nghiên cứu sự biến đổi thành phần saponin của sâm việt nam (panax vietnamesnsis) trong quá trình chế biến

SỞ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ THÀNH ĐOÀN CHƯƠNG TRÌNH VƯỜN ƯƠM SÁNG TẠO KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ TRẺ  *  BÁO CÁO NGHIỆM THU Đã chỉn sửa he g p ý của Hội đ ng nghiệm h ng y 2 háng 0 năm 2 1

SỞ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ THÀNH ĐOÀN

CHƯƠNG TRÌNH VƯỜN ƯƠM SÁNG TẠO KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ TRẺ

 * 

BÁO CÁO NGHIỆM THU

(Đã chỉn sửa he g p ý của Hội đ ng nghiệm h ng y 2 háng 0 năm 2 1 )

NGHIÊN CỨU SỰ BIẾN ĐỔI THÀNH PHẦN SAPONIN

CỦA SÂM VIỆT NAM (PANAX VIETNAMNSIS) TRONG

QUÁ TRÌNH CHẾ BIẾN

Chủ nhiệm đề tài: LÊ THỊ HỒNG VÂN

Cơ quan chủ trì: TRUNG TÂM PHÁT TRIỂN

KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ TRẺ

TP Hồ Chí Minh, tháng 07 năm 2010

PHẦN MỞ ĐẦU Tên đề tài: NGHIÊN CỨU SỰ BIẾN ĐỔI THÀNH PHẦN SAPONIN

CỦA SÂM VIỆT NAM (PANAX VIETNAMNSIS) TRONG QUÁ TRÌNH

CHẾ BIẾN

Chủ nhiệm đề tài: DS LÊ THỊ HỒNG VÂN

Cơ quan chủ trì: TRUNG TÂM KHOA HỌC CÔNG NGHỆ TRẺ

Thời gian thực hiện đề tài: 12 Tháng

Kinh phí đƣợc duyệt: 80.000.000 đồng

Kinh phí đã cấp: theo TB số : TB-SKHCN ngày / / Mục tiêu:

- Chế biến sâm Việt nam (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) bằng cách hấp có

hơi nước ở nhiệt độ cao

- Khảo sát sự biến đổi thành phần hóa học bằng sắc ký lớp mỏng và sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) của Sâm Việt Nam qua chế biến so với sâm Việt nam không chế biến

Thăm dò quy trình chiết tách các saponin mới tạo thành qua quá trình chế biến sâm Việt nam”

Nội dung:

- Chế biến sâm Việt Nam từ những củ

sâm Việt nam tươi theo cách chế

biến hồng sâm từ nhân sâm

- Hấp những củ sâm Việt Nam tươi (>6 tuổi) ở nhiệt độ 105oC trong những khoảng thời gian 2,4,6,8 giờ

- Phân tích thành phần hóa học của

sâm Việt nam sau khi chế biến

- Sử dụng SKLM saponin toàn phần so sánh với chuẩn G-Rg1, MR2, G-Rb1, G-Rd

- Tiến hành sắc ký lớp mỏng để so

sánh đối chiếu thành phần saponin

của sâm Việt Nam qua chế biến và

sâm Việt nam chưa chế biến

- SKLM đồng lượng các mẫu cao toàn phần và saponin toàn phần của các mẫu sâm Việt Nam trước khi chế biến và mẫu sau chế biến 2,4,6,8 giờ bằng hệ CHCl3-MeOH-H2O (65:35:10, lớp dưới)

- Tiến hành sắc ký lỏng hiệu năng cao

để so sánh đối chiếu thành phần

saponin của sâm Việt Nam qua chế

biến và sâm Việt nam chưa chế biến

- Sử dụng HPLC với 4 điều kiện khác nhau trên hai máy sắc ký lỏng Shimadzu và Water với detector PDA phân tích mẫu saponin toàn phần

- Thăm dò chiết tách các saponin mới

tạo thành qua quá trình chế biến sâm

Việt nam

- Sử dụng sắc ký cột cổ điển và sắc ký lỏng hiệu năng cao chế hóa tách được 2 đơn chất

XÁC NHẬN CHỈNH SỬA BÁO CÁO NGHIỆM THU

(Theo góp ý của Hội đồng nghiệm thu ngày 22/06/2010)

Chủ nhiệm đề tài:

Cơ quan chủ trì đề tài: Trung tâm Phát triển Khoa học và Công nghệ Trẻ

TT Góp ý của Hội đồng Chỉnh sửa của chủ nhiệm đề tài Trang

1 Viết thêm phần đặt vấn đề Đã viết lại 1

2 Chỉnh sửa lại phần tổng quan Đã chỉnh sửa 9

3 Viết phần tóm tắt bằng Tiếng

Việt và tiếng Anh Đã viết lại

I

4 Viết lại quy trình chế biến Sâm

Việt Nam Đã viết lại theo ý kiến hội đồng

31

5 Kết quả thăm dò điều kiện chiết

tách chất mới Đã bổ sung theo ý kiến hội đồng

DS LÊ THỊ HỒNG VÂN

PHẢN BIỆN 1

(Ký tên)

PHẢN BIỆN 2 (Ký tên)

CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG

(Ký tên)

Sâm Việt nam (Panax vietnamensis Ha et Grushv Araliaceae) là một loài Panax

mới, cho đến nay chỉ mới phát hiện ở Việt nam Hiện nay sâm Việt nam chỉ được

dùng dưới dạng phơi sấy khô chứ chưa có nghiên cứu nào về bào chế dạng hồng

sâm như Sâm Triều Tiên.

THE EFFECT OF STEAMING ON SAPONIN COMPONENTS OF

VIETNAMESE GINSENG PANAX VIETNAMESNIS HA ET GRUSHV

Vietnamse ginseng (VG), a wild Panax species, discovered in the Central Vietnam

in 1973, has been used in Vietnam for many purpose as ginseng Panax ginseng

(PG), i.e., for treatment of many serious diseases and for enhancement of physical

strength

This study was carried out to investigate changes in the saponin composition of

vietnamese ginseng Panax vietnamensis Ha et Grushv., Araliaceae induced by

steaming

The raw VG root was obtained from Quang Nam province Samples of the raw VG

root were steamed for 2, 4, 6, and 8 h The root was then dried at about 50 oC until

constant weight Dried VG were extracted with refluxing MeOH in a soxhlet

extractor for 8 hours After cooling the methanol was removed in vacuo The

residue was dissolved in water and then subjected to a column chromatography with

Diaion HP-20 The total saponins was collected by evaporating to dryness in vacuo

methanol fraction Use a thin layer and high-performance liquid (HPLC)

chromatographic pattern matching method to differentiate saponin fraction

No difference between the raw and steamed form indicated the steaming process did

not affect the physical strengthening of VG in this paradigm

In summary, using pattern matching analysis, the raw and steamed samples were successfully differentiated The steamed form showed numerous peaks were not distinct in the chromatogram of the raw samples indicated a lot of newly formed

