chiết xuất glycoside tim

CHIẾT XUẤT HỢP CHẤT CHIẾT XUẤT HỢP CHẤT GLYCOSIDE TIM GLYCOSIDE TIM ĐẠI CƯƠNG Glycoside tim là một nhóm glycoside có cấu trúc steroid, có tác dụng đặc biệt lên tim. Nhưng với liều cao, chúng là những chất gây độc nên từ thời cổ xưa, nhiều dân tộc ở nhiều nước đã biết sử dụng những chất này để tẩm vào tên thuốc độc. Trong cây chúng tồn tại dưới dạng glycoside hòa tan trong các dịch tế bào. Dưới tác dụng của men hoặc acid loãng, các glucoside thủy phân thành genin và đường. Glycoside tim còn được gọi là glycosidedigitalic vì glycoside của lá cây Digitalics được dùng đầu tiên trên lâm sàng để chữa bệnh tim. Glycoside tim tan trong nước và cồn loãng, ít tan trong các dung môi không phân cực. Glycoside tim phân bố trong khoảng 10 họ thực vật, đặc biệt trong 2 học Trúc đào (Apocynaceae) và họ Thiên lý (Asclepiadaceae). CẤU TRÚC HÓA HỌC Glycoside tim cũng như các glycoside khác, cấu trúc hóa học gồm 2 phần: aglycon và phần đường. Phần aglycon cấu tạo bởi một khung steroid. Gắn ở C 17 là vòng lacton. Dựa vào vòng lacton, người ta chia chúng thành 2 nhóm lớn: Cardenoid: vòng lacton 5 cạnh, có một nối đôi. Bufadienolid: vòng lacton 6 cạnh, có 2 nối đôi. HO HO O O O O A B C D Cardenolid Bufadienolid Phần đường được gắn vào C3. Cho đến nay người ta biết khoảng 40 loại đường khác nhau. Ngoài những đường thông thường như glucose, rhamnose, xylose, fucose, còn có những đường là 2,6-desoxy. Sự liên quan giữa cấu trúc hóa học và hoạt tính sinh học của glycoside tim: Liên hệ giữa vòng A/B: đa số glycoside tim có vòng A/B là cis, A/B là trans ít gặp hơn. Vòng A/B có cấu tạo trans thì hoạt tính sinh học giảm hơn so với cis. Cấu tạo vòng lacton: phần quyết định tác dụng lên tim là phần aglycon bao gồm nhân steroid và vòng lacton chưa bão hòa, cả hai phần này đều rất quan trọng. Nếu giữ lại vòng lacton, thay nhân steroid bằng nhân benzen, naphtalen,… thì mất tác dụng. Nếu giữ nguyên nhân steroid mà thay đổi vòng lacton như: bão hòa nối đôi, mở vòng lacton, thay vòng lacton bằng vòng lactam thì tác dụng mất và giảm đi rất nhiều. Sự hấp thu qua dạ dày, tá tràng ruột non phụ thuộc vào số lượng nhóm OH của phần aglycon hay nói cách khác là phụ thuộc vào tính ái dầu của nó. Nhóm OH ở vị trí C 14 rất quan trọng, không có nhóm này thì tác dụng giảm đi rất nhiều. Nhóm OH ở C 3 hướng α thì giảm tác dụng đi nhiều. Qua quá trình chuyển hóa trong cơ thể, OH β ở vị trí C 3 bị epimer hóa sang OH α để thải ra ngoài. Nếu ở dạng aglycon thì hoạt tính của nhóm bufadienolid mạnh hơn dẫn chất cardenolid tương ứng. Đối với phần đường thì tác dụng sinh học của glycoside không những chỉ phụ thuộc vào bản chất của đường mà còn phụ thuộc vào vị trí của phần đường nối vào nhân steroid. Ngoài ra, người ta thấy rằng liều chết khác nhau tùy động vật. Đối với mèo thì liều chết gấp đôi thỏ và khoảng 60 lần chuột cống trắng. Ếch là động vật thích hợp để làm các thí nghiệm các thuốc độc lên tim thì hầu như miễn dịch với các chất này. Thí dụ dịch chiết của hạt Strophanthus kombe đối với mèo và chó thì độc như nhau nhưng digitoxin thì ít độc trên chó hơn là trên mèo. TÍNH CHẤT, ĐỊNH TÍNH VÀ ĐỊNH LƯỢNG 1. Tính chất Glycoside tim là những chất kết tinh, không màu, vị đắng, có năng suất quay cực, tan trong nước, cồn, không tan trong benzen, ether. Những glycoside tim có đường 2-desoxy thì rất dễ bị thủy phân khi đun với acid vô cơ 0,05N trong MeOH 30 phút, trong khi những glycoside khác trong điều kiện đó thì không thủy phân được. [...]