hạ đường huyết: Sau khi tiến hành đo nồng độ glucose huyết của chuột sau khi tiêm STZ ta chọn những con chuột có nồng độ glucose huyết cao >20mmol/l chia làm 3 lô: 2 lô cho uống cao thuốc với liều 500mg/kg còn 1 lô không điều trị dùng làm đối chứng Nồng độ glucose huyết được đo ở các thời điểm: 0h, 3 ngày, 7 ngày, 10 ngày, 20 ngày Bảng 6 Nồng độ glucose huyết của chuột sau khi điều trị bằng cao . hành đề tài mang tên: Nghiên cứu khả năng hạ đường huyết và xác định cấu trúc hợp chất của cao chiết lá chè đắng- Ilex kaushe S. Y. Hu . 1 Hoàng Thị Chang- K52B Công nghệ Sinh học Khóa luận tốt. cột 2.2.5. Phương pháp định lượng glucose huyết Máu s dụng để định lượng đường huyết là máu toàn phần l y từ đuôi chuột. Định lượng đường huyết bằng m y đo đường huyết tự động và que thử tương. insulin đường mới đi vào tế bào được cơ thể s dụng. Lượng đường glucose trong máu được duy trì trong một phạm vi an toàn nhất định cũng nhờ insulin. S dĩ insulin có đủ khả năng phát huy tác