derivatives

MỤC LỤC

1 ĐẶT VẤN ĐỀ 17

2 TỔNG QUAN 21

2.1 Tổng quan cây sâm Việt Nam 21

2.1.1.Thực vật học 21

2.1.2.Thành phần hóa học 23

2.1.3.Tác dụng dược lý và công dụng 31

2.2 SÂM TRIỀU TIÊN 33

2.2.1.Thực vật học 33

2.2.2.Thành phần hóa học 34

2.2.3.Tác dụng dược lý, công dụng 35

2.3 Các phương pháp chế biến sâm 36

3 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 38

3.1 Đối tượng nghiên cứu 38

3.1.1.Nguyên liệu 38

3.1.2.Dung môi, hóa chất 38

3.2 Phương pháp nghiên cứu 39

3.2.1.Khảo sát dược liệu tươi 39

3.2.2.Chế biến sâm Việt Nam từ sâm Việt Nam tươi 39

3.2.3.Chiết xuất cao toàn phần 39

3.2.4.Phân lập saponin toàn phần 40

3.2.5.Tiến hành so sánh thành phần saponin trong các mẫu dược liệu 40

3.2.6 40

4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 41

4.1 Kết quả khảo sát sâm Việt Nam trước khi chế biến 41

4.1.1.Đặc điểm hình thái sâm Việt Nam tươi 41

4.1.2.Xác định độ ẩm 41

4.1.3.Định tính bằng sắc ký lớp mỏng 41

4.2 Chế biến sâm Việt Nam 42

4.3 Chiết xuất cao toàn phần 45

4.4 Chiết xuất saponin toàn phần 46

Formatted: BODY TEXT, Centered Formatted: Font: 14 pt, Bold

4.5 So sánh thành phần saponin của sâm Việt Nam đã chế biến và chưa chế

biến 47

4.5.1.Sắc ký lớp mỏng 47

4.5.2.Sắc ký lỏng hiệu năng cao ( HPLC) 48

4.6 Phân lập saponin mới từ mẫu Sâm Việt Nam đã qua chế biến 58

4.6.1.Phân lập các phân đoạn đơn giản 58

4.6.2.Phân lập các đơn chất bằng kỹ thuật HPLC chế hóa 59

5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 62

5.1 KẾT LUẬN 62

5.2 ĐỀ NGHỊ 63

6 TÀI LIỆU THAM KHẢO 64

DANH MỤC HÌNH

Hình 2.1.Bộ phận trên mặt đất của sâm Việt Nam 21

Hình 2.2.Sơ đồ phân loại các saponin trong thân rễ và rễ củ sâm Việt Nam 25

Hình 3.1.Thân rễ và rể củ sâm Việt nam 38

Hình 4.1.Thân rễ và rễ củ sâm Việt Nam tươi 41

Hình 4.2Sắc ký đồ SKLM định tính các saponin trong sâm Việt Nam 42

Hình 4.3Sơ đồ quy trình chế biến sâm Việt Nam 43

Hình 4.4.Sâm Việt Nam trước khi chế biến 45

Hình 4.5.Sâm Việt Nam sau khi chế biến 45

Hình 4.6.Sơ đồ chiết xuất cao toàn phần và saponin toàn phần sâm Việt Nam 47

Hình 4.7.Sắc ký đồ SKLM so sánh cao methanol toàn phần và saponin toàn phần của sâm Việt Nam chưa chế biến và qua chế biến 48

Hình 4.8.Sắc ký đồ HPLC saponin toàn phần của sâm Việt Nam chưa chế biến 50

50

50 Hình 4.11.Sắc ký đồ HPLC saponin toàn phần của các mẫu sâm Việt Nam 52

Hình 4.12.Sắc ký đồ HPLC của mẫu chuẩn M-R2 (a), mẫu sâm Việt Nam trước khi chế biến (b) và sau khi chế biến 6 giờ (c), 8 giờ (d) 53

Hình 4.13.Sắc ký đồ HPLC của sâm Việt Nam trước khi chế biến 55

Hình 4.14.Sắc ký đồ HPLC của mẫu Sâm Việt Nam sau khi chế biến (mẫu 2 giờ) 55 Hình 4.15.Sắc ký đồ HPLC của mẫu Sâm Việt Nam sau khi chế biến (mẫu 4 giờ) 55 Hình 4.16.Sắc ký đồ HPLC của mẫu Sâm Việt Nam sau khi chế biến (mẫu 6 giờ) 56 Hình 4.17.Sắc ký đồ HPLC của mẫu Sâm Việt Nam sau khi chế biến (mẫu 8 giờ) 56 sau khi chế biến 57

Hình 4.19.Sắc ký đồ sắc ký lớp mỏng các phân đoạn qua cột sắc ký cổ điển 59

Hình 4.20.Sắc ký đồ SKLM phân đoạn 1 và 2 61

DANH MỤC BẢNG

Bảng 2.1.Các saponin dẫn chất của 20 (S)-protopanaxdiol ở thân rễ và rễ củ sâm

Việt Nam 26

Bảng 2.2.Các saponin dẫn chất của 20 (S)-protopanaxtriol ở thân rễ và rễ củ sâm Việt Nam 27 Bảng 2.3.Các saponin có cấu trúc ocotillol ở thân rễ và rễ củ sâm Việt Nam 28

Bảng 2.4.Các saponin dẫn chất của acid oleanolic ở thân rễ và rễ củ sâm Việt Nam 29

Bảng 2.5Thành phần saponin triterpen của nhân sâm 34

Bảng 4.1Khối lượng các mẫu sâm Việt Nam sau khi sấy khô 43

Bảng 4.2Kết quả chiết xuất cao toàn phần 46

47

1.TỔNG QUAN

1.1.Tổng quan tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước [7,

nước [7, 11,12,14,14]

Nhân sâm, hay còn gọi là Sâm Triều Tiên, tên khoa học: Panax ginseng C.A

Meyer, họ Nhân sâm (Araliaceae), là một cây thuốc quí hàng đầu của y học cổ

truyền ("Sâm, nhung, quế, phụ") và đã được loài người sử dụng từ hơn 4.000

năm qua Ngày nay, Nhân sâm được công nhận và sử dụng rộng rãi trên khắp

thế giới

Nhân sâm chứa chủ yếu saponin thuộc nhóm dammaran gồm các ginsenosid,

được xem một trong những hoạt chất quan trọng của Nhân sâm, các hợp chất

polyacetylen, tinh dầu, khoáng chất, nguyên tố vi lượng

Theo tài liệu cổ, Nhân sâm có tác dụng đại bổ nguyên khí, ích huyết sinh tân,

định thần ích trí, làm tăng thể lực và trí lực, đặc biệt tốt cho cơ thể suy nhược

hay trong thời kỳ dưỡng bệnh Dưới ánh sáng của khoa học và y học hiện đại,

những tác dụng sau đây của Nhân sâm đã được chứng minh:

- Tác dụng bổ, tăng lực, tăng sức bền, giảm mệt mỏi

- Cải thiện năng lực tinh thần, tăng trí nhớ, chống stress

- Thúc đẩy các quá trình sinh tổng hợp quan trọng trong cơ thể, tăng cường khả

năng miễn dịch, chống oxi hoá, làm chậm quá trình lão hóa

Gần đây, các nhà khoa học đã chứng minh thêm một số tác dụng quan trọng

của Nhân sâm như tác dụng hạ đường huyết, cải thiện tuần hoàn máu não, kích

thích miễn dịch, ngăn ngừa ung thư

Bộ phận dùng của Nhân sâm là rễ củ, thường được chế biến thành hai dạng chủ

yếu là hồng sâm và bạch sâm Hồng sâm là loại nhân sâm được chế biến theo

phương pháp cổ truyền bằng cách hấp các củ sâm tươi ở nhiệt độ cao có hay

không có áp suất trong khoảng 2-6 giờ tùy theo tài liệu Cách chế biến này đã

mang lại cho hồng sâm các đặc điểm sau so với bạch sâm:

Formatted: Bullets and Numbering

- Thể chất rắn hơn nên bảo quản lâu dài tốt hơn bạch sâm (do thành phần tinh bột bị hồ hoá một phần nên hoá sừng cứng chắc ít bị sâu mọt phá hoại)

- Về mặt hóa học, qua chế biến hồng sâm có chứa những ginsenosid mới không

có trong bạch sâm như ginsenosid-Rg3, G-Rg5, G-Rg6, G-Rh2, G-Rh3, G-Rh4, G-Rs3… Các thành phần mới này giúp tăng cường hoạt tính sinh học của hồng sâm với tác dụng phòng chống ung thư, kháng viêm, chống oxy hóa…Trong

đó, tinh chất G-Rg3 và G-Rh2 đã được nghiên cứu phát triển như một thuốc chống ung thư Các thành phần mới này giúp tăng cường hoạt tính sinh học của nhân sâm

- Về mặt tác dụng và công dụng: tính bổ dưỡng được tăng cường, tác dụng chữa bệnh tim mạch, thần kinh suy nhược, bệnh tiểu đường đã được chứng minh, và đặc biệt hơn là có thêm tác dụng phòng chống ung thư, kháng viêm và chống oxy hóa…

Do các biến đổi trên, trong hai dạng chế biến, hồng sâm được cho là tốt hơn, đắt tiền hơn và sử dụng phổ biến hơn bạch sâm Tóm lại, việc chế biến bạch sâm thành hồng sâm đã làm tăng tác dụng điều trị, hiệu quả và giá trị kinh tế của nhân sâm

Gần đây, các nhà nghiên cứu đã đưa ra một dạng bào chế mới từ nhân sâm là

“sun ginseng” Sun ginseng được bào chế tương tự hồng sâm nhưng ở nhiệt độ cao hơn (120 oC) Các ginsenosid chính trong “sun ginseng” là G-Rg3, G-Rg5, G-Rk1; trong đó, hàm lượng G-Rg3, G-Rg5 tăng lên nhiều lần so với hàm lượng

có trong hồng sâm, G-Rk1 là một ginsenosid mới Ngoài ra, trong “sun ginseng” còn có các ginsenosid mới khác như G-Rk2, G-Rk3, G-Rs4, G-Rs5, G-

Rs6, G-Rs7 Các ginsenosid này có tác dụng giãn mạch, hạ huyết áp, chống kết tập tiểu cầu, chống oxy hóa, chống ung thư, bảo vệ tế bào não… Các nhà khoa học cũng đã nghiên cứu thành phần hóa học và tác dụng chống ung thư trên

Sâm Hoa Kỳ (Panax quinquefolium L.) đã chế biến và cũng đã có những kết

quả khả quan Sâm Hoa kỳ sau khi hấp ở 120 0C trong vòng 1 giờ và 120 0C từ 0,5-4 giờ cũng đã cho thấy sự thay đổi về thành phần hóa học, hàm lượng 5 Ginsenosid Rh1, Rg2, 20R-Rg2, Rg3 và Rh2 đã tăng [10,15]

Cần nhấn mạnh thêm thị trường nhân sâm trên thế giới rất lớn, lên đến hàng trăm triệu đô la Mỹ mỗi năm, trong đó dạng hồng sâm và các chế phẩm từ hồng sâm chiếm giá trị lớn nhất

Ngoài nhân sâm, một số loài Panax khác như sâm Hoa kỳ (Panax quinquefolium L.), tam thất (Panax notoginseng Burk F.H Chen), sâm Việt Nam (Panax

vietnamensis Ha et Grushv.) cũng được dùng với công dụng tương tự nhân sâm

Một số loài Panax khác như Panax japonicus, Panax zingiberensis v.v cũng

được dùng nhưng được xem là có giá trị kém hơn vì không chứa saponin nhóm dammaran đặc trưng của nhân sâm

Sâm Việt Nam (Panax vietnamensis Ha et Grushv Araliaceae) là một loài

Panax mới, cho đến nay chỉ mới phát hiện ở Việt nam Cây sâm này được phát

hiện vào năm 1973 tại đỉnh Ngọc Linh, thuộc Khu 5 cũ nên còn được gọi là sâm Ngọc linh hay sâm Khu 5 Đây là cây “thuốc giấu“ rất quý của dân tộc Sê Đăng sống trên dãy Trường sơn với tác dụng tăng lực, chống mệt mỏi khi đi rừng, lao động và nhiều bệnh tật khác Sâm Việt Nam là một nguồn tài nguyên thiên nhiên rất quý của nước ta nói chung và với ngành y dược nói riêng Tháng 10 năm 2006, sâm Việt Nam còn được phát hiện ở đỉnh núi Ngọc Lum Heo (Quảng Nam) Có một số tài liệu khác ghi nhận sâm Việt Nam còn phân

bố ở vùng núi Langbiang (thuộc tỉnh Lâm Đồng)

Từ năm 1979 cho đến nay, cây sâm Việt Nam đã được nghiên cứu trên rất nhiều mặt từ thực vật học, sinh thái, trồng trọt, hoá học, dược lý cho đến lâm sàng Năm 1976, J Lutomski và Nguyễn Thới Nhâm đã công bố lần đầu tiên về thành phần saponin của Sâm Việt Nam Tiếp theo là các công trình nghiên cứu của Nguyễn Minh Đức (1994, 1997) và Trần Lê Quan (2001) cho thấy trong thân rễ và rễ củ sâm Việt Nam có chứa 52 hợp chất saponin, trong đó có 26 saponin đã biết và 26 saponin có cấu trúc mới được đặt tên là vina-ginsenosid-

R1-R25 và ginsenosid-Rh5 (hay 20-O-Me-G-Rh1)

Các công trình nghiên cứu đã chứng minh sâm Việt Nam là một loài sâm quý,

có nhiều điểm tương tự nhân sâm về thành phần hóa học và tác dụng dược lý, nhưng cũng có một số điểm khác biệt đáng chú ý như sau:

Ngoài các saponin chính có trong sâm Triều Tiên như G-Rb1, G-Rb2, G-Rb3,

G-Rc, G-Rd, G-Re, G-Rg1 …, sâm Việt Nam còn chứa các saponin khung

dammaran có cấu trúc ocotillol chưa tìm thấy ở sâm Triều Tiên, đặc biệt là hợp

chất majonosid R2 với hàm lượng lên đến 5,29% (chiếm gần một nửa hàm

lượng saponin toàn phần) Về tác dụng dược lý, sâm Việt Nam có những tác

dụng tương tự sâm Triều Tiên như bổ, tăng lực, sinh thích nghi, chống viêm,

giảm đau, chống stress … nhưng tác dụng kháng khuẩn của sâm Việt Nam rõ

rệt hơn nhân sâm Do giá trị trong điều trị cũng như nguồn sâm Việt Nam rất

hiếm, chủ yếu dựa vào thu hái tự nhiên và trồng trọt chưa phát triển, giá của

sâm Việt Nam hiện nay cao hơn sâm Triều tiên rất nhiều lần (trên 100 triệu

đồng/kg khô, so với vài triệu đồng/kg sâm Triều tiên)

OH

O-glc 2 -xyl

OH O

HO

3 6

12 17

24(S)

20(S)

Majonosid-R2

(Saponin chủ yếu của sâm Việt Nam với cấu trúc ocotillol)

Hiện nay, sâm Việt Nam chỉ mới được sử dụng dưới dạng phơi sấy khô như

bạch sâm và chưa có nghiên cứu nào về dạng chế biến sâm Việt Nam tương tự

hồng sâm từ nhân sâm

1.2.Tổng quan cây sâm Việt Nam

1.2.1.Thực vật học [1,2]

Sâm Việt Nam hay còn gọi Sâm Ngọc Linh, Sâm Khu 5, tên khoa học: Panax

vietnamensis Ha et Grushv., thuộc họ Nhân sâm (Araliaceae) là một cây sâm

quý của nước ta, được phát hiện đầu tiên tại Ngọc Lây, huyện Đắc Tô, thuộc

tỉnh Kon Tum vào năm 1973 Các công trình nghiên cứu hệ thống về các mặt

Formatted: Bullets and Numbering

thực vật, sinh thái, trồng trọt, hóa học, dược lý, lâm sàng đến nay đã xác định

đây là một cây sâm quý có thể so sánh với Nhân Sâm (Panax ginseng C.A

Meyer), Sâm Hoa Kỳ (Panax quinquefolium L.) và Tam Thất (Panax

notoginseng Burk F.H Chen) Trên cơ sở phân tích, định lượng thành phần

saponin của các loài Panax, Osamu Tanaka (1989) đã đưa ra bảng phân loại

hóa học các loài Panax Theo đó thì sâm Việt Nam, sâm Triều Tiên, sâm Hoa

Kỳ, sâm ba lá được xếp vào cùng nhóm B1, là nhóm mà hầu hết saponin thuộc

khung damaran với số lượng và hàm lượng ginsenosid cao, chỉ có 1 – 2 saponin

olean với hàm lượng không đáng kể

Đặc điểm hình thái

Hình 1.1.Bộ phận trên mặt đất của sâm Việt Nam

Cây thảo sống nhiều năm, cao 40-60 cm, đôi khi trên 1m

Thân rễ nạc, đường kính từ 1-3,5 cm, chiều dài tùy số năm sinh trưởng, mọc bò

ngang như củ gừng, không phân nhánh, có nhiều đốt mang những vết sẹo do

thân khí sinh rụng hàng năm để lại, mặt ngoài màu nâu nhạt, ở trong trắng ngà,

thân rễ có nhiều rễ phụ, cuối thân rễ có rễ củ có dạng con quay, hình trụ, hình

cầu hay có dạng ngoài như củ nhân sâm Đối với sâm thiên nhiên, thân rễ phát

triển mạnh tạo thành nhiều đốt, mỗi đốt tương ứng với một năm tuổi; với sâm

trồng bộ phận rễ củ phát triển hơn, từ một vị trí trên thân rễ có thể mọc ra nhiều

rễ củ, dựa vào số lượng đốt hay số lượng rễ củ người ta có thể đoán được số

tuổi của sâm

Formatted: Bullets and Numbering

Thân khí sinh mảnh mọc thẳng đứng, màu xanh hoặc hơi tím, đường kính thân

độ 5-8 mm, thường rụng hàng năm, thỉnh thoảng cũng tồn tại 2-3 thân trong vài năm

Lá kép hình chân vịt mọc vòng, thường là 3-5 ở ngọn thân Cuống lá kép dài

6-12 mm, mang 5 lá chét, lá chét ở chính giữa lớn hơn cả, có thể dài đến 15 cm, rộng 3-5 cm Lá chét có phiến hình trứng ngược, hình mác ngược hay hình bầu dục, mép khía răng cưa, chóp nhọn, có khi kéo dài thành mũi, gốc hình nêm, lá

có lông ở cả hai mặt, gân bên 10 đôi hình lông chim, gân nhỏ hình mạng

Ở cây 4-5 năm tuổi, hoa là một tán đơn trên cuống, cuống tán hoa dài 10-20 cm

có thể kèm 1-4 tán phụ hay một hoa riêng lẻ ở phía dưới tán chính Mỗi tán có 50-120 hoa, cuống hoa dài 1-1,5 cm, lá đài 5 hợp ở dưới thành hình chuông, cánh hoa 5, màu vàng lục nhạt, nhị 5, bầu 1 ô với 1 (2-3 ) vòi nhụy

Quả nang, màu đỏ tươi, có một chấm đen ở đỉnh, có 1-2 hạt hình thận, màu trắng hay vàng nhạt

Bộ phận dùng, thu hái, chế biến

Bộ phận dùng là thân rễ và rễ củ Có thể dùng lá

Thu hoạch vào mùa đông sau khi lá rụng để lại một vết sẹo ở đầu củ sâm Thường thu củ sau khi thu hạt để làm giống, nếu không thu hạt thì có thể thu củ khi cây ra nụ Chỉ nên thu hoạch củ của những cây sâm đã 4-7 tuổi

Chế biến: Thân rễ và rễ củ sâm Việt Nam đào rửa sạch, phơi hoặc sấy khô dùng như nhân sâm Lá sâm phơi khô sắc nước uống

Phân bố, sinh thái

Sâm Việt Nam mọc hoang tại vùng núi Ngọc Linh (thuộc huyện Đắc Tô và Đắc Glây - tỉnh Kon Tum và huyện Trà My - tỉnh Quảng Nam) Tháng 10 năm

2006, sâm Việt Nam còn được phát hiện ở đỉnh núi Ngọc Lum Heo (Quảng Nam) Có một số tài liệu khác ghi nhận sâm Việt Nam còn phân bố ở vùng núi Langbiang (thuộc tỉnh Lâm Đồng)

Sâm Việt Nam là loại cây thảo đặc biệt ưa ẩm và ưa bóng Cây mọc ở độ cao 1500-2200 m, ở độ cao trên 1700 m cây mọc dày hơn, thành đám dưới tán rừng

hỗn giao có độ che phủ cao (có thể tới 80% hoặc hơn), ít dốc, dọc theo các suối

ẩm, chỗ đất có nhiều mùn Cây mọc đơn lẻ hay mọc thành đám nhỏ gồm nhiều

cá thể ở các lứa tuổi khác nhau Cây trồng bán tự nhiên dưới tán rừng ở độ cao

1800-1900 m ở Kon Tum và Quảng Nam cho thấy nếu độ che phủ của rừng chỉ

40-50% thì có đến 90% cây sâm trồng bị vàng lá và bị bệnh đốm lá, sự sinh

trưởng và phát triển của cây cũng kém hơn Một số nghiên cứu cho thấy thành

phần hóa học và hàm lượng hoạt chất trong sâm trồng tương tự với sâm thiên

nhiên [3]

Sâm Việt Nam là cây sống nhiều năm nhưng phần thân mang lá (phần trên mặt

đất) tàn lụi hàng năm vào mùa đông, để lại một vết sẹo trên thân rễ Sâm Việt

Nam sinh trưởng mạnh trong mùa xuân – hè Chồi thân (ở đầu thân rễ) sẽ mọc

lên vào giữa tháng 2, cây ra hoa và kết quả khoảng từ tháng 3 đến tháng 10

Sau khi quả chín rụng xuống đất, tồn tại qua mùa đông khoảng trên 4 tháng thì

sẽ nảy mầm vào đầu mùa xuân năm sau Sâm Việt Nam có khả năng tái sinh tự

nhiên từ hạt rất tốt

1.2.2.Thành phần hóa học [5,6,7]

Trong các loài thuộc chi Panax, ngoài những chất thông thường như các đường,

acid béo, acid amin, nguyên tố vi lượng, hợp chất polyacetylen, …có một nhóm

hợp chất có tính đặc thù đó là saponin triterpen, gồm có saponin dammaran và

saponin olean Các saponin dammaran có giá trị chữa bệnh cao, được xem là tiêu

chuẩn để đánh giá các loài Panax Dựa vào cấu tạo của các genin tương ứng chia

các saponin dammaran thành 3 nhóm: 20 (S) protopanaxadiol, 20 (S)

protopanaxatriol và ocotillol

Phần dưới mặt đất (thân rễ và rễ củ) sâm Việt Nam có chứa các hợp chất:

saponin triterpen, polyacetylen, acid béo, acid amin, nguyên tố vi lượng, hợp

chất sterol,…Tuy nhiên trong đó các hợp chất saponin là thành phần quan

trọng, tiêu biểu nhất đưa đến các tác dụng dược lý của sâm Việt Nam nói riêng

và của các cây trong họ Araliaceae nói chung như tác dụng bồi bổ, gia tăng

chuyển hóa, tăng lực chống nhược sức, sinh thích nghi Hàm lượng saponin

Formatted: Bullets and Numbering

toàn phần trong sâm Việt Nam từ 12-15% tính trên dược liệu khô (cao nhất

trong các loài thuộc chi Panax đã được nghiên cứu trên thế giới)

1.2.2.1.Hợp chất saponin

Năm 1976, J Lutomski và Nguyễn Thới Nhâm đã công bố lần đầu tiên về

thành phần saponin của Sâm Việt Nam Tiếp theo là các công trình nghiên cứu

của Nguyễn Minh Đức (1994, 1997) và Trần Lê Quan (2001) cho thấy trong

thân rễ và rễ củ sâm Việt Nam có chứa 52 hợp chất saponin, trong đó có 26

saponin đã biết và 26 saponin có cấu trúc mới được đặt tên là

vina-ginsenosid-R1-R25 và ginsenosid-Rh5 (hay 20-O-Me-G-Rh1)

Ngoài những saponin chính mà Sâm Triều Tiên có như G-Rb1, G-Rb2, G-Rb3,

G-Rc, G-Rd, G-Re, G-Rg1, … thì Sâm Việt Nam còn có những saponin của

các loài sâm khác như: sâm Hoa Kỳ (P-F11, Q-R1), sâm Nhật Bản (R1,

M-R2), tam thất Trung Quốc (N-Fa, N-R6)

Thành phần saponin trong sâm Việt Nam thuộc loại saponin triterpen, trong đó

chủ yếu là các saponin thuộc nhóm dammaran và một lượng nhỏ thuộc nhóm

oleanan Hầu hết các saponin đã biết được tìm thấy và phân lập từ các loài thuộc

chi Panax, riêng gypenosid XVII được phân lập lần đầu tiên ở loài Gynostemma

pentaphyllum Makino, Cucurbitaceae bởi Takemoto và cộng sự Một trường hợp

ngoại lệ khác là hemsloside Ma3 trước đây chỉ được tìm thấy từ một loài thuộc họ

Cucurbitaceae – Hemsleya macrosperma C.Y Wu., đây là lần đầu tiên tìm thấy từ

một loài thuộc chi Panax

Điểm đặc biệt trong sâm Việt Nam là các saponin có cấu trúc vòng ocotillol có

hàm lượng lớn hơn nhiều so với các loài sâm khác (sâm Hoa Kỳ, sâm Nhật,

tam thất) và chưa tìm thấy ở sâm Triều Tiên Trong đó đáng chú ý là hợp chất

M-R2 có hàm lượng lớn (5,29%; chiếm khoảng 50% lượng saponin toàn phần

và cao hơn hàm lượng của hợp chất này trong sâm Nhật Bản từ 42-43 lần); là

thành phần chủ yếu tạo nên những tác dụng dươc lý đặc trưng của sâm Việt

Nam như tác dụng chống trầm cảm, giải lo âu, chống stress, …

Formatted: Bullets and Numbering

Hình 1.2.Sơ đồ phân loại các saponin trong thân rễ và rễ củ sâm Việt Nam

G-Rh5GRh1

Ome-V-R15 V-R12 V-R17 V-R18 V-R4V-R19 G-Re

V-R7 V-R22 V-R23 V-R24 V-R9 V-R8 V-R16V-R13 V-R20 V-R21 G-Rb1

V-R3 G-Rb2 G-Rb3 G-Rc G-Rd P-Rc1 Gy-IX Gy-XVII Q-R1 N-Fa M-F1

Dẫn xuất protopanaxadiol

Saponin cấu trúc ocotillol

P-RT4 M-R1 M-R2 V-R1 V-R2 V-R5

24 F11

(S)-P-Formatted: Bullets and Numbering

rễ củ sâm Việt Nam

Ghi chú: G: ginsenosid; P: pseudo-ginsenosid; Gy: gypenosid; Q: quinquenosid; N:

notoginsenosid; M: majonosid; V: vina-ginsenosid; *: các saponin chính

Hàm lượng phần trăm các chất tính trên khối lượng dược liệu khô kiệt

Các saponin dẫn chất của 20 (S)-protopanaxatriol

Bảng 1.2.Các saponin dẫn chất của 20 (S)-protopanaxtriol ở thân rễ và rễ củ

rễ củ sâm Việt Nam

Ghi chú: các saponin chính; Glc: β-D-glucopyranosyl; α-Glc: α-glucopyranosyl;

GlcA: β-D-glucoronopyranosyl; Rha: α-L-rhamnopyranosyl; Xyl: β-D-xylopyranosyl;

Ara: α-arabinopyranosyl; Ara(f): arabinofuranosyl; Ara(p):

α-L-arabinopyranosyl; Ac: acetyl Hàm lượng phần trăm các chất tính trên khối lượng

dược liệu khô kiệt

Glc-Glc-O2

V-R 19

OH Glc-O

O H

OR1

O H

C

R 1 = -H, R 2 = -CH 3

20 (S), 25-epoxydammarane-3 beta,

6 anpha, 12 beta, 24 (R) -tetrol (M)

Bảng 1.3.Các saponin có cấu trúc ocotillol ở thân rễ và rễ củ sâm Việt Nam

củ sâm Việt Nam

Formatted: Bullets and Numbering

-Glc2-Xyl

6 Glc

Bảng 1.4.Các saponin dẫn chất của acid oleanolic ở thân rễ và rễ củ sâm Việt

củ sâm Việt Nam

Ara (p)

Ghi chú: H: Hemslosid Hàm lượng phần trăm các chất tính trên khối lượng dược

liệu khô kiệt

1.2.2.2.Hợp chất polyacetylen

Đã phân lập và xác định được cấu trúc của 7 hợp chất polyacetylen gồm hai

hợp chất mới là 10-acetoxy-heptadeca-8(E)-en-4,6-diyn-3-ol (Pv2) và

heptadeca-1,8(E), 10(E)-trien-4,6-diyn-3,12-diol (Pv7); hai hợp chất chính là

panaxynol (Pv1; 0,0085%) và heptadeca-1,8 (E) dien-4,6 diyn-3,10 diol (Pv5;

0,0028%) có tác dụng độc tế bào và kháng ung thư; các hợp chất khác là đồng

phân và dẫn xuất của heptadeca-1,8 (E) dien-4,6 diyn-3,10 diol gồm Pv3, Pv4,

Pv6

1.2.2.3.Thành phần acid béo

Có 17 acid béo, trong đó có các acid béo chưa no quan trọng như acid linoleic,

acid linolenic, acid oleic chiếm hàm lượng cao

1.2.2.4.Thành phần acid amin

Có khoảng 18 acid amin được phân tích bằng kỹ thuật sắc ký, trong đó có đủ 8

acid amin cần thiết cho cơ thể

1.2.2.5.Thành phần các nguyên tố vi lượng

Có 20 nguyên tố vi lượng, trong đó có các nguyên tố vi lượng có tác dụng sinh

học quan trọng như Fe, Co, Se, Mn, K

1.2.2.6.Hợp chất sterol

- –sitosterol

- Daucosterol ( -sitosteryl-3-O- -D-glucopyranosid)

1.2.2.7.Hợp chất glucid (định lượng theo phương pháp Bertrand)

Bertrand)

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Bullets and Numbering

Độc tính cấp đường uống của bột chiết và saponin thô toàn phần Sâm Việt

Nam rất thấp Liều tối đa có thể sử dụng mà không có biểu hiện độc tính là: 34

g/kg (bột chiết) và 10,6 g/kg (saponin thô toàn phần)

Ở những liều điều trị, khi sử dụng dài ngày (trên 30 ngày), bột chiết Sâm Việt

Nam không biểu thị tác động có hại trên thể trọng, thành phần máu và chức

năng của gan, thận Chỉ số an toàn trong điều trị lớn hơn 1/20 LD50

1.2.3.2.Tác dụng trên hệ thần kinh trung ương

Sâm Việt Nam có tác dụng trên hệ thần kinh trung ương theo 2 hướng, tùy theo

liều sử dụng:

Liều thấp (10-100 mg/kg): kích thích nhẹ trên hệ thần kinh trung ương

Liều cao (trên 100 mg/kg): ức chế hệ thần kinh trung ương

1.2.3.3.Tác động tăng lực và hồi phục sức

Trong thử nghiệm chuột bơi theo phương pháp Brekhman, bột chiết Sâm Việt

Nam có tác động tăng lực rõ ở những liều nhỏ (từ 5-100 mg/kg), làm kéo dài

thời gian bơi của súc vật thử từ 22,1-86,3%

Khi dùng dài ngày, Sâm Việt Nam có tác dụng tăng lực ở cả liều nhỏ (50

mg/kg) lẫn liều cao (3 g/kg)

1.2.3.4.Tác động kháng viêm, giảm đau

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Bullets and Numbering

Bột chiết của Sâm Việt Nam có tác dụng giảm đau và kháng viêm mạnh hơn so

với bột chiết tam thất cùng liều và tương đương so với bột chiết sâm Triều

Tiên

1.2.3.5.Tác động nội tiết tố sinh dục

Sâm Việt Nam có tác động nội tiết tố sinh dục rõ rệt, tuy nhiên không mạnh

lắm khi so sánh với các kích thích tố sinh dục nam và nữ thiên nhiên

Sâm Việt Nam thể hiện tác dụng phòng chống xơ vữa động mạch qua việc:

+ Giảm hàm lượng cholesterol toàn phần, hàm lượng lipid toàn phần, hàm

lượng lipoprotein trong huyết thanh

Khi dùng chung với insulin, Sâm Việt Nam có tác dụng hiệp lực, kéo dài thời

gian hạ đường huyết khoảng 2-3 giờ so với khi dùng insulin riêng rẽ, ngoài ra

trị số đường huyết cũng ổn định và tốt hơn

1.2.3.8.Tác động kháng khuẩn

Sâm Việt Nam thể hiện tác dụng kháng khuẩn đặc hiệu trên các chủng vi khuẩn

Staphylococcus và Streptococcus gây bệnh viêm họng Đây là một trong những

tác dụng quan trọng của Sâm Việt Nam khi so sánh với Sâm Triều Tiên và một

số cây thuốc thuộc họ Araliaceae khác Tác dụng kháng khuẩn của Sâm Việt

Nam tương đương với một số kháng sinh thông dụng và không gây ảnh hưởng

lên hệ vi khuẩn lành tính ở đường ruột như một số kháng sinh

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Bullets and Numbering

1.2.3.9.Tác động trên chức năng gan

Bột chiết SVN có tác dụng bảo vệ tế bào gan tránh các kích thích của độc chất

như KMnO4, CCl4

1.2.3.10.Tác dụng trên trí nhớ

Bột chiết SVN liều 50 mg/kg và 100 mg/kg có tác dụng cải thiện trí nhớ trên

mô hình gây suy giảm trí nhớ bằng scopolamin liều 1 mg/kg trong cả 2 trường

hợp điều trị tức thời và điều trị dự phòng

Saponin SVN ở liều 50 mg/kg và 100 mg/kg (điều trị tức thời) cũng thể hiện

tác dụng cải thiện trí nhớ

1.2.3.11.Tác dụng chống ung thư

Trong thử nghiệm 2 giai đoạn chất sinh ung thư từ khối u tế bào gan chuột

dùng N-nitrosodiethylamine (DEN) và phenobarbital (PB), MR2 đã thể hiện

khả năng ngăn chặn sự phát triển khối u

1.2.3.12.Tác dụng giải lo âu

Trong mô hình thử nghiệm buồng tối sáng, MR2 liều 12,5 mg/kg (i.p) thể hiện

tác dụng giải lo âu tương tự diazepam liều 1 mg/kg (i.p)

Và một số tác dụng quan trọng khác:

Tác dụng chống oxy hóa

Tác dụng tương hỗ của những saponin triterpen SVN với hệ thống

monooxygenase ở gan chuột

Tác động sinh thích nghi (Adaptogen)

Tác dụng chống stress

Tác dụng chống trầm cảm

1 ĐẶT VẤN ĐỀ

Sâm Việt Nam (Panax vietnamensis Ha et Grushv Araliaceae) một loài sâm

mới trên thế giới được phát hiện ở núi Ngọc Linh (Kon Tum) vào năm 1973

Qua các công trình nghiên cứu cho thấy sâm Việt Nam là một loài sâm quý, có

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Bullets and Numbering

nhiều điểm tương tự sâm Triều Tiên về thành phần hóa học và tác dụng dược

quinquefolium L.), sâm Nhật (Panax japonicus C A Meyer), sâm tam thất

(Panax notoginseng Burk F.H Chen),…; ngoài ra, vì nhân sâm có tác dụng

bồi bổ nên các vị thuốc có tác dụng bổ dưỡng khác không phải là sâm chính danh cũng được gọi là sâm và tùy theo màu sắc hay xuất xứ của vị thuốc mà ta

có sâm bố chính, đảng sâm, đan sâm, huyền sâm

Hồng sâm là loại nhân sâm được chế biến theo phương pháp cổ truyền bằng cách hấp các củ sâm tươi ở nhiệt độ cao có hay không có áp suất trong khoảng 2-6 giờ tùy theo tài liệu Cách chế biến này đã mang lại cho hồng sâm các đặc điểm sau so với bạch sâm:

- Thể chất rắn hơn nên bảo quản lâu dài tốt hơn bạch sâm (do thành phần tinh bột bị hồ hoá một phần nên hoá sừng cứng chắc ít bị sâu mọt phá hoại)

- Về mặt hóa học, qua chế biến hồng sâm có chứa những ginsenosid mới không

có trong bạch sâm như ginsenosid-Rg3, G-Rg5, G-Rg6, G-Rh2, G-Rh3, G-Rh4, G-Rs3… Các thành phần mới này giúp tăng cường hoạt tính sinh học của hồng sâm với tác dụng phòng chống ung thư, kháng viêm, chống oxy hóa…Trong

đó, tinh chất G-Rg3 và G-Rh2 đã được nghiên cứu phát triển như một thuốc chống ung thư Các thành phần mới này giúp tăng cường hoạt tính sinh học của nhân sâm

- Về mặt tác dụng và công dụng: tính bổ dưỡng được tăng cường, tác dụng chữa bệnh tim mạch, thần kinh suy nhược, bệnh tiểu đường đã được chứng minh, và đặc biệt hơn là có thêm tác dụng phòng chống ung thư, kháng viêm và chống oxy hóa…

Do các biến đổi trên, trong hai dạng chế biến, hồng sâm được cho là tốt hơn, đắt tiền hơn và sử dụng phổ biến hơn bạch sâm Tóm lại, việc chế biến bạch sâm thành hồng sâm đã làm tăng tác dụng điều trị, hiệu quả và giá trị kinh tế của nhân sâm

Gần đây, các nhà nghiên cứu đã đưa ra một dạng bào chế mới từ nhân sâm là

“sun ginseng” Sun ginseng được bào chế tương tự hồng sâm nhưng ở nhiệt độ

cao hơn (120 oC) Các ginsenosid chính trong “sun ginseng” là G-Rg3, G-Rg5,

G-Rk1; trong đó, hàm lượng G-Rg3, G-Rg5 tăng lên nhiều lần so với hàm lượng

có trong hồng sâm, G-Rk1 là một ginsenosid mới Ngoài ra, trong “sun

ginseng” còn có các ginsenosid mới khác như G-Rk2, G-Rk3, G-Rs4, G-Rs5,

G-Rs6, G-Rs7 Các ginsenosid này có tác dụng giãn mạch, hạ huyết áp, chống kết

tập tiểu cầu, chống oxy hóa, chống ung thư, bảo vệ tế bào não… Các nhà khoa

học cũng đã nghiên cứu thành phần hóa học và tác dụng chống ung thư trên

Sâm Hoa Kỳ (Panax quinquefolium L.) đã chế biến và cũng đã có những kết

quả khả quan Sâm Hoa kỳ sau khi hấp ở 120 0C trong vòng 1 giờ và 120 0C từ

0,5-4 giờ cũng đã cho thấy sự thay đổi về thành phần hóa học, hàm lượng 5

Ginsenosid Rh1, Rg2, 20R-Rg2, Rg3 và Rh2 đã tăng [10,15]