... glycoside tim làm đa số ếch trong một lô ếch thí nghiệm bị ngừng tim Thí nghiệm được tiến hành trong những điều kiện quy định Đơn vị mèo (Đ.V.M) là liều tối thiểu của nguyên liệu hay của glycoside tim làm cho tim mèo ngừng đập, tính theo kilogam thể trọng Thí nghiệm được tiến hành trong những điều kiện quy định CHIẾT XUẤT GLYCOSIDE TIM Xử lý nguyên liệu Trong nguyên liệu chứa glycoside tim thường... Các phương pháp chiết xuất để định lượng Các phương pháp định lượng glycoside tim thường dựa vào các phản ứng cho màu và phải qua khâu chiết xuất glycoside toàn phần và loại tối đa các tạp chất khác lẫn vào Công việc ổn định để diệt enzym trước khi chiết là cần thiết Thường người ta hay diệt enzym bằng cách cho tác dụng ngay cồn sôi trên nguyên liệu Nói chung trong các phương pháp chiết xuất đều có giai... DL đã loại mỡ Chiết (H2O, Cồn, MeOH…) (3) Sơ đồ chiết xuất tổng quát của glycosid tim Dịch chiết Thu hồi P↓ Sirô đặc H2O, lọc Dịch lọc Loại tạp (4) Tủa tạp bằng Pb(OH)2, Al(OH)3 Lắc với dung môi Dịch lọc Kết tinh lại (5) Tủa glycoside thô Glycoside tinh khiết Lọc qua chất hấp phụ (Than hoạt, Al2O3, polyamid,…) Thu hồi P↓ Hạt tán nhỏ Loại mỡ bằng xăng, sấy khô Chiết bằng cồn 98o Dịch chiết BM Cắn Hòa... tác giả chiết xuất bằng nước ở 0oC Thông dụng hơn, có thể sử dụng các chất ức chế enzym khác nhau để ngăn cản tác dụng của enzym Các chất dùng là: các muối vô cơ, các chất này có khả năng kết tủa protid làm enzym bị biến tính Thực tế trong việc chiết xuất những glycoside dùng làm thuốc, đôi khi người ta lại không ổn định nguyên liệu trước khi chiết xuất mà lại để cho enzym hoạt động để thu những glycoside. .. những phương pháp thông dụng nhất Loại tạp chất – phân loại glycoside Việc sử dụng hỗn hợp nước - cồn đã hạn chế được một số tạp chất Tuy vậy, trong dịch chiết còn chứa nhiều chất không phải glycoside tim, rất hay gặp trong thực vật Trong hoá thực vật, dù chiết xuất bằng phương pháp nào, không bao giờ thu ngay được một chất tinh khiết Sau khi chiết ra khỏi nguyên liệu, bao giời cũng có một hỗn hợp gồm... Phương pháp chiết glycoside từ thực vật Nguyên liệu sau khi xử lý thường phải loại chất béo, nhựa hoặc chất diệp lục Quá trình này cũng quan trọng và có ảnh hưởng đến hiệu suất glycoside Để lấy glycoside ra khỏi nguyên liệu cần chọn các dung môi thích hợp Việc chọn lựa này dựa vào khả năng hoà tan của các glycoside vào dung môi Về phương pháp, do tính chất dễ thuỷ phân của glycoside tim nên người... trong hỗn hợp aceton-ete (1:1) Tẩy màu bằng than hoạt, lọc Để ở 0oC Tinh thể thevozid Sơ đồ chiết thevosid từ hạt thông thiên Nọc Cóc khô Chiết bằng EtOAc Cắn Dịch chiết Chiết bằng etanol Cắn Bốc hơi Cắn Dịch chiết Bốc hơi Cắn A Cắn Dịch chiết Bốc hơi Tinh chế Cắn B Sắc ký cột Các bufadienolid Các bufadienolid Sơ đồ chiết bufadiennoid từ nọc Cóc khô ... thuốc thử picro-sodic để làm phản ứng màu Phương pháp của Makarevich chiết để chạy sắc ký 2g nguyên liệu khô, loại chất béo bằng ether dầu hỏa Sấy khô ở áp suất kém rồi sau đó chiết nóng bằng EtOH 96o, chiết tiếp bằng EtOH 80o cho đến hết hoạt chất Bốc hơi, hòa cặn trong 30ml nước rồi lắc với ether (4 x 30ml) Loại ether, sau đó chiết glycoside bằng cồn và CHCl3 (1:2), làm khô bằng Na2SO4, loại dung môi... đồ chiết xymarin từ hạt Strophantrus kombe (phương pháp Lipcopsli) Hạt tán nhỏ Ngâm trong cồn 25% + 1 ít CaCO3, để qua đêm Ngấm kiệt Dịch chiết Loại tạp bằng Pb acetat Lọc Dịch lọc 1 Loại chì thừa bằng Na2SO4 Lọc Dịch lọc 2 Một ít CaCO3, để yên 2h Lọc Dịch lọc 3 Bão hòa bằng NaCl Chiết bằng hỗn hợp cồn-CHCl3 Dịch cồn-CHCl3 Rửa bằng nước bão hòa NaCl Thu hồi dung môi Hỗn hợp glycoside thô Sơ đồ chiết. .. của glycoside tim bằng phương pháp sinh vật Súc vật hay dùng là mèo hoặc ếch Đối với mèo thì căn cứ vào liều gây ngừng tim ở thời kỳ tâm trương, đối với ếch thì căn cứ vào liều gây ngừng tim ở thời kỳ tâm thu Đối với ếch thì tiêm dưới da vào túi bạch huyết, đối với mèo thì tiêm vào tĩnh mạch đùi, sau đó tính ra đơn vị ếch hoặc đơn vị mèo Đơn vị ếch (Đ.V.Ê) là liều tối thiểu của nguyên liệu hay của glycoside . CHIẾT XUẤT HỢP CHẤT CHIẾT XUẤT HỢP CHẤT GLYCOSIDE TIM GLYCOSIDE TIM ĐẠI CƯƠNG Glycoside tim là một nhóm glycoside có cấu trúc steroid, có tác dụng đặc biệt lên tim. Nhưng với. thử Legal: 3. Các phương pháp chiết xuất để định lượng Các phương pháp định lượng glycoside tim thường dựa vào các phản ứng cho màu và phải qua khâu chiết xuất glycoside toàn phần và loại tối. được dùng đầu tiên trên lâm sàng để chữa bệnh tim. Glycoside tim tan trong nước và cồn loãng, ít tan trong các dung môi không phân cực. Glycoside tim phân bố trong khoảng 10 họ thực vật, đặc