xây dựng qui trình công nghệ sản xuất chế phẩm sinh học từ nguyên sinh động vật (protozoa) để phòng trừ nhóm sâu hại rau màu (sâu ăn tạp, sâu xanh…) cho vùng rau an toàn tp. cần thơ

Biểu B1-2-TMĐTKHCN THUYẾT MINH ĐỀ TÀI (Kèm theo Quyết định số /2007/QĐ-UBND ngày tháng Ủy ban nhân dân thành phố Cần Thơ) năm 2007 B1-2-TMĐTKHCN THUYẾT MINH ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ1 I THÔNG TIN CHUNG VỀ ĐỀ TÀI Tên đề tài: Xây dựng qui trình cơng nghệ sản xuất chế phẩm sinh học từ nguyên sinh động vật (Protozoa) để phịng trừ nhóm sâu hại rau màu (Sâu ăn tạp, sâu xanh…) cho vùng rau an toàn Tp Cần Thơ Thời gian thực hiện: 24 tháng (Từ tháng 10/2008 đến tháng 10/2010 Mã số (được cấp Hồ sơ trúng tuyển) Cấp quản lý Thành phố Cần thơ Kinh phí: Bốn trăm hai mƣơi tám triệu, tám trăm bảy chục ngàn đồng; Nguồn Tổng số - Từ ngân sách nghiệp khoa học 462.068,5 - Từ nguồn tự có tổ chức: 295.209.800 (Máy móc thiết bị từ dự án NEDO-VN điện nước, xe lại, nhà lưới, khu ruộng thí nghiệm ) - Từ nguồn khác Thuộc Chƣơng trình (Ghi rõ tên chương trình, có), Mã số: Thuộc dự án KH&CN; Đề tài độc lập; Lĩnh vực khoa học Tự nhiên; Nông, lâm, ngư nghiệp; Kỹ thuật công nghệ; Y dược Bản Thuyết minh dùng cho hoạt động nghiên cứu ứng dụng phát triển công nghệ thuộc lĩnh vực khoa học nêu mục Thuyết minh Thuyết minh trình bày in khỗ A4 Chủ nhiệm đề tài Họ tên: Trần Văn Hai Ngày, tháng, năm sinh: 02-03-1955 Nam/ Nữ: Nam Học hàm, học vị: Phó Giáo sư, Tiến sĩ Chức danh khoa học: Giảng Viên Chính Chức vụ P Trưởng Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật Điện thoại: Tổ chức: 071 0832 290 Nhà riêng: 071 0833 483 Fax: 071 0830 814 E-mail: tvhai@ctu.edu.vn Mobile: 0913 675024 Tên tổ chức công tác: Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật Địa tổ chức: Khoa Nông Nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng, Đại Học Cần Thơ, Khu 2, đường Ba Tháng Hai, Tp Cần Thơ Địa nhà riêng: số 141, Lý Tự Trọng,Tp Cần Thơ Thƣ ký đề tài Họ tên: Phạm Kim Sơn Ngày, tháng, năm sinh: 13-09-1972 Nam/ Nữ: Nam Học hàm, học vị: Thạc sĩ Nông học Chức danh khoa học-chức vụ: Giảng Viên Điện thoại tổ chức: 0710 832290, Mobile: 0989 224329 Fax: 0710 830814 E-mail: pkson@ctu.edu.vn Tên tổ chức công tác: Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật Địa tổ chức: Khoa Nông Nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng, Đại Học Cần Thơ, Khu 2, đường Ba Tháng Hai, Tp Cần Thơ Địa nhà riêng: 108G/5/3 khu vực 5, P An Bình, Q Ninh Kiều, Tp Cần Thơ Điện thọai nhà riêng: 0710 914758 10 Tổ chức chủ trì đề tài Tên tổ chức chủ trì đề tài: Trường Đại Học Cần Thơ Điện thoại: 0710 838237 Fax: 0710 838474 E-mail: Nguyen Anh Tuan ; Website: ctu.edu.vn Địa chỉ: đường tháng 2, khu 2, Tp Cần Thơ Họ tên thủ trưởng tổ chức: Nguyễn Anh Tuấn, Hiệu Trưởng Tên tài khoản: Trường Đại Học Cần Thơ Số tài khoản: 011.100.0055 447 Ngân hàng: Ngân hàng ngoại thương VietComBank-Chi nhánh Cần Thơ Tên quan chủ quản đề tài: Sở Khoa Học & Công Nghệ Tp Cần Thơ 11 Các tổ chức phối hợp thực đề tài (nếu có) Tổ chức 1: Tên quan: Khoa khoa học nguồn lực sinh học, Đại học Nihon Địa chỉ: 1866 Kameino, Fujisawa, Nhật Bản Họ tên thủ trưởng tổ chức: Hidetoshi Iwano Tổ chức : Tên quan : Trung tâm Khuyến nông Tp Cần Thơ Điện thoại: 0710 820783, 823 491 Địa chỉ: 4, Ngô Hữu Hạnh, Tp Cần Thơ Họ tên thủ trưởng tổ chức: Hà Anh Dũng Các cán thực đề tài (Ghi người có đóng góp khoa học chủ trì thực nội dung thuộc tổ chức chủ trì tổ chức phối hợp tham gia thực đề tài, không 10 người kể chủ nhiệm đề tài) 12 Họ tên, học hàm học vị PGs Ts Trần Văn Hai Ths Phạm Kim Sơn Tổ chức công tác Nội dung công việc tham gia Thời gian làm việc cho đề tài (Số tháng) Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật - ĐHCT Chủ nhiệm 24 Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật - ĐHCT Nghiên cứu viên đề tài 24 Thư ký Ts Lê Văn Vàng Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật - ĐHCT Nghiên cứu viên 24 Ks Trịnh Thị Xuân Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật - ĐHCT Nghiên cứu viên 24 Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật - ĐHCT Nghiên cứu viên, Ks Nguyễn T Diệu Hương Kế tóan 24 Thủ quỹ Ths Hà Anh Dũng Trung tâm Khuyến nông Tp Cần Thơ Nghiên cứu viên 12 Cán địa phương Phịng Kinh tế quận Bình Thủy Điều tra, theo dõi thí nghiệm đồng ruộng, tổ chức hội thảo 12 Phòng Kinh tế huyện Phong Điền Điều tra, theo dõi thí nghiệm đồng ruộng, tổ chức hội thảo 12 Đại học Nihon Phân loại, nghiên cứu Yến Cán địa phương Hidetoshi Iwano II MỤC TIÊU, NỘI DUNG KH&CN VÀ PHƢƠNG ÁN TỔ CHỨC THỰC HIỆN ĐỀ TÀI 13 Mục tiêu đề tài ( B¸ m s ¸ t cụ thể hố định hướng mục tiêu theo đặt hàng - có) +Mục tiêu chung: -Tạo sản phẩm rau màu an toàn, đáp ứng nhu cầu tiêu dùng ngày cao nhân dân -Thay dần thói quen sử dụng thuốc hóa học độc hại thuốc sinh học không độc hại cho người môi trường sản xuất nông nghiệp +Mục tiêu riêng: -Tìm lồi Protozoa chun biệt cho loài sâu hại rau (cải xà lách, cải bẹ xanh, cải vún, cải bông, cải bắp…) màu (đậu xanh, đậu nành loại đậu khác…) -Ứng dụng đồng ruộng để trừ nhóm sâu ăn hại rau màu (chọn nhứt ba đối tượng, tùy theo kết thu mẫu thực tế: sâu ăn tạp, sâu xanh sâu nhiếu đọt ) - Đánh giá hiệu lực Protozoa sâu hại rau màu như: sâu ăn tạp, sâu xanh -Xây dựng quy trình sản xuất dạng chế phẩm sinh học từ nguyên sinh động vật (Protozoa) thiết bị đại Nhật viện trợ dự án NEDO-VN (Phát triển chế phẩm sinh học Việt Nam) có chất lượng tương đương với sản phẩm nước ngồi (NoLoc® đạt 108spore/mL Mỹ) 14 Tình trạng đề tài Mới Kế tiếp hướng nghiên cứu nhóm tác giả Kế tiếp nghiên cứu người khác 15 Tổng quan tình hình nghiên cứu, luận giải mục tiêu nội dung nghiên cứu Đề tài 15.1 Đánh giá tổng quan tình hình nghiên cứu thuộc lĩnh vực Đề tài Ngoài nƣớc (Phân tích đánh giá cơng trình nghiên cứu có liên quan kết nghiên cứu lĩnh vực nghiên cứu đề tài; nêu bước tiến trình độ KH&CN kết nghiên cứu đó) -Protozoa nguyên sinh động vật đơn bào, có khả sống ký sinh đường ruột sâu non, làm sâu biếng ăn chết (Iwano Hidetoshi, 2005) Đây loài vi sinh vật nghiên cứu nước tiên tiến năm gần Nhật, Do Thái, Mỹ, Châu Âu… chun biệt nhóm trùng cánh vảy Lepidoptera, khơng ảnh hưởng đến động vật máu nóng trùng có ích khác - Thời gian protozoa ký sinh đường ruột sâu non tùy thuộc vào giai đoạn protozoa xâm nhập vào ký chủ tùy thuộc vào mật số protozoa có ruột non tích lũy đủ mật số, bào tử phóng thích ngồi mơi trường, giai đoạn sâu non bị chết -Loài nguyên sinh động vật Nosema spp lồi nằm nhóm trùng vi bào tử, thuộc họ Microsporidae, Protozoa, ký sinh gây bệnh cho trùng Nhưng, lồi Nosema có tính chuyên biệt, tức gây bệnh cho lồi trùng (Trần Văn Mão, 2002) Hiện có nhiều lồi Nosema gây bệnh cho côn trùng phát cụ thể như: Nosema heliothidis, phát ông Lutz Splendore (1904) Brazil, ly trích từ sâu đục thân bắp Kramer (1959) phát Nosema hai loài Helicoverpa zea Helicoverpa virescens hại bắp Loài Nosema heliothidis gây bệnh cánh đồng trồng bắp quần thể sâu H zea khu vực phía đơng nước Mỹ, Mississippi suốt năm 1978 Vì lồi Nosema spp xem tác nhân sinh học tiên tiến có triển vọng lớn việc phòng trừ lồi trùng gây hại trồng thuộc cánh vảy - Loài Nosema bombycis gây bệnh cho loại trùng thuộc nhóm cánh vẩy như: Bombyx mori, Spodoptera litura, Lymantria dispar japonica,… ( Hayasaka Yonemura, 2000) Trong nƣớc (Phân tích, đánh giá tình hình nghiên cứu nước thuộc lĩnh vực nghiên cứu đề tài, đặc biệt phải