Đang tải... (xem toàn văn)
Glycosid tim là những glycosid steroid có tác dụng đặc biệt lên tim. ở liều điều trị thì có tác dụng cường tim, làm chậm và điều hoà nhịp tim. Nếu quá liều thì gây nôn làm chảy nước bọt, mờ mắt, ỉa chảy, yếu các cơ, loạn nhịp tim, giảm sức co bóp của tim và cuối cùng làm ngừng tim ở thời kỳ tâm thu trên tim ếch và tâm trương trên động vật máu nóng.Glycosid tim còn được gọi là glycosid digitalic vì glycosid của lá cây digitan (Digitalis) được dùng đầu tiên trên lâm sàng để chữa bệnh tim.
Phần II HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN CHỨA GLYCOSID TIM & PHƯƠNG PHÁP CHIẾT XUẤT GLYCOSID TIM TỪ LÁ CÂY TRÚC ĐÀO VÀ CÂY THÔNG THIÊN Chương TỔNG QUAN VỀ GLYCOSID TIM 1.Định nghĩa Glycosid tim 1.1.Ðịnh nghĩa: Glycosid tim glycosid steroid có tác dụng đặc biệt lên tim liều điều trị có tác dụng cường tim, làm chậm điều hoà nhịp tim Nếu liều gây nơn làm chảy nước bọt, mờ mắt, ỉa chảy, yếu cơ, loạn nhịp tim, giảm sức co bóp tim cuối làm ngừng tim thời kỳ tâm thu tim ếch tâm trương động vật máu nóng.Glycosid tim gọi glycosid digitalic glycosid digitan (Digitalis) dùng lâm sàng để chữa bệnh tim 1.2.Nguồn gốc: Glycosid tim có 45 lồi thực vật chủ yếu thuộc họ: Apocynaceae, Asclepiadaceae, Celastraceae (Dây gối) , Cruciferae, Euphorbiaceae, Fabaceae, Liliaceae, Meliaceae, Moraceae, Ranulculaceae, Scrophulariaceae, Sterculiaceae, Tiliaceae (Ðay), số côn trùng, glycosid tim có phận: lá, hoa, vỏ thân, rễ, thân rễ, dò, nhựa mủ 1.3.Cấu trúc hoá học, phân loại Glycosid tim glycosid khác cấu trúc hoá học gồm hai phần: phần đường phần không đường (aglycon) 1.3.1.Phần không đường Phần khơng đường chia thành hai phần nhỏ: phần hydrocacbon mạch nhánh vòng lacton Phần hydrocacbon: xyclopentanopehydrophenantren dẫn chất 10,13-dimetyl (steroid)(10,13-dimethyl-hexadecahydro- 1H-cyclopenta[a]phenanthrene) Ðính vào nhân có nhóm chức có chứa oxy Vòng lacton : Phần aglycon glycosid tim ngồi khung hydrocacbon nói đặc biệt có vòng lacton nối vào vị trí C-17 khung Vòng lacton coi mạch nhánh Hầu hết chất có tác dụng dược lý có vòng lacton hướng b Dựa vào vòng lacton nối vào vị trí C-17 người ta chia glycosid tim thành hai nhóm: - Nếu vòng lacton có cacbon có nối đơi vị trí a-b Những aglycon có vòng lacton có 23 cacbon glycosid tim thuộc nhóm cardenolid - Nếu vòng lacton có cacbon , có hai nối đơi -> aglycon có 24 cacbon ->glycosid tim thuộc nhóm bufa dienolid 1.3.2.Phần đường: Phần đường nối vào OH C-3 aglycon Chođến người ta biết khoảng 40 loại đường khác Ngồi đường thơng thường D-glucose, L-ramnose, D-fucose, D-xylose có gặp nhóm glycosid khác, lại đường gặp glycosid tim Trong đường đáng ý đường 2,6-desoxy Dưới số đường 2,6-desoxy hay gặp: Những đường có đặc tính sau: dễ bị thuỷ phân, cho phản ứng màu với thuốc thử Kele-Kiliani, thuốc