Cần nhấn mạnh thêm thị trường nhân sâm trên thế giới rất lớn, lên đến hàng

trăm triệu đô la Mỹ mỗi năm, trong đó dạng hồng sâm và các chế phẩm từ hồng

sâm chiếm giá trị lớn nhất

Về thành phần hóa học, sâm Việt Nam có chứa hầu hết những ginsenosid chính

có trong sâm Triều Tiên như Rb1, Rb2, Rb3, Rc, Rd, Re,

G-Rg1, … Ngoài ra, sâm Việt Nam còn chứa các saponin có cấu trúc ocotillol

chưa tìm thấy ở sâm Triều Tiên, đặc biệt là hợp chất majonosid R2 với hàm

lượng lên đến 5,29% (chiếm khoảng một nữa hàm lượng saponin toàn phần)

Về tác dụng dược lý, sâm Việt Nam có những tác dụng tương tự sâm Triều

Tiên như bổ, tăng lực, sinh thích nghi, chống viêm, giảm đau, chống stress, …

Hiện nay, sâm Việt Nam chỉ mới được sử dụng dưới dạng phơi sấy khô như

bạch sâm và chưa có nghiên cứu nào công bố chính thức về thành phần hóa học

cũng như tác dụng dược lý của sâm Việt nam khi chế biến như hồng sâm Vấn

đề đặt ra là liệu khi chế biến sâm Việt Nam theo kiểu hồng sâm thì có những

thay đổi gì về thành phần hóa học và tác dụng dược lý của sâm Việt Nam hay

không Do vậy, chúng tôi thực hiện đề tài “Nghiên cứu sự thay đổi thành phần

hóa học saponin của Sâm Việt Nam (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) sau

Formatted: Space Before: 0 pt, After: 6 pt,

Line spacing: 1.5 lines

khi chế biến” nhằm mục tiêu chế biến sâm Việt Nam với phương pháp chế biến tương tự Hồng sâm để có một dạng dùng mới của sâm Việt Nam

2 TỔNG QUAN

2.1 Tổng quan cây sâm Việt Nam

2.1.1 Thực vật học [ 1 , 2 ]

Sâm Việt Nam hay còn gọi Sâm Ngọc Linh, Sâm Khu 5, tên khoa học: Panax

vietnamensis Ha et Grushv., thuộc họ Nhân sâm (Araliaceae) là một cây sâm quý

của nước ta, được phát hiện đầu tiên tại Ngọc Lây, huyện Đắc Tô, thuộc tỉnh Kon

Tum vào năm 1973 Các công trình nghiên cứu hệ thống về các mặt thực vật, sinh

thái, trồng trọt, hóa học, dược lý, lâm sàng đến nay đã xác định đây là một cây

sâm quý có thể so sánh với Nhân Sâm (Panax ginseng C.A Meyer), Sâm Hoa Kỳ

(Panax quinquefolium L.) và Tam Thất (Panax notoginseng Burk F.H Chen) Trên

cơ sở phân tích, định lượng thành phần saponin của các loài Panax, Osamu Tanaka

(1989) đã đưa ra bảng phân loại hóa học các loài Panax Theo đó thì sâm Việt Nam,

sâm Triều Tiên, sâm Hoa Kỳ, sâm ba lá được xếp vào cùng nhóm B1, là nhóm mà

hầu hết saponin thuộc khung damaran với số lượng và hàm lượng ginsenosid cao,

chỉ có 1 – 2 saponin olean với hàm lượng không đáng kể

Đặc điểm hình thái

Cây thảo sống nhiều năm, cao 40-60 cm, đôi khi trên 1m

Thân rễ nạc, đường kính từ 1-3,5 cm, chiều dài tùy số năm sinh trưởng, mọc bò

ngang như củ gừng, không phân nhánh, có nhiều đốt mang những vết sẹo do thân

khí sinh rụng hàng năm để lại, mặt ngoài màu nâu nhạt, ở trong trắng ngà, thân rễ

có nhiều rễ phụ, cuối thân rễ có rễ củ có dạng con quay, hình trụ, hình cầu hay có

Formatted: Font: Not Italic

Formatted: Bullets and Numbering

dạng ngoài như củ nhân sâm Đối với sâm thiên nhiên, thân rễ phát triển mạnh tạo thành nhiều đốt, mỗi đốt tương ứng với một năm tuổi; với sâm trồng bộ phận rễ củ phát triển hơn, từ một vị trí trên thân rễ có thể mọc ra nhiều rễ củ, dựa vào số lượng đốt hay số lượng rễ củ người ta có thể đoán được số tuổi của sâm

Thân khí sinh mảnh mọc thẳng đứng, màu xanh hoặc hơi tím, đường kính thân độ 5-8 mm, thường rụng hàng năm, thỉnh thoảng cũng tồn tại 2-3 thân trong vài năm

Lá kép hình chân vịt mọc vòng, thường là 3-5 ở ngọn thân Cuống lá kép dài 6-12

mm, mang 5 lá chét, lá chét ở chính giữa lớn hơn cả, có thể dài đến 15 cm, rộng 3-5

cm Lá chét có phiến hình trứng ngược, hình mác ngược hay hình bầu dục, mép khía răng cưa, chóp nhọn, có khi kéo dài thành mũi, gốc hình nêm, lá có lông ở cả hai mặt, gân bên 10 đôi hình lông chim, gân nhỏ hình mạng

Ở cây 4-5 năm tuổi, hoa là một tán đơn trên cuống, cuống tán hoa dài 10-20 cm có thể kèm 1-4 tán phụ hay một hoa riêng lẻ ở phía dưới tán chính Mỗi tán có 50-120 hoa, cuống hoa dài 1-1,5 cm, lá đài 5 hợp ở dưới thành hình chuông, cánh hoa 5, màu vàng lục nhạt, nhị 5, bầu 1 ô với 1 (2-3 ) vòi nhụy

Quả nang, màu đỏ tươi, có một chấm đen ở đỉnh, có 1-2 hạt hình thận, màu trắng hay vàng nhạt

Bộ phận dùng, thu hái, chế biến

Bộ phận dùng là thân rễ và rễ củ Có thể dùng lá

Thu hoạch vào mùa đông sau khi lá rụng để lại một vết sẹo ở đầu củ sâm Thường thu củ sau khi thu hạt để làm giống, nếu không thu hạt thì có thể thu củ khi cây ra

nụ Chỉ nên thu hoạch củ của những cây sâm đã 4-7 tuổi

Chế biến: Thân rễ và rễ củ sâm Việt Nam đào rửa sạch, phơi hoặc sấy khô dùng như nhân sâm Lá sâm phơi khô sắc nước uống

Phân bố, sinh thái

Sâm Việt Nam mọc hoang tại vùng núi Ngọc Linh (thuộc huyện Đắc Tô và Đắc Glây - tỉnh Kon Tum và huyện Trà My - tỉnh Quảng Nam) Tháng 10 năm 2006, sâm Việt Nam còn được phát hiện ở đỉnh núi Ngọc Lum Heo (Quảng Nam) Có một

số tài liệu khác ghi nhận sâm Việt Nam còn phân bố ở vùng núi Langbiang (thuộc

tỉnh Lâm Đồng)

Sâm Việt Nam là loại cây thảo đặc biệt ưa ẩm và ưa bóng Cây mọc ở độ cao

1500-2200 m, ở độ cao trên 1700 m cây mọc dày hơn, thành đám dưới tán rừng hỗn giao

có độ che phủ cao (có thể tới 80% hoặc hơn), ít dốc, dọc theo các suối ẩm, chỗ đất

có nhiều mùn Cây mọc đơn lẻ hay mọc thành đám nhỏ gồm nhiều cá thể ở các lứa

tuổi khác nhau Cây trồng bán tự nhiên dưới tán rừng ở độ cao 1800-1900 m ở Kon

Tum và Quảng Nam cho thấy nếu độ che phủ của rừng chỉ 40-50% thì có đến 90%

cây sâm trồng bị vàng lá và bị bệnh đốm lá, sự sinh trưởng và phát triển của cây

cũng kém hơn Một số nghiên cứu cho thấy thành phần hóa học và hàm lượng hoạt

chất trong sâm trồng tương tự với sâm thiên nhiên [3]

Sâm Việt Nam là cây sống nhiều năm nhưng phần thân mang lá (phần trên mặt đất)

tàn lụi hàng năm vào mùa đông, để lại một vết sẹo trên thân rễ Sâm Việt Nam sinh

trưởng mạnh trong mùa xuân – hè Chồi thân (ở đầu thân rễ) sẽ mọc lên vào giữa

tháng 2, cây ra hoa và kết quả khoảng từ tháng 3 đến tháng 10 Sau khi quả chín

rụng xuống đất, tồn tại qua mùa đông khoảng trên 4 tháng thì sẽ nảy mầm vào đầu

mùa xuân năm sau Sâm Việt Nam có khả năng tái sinh tự nhiên từ hạt rất tốt

2.1.2 Thành phần hóa học [ 5 , 6 , 7 ]

Trong các loài thuộc chi Panax, ngoài những chất thông thường như các đường, acid

béo, acid amin, nguyên tố vi lượng, hợp chất polyacetylen, …có một nhóm hợp chất có

tính đặc thù đó là saponin triterpen, gồm có saponin dammaran và saponin olean Các

saponin dammaran có giá trị chữa bệnh cao, được xem là tiêu chuẩn để đánh giá các

loài Panax Dựa vào cấu tạo của các genin tương ứng chia các saponin dammaran

thành 3 nhóm: 20 (S) protopanaxadiol, 20 (S) protopanaxatriol và ocotillol

Phần dưới mặt đất (thân rễ và rễ củ) sâm Việt Nam có chứa các hợp chất: saponin

triterpen, polyacetylen, acid béo, acid amin, nguyên tố vi lượng, hợp chất

sterol,…Tuy nhiên trong đó các hợp chất saponin là thành phần quan trọng, tiêu

biểu nhất đưa đến các tác dụng dược lý của sâm Việt Nam nói riêng và của các cây

trong họ Araliaceae nói chung như tác dụng bồi bổ, gia tăng chuyển hóa, tăng lực

chống nhược sức, sinh thích nghi Hàm lượng saponin toàn phần trong sâm Việt

Formatted: Bullets and Numbering

Nam từ 12-15% tính trên dược liệu khô (cao nhất trong các loài thuộc chi Panax đã

được nghiên cứu trên thế giới)

2.1.2.1 Hợp chất saponin

Năm 1976, J Lutomski và Nguyễn Thới Nhâm đã công bố lần đầu tiên về thành

phần saponin của Sâm Việt Nam Tiếp theo là các công trình nghiên cứu của

Nguyễn Minh Đức (1994, 1997) và Trần Lê Quan (2001) cho thấy trong thân rễ và

rễ củ sâm Việt Nam có chứa 52 hợp chất saponin, trong đó có 26 saponin đã biết và

26 saponin có cấu trúc mới được đặt tên là vina-ginsenosid-R1-R25 và

ginsenosid-Rh5 (hay 20-O-Me-G-Rh1)

Ngoài những saponin chính mà Sâm Triều Tiên có như G-Rb1, G-Rb2, G-Rb3,

G-Rc, G-Rd, G-Re, G-Rg1, … thì Sâm Việt Nam còn có những saponin của các loài

sâm khác như: sâm Hoa Kỳ (P-F11, Q-R1), sâm Nhật Bản (M-R1, M-R2), tam thất

Trung Quốc (N-Fa, N-R6)

Thành phần saponin trong sâm Việt Nam thuộc loại saponin triterpen, trong đó chủ yếu

là các saponin thuộc nhóm dammaran và một lượng nhỏ thuộc nhóm oleanan Hầu hết

các saponin đã biết được tìm thấy và phân lập từ các loài thuộc chi Panax, riêng

gypenosid XVII được phân lập lần đầu tiên ở loài Gynostemma pentaphyllum Makino,

Cucurbitaceae bởi Takemoto và cộng sự Một trường hợp ngoại lệ khác là hemsloside

Ma3 trước đây chỉ được tìm thấy từ một loài thuộc họ Cucurbitaceae – Hemsleya

macrosperma C.Y Wu., đây là lần đầu tiên tìm thấy từ một loài thuộc chi Panax

Điểm đặc biệt trong sâm Việt Nam là các saponin có cấu trúc vòng ocotillol có hàm

lượng lớn hơn nhiều so với các loài sâm khác (sâm Hoa Kỳ, sâm Nhật, tam thất) và

chưa tìm thấy ở sâm Triều Tiên Trong đó đáng chú ý là hợp chất M-R2 có hàm

lượng lớn (5,29%; chiếm khoảng 50% lượng saponin toàn phần và cao hơn hàm

lượng của hợp chất này trong sâm Nhật Bản từ 42-43 lần); là thành phần chủ yếu

tạo nên những tác dụng dươc lý đặc trưng của sâm Việt Nam như tác dụng chống

trầm cảm, giải lo âu, chống stress, …

Formatted: Bullets and Numbering

Hình 2.2 Sơ đồ phân loại các saponin trong thân rễ và rễ củ sâm Việt Nam

Các saponin dẫn chất của 20 (S)-protopanaxadiol

R1O

R2O OH

Ome-GRh1V-R15V-R12V-R17V-R18V-R4V-R19G-Re

V-R7V-R22V-R23V-R24 V-R9V-R8V-R16V-R13V-R20 V-R21 G-Rb1

V-R3 G-Rb2G-Rb3 G-Rc G-Rd P-Rc1 Gy-IX Gy-XVII Q-R1N-Fa M-F1

Dẫn xuất protopanaxadiol

Saponin cấu trúc ocotillol

P-RT4M-R1 M-R2 V-R1V-R2 V-R5

Formatted: Bullets and Numbering

Formatted: Portuguese (Brazil)

Ghi chú: G: ginsenosid; P: pseudo-ginsenosid; Gy: gypenosid; Q: quinquenosid; N:

notoginsenosid; M: majonosid; V: vina-ginsenosid; *: các saponin chính

Hàm lượng phần trăm các chất tính trên khối lượng dược liệu khô kiệt

Các saponin dẫn chất của 20 (S)-protopanaxatriol

Formatted: Bullets and Numbering

Ghi chú: các saponin chính; Glc: D-glucopyranosyl; α-Glc: α-glucopyranosyl; GlcA:

β-D-glucoronopyranosyl; Rha: L-rhamnopyranosyl; Xyl: β-D-xylopyranosyl; Ara:

α-arabinopyranosyl; Ara(f): α-L-arabinofuranosyl; Ara(p): α-L-α-arabinopyranosyl; Ac:

acetyl Hàm lượng phần trăm các chất tính trên khối lượng dược liệu khô kiệt