nêu cụ thể kết KH&CN liên quan đến đề tài mà cán tham gia đề tài thực Nếu có đề tài chất thực cấp khác, nơi khác phải giải trình rõ nội dung kỹ thuật liên quan đến đề tài này; Nếu phát có đề tài tiến hành mà đề tài phối hợp nghiên cứu cần ghi rõ Tên đề tài, Tên Chủ nhiệm đề tài quan chủ trì đề tài đó) Đây đề tài nghiên cứu mới, chưa thấy tác giả hay Viện-Trường khác nghiên cứu Protozoa Hiện nay, việc việc sử dụng chế phẩm có nguồn gốc sinh học cịn đối nơng dân, chế phẩm thị trường; ngoại trừ chế phẩm có nguồn gốc từ vi khuẩn Bacillus thurigiensis chế phẩm có nguồn gốc virút NPV (Nucleotid Polyhydrosis Virus) Nơng dân ngại sử dụng thuốc sinh học tác dụng diệt sâu hại chậm, phối hợp với chế phấm khác có nguồn gốc kháng sinh Đề tài bắt đầu tiến hành vào tháng 6/2007 Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật, Khoa Nông Nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng, Trường Đại Học Cần Thơ; với mục đích điều tra sơ để nghiên cứu ký chủ Protozoa gây hại lồi trùng hại rau màu quanh thành phố Cần Thơ Kết sơ khởi tìm tác nhân sinh học Protozoa Microsporidia ký sinh đường ruột sâu ăn tạp Spodoptera litura Sinh viên Huỳnh Nguyễn Minh Trí thực hiện, lớp Trồng Trọt khóa 29 Chủ nhiệm đề tài: TrầnVăn Hai 15.2 Luận giải việc đặt mục tiêu nội dung cần nghiên cứu Đề tài Để tìm lồi Protozoa chuyên biệt cho loài sâu hại rau màu, phù hợp với điều kiện tự nhiên địa phương có khả khống chế dịch hại Đối tượng cần phải nghiên cứu thật tỉ mĩ, nghiêm túc, theo trình tự khoa học, phải có tính an tồn cao sinh vật có ích, người mơi trường Do đó, đề tài cần có hợp tác nhân lực hỗ trợ trang thiết bị đại, phù hợp với khoa học cơng nghệ tiên tiến Qui trình cần qua bước: Điều tra phát đối tượng nghiên cứu, ly trích khỏi ký chủ, chủng nhiễm trở lại ký chủ, nhân nuôi tăng sinh khối, khảo nghiệm độ hiệu phịng thí nghiệm, nhà lưới, cuối đưa thực tế đồng ruộng, khảo nghiệm tính an tồn sinh vật có ích, động vật máu nóng thủy sản Liệt kê danh mục cơng trình nghiên cứu, tài liệu có liên quan đến đề tài trích dẫn đánh giá tổng quan Chu Thị Thơm, Phan Thị Lài, Nguyễn Văn Tó 2006 Phịng trừ sâu hại cơng nghệ vi sinh NXB Lao động Hà Nội Phạm Thị Thùy 2004 Công nghệ sinh học bảo vệ thực vật NXB Đại học Quốc gia Hà Nội Hidetoshi Iwano and Ren Ishihara 1991 Dimorphism of Spores of Nosema spp in Cultured Cell Journal of Invertebrate Pathology 57, 211 - 219 Lê Thị Sen 1999 Giáo trình trùng nơng nghiệp Tủ sách Đại học Cần Thơ Syoji Hayasaka and Naoyuki Yonemura 2000 Infection and Development of Nosema sp NIS H5 (Microsporidae: Protozoa) in Several Lepidopteran Insects Department of Sericulture, National Institute of Sericultural and Entomological Science (Tsukuba, Ibaraki, 305 - 0851 Japan) 16 Trần văn Mão 2002 Sử dụng trùng vi sinh vật có ích, Tập II NXB Nông nghiệp Hà Nội Trang 108 - 112 Võ Thị Thương Lan 2007 Sinh hoc phân tử tế bào ứng dụng Giáo trình, NXB Giáo dục, 191 trang 17 Nội dung nghiên cứu khoa học triển khai thực nghiệm Đề tài phƣơng án thực hiện: Nội dung 1: Điều tra, thu thập mẫu trứng & ấu trùng sâu hại rau nhiễm Protozoa ruộng nông dân biện pháp thủ công (6 tháng) -Thu thập mẫu sâu chết loài loại rau màu khác (Cải bẹ xanh, cải vún, cải ngọt, xà lách, cải bắp, cải bông, đậu xanh, đậu nành, đậu cô ve…) vào thời điểm sâu gây hại quan trọng để tìm nguồn Protozoa địa phương (Bình Thủy Phong Điền), trung bình tuần/lần, chọn 3-5 ruộng cố định/địa bàn -Xác định triệu chứng đặc trưng, tuổi sâu, tỉ lệ nhiễm Protozoa tự nhiên Nội dung 2: Thu thập mẫu thành trùng nhiễm Protozoa ruộng rau bẫy hấp dẫn giới tính Pheromone (12 tháng) -Đặt bẩy pheromone hấp dẫn thành trùng loài loại rau khác liên tục năm, thay mồi pheromone tháng, thu mẫu định kỳ hàng tuần để xác định khả thành trùng nhiễm Protozoa theo mùa -Pheromone cung cấp phía đối tác Nhật Bản, bẩy/địa bàn Nội dung 3: Nghiên cứu phịng thí nghiệm (8 tháng) -Phân lập lồi Protozoa có tính độc cao: ly trích, tách lọc, nhuộm màu, xác định qua kính hiển vi huỳnh quang, kính hiển vi điện tử qui trình Koch -Áp dụng qui trình cơng nghệ cao phân tích ADN, kỹ thuật PCR để xác định loài Protozoa ký sinh chuyên biệt loài sâu hại -Xác định tính độc LD50, LC50; thời gian gây chết LT50 -Đánh giá độ hữu hiệu loài sâu hại độ tuổi khác công thức Abbott Nội dung 4: Thí nghiệm nhà lƣới (6 tháng) -Các lồi Protozoa gây bệnh cao phịng thí nghiệm xác định trở lại loài dịch hại trồng điều kiện nhà lưới -Bố trí thí nghiệm nhiều dãy nồng độ khác 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109 lên ấu trùng sâu để xác định độ hữu hiệu công thức Abbott -An toàn sinh học thiên địch (bọ rùa, ong, ruồi có ích), động vật thủy sinh (cá đồng) động vật máu nóng (chuột) Nội dung 5: Thí nghiệm ngồi đồng (12 tháng) -Thí nghiệm diện hẹp có lập lại (5TN): Các lồi Protozoa có hiệu cao nhà lưới chọn lọc để phun lên trồng bình phun phỗ biến nơng dân nồng độ hợp lý diện tích 25-30m2 (cho lần lập lại) Đánh giá hiệu sinh học công thức Henderson-Tilton, khả tồn môi trường, so sánh suất, hiệu kinh tế so với đối chứng Thí nghiệm bố trí theo thể thức khối hồn tịan ngẫu nhiên, lần lập lại, đối chứng khơng xử lý -Thí nghiệm diện rộng (5TN): Các lồi Protozoa có hiệu cao phun diện tích định (500-1000 m2) để so sánh với ruộng nơng dân áp dụng thuốc hóa học Thí nghiệm bố trí khơng lập lại, so sánh suất, hiệu kinh tế so với đối chứng nơng dân Nội dung 6: Xây dựng qui trình sản xuất thử chế phẩm (4 tháng) -Kỹ thuật tạo sinh khối -Đóng chai sản phẩm dạng dung dịch -Bảo quản sản phẩm: thời gian, chất phụ, khả tồn trữ điều kiện bình thường -Kiểm tra chất lượng, đảm bảo khả diệt sâu điều kiện đồng ruộng Nội dung 7: Tập huấn & Hội Nghị (3 tháng) -Tập huấn nông dân đánh giá kết thực tế đồng ruộng kỳ cuối kỳ -Dự hội nghị nước nước đến cuối kỳ -Viết báo cáo, tổ chức hội nghị khoa học tổng kết cuối kỳ -Nghiệm thu tổng kết đề tài 18 Cách tiếp cận, phƣơng pháp nghiên cứu, kỹ thuật sử dụng (Luận rõ cách tiếp cận vấn đề nghiên cứu, thiết kế nghiên cứu, phương pháp nghiên cứu, kỹ thuật sử dụng gắn với nội dung đề tài; so sánh với phương pháp giải tương tự khác phân tích để làm rõ tính mới, tính độc đáo, tính sáng tạo đề tài) Cách tiếp cận: -Phỏng vấn nhanh nông dân để tìm hiểu dịch hại rau, tác nhân sinh học gây chết sâu hại rau để thu mẫu sâu nhiễm bệnh Protozoa -Tham khảo liệu có sẵn Trung Tâm Học Liệu ĐHCT, truy cập thông tin Internet địa đáng tin cậy Trường đại học, Viện nghiên cứu sinh học ngồi nước -Trao đổi thơng tin trực tiếp với phía đối tác Nhật Bản Phương pháp nghiên cứu, kỹ thuật sử dụng: -Dùng phần mềm Excel để thống kê số liệu, vẽ biểu đồ -Phân tích thống kê phần mềm MSTATC, IRRISTAT -Dùng chất hấp dẫn sinh học (Sex pheromone) đặt vào bẫy dính để thu mẫu loài dịch hại chuyên biệt -Phân loại Protozoa dựa hình thái, phản ứng sinh hóa, qui trình nhuộm mẫu Giemsa, quan sát qua kính hiển vi quang học, kính hiển vi huỳnh quang điện tử Sử dụng phương pháp phân tích ADN, kỹ thuật PCR để xác định loài -Dùng phần mềm POLO-PC, 1978 để xác định giá trị LD50, LC50, LT50 Tính mới, tính độc đáo, tính sáng tạo: Tại Việt Nam, chưa tìm thấy tác giả nghiên cứu để ứng dụng Protozoa vào thực tế sản xuất, đề tài hoàn toàn 19 Phƣơng án phối hợp với tổ chức nghiên cứu sở sản xuất nƣớc (Trình bày rõ phương án phối hợp: tên tổ chức phối hợp tham gia thực đề tài nội dung công việc tham gia đề tài, kể sở sản xuất người sử dụng kết nghiên cứu; khả đóng góp nhân lực, tài chính, sở hạ tầng-nếu có) : -Trung tâm Khuyến nơng Cần Thơ cử cán tham gia điều tra thu mẫu thực thí nghiệm đồng ruộng, đồng thời đánh giá kết nghiên cứu -Phòng kinh tế quận Bình Thủy huyện Phong Điền cử cán tham gia thí nghiệm, tổ chức hội thảo đầu bờ để giới thiệu chuyển giao qui trình áp dụng cho nơng dân vùng trồng rau an toàn thuộc thành phố Cần Thơ 20 Phƣơng án hợp tác quốc tế (nếu có) (Trình bày rõ phương án phối hợp: tên đối tác nước ngoài; nội dung hợp tác- đối tác có hợp tác từ trước; nội dung cần hợp tác khuôn khỗ đề tài; hình thức thực Phân tích rõ lý cần hợp tác dự kiến kết hợp tác, tác động hợp tác kết Đề tài ) Trường đại học Nihon Nhật Bản: -Hỗ trợ hợp chất pheromone để xử dụng công việc thu mẫu định kỳ hàng tuần -Phân loại, xác định đến tên loài, chủng Protozoa -Cung cấp thơng tin khoa học -Hỗ trợ loại hóa chất đặc biệt cho công việc tách lọc, tinh sạch, nhân sinh khối, bảo quản Protozoa 21 Tiến độ thực Các nội dung, công việc chủ yếu cần đƣợc thực hiện; mốc đánh giá chủ yếu 1 Kết phải đạt Thời gian (bắt đầu, kết thúc) Cá nhân, tổ chức thực hiện* Nội dung (Triệu đồng) 15 Tháng thứ 1-6 -Điều tra thu mẫu nắm tình hình dịch hại, sử dụng nông dược Chọn khu vực trồng rau tiêu biểu quận Bình Thủy huyện Phong Điền Phản ảnh thực tế Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật – ĐHCT -Phân tích thống kê, tổng hợp kết Kết luận có hệ thống, xác, mang tính khoa học Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật ĐHCT -Thu thập mẫu trứng & ấu trùng sâu hại rau nhiễm Protozoa biện pháp thủ cơng: Chọn 3-5 Tìm tác nhân gây hại (dịng Bộ Mơn Bảo Vệ Thực Vật – ĐHCT Phịng Kinh tế quận Bình Thủy & Phong Điền Dự kiến kinh phí ruộng cố định khơng xịt thuốc hóa học/địa bàn Phịng Kinh tế quận Bình Thủy & Phong Điền -Phân tích thống kê, tổng hợp kết Protozoa) sâu ăn tạp, sâu xanh… Kết luận có hệ thống, xác, mang tính khoa học Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật ĐHCT Nội dung 15 Tháng thứ 4-12 -Thu thập mẫu thành trùng nhiễm Protozoa bẫy hấp dẫn giới tính Pheromone Đặt bẫy trên/địa bàn Thu mẫu thành trùng sống hàng tuần; đem phịng thí nghiệm phân tích tỉ lệ nhiễm Bộ Mơn Bảo Vệ Thực Vật ĐHCT -Phân tích thống kê, tổng hợp kết Tìm tác nhân gây hại (dòng Protozoa) sâu ăn tạp, sâu xanh… Kết luận có hệ thống, xác, mang tính khoa học Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật ĐHCT Nội dung -Nghiên cứu phịng thí nghiệm: phân loại, tạo thức ăn nhân tạo, đặc tính sinh học, qui trình Koch -Qui trình nhân ni, tạo sinh khối Protozoa -Phân tích thống kê, tổng hợp kết Xác định LC50, LD50, (5-7 thí nghiệm) -Thuê chuyên gia khảo nghiệm độ an toàn chế phẫm sinh học thiên địch, đơng vật máu nóng Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật ĐHCT LT50 Đảm bảo chất lượng Kết luận có hệ thống, xác, mang tính khoa học Nội dung -Thí nghiệm nhà lưới đánh giá độ hữu hiệu sản phẩm 100 Tháng thứ 4-12 Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật ĐHCT 80 Tháng thứ 6-12 Tìm nghiệm thức tối ưu Bộ Mơn Bảo Vệ Thực Vật ĐHCT Đánh giá độ an toàn Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật – Bộ Môn Thú Y thủy sản (Tổ bệnh lý học), (8-10 thí nghiệm) ĐHCT -Phân tích thống kê, tổng hợp kết Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật ĐHCT - Nghiệm thu, báo cáo kỳ, chuẩn bị cho thí nghiệm ngồi đồng Kết luận có hệ thống, xác, mang tính khoa học Chọn nồng độ thích hợp để phịng trị sâu ăn tạp, sâu xanh… Bộ Mơn Bảo Vệ Thực Vật ĐHCT Nội dung -Thí nghiệm ngồi đồng: (tổng cộng 8-10 mơ hình thí nghiệm mùa mưa nắng) -Tập huấn nông dân đánh giá kết thực tế đồng ruộng giũa kỳ -Phân tích thống kê, tổng hợp kết quả, viết báo cáo Bộ Mơn Bảo Vệ Thực Vật – ĐHCT Tìm nghiệm thức tối ưu Phịng Kinh tế quận Bình Thủy & Phong Điền Kết luận có hệ thống, xác, mang tính khoa học Nội dung Bộ Mơn Bảo Vệ Thực Vật ĐHCT Đạt yêu cầu kỹ thuật, theo -Đóng chai sản phẩm dạng dung tiêu chuẩn dịch, bảo quản, khả tồn trữ qui định điều kiện phòng chế phẩm vi -Kiểm tra chất lượng, đảm bảo khả sinh vật diệt sâu điều kiện đồng ruộng Nội dung -Tập huấn nông dân đánh giá kết thực tế đồng ruộng cuối kỳ 30 Tháng thứ 20-23 -Kỹ thuật tạo sinh khối 70 Tháng thứ 8-20 Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật – ĐHCT 70 Tháng thứ 22-24 Phỗ biến kỹ thuật cho nông dân 10 ĐHCT TT Khuyến nông Thuê chuyên gia giám định mẫu sâu hại, thiên địch, động vật, cá Mẫu protozoa gửi nƣớc mẫu x 1.000.000 đ/mẫu= 8.000.000đ 8.000 Thuê chuyên gia khảo nghiệm độ an toàn chế phẫm sinh học thiên địch (6 thí nghiệm), đơng vật máu nóng (2 TN) thủy sản (2 TN): 10 thí nghiệm x 5.000.000đ= 50.000.000đ 50.000 Xây dựng đề cƣơng tổng quát chi tiết dự án Hội thảo tập huấn cán NN nông dân (1 lớp kỳ lớp cuối kỳ) 00 lớp x 2.860.000đ= 72 000đ 72 Cn g : é   160.720 Chỉ dự toán đề tài phê duyệt (theo Thông tư số 93/2006/TTLT/BTC-BKHCN) Ghi chú: -Cán phịng thí nghiệm: Ni sâu sạch, chế biến thức ăn nhân tạo cho sâu, nhuộm mẫu kiểm tra protozoa, ly tâm, tách lọc, nhân nuôi sinh khối, rửa trùng dụng cụ thí nghiệm hàng ngày, bố trí thí nghiệm phịng nhà lưới… -Kỹ sƣ đồng ruộng: Điều tra, thu mẫu sâu nhiễm protozoa, bố trí thí nghiệm đồng ruộng, phun xịt thuốc, thăm đồng, lấy mẫu, đánh giá kết trước sau phun thuốc, thu kết suất… -Cán kỹ thuật địa phƣơng: hướng dẫn địa phương thu mẫu sâu, với kỹ sư đồng ruộng bố trí thí nghiệm đồng ruộng, thăm đồng, lấy mẫu, tổ chức tập huấn nông dân địa phương 17 Khoản Nguyên vật liệu, lƣợng CHIẾT TÍNH CHI PHÍ VẬT TƢ CHỦ YẾU DÙNG CHO THÍ NGIỆM NGHIÊN CỨU (1.000 m2 / mơ hình) Đơn vị: x 1000 đ TT Nội dung Đơn vị đo Số lƣợng Nguồn vốn Đơn giá Thành tiền Tæ g s è n 2.1 Mướn đất m2 1.000 2.000 2.2 m2 1.000 2.000 2.3 Cày, bơm nước, làm cỏ, phun thuốc, thu họach Giống Kg 0.5 600 300 2.4 Phân hoá học Kg 50 25 1.250 2.5 Phân chuồng Tấn 1.5 150 225 Phân vi sinh phân bón Lít 30 120 2.6 2.7 Thuốc BVTV loại Lít 1.5 150 Tự có SNKH 225 18 Trong đó, khốn chi theo quy định* Nă thứ n hất* m Tro ng ú, kho ỏn chi the o quy n h* Nă thứ hai* m Trong đó, khốn chi theo quy định * Nă thứ m ba* 10 Kh ỏc 11 12 Trong đó, khốn chi theo quy định * 2.8 Màng phủ nơng nghiệp Mét 2.9 Trichoderma bón đất Kg 450 1,5 675 100 200 Cộng: Cộng chung 10 thí nghiệm x 6.995.000đ = 6.995 69.950 * Chỉ dự toán đề tài phê duyệt(theo Thông tư số 93/2006/TTLT/BTC-BKHCN) 19 Khoản Thiết bị, máy móc, hóa chất, dụng cụ mau hỏng… Đơn vị: x 1000 đ TT Nội dung Mục c hi Đơn vị đo Số lƣợng Đơn giá Nguồn vốn Thành tiền Tự có SNKH Tỉ g n I Nồi trùng ướt (Laboratory autoclave SANYO MSL-3780) Tủ lạnh (Pharmaceutial refrigerator SANYO MPR-513 ) Tủ đông (Biomedical freezer SANYO MDF-U537) Tủ cực đông (CFC-Freeultra-low temperature freezer SANYO MDF-192) Tủ úm lạnh (Cooled incubator SANYO MIR-553) Tủ cấy (Bio-clean benche SANYO MCV-B131F) Kính hiển vi tương phản pha (Phasecontrast microscope OLYMPUS BX51N-33-PH) Máy ảnh kỹ thuật số dùng cho kính hiển vi (Digital microscopre camera OLYMPUS DP20-C) Máy ly tâm lạnh cao tốc (High speed refigerated centrifuge HITACHI CR21G II) 101.787 203.577 77.754 77.754 53.721 107.442 107.442 107.442 99.070 189.140 185.197 185.197 143.572 143.572 95.643 95.643 269.892 269.892 20 Nă thứ hai* m 10 11 12 Nă m thứ ba* Thit b hin cú tham gia thực đề tài (chỉ ghi tên thiết bị giá trị cịn lại, khơng cộng vào tổng kinh phớ ca Khon 3) Nă thứ n hÊt* m Khác 10 Rotor cố định góc (Fixed 96.390 angle rotor HITACHI R12A6) Pheromone, bẫy nhựa (Chuyên gia Nhật mang sang VN) Cộng khấu hao dụng cụ, máy móc cho năm sử dụng (khơng tình vào dự án) Tổng số (1.476.047)x2/10 96.390 295.209,8 II Hóa chất phịng thí nghiệm -Cồn khử trùng Lít 15 30 -Nước cất trùng Lít 10 50 -Methyl p-Hydroxybenzoate chống mốc thức ăn nhân tạo cho sâu non kg 0,2 800 160 -Đường đơn hóa học: kg + Glucose 0,3 950 285 +Lactose 0,3 1.176 352.8 + Maltose 0,1 2.680 268 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,02 10 1.760 290 990 630 2.620 19.950 1.620 3.850 38.5 352 58 198 126 524 119.7 32.4 77 192.5 -Các lọai hóa ly tâm vi sinh vật, ly trích ADN, chạy PCR + Proteinase K + Cồn Tuyệt đối + hợp chất PCI + Primer + dNTPs mix + Pecoll + Buffer (Tris-bazo, Tris-HCl) + Tag polymerase + Agarose gr lít lít ml ml ml kg 500U gr 21 -Ethyl acetate giết côn trùng ml 10 50 -Formaline khử trùng ml 10 50 -Thuốc nhuộm Giemsa cho protozoa gr 46.2 231 -Phẩm màu cho thức ăn sâu Lọ 10 10 100 10 - Khoai tây nấu môi trường Kg 20 60 11 - Vật liệu nấu thức ăn cho sâu: + Bột, gạo Kg 18 72 + Đậu Kg 25 100 + Men bia Kg 83 166 + Vitamin Kg 0,1 199 19.9 250gr 20 1.870 149.6 + Cloramphenicol gr 0,5 65 32.5 + Agar Kg 0,5 242 121 + Yeast extract kg 0,1 2.970 297 + Hexan Lít 0,5 45.6 22.8 + Aceton Lít 0,5 268 134 + Xylen… lít 0,5 385 192.5 + L-Cystein 12 -Dung môi hữu cơ: Cộng Cộng chung cho15 thí nghiệm x 4.623,7 = III 4.623,7 69.355,5 Vật liệu mau hỏng -Chậu trồng Cái 50 20 1.000 22 -Hộp nhựa nuôi sâu Cái 100 15 1.500 -Bao ny lon thu mẫu Kg 70 140 -Băng keo Cuộn 20 100 -Lồng lưới gổ nuôi sâu Cái 300 1.500 -Lưới may mùng làm nhà lưới Mét 50 20 1.250 -Bình tam giác thủy tinh Cái 50 50 2.500 -Chai thủy tinh chịu nhiệt Cái 50 65 3.250 -Đĩa petri Cái 100 21 2.100 10 -Óng ly tâm nhựa (100 cái/bịt) Bịt 500 2.500 11 -Đầu Tip nhựa cho pipette, Eppendolf (1.000 cái/bịt) Bịt 300 1.500 12 -Parafilm quấn đĩa petri Cuộn 800 3.200 13 -Thau, chậu nhựa Cái 50 10 500 14 -Giấy lọc Whatman No1 Hộp 20 139.7 2.794 15 - Giấy nhôm Cuộn 30 38.8 1.134 16 - Bơng gịn thấm nước Kg 10 68.5 685 17 - Găng tay Hộp 60 300 18 - Khẩu trang Hộp 50 250 19 - lamen hộp Hộp 15 55 850 Cộng 27.053 Tổng cộng 96.408.5 II+III: * Chỉ dự toán đề tài phê duyệt 23 Khoản 5: Chi khác § ơn vị: ( x 000 đồn g ) Tổ g s è n Mục chi Ng uån vèn Tổng Ng ân s c h SNK H Tự c ó Tổ g s ố n TT Nă thứ n hÊt* m Trong đó, khốn chi theo quy định * Nă thứ hai* m Trong ú, khoỏn chi theo quy nh * Nă thứ m ba* Trong ú, khoỏn chi theo quy định * 10 11 12 Nội dung Trong đó, khốn chi theo quy định* Công tác hội nghị nước (Hà Nội) cho người, lần hội nghị - Máy bay (4 vé x 2.700.000) - Xe vận chuyển (đi Ctho-TPHCM x lượt x 500.000đ) - Khách sạn (3 đêm x phòng x lần hội nghị x 300.000đ) - Lệ phí hội nghị (500.000x người x lần hội nghị) Kc h¸ 10 00 000 00 000 Hợp tác quốc tế 24 13 14 Đoàn vào (số người, số ngày, số lần ): chuyên gia x đợt x ngày (đầu kỳ kỳ) - Khách sạn, ăn uống - XE đưa rước, lại, vận chuyển (Cần Thơ-TP HCM) Kinh phí quản lý (của quan): 14.000.000x 2năm 10.000 000 Chi phí đánh giá, kiểm tra nội bộ, nghiệm thu cấp quản lý đề tài Chi phí nghiệm thu nội (kèm phụ lục 2) Chuyên gia tự chi trả 500 Chi khác Hội thảo khoa học cuối kỳ Chủ trì hội thảo: 180.000đ Thư ký: 90.000đ 50 Thành viên tham dự x 60.000đ 18 90 000 người báo cáo tham luận x 450.000đ 00 In 60 tài liệu x 10.000đ 00 Mướn hội trường + thiết bị+pano, hiệu Nước uống hội nghị 00 300 Viết báo khoa học tổng 25 kết đề tài (bao gồm báo cáo thức tóm tắt) 11 000 Xử lý, tổng thuật tài liệu đề tài 700 -Văn phòng phẩm: 000 Phim ảnh, đĩa CD, mực in, giấy, bút, photo copy, - Dịch tài liệu 000 - Đăng ký bảo hộ quyền sở hữu trí tuệ: Lệ phí đăng ký, hành chánh, lại,linh tinh… Vận chuyển, lại: (khoán xe gắn máy) - 192 (4 người x chuyến/tháng) chuyến & Cần Thơ - Ơ Mơn, Long Tuyền, Phong Điền (50km x 1.200đ/người ) = 11.520.000đ 11 52 Phụ cấp cơng tác phí: 192 chuyến x 50.000đ/ngày= 9.600.000đ 000 00 Phụ cấp chủ nhiệm đề tài 24 tháng x900.000/tháng= 21.600.00đ 21.600 Cộng: 134.990 26 * Chỉ dự toán đề tài phê duyệt (theo Thông tư số 93/2006/TTLT/BTC-BKHCN) PHỤ LỤC (Khoản 1; Mục 5) Hội thảo tập huấn cán khuyến nông, bảo vệ thực vật nông dân (1 lớp kỳ lớp cuối kỳ, qui mô 30 ngƣời) Đơn vị: x 1000 đ TT Nội dung chi Đvt Số lƣợng Số ngày Đơn giá Thành tiền 15 900 200 200 In ấn tài liệu, copy Bộ 30 Dụng cụ hỗ trợ tập huấn: mướn máy chiếu Lớp Hỗ trợ tiền ăn học viên Người/ngày 30 10 600 Giảng viên (Tiến sỹ, Thạc sỹ) Người 1 180 360 Phòng học/hội trường Ngày 200 400 Nước uống Người 30 300 Văn phòng phẩm Giấy, viết bic, Pentouch viết bảng 100 Cộng: PHỤ LỤC 27 2.860 Ghi (Khoản 5; Mục 4) Chi phí nghiệm thu nội STT Nội dung chi Nhận xét Phản biện UV Hội đồng Họp Hội đồng Chủ tịch hội đồng Thành viên Thư ký Đại biểu Nước uống Hội trường, thiết bị Photo tài liệu Số lƣợng Đơn vị: x 1000 đ Đơn giá Thành tiền 700 450 1.400 2.250 10 20 180 140 90 60 20 17 Cộng 180 980 90 600 60 600 340 6.500 28 Ghi PHỤ LỤC (Khoản 1; Mục 3) Thuê chuyên gia khảo nghiệm độ an toàn chế phẫm sinh học cho đơn vị thí nghiệm Đơn vị: x 1000 đ Đơn giá Thành tiền STT Nội dung chi Số lƣợng Nguồn sinh vật (nuôi thiên địch, chuột, cá đồng…) Thức ăn ni sinh vật Hóa chất xử lý, bảo quản mẫu Cơng chăm sóc, vận chuyển Vật liệu: lồng nuôi, lưới, chậu, thau, hộp, bể nuôi, lọ thủy tinh, bao tay, bao ny lon, giấy, băng keo, óng tiêm, kéo, kẹp, dao mổ… Chi phí phân tích thí nghiệm, mổ mẫu vật, đánh giá kết (Xét nghiệm máu, gan, thận, tế bào nội tạng…) 200 35 kg 15 lít 20 20 200 800 1.000 700 300 200 800 2.000 2.000 Cộng 5.000 PHỤ CHƢƠNG (Cách tiếp cận phương pháp nghiên cứu, kỹ thuật sử dụng) 29 Ghi 1-Áp dụng qui trình Koch để xác định tác nhân gây bệnh cho sâu hại: tiến hành theo bước Bƣớc 1: - Thu thập mẫu sâu (sâu ăn tạp, sâu xanh…) bị bệnh ruộng trồng rau màu tự nhiên - quan sát ghi nhận triệu chứng sâu bị chết Bƣớc 2: - Phân lập tác nhân protozoa gây bệnh, kiểm tra kính hiển vi, so sánh với liệu, phân loại, định danh loài - Phân lập protozoa, định danh phương pháp ly trích DNA, chạy PCR Bƣớc 3: - Chủng nhiễm trở lại tác nhân protozoa phân lập lên sâu ăn tạp, sâu xanh…trong điều kiện phịng thí nghiệm - Kiểm tra tác nhân gây chết sâu điều kiện phịng thí nghiệm có giống chủng protozoa ban đầu thu thập tự nhiên - Đưa kết luận - Các thí nghiệm bố trí theo thể thức hồn toàn ngẫu nhiên (RCD), khối hoàn toàn ngẫu nhiên (RCBD), hình vng latin (Latin Square) có lập lại đối chứng tùy theo điều kiện cụ thể - Xác định độ hữu hiệu (ĐHH) nghiệm thức công thức Abbott phịng thí nghiệm nhà lưới 30 C-T ĐHH= x 100 C C: số sâu sống lô đối chứng ; T: số sâu sống lơ có xử lý -Xác định độ hữu hiệu nghiệm thức công thức Henderson-Tilton điều kiện đồng Ta x Cb ĐHH= [1- ] x 100 Tb x Ca Ta: số sâu sống lơ có xử lý sau phun; Ca: số sâu sống lô đối chứng sau phun; Tb: số sâu sống lơ có xử lý trước phun Cb: số sâu sống lô đối chứng trước phun; 31 ... tế: sâu ăn tạp, sâu xanh sâu nhiếu đọt ) - Đánh giá hiệu lực Protozoa sâu hại rau màu như: sâu ăn tạp, sâu xanh -Xây dựng quy trình sản xuất dạng chế phẩm sinh học từ nguyên sinh động vật (Protozoa). .. liên quan đến đề tài trích dẫn đánh giá tổng quan Chu Thị Thơm, Phan Thị Lài, Nguyễn Văn Tó 2006 Phịng trừ sâu hại công nghệ vi sinh NXB Lao động Hà Nội Phạm Thị Thùy 2004 Công nghệ sinh học bảo... 1-Áp dụng qui trình Koch để xác định tác nhân gây bệnh cho sâu hại: tiến hành theo bước Bƣớc 1: - Thu thập mẫu sâu (sâu ăn tạp, sâu xanh…) bị bệnh ruộng trồng rau màu tự nhiên - quan sát ghi nhận