thử Xanthydrol Mạch đường monosacarit oligosacarit Gitoxin-xelobiozit có digitan tía có mạch đường với đơn vị đường đơn: Gitoxin-xelobiozit = Gitoxygenin + (digitoxoza)3 + (glucose)2 Ví dụ, số genin Glycozit trợ tim thường gặp : 1.4 Tính chất: - Các glycosid tim chất kết tinh, khơng màu, vị đắng, có suất quay cực, tan nước, cồn, không tan benzen,ete, - Các glycosid tim nhạy cảm với thay đổi pH mơi trường., glycosid tim có đường 2-desoxy dễ thuỷ phân đun với acid vô 0,05 N metonol 30 phút glycosid khác điều kiện khơng thuỷ phân Trong môi trường kiềm cacdenolid chuyển thành dẫn chất iso dây nối este bị cắt ( có) khơng hoạt tính Glycosid dễ bị thuỷ phân enzim.Thường enzim có sẵn cây, có khả cắt bớt phần glucose để chuyển thành glycosid thứ cấp Ví dụ: digilanidaza digitan lơng, digipuapidaza digitan tía, strophantobiaza hạt Strophanthus courmonti, xilarenaza Scilla maritima 1.5.Phân bố : Glycosid tim phân bố hầu hết thực vật Một số dược liệu chứa glycosid tim: Dương địa hoàng, Hành biển, Thông thiên, Trúc đào, Strophanthus, đay … Glycosod tim có thân ,lá ,quả ,rể ,củ,cành ,vỏ tồn 2.Định tính & Định lượng 2.1.Các thuốc thử định tính định lượng: Các thuốc thử để định tính định lượng chủ yếu dựa thuốc thử tạo màu ánh sáng thường tạo huỳnh quang ánh sáng cực tím Trước tiến hành phản ứng, Chiết: - Loại tạp ete dầu hoả benzen - Chiết cồn - Pha loãng cồn loại tạp dung dịch chì acetat 15%, lọc - Chiết glycosid dịch lọc cloroform hỗn hợp cloroformetanol 4:1 - Bốc dịch chiết hồ glycosid dung mơi thích hợp để tiến hành phản ứng Các thuốc thử chia thành hai loại: loại thuốc thử phản ứng với phần đường 2-desoxy loại thuốc thử phản ứng với aglycon 2.2 Các thuốc thử tác dụng lên phần đường: 2.2.1 Thuốc thử Xanthydrol Thuốc thử dương tính với đường 2desoxy glycosid có đường Phản ứng cho màu đỏ mận rõ ổn định.Phản ứng nhạy với đường 2-desoxy acetyl hố âm tính với đường 2-desoxy nối với glucose vị trí 4.Các đường 6-desoxy âm tính với thuốc thử này.Phản ứng dùng để định tính định lượng Thuốc thử gồm 10mg xanthydrol hoà tan 99 ml acid acetic đặc thêm ml HCl đặc, trộn Tiến hành phản ứng: Lấy khoảng 20-200 mg glycosid cho vào ống nghiệm khô, thêm ml thuốc thử trộn đều, đậy nút bông, đặt nồi cách thuỷ sôi phút sau làm lạnh cách ngâm phút vào nước đá để nhiệt độ phòng 10 phút Ðọc quang phổ kế bước sóng 550 nm.Ðể định tính khơng cần làm lạnh phản ứng tiến hành sau: Hoà it glycosid vào metanol, cho thêm vài giọt xanthydrol, đun nồi cách thuỷ cho khơ cạn, hồ cặn vào acid acetic Sau cho thêm acid chlohydric vào đun sôi nồi cách thuỷ có màu đỏ thẫm 2.2.2 Thuốc thử acid photphoric đặc Thuốc thử dương tính với đường 2-desoxy glycosid có đường Phản ứng dùng để định tính định lượng 2.2.3 Thuốc thử Kele-Kiliani thuốc thử pha thành hai dung dịch, dung dịch gồm 100 ml acid acetic kết tinh trộn với ml dung dịch FeCl3 5% Dung dịch gồm 100 ml H2SO4 đậm đặc trộn với ml dung dịch FeCl3 5% Hoà tan mg glycosid vào dung dịch chồng thêm dung dịch Mặt ngăn cách có màu đỏ màu nâu đen lớp có màu xanh từ khuyếch tán lên.Ðộ nhạy phản ứng thuốc thử xanthydrol.Màu không ổn định 2.3 Các thuốc thử tác dụng lên phần aglycon: thuốc thử chia thành hai nhóm, nhóm phản ứng lên nhân steroid nhóm phản ứng lên vòng laclon 2.3.1.Xác định phần steroid 2.3.1.1 Phản ứng Libermanm: Hồ glycosid vào vài ml anhydrid acetic, rót cẩn thận dung dịch lên thành mặt kính đồng hồ có chứa H2SO4 đậm đặc Lớp anhydrid acetic có màu xanh vàng sau thành xanh sáng Phản ứng Libermanm- Burchard: Phản ứng khơng lên màu với glycosid tim mà lên màu với nhiều dẫn chất có nhân steroid khác Hồ glycosid vào vài giọt acid acetic, kết tinh trộn với hỗn hợp anhydrid acetic acid sulfuric đặc Sẽ có màu hồng chuyển sang xanh Cơ chế phản ứng khử nước acid mạnh 2.3.1.2 Thuốc thử acid photphoric Acid photphoric phản ứng với phần đường 2- desoxy (nt) tác dụng lên phần aglycon cho huỳnh quang 2.3.1.3 Thuốc thử Tatgie gồm Acid photphoric, H2SO4 FeCl3 2.3.1.4 Phản ứng Rozenhem: Hồ glycosid vào chloroform, thêm dung dịch acid trichloacetic 90% xuất màu hồng tím, xanh biển Xác định phần lacton cạnh chưa no Các glycosid aglycon thuộc nhóm cacdenolid cho phản ứng với dẫn chất nitro thơm mơi trường kiềm tạo nên sản phẩm màu đỏ đến tím Phản ứng phụ thuộc vào nhóm metylen hoạt động vòng butenolit Một số hợp chất tự nhiên khác có phần cấu trúc tương tự ( b -thuyon, piperitenon, benzalaceton) dương tính với thuốc thử 2.3.1.5 Phản ứng Baljiet Cho glycosid tác dụng với dung dịch acid picric môi trường kiềm cho màu đỏ da cam tạo phức Meisenhemer, màu tương đối bền nên dùng để định tính định lượng Cơ chế phản ứng tạo thành phức: 2.3.1.6 Phản ứng Kedde: Thuốc thử dung dịch 3,5-dinitrobenzoic acid 2% etanol Chất thử hoà tan etanol, thêm thuốc thử thêm dung dịch xút, phản ứng có màu đỏ tía Màu ổn định, dùng để định lượng ( đọc bước sóng 540 nm.) 2.3.1.7.Phản ứng Raymond- Mactu: Thuốc thử m.dinitrobenzen 1% cồn tuyệt đối, thực môi trường kiềm Phản ứng có màu tím, có xanh, màu khơng bền Ngồi thuốc thử nitro thơm nói người ta thấyd số thuốc thử khác 2,4 - dinitrophenylsunfon, 3,5 - dinitroanizol cho màu với nhóm cacdenolid 2.3.1.8 Phản ứng Legal: Cho glycosid tác dụng với dung dịch natri nitroprussiat môi trường kiềm xuất màu đỏ, màu nhanh Tiến hành phản ứng: Các chất thuộc nhóm cacdenolit hồ vào pyridin thêm dung dịch natri nitroprussiat 0,3 - 0,5% sau thêm xút 10 -15% để đảm bảo kiềm thừa xuất màu đỏ Các thuốc thử tác dụng lên vòng butenolid nói âm tính với dẫn chất thuộc nhóm bufadienolid.Muốn phát hiên nhóm dùng thuốc thử SbCl3 chloroform, có màu tím sau đun nóng.Tốt dựa vào quang phổ tử ngoại 2.2 Sắc ký: Ðể xác định , đối chiếu tách chất để nghiên cứu ta tiến hành sắc ký giấy sắc ký lớp mỏng Ðể màu dùng thuốc thử nói phần thường dùng thuốc thử Keđe ( màu đỏ), thuốc thử Raymon-Mactu ( màu tím) Các dẫn chất có đường 2-desoxy dùng thuốc thử xanthydrol Phổ tử ngoại Nhóm cacdenolid có đỉnh hấp thu cực đại vùng 215-218 nm log e khoảng 4,1; phân tử có thêm nhóm cacbonyl có đỉnh vai 272 - 305 nm, chất bufadienolid có đỉnh hấp thu cực đại khoảng 300 nm, loge khoảng 3,7 3.Ứng dụng Glycosid Tim dược liệu 3.1.Thuốc loại glycosid (glycosid trợ tim) Hiện digoxin digitoxin dùng lâm sàng Digitoxin khác digoxin khơng có OH C12 tan nước hơn.Các thuốc loại có đặc điểm chung: Tất có nguồn gốc từ thực vật: lồi Digitalis, Strophantus Cấu trúc hố học gần giống nhau: có nhân steroid nối với vòng lacton khơng bão hòa C17, gọi aglycon genin, có tác dụng chống suy tim Vị trí C3 nối với nhiều phân tử đường(ose), khơng có tác dụng dược lý ảnh hưởng đến dược động học thuốc 3.2.Tác dụng digitalis: Tác dụng tim Đây tác dụng chủ yếu: digitalis làm tâm thu ngắn mạnh, tâm trương dài ra, nhịp tim chậm lại Nhờ đó, tim nghỉ nhiều hơn, máu từ nhĩ vào thất thời kỳ tâm trương nhiều hơn, cung lượng tim tăng nhu cầu oxy giảm Do bệnh nhân đỡ khó thở nhịp hơ hấp trở lại bình thường Digitalis làm giảm dẫn truyền nội tăng tính trợ tim nên tim bị loạn nhịp, thuốc làm nhịp trở lại 3.3.Các tác dụng khác Trên thận: digitalis làm tăng thải nước muối nên làm giảm phù suy tim.Cơ chế tác dụng là: mặt, digitalis làm tăng cung lượng tim, nên nước qua cầu thận tăng; mặt khác, thuốc ức chế ATPase màng tế bào ống thận làm giảm tái hấp thu natri nước -Trên trơn: với liều độc, ATPase “bơm” Na + - K+ bị ức chế, nồng độ Ca++ tế bào thành ruột tăng làm tăng co bóp trơn dày, ruột (nơn, lỏng), co thắt khí quản tử cung (có thể gây xảy thai) - Trên mơ thần kinh: digitalis kích thích trực tiếp trung tâm nôn sàn não thất phản xạ từ xoang cảnh, quai động mạch chủ 3.4.Chế phẩm liều lượng 3.4.1.Digitoxin Nồng độ điều trị huyết tương 10 - 25 ng/ mL, nồng độ độc > 35 ng/ mL Liều điều trị: 0,05- 0,2 mg/ ngày.Chế phẩm: viên nén 0,05 0,1 mg 3.4.2.Digoxin Nồng độ điều trị huyết tương 0,5 - 1,5 ng/ mL, nồng độ độc 0,2ng/ mL Liều điều trị: 0,125- 0,5 mg/ ngày.Chế phẩm: viên nén 0,1250,25-0,5mg ống tiêm 0,1- 0,25 mg/ mL Chương CÁC PHƯƠNG PHÁP CHIẾT XUẤT Chương PHƯƠNG PHÁP CHIẾT XUẤT GLYCOSID TIM TỪ LÁ CÂY TRÚC ĐÀO 3.1 Giới thiệu đôi nét trúc đào 3.1.1 Trúc đào , loài bụi hay gỗ nhỏ, thường xanh họ La bố ma (Apocynaceae) Nó lồi phân loại chi Nerium Một bụi trúc đào thành phố Long Xuyên.Việt Nam Nó lồi địa khu vực rộng từ Morocco Bồ Đào Nha kéo dài phía đơng tới khu vực Địa Trung Hải miền nam châu Á.[1] Thơng thường lồi mọc xung quanh lòng suối khơ Nó cao tới 2–6 m, với cành mọc gần thẳng Các mọc thành cặp hay vòng xoắn gồm ba lá, dầy bóng da, màu lục sẫm, hình mũi mác hẹp, dài khoảng 5–21 cm rộng 1-3,5 cm, mép nhẵn Hoa mọc thành cụm đầu cành; màu trắng, vàng hay hồng (tùy theo giống), đường kính 2,5–5 cm, tràng hoa thùy với tua bao quanh ống tràng trung tâm tràng hoa Thơng thường (nhưng khơng phải ln ln) hoa trúc đào có hương thơm Quả loại nang dài hẹp, kích thước dài 5–23 cm, nứt chín để giải phóng hạt nhỏ phủ đầy lơng tơ 3.1.2.Độc tính Trúc đào lồi thực vật có độc tính cao chứa nhiều hợp chất có độc, nhiều hợp chất số gây tử vong người, đặc biệt trẻ em Độc tính trúc đào coi cao có nhiều thơng báo cho thấy số trường hợp cần lượng nhỏ đủ gây hậu tử vong hay cận kề tử vong (Goetz 1998) Đáng kể số chất độc oleandrin neriin, cácglicozit tim mạch (Goetz 1998) Chúng có mặt toàn phận loài này, chủ yếu tập trung nhựa Người ta cho trúc đào chứa nhiều hợp chất chưa rõ hay chưa nghiên cứu khác chúng có tác động nguy hiểm (Inchem, 2005) Vỏ trúc đào chứa rosagenin, có tác động tương tự strychnin.Toàn này, bao gồm nhựa màu trắng sữa độc phận gây phản ứng có hại cho sức khỏe 3.13.Các triệu chứng ngộ độc Oleandrin, chất độc có trúc đào Ăn phải trúc đào gây triệu chứng đường ruột tim mạch Các triệu chứng đường tiêu hóa bao gồm buồn nôn nôn mửa, tiết nhiều nước bọt, tổn thương vùng bụng, tiêu chảy lẫn hay không lẫn máu, đặc biệt ngựa đau bụng (Inchem 2005) Các triệu chứng đường tim mạch bao gồm loạn nhịp tim, với đặc trưng nhịp nhanh sau chậm mức bình thường Tim đập thất thường khơng có dấu hiệp nhịp cụ thể Các trường hợp nghiêm trọng dẫn tới nhợt nhạt da lạnh tuần hoàn máu hay khơng ổn định Các tác động ngộ độc lồi tác động tới hệ thần kinh trung ương Các triệu chứng bao gồm thờ thẫn, run rẩy chân tay cơ, tai biến ngập máu, xẹp chí mê dẫn tới tử vong Nhựa trúc đào gây tấy rát da, sưng, tấy rát mắt nghiêm trọng phản ứng dị ứng đặc trưng viêm da 3.2 Phương pháp chiết xuất glycoside tim trúc đào 3.2.1.Sơ đồ quy trình chiết tách 10 g trúc đào,tán nhỏ Bình nón 250 ml Thêm 100 ml cồn 25% Ngâm 24 h Gạn dịch chiết vào bình 100 ml Thêm 3ml chì acetat 30% khuấy Lọc Chiết cloroform lần ,mỗi lần ml Loại nước natrisulfat khan Dịch chiết Tiến hành phản ứng định tính định lượng ... tiêm 0,1- 0,25 mg/ mL Chương CÁC PHƯƠNG PHÁP CHIẾT XUẤT Chương PHƯƠNG PHÁP CHIẾT XUẤT GLYCOSID TIM TỪ LÁ CÂY TRÚC ĐÀO 3.1 Giới thiệu đôi nét trúc đào 3.1.1 Trúc đào , loài bụi hay gỗ nhỏ, thường... Nhựa trúc đào gây tấy rát da, sưng, tấy rát mắt nghiêm trọng phản ứng dị ứng đặc trưng viêm da 3.2 Phương pháp chiết xuất glycoside tim trúc đào 3.2.1.Sơ đồ quy trình chiết tách 10 g trúc đào, tán... maritima 1.5.Phân bố : Glycosid tim phân bố hầu hết thực vật Một số dược liệu chứa glycosid tim: Dương địa hồng, Hành biển, Thơng thiên, Trúc đào, Strophanthus, đay … Glycosod tim có thân